Применение соединений оксикама

Предложено применение лорноксикама или простых еноловых эфиров 6-хлор-4-гидрокси-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено[3,2-е]-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксида (в частности, 6-хлор-4-(1-(этоксикарбамоилокси)этокси)-2-метил-N-(2-пиридил)-2Н-тиено-(2,3-е)-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксида) для получения фармацевтической композиции для лечения или предотвращения болезни Альцгеймера (БА) или артериосклероза. Показано, что лорноксикам снижает уровень Аβ-42 по отношению к Аβ-40 (параметру эффективности лечения болезни Альцгеймера), имеет низкие побочные эффекты в сочетании с высокой эффективностью лечения по отношению к иным средствам. 2 з.п. ф-лы, 7 ил.

 

Изобретение касается получения фармацевтических композиций для лечения болезни Альцгеймера и артериосклероза.

Этиология болезни Альцгеймера (БА) до сих пор не выяснена. Согласно «амилоидной гипотезе» это происходит при изменении расщепления белка-предшественника амилоидов (БПА) (APP). Так называемый β-42-пептид осаждается, вследствие чего образуются церебральные бляшки. Как следствие, результирующей гипоперфузии происходит также нейрональная дегенерация.

Методы лечения, применяемые в настоящее время, включают все применения холинэргических агентов, в особенности ингибиторов ацетилхолинэстеразы, так как БА взаимосвязана с существенной потерей холинэргических нейронов, и ингибиторы ацетилхолинэстеразы повышают уровень ацетилхолина, так что остающиеся нейроны остаются активированными («искрящими»). К сожалению, при таком лечении прогрессирующая потеря нейронов не может быть остановлена.

Другими целевыми молекулами, влияние которых в настоящее время обсуждается и испытывается в связи с лечением БА, являются вещества, модулирующие секретазу, в особенности ингибиторы β- и γ-секретазы, ингибиторы холестеринбиосинтетазы, ингибиторы агрегации амилоида, иммунологические способы, в особенности с А-β-пептидом или антителами против этого пептида, предотвращение экспрессии APP, повышение клиренса APP, модуляция фосфорилирования тау-протеина и снижение уровня сывороточного амилоида P (Wolfe, Nat. Rev. Drug Discov.1 (2002) 859-866).

В заявке США 2002/0052407 А1, патентах США 6187756 B1 и 6184248 B1 описаны смеси веществ, которые включают нестероидные антивоспалительные лекарственные средства (НСАВЛ) (NSAID), для ингибирования аномальной экспрессии белка-предшественника амилоидов (APP), который известным образом связан с болезнью Альцгеймера. На примерах с помощью опытов in vitro и in vivo смогли показать, что вещества согласно изобретению ингибируют сверхэкспрессию APP. Все три публикации предполагают применение нестероидных антивоспалительных лекарственных средств, которые ингибируют только циклооксигеназу-2, правда, не циклооксигеназу-1, для предупреждения или для возможного излечивания болезни Альцгеймера.

Далее в этих документах описаны исключительно ингибиторы циклооксигеназы-2. Оксикамы и особенно лорноксикам или аналогичные соединения не описаны.

В заявке WO 93/24115 A1 описан метод лечения слабоумия, в особенности болезни Альцгеймера путем применения нестероидных антивоспалительных лекарственных средств. При этом помимо ряда других веществ, тоже оксикамов, в особенности как пироксикам, изоксикам и судоксикам, тем не менее, лорноксикам или аналогичные вещества не предлагались.

В заявке WO 01/78721 A1 описан метод профилактики или лечения болезни Альцгеймера путем применения веществ, сокращающих содержание амилоид-β-полипептида (Aβ) Aβ₄₂. Так как высокая степень экспрессии Aβ₄₂ является ответственной за возникновение болезни Альцгеймера, посредством сокращения этого полипептида может быть оказано положительное влияние на течение болезни. Далее в этой публикации описан эксперимент, в котором показано влияние различных НСАВЛ на степень экспрессии двух Aβ-полипептидов, Aβ₄₀ и Aβ₄₂. Из этого можно сделать вывод, что оксикамы, в особенности мелоксикам, пероксикам, изоксикам и теноксикам (лорноксикам или аналогичные соединения при этом не упоминают) не оказывают влияния на экспрессию Aβ₄₂ или даже повышают его экспрессию. Поэтому из этой публикации специалисты могут заключить, что использование оксикамов для сокращения Aβ₄₂ оказалось невыгодным.

