Модуляторы рецепторов прогестерона

Настоящее изобретение относится к стероидам с (11β)-[4-(аза-арил)фенильным] заместителем, модулирующим рецепторы прогестерона, или его фармацевтически приемлемой соли и/или гидратированной форме, и/или его пролекарству. Соединения проявляют смешанный профиль активности агониста PR и антагониста PR, что делает их пригодными для контрацепции и лечения гинекологических расстройств. 6 н. и 24 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области контрацепции, гормонзамещающей терапии (HRT) и терапии гинекологических расстройств, а также к вспомогательной терапии при раке и других заболеваниях.

Рассматриваемое изобретение предусматривает новые стероиды, модулирующие рецепторы прогестерона, которые имеют как агонистические, так и антагонистические модулирующие активности по отношению к рецептору прогестерона, к способам их получения, и к их использованию при терапии.

Уровень техники

Внутриклеточные рецепторы представляют собой класс структурно родственных белков, вовлеченных в регуляцию транскрипции гена. Стероидные рецепторы представляют собой подмножество этих рецепторов, включающие в себя рецептор прогестеронов (PR), рецептор андрогенов (AR), рецептор эстрогенов (ER), рецептор глюкокортикоидов (GR) и рецептор минералокортикоидов (MR). Регуляция гена требует внутриклеточного рецептора и соответствующего лиганда, который обладает способностью к селективному связыванию с рецептором таким способом, который влияет на транскрипцию гена.

Модуляторы рецепторов прогестерона (прогестагены и антипрогестагены), как известно, играют важную роль в здоровье женщин. Природный лиганд PR представляет собой стероидный гормон прогестерон, но получены синтетические соединения, которые также могут служить в качестве лигандов (см., например, Jones et al. патент США №5688810).

В настоящее время прогестагены широко используются для гормональной контрацепции и при HRT. Другие важные клинические применения прогестагенов представляют собой лечение гинекологических расстройств (например, эндометриоза, дисменореи, дисфункционального маточного кровотечения, острого предменструального синдрома), рака груди, «приливов» и аффективных расстройств, и прогестероновую поддержку во время IVF (при экстракорпоральном оплодотворении). В дополнение к этому они применяются в сочетании с другими гормонами и/или другими видами терапии, включая, но, не ограничиваясь этим, химиотерапевтические агенты, такие как цитотоксические и цитостатические агенты, иммунологические модификаторы, такие как интерфероны и интерлейкины, гормоны роста или другие цитокины, гормональную терапию, при хирургии и радиационной терапии.

Современные стероидные прогестагены, как показано, являются совершенно безопасными и хорошо переносятся. Иногда, однако, сообщается о побочных воздействиях (например, о повышенной чувствительности груди, головных болях, депрессии и увеличении веса), связанных с этими стероидными прогестагенами, которые используют индивидуально, либо в сочетании с эстрогенными соединениями. В дополнение к этому стероидные лиганды для одного рецептора часто демонстрируют перекрестную реакционную способность с другими стероидными рецепторами. Множество прогестагенов также связываются, например, с рецептором андрогенов, в то время как многие антипрогестагены имеют сродство к рецептору глюкокортикоидов.

Антипрогестагены в сочетании с прогестагенами являются также пригодными для использования в режимах контрацепции и замещения гормонов, как описано, например, в международных заявках WO 99/25360 и WO 97/49407. По этой причине было бы полезным обнаружение соединений, которые имеют как прогестагенные, так и антипрогестагенные свойства в одной молекуле.

Международная заявка WO 99/45022 описывает 20-кето-11β-арилстероиды, которые имеют либо антагонистическую, либо агонистическую активность по отношению к рецепторам прогестерона. Среди множества соединений, описанных в международной заявке WO 99/45022, три или четыре соединения имеют активность как антагониста, так и агониста прогестерона. Ни одно из этих соединений не имеет заместителя в положении 16; в положении 17α они имеют ацетилокси, ацетилоксиметильный или метоксиметильный заместитель.

Соединения, описанные в EP 349481, содержат 4-[(3-пиридил)фенильный] заместитель в положении 11(и не имеют заместителя в положении 16; ни одно из этих соединений не обладает циклопропилкарбонильным или циклопропенилкарбонильным заместителем в положении 17, или спироциклоалканоновым или спироциклоалкеноновым заместителем в положении 17. Соединения EP 349481 имеют только антипрогестагенные свойства.

В настоящем изобретении неожиданно обнаружено, что новые стероидные соединения с (11β)-[4-(аза-арил)фенильным] заместителем, в сочетании с разнообразными заместителями в положениях 16 и 17, демонстрируют смешанный профиль активности агониста PR и антагониста PR (далее упоминаемый как смешанный P/AP профиль) в одном соединении. Эти соединения являются особенно пригодными для контрацепции, HRT и при лечении гинекологических расстройств.

