Производные 1-n-фениламино-1н-имидазола и содержащие их фармацевтические композиции
Изобретение относится к новым производным имидазола формулы (I):
и к его солям с кислотой, где R1 и R2 обозначают водород; Q обозначает(СН2)m-Х-(СН2)n-А; А обозначает прямую связь. О, SO2, NR5; Х обозначает прямую связь, О, SO2, C(O) или NR5; Z обозначает группу, выбранную из:
m и n обозначают, каждый независимо, 0, 1, 2, 3 или 4; р обозначает 1, 2, 3 или 4; q обозначает 0, 1 или 2; пунктирная линия означает, что R8 и/или R9 могут находиться в любом положении бензотиофенового кольца; R3 и R8 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро,
(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-C6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо,
NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10; когда Q-Z обозначает
n обозначает 0, 1 или 2 и р обозначает 1, один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро,
NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11,
OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CONR10R11, a другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (C1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо,
NR10R11, SО2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, CO2R10; R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CHO; когда р обозначает 2, 3 или 4, R9 могут быть одинаковыми или различными; R6 и R7 обозначают водород; каждый R5, R10, R11 и R12 обозначает водород; когда Z обозначает
и p обозначает 1, тогда R8 и R9 могут также образовывать вместе с фенильным кольцом диоксид бензоксатиазина.
Изобретение также относится к фармацевтической композиции и к применению производных по любому из пп.1-25.
Технический результат - получение новых биологически активных соединений, обладающих ингибирующей активность в отношении ароматазы и/или стероидсульфатазы и/или карбоангидразы. 9 н. и 27 з.п. ф-лы, 5 табл.
Настоящее изобретение относится к производным 1-N-фениламино-1H-имидазола и к содержащим их фармацевтическим композициям.
Изобретение в целом относится к области гормонозависимого и гормононезависимого рака и эндокринных нарушений.
Ароматаза представляет собой физиологический фермент, ответственный за специфическое превращение андрогенов, таких как андростендион или тестостерон, в эстрогены, такие как фолликулин и эстрадиол, соответственно (Simpson ER et al., Endocrine Reviews, 1994, 15: 342-355). Ингибирование ароматазы является, поэтому, избранной стратегией воздействия на нормальные или патологические эстрогениндуцируемые или эстрогензависимые биологические процессы, такие как женская половая дифференциация, овуляция, имплантация, беременность, пролиферация клеток молочной железы и эндометрия, а также регуляция сперматогенеза или пролиферации клетки простаты у мужчин или нерепродуктивных функций, таких как остеогенез или баланс Т-клеток и цитокинов (см. Simpson ER et al., Recent Progress in Hormone Research, 1997, 52: 185-213 и все Endocrine Related Cancer (1999, volume 6, n 2) и Breast Cancer Research Treatment (1998, volume 49, supplement n 1)).
Фермент стероидсульфатаза (E.C. 3.1.6.2., STS) катализирует гидролиз сульфата фолликулина до фолликулина и сульфата DHEA до DHEA (Dibbelt L, Biol. Chem, Hoppe-Seyler, 1991, 372, 173-185 и Stein C, J. Biol. Chem., 1989, 264, 13865-13872).
Путь стероидсульфатазы был в фокусе недавних исследований в области рака молочной железы, относительно локального внутритканевого формирования эстрогенов из обильного циркулирующего пула сульфата фолликулина (E1S) (Pasqualini JR, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 1999, 69, 287-292 и Purohit A, Mol. Cell. Endocrinol., 2001, 171, 129-135).
Ингибирование этого фермента предотвратило бы образование из E1S свободного фолликулина (E1), который может быть преобразован в эстрадиол (E2) ферментативным восстановлением. В дополнение к пути сульфатазы фолликулина, теперь считается, что другой мощный эстроген, андростендиол (адиол), получающийся из DHEA в результате гидролиза DHEA-с, может быть другим важным компонентом, поддерживающим рост и развитие гормонозависимых опухолей молочной железы.
Формирование эстрогенов у женщин схематически представлено на фигуре 1.
Для лечения больных гормонозависимыми онкологическими заболеваниями в настоящее время используются ингибиторы ароматазы, чтобы предотвратить синтез эстрогена. Однако клинические испытания показали относительный недостаток эффективности для пациентов с опухолями, положительными в отношении рецептора эстрогена (Castiglione-Gertsch M, Eur. J. Cancer, 1996, 32A, 393-395 и Jonat W, Eur. J. Cancer, 1996, 32A, 404-412). Как объяснение, путь стероидсульфатазы может быть другим важным путем для формирования эстрогена в опухолях молочной железы.
EMATE (Ahmed S, Curr. Med. Chem., 2002, 9, 2, 263-273), фолликулин-3-сульфамат, является традиционным стандартным стероидным ингибитором сульфатазы, но имеет главный недостаток, заключающийся в том, что он имеет эстрогенную природу из-за его механизма ингибирования: сульфаматная часть расщепляется в ходе процесса инактивации ферментов, в результате чего E1 образуется не из E1S, а непосредственно из EMATE (Ahmed S, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 2002, 80, 429-440).
Другие нестероидные сульфаматные соединения, которые приводят к производным без эстрогенных свойств, были представлены как приемлемые потенциальные лекарственные средства, такие как 6,6,7-COUMATE, стандартный неэстрогенный ингибитор сульфатазы, известный из литературы (Purohit A, Cancer Res, 2000, 60, 3394-3396).
Карбоангидразы человека катализируют преобразование диоксида углерода (CO2) в ион бикарбоната (НСО3 -) и участвуют в физиологических и патологических процессах. Эти процессы включают гормонозависимый и гормононезависимый канцерогенез, метастатический инвазивный процесс и гипоксические опухоли, экспрессирующие эти ферменты, которые являются менее чувствительными к классическим химио/радиотерапевтическим ингибиторам. В частности, было обнаружено, что EMATE обладает активностью ингибитора карбоангидразы человека, подобной активности ацетазоламида, известного сульфонамидного ингибитора карбоангидразы человека (Winum J and al., J. Med. Chem. 2003, 46, 2197-2204).
Поэтому особенно интересно найти соединения, обладающие по меньшей мере одной, предпочтительно по меньшей мере двумя из следующих активностей: ингибирование ароматазы, ингибирование стероидсульфатазы и ингибирование карбоангидразы.
Недавно B. Potter et al. (J. Med. Chem., 46, 2003, 3193-3196) сообщали, что сульфамоилированные производные ингибитора ароматазы YM 511 ингибировали сульфатазную и ароматазную активности в клетках JEG-3.
Соединения, представленные как пригодные для лечения эстрогензависимых заболеваний, описаны в US 2003/0008862A. Производные имидазола с антиароматазными свойствами описаны в WO 2004/054983.
В настоящее время обнаружено, что производные имидазола, которые содержат 1-N-фениламиногруппу, демонстрируют неожиданно высокий потенциал в отношении ингибирования ароматазы и/или стероидсульфатазы и/или карбоангидразы.
Соответственно, одной из задач настоящего изобретения является получение производных 1-N-фениламино-1H-имидазола, которые являлись бы мощными ингибиторами ароматазы и/или стероидсульфатазы и/или карбоангидразы.
Другой задачей настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного ингредиента производное 1-N-ариламино-1H-имидазола, как изображено ниже.
Следующей задачей настоящего изобретения является применение производных 1-N-фениламино-1H-имидазола для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения различных заболеваний и для регулирования репродуктивных функций у женщин, у мужчин, а также у самок и самцов диких или домашних животных.
Производные 1-N-фениламино-1H-имидазола по изобретению представлены следующей общей формулой (I):
и их соли с кислотой и стереоизомерные формы, где:
R1 иR2 обозначают, каждый независимо, водород, (C1-C6)алкил или (C3-C8)циклоалкил; или R1 и R2 вместе образуют насыщенное или ненасыщенное 5-, 6- или 7-членное карбоциклическое кольцо;
Q обозначает(CH2)m-X-(CH2)n-A;
A обозначает прямую связь, O, S, SO, SO2, NR5;
X обозначает прямую связь, CF2, O, S, SO, SO2, C(O), NR5 или CR6R7;
Z обозначает группу, выбранную из:
m и n обозначают, каждый независимо, 0, 1, 2, 3 или 4;
p обозначает 1, 2, 3 или 4;
q обозначает 0, 1 или 2;
пунктирная линия означает, что R8 и/или R9 могут находиться в любом положении бензотиофенового кольца;
R3 и R8 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, OPO(OR10)2,
NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, OSO2OR10, SO2OR10, SSO2NR10R11, CF2SO2OR10, CF2SO2NR10R11, CF2-тетразолил или NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CONR10R11, OCHO, OCONR10R11, OCSNR10R11, SCONR10R11, SCSNR10R11, тетразолил, NR12CONR10R11, NR10-CHO;
когда Q-Z обозначает
n обозначает 0, 1 или 2 и p обозначает 1, один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, OPO(OR10)2, NR10R11, OSO2NR10R11, OSO2OR10, SO2OR10, SSO2NR10R11, CF2SO2OR10, CF2SO2NR10R11, CF2-тетразолил, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CONR10R11, OCHO, OCONR10R11, OCSNR10R11,
SCONR10R11, SCSNR10R11, тетразолил, NR12CONR10R11, NR10-CHO, а другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, SO2NR10R11, ОSO2NR10R11, OSO2OR10, SO2OR10, SSO2NR10R11, CF2SO2OR10, CF2SO2NR10R11, CF2-тетразолил, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CONR10R11, OCHO, OCONR10R11, OCSNR10R11, SCONR10R11, SCSNR10R11, тетразолил, NR12CONR10R11, NR10-CHO;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, OPO(OR10)2, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, SO2NR10R11, ОSO2NR10R11, OSO2OR10, SO2OR10, SSO2NR10R11, CF2SO2OR10, CF2SO2NR10R11, CF2-тетразолил, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, СНО, CONR10R11, OCHO, OCONR10R11, OCSNR10R11, SCONR10R11, SCSNR10R11, тетразолил, NR12CONR10R11, NR10-CHO;
когда p обозначает 2, 3 или 4, R9 могут быть одинаковыми или различными;
R6 и R7 обозначают независимо водород, галоген, (C1-C6)алкил или (C3-C8)циклоалкил;
R5, R10, R11 и R12 обозначают, каждый независимо, водород, гидрокси, (C1-C6)алкил или (C3-C8)циклоалкил; R10 может также быть солью; R10 и R11 могут также образовывать, вместе с атомом азота, с которым они связаны, 5-7-членный гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранных из O, S и N;
когда Z обозначает
и p обозначает 1,
тогда R8 и R9 могут также образовывать вместе с фенильным кольцом диоксид бензоксатиазина, диоксид дигидробензоксатиазина, диоксид бензоксатиазинона, диоксид бензоксатиазола, тетраоксид бензоксадитиадиазина, тетраоксид бензодитиазина или тетраоксид бензодиоксадитиина;
когда Z обозначает
R3 и R4 вместе с фенильным кольцом, к которому они присоединены, могут также образовывать бензофуран или N-метилбензотриазол, при условии, что когда p обозначает 1 и Q обозначает (CH2)n, тогда R8 и R9 обозначают независимо гидрокси, нитро, OPO(OR10)2, NR10R11, ОSO2NR10R11, OSO2OR10, SO2OR10, SSO2NR10R11, CF2SO2OR10, CF2SO2NR10R11, CF2-тетразолил, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CONR10R11, OCHO, OCONR10R11, OCSNR10R11, SCONR10R11, SCSNR10R11, тетразолил, NR12CONR10R11 или NR10-CHO.
Настоящее изобретение также относится к солям соединений по изобретению или к их стереоизомерным формам, если они существуют.
В описании и формуле изобретения термин “(C1-C6)алкил” обозначает прямую или разветвленную углеводородную цепь, имеющую 1-6 атомов углерода. (C1-C6)алкил представляет собой, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, изопентил или гексил. Предпочтительными алкильными радикалами являются такие, которые имеют 1, 2 или 3 атома углерода.
Термин "галоген" обозначает хлор, бром, йод или фтор.
Термин “(C3-C8)циклоалкил” означает насыщенный моноциклический углеводород, имеющий 3-8 атомов углерода. (C3-C8)циклоалкил представляет собой, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил.
Термин “(C1-C6)алкокси” означает группу OR, в которой R является (C1-C6)алкилом, как определено выше. (C1-C6)алкокси представляет собой, например, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, трет-бутокси, н-пентилокси или изопентилокси. Предпочтительными алкокси-радикалами являются такие, которые имеют 1, 2 или 3 атома углерода.
Термин «ацил» означает группу 
,
в которой R' обозначает водород или (C1-C4)алкил, где термин "алкил" определен выше. Ацил представляет собой, например, формил, ацетил, пропионил, бутирил или валерил. Предпочтительными ацильными радикалами являются формил и ацетил.
В определении R10 "соль" означает соль щелочного металла или соль щелочноземельного металла, такого как натрий, калий, магний или кальций, или соли аммония или органического амина, такого как триэтиламин, этаноламин или трис-(2-гидроксиэтил)амин. В контексте изобретения это относится к группам, имеющим остаток OR10.
5-7-Членный гетероцикл может быть насыщенным или ненасыщенным и включает, например, тетразол, триазол, пиразол, пиразолидин, имидазол, имидазолидин, пиперидин, пиперазин, морфолин, пирролидин.
Соединения формулы (I) образуют соли с кислотами, например, с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или с органическими карбоновыми кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, яблочная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота и т.п. Особенно предпочтительные соли представляют собой соли, которые являются фармацевтически приемлемыми.
Среди соединений формулы (I), соединения, которые удовлетворяют по меньшей мере одному из следующих условий, являются предпочтительными:
R3 и R8 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, OCHO, NR12SO2NR10R11;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO, NR12SO2NR10R11;
R1 и R2 обозначают, каждый независимо, водород или (C1-C6)алкил;
R10, R11 и R12 обозначают, каждый независимо, водород или (C1-C6)алкил.
Особенно предпочтительны соединения формулы (I), в которой:
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или
NR12SO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11 NR12SO2NR10R11.
Особенно предпочтительная группа этих соединений представлена соединениями, в которых:
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, циано, (C1-C6)алкокси или OSO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, галоген, нитро, циано, (C1-C6)алкокси,
NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, OSO2NR10SO2NR11R12.
Предпочтительно, соединения формулы (I) представляют собой соединения, в которых:
один из R3 и R8 обозначает цианогруппу; и
другой обозначает водород или гидрокси, галоген, нитро, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11.
Другие предпочтительные соединения представляют собой соединения, в которых:
один из R4 и R9 обозначает водород или гидрокси, циано, OSO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил,
(C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO, NR12SO2NR10R11.