В заявке США 2002/0119193 А1 предложена фармацевтическая композиция, которая среди прочего содержит селективные ингибиторы циклооксигеназы-2 и используется для лечения различных заболеваний, в том числе также болезни Альцгеймера. Согласно этой публикации ингибиторы циклооксигеназы-2 согласно изобретению имеют преимущество по сравнению с традиционными нестероидными антивоспалительными лекарственными средствами. Таким образом, содержание этого документа также уводит от использования оксикамов, которые ингибируют как циклооксигеназу-1, так и циклооксигеназу-2.

Ни одна из ранее описанных концепций не дает возможности действительного прорыва для эффективного лечения и, прежде всего, профилактики БА. Поэтому все еще существует острая потребность в медикаментозных мерах лечения и профилактики БА.

Вследствие этого данное изобретение касается применения лорноксикама или аналогов лорноксикама для получения фармацевтической композиции для лечения или предотвращения болезни Альцгеймера (БА) или артериосклероза.

Только недавно было обнаружено, что периферийные тромбоциты являются первичным источником - отложившегося в церебральных бляшках - β-42-пептида. С этими сведениями БА может быть определена как сосудистое заболевание. Новая этиологическая интерпретация подтверждается результатами клинических исследований, которые показывают, что нестероидные антивоспалительные лекарственные средства (НСАВЛ) облегчают симптомы БА. С другой стороны, в основе этих исследований лежит гипотеза, что БА является воспалительным заболеванием мозга, причем вновь упоминают различные причины появления воспаления. Так, путем введения 100-150 мг индометацина ежедневно смогли сократить когнитивный распад приблизительно на 9% в течение 6 месяцев. Точно так же известно, что НСАВЛ оказывают влияние на экспрессию и функционирование APP-протеина тем, что они сокращают APP-экспрессию, индуцированную простагландином Е2, и одновременно способствуют изменениям при расщеплении APP.

В исследованиях ибупрофена и индометацина смогли показать, что доля амилоидного β-42-пептида понижается, а доля неамилоидогенного растворимого APP возрастает. Из факта, что тромбоциты являются первичным источником протеинов в амилоидных бляшках, равным образом явствует отношение к артериосклеротическим заболеваниям.

Сокращение APP-экспрессии в тромбоцитах, вызванное НСАВЛ, изменение разложения бляшек APP с уменьшением плазмы А-β и рост неамилоидогенного растворимого APP, сокращение амилоидных бляшек в церебральных сосудах и уменьшающаяся цереброваскулярная гипоперфузия также являются здесь основополагающими механизмами терапевтического действия.

Поэтому данное изобретение основывается на идее, что спорадическая БА базируется на повреждении сосудов, и первичным источником цереброваскулярных отложений β-42 являются периферийные тромбоциты.

Посредством применения согласно изобретению селективно препятствуют экспрессии APP в тромбоцитах и влияют на расщепление бляшек APP, причем А-β уровень плазмы падает, а уровень неамилоидогенного растворимого APP возрастает. Вследствие сокращенного образования бляшек в церебральных сосудах не происходит цереброваскулярной гипоперфузии, благодаря чему сокращается нейродегенерация.