Cook et al., (Life Sciences 52 (1993), 155-162) описывают возможность того, что стероид, который имеет антипрогестагенный профиль, с ацетилокси-заместителем в положении 17α, может быть превращен в соединение со смешанным профилем, если убрать этот заместитель, в то время как введение заместителя в положение 16α превращает соединение в полный агонист. Неожиданно оказалось, что это не относится к новым соединениям, описанным в рассматриваемом изобретении, которые имеют однородные смешанные профили при различных сочетаниях (включая водород) заместителей в положениях 16α и 17α.

Подробное описание изобретения

Объектом настоящего изобретения является соединение структурной формулы I

где

X представляет собой O, NOH, NO(1-4C)алкил, NO(1-4C)ацил;

A1-A5 представляют собой C, замещенный R1, или N, при условии, что, по меньшей мере, один, но не более чем три из A1-A5 представляют собой N; или

один или два из A1, A2 и A5 представляют собой N, а остальные представляют собой C, замещенный R1, и A3 и A4 вместе представляют собой конденсированное бензольное кольцо или конденсированное пяти- или шестичленное азотсодержащее ароматическое кольцо, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом;

каждый R1 независимо выбирается из H, галогена, (1-4C)алкила и (1-4C)алкокси; R2 представляет собой H, (1-4C)алкил или (1-6C)алкенил, оба необязательно являются замещенными (6-10C)арильной группой, которая является необязательно замещенной одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом; и R3 представляет собой H или (1-4C)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогенов; и

R4 представляет собой циклопропил или циклопропенил, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом; или

R2 вместе с R3 образуют 3-, 4-, 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо; и

R4 представляет собой циклопропил или циклопропенил, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом; или

R2 представляет собой H или (1-4C)алкил; и

R3 вместе с R4 образуют 5-, 6- или 7-членное насыщенное или ненасыщенное карбоциклическое кольцо;

R5 представляет собой H или(1-4C)алкил;

или его фармацевтически приемлемую соль и/или гидратированную форму, и/или его пролекарство.

В одном из вариантов осуществления A1-A5 представляют собой C, замещенный R1, или N, при условии, что, по меньшей мере, один, но не более чем три из A1-A5 представляют собой N.

В другом варианте осуществления один или два из A1, A2 и A5 представляют собой N, а остальные представляют собой C, замещенный R1, и A3 и A4 вместе представляют собой конденсированное бензольное кольцо или конденсированное азотсодержащее кольцо, оба необязательно являются замещенными атомом галогена и/или (1-4C)алкилом.

В одном из вариантов осуществления R2 представляет собой H, (1-4C)алкил или (1-6C)алкенил, оба необязательно являются замещенными (6-10C)арильной группой, которая является необязательно замещенной одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом; и R3 представляет собой H или (1-4C)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогенов; и R4 представляет собой циклопропил или циклопропенил, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом.

В другом варианте осуществления R2 вместе с R3 образуют 3-, 4-, 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо; и R4 представляет собой циклопропил или циклопропенил, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4C)алкилом.

Еще в одном варианте осуществления R2 представляет собой H или (1-4C)алкил; и R3 вместе с R4 образуют 5-, 6-или 7-членное насыщенное или ненасыщенное карбоциклическое кольцо.

В конкретном варианте осуществления X представляет собой O.

В другом конкретном варианте осуществления R4 представляет собой циклопропил.

Еще в одном конкретном варианте осуществления A1, A3, A4 и A5 представляют собой C, замещенный R1, и A2 представляет собой N.

В одном из вариантов осуществления R2 представляет собой H, (1-4C)алкил или (1-4C)алкенил.

В конкретном варианте осуществления X представляет собой O, A1, A3, A4 и A5 представляют собой C, замещенный R1, и A2 представляет собой N; R2 представляет собой H, (1-4C)алкил или (1-4C)алкенил; и R3 представляет собой H или (1-4C)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогенов; и R4 представляет собой циклопропил; или

R2 вместе с R3 образуют 3-, 4-, 5- или 6-членное карбоциклическое кольцо; и

R4 представляет собой циклопропил.

В отдельном варианте осуществления X представляет собой O, A1, A3, A4 и A5 представляют собой C; A2 представляет собой N; R1 представляет собой H; R2 представляет собой метил; R3 представляет собой H; R4 представляет собой циклопропил; и R5 представляет собой H.

В другом отдельном варианте осуществления X представляет собой O, A1, A3, A4 и A5 представляют собой C; A2 представляет собой N; R1 представляет собой H; R2 представляет собой этенил; R3 представляет собой H; R4 представляет собой циклопропил; и R5 представляет собой H.

Соединения рассматриваемого изобретения предназначены для использования в терапии.

Еще одним объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. В одном из вариантов осуществления фармацевтическая композиция предназначена для контрацепции. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция предназначена для гормон-замещающей терапии. Еще в одном варианте осуществления фармацевтическая композиция предназначена для лечения гинекологического расстройства.

Рассматриваемое изобретение, кроме того, относится к применению соединения согласно изобретению для получения лекарственного средства. В одном из вариантов осуществления применение соединения согласно изобретению предусматривает получение контрацептива. В другом варианте осуществления применение соединения согласно изобретению предусматривает получение лекарственного средства для гормон-замещающей терапии или для лечения гинекологического расстройства.