Другая группа предпочтительных соединений представлена соединениями, в которых:
R4 обозначает водород, гидрокси, циано, или OSO2NR10R11;
R9 обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO.
Особенно предпочтительные соединения формулы (I) представляют собой соединения, где:
R4 обозначает водород; и
R9 обозначает гидроксил, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO или NR12SO2NR10R11.
Особенно предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых Z представляет собой:
в которых R8 и R9 имеют определенные выше значения.
В определенных выше соединениях R8 и R9 предпочтительно имеют следующие значения:
R8 обозначает водород, гидрокси, галоген, нитро, циано, (C1-C6)алкокси, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11 или OSO2NR10SO2NR11R12;
R9 обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO, NR12SO2NR10R11.
p и q имеют определенные выше значения.
Среди соединений формулы (I), соединения, в которых Q выбран из прямой связи, C(O), SO2, CONH, C(O)(CH2)n, (CH2)n(O) или (CH2)n, где n обозначает 0, 1 или 2, также являются особенно предпочтительными.
Особенно предпочтительными являются соединения формулы (II)
в которой:
Q обозначает (CH2)n, где n обозначает 0, 1 или 2;
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11, а другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород, гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-C6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
R10 и R11 обозначают, каждый независимо, водород, (C1-C6)алкил или (C3-C8)циклоалкил;
p обозначает 1, 2, 3 или 4;
R8 и R9 вместе с фенильным кольцом, к которому они присоединены, могут также образовывать диоксид бензоксатиазина или диоксид дигидробензоксатиазина;
R3 и R4 вместе с фенильным кольцом, к которому они присоединены, могут также образовывать бензофуран или N-метилбензотриазол.
Среди этих соединений формулы (II), соединения, которые соответствуют по меньшей мере одному из следующих условий, являются предпочтительными:
Q обозначает (CH2)n, где n обозначает 0, 1 или 2;
R8 обозначает гидрокси, галоген, нитро, циано или (C1-C6)алкокси,
NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R9 обозначает водород, гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11;
p обозначает 1, 2, 3 или 4.
Наиболее предпочтительными соединениями формулы (II) являются соединения, в которых:
n обозначает 0 или 1;
R1 и R2 обозначают, каждый независимо, водород или (C1-C6)алкил;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород, галоген, (C1-C6)алкокси, ацил, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
Особенно предпочтительными соединениями формулы (II) являются соединения, в которых:
n обозначает 0 или 1;
R1, R2 и R4 обозначают, каждый, водород;
R9 обозначает водород, галоген, (C1-C6)алкокси или OSO2NR10R11.
Особенно предпочтительными соединениями формулы (II) являются соединения, в которых:
n и p обозначают 1;
R8 обозначает гидрокси, галоген, нитро, циано, (C1-C6)алкокси, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11 или OSO2NR10SO2NR11R12;
R9 обозначает гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10 или CHO;
R3 обозначает циано, гидрокси, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R4 обозначает водород, гидрокси, галоген, циано или OSO2NR10R11.
Среди этих соединений, соединения, которые соответствуют по меньшей мере одному из следующих условий, также являются предпочтительными:
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, циано или OSO2NR10R11, предпочтительно циано или OSO2NR10R11; и
другой обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11, предпочтительно гидрокси или OSO2NR10R11.
Среди этих соединений формулы (II), соединения, в которых R10 и R11 обозначают водород, являются наиболее предпочтительными.
Особенно предпочтительны также соединения формулы (III):
в которой:
Q обозначает (CH2)m-X-(CH2)n-A-;
A обозначает прямую связь или O, S, SO, SO2, NR5;
X обозначает прямую связь, CF2, O, S, SO, SO2, C(O), NR5 или CR6R7;
m и n обозначают, каждый независимо, 0, 1, 2, 3 или 4;
R3, R4, R8 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-C6)алкил, (C1-C6)алкокси, бензилокси, трифторметил, (C1-C6)алкилтио, (C1-C6)алкилсульфонил, ацил, (C1-С6)алкоксикарбонил, NR10R11, OPO(OR10)2, OCHO, COOR10, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, SO2OR10, OSO2OR10, SSO2NR10R11, CONR10R11, OCONR10R11, OCSNR10R11, SCONR10R11, SCSNR10R11, NR12SO2NR10R11, тетразолил, NR10CONR11OH, NR10SO2NR11OH, NOH-CHO, NOHSO2NR10R11 или OSO2NR10OH;
q обозначает 0, 1 или 2.
R5, R6, R7, R10, R11 и R12 обозначают, каждый независимо, водород, (C1-С6)алкил или (С3-С8)циклоалкил; R10 может также быть солью; R10 и R11 могут также образовывать с атомом азота, с которым они связаны, 5-7-членный гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранных из О, S и N;
Пунктирная линия означает, что Q и/или R8 и/или R9 могут находиться в любом положении бензотиофенового кольца.
Среди соединений формулы (III), соединения, которые соответствуют по меньшей мере одному из следующих условий, также являются предпочтительными:
R3 обозначает водород, галоген или циано;
R8 обозначает OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R9 обозначает водород, галоген, нитро, COOR10 или циано;
R4 обозначает водород, галоген, циано, (C1-С6)алкокси, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R10, R11 и R12 обозначают, каждый независимо, водород или (C1-C6)алкил.
Соединения формулы (III), в которых Q обозначает (CH2)m-X-(CH2)n-A, где m обозначает 0, 1 или 2 и X обозначает прямую связь, SO2 или СО, n = 0 и A обозначает прямую связь, также являются предпочтительными.
Особенно предпочтительны соединения формулы (IV):
в которой R1, R2, R3, R4, R8, R9 и p имеют такие значения, как определено для соединений формулы (I).
Особенно предпочтительными соединениями формулы (IV) являются соединения, в которых:
R3 обозначает циано или OSO2NR10R11;
R4 обозначает водород, гидроксил, галоген, циано, OSO2NR10R11;
R8 обозначает гидрокси, циано, OSO2NR10R11, NR10R11, NR12SO2NR10R11, OCHO, тетразолил;
R9 обозначает водород, галоген, нитро, циано или CO2R10; и
Q имеет такие значения, как определено выше для соединений формулы (I).
Благодаря способности ингибировать ферменты ароматазу и/или стероидсульфатазу и/или карбоангидразу, соединения по изобретению могут использоваться индивидуально или в комбинации с другими активными ингредиентами для лечения или предотвращения любого гормонозависимого или гормононезависимого рака у людей, а также у диких или домашних животных. Благодаря активности ингибирования ароматазы и/или стероидсульфатазы, соединения по изобретению являются пригодными для управления регулируемыми эстрогеном репродуктивными функциями у людей, а также у диких или домашних животных.
Для лечения или предотвращения указанных состояний соединения по изобретению могут использоваться индивидуально или в комбинации с антиэстрогеном, SERM (селективный модулятор рецептора эстрогена), ингибитором ароматазы, ингибитором карбоангидразы, антиандрогеном, ингибитором стероидсульфатазы, ингибитором лиазы, прогестином или агонистом или антагонистом LH-RH. Соединения по изобретению могут также использоваться в комбинации с радиотерапевтическим средством; химиотерапевтическим средством, таким как нитрированный аналог иприта, такой как циклофосфамид, мельфалан, ифосфамид или трофосфамид; этиленимином, таким как тиотепа; нитрозомочевиной, такой как кармустин; лизированным агентом, таким как темозоломид или дакарбазин; антиметаболитом фолиевой кислоты, таким как метотрексат или ралтитрексед; аналогом пурина, таким как тиогуанин, кладрибин или флударабин; аналогом пиримидина, таким как фторурацил, тегафур или гемцитабин; винка-алкалоидом или аналогом, таким как винбластин, винкристин или винорелбин; производным подофиллотоксина, таким как этопозид, таксаны, доцетаксель или паклитаксель; антрациклином или аналогом, таким как доксорубицин, эпирубицин, идарубицин или митоксантрон; цитотоксическим антибиотиком, таким как блеомицин или митомицин; соединением платины, таким как цисплатин, карбоплатин или оксалиплатин; моноклональным антителом, таким как ритуксимаб; противоопухолевым средством, таким как пентостатин, мильтефозин, эстрамустин, топотекан, иринотекан или бикалутамид; или с ингибитором простагландина (COX 2/COX 1 ингибитор).
Соединения по изобретению могут также использоваться для контроля или управления регулируемыми эстрогеном репродуктивными функциями, такими как мужская или женская плодовитость, беременность, прерывание беременности или родоразрешение, у людей, а также у различных видов диких или домашних животных, индивидуально или в комбинации с одним или несколькими другими терапевтическими средствами, такими как агонист или антагонист LH-RH, эстропрогестагенное противозачаточное средство, прогестин, антипрогестин или ингибитор простагландина.
Поскольку ткань молочной железы является чувствительной мишенью стимулируемой эстрогеном пролиферации и/или дифференцировки, ингибиторы ароматазы и/или стероидсульфатазы и/или карбоангидразы могут использоваться для лечения или предотвращения доброкачественных заболеваний молочных желез у женщин, гинекомастии у мужчин и доброкачественных или злокачественных грудных опухолей с или без метастазов у мужчин и женщин или у самцов или самок домашних животных. Соединения по изобретению могут также использоваться для лечения или профилактики доброкачественного или злокачественного заболевания матки или яичника. В каждом случае, соединения по изобретению могут использоваться индивидуально или в комбинации с одним или несколькими другими половыми эндокринными терапевтическими средствами, такими как антиандроген, антиэстроген, прогестин или агонист или антагонист LH-RH.
Поскольку фермент стероидсульфатаза трансформирует сульфат DHEA в DHEA, предшественник активных андрогенов (тестостерона и дигидротестостерона), соединения по изобретению могут использоваться для лечения или предотвращения андрогенозависимых заболеваний, таких как андрогенное облысение (облысение по мужскому типу) (Hoffman R et al., J. Invest. Dermatol., 2001, 117, 1342-1348), гирсутизм, угри (Billich A et al., WO 9952890), доброкачественные или злокачественные заболевания простаты или яичка (Reed MJ, Rev. Endocr. Relat. Cancer, 1993, 45, 51-62), индивидуально или в комбинации с одним или несколькими другими половыми эндокринными терапевтическими средствами, такими как антиандроген, антиэстроген, SERM, антиароматаза, прогестин, ингибитор лиазы или агонист или антагонист LH-RH.
Ингибиторы стероидсульфатазы также могут быть использованы для лечения когнитивной дисфункции, потому что они в состоянии усилить познавательные процессы и пространственную память у крысы (Johnson DA, Brain Res, 2000, 865, 286-290). Сульфат DHEA как нейростероид затрагивает множество систем нейромедиаторов, включая те, которые задействуют ацетилхолин, глутамат и ГАМК, приводя к увеличенной нейронной возбудимости (Wolf OT, Brain Res. Rev, 1999, 30, 264-288). Соединения по изобретению, таким образом, также полезны для усиления когнитивной функции, особенно для лечения старческой деменции, включая болезнь Альцгеймера, увеличивая уровни DHEA в центральной нервной системе.
Кроме того, эстрогены участвуют в регулировании баланса между преобладающими иммунными функциями Th1 и Th2 и могут поэтому быть полезными для лечения или предотвращения зависящих от пола аутоиммунных заболеваний, таких как волчанка, рассеянный склероз, ревматоидный артрит и т.п. (Daynes RA, J. Exp. Med, 1990, 171, 979-996). Кроме того, показано, что ингибирование стероидсульфатазы обеспечивает защиту в моделях контактной аллергии и индуцируемого коллагеном артрита у грызунов (Suitters AJ, Immunology, 1997, 91, 314-321).
Исследования с использованием 2-MeOEMATE показали, что ингибиторы стероидсульфатазы имеют мощное, независимое от эстрадиола рост-ингибирующее действие (MacCarthy-Moorogh L, Cancer Research, 2000, 60, 5441-5450). Уменьшение объема опухоли неожиданно наблюдали с соединениями по изобретению, с низким ингибированием стероидсульфатазы опухоли. Ввиду этого, соединения по изобретению могут привести к уменьшению деления клеток из-за сильного взаимодействия между такими новыми химическими структурными единицами и микротрубчатой сетью в раковой клетке, безотносительно ткани, включая молочную железу, эндометрий, матку, простату, яичко или метастаз, генерируемый из них. Соединения по изобретению могут поэтому быть полезны для лечения эстрогеннезависимого рака.
Соединения по изобретению имеют особое значение для лечения или предотвращения эстрогензависимых заболеваний или нарушений, то есть индуцируемых эстрогеном или стимулируемых эстрогеном заболеваний или нарушений (Golob T, Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3941-3953).
Кроме того, соединения по изобретению являются ингибиторами карбоангидразы (CA). Это свойство может объяснить интерес к таким соединениям для лечения гормононезависимого рака. Иммуногистохимические исследования CA II показали, что она экспрессируется в злокачественных опухолях головного мозга (Parkkila A-K. et al., Histochem. J., 1995, 27: 974-982), а также в карциномах желудка и поджелудочной железы (Parkkila S et al., Histochem. J., 1995, 27: 133-138), и недавние исследования показали, что CA IX и XII также экспрессируется в некоторых опухолях и может быть функционально связана с онкогенезом. Ivanov et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95: 12596-12601) недавно выдвигал гипотезу, что ассоциированная с опухолью CA IX и XII может быть вовлечена в окисление внеклеточной питательной среды, окружающей раковые клетки, что создает микросреду, способствующую росту и распределению опухоли. Показано, что ацетазоламид заметно ингибирует инвазивную способность в четырех почечных линиях раковых клеток (Parkkila S et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, 97: 2220-2224), эффект, относящийся к CA II, IX, и XII, которые экспрессируются в этих клетках. Лейкозные клетки могут легко распространиться от костного мозга к другим органам через систему кровообращения, но различные лейкозы отличаются по их способности образовывать экстрамедуллярные опухоли, то есть метастазы. Если бы активности CA были существенными для инвазии другими раковыми клетками, то можно было бы аналогично предсказать, что активная CA может также функционировать в лейкозных клетках.
В рамках настоящей заявки термин "комбинированный" или "комбинация" относится к любому протоколу для совместного введения соединения по изобретению и одной или более других фармацевтических субстанций, независимо от природы времени введения и изменения дозы в течение времени любой из субстанций. Совместное введение может, например, осуществляться параллельно, последовательно или в течение периода времени.
Для лечения/предотвращения любого из указанных заболеваний или нарушений, соединения по изобретению могут вводиться, например, перорально, местно, парентерально, в лекарственных составах, содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители. Эти лекарственные формы приведены в качестве примеров, но специалист может выбрать другие лекарственные формы для введения соединений по изобретению. Термин парентеральный в рамках настоящей заявки включает подкожные инъекции, внутривенную, внутримышечную, надчревную инъекцию или инфузию. В дополнение к лечению людей, соединения по изобретению эффективны при лечении теплокровных животных, таких как мыши, крысы, лошади, овцы, собаки, кошки и т.д.