Существенной предпосылкой для применения согласно изобретению является то, что вещество согласно изобретению, а именно лорноксикам или аналоги лорноксикама, подавляет оба основных изофермента эйкозаноидного обмена веществ, а именно, COX-1 и COX-2. Особый факт, что изофермент COX-2 связан с воспалительными процессами, по существующему до сих пор мнению свидетельствовал о целесообразности применения селективных в отношении COX-2 поступающих в головной мозг лекарственных средств. Однако, так как в соответствии с новыми вышеупомянутыми результатами периферийные тромбоциты, которые экспрессируют только COX-1, являются первичным источником протеиновых бляшек, эффективное средство лечения и профилактики согласно изобретению должно характеризоваться обеими ингибирующими активностями.

Так как COX-2 также в основном экспрессируется в головном мозге, нужно принимать во внимание при периферийном появлении тромбоцитов поступление биологически активного вещества в мозг не только как нежелательное, но, напротив, даже как недостаток, так как подавление основного экспрессированного фермента, как правило, вызывает подавление физиологических процессов и тем самым может приводить к побочным действиям лекарственного средства. Таким образом, свойство средства, применяемого согласно изобретению, не преодолевать гематоэнцефалический барьер, также является важным признаком согласно изобретению.

Эффективность лорноксикама или аналогов лорноксикама в рамках данного изобретения оказалась неожиданной, принимая во внимание, прежде всего, уровень техники, в особенности принимая во внимание результаты исследования заявки WO 01/78721 A1, так как описанные там оксикамы, в особенности мелоксикам, пероксикам, изоксикам и тероксикам или не могут влиять на экспрессию Aβ₄₂, или даже еще повышают ее.

Согласно данному изобретению и лорноксикам, и его аналоги оказались чрезвычайно предпочтительными для лечения и, прежде всего, для профилактики или замедления БА и артериосклероза. Под термином «аналоги лорноксикама» в рамках данного изобретения имеют в виду все вещества, которые - будучи производными от структуры лорноксикама - в периферийных тромбоцитах характеризуются принципиально тем же или сравнимым эффектом применительно к Aβ-42, что и лорноксикам, а именно:

- ингибируют циклооксигеназу-1 и циклооксигеназу-2 (COX-1 и COX-2),

- не могут преодолевать гематоэнцефалический барьер при физиологических условиях и

- сокращают индуцированную простагландином Е2 индукцию белка-предшественника амилоидов (APP).

Примером аналогов лорноксикама такого рода являются простые еноловые эфиры 6-хлор-4-гидрокси-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено(2,3-е)-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксида (описанные в заявке EP 0313935 A1 и, в особенности, в EP 0313935 B1), 4-гидрокси-2-метил-3-(2-пиридилкарбамоил)-6-трифторметил-2H-тиено[2,3-е]-1,2тиозин-1,1-диоксида (описанные в заявке EP 0103142 A1 и, в особенности, в EP 0103142 B1); тиенотиазин-производные согласно EP 0001113 A1 (B1) общей формулы I,

где А с обоими углеродными атомами тиазинового кольца образует группы

и штриховая линия показывает двойную связь, имеющуюся в первом и последнем случае, R¹ обозначает низший алкил, R² обозначает 2-тиазолил, 4-метил-2-тиазолил, 4,5-диметил-2-тиазолил, 5-метил-1,3,4-тиадиазолил, 2-пиразинил, 2-пиримидинил, 1,2,4-триазин-3-ил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 3-метил-2-пиридил, 4-метил-2-пиридил, 5-метил-2-пиридил, 6-метил-2-пиридил, 4,6-диметил-2-пиридил, 5-изоксазолил, 5-метил-3-изоксазолил, 3,4-диметил-5-изоксазолил, 2,6-диметил-4-пиримидинил, 1,2,3,4-тетразол-5-ил или фенильный остаток, в случае необходимости, замещенный галогеном, гидрокси-группой, низшим алкилом, трифторметилом или низшей алкокси-группой, и R³ обозначает галоген, а также их соли, причем выражение «низший алкил» обозначает неразветвленные или разветвленные насыщенные углеводородные группы с 1-4 атомами углерода, как, например, метил, этил, пропил, изобутил и т.-бутил; выражение «низшая алкокси-группа» обозначает углеводородную окси-группу с вплоть до 4 С-атомов, и термином «галоген» обозначают 4 галогена: хлор, бром, фтор, йод; при этом в особенности предпочтительно R³ обозначает хлор или бром, причем хлор особенно предпочтителен; R¹ предпочтительно обозначает метильную группу; R² представляет собой предпочтительно 2-тиазолил, 5-изоксазолил или 2-пиридил; A предпочтительно обозначает группу