Объектом настоящего изобретения, кроме того, является способ контрацепции, включающий в себя введение фармацевтически эффективного количества соединения по рассматриваемому изобретению субъекту, нуждающемуся в этом.

Объектом настоящего изобретения, кроме того, является способ лечения гинекологического расстройства, включающий в себя введение фармацевтически эффективного количества соединения согласно изобретению субъекту, нуждающемуся в этом.

Соединения формулы I, где X представляет собой NOH, NO(алкил) или NO(ацил), получают из соединения формулы I, где X представляет собой O, посредством обработки H₂NOH, H₂NO(алкилом) или H₂NO(ацилом), или солями этих аминов.

Как изображено на схеме 1, соединения формулы I, где X представляет собой O (формула I на схеме 1), получают из соединений формулы II. На этой схеме Pg представляет собой соответствующую защитную группу карбонильной функциональной группы в положении 3 стероидов. Несколько защитных групп, известных в данной области, описываются в "Protective Groups In Organic Synthesis" by Greene T.W. and Wuts P.G.M. (John Wiley & Sons, New York). Соответствующие типы защитных групп представляют собой кетали, в частности, циклические кетали, такие как 1,3-диоксоланы, являются пригодными для использования. Карбонильная группа в положении 17 стероида используется как таковая, в этой последовательности реакций, или маскируется в форме синтетического эквивалента, такого как гидроксиметильная группа (которая позже при синтезе окисляется обратно до карбонила). Другая возможность представляет собой защиту карбонила посредством защитной группы, такой как кеталь.

Соединения формулы II окисляются до эпоксида формулы III с использованием различных способов, известных в данной области, таких как обработка с помощью перекиси водорода в присутствии трифторацетофенона. Обработка такого эпоксида с помощью бромида (4-бромфенил)магния в присутствии соответствующей соли Cu(I), такой как хлорид меди(I), дает соединения формулы IV. Соединения формулы IV преобразуются в соединения формулы V с использованием реакций перекрестного связывания, опосредуемых палладием, таких как реакции Сузуки, Штиле или Негиши. Удаление защитной группы соединений формулы V с использованием способов, известных в данной области, таких как, в случае кеталей, водный раствор кислоты, дает соединения формулы I. Такие способы снятия защиты могут применяться к соединениям формулы IV, с получением соединений формулы VI. Последние соединения могут преобразовываться в соединения формулы I с использованием реакций перекрестного связывания, опосредуемых палладием.

Соединения формулы II, в которых R4 представляет собой циклопропил или циклопропенил, получают из соединений формулы VII, как изображено на схеме 2. Соединения формулы VII описаны в литературе (например, van den Heuvel, M.J. and Groen, M.B. Rec. Trav. Chim. Pays-Bas, 112, 107 (1993), EP289073, EP277676, DE3617883, EP549041, EP 582338). Соединения формулы VII преобразуются в енолтрифлаты с использованием основания и трифлатирующего реагента. Пример пригодного для использования сочетания реагентов представляет собой литий гексаметилдисилазан, в качестве основания, с последующим добавлением N-фенил-бис(трифторметансульфонимида), в качестве трифлатирующего агента. Полученные енолтрифлаты преобразуются в соединения формулы VIII, с использованием опосредуемого палладием карбонилирования в присутствии N,O-диметилгидроксиламина. Обработка соединений формулы VIII циклопропилом - реагентом Гриньяра, циклопропиллитиатом, циклопропенилом - реагентом Гриньяра, или циклопропениллитиатом, дает соединения формулы IX. Обработка последних соединений с помощью соединения R2-литиата или R2-реагента Гриньяра в присутствии соответствующей соли Cu(I), с последующим гашением водой, дает соединения формулы II, где R3 представляет собой H; альтернативно, гашение алкилирующим реагентом, таким как метилйодид, или что-либо подобное, дает соединения формулы II, где R3 представляет собой алкил.

Соединения формулы II, где R3 вместе с R4 образуют 5-членное карбоциклическое кольцо, могут быть получены с использованием способа, описанного в патенте США №5084450. Как правило, соединения формулы II, где R3 вместе с R4 образуют 5-, 6-или 7-членное карбоциклическое кольцо, могут быть получены из соединений формулы VII, с использованием способа, описанного Mash, E.A. et al. в J. Org. Chem. 55, 2045 (1990). В этой публикации способ применяется для преобразования кетона в 6-членное спиросоединение. Этот способ может быть распространен на 5- или 7-членные спиросоединения посредством использования простого 4-йодбутил трет-бутилдиметилсилилового эфира или простого 6-йодгексил трет-бутилдиметилсилилового эфира вместо простого 5-йодпентил трет-бутилдиметилсилилового эфира, применяемого в публикации для получения 6-членного спиросоединения.

Схема 1

Схема 2

Соединение в соответствии с настоящим изобретением представляет собой соединение, как определено выше, в формуле I, его соль, его гидрат и/или его пролекарство.