Фармацевтические композиции, содержащие активный ингредиент(ы), могут быть в форме, подходящей для перорального использования, например, в форме таблеток, пастилок, леденцов, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, или сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального использования, могут быть получены согласно любому известному специалисту способу получения фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать одно или более средств, выбранных из группы, состоящей из подслащивающих агентов, ароматизирующих веществ, красителей и консервантов, чтобы получить фармацевтически изящные и приемлемые препараты. Таблетки содержат активный ингредиент(ы) в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми инертными эксципиентами, которые являются подходящими для получения таблеток. Эти инертные эксципиенты могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, например кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие вещества, например крахмал, желатин или гуммиарабик, и лубриканты, например стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть непокрытыми, или они могут иметь покрытие, наносимое известными методами, чтобы задержать разложение и абсорбцию в желудочно-кишечном тракте и таким образом обеспечить замедленное действие в течение долгого периода времени. Например, может использоваться материал для отсрочки действия, такой как моностеарат глицерина или дистеарат глицерина.
Они могут также иметь покрытие, наносимое методом, описанным в патенте US 4256108; 4166452 и 4265874, чтобы сформировать осмотические терапевтические таблетки для контролируемого высвобождения.
Составы для перорального использования могут также быть представлены как твердые желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент(ы) смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или как мягкие желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например арахисовым маслом, вазелиновым маслом или оливковым маслом.
Водные суспензии содержат активный ингредиент(ы) в смеси с эксципиентами, подходящими для получения водных суспензий. Такими эксципиентами являются суспендирующие агенты, например карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая и аравийская камедь; диспергирующие или смачивающие вещества могут быть природным фосфатидом, например лецитином, или продуктами конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например стеаратом полиэтиленоксида, или продуктами конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанолом, или продуктами конденсации этиленоксида с частичными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такими как полиоксиэтиленсорбит моноолеат, или продуктами конденсации этиленоксида с частичными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например полиэтиленсорбитан моноолеат. Водные суспензии могут также содержать один или более консервантов, например этил или н-пропил, п-гидроксибензоат, один или более красителей, одно или более ароматизирующих веществ и один или более подслащивающих агентов, таких как сахароза, сахарин или аспартам.
Масляные суспензии могут быть составлены путем суспендирования активного ингредиента(ов) в растительном масле, например арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как вазелиновое масло. Масляные суспензии могут содержать загуститель, например пчелиный воск, твердый парафин или ацетиловый спирт. Подслащивающие агенты, такие как указанные выше, и ароматизирующие вещества могут быть добавлены для получения приемлемого перорального препарата. Эти композиции могут быть сохранены добавлением антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.
Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для получения водной суспензии добавлением воды, содержат активный ингредиент(ы) в смеси с диспергирующим или смачивающим веществом, суспендирующим агентом и одним или более консервантами. Подходящие диспергирующие или смачивающие вещества и суспендирующие агенты иллюстрируются выше. Дополнительные эксципиенты, например подслащивающие, ароматизирующие вещества и красители, могут также присутствовать. Фармацевтические композиции по изобретению могут также быть в форме эмульсии типа "масло в воде". Масляная фаза может быть представлена растительным маслом, например оливковым маслом или арахисовым маслом, или минеральным маслом, например вазелиновым маслом, или их смесью. Подходящие эмульгаторы могут представлять собой природные фосфатиды, например сою, лецитин и сложные эфиры или частичные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, например сорбитан моноолеат, и продукты конденсации указанных частичных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтиленсорбитан моноолеат. Эмульсии могут также содержать подслащивающие и ароматизирующие вещества.
Фармацевтические композиции могут быть в форме стерильной водной или масляной суспензии для инъекций. Эта суспензия может быть составлена согласно известным способам, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих агентов, которые были упомянуты выше. Стерильный препарат для инъекций может также быть стерильным инъецируемым раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствором в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут использоваться, можно назвать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла традиционно используются как растворитель или суспендирующая питательная среда. С этой целью может использоваться любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при получении инъецируемых препаратов находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Уровни дозировки порядка приблизительно от 0,0001 мг до приблизительно 20 мг/кг массы тела в сутки пригодны для лечения указанных выше состояний, или альтернативно, приблизительно от 0,1 мг до приблизительно 2000 мг на одного пациента в сутки.
Количество активного ингредиента, который может быть объединен с материалами-носителями для получения разовой лекарственной формы, варьирует в зависимости от индивидуальных особенностей пациента и конкретного способа введения. В целом, лекарственные формы содержат приблизительно от 0,1 мг до приблизительно 400 мг соединения по изобретению, обычно 0,1 мг, 1 мг, 2 мг, 5 мг, 10 мг, 20 мг, 40 мг, 80 мг, 100 мг, 200 мг или 400 мг.
Понятно, однако, что конкретный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от разновидности факторов, включая возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время введения, путь введения, коэффициент экскреции, комбинацию лекарственного средства и серьезность конкретного заболевания, на которое направлена терапия.
Согласно другому объекту изобретение относится к способу лечения или предотвращения указанных заболеваний, нарушений или состояний. Способ включает введение пациенту (человеку или животному) терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой.
Производные 1-N-ариламино-1H-имидазола формулы (I) и их соли с кислотой могут быть получены согласно общим схемам Ia, Ib, IIa, IIb, IV и V, в которых ()m обозначает (CH2)m и ()n обозначает (CH2)n.
Схема Ia
Согласно схеме Ia, N,N-двузамещенный анилин (3) может быть получен конденсацией анилинового производного (1) с галогенопроизводными, алкоильными производными, сульфонильными производными или сульфинильными производными (2) с использованием стандартных условий (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York). Большинство галогенопроизводных, алкоильных производных, сульфонильных производных или сульфинильных производных (2) являются коммерчески доступными или синтезируются обычными химическими способами (см. экспериментальную часть).
Соединение (3) преобразуют в его нитрозо-производное, используя стандартные условия, затем восстанавливают, получая 1,1-двузамещенный гидразин формулы (4).
Альтернативно, 1,1-двузамещенный гидразин (4) может быть получен селективным N-алкилированием гидразина формулы (5) с соединением формулы (2), с использованием условий, описанных U. Lerch and J. König (Synthesis, 1983, 2, 157-8), или условий, описанных J. Chung et al. (Tetrahedron Letters, 1992, 33, 4717-20).
Затем путем конденсации (4) с диалкилокси-алкил-изотиоцианатным производным или этилендиокси-алкил-изоцианатным производным получают тиосемикарбазид (6), который преобразуют в 1-аминоимидазол-2-тион (7) путем обработки кислотой, такой как уксусная кислота или серная кислота.
Десульфирование (7) в уксусной кислоте в условиях, описанных S.Grivas and E.Ronne in Acta Chemica Scandinavia, 1995, 49, 225-229, дает конечный 1-N-фениламино-1H-имидазол (8), который в случае необходимости преобразуют в одну из его солей с кислотой.
Альтернативно, указанные соединения (8), где R3 или R4 обозначают электроноакцепторную группу, могут быть получены конденсацией N-имидазоланилина (9) с галогенопроизводными, алкоильными производными, сульфонильными производными или сульфинильными производными (2) с использованием стандартных условий (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York).
Если R8 представляет собой сложный эфир, омыление соединения (8) дает производное карбоновой кислоты обычными способами.
Если R8 представляет собой сульфамид, он может быть непосредственно получен с использованием подходящего замещенного алкоильного производного или галогенопроизводного (2).
Если R8 обозначает цианогруппу, реакция с азидом натрия дает тетразолильную группу (Kiyoto K., Synthesis, 1998, 910-14).
Соединение (9) получают способом, подобным способу, раскрытому выше для получения соединения (8), исходя из соединения (4).
Схема Ib
Согласно схеме Ib, снятие защиты метокси- или бензилокси-производных (8) с использованием трибромборана (McOmie. J.F.W, Tetrahedron, 1968, 24, 2289-92) или пиперидина (Nishioka H. Synthesis, 200, 2, 243-46), или путем гидрирования (Felix A., J Org Chem, 1978, 43, 4194-97) дает гидроксильное соединение (10). Восстановление нитросоединения (8) двухлористым оловом или рутением и гидразином (WO 02051821) дает аминосоединение (12) (Matassa V., J Med Chem, 1990, 33, 2621-29).
Эти соединения преобразуют в соответствующие сульфаматы (11) или аминосульфониламины (13) путем обработки гидридом натрия и сульфамоилхлоридом (Nussbaumer. P, J Med Chem, 2002, 45, 4310-20) или взаимодействием с сульфамоилхлоридом в диметилацетамиде (DMAc) (Makoto O, Tetrahedron letters, 2000, 41, 7047-51).
Эти гидроксильные соединения могут быть преобразованы в формиатные производные путем обработки формилацетатом (Schreiner E., Bioorg Med Chem Lett, 2004, 14, 4999-5002) или в 1H-имидазол-1-карбоксилатные производные путем обработки N,N'-карбонилдиимидазолом (Fischer, W., Synthesis, 2002, 1, 29-30).
Соединения (10) или (12), имеющие как амино, так и гидроксил в положении орто, могут быть преобразованы в соответствующие бензоксатиазолы в условиях, предложенных K. K. Andersen (J Org Chem, 1991, 56, 23, 6508-6516).
Когда X обозначает СО или CS, восстановление кетона, тиокетона, амида, тиоамида выполняют в стандартных условиях (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York). Эти стадии восстановления могут быть эффективными на любых стадиях процесса синтеза.
Схема IIa
Согласно схеме IIa, соединения (15) могут быть получены по такой же методике, как и соединение (3) на схеме Ia, исходя из соединений (1) и (14), или конденсацией N-имидазоланилина (9) с галогенопроизводными, алкоильными производными, сульфонильными производными или сульфинильными производными (14) с использованием стандартных условий (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York). Большинство галогенопроизводных, алкоильных производных, сульфонильных производных или сульфинильных производных (14) являются коммерчески доступными или синтезируются обычными способами (см. экспериментальную часть).
Если R8 представляет собой сложный эфир, омыление соединения (15) дает производное карбоновой кислоты обычными способами.
Если R8 представляет собой сульфамид, он может быть непосредственно получен с использованием подходящего замещенного алкоильного производного или галогенопроизводного (14).
Если R8 обозначает цианогруппу, взаимодействие с азидом натрия дает тетразолильную группу (Kiyoto K., Synthesis, 1998, 910-14).
Снятие защиты метокси- или бензилоксибензотиофена (15) с использованием трибромборана (McOmie. J.F.W, Tetrahedron, 1968, 24, 2289-92) или путем гидрирования (Felix A., J Org Chem, 1978, 43, 4194-97) дает гидроксибензотиофен (16). Восстановление нитробензотиофенового соединения (15) двухлористым оловом дает аминобензотиофен (18) (Matassa V., J Med Chem, 1990, 33, 2621-29).
Эти соединения (16) и (18) преобразуют в соответствующие сульфаматы (17) или аминосульфониламины (19) с использованием тех же самых условий, что и в синтезе соединений (11) или (13).
Окисление серы в бензотиофене перекисью водорода в трифторуксусной кислоте в условиях, описанных Grivas S. and Ronne E. (Acta Chemica Scandinavia, 1995, 49, 225-229), или мета-хлорпербензойной кислотой в метиленхлориде дает окисленные бензотиофены. (Ong H. H., J Med Chem, 1987, 30, 12, 2295-2303).
Восстановление амида, тиоамида, кетона, тиокетона, когда X обозначает СО или CS, или восстановление окисленной серной группы осуществляют в условиях, описанных Ellefson C. (J Med Chem, 1981, 24, 1107-10), Hajos J. (Complex Hydrides, Elsevier, New York, 1979) или Drabowicz S. (Org Prep Proced Int, 1977, 9, 63-83) и Bordwell J. (J Am Chem Soc, 1951, 73, 2251-53), или в стандартных условиях (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York). Эти стадии окисления и восстановления могут быть эффективными на любых стадиях процесса синтеза.
Схема IIb
Согласно схеме IIb, соединения (21) синтезируют такими же способами синтеза, что и соединения (3), исходя из соединений (1) и (20) или (9) и (20).
3-Галогенобензотиофеновое производное (21) обрабатывают водным гидроксидом металла (Svoboda J., Collect Czech Chem comm, 2000, 65, 7, 1082-92 или Sall D., J Med Chem, 2000, 43, 4, 649-63), получая 3-гидроксибензотиофеновое производное (22), или обрабатывают водным аммиаком в ацетоне или этаноле (Bordwell F., J. A. C. S., 1948, 70, 1955-58), получая 3-аминобензотиофеновое производное (24).
2-Гидроксибензотиофеновое производное (22) или 2-аминобензотиофеновое производное (24) получают соответственно снятием защиты 2-метоксибензотиофенового производного (21) с использованием гидрохлорида пиридина (Cannizzo S., J Heterocyclic Chem, 1990, 27, 2175-79) и путем восстановления 2-нитробензотиофенового соединения (21) двухлористым оловом (Matassa V, J Med Chem, 1990, 33, 2621-29).
Эти соединения (22) и (24) могут быть сульфамоилированы с получением (23) и (25), используя те же самые условия, что и для синтеза соединений (11) или (13).
Депротонирование 2-H-бензотиофенового производного (21) с использованием амидов лития или алкилов приводит к литиированию в C-2 положении. Добавление сульфурилхлорида дает хлорсульфонил, который обрабатывают водным аммиаком в ацетоне (Graham S., J Med Chem, 1989, 32, 2548-54), получая 2-сульфонамидбензотиофеновое производное (21), или добавление сухого льда с последующим гидролизом дает бензотиофеновое производное 2-карбоновой кислоты (21) (Matecka D., J Med Chem, 1997, 40, 705-16).
Бензотиофеновое производное 3-карбоновой кислоты или карбоксамида (21) получают обработкой 3-H-бензотиофенового производного трихлорацетилхлоридом/хлоридом алюминия, с последующим гидролизом водой (Bonjouklian R., Synth Comm, 1985, 15, 8, 711-13) или водным аммиаком (Turnbull K., J Heterocycl Chem, 2000, 37, 2, 383-88).
3-Сульфонамидное производное (21) получают в условиях, описанных Chapman N. (J. Chem. Soc., 1970, 18, 2431-35) или Hageman W. (Ger. Offen., 3435173, 11 April 1985).
Окисление серы в бензотиофене и восстановление карбоксамида, тиоамида, кетона, тиокетона, окисленной серной группы может быть осуществлено на любой стадии синтеза в условиях, уже представленных в настоящем описании.