далее предпочтительными являются производные [3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[3',2':4,5]-циклопента[1,2-c]пиридина общей формулы

или производные [3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[2',3':3,4]-циклопента[1,2-b]пиридина общей формулы

где:

Z обозначает простую связь или CH₂,

R¹ обозначает водород или неразветвленный или разветвленный, в случае необходимости, ненасыщенный низший алкильный остаток, который также может быть перфторированным,

R² и R³ независимо друг от друга обозначают водород, неразветвленный или разветвленный, в случае необходимости, ненасыщенный низший алкильный остаток, который также может быть перфторированным, низшую алкокси-группу, низшую алкилтио-группу или галоген,

а также их оптически чистые антиподы и фармацевтически приемлемые соли.

Соединения общих формул (II) и (III) могут быть получены тем, что соединение

где R2 и R3 имеют вышеупомянутое значение, восстановлением переводят в соединение общей формулы II или III с Z = простая связь и R1 = водород, их, в случае необходимости, подвергают превращению с энантиомерно чистым 1-фенилэтилизоцианатом до соединения общей формулы (Va) или (Vb),

из смеси диастереомеров, полученной таким образом, посредством кристаллизации получают плохо растворимый диастереомер, полученное таким образом диастереомерно чистое соединение общей формулы (Va) или (Vb) в пригодных условиях расщепляют до энантиомерно чистого соединения общей формулы (II) или (III) с Z = простая связь и R1 = водород, его, в случае необходимости в условиях, благоприятных для алкилирования, подвергают превращению до соединения общей формулы (II) или (III) с Z = CH₂, и, в случае необходимости, соединение общей формулы (II) или (III), а также их рацемическую смесь, переводят в их фармацевтически приемлемые соли, причем выражение «низший алкил» обозначает неразветвленный или разветвленный алкильный остаток с 1-4 атомами углерода, как, например, метил, этил, н- и изо-пропил, н-, изо- и т.-бутил; выражение «низшая алкокси-группа» обозначает неразветвленный или разветвленный алкоксильный остаток с 1-4 атомами углерода, например, метокси, этокси, н- и изо-пропокси, н-, изо- и т.-бутокси; выражение «низшая алкилтио-группа» обозначает неразветвленный или разветвленный алкилтио-остаток с 1-4 атомами углерода, например, метилтио, этилтио, н- и изо-пропилтио, н-, изо- и т.-бутилтио; и выражение «галоген» обозначает фтор, хлор, бром или йод.

Превращения согласно изобретению лучше всего проводят так, что соединение общей формулы (IVa) или (IVb) растворяют в полярном растворителе, как, например, этиловый эфир уксусной кислоты, диоксан, этанол или метанол, смешивают с 1-5 эквивалентами пригодного катализатора, как, например, W2-никель Ренея или кобальт Ренея, и др., и при температуре 40-70°С гидрируют вплоть до стехиометрического присоединения водорода. Полученное таким образом рацемическое соединение общей формулы (II) или (III) с Z = простая связь и R1 = водород для энантиомерного разделения может быть подвергнуто превращению в инертном растворителе, как, например, тетрагидрофуран, диоксан или ацетон, с 1 эквивалентом (+) или (-) 1-фенилэтилизоцианата до соединения общей формулы (Va) или (Vb), и из полученной таким образом смеси диастереомеров посредством кристаллизации получен плохо растворимый диастереомер. Полученное таким образом диастереомерно чистое соединение общей формулы (Va) или (Vb) для расщепления растворяют в высококипящем спирте, как, например, пропанол, бутанол, пентанол, гликоль и т.д. или их водных смесях, и нагревают с 5-20 эквивалентами основания, как пропанолят натрия, бутанолят натрия, пентанолят натрия или гидроксид натрия 1-24 часа до кипения. Полученное таким образом энантиомерно чистое соединение общей формулы (II) или (III) с Z = простая связь и R1 = водород, так же, как его рацемическая форма, в случае необходимости, для алкилирования растворяют в инертном растворителе, как, например, тетрагидрофуран, диоксан, ацетонитрил или диметилформамид и т.д., смешивают с 1-20 эквивалентами соединения формулы