В тех случаях, когда соединение по настоящему изобретению содержит атом азота соответствующей основности, соединение может использоваться в виде свободного основания или в виде фармацевтически приемлемой соли.

Термин фармацевтически приемлемая соль представляет собой такие соли, которые являются, в рамках медицинского суждения, пригодными для использования в контакте с тканями человека и/или животных без излишней токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного, и являются совместимыми с разумным отношением выгода/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области.

Они могут быть получены во время конечного выделения и очистки соединений по настоящему изобретению, или отдельно, посредством взаимодействия функциональной группы свободного основания с соответствующей минеральной кислотой, такой как хлористоводородная кислота, фосфорная кислота или серная кислота, или с органической кислотой, такой, например, как аскорбиновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, фумаровая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, пропионовая кислота, уксусная кислота, метансульфоновая кислота и тому подобное.

Пролекарства представляют собой соединения, которые быстро преобразуются in vivo в исходное соединение указанной выше формулы, например, посредством гидролиза в желудке и/или в крови, метаболизма в печени или других процессов, известных специалисту в данной области. Например, специалисты в данной области обнаружат, что соединения формулы I, где X представляет собой H₂, как можно ожидать, должны метаболизироваться до аналогичных соединений, где X представляет собой O, которые демонстрируют активность in vitro, даже если пролекарства, где X представляет собой H₂, не проявляет ее.

Термины, используемые при определении соединений по настоящему изобретению в соответствии с формулой I, имеют следующие значения:

- (1-4C)алкил представляет собой разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 1-4 атома углерода, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил или трет-бутил;

- (1-4C)алкокси обозначает (1-4C)алкилокси, где (1-4C)алкил имеет такое же значение, как определено выше;

- (1-6C)алкенил представляет собой разветвленную или неразветвленную алкенильную группу, имеющую 1-6 атомов углерода, такую как этенил, 1-метилэтенил, 2-пропенил, 2-бутенил, и тому подобное;

- (6-10)арил представляет собой карбоциклическую ароматическую группу, имеющую 6-10 атомов углерода, такую как фенил, 1-нафтил или 2-нафтил;

- (1-4C)ацил представляет собой алкилкарбонильную группу, имеющую 1-4 атома углерода, такую как формил, ацетил или пропионил;

- аза-арил обозначает моноциклическую или бициклическую ароматическую кольцевую систему, в которой, по меньшей мере, одно из колец содержит, по меньшей мере, один атом азота в кольце. Примеры включают в себя, но не ограничиваясь этим, пиридил, пирмидинил, хинолинил, нафтиридил и тому подобное;

- карбоциклический, когда рассматривается в контексте кольца, означает, что все атомы, составляющие кольцо, представляют собой атомы углерода;

- спироциклоалкан представляет собой заместитель, состоящий из алкандиильной группы, у которой два конечных атома присоединены к одному и тому же атому (углероду), таким образом, образуя систему спирокольца;

- спироциклоалкен представляет собой заместитель, состоящий из алкендиильной группы, у которой два конечных атома присоединены к одному и тому же атому (углероду), таким образом, образуя систему спирокольца;

- приставки (1-4C), (2-4C) и тому подобное имеют обычное значение, ограничивая значение указанной группы до таких групп с 1-4, 2-4, и тому подобное, атомами углерода;

- галоген относится к фтору, хлору, брому и йоду;

- спироциклоалканон представляет собой спироциклоалкановое кольцо, где один из атомов углерода образует карбонильную группу;

- спироциклоалкенон представляет собой спироциклоалкеновое кольцо, где один из атомов углерода образует карбонильную группу.

Сродство и эффективность к рецепторам соединений прогестагенов в соответствии с настоящим изобретением делает их пригодными для использования при контроле фертильности и воспроизводства, например, при контрацепции женщин, и, кроме того, для HRT женщин, лечения гинекологических расстройств, в качестве компонентов мужской контрацепции и в методах диагностики, концентрирующихся на количестве и/или расположении рецепторов прогестерона в различных тканях. Для последней цели может быть предпочтительным получение изотопно-меченных вариантов соединений в соответствии с настоящим изобретением.

Соединения по настоящему изобретению могут, кроме того, быть полезны для использования при лечении эндометриоза, менорагии, менометрорагии, дисменореи, прыщей, фиброидов, остеопороза, а также других нарушений костей, восстановления костей после переломов, саркопении, дряхлости, старения кожи, женской сексуальной дисфункции, постменапаузальных симптомов, атеросклероза, апластической анемии, липодистрофии, побочных воздействий химиотерапии, опухолей (расположенных, например, в груди, яичниках или матке) и других.

Соединения по настоящему изобретению могут вводиться в сочетании с эстрогенами, андрогенами, прогестагенами, антипрогестагенами и другими соответствующими соединениями, такими как фолиевая кислота, витамины, минералы, и тому подобное.

Способы определения связывания рецепторов, а также анализы in vitro и in vivo для определения биологической активности соединений, хорошо известны. Как правило, экспрессированный рецептор (или его функциональная часть) обрабатывается соединением по настоящему изобретению, и измеряется связывание, или стимулирование, или ингибирование функциональной реакции.