Схема III
Согласно схеме III, соединения (27) получают конденсацией N-имидазоланилина (9) с изоцианатными производными (26), используя стандартные условия (March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York). Большинство изоцианатных производных (26) являются коммерчески доступными или синтезируются обычными способами.
Соединения (28) и (30) синтезируют такими же способами синтеза, что и соединения (10) и (12) на схеме Ib.
Соединения (29) и (31) синтезируют такими же способами синтеза, что и соединения (11) и (13) на схеме Ib.
Схема IV
Согласно схеме IV, би-арильные соединения (33) могут быть синтезированы такими же способами синтеза, что и соединения (8) с производными (32). Производные (32) являются коммерчески доступными или синтезируются обычными способами (как ex Buraway S, J Chem Soc, 1955, 2557; Tilley J W, J Med Chem, 1989, 32, 8, 1814).
Схема V
Согласно схеме V, соединения (35) синтезируют такими же способами синтеза, что и соединения (8) с гетероциклами (34) (один или два атома азота в любых положениях). Гетероциклы (34) являются коммерчески доступными или синтезируются обычными способами (см. следующие примеры). Галогенопроизводные пиридина (34) могут быть получены в соответствии с публикациями (Biorg Med Chem Lett, 1996, 6, 21, 2613; Myers A G, J Org Chem, 1996, 61, 813; Tetrahedron, 1993, 49, 19, 4085) или из карбоновой кислоты (WO 0177078). Галогенопроизводные пиримидина (34) могут быть получены из алкилпиримидинов (Budesinsky, Collect, Czech, Chem Commun, 1968, 33, 7, 2266; Kunieda T, J Am Chem Soc, 1971, 93,3487) обычным галогенированием (Isoda S, Chem pharm Bull, 1980, 28, 5, 1408; March J., Advanced Organic Chemistry, Fourth edition, Wiley Interscience, New-York) или из карбальдегидов (Bredereck, Chem Ber, 1967, 100, 11, 3664; Adams J L, Bioorg Med Chem Lett, 1998, 8, 22, 3111), и карбоновые кислоты (Huffman K R, J Org Chem, 27, 1962, 551; Daves J Org Chem, 1961, 26, 2755) могут быть преобразованы в хлорангидриды кислот (34). Галогенопроизводные пиразина (34) могут быть получены из алкилпиразинов (Lutz W B, J Org Chem, 1964, 29, 415) бромированием или из карбальдегидов (US 3558625), и карбоновые кислоты (Sato N, J Heterocycl Chem, 19, 1982, 407-408; Felder P, Helv Chim Acta, 1964, 47, 873) могут быть преобразованы в хлорангидриды кислот (34). Галогенопроизводные пиридазина (34) могут быть получены согласно Piras S (Farmaco, 1993, 48, 9, 1249) Yanai, (Heterocycles, 1976, 4, 1331) или галогенированием алкилпиридазинов (Becker, J Prakt Chem, 1970, 312, 591; DE 1950491), и карбоновые кислоты (Boger D L, J Am Chem Soc 1987, 109, 9, 2717) могут быть преобразованы в хлорангидриды кислот (34).
Для всех схем IIa, IIb, IV, V карбоксилатное производное, сульфамидное производное и тетразольное производное синтезируют способами, уже описанными для схемы Ia и R8 и (R9)p и выполненными в тех же самых условиях, уже представленных в настоящем описании.
Группы, описанные для R3, R4, R8 и R9, могут быть получены обычными способами (см. обзор по сульфатазе (Nussbaumer P, Medecinal Research, 2004, 24, 4, 529-76), карбоангидразе (Supuran C T, Carbonic anhydrase, 2004, C R C press) и статьи от Park J D (J Heterocycl Chem, 2000, 37, 2, 383-88), Schreiner E P (Bioorg Med Chem Lett, 2004, 14, 4999-5002) и Taylor S D (Bioorg Med Chem Lett, 2004, 14, 151-155).
Следующие примеры предназначены для иллюстрации, но не для ограничения диапазона изобретения.
ПОЛУЧЕНИЕ N,N-ДВУЗАМЕЩЕННЫХ ГИДРАЗИНОВ (4)
Пример 1
N 1 -(4-Цианофенилметил)-N 1 -(4-метоксифенил)гидразин
Хлорметилбензонитрил (25 г, 164,90 ммоль) вводили при перемешивании в колбу, содержащую толуол (200 мл) и триэтиламин (46,40 мл, 329,80 ммоль). Гидрохлорид 4-метоксифенилгидразина (28,80 г, 164,90 ммоль) добавляли порциями и реакционную смесь перемешивали 3 часа при кипении с обратным холодильником. После охлаждения смесь фильтровали, промывали толуолом (50 мл) и водой (200 мл), получая твердое вещество белого цвета (27,20 г, 65%), т.пл: 115°C.
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,65 (с, 3H), 4,30 (с, 2H), 4,57 (с, 2H), 6,77 (д, 2H), 6,94 (д, 2H), 7,48 (д, 2H), 7,76 (д, 2H).
ПОЛУЧЕНИЕ ИМИДАЗОЛОВ (9)
Пример 2
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
a) 4-[N-(2,3-дигидро-1H-имидазол-1-ил-2-тион)амино]бензонитрил
К суспензии гидрохлорида 4-цианофенилгидразина (6,00 г, 35,40 ммоль) в этаноле (60 мл) добавляли по каплям 2,2-диметоксиэтилизотиоцианат (6,25 г, 42,4 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения растворитель выпаривали в вакууме, полученное масло разбавляли смесью уксусная кислота/вода (9/1, 32 мл) и суспензию нагревали с обратным холодильником в течение 1,5 часов и при комнатной температуре в течение ночи. Полученный остаток вливали в воду (300 мл) и собирали коричневый осадок. После гомогенизации в этаноле из твердого вещества коричневого цвета получали твердое вещество белого цвета (4,60 г, 58%).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,54 (д, 2H), 7,00 (т, 1H), 7,23 (т, 1H), 7,62 (д, 2H), 9,83 (с, 1H), 12,40 (с, 1H).
b) 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
35%-ную перекись водорода (4,90 мл, 55,5 ммоль) добавляли по каплям к охлажденной льдом суспензии 4-[N-(2,3-дигидро-1H-имидазол-1-ил-2-тион)амино]бензонитрила (4,00 г, 18,50 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл). Когда ТСХ показала полное завершение реакции, реакционную смесь разбавляли водой, устанавливали рН 11 гидроксидом натрия, обрабатывали гидросульфитом натрия и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 6/4) получали чистое масло и кристаллизацией из этанола получали белые кристаллы (4,40 г, 58%), т.пл: 162°C.
1H-ЯМР (ДMСO-d6): 6,50 (д, 2H), 7,08 (с, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,66 (д, 2H), 7,83 (с, 1H).
ПОЛУЧЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ БЕНЗОТИОФЕНА (14) И (20)
Пример 3
1-Хлор-3-(3-метоксифенил)сульфанилпропан-2-он
К перемешиваемому раствору 1,3-дихлор-2-пропанона (12,70 г, 0,1 моль) в смеси метанол/вода (100 мл, 1:3) при 0°C добавляли суспензию 3-метоксибензолтиола (14,02 г, 0,1 моль) и гидроксид натрия (4,00 г, 0,10 г) в воде (100 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 7 часов и при комнатной температуре в течение 10 часов. Осажденный продукт экстрагировали дихлорметаном (100 мл), промывали водой (80 мл) и сушили сульфатом натрия. После удаления растворителя получали требуемый продукт (масло, 18,70 g).
1H-ЯМР (CDCl3): 3,80 (с, 3H), 3,83 (с, 2H), 4,29 (с, 2H), 6,78 (дд, 1H), 6,98 (д, 1H), 6,90 (дд, 1H), 7,21 (т, 1H).
Пример 4
3-Хлорметил-6-метоксибензотиофен
Раствор указанного выше тиосоединения (17,50 г, 75,85 ммоль) в CH2Cl2 (1700 мл) добавляли по каплям к раствору BF3·Et2O (10,60 мл, 83,44 ммоль) в CH2Cl2 (100 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение ночи и после гидролиза водным раствором NaHCO3 реакционную смесь перемешивали, пока обе фазы не стали прозрачными. Слой CH2Cl2 отделяли и водный слой экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические фазы сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая масло (18,00 г). Флэш-хроматография на силикагеле (толуол/петролейный спирт 40-60°C: 5/5) давала смесь 1:10 3-хлорметил-4-метоксибензотиофен:3-хлорметил-6-метоксибензотиофен в виде масла (12,35 г, 58%).
Главный изомер 1H-ЯМР (CDCl3): 3,89 (с, 3H), 4,82 (с, 2H), 7,08 (дд, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,35 (д, 1H), 7,78 (д, 1H).
Пример 5
3-Бром-6-бензилоксибензотиофен
N-Бромсукцинимид (15,70 г, 83,92 ммоль) и п-толуолсульфоновую кислоту (2,70 г, 15,68 ммоль) добавляли к раствору 6-бензилоксибензотиофена (Zhengying C., компьютерная сеть 1370533 A, 21,2 г, 88,33 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (120 мл). Смесь выдерживали при 80°C в течение 35 минут, охлаждали на ледяной бане и сукцинимид удаляли фильтрованием. Раствор экстрагировали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая масло. Кристаллизацией из пентана получали твердое вещество белого цвета (21,60 г, 92%, т.пл: 68°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,14 (с, 2H), 7,08 (дд, 1H), 7,25-7,55 (м, 6H), 7,65 (д, 1H), 7,76 (д, 1H).
Пример 6
3-Бром-6-бензилоксибензотиофен-1,1-диоксид
К раствору 3-бром-6-бензилоксибензотиофена (2,00 г, 6,27 ммоль) в дихлорметане (50 мл) и трифторуксусной кислоте (1,5 мл) добавляли 35%-ную водную перекись водорода (2,00 мл, 19,54 ммоль). После 8 часов при 50°C смесь гидролизовали насыщенным водным NaHCO3, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт. Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/этилацетат: 9/1) получали прозрачное масло (1,10 г, 55%).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,20 (с, 2H), 7,20-7,60 (м, 7H), 7,72 (д, 1H), 7,83 (с, 1H).
Пример 7
(6-Бензилоксибензотиен-2-ил)метанол
К раствору 6-бензилоксибензотиофен-2-карбальдегида (описанному Nomura Y., WO 9635688 A1, 6,50 г, 24,20 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли по каплям охлажденную до -30°C суспензию LiAlH4 (0,85 г, 22,26 ммоль). После нагревания до комнатной температуры смесь перемешивали в течение ночи, охлаждали до -10°C, гидролизовали ледяной водой, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт. Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/этилацетат: 7/3) получали прозрачное масло (4,50 г, 69%).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,68 (с, 2H), 5,13 (с, 2H), 5,60 (с, 1H), 7,00 (дд, 1H), 7,14 (с, 1H), 7,25-7,80 (м, 7H).
Пример 8
6-Бензилокси-2-(хлорметил)бензотиофен
Сульфонилхлорид (20 мл) добавляли к раствору (6-бензилоксибензотиен-2-ил)метанола (4,20 г, 15,50 ммоль) в дихлорметане (40 мл). Смесь выдерживали при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов, охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме, получая 4,20 г в виде масла.
1H-ЯМР (CDCl3): 4,75 (с, 2H), 5,04 (с, 2H), 6,95 (дд, 1H), 7,10 (с, 1H), 7,20-7,60 (м, 7H).
ПОЛУЧЕНИЕ ИМИДАЗОЛОВ ФОРМУЛЫ (8, 33, 35)
Используя ту же самую методику, как описано в примере 2, но заменяя гидрохлорид 4-цианофенилгидразина на:
- N1-(4-цианофенилметил)-N1-(4-метоксифенил)гидразин,
получали следующее соединение:
Пример 9
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(4-метоксифенил)амино]метилбензонитрил
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,70 (с, 3H), 4,90 (с, 2H), 6,60-7,00 (м, 5H), 7,40 (с, 1H), 7,55 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,78 (д, 2H).
Кристаллизацией из эфира этанола с соляной кислотой получали белые кристаллы (5,70 г, 66%).
Т.пл.: 207°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,70 (с, 3H), 4,97 (с, 2H), 6,93 (д, 2H), 7,13 (д, 2H), 7,45 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,84 (д, 2H), 8,04 (с, 1H), 8,18 (с, 1H), 9,55 (с, 1H).
Пример 10
4-[N-(4-Гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метилбензонитрил
Раствор трибромида бора (60 мл, 60,00 ммоль) в 20 мл дихлорметана добавляли к холодному (0-5°C) раствору 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)-N-(4-метоксифенил)амино]метилбензонитрила (4,60 г, 15,11 ммоль). После 1 часа при комнатной температуре смесь гидролизовали насыщенным водным NaHCO3, фильтровали, промывали водой (50 мл) и дихлорметаном (20 мл), получая твердое вещество коричневого цвета (4,00 г). Кристаллизацией из ацетона получали твердое вещество коричневого цвета (3,00 г, 68%). Т.пл.: 150°C.
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,84 (с, 2H), 6,70 (с, 4H), 6,90 (с, 1H), 7,45-7,62 (м, 3H), 7,62-7,90 (м, 3H), 9,25 (с, 1H).
Пример 11
4-[N-(4-Гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
4-Гидроксибензилбромид (15,6 г, 84,3 ммоль, полученный согласно Wissner A. et al., J. Med. Chem. 1992, 35, 1650), добавляли к смеси 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (10,00 г, 54,30 ммоль) и K2CO3 (8,20 г, 59,70 ммоль) в сухом ТГФ (150 мл) при комнатной температуре. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и после этого вливали в воду и экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт (16,00 г в виде твердого вещества). Кристаллизацией из этилацетата с этанолом получали ожидаемый продукт (6,50 г, 41%, т.пл: 180°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,80 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 6,91 (с, 1H), 7,04 (д, 1H), 7,20 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,63 (д, 2H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-гидроксибензилбромид на:
- 3-хлор-4-гидроксибензилбромид
- 3-бром-4-гидроксибензилбромид
- 4-гидрокси-3-метоксибензилбромид
- 2,3,5,6-тетрафтор-4-гидроксибензилхлорид (полученный согласно Angyal S.J. et al., J. Chem. Soc. 1950, 2141)
- 3-формил-4-гидроксибензилхлорид (полученный согласно Angyal S.J. et al., J. Chem. Soc. 1950, 2141)
- 1-бензилокси-4-(2-бромэтокси)бензол (полученный согласно Brinkman J. and al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, 6, 21, 2491-94)
- 2-хлор-5-хлорметилпиридин
- 4-(бромметил)бензолсульфонамид (полученный согласно Colescott R. and all. J. Chem. Soc., 1957, 79, 4232-35)
- 4-(хлорметил)-2-нитрофенол (полученный согласно патенту Bayer: DE 132475)
- 5-хлорметил-2-метоксибензойную кислоту (полученную согласно Leonard F. and all. J. Med. Chem., 1965, 8, 812-15),
получали соответственно следующие соединения:
Пример 12
4-[N-(3-Хлор-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 195°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,88 (с, 2H), 6,67 (д, 2H), 6,88 (д, 2H), 6,98 (с, 1H), 7,05 (дд, 1H), 7,24 (д, 1H), 7,33 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,72 (д, 2H), 10,28 (с, 1H).