R1-CHO(VI),

где R1 имеет вышеназванное значение, и 1,5-4 эквивалентами восстановителя, как, например, цианоборгидрид натрия или др., и подвергают превращению при -20°С до 100°С в течение 1-24 часов.

Полученные в результате этого превращения соединения общей формулы (II) или (III) являются основными соединениями и обычным образом могут быть переведены с неорганическими или органическими кислотами в их фармацевтически приемлемые соли. Образование соли может быть проведено тем, что соединения формулы (II) или (III) растворяют в пригодном растворителе, например воде, низшем алифатическом спирте, ТГФ, диоксане, бензоле, диэтиловом эфире, ДМФ или ДМСО, добавляют эквивалентное количество желаемой кислоты, обеспечивают хорошее перемешивание, и после оконченного солеобразования растворитель отгоняют под вакуумом. В случае необходимости после выделения соль может быть перекристаллизована.

Следующим предпочтительным примером аналогов лорноксикама согласно изобретению являются объекты патентов AT 400567 B и AT 400437 B, в особенности вещества, описанные в пунктах формулы изобретения 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 AT 400567 B, и вещества, описанные в пунктах формулы изобретения 2, 3 или 4 AT 400437 B. Следующими предпочтительными аналогами лорноксикама согласно данному изобретению являются вещества, описанные в заявке EP 0657459 A1, в особенности включенные в пункты формулы изобретения 2, 3 и 4.

Фармацевтически приемлемыми солями являются соли сильных неорганических кислот, как, например, соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота и т.д., а также соли органических кислот, как, например, фумаровая кислота, лимонная кислота, себациновая кислота и т.д.

Предпочтительным образом введение веществ не должно сопровождаться никакими тяжелыми нежелательными явлениями, а именно, быть свободным от побочного действия. Вследствие этого возможно профилактическое использование этих веществ для предотвращения БА или артериосклероза без возникновения у пациента проблем с нежелательными побочными реакциями. Профилактика показана прежде всего пациентам, у которых имеется особый риск БА или артериосклероза, обусловленный генетическими факторами (семейная аккумуляция таких заболеваний) или другими параметрами. Для определения отсутствия побочного действия согласно данному изобретению могут быть привлечены определения из специальных фармацевтических учебников и стандартов. Например, побочное действие при наблюдении за использованием должно быть ниже 1%, предпочтительно ниже 0,5%, еще более предпочтительно ниже 0,1%, в особенности ниже 0,05%. В случае необходимости вещества согласно изобретению могут комбинироваться с другими лекарственными средствами, в особенности такими, которые противодействуют возможному отрицательному эффекту, как, например, свойства, инициирующие слизистую оболочку желудка (например, антациды, антагонисты H2-рецепторов, ингибиторы нагнетания протонов и т.д.). Это следует учитывать, прежде всего, при длительном применении.

Особенно предпочтительными соединениями для применения в рамках данного изобретения кроме лорноксикама прежде всего являются следующие:

6-хлор-4-(1-(этоксикарбамоилокси)этокси)-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено-(2,3-е)-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксид;

6-хлор-4-гидрокси-2-метил-3-(2-пиридил-карбамоил)-2H-тиено[3,2-е]1,2-тиазин-1,1-диоксид;

(+)-[3аα,8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[2',3':3,4]-циклопента[1,2-b]-пиридин-дигидрохлорид;

(+)-[3aS-(3аα,8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[3',2':4,5]-циклопента[1,2-c]пиридин-дигидрохлорид;