Для измерения функциональной реакции, выделенная ДНК, кодирующая ген рецептора прогестерона, предпочтительно, рецептора человека, экспрессируется в соответствующие клетки-хозяева. Такая клетка может представлять собой клетку яичника китайского хомячка (CHO), но и другие клетки также являются пригодными для использования. Предпочтительно, клетки берутся у млекопитающих. Способы конструирования рекомбинантных линий клеток, экспрессирующих рецептор прогестерона, хорошо известны в данной области (Sambrook et al.., Molecular Cloning: а Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, последнее издание). Экспрессия рецептора поддерживается посредством экспрессии ДНК, кодирующей желаемый белок.

Методики сайт-ориентированного мутагенеза, лигирования дополнительных последовательностей, PCR и конструирование соответствующих систем экспрессии, все являются на сегодняшний день хорошо известными в данной области. Части ДНК, кодирующие желаемый белок, или вся она, может конструироваться синтетически с использованием стандартных твердофазных методик, предпочтительно, для включения сайтов рестрикции, для простоты лигирования. Соответствующие элементы контроля транскрипции и трансляции включенной кодирующей последовательности могут обеспечиваться посредством кодирующих последовательностей ДНК. Как хорошо известно, в настоящее время доступны системы экспрессии, которые являются совместимыми с большим разнообразием хозяев, включая прокариотических хозяев, таких как бактерии, и эукариотических хозяев, таких как дрожжи, клетки растений, клетки насекомых, клетки млекопитающих, клетки птиц и тому подобное.

Клетки, экспрессирующие рецептор, затем приводятся в контакт с соединением по настоящему изобретению для наблюдения связывания или стимулирования или ингибирования функциональной реакции.

Альтернативно, выделенный цитозоль, содержащий экспрессированный рецептор, может использоваться для измерения связывания соединения по настоящему изобретению.

Для измерения связывания могут использоваться радиоактивно- или флуоресцентно-меченное соединение. В качестве соединения сравнения могут использоваться нативный гормон или другие соединения, связывающие рецептор. В качестве альтернативы также может использоваться анализ конкурентного связывания. Другой анализ включает в себя скрининг соединений по настоящему изобретению, смешанных агонистов/антагонистов рецептора прогестерона, посредством определения регуляции медиируемого рецептором природного целевого гена мРНК, то есть генов, регулируемых посредством рецептора, путем связывания рецептора в промоторной области гена. Уровни мРНК целевого гена будут уменьшаться или увеличиваться, в зависимости от ингибиторного или стимулирующего воздействия соединения по настоящему изобретению при связывании рецептора.

В дополнение к прямому измерению уровней мРНК в экспонированных клетках, могут использоваться клетки, которые, в дополнение к трансфекции ДНК, кодирующей рецептор, трансфицируются также второй ДНК, кодирующей репортерный ген, экспрессия которого реагирует на связывания рецептора по отношению к чувствительным элементам в промоторе конкретного репортерного гена. Такие чувствительные элементы могут представлять собой классические гормон-чувствительные элементы, хорошо известные в данной области и описанные, например, в Beato, M, Chalepakis, G, Schauer, M, Slater, EP J. Steroid Biochem. 5 (1989) 737-47, или могут конструироваться таким образом, что они связаны с новыми чувствительными элементами. Как правило, экспрессия репортерного гена может контролироваться посредством любого чувствительного элемента, реагирующего на связывание рецептора прогестерона. Пригодные для использования репортерные гены представляют собой, например, LacZ, щелочную фосфатазу, люциферазу светлячков и зеленый флуоресцентный белок.

Для выбора соединений по рассматриваемому изобретению со смешанным модулирующим воздействием на рецептор прогестерона, исследование в агонистическом режиме должно приводить к собственной активности в пределах примерно между 15% и примерно 85% от максимальной активности, когда (16α)-16-этил-21-гидрокси-19-норпрегн-4-ен-3,20-дион используется в качестве сравнения. Кроме того, эта максимальная агонистическая активность должна достигаться при концентрации 10^-6 или менее, а предпочтительно при концентрации 10^-8 или менее.

В антагонистическом режиме исследование должно приводить к собственной активности в пределах примерно между 85% и примерно 15% от максимальной активности, когда в качестве сравнения используется (6β,11β,17β)-11-[4-(диметиламино)фенил]-4',5'-дигидро-6-метилспиро[эстра-4,9-диен-17,2'(3'H)-фуран]-3-он.

Дополнительный критерий представляет собой значение IC₅₀, которое должно быть<10^-6 M, предпочтительно<10^-8 M. Специалистам в данной области будет понятно, что соединения по настоящему изобретению со смешанным профилем P/AP понимаются как имеющие профиль в пределах от сочетания минимальной собственной агонистической активности примерно от 15% и максимальной собственной антагонистической активности примерно 85% до сочетания максимальной собственной агонистической активности примерно 85% и минимальной собственной антагонистической активности примерно 15%. Специалисты в данной области также заметят, что из-за биологической вариации при анализе не всегда является необходимым случай, когда собственная агонистическая активность и собственная антагонистическая активность доходят точно до 100%.