Пример 13
4-[N-(3-Бром-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 198°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,90 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 6,85 (д, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,07 (д, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,67 (д, 2H), 10,40 (с, 1H).
Пример 14
4-[N-(4-Гидрокси-3-метоксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 215°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,70 (с, 3H), 4,89 (с, 2H), 6,68 (с, 2H), 6,70 (д, 2H), 6,80 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,72 (д, 2H), 9,20 (с, 1H).
Пример 15
4-[N-(2,3,5,6-Тетрафтор-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 243°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,09 (с, 2H), 6,72 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,32 (с, 1H), 7,69 (д, 2H), 7,77 (с, 1H), 11,80 (с, 1H).
Пример 16
4-[N-(3-Формил-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 160°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,95 (с, 2H), 6,70 (д, 2H), 6,90 (с, 1H), 6,96 (д, 1H), 7,35 (с, 1H), 7,44 (дд, 1H), 7,58 (д, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,71 (д, 2H), 10,20 (с, 1H), 10,75 (с, 1H).
Пример 17
4-{N-[2-(4-Бензилокси-фенокси)этил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]}бензонитрил
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,95-4,10 (м, 2H), 4,11-4,28 (м, 2H), 5,01 (с, 2H), 6,60 (д, 2H), 6,82 (д, 2H), 7,95 (д, 2H), 7,03-7,50 (м, 7H), 7,69 (д, 2H), 7,88 (с, 1H).
Пример 18
4-{N-[(6-Хлорпиридин-3-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино}бензонитрил
Т.пл. 156°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,10 (с, 2H), 6,71 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,49 (д, 1H), 7,55-7,90 (м, 4H), 8,34 (д, 1H).
Пример 19
4-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}бензолсульфамид
Т.пл. 150°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,15 (с, 2H), 6,62 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,36 (с, 2H), 7,45 (с, 1H), 7,55 (д, 2H), 7,65-7,90 (м, 5H).
Пример 20
4-[N-(4-Гидрокси-3-нитрофенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 205°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,98 (с, 2H), 6,72 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,06 (д, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,48 (д, 1H), 7,60-7,78 (м, 3H), 7,82 (с, 1H).
Пример 21
5-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}-2-метоксибензойная кислота
Т.пл. 187°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,79 (с, 3H), 5,00 (с, 2H), 6,69 (д, 2H), 6,98 (с, 1H), 7,05 (д, 1H), 7,31 (с, 1H), 7,39 (дд, 1H), 7,55 (д, 1H), 7,62-7,85 (м, 3H).
Пример 22
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(4-нитрофенил)амино]бензонитрил
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)амино]бензонитрил (10,00 г, 54,30 ммоль) добавляли порциями к суспензии трет-бутоксида калия (6,69 г, 59,73 мм) в ДМСО (100 мл) при (10-15°C) с перемешиванием. Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре и затем добавляли по каплям 4-нитрофторбензол (7,60 г, 54,00 мМ) в ДМСО (15 мл), поддерживая температуру ниже 30°C. Через 2 ч смесь вливали в воду (800 мл), полученный осадок собирали фильтрованием и очищали кристаллизацией из этанола (1,00 г, 48%, т.пл: 188°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 7,00 (д, 2H), 7,17 (с, 1H), 7,26 (д, 2H), 7,65 (с, 1H), 7,90 (д, 2H), 8,20 (с, 1H), 7,22 (д, 2H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-нитро-фторбензол на:
- 6-хлорникотиноилхлорид
- 4-фторфенилацетилхлорид
- 4-гидроксифенилацетилхлорид
- 4-гидроксифенилпропанoилхлорид (полученный согласно Elias H. and all. Macromol. Chem. Phys., 1981, 182, 681-86)
- 4-фенилметоксибензолсульфонилхлорид (полученный согласно Toja E. and all. Eur. J. Med. Chem. 1991, 26, 403-13),
получали соответственно следующие соединения:
Пример 23
6-Хлор-N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)никотинамид
Т.пл. 132°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,98 (с, 1H), 7,40-7,62 (м, 3H), 7,70 (с, 1H), 7,95 (д, 2H), 8,00 (д, 1H), 8,19 (с, 1H), 8,57 (д, 1H).
Пример 24
N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(4-цианофенил)-2-(4-фторфенил)ацетамид
Т.пл. 131°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,57 (с, 2H), 7,00-7,35 (м, 5H), 7,55 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,93 (д, 2H), 8,19 (с, 1H).
Пример 25
N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(4-цианофенил)-2-(4-гидроксифенил)ацетамид
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,32 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 6,87 (д, 2H), 7,08 (с, 1H), 7,50 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,90 (д, 2H), 8,10 (с, 1H), 9,30 (с, 1H).
Пример 26
N-(4-Цианофенил)-3-(4-гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)пропанамид
Т.пл. 172°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,25-2,60 (м, 2H), 2,65-2,90 (м, 2H), 6,63 (д, 2H), 6,90 (д, 2H), 7,08 (с, 1H), 7,51 (д, 2H), 7,61 (с, 1H), 7,90 (д, 2H), 8,10 (с, 1H), 9,20 (с, 1H).
Пример 27
N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-4-(фенилметокси)бензолсульфонамид
1H-ЯМР (CDCl3): 5,14 (с, 2H), 6,93 (т, 1H), 7,00-7,15 (м, 3H), 7,30-7,45 (м, 7H), 7,50 (с, 1H), 7,66 (д, 2H), 7,68 (д, 2H).
ПОЛУЧЕНИЕ ИМИДАЗОЛОВ ФОРМУЛЫ (15), (21)
Пример 28
5-Нитро-[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)]бензотиофен-2-карбоксамид
5-Нитробензотиофен-2-карбонилхлорид (промышленное соединение, 10,00 г, 41,00 ммоль) добавляли к смеси 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (7,55 г, 41,00 ммоль), ТЕА (20 мл, 143,00 ммоль) в сухом ТГФ (150 мл) при комнатной температуре. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и осадок отфильтровывали, промывали ТГФ, водой, получая сырой продукт в виде твердого вещества (9,26g). Кристаллизацией с этанолом получали белые кристаллы (3,50 г, т.пл: 221°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 7,10 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 7,82 (с, 1H), 7,98 (д, 2H), 8,15-8,40 (м, 3H), 8,89 (с, 1H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 5-нитробензотиофен-2-карбонилхлорид на:
6-метоксибензотиофен-3-ацетилхлорид (описанный Sauter F., Monatshefte Fuer Chemie, 1968, 99, 2, 610-15), получали следующее соединение:
Пример 29
N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-2-(6-метоксибензотиен-3-ил)ацетамид
Т.пл.: 104°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,75-3,85 (м, 5H), 7,02 (дд, 1H), 7,13 (с, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,50-7,75 (м, 4H), 7,80 (с, 1H), 7,90 (д, 2H), 8,25 (с, 1H).
Пример 30
4-{N-[1H-Имидазол-1-ил]-N-[(6-метоксибензотиен-3-ил)метил]амино}бензонитрил
3-Хлорметил-6-метоксибензотиофен (12,35 г, 58,06 ммоль) добавляли к смеси 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (9,72 г, 52,78 ммоль), K2CO3 (14,60 г, 105,56 ммоль) и йодида калия (0,10 г, 0,60 ммоль) в сухом ДМФА (70 мл) при комнатной температуре. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и после этого вливали в воду и экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт в виде твердого вещества (14,30 г). Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 6/4) получали ожидаемый продукт (10,50 г, 55%, порошок). Кристаллизацией с этанолом получали белые кристаллы (7,30 г, т.пл: 164°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,80 (с, 3H), 5,25 (с, 2H), 6,74 (д, 2H), 6,93 (с, 1H), 7,02 (дд, 1H), 7,28 (с, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,68 (д, 1H), 7,75 (д, 2H).
Пример 31
4-[N-(6-Бензилокси-1,1-диоксидобензотиен-3-ил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)амино]бензонитрил (0,50 г, 27,14 ммоль) добавляли порциями к суспензии трет-бутоксида калия (0,35 г, 31,00 ммоль) в ТГФ (20 мл) при (10-15°C) с перемешиванием. Смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре и затем добавляли по каплям 3-бром-6-бензилоксибензотиофен-1,1-диоксид (1,10 г, 31,33 мМ) в ТГФ (5 мл), поддерживая температуру ниже 30°C. После одной ночи смесь вливали в воду (200 мл) и экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт в виде масла (2,50 г). Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/1,4-диоксан: 7/3) и кристаллизацией в этаноле получали светло-коричневые кристаллы (1,20 г, 95%, т.пл: 146°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,22 (с, 2H), 6,48 (с, 1H), 6,49 (д, 1H), 7,05-7,20 (м, 2H), 7,25-7,50 (м, 8H), 7,60 (д, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,94 (д, 2H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 3-бром-6-бензилоксибензотиофен-1,1-диоксид на:
6-бензилокси-2-(хлорметил)бензотиофен,
получали следующее соединение:
Пример 32
4-[N-[(6-Бензилоксибензотиен-2-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,12 (с, 2H), 5,30 (с, 2H), 6,72 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,04 (дд, 1H), 7,23 (с, 1H), 7,27-7,90 (м, 11H).
ПОЛУЧЕНИЕ ИМИДАЗОЛОВ ФОРМУЛЫ (10), (16)
Пример 33
4-{N-[(6-Гидроксибензотиен-3-ил)метил]-N-[1H-имидазол-1-ил]амино}бензонитрил
Раствор 4-{N-[1H-имидазол-1-ил]-N-[(6-метоксибензотиен-3-ил)метил]амино}бензонитрила (0,50 г, 1,39 ммоль) в 10 мл метиленхлорида добавляли при комнатной температуре к раствору 1M трибромида бора в метиленхлориде (1,50 мл, 1,52 ммоль). После 2 ч при комнатной температуре смесь гидролизовали насыщенным водным NaHCO3, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Сырой продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 6/4), получая ожидаемый продукт (0,30 г, 62%, порошок). Кристаллизацией с этанолом получали кристаллы белого цвета (0,10 г, т.пл: 169°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,24 (с, 2H), 6,72 (д, 2H), 6,87 (дд, 1H), 6,94 (с, 1H), 7,27 (д, 2H), 7,29 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,56 (д, 1H), 7,75 (д, 2H), 9,67 (с, 1H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-{N-[1H-имидазол-1-ил]-N-[(6-метоксибензотиофен-3-ил)метил]амино}бензонитрил на:
N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-2-(6-метоксибензотиен-3-ил)ацетамид, получали следующее соединение:
Пример 34
N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-2-(6-гидроксибензотиен-3-ил)ацетамид
Т.пл. 179°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,72 (с, 2H), 6,85 (дд, 1H), 7,10 (д, 2H), 7,25 (д, 1H), 7,40-7,70 (м, 3H), 7,80 (с, 1H), 7,91 (д, 2H), 8,24 (с, 1H), 9,60 (с, 1H).
Пример 35
4-[N-(3-Амино-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
4-[N-(4-Гидрокси-3-нитрофенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил (2 г, 5,97 ммоль) гидрировали над суспензией Pd/C (10 вес.% на угле, 0,2 г) в этаноле (30 мл). Когда ТСХ показала полное завершение реакции, смесь фильтровали через celatum, промывали EtOH. Растворитель концентрировали в вакууме. Кристаллизацией из смеси EtOH/петролейный эфир получали оранжевые кристаллы (1,1 г, 60,5%, т.пл.: 208°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,60 (с, 2H), 4,79 (с, 2H), 6,80 (д, 1H), 6,40-6,80 (м, 4H), 6,99 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,50-7,80 (м, 3H), 9,07 (с, 1H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-[N-(4-гидрокси-3-нитробензил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил на:
- 4-{N-[2-(4-бензилоксифенокси)этил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]}бензонитрил
- N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-4-(фенилметокси)бензолсульфонамид,
получали соответственно следующие соединения:
Пример 36
4-{N-[2-(4-Гидроксифенокси)этил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино}бензонитрил
Т.пл. 188°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,99 (т, 2H), 4,17 (т, 2H), 6,40-6,85 (м, 6H), 7,10 (с, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,68 (д, 2H), 7,86 (с, 1H), 8,95 (с, 1H).
Пример 37
N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-4-гидроксибензолсульфонамид
Т.пл. 248°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,95 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,24 (с, 1H), 7,49 (д, 2H), 7,52 (д, 2H), 7,88 (с, 1H), 7,92 (д, 2H), 10,95 (с, 1H).
Пример 38
4-[N-[(6-Гидрокси-1,1-диоксидобензотиен-3-ил)]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Смесь 4-[N-[(6-бензилокси-1,1-диоксидобензотиен-3-ил)]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (3,00 г, 6,78 ммоль), 10% Pd/C (0,50 г), ТГФ (30 мл) и раствора формиата аммония (25% в H2O, 30 мл) перемешивали при температуре окружающей среды в течение 6 часов и фильтровали. Смесь вливали в воду и экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт (2,50 г в виде твердого вещества). Кристаллизацией из этанола получали белые кристаллы (0,80 г, 26%, т.пл.: 260°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,25 (с, 1H), 6,29 (д, 1H), 6,82 (дд, 1H), 7,10 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 7,30 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,91 (д, 2H), 8,25 (с, 1H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-[N-[(6-бензилокси-1,1-диоксидобензотиен-3-ил)]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил на:
4-[N-[(6-бензилоксибензотиен-2-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил,
получали следующее соединение:
Пример 39
4-[N-[(6-Гидроксибензотиен-2-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 230°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,28 (с, 2H), 6,70 (д, 2H), 6,82 (дд, 1H), 7,00 (с, 1H), 7,15-7,21 (м, 2H), 7,31 (с, 1H), 7,55 (д, 1H), 7,69-7,80 (м, 3H), 9,63 (с, 1H).