(-)-[3aR-(3аα,8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[3',2':4,5]- циклопента[1,2-c]пиридин-дигидрохлорид;

(-)-[3аα,8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидропирроло[2',3':3,4]-циклопента[1,2-b]-пиридин-дигидрохлорид;

(-)[3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидро-1-метил-пирроло[2',3':3,4]-циклопента[1,2-b]пиридин-дигидрохлорид;

(+)-[3aS-(3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидро-1-метил-пирроло[3',2':4,5]-циклопента[1,2-c]пиридин-дигидрохлорид;

(+)[3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидро-1-метил-пирроло[2',3':3,4]-циклопента[1,2-b]пиридин-дигидрохлорид;

(-)-[3aR-(3аα, 8bα)]-1,2,3,3a,4,8b-гексагидро-1-метил-пирроло[3',2':4,5]-циклопента[1,2-c]пиридин-дигидрохлорид.

Особенное преимущество согласно изобретению применения лорноксикама, а также аналогов лорноксикама, выявляется из особенно предпочтительной комбинации фармакодинамических и фармакокинетических свойств этого биологически активного вещества.

Обусловленные изобретением фармакодинамические особенности лорноксикама или аналогов лорноксикама согласно данному изобретению заключаются в следующем.

Особенно важное свойство, которое обуславливает особенную пригодность лорноксикама согласно изобретению основывается на факте, что активное вещество подавляет оба главных изофермента эйкозаноидного метаболизма, а именно, COX-1 и COX-2. Отныне определяющий факт, что периферийные тромбоциты, экспрессирующие только COX-1, являются первичным источником бляшек протеина, обуславливает преимущество применения лорноксикама или его аналогов согласно изобретению, которое характеризуется существенным подавлением COX-1.

Далее лорноксикам является активным веществом с особенно высокой собственной активностью. Так как терапия для профилактики БА или артериосклероза должна проводиться длительное время, малое нагружение организма активным веществом является дополнительным преимуществом.

Далее лорноксикам не в состоянии преодолеть гематоэнцефалический барьер (Pruss et al., 3. Interscience World Conference on Inflammation, Monte Carlo (1989), Abstract 41).

Принимая во внимание долговременную профилактическую терапию БА с помощью лорноксикама, короткий период полураспада лорноксикама в плазме является особенным преимуществом, так как вследствие этого не происходит его накопления в крови. Также важное значение имеет известная хорошая желудочно-кишечная и прочая совместимость активного вещества. Так, при миллионе назначений происходит менее 10 заявленных тяжелых нежелательных случаев, или побочное действие при наблюдаемом применении составляет менее 0,05% (причем до сих пор абсолютно все случаи побочного действия могли быть излечены).

Названной комбинации фармакодинамических и фармакокинетических свойств активного вещества лорноксикама при условиях, особенно благоприятных для целей терапии БА и артериосклеротических заболеваний, достойной сравнения, нет ни у одного другого известного на сегодняшний день биологически активного вещества.

Изобретение поясняется последующими примерами и чертежами, которые, однако не ограничивают его.

На чертежах изображено следующее.

Фиг.1, 2 и 3 - путь арахидоновой кислоты и ее связь с COX-1 и COX-2.

Фиг.4 - ингибирующее в отношении COX действие некоторых веществ.

Фиг.5 - фармакокинетика лорноксикама у здоровых молодых пробандов после оральной разовой дозы.

Фиг.6 - ингибирование TXB2, произведенного COX-1, из цельной крови во время свертывания посредством лорноксикама.

Фиг.7 - ингибирование образования эйкозаноидов в HEL-клетках (COX-1) и LPS-стимулированных Mono Mac 6-клеток (COX-2) посредством лорноксикама.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Действие лорноксикама на процессинг (выработку белка в клетках) APP in vitro и in vivo.

1.1. Характеристика специфического влияния на разложение APP in vitro.

1.1.1.Влияние лорноксикама на процессинг APP в нейрональной линии клеток (SH-SY5Y).