Кроме того, специалист в данной области заметит, что желаемые значения EC₅₀ и IC₅₀ зависят от соединения по настоящему изобретению, которое исследуется. Например, соединение с EC₅₀, которая меньше, чем 10^-6 M, как правило, рассматривается как кандидат для выбора лекарственного средства. Предпочтительно, это значение меньше, чем 10^-8 M. Однако соединение, которое имеет более высокие EC₅₀ и/или IC₅₀, но имеет соответствующую селективность (или сочетание агонистической и антагонистической селективности) по отношению к конкретному рецептору, по-прежнему может являться кандидатом для выбора лекарственного средства.

В основном любой анализ трансактивирования на клетках млекопитающих (на линии клеток или на первичной культуре), который может давать информацию о возможном активировании рецептора, может использоваться для целей выбора сильнодействующих и пригодных для использования лигандов. Дополнительная ценность использования нескольких систем клеток, с клетками, которые происходят от различных органов, будет заключаться в том, что получается информация о потенциальной специфичности лигандов к тканям. Без ограничения, примеры клеток, часто используемых для этой цели, представляют собой, наряду с клетками CHO, например, клетки T47D, клетки MCF7, клетки ECC-1, клетки HeLa, первичные культуры эндометриальных клеток и питуитарные клетки.

Соответствующие способы введения для соединений по рассматриваемому изобретению (называемые также активным ингредиентом) представляют собой пероральное, ректальное, назальное, местное (включая трансдермальное, буккальное и сублингвальное), вагинальное или парентеральное (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и чрескожное) введение или введение посредством импланта. В конкретном варианте осуществления соединения могут вводиться перорально. Конкретная доза и режим введения активного ингредиента или его фармацевтической композиции обязательно будут зависеть от терапевтического воздействия, которое должно достигаться (например, при контрацепции, HRT, эндометриозе), и может изменяться вместе с конкретным соединением, способом введения и возрастом и состоянием индивидуального субъекта, которому должно вводиться лекарственное средство.

Как правило, парентеральное введение требует более низких дозировок, чем другие способы введения, которые сильнее зависят от поглощения. Однако дозировка для людей желательно составляет 0,0001-25 мг на кг массы тела. Желаемая доза может быть представлена как одна доза или множество суб-доз, вводимых в соответствующих интервалах в течение дня, или, в случае пациентов женского пола, в виде доз, которые должны вводиться при соответствующих (дневных) интервалах в течение менструального цикла.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение в соответствии с формулой I, в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и, необязательно, с другими терапевтическими агентами. Вспомогательные вещества должны быть "приемлемыми" в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не быть вредными для тех, кто их принимает.

Фармацевтические композиции включают в себя композиции, пригодные для перорального, ректального, назального, местного (включая трансдермальное, буккальное и сублингвальное), вагинального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и чрескожное) введения или введение посредством импланта. Композиции могут быть получены с помощью способов, известных в области фармации, например, с использованием таких способов, как те, которые описаны в Gennaro et al., Remington's Pharmaceutical Sciences (18th ed, Mack Publishing company, 1990, см., в частности, Part 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture).

Такие способы включают в себя стадию объединения активного ингредиента с любым вспомогательным агентом. Вспомогательный агент (агенты), называемый также вспомогательным ингредиентом (ингредиентами), включает в себя агенты, обычные в данной области (Gennaro, выше), такие как носители, наполнители, связующие вещества, разбавители, разрыхлители, смазочные материалы, красители, ароматизирующие агенты, антиоксиданты и смачивающие агенты.

Фармацевтические композиции, пригодные для перорального введения, могут быть представлены как отдельные единичные дозированные формы, такие как пилюли, таблетки, драже или капсулы, или в виде порошка или гранул, или в виде раствора или суспензии. Активный ингредиент может также быть представлен в виде болюса или пасты. Композиции могут быть, кроме того, переработаны в суппозитории или клизмы для ректального введения.

Кроме того, настоящее изобретение включает в себя фармацевтическую композицию, как описано выше, в сочетании с упаковочным материалом, включая инструкции по использованию композиции, для ее использования, как описано выше.

Для парентерального введения пригодные для использования композиции включают в себя водную и неводную стерильную инъекцию. Композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например, в герметичных флаконах и ампулах, и могут храниться в полученном сушкой замораживанием (лиофилизированным) состоянии, требующим только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, перед использованием. Композиции или препараты, пригодные для введения посредством назальной ингаляции, включают в себя мелкодисперсные пыли или туманы, которые могут генерироваться посредством аэрозолей высокого давления с отмеряемой дозой, небулизаторов или инсуфляторов.

Соединения по настоящему изобретению могут также вводиться в форме устройств, состоящих из сердцевины из активного материала, окруженной мембраной, регулирующей скорость высвобождения. Такие импланты могут применяться подкожно или локально и будут высвобождать активный ингредиент приблизительно с постоянной скоростью в течение относительно больших периодов времени, например, от недель до лет. Способы получения имплантируемых фармацевтических устройств как таковых известны в данной области, например, как описано в EP 303306.