ПОЛУЧЕНИЕ ИМИДАЗОЛОВ ФОРМУЛЫ (12), (18)
Пример 40
4-[N-(4-Аминофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Гидразин (1,52 мл, 49,00 ммоль) добавляли порциями к суспензии 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)-N-(4-нитрофенил)амино]бензонитрила (3,00 г, 9,80 мм) и рутения, 5 вес.% на угле (0,30 г, 0,15 мМ) в этаноле (35 мл) при кипении с обратным холодильником с перемешиванием. Когда ТСХ показала полное завершение реакции, смесь охлаждали и катализатор отфильтровывали. Растворитель концентрировали в вакууме. Остаток вливали в воду и экстрагировали дихлорметаном, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт (2,50 г в виде твердого вещества). Кристаллизацией из этилацетата с этанолом получали ожидаемый продукт (1,30 г, 50%, т.пл: 147 °C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,50 (с, 2H), 6,30 (д, 2H), 6,69 (д, 2H), 7,09 (с, 1H), 7,29 (д, 2H), 7,63 (с, 1H), 7,65 (д, 2H), 8,14 (с, 1H).
Пример 41
5-Амино-[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)]бензотиофен-2-карбоксамид
Дигидрат двухлористого олова (13,10 г, 58,00 ммоль) добавляли порциями к перемешиваемому раствору 5-нитро-[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)]бензотиофен-2-карбоксамида (4,50 г, 11,6 мм) в этаноле (100 мл). Смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником. Когда ТСХ показала полное завершение реакции, смесь охлаждали и превращали в основание с помощью насыщенного раствора бикарбоната. Смесь экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт в виде твердого вещества (3,90 г). Кристаллизацией из метанола получали ожидаемый продукт (2,60 г, 63%, т.пл: 214°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,70-6,98 (м, 3H), 7,07 (с, 1H), 7,40-7,25 (м, 4H), 7,26-7,96 (м, 3H).
ОБЩАЯ МЕТОДИКА СУЛЬФАМОИЛИРОВАНИЯ
ПОЛУЧЕНИЕ СУЛЬФАМАТОВ (11, 17, 23) И АМИНОСУЛЬФОНИЛАМИНОВ (13, 19, 25)
Пример 42
4-[N-(4-Цианофенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Сульфамоилхлорид (2,39 г, 20,69 ммоль) добавляли к раствору 4-[N-(4-гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метилбензонитрила (1,00 г, 3,45 ммоль) в сухом DMAc (36 мл) с охлаждением на льду. Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После добавления ТНЕ (3,40 мл, 24,73 мл) смесь вливали в холодный рассол и экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт (0,70 г в виде твердого вещества). Кристаллизацией из этилацетата получали ожидаемый продукт (0,40 г, 31%, т.пл: 60°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,00 (с, 2H), 6,70 (д, 2H), 6,92 (с, 1H), 7,19 (д, 2H), 7,40 (с, 1H), 7,55 (д, 2H), 7,74 (с, 1H), 7,77 (д, 2H), 7,91 (с, 2H).
Используя ту же самую методику, но заменяя 4-[N-(4 гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метилбензонитрил на:
- 4-[N-(4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- 4-[N-(3-хлор-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- 4-[N-(3-бром-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- 4-[N-(3-метокси-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]
бензонитрил
- 4-[N-(2,3,5,6-тетрафтор-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- 4-[N-(3-формил-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- 4-[N-(4-аминофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-4-гидроксибензолсульфонамид
- 4-{N-[2-(4-гидроксифенокси)этил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино}бензонитрил
- N-(1H-имидазол-1-ил)-N-(4-цианофенил)-2-(4-гидроксифенил)ацетамид
- N-(4-цианофенил)-3-(4-гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)пропанамид
- 4-[N-(3-амино-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]
бензонитрил
- 5-амино-[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)]бензотиофен-2-карбоксамид
- 4-[N-[(6-гидрокси-1,1-диоксидобензотиен-3-ил)]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
- N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-2-[(6-гидроксибензотиен-2-ил)]ацетамид
- 4-{N-[(6-гидроксибензотиен-3-ил)метил]-N-[1Н-имидазол-1-ил]амино}бензонитрил
- 4-{N-[(6-гидроксибензотиен-2-ил)метил]-N-[1Н-имидазол-1-ил]амино}бензонитрил,
получали соответственно следующие соединения:
Пример 43
4-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 172°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,00 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,22 (д, 2H), 7,40 (с, 1H), 7,42 (д, 2H), 7,70 (с, 1H), 7,75 (д, 2H), 8,00 (с, 2H).
Пример 44
2-Хлор-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,05 (с, 2H), 6,63 (д, 2H), 7,00 (с, 1H), 7,35-7,45 (м, 3H), 7,54 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 7,80 (с, 1H), 8,29 (с, 2H).
ПРИМЕР 45
2-Бром-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты, гидрохлорид
Кристаллизацию выполняли в EtOH/HCl (т.пл. 145°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,15 (с, 2H), 6,90 (д, 2H), 7,48 (с, 2H), 7,60-7,85 (с, 5H), 8,08 (с, 1H), 8,32 (с, 2H), 9,51 (с, 1H).
Пример 46
2-Метокси-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 211°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,77 (с, 3H), 5,02 (с, 2H), 6,75 (д, 2H), 6,92 (д, 1H), 7,05 (с, 2H), 7,25 (д, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,71 (д, 2H), 7,80 (с, 1H), 7,93 (с, 2H).
Пример 47
2,3,5,6-Тетрафтор-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,37 (с, 2H), 5,83 (с, 2H), 6,86 (д, 2H), 7,08 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 7,81 (д, 2H).
Пример 48
4-[N-[(2,2-Диоксидо-1,2,3-бензоксатиазин-6-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Т.пл. 180°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,17 (с, 2H), 6,67 (д, 2H), 7,02 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,50 (д, 2H), 7,74 (д, 2H), 7,82 (дд, 1H), 7,87 (с, 1H), 8,02 (д, 1H), 9,19 (с, 1H).
Пример 49
N-{4-[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]фенил}сульфамид
Т.пл. 121°C
1H-ЯМР(ДМСО-d6): 6,38 (д, 2H), 7,09 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 7,22 (д, 2H), 7,51 (д, 2H), 7,63 (с, 1H), 7,69 (д, 2H), 8,19 (с, 1H).
Пример 50
4-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]сульфонил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты, гидрохлорид
Кристаллизацию выполняли в EtOH/HCl.
Т.пл. 200°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 7,57 (д, 2H), 7,60 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 7,80-8,10 (м, 5H), 8,40 (с, 2H), 9,30 (с, 1H).
Пример 51
4-{2-[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]этокси}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 174°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,08 (т, 2H), 4,23 (т, 2H), 6,60 (д, 2H), 6,95 (д, 2H), 7,10 (с, 1H), 7,18 (д, 2H), 7,42 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 7,88 (с, 3H).
Пример 52
4-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)карбамоил]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,32 (с, 2H), 7,12 (с, 1H), 7,18-7,32 (м, 4H), 7,50-7,60 (д, 2H), 7,71 (с, 1H), 7,85-8,05 (м, 4H), 8,20 (с, 1H).
Пример 53
4-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]-3-оксопропил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 100°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,45 (т, 2H), 3,85 (т, 2H), 7,10 (с, 1H); 7,12-7,30 (м, 4H), 7,55 (д, 2H), 7,65 (с, 1H), 7,90 (м, 4H), 8,12 (с, 1H).
Пример 54
3-(Аминосульфонил)амино-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 197°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,00 (с, 2H), 6,71 (д, 2H), 6,93 (д, 1H), 7,02 (с, 2H), 7,21 (д, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,61 (д, 2H), 7,74 (с, 1H), 7,92 (с, 2H), 8,10 (с, 2H).
Пример 55
5-(Аминосульфонил)амино-[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)]бензотиофен-2-карбоксамид
Т.пл.: 169°C
1H-ЯМР (ДМСОd6): 6,87 (д, 1H), 7,05-7,30 (м, 4H), 7,56 (с, 1H), 7,67 (д, 2H), 7,80-8,10 (м, 4H), 7,86 (с, 1H), 9,65 (с, 1H).
Пример 56
3-[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]-1,1-диоксидобензотиен-6-иловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 172°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,24 (с, 1H), 6,29 (д, 1H), 6,85 (дд, 1H), 7,15 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 7,30 (д, 2H), 7,65 (с, 1H), 7,95 (д, 2H), 8,05 (с, 2H), 8,25 (с, 1H).
Пример 57
3-{2-[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]-2-оксоэтил}бензотиен-6-иловый эфир сульфаминовой кислоты
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 3,84 (с, 2H), 7,15 (с, 1H), 7,28-7,37 (дд, 1H), 7,51-7,65 (м, 3H), 7,80-7,98 (м, 5H), 8,01 (с, 2H), 8,29 (с, 1H).
Пример 58
3-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}бензотиен-6-иловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 193°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,30 (с, 2H), 6,80 (д, 2H), 6,97 (с, 1H), 7,30-7,40 (м, 2H), 7,56 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,75 (д, 2H), 7,80-7,95 (м, 2H), 8,05 (с, 2H).
Пример 59
2-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}бензотиен-6-иловый эфир сульфаминовой кислоты
Т.пл. 178°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,17 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 6,89 (дд, 1H), 6,94 (с, 1H), 7,20 (д, 2H), 7,27 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 7,58 (д, 1H), 7,72 (д, 2H), 8,00 (с, 2H).
Используя ту же самую методику, как в примере 13, но заменяя 4-[N-(4-гидроксифенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метилбензонитрил на:
- 4-[N-(3-бром-4-гидроксифенилметил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил,
получали в качестве побочного продукта следующие соединения:
Пример 60
2-Бром-4-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}фениламидимидодисульфат
Т.пл. 220°C
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 5,00 (с, 2H), 5,70 (с, 2H), 6,65 (д, 2H), 7,03 (с, 1H), 7,42 (дд, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,55 (д, 1H), 7,65 (д, 1H), 7,72 (д, 2H), 7,81 (с, 1H).
ПОЛУЧЕНИЕ ДРУГИХ СОЕДИНЕНИЙ (8)
Пример 61
4-[N-[(2,2-Диоксидо-3,4-дигидро-1,2,3-бензоксатиазин-6-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
К суспензии 4-[N-[(2,2-диоксидо-1,2,3-бензоксатиазин-6-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (0,40 г, 1,05 ммоль) в метаноле (8 мл) добавляли порциями NaBH4 (0,08 г, 2,11 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После добавления насыщенного раствора NH4Cl (3 мл) и воды (40 мл) полученный осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили, получая твердое вещество белого цвета. Кристаллизацией из этилацетата с этанолом получали ожидаемый продукт (0,40 г, 82%, т.пл: 190°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,55 (д, 2H), 5,04 (с, 2H), 6,64 (д, 2H), 7,02 (с, 1H), 7,03 (д, 1H), 7,27 (д, 1H), 7,30 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 7,85 (с, 1H), 8,56 (т, 1H).
Пример 62
5-{[N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}-2-гидроксибензойная кислота
Смесь 5-{[N-(4-цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]метил}-2-метоксибензойной кислоты (1,00 г, 2,85 ммоль) и пиперидина (0,42 мл, 8,57 ммоль) в диметилацетамиде (DMA) (2 мл) нагревали при 150°C. Когда исходный материал исчезал (ТСХ-мониторинг), растворитель удаляли в вакууме. Флэш-хроматографией на силикагеле (MeOH/дихлорметан: 5/95) и кристаллизацией из этанола получали белые кристаллы (53 мг, 6%, т.пл: 260°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 4,85 (с, 2H), 6,54 (д, 1H), 6,66 (д, 2H), 6,95 (с, 1H), 7,05 (дд, 1H), 7,24 (с, 1H), 7,50-7,60 (м, 2H), 7,68 (д, 2H).
Пример 63
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(фенил)амино]бензонитрил
4-[N-(1H-Имидазол-1-ил)-N-(4-нитрофенил)амино]бензонитрил (3,91 г, 12,80 ммоль) помещали в колбу для гидрогенизации и растворяли в уксусном ангидриде (60 мл) и уксусной кислоте (60 мл). Добавляли палладий (10%) на C, 0,20 г) и колбу присоединяли к прибору для гидрогенизации Парра. Гидрогенизацию выполняли со встряхиванием в течение 3 часов при 25 psi H2. Катализатор удаляли фильтрованием и раствор охлаждали на бане в течение 30 мин. Нитрит натрия (0,97 г, 14,00 ммоль) добавляли к смеси и сосуды слегка прикрывали. Колбу оставляли на ледяной бане в течение 2 часов и давали нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Смесь вливали в смесь лед/вода и твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (50 мл), получая сырой продукт. Флэш-хроматографией (толуол/диоксан: 6/4) и кристаллизацией из этилацетата с этанолом получали ожидаемый продукт (0,40 г, 8%, т.пл: 162°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,60 (д, 2H), 7,00-7,50 (м, 9H), 7,69 (с, 1H).
ПОЛУЧЕНИЕ БЕНЗОКСАТИАЗОЛА (8)
Пример 64
4-[N-(3-Тозиламино-4-гидроксибензил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Тозилхлорид (3,5 г, 18,59 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) добавляли по каплям к раствору (TX 1840) (5,4 г, 17,7 ммоль) и пиридина (19,47 ммоль, 1,6 мл) в CH2Cl2 (50 мл) при 0°C.
Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, после чего вливали в воду и экстрагировали EtOAc, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая сырой продукт (8,1 г в виде твердого вещества оранжевого цвета).
Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 7/3) получали твердое вещество желтого цвета.
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,32 (с, 3H), 4,85 (с, 2H), 6,60 (д, 2H), 6,62 (с, 1H), 6,80 (дд, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,10-7,30 (м, 5H), 7,00 (д, 2H), 7,03 (с, 1H), 7,52 (д, 2H), 9,45 (с, 2H).
Пример 65
4-[N-[(2,2-Диоксидо-3-тозил-3H-1,2,3-бензоксатиазол-5-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Сульфурилхлорид (0,60 мл, 7,40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли по каплям при перемешивании в течение 30 мин к 4-[N-(3-тозиламино-4-гидроксибензил)-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрилу (3,40 г, 7,40 ммоль) и триэтиламину (2,10 мл, 14,81 ммоль) в дихлорметане (6 мл) при -78°C. После дополнительных 15 мин. смеси давали нагреться до комнатной температуры в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавляли водой, экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 5/5) получали чистое масло (1,60 г, 41%).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 2,39 (с, 3H), 5,18 (с, 2H), 6,80 (д, 2H), 7,00-7,50 (м, 6H), 7,60-7,85 (м, 5H), 8,02 (с, 1H).
Пример 66
4-[N-[(2,2-Диоксидо-3H-1,2,3-бензоксатиазол-5-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрил
Фторид калия (0,36 г, 6,14 ммоль) в воде (5 мл) добавляли к 4-[N-[(2,2-диоксидо-3-тозил-3H-1,2,3-бензоксатиазол-5-ил)метил]-N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрилу (1,60 г, 3,07 ммоль) в ацетонитриле (15 мл) при комнатной температуре. Раствор перемешивали в течение ночи, концентрировали, экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Флэш-хроматографией на силикагеле (толуол/диоксан: 5/5) получали масло и кристаллизацией из этанола получали ожидаемый продукт (0,17 г, 15%, т.пл: 230°C).