- Высвобождение амилоидного β-42-пептида (снижено посредством НСАВЛ).

- Высвобождение неамилоидного sAPPα-протеина (повышено посредством НСАВЛ).

- Экспрессия холопротеина APP (снижено посредством НСАВЛ).

1.2. Характеристика тромбоцитов человека как периферийной модели для действия лорноксикама на нервные клетки.

В периферийных тромбоцитах пациентов с болезнью Альцгеймера было обнаружено, что неамилоидный sAPPα-протеин также вырабатывается в пониженной степени (Colciaghi et al., Mol. Med. 8 (2002), 67-74). Экспрессия неамилоидного sAPPα может быть повышена в нервных клетках посредством НСАВЛ (Avramovich et al., J. Biol. Chem. 277 (2002), 31466-73). Результаты обоих этих исследований позволили ожидать, что неамилоидный sAPPα-протеин хорошо пригоден для того, чтобы наблюдать специфическое действие лорноксикама на периферийной области.

1.2.1. Влияние лорноксикама на процессинг APP в тромбоцитах человека in vitro.

- Высвобождение неамилоидного sAPPα-протеина активированных тромбоцитов.

1.2.2. Влияние лорноксикама на экспрессию APP тромбоцитов человека пациентов с болезнью Альцгеймера in vivo.

- Экспрессия холопротеина APP.

(Этот параметр является показательным, если лорноксикам не оказывает никакого специфического влияния на процессинг APP, так как холопротеин APP повышенно выделяется путем экспрессии во фронтальной коре головного мозга (Golde et al., Neuron 4 (1990), 253-267), и НСАВЛ могут уменьшить его экспрессию. В проведенных исследованиях также была обнаружена повышенная экспрессия холопротеина APP в тромбоцитах пациентов с болезнью Альцгеймера).

- Соотношение APP тромбоцитов пациентов с болезнью Альцгеймера до и после лечения лорноксикамом.

- Высвобождение неамилоидного sAPPα-протеина активированных тромбоцитов.

Целью этих исследований был мониторинг in vivo периферийных тромбоцитов для постулированного действия лорноксикама в нервных клетках.

2.2. Протеомный профиль протеинов (протеомика) тромбоцитов человека после приема лорноксикама in vivo.

Сравнение протеомных наборов тромбоцитов пациентов с болезнью Альцгеймера и здоровых лиц, находящихся под медицинским наблюдением перед и после назначения лорноксикама.

Целью этих исследований был протеомный профиль протеинов in vivo при действии лорноксикама на тромбоциты человека.

2.3. Влияние лорноксикама на фармакопротеомику тромбоцитов человека in vitro: протеомный профиль протеинов (протеомика) тромбоцитов человека после инкубации in vitro с лорноксикамом.

Сравнение протеомных наборов тромбоцитов, обработанных лорноксикамом, и необработанных контрольных тромбоцитов.

Цель этого примера состоит в характеристике протеинов тромбоцитов, которые непосредственно затронуты ингибитором циклооксигеназы лорноксикамом.

1. Применение лорноксикама или простых еноловых эфиров 6-хлор-4-гидрокси-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено[2,3-е]-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксида для получения фармацевтической композиции для лечения или предотвращения болезни Альцгеймера (БА) или артериосклероза.

2. Применение по п.1, отличающееся тем, что введение вещества сопровождается тяжелыми нежелательными побочными действиями на уровне ниже 1%, предпочтительно ниже 0,5%, более предпочтительно ниже 0,1%, в особенности ниже 0,05% пациентов.

3. Применение по п.1 или 2, отличающееся тем, что простой еноловый эфир 6-хлор-4-гидрокси-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено[2,3-е]-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксида представляет собой 6-хлор-4-(1-(этоксикарбамоилокси)этокси)-2-метил-N-(2-пиридил)-2H-тиено-(2,3-е)-1,2-тиазин-3-карбоновой кислоты амид-1,1-диоксид.