Соединения по настоящему изобретению могут также вводиться в форме вагинального кольца, такого, как описано, например, в EP 876815.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены посредством различных способов, известных в области органической химии в целом. Более конкретно, могут использоваться способы синтеза, как иллюстрируется в предыдущих и следующих далее схемах и примерах. В схемах и примерах используются следующие сокращения:

ТГФ: тетрагидрофуран

ДМФ: N,N-диметилформамид

NaHCO₃: бикарбонат натрия

NH₄Cl: хлорид аммония

Na₂S₂O₃: тиосульфат натрия

SiO₂: двуокись кремния (силикагель)

Na₂SO₄: сульфат натрия

MgSO₄: сульфат магния

ЖХ-МС: жидкостная хроматография/масс-спектрометрия

ВЭЖХ: высокоэффективная жидкостная хроматография

ЯМР: ядерный магнитный резонанс

M: молярный

В дальнейшем настоящее изобретение описывается в следующих далее примерах, которые ни в коем случае не предназначены для ограничения рамок настоящего изобретения в соответствии с формулой изобретения.

Примеры

Пример 1

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь 17-[[(трифторметил)сульфонил]окси]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она

Литий гексаметилдисилазан (1M в ТГФ, 478 мл, 478 ммоль) добавляют к ТГФ (1 л) и охлаждают до -40°C в атмосфере азота. Раствор циклического 3-(1,2-этандиилацеталя) эстра-5(10),9(11)-диен-3,17-диона (50 г, 159 ммоль) в сухом ТГФ (500 мл) добавляют по каплям, в то время как температуру реакции медленно увеличивают до -15°C. После перемешивания в течение 30 минут при -15°C добавляют в виде загрузки N-фенил-бис(трифторметансульфонимид) (62,5 г, 175 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов при 0°C. Насыщенный водный раствор NaHCO₃ добавляют по каплям (экзотермически), а затем воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 4/1), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя 17-[[(трифторметил)сульфонил]окси]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (90,1 г, 159 ммоль, выход 100%, по-прежнему содержит некоторое количество растворителя). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,91 (с, 3H), 1,20-2,55 (м, 16H), 3,98 (с, 4H), 5,52 (м, 1H), 5,59 (м, 1H).

b. N-метокси-N-метил-3,3-[1,2-этандиилбис(окси)]оксо-эстра-5(10),9(11),16-триен-17-карбоксамид

Триэтиламин (221 мл, 1,59 моль), трифенилфосфин (6,67 г, 25 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламин·HCl (82,2 г, 843 ммоль) добавляют к раствору циклического 1,2-этандиилацеталя 17-[[(трифторметил)сульфонил]окси]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (70,9 г, 159 ммоль) в ДМФ (1,5 л). Моноокись углерода пропускают через раствор в течение 10 минут, затем добавляют палладий(II)ацетат (2,86 г, 12,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при 60°C в атмосфере CO. Реакционную смесь выливают в насыщенный водный раствор NH₄Cl и экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 2/1), с получением N-метокси-N-метил-3,3-[1,2-этандиилбис(окси)]эстра-5(10),9(11),16-триен-17-карбоксамида (59,7 г, 139 ммоль, выход 87%, по-прежнему содержит некоторое количество растворителя). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,97 (с, 3H), 1,25-2,58 (м, 16H), 3,25 (с, 3H), 3,62 (с, 3H), 3,99 (с, 4H), 5,58 (м, 1H), 6,41 (м, 1H).

c. Циклический 1,2-этандиилацеталь 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она

Раствор циклопропилбромида (22,3 мл, 278 ммоль) в простом диэтиловом эфире (20 мл) медленно добавляют к охлажденной суспензии (0°C) измельченного лития (5,8 г, 834 ммоль) в простом эфире (380 мл) (экзотермически) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 90 минут, в то время как температура увеличивается до комнатной температуры. Раствор этого литиата медленно добавляют к охлажденному раствору (0°C) N-метокси-N-метил-3,3-[1,2-этандиилбис(окси)]эстра-5(10),9(11),16-триен-17-карбоксамида (59,7 г, 139 ммоль) в ТГФ (260 мл). После перемешивания этой смеси в течение 2 часов при 0°C добавляют по каплям насыщенный водный раствор NH₄Cl (экзотермически), а затем воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 4/1), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (33,9 г, 93 ммоль, выход 67%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,82-2,67 (м, 24H), 3,99 (с, 4H), 5,59 (м, 1H), 6,88 (м, 1H).

d. Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она

Метилмагнийхлорид (3M в ТГФ, 92,6 мл, 278 ммоль) добавляют к перемешиваемому и охлажденному раствору (0°C) ацетата меди(II) (1,7 г, 9,3 ммоль) в ТГФ (1 л) в атмосфере азота. Раствор циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (33,9 г, 93 ммоль) и триметилсилилхлорида (58,5 мл, 463 ммоль) в ТГФ (500 мл) добавляют по каплям, в то время как температура поддерживается при 0°C. Через 1 час добавляют по каплям еще один эквивалент метилмагнийхлорида и перемешивание продолжают в течение 30 минут при 0°C. Насыщенный водный раствор NH₄Cl добавляют по каплям, а затем воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха, с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она (32,9 г, 86 ммоль, выход 93%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,61 (с, 3H), 0,80-2,79 (м, 26H), 3,99 (с, 4H), 5,55 (м, 1H).