1H-ЯМР (ДМСОd6): 4,84 (с, 2H), 6,38 (дд, 1H), 6,42 (д, 1H), 6,63 (д, 1H), 6,69 (д, 2H), 7,15 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 7,70 (д, 2H), 8,02 (с, 1H).
ПОЛУЧЕНИЕ ФЕНИЛМОЧЕВИН (27)
Пример 67
N-(4-Цианофенил)-N-(1H-имидазол-1-ил)-N'-фенилмочевина
Фенилизоцианат (3,6 мл, 32,6 ммоль) добавляли к раствору 4-[N-(1H-имидазол-1-ил)амино]бензонитрила (5 г, 27,17 ммоль) в ТГФ (50 мл). Смесь перемешивали при 50°C в течение ночи и после выпаривания кристаллизовали в смеси ацетон/EtOH, получая белые кристаллы (2,5 г, 30,3%, 178°C).
1H-ЯМР (ДМСО-d6): 6,59 (с, 1H), 7,05-7,40 (м, 9H), 7,52 (д, 2H), 7,83 (с, 1H).
РЕЗУЛЬТАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ
ИНГИБИРОВАНИЕ СТЕРОИДСУЛЬФАТАЗЫ, АРОМАТАЗЫ И КАРБОАНГИДРАЗЫ IN VITRO
Сульфат фолликулина (E1S) является основным циркулирующим в плазме эстрогеном, который преобразуется ферментом стероидсульфатазой в фолликулин (E1), который, в свою очередь, может быть преобразован в эстрадиол (E2) ферментативным восстановлением.
Клинически доказано, что ингибирование синтеза E2 ингибиторами ароматазы является хорошим способом остановить прогресс гормонозависимых опухолей молочной железы. Недавно, в качестве альтернативы, появилось ингибирование пути стероидсульфатазы. Поэтому разработка соединений, способных ингибировать как ароматазу, так и стероидсульфатазу, представляется новым и желательным подходом к ингибированию роста опухоли.
Карбоангидразы человека катализируют преобразование между диоксидом углерода (CO2) и бикарбонатным ионом (НСО3 -) и участвуют в многочисленных физиологических и патологических процессах. Они включают гормонозависимый и гормононезависимый канцерогенез, процесс метастазирования и гипоксические опухоли, которые являются менее чувствительными к классической химио/радио-терапии. Ингибирование карбоангидразы человека могло бы быть поэтому ценной дополнительной активностью для соединения, являющегося двойным ингибитором ароматазы и сульфатазы (DASI). В частности, обнаружено, что EMATE обладает способностью ингибировать карбоангидразу человека, подобную такой способности ацетазоламида, известного сульфонамида, являющегося ингибитором карбоангидразы человека. Цель этих экспериментов состояла в том, чтобы оценить in vitro ингибиторный потенциал новых соединений в отношении ароматазной и/или стероидсульфатазной активности. Кроме того, ингибирование активности карбоангидразы II человека (как пример карбоангидразы человека) для некоторых из них было оценено по сравнению с 6,6,7 COUMATE и ацетазоламидом.
Материалы и методы
a) Активность ароматазы
Линия клетки JEG-3, полученная из плацентарной хориокарциномы человека, конститутивно суперэкспрессирует ароматазу человека и представляет собой хорошую модель для анализа предполагаемых ингибиторов ароматазы in vitro. Активность ароматазы определяли тритиевым водным способом. Коротко говоря, клетки сначала высевали в 96-луночные микропланшеты в среду, дополненную декомплементированной эмбриональной телячьей сывороткой (dFCS). Спустя 24 часа клетки промывали и свежую питательную среду, содержащую 1β-3H-андростендион в качестве субстрата ароматазы, добавляли вместе с тестируемыми соединениями при концентрациях в пределах от 10-12 М до 10-5 М. После 2 часов инкубации фракцию питательной среды переносили на гомологичные новые 96-луночные микропланшеты и в каждую лунку добавляли раствор угля с декстрановым покрытием. После выдерживания на льду в течение 10 минут микропланшеты центрифугировали (1500 g; 4°C). Все стероиды, включая радиоактивный субстрат и биосинтезированные эстрогены, адсорбировали на угле; только 3H-вода, специфически образованная в ходе ароматизации 1β-3H-андростендиона, остается в супернатанте. Радиоактивность в супернатанте измеряли подсчетом жидкостной сцинтилляции. Параллельно, солюбилизацию клеток выполняли в растворе этилендиаминтетраацетата. Содержание ДНК измеряли стандартным флуорометрическим способом с использованием флуорохрома Hoechst 33258. Наконец, активность ароматазы выражали в фмоль образованной 3H-воды/2 часа/мкг ДНК и ингибирование ароматазы - как процент контрольной активности без ингибитора. Нелинейный фиттинг-анализ (GraphPad Prism Software) % ингибирования vs концентрация ингибитора позволял определить 50%-ную ингибирующую концентрацию (IC50): самые низкие IC50 соответствуют самым мощным ингибиторам (таблица 1).
b) Активность стероидсульфатазы
Линии клеток JEG-3 присуще очень высокое содержание фолликулинсульфатазы человека, и поэтому она является полезной биологической системой для оценки новых ингибиторов стероидсульфатазы in vitro. Пробы выполняли с клетками в логарифмической фазе роста на 96-луночных микропланшетах. За 24 часа до начала исследования клетки высевали в среду, дополненную декомплементированной эмбриональной телячьей сывороткой (dFCS). Среду удаляли спустя 24 часа и клетки промывали PBS для удаления всех следов dFCS. Затем в свободную от dFCS среду добавляли 3H-E1S, затем тестируемые соединения при концентрациях в пределах от 10-12 М до 10-5 М. После 4 часов обработки питательную среду переносили на 96-луночные микропланшеты и центрифугировали при 200 × g в течение 10 минут с получением сгустков клеток перед экстракцией толуолом. Фракцию среды использовали для экстракции толуолом, чтобы отделить конъюгированный субстрат от неконъюгированных продуктов. Радиоактивность в толуольной фазе измеряли подсчетом жидкостной сцинтилляции. Параллельно, после солюбилизации клеток в растворе этилендиаминтетраацетата, содержание ДНК измеряли стандартным флуорометрическим способом с использованием флуорохрома Hoechst 33258. Наконец, активность фолликулинсульфатазы выражали в пмоль образованных 3H-E1 + 3H-E2/4 часа/мг ДНК и ингибирование сульфатазы фолликулина - как процент контрольной активности без ингибитора. Нелинейный фиттинг-анализ (GraphPad Prism Software) ингибирования % vs. концентрация ингибитора позволял определить 50%-ную ингибирующую концентрацию (IC50): самые низкие IC50 соответствуют самым мощным ингибиторам (таблица 1).
c) Двойная активность ароматазы и стероидсульфатазы
Для оценки ингибирующего потенциала соединений DASI, параллельно в отношении активностей ароматазы и стероидсульфатазы человека, использовали новую in vitro модель, используя клетки JEG-3. Экспериментальные условия, описанные выше для модели стероидсульфатазы, использовали с незначительными изменениями: наличие обоих субстратов, 3-HE1S и 1β-3H-андростендиона, в среде и инкубационный период 2 часа. Результаты выражали в пмоль образованного продукта (3H-E1 + 3H-E2 или 3H2O)/2 часа/мг ДНК (таблица 1).
d) Активность щелочной фосфатазы
Клетки Ishikawa высаживали в 96-луночные микропланшеты за 48 часов до начала исследования. На следующий день питательную среду заменяли свободной от фенолового красного средой, дополненной 5% очищенной углем dFCS. Спустя 24 часа питательную среду обновляли и к высеянным клеткам добавляли соединения и культивировали в течение дополнительного четырехдневного периода. Для каждого соединения тестируемые концентрации составляли от 10-12 М до 10-5 М, и конечная концентрация носителя не превышала 0,1%. В конце инкубационного периода активность щелочной фосфатазы (APase) анализировали способом, включающим гидролиз п-нитрофенилфосфата до п-нитрофенола и спектрофотометрическое определение продукта при 405 нм.
Коротко говоря, микропланшеты сначала промывали дважды холодным фосфатным буферным раствором и затем выдерживали при -80°C в течение по меньшей мере 15 минут. После размораживания при комнатной температуре 50 мкл охлажденных льдом растворов, содержащих 5 мМ п-нитрофенилфосфата, добавляли в каждую лунку. После инкубационного периода 15-60 минут при комнатной температуре интенсивность желтого цвета, генерируемая продукцией п-нитрофенола, измеряли в каждой лунке при 405 нм.
Для каждой проверенной концентрации активность APазы, выражаемая коэффициентом поглощения, сначала выражали как кратность увеличения по сравнению с контролем (FI) и затем как процент от активности E2 (10-8 M), принятой за 100%. Были построены сигмовидные кривые доза-ответ (GraphPad Prism Software), и 50%-ные эффективные концентрации (ЕСао) были вычислены для каждого соединения (таблица 1).
е) Активность карбоангидразы II человека
Этот тест проводили, как описано в литературе (Armstrong J. et al. Purification and properties of human erythrocyte carbonic anhydrases, J Biol Chem, 1966, 241: 5137-5149). Кратко, в этом тесте, карбоангидраза II человека катализирует преобразование п-нитрофенилацетата в п-нитрофенол. Потенциальное ингибирующее действие тестируемых соединений оценивали колориметрическим определением п-нитрофенола, продуцированного в течение ферментативной реакции. Уровни оптической плотности, полученные без ингибитора, упоминаются "как полная активность". Уровни, полученные без ингибитора и без фермента, упоминаются "как контроль", для оценки любого влияния на субстрат в ходе теста (таблица 2).
| Таблица 1 | ||||||
| Ингибирование ароматазной, фолликулинсульфатазной активности и эстрогенный потенциал | ||||||
| Ароматазная активность | Сульфатазная активность | Эстрогенный потенциал | ||||
| Соединения | IC50 ((НМ) ± S.E.M. | n | IC50 ((НМ) ± S.E.M. | n | IC50 ((НМ) ± S.E.M. | n |
| летрозол | 0,47±0,08a | 8 | ndb | 6 | nd | 1 |
| анастрозол | 6,93±1,07a | 6 | ndb | 6 | nd | 1 |
| 2,5±0,6c | 4 | ndc | ||||
| А* | nda | 3 | 2,5±0,5b | 4 | nd | 4 |
| ndc | 4 | 3,6±10,8c | 4 | |||
| Пример 11 | 0,17±0,01a | 8 | ndb | 4 | nd | 4 |
| Пример 13 | 0,17±0,03a | 8 | - | - | nd | 4 |
| 0,05±0,02c | 4 | ndc | 4 | |||
| Пример 14 | 0,21±0,05a | 4 | ndb | 1 | nd | 4 |
| Пример 20 | 0,3a | 1 | ndb | 4 | nd | 4 |
| Пример 22 | 0,32±0,40a | 4 | - | - | nd | 1 |
| Пример 26 | 50,6a | 1 | ndb | 1 | - | - |
| Пример 30 | 0,06c | 1 | - | - | - | - |
| Пример 35 | 2,2±0,7c | 4 | ndc | 4 | - | - |
| Пример 36 | 0,61±0,21c | 4 | ndc | 4 | - | - |
| Пример 37 | 52,0±9,6c | 4 | ndc | 4 | - | - |
| Пример 40 | 0,67±0,10a | 8 | - | - | nd | 3 |
| Пример 41 | 4,3c | 1 | - | - | - | - |
| Пример 43 | 0,57±0,16a | 4 | 5,5±1,1b | 4 | nd | 4 |
| Пример 45 | 0,13±0,07c | 4 | 3,4±0,4c | 4 | nd | 4 |
| Пример 46 | 0,79±0,26a | 4 | 13,8±2,5b | 4 | nd | 4 |
| Пример 48 | 0,82±0,12a | 4 | 2657±257b | 4 | nd | 1 |
| Пример 51 | 0,34±0,13c | 4 | 597,2±67,4c | 4 | - | - |
| Пример 61 | 1,06±0,21a | 4 | ndb | 4 | nd | 1 |
| Пример 62 | 81,8c | 1 | ndc | 1 | - | - |
|
A*: 3-циклогептилметилбензотиофен-6-ил-1,1-диоксид-эфир сульфаминовой кислоты,(описанный в WO2004/101545)
nd: не обнаружено Материалы и методы: а одна активность ароматазы; b одна активность сульфатазы; c двойная активность ароматазы и сульфатазы, d эстрогенный потенциал. |
Среди тестируемых соединений, пример 43, пример 45 и пример 46 демонстрировали сильное ингибирование (IC50 приблизительно 10 нМ) активности фолликулинсульфатазы человека. Кроме того, те же самые соединения демонстрировали сильное ингибирование активности ароматазы (IC50 < 1 нМ). Несмотря на эту двойную активность, они не обладали эстрогенным потенциалом in vitro.
| Таблица 2 Ингибирование карбоангидразы II человека |
||
| Активность карбоангидразы II человека | ||
| Соединения | IC50 (нМ) ± S.E.M. | n |
| ацетазоламид | 11,3 ± 1,9 | 4 |
| 6,6,7 COUMATE | 16,1 ± 1,5 | 4 |
| Пример 45 | 16,2 ± 3,3 | 4 |
| Пример 51 | 6,5 ± 0,9 | 4 |
Пример 45 и Пример 51 ингибировали карбоангидразу II человека in vitro.
АНТИ-УТЕРОТРОФНАЯ/АНТИ-СТЕРОИДСУЛЬФАТАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ IN VIVO
Самкам крыс Wistar удаляли яичники и оставляли в течение 4 недель. До начала лечения отсутствие циклов проверяли мазками из влагалища. Животным вводили сульфат фолликулина (E1S) в количестве 50 мкг/кг/день п/к, индивидуально или в комбинации с пероральным введением потенциальных ингибиторов сульфатазы в количестве 1 мг/кг/день в течение 4 дней. Матки удаляли, очищали от смежной ткани и взвешивали во влажном состоянии (таблица 3).
Активность фолликулинсульфатазы измеряли согласно способу, описанному Purohit et al., с незначительными изменениями. Вкратце, матки размораживали, взвешивали и гомогенизировали. Аликвоты супернатанта обрабатывали покрытым декстраном углем и анализировали в отношении сульфатазы. Активность E1S оценивали после 30 минут инкубации с 5 нМ 3H-E1S и 20 мкM немеченого E1S в качестве субстрата. Активность фолликулинсульфатазы выражали как пмоль/ч/мг белка и представляли в виде процента ингибирования vs E1S; в отношении массы матки результаты выражали в % ингибирования E1S индуцированной стимуляции.
| Таблица 3 Ингибирование массы матки |
||
| Соединение | Ингибирование % (масса матки) |
n |
| 6,6,7 COUMATE | 81 | 8 |
| Пример 45 | 70 | 8 |
Поскольку существует прямая линейная корреляция между ингибированием сульфатазы и ингибированием массы матки (WO 2004/101545), может быть сделан вывод, что эта активность в отношении матки следует из значительного ингибирования E1S (>90%). Пример 45 был выбран как потенциальный ингибитор активности фолликулинсульфатазы в силу отсутствия у него эстрогенных свойств и значительного ингибирования стероидсульфатазы. Эти результаты in vivo согласуются с результатами in vitro, полученными в клетках JEG-3.
ИНГИБИРОВАНИЕ ПИКА ЭСТРАДИОЛА, КАК IN VIVO МОДЕЛЬ ИНГИБИРОВАНИЯ АРОМАТАЗЫ
Цель этого эксперимента состояла в том, чтобы определить дозозависимую активность тестируемых соединений по сравнению с анастрозолом в отношении уровней 17β-эстрадиола спустя 24 часа после одного перорального введения самкам крыс. Анастрозол является мощным, нестероидным ингибитором ароматазы, который значительно ингибирует уровни эстрадиола при 3 мкг/кг, спустя 24 часа после одного единственного перорального введения самкам крыс. Сто самок крыс IOPS Wistar весом 180-200 г размещали по четыре в клетках из нержавеющей стали. Животным обеспечивали свободный доступ к стандартной диете в виде гранул Harlan Teklad 2016. Мазки из влагалища отбирали у каждого животного каждое утро, чтобы установить различные фазы цикла. Крысы, которые не имели регулярного эстрального цикла, были исключены из эксперимента. Начиная с 4.00 пополудни, животным перорально вводили составы. Спустя 24 часа брали пробы сыворотки и уровень эстрадиола определяли, как описано выше (таблица 4).
| Таблица 4 Ингибирование пика эстрадиола |
|
| Соединение | Ингибирование % (пик эстрадиола) |
| Анастрозол | 56 |
| Пример 45 | 28 |
Пример 45 ингибировал пик эстрадиола in vivo.
ИНГИБИРОВАНИЕ РОСТА ОПУХОЛИ
MCF-7 ксенотрансплантаты в голых мышах
Клетки MCF-7, полученные из аденокарциномы молочной железы человека, вводили подкожно атимическим голым мышам с удаленными яичниками, которым ежедневно подкожно вводили сульфат фолликулина. Объемы ксенотрансплантата определяли еженедельно. Когда объемы опухоли значительно увеличиваются, тестируемое соединение вводят перорально в количестве 1 мг/кг/день в течение 8 недель. Ксенотрансплантаты измеряют, удаляют, взвешивают и глубоко замораживают для определения активности сульфатазы, согласно способам, используемым для крысиных маток.
ER+ ткань опухоли молочной железы человека, пересаженная в виде ксенотрансплантата голым крысам
Клетки MCF-7 (ATCC), полученные из аденокарциномы молочной железы человека, вводили подкожно атимическим голым мышам с удаленными яичниками, которым ежедневно вводили подкожно эстрадиол. Объемы ксенотрансплантата определяли еженедельно. Через 8 недель объемы опухоли достигали 1000 мм, обеспечивая 500 мг пробы эстрогенчувствительной ткани от каждого животного. В это время каждую опухоль нарезали слоями и повторно трансплантировали наивным голым крысам с удаленными яичниками (Rnu/Rnu). Затем животных лечили сульфатом фолликулина в качестве предшественника эстрадиола в стероидсульфатазном пути. Когда объемы опухоли достигали значительного увеличения, отличного от плацебо, животных рандомизировали и разделяли на две группы. Животных первой группы лечили с использованием соединения примера 45 и с дополнительным ежедневным введением сульфата фолликулина. Животным второй группы вводили носитель с дополнительным введением той же самой дозы сульфата фолликулина. Пример 45 перорально вводили в количестве 5 мг/кг/день в течение 5 недель. Ксенотрансплантаты измеряли еженедельно электронным штангенциркулем и сравнивали с группой, получавшей сульфат фолликулина (таблица 5).
| Таблица 5 Ингибирование опухоли молочной железы человека |
|||||
| Параметры | Изменения объема (выраженные в виде % от E1S-положительной контрольной группы) |
||||
| Лечение | Время | День 7 | День 28 | день 35 | День 42 |
| E1S + Пр. 45 | 0 | -26 | -44 | -39 |
Когда животных лечили соединением примера 45, объемы опухоли не увеличивались. С другой стороны, одновременно, в группах, получавших только сульфат фолликулина (E1S), объемы опухоли были выше. В конце эксперимента, после пяти недель ежедневного лечения, пример 45 приводил к 40%-ному уменьшению в объеме опухоли, демонстрируя явную и стабильную антиканцерогенную активность.
Ксенотрансплантат JEG-3 в голых мышах
Линия клеток JEG-3 суперэкспрессирует как ароматазу человека, так и фолликулинсульфатазу. Ее вводят подкожно атимическим голым мышам с удаленными яичниками, которым ежедневно дополнительно подкожно вводят сульфат фолликулина с тестируемыми соединениями или без них (в количестве 5 мг/кг/день). В том особом случае, и согласно их полужидкому статусу (хориокарциномное происхождение), измерения опухоли являются нерелевантными. Однако косвенный эффект эстрадиола, который главным образом синтезируется тканью опухоли, получают на основе массы маток. С другой стороны, из-за суперэкспрессии ароматазы и сульфатазы в таких опухолях ферментные уровни могут быть измерены. Ферментативные активности определяют согласно вышеописанным способам.
Ксенотрансплантат JEG-3 у голой крысы с дополнительным введением сульфата фолликулина и Δ4-андростендиона
За 15 дней до инъекции клеток JEG-3 крысам, брали пробы крови, чтобы измерить базальные уровни эстрадиола в плазме. Затем клетки JEG-3 вводят подкожно атимическим голым крысам с удаленными яичниками (Rnu/Rnu). Животным дополнительно ежедневно вводили подкожно сульфат фолликулина и Δ4-андростендион с тестируемым соединением или без него (в количестве 1 мг/кг/день). После 21-дневного периода, забор крови выполняли спустя один день после введения злокачественного ксенотрансплантата и в конце эксперимента. В этом эксперименте сульфат фолликулина и Δ4-андростендион являются предшественниками эстрадиола. Эффект эстрадиола отражен в массе матки после умерщвления. Плазменные гормональные уровни анализируют в конце экспериментов согласно стандартному методу поставщика (DSL, Webster, TX, США).
1. Производное имидазола формулы (I)
и его соли с кислотой, где
R1 и R2 обозначают водород;
Q обозначает(СН2)m-Х-(СН2)n-А;
А обозначает прямую связь, О, SO2, NR5;
Х обозначает прямую связь, О, SO2, C(O) или NR5;
Z обозначает группу, выбранную из:
m и n обозначают, каждый независимо, 0, 1, 2, 3 или 4;
p обозначает 1, 2, 3 или 4;
q обозначает 0, 1 или 2;
пунктирная линия означает, что R8 и/или R9 могут находиться в любом положении бензотиофенового кольца;
R3 и R8 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (C1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10;
когда Q-Z обозначает
n обозначает 0, 1 или 2 и p обозначает 1, один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10,
CONR10R11, а другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, CO2R10;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (C1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, OSO2NR12SO2NR10R11, CO2R10, CHO;
когда p обозначает 2, 3 или 4, R9 могут быть одинаковыми или различными;
R6 и R7 обозначают водород;
каждый R5, R10, R11 и R12 обозначает водород;
когда Z обозначает
и p обозначает 1,
тогда R8 и R9 могут также образовывать вместе с фенильным кольцом диоксид бензоксатиазина.
2. Производное по п.1 и его соли с кислотой, в котором:
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или
NR12SO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил,
(С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (C1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11.
3. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором:
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, циано, (С1-С6)алкокси или OSO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, галоген, нитро, циано, (C1-С6)алкокси,
NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11, OSO2NR10SO2NR11R12.
4. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором:
один из R3 и R8 обозначает цианогруппу; и
другой обозначает водород или гидрокси, галоген, нитро, (С1-С6)алкокси, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11.
5. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором:
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород, гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11,
NR12SO2NR10R11, CO2R10 или СНО.
6. Производное по п.5 и его соли с кислотой, в котором:
один из R4 и R9 обозначает водород или гидрокси, циано или OSO2NR10R11; и
другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (C1-С6)алкил,
(С1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, СНО, NR12SO2NR10R11.
7. Производное по п.6 и его соли с кислотой, в котором:
R4 обозначает водород, гидрокси, циано или OSO2NR10R11;
R9 обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO.
8. Производное по п.7 и его соли с кислотой, в котором:
R4 обозначает водород; и
R9 обозначает гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (C1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO или NR12SO2NR10R11.
9. Производное по п.1 или 2, и его соли с кислотой, в котором Z обозначает:
где R8 обозначает водород, гидрокси, галоген, нитро, циано, (С1-С6)алкокси, NR10R11, SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11 или OSO2NR10SO2NR11R12;
R9 обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10, CHO, NR12SO2NR10R11;
p и q имеют значения, определенные в п.1.
10. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором Q выбрано из прямой связи, С(O), SO2, CONH, C(O)(CH2)n, (СН2)n(O) или (СН2)n, где n обозначает 0, 1 или 2.
11. Производное по п.1 и его соли с кислотой, в котором:
Z обозначает
Q обозначает (CH2)n, где n обозначает 0, 1 или 2;
один из R3 и R8 обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или
NR12SO2NR10R11, а другой обозначает водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (C1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород, гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, карбоксамидо, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
каждый R10 и R11 обозначает водород;
p обозначает 1, 2, 3 или 4;
R8 и R9 вместе с фенильным кольцом, к которому они присоединены, могут также образовывать диоксид бензоксатиазина.
12. Производное по п.11 и его соли с кислотой, в котором:
Z обозначает
Q обозначает(СН2)n, где n обозначает 0, 1 или 2;
R8 обозначает гидрокси, галоген, нитро, циано или (С1-С6)алкокси, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R9 обозначает водород, гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11;
p имеет значение, определенное в п.1.
13. Производное по п.12 и его соли с кислотой, в котором:
n обозначает 0 или 1;
R4 и R9 обозначают, каждый независимо, водород, галоген, (С1-С6)алкокси, ацил,
NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
14. Производное по любому из пп.11-13 и его соли с кислотой, в котором:
n обозначает 0 или 1;
R1, R2 и R4 обозначают, каждый, водород;
R9 обозначает водород, галоген, (С1-С6)алкил или OSO2NR10R11.
15. Производное по п.11 и его соли с кислотой, в котором:
n и p обозначают 1;
R8 обозначает гидрокси, галоген, нитро, циано, (С1-С6)алкокси, NR10R11,
SO2NR10R11, OSO2NR10R11, NR12SO2NR10R11 или OSO2NR10SO2NR11R12;
R9 обозначает гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (C1-С6)алкокси, трифторметил, NR10R11, OSO2NR10R11, CO2R10 или СНО;
R3 обозначает циано, гидрокси, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
R4 обозначает водород, гидрокси, галоген, циано или OSO2NR10R11.
16. Производное по п.11 и его соли с кислотой, в котором один из R3 и R8 обозначает гидрокси, циано или OSO2NR10R11, а другой обозначает гидрокси, нитро, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
17. Производное по п.16 и его соли с кислотой, в котором один из R3 и R8 обозначает циано или OSO2NR10R11, а другой обозначает гидрокси или OSO2NR10R11.
18. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором:
Z обозначает
где Q обозначает (CH2)m-X-(CH2)n-A-;
А обозначает прямую связь или O, SO2, NR5;
Х обозначает прямую связь, О, SO2, С(O) или NR5;
m и n обозначают, каждый независимо, 0, 1, 2, 3 или 4;
R3, R4, R8 и R9 обозначают, каждый независимо, водород или гидрокси, циано, галоген, нитро, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, трифторметил, (С1-С6)алкилтио, (С1-С6)алкилсульфонил, ацил, (С1-С6)алкоксикарбонил, NR10R11, SO2NR10R11,
OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11;
q обозначает 0, 1 или 2;
каждый R5, R6, R7, R10, R11 и R12 обозначает водород;
пунктирная линия означает, что R8 и/или R9 могут находиться в любом положении бензотиофенового кольца.
19. Производное по п.18 и его соли с кислотой, в котором R8 обозначает
OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
20. Производное по п.19, в котором R9 обозначает водород, галоген, нитро, COOR10 или циано.
21. Производное по п.18, в котором R4 обозначает водород, галоген, циано, (С1-С6)алкокси, NR10R11, OSO2NR10R11 или NR12SO2NR10R11.
22. Производное по п.18, в котором Q обозначает (CH2)m-X-(CH2)n-A, где m обозначает 0, 1 или 2 и Х обозначает прямую связь, SO2 или СО, n обозначает 0 и А обозначает прямую связь.
23. Производное по п.18, в котором R3 обозначает водород, галоген или циано.
24. Производное по п.1 или 2 и его соли с кислотой, в котором:
Z обозначает группу:
в которой R8, R9 и p имеют значения, определенные в п.1.
25. Производное по п.24 и его соли с кислотой, в котором:
R3 обозначает циано или OSO2NR10R11;
R4 обозначает водород, гидроксил, галоген, циано, OSO2NR10R11;
R8 обозначает гидрокси, циано, OSO2NR10R11, NR10R11, NR12SO2NR10R11;
R9 обозначает водород, галоген, нитро, циано или CO2R10; и
Q имеет значение, определенное в п.10.
26. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении ароматазы, и/или стероидсульфатазы, и/или карбоангидразы, содержащая производное по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемую соль с кислотой и фармацевтически приемлемый носитель.
27. Фармацевтическая композиция по п.26, содержащая от 0,1 до 400 мг указанного производного.
28. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения гормонозависимых или гормононезависимых опухолей.
29. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для контроля или управления репродуктивными функциями.
30. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения доброкачественных или злокачественных заболеваний молочной железы, матки или яичника.
31. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения андрогенозависимых заболеваний или доброкачественных или злокачественных заболеваний простаты или яичка.
32. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения нарушений когнитивной функции.
33. Применение по п.32 для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения старческой деменции.
34. Применение по п.32 для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения болезни Альцгеймера.
35. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения иммунологических нарушений.
36. Применение производного по любому из пп.1-25 или его фармацевтически приемлемой соли с кислотой для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения патологий, в которых требуется ингибирование ароматазы, и/или стероидсульфатазы, и/или карбоангидразы.