e. Циклический 1,2-этандиилацеталь (5α,10α,16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-5,10-эпокси-16-метилэстр-9(11)-ен-3-она

К перемешиваемому раствору циклического 1,2-этандиилацеталя (16α, 17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она (32,9 г, 86 ммоль) в дихлорметане (500 мл), добавляют пиридин (2,1 мл, 26,7 ммоль), трифторацетофенон (12,1 мл, 86,1 ммоль) и перекись водорода (30% в воде, 96,1 мл). Полученную двухфазную систему энергично перемешивают при температуре окружающей среды в течение 2 дней. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют дважды дихлорметаном. Объединенные органические слои промывают дважды насыщенным водным раствором Na₂S₂O₃, промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 5/1), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (5α,10α,16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-5,10-эпокси-16-метилэстр-9(11)-ен-3-она (27,9 г, 70,1 ммоль, выход 81%, присутствует 16% β-эпоксида). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,61 (с, 3H), 0,81-2,78 (м, 26H), 3,87-3,96 (м, 4H), 6,02 (м, 1H).

f. Циклический 1,2-этандиилацеталь (5α,11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидрокси-16-метилэстр-9-ен-3-она

Кристаллик йода добавляют к магнию (8,4 г, 350 ммоль) и нагревают в течение 1 минуты. Раствор 1,4-дибромбензола (85,1 г, 350 ммоль) и несколько капель 1,2-дибромэтана в ТГФ (400 мл) добавляют по каплям в атмосфере азота, в то время как температура поддерживается при 45°C. Через 1 час перемешивания при 45°C эту суспензию Гриньяра добавляют к охлажденному (-40°C) раствору циклического 1,2-этандиилацеталя (5α,10α,16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-5,10-эпокси-16-метилэстр-9(11)-ен-3-она (27,9 г, 70,1 ммоль) и хлорида меди(I) (3,4 г, 35,1 ммоль) в ТГФ (550 мл) в атмосфере азота, в то время как температура поддерживается при -40°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов, в то время как температуру увеличивают до комнатной температуры. Насыщенный водный раствор NH₄Cl добавляют по каплям (экзотермически), а затем воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ и насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 2/1), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (5α,11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидрокси-16-метилэстр-9-ен-3-она (30,0 г, 54,1 ммоль, выход 77%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,24 (с, 3H), 0,80-2,71 (м, 26H), 3,89-4,05 (м, 4H), 4,23 (д, J=6 Гц, 1H), 4,37 (д, J=1 Гц, 1Н), 7,05-7,09 (м, 2H), 7,35-7,38 (м, 2H).

g. (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он

2н Хлористоводородную кислоту (81,1 мл, 162 ммоль) добавляют к раствору циклического 1,2-этандиилацеталя (5α,11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидрокси-16-метилэстр-9-ен-3-она (30,0 г, 54,1 ммоль) в ацетоне (600 мл). После перемешивания этого раствора в течение 10 минут при комнатной температуре добавляют насыщенный водный раствор NaHCO₃. Реакционную смесь экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 2/1), с получением (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она (17,6 г, 35,7 ммоль, выход 66%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,30 (с, 3H), 0,84-2,76 (м, 24H), 4,34 (д, J=8 Гц, 1H), 5,79 (с, 1H), 7,02-7,05 (м, 2H), 7,37-7,41 (м, 2H).

h. (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-l6-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

(11β,16α,17β)-11-(4-Бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он (10 г, 20,3 ммоль), 3-пиридинилбороновую кислоту (3,7 г, 30,4 ммоль), фосфат калия (5,2 г, 24,3 ммоль), хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (442 мг, 0,61 ммоль) и трифениларсин (426 мг, 1,4 ммоль) растворяют в смеси диоксана (240 мл) и воды (30 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при 100°C, а затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют воду и смесь экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (MgSO₄) и выпаривают досуха. Очистка с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, градиент от 2/1 до 1/2), дает сырой продукт (8,3 г, 16,9 ммоль), который кристаллизуют из ацетонитрила/воды, с получением (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она (5,5 г, 11,2 ммоль, выход 55%), т.пл. 206°C. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,35 (с, 3H), 0,86-2,86 (м, 24H), 4,46 (д, J=8 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,26-7,29 (м, 2H), 7,35 (дд, J=10 и 6 Гц, 1H), 7,49-7,53 (м, 2H), 7,86 (дт, J=10 и 4 Гц, 1H), 8,57 (дд, J=6 и 4 Гц, 1H), 8,84 (д, J=4 Гц, 1H).

Пример 2

Получение гидрохлорида (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

К раствору (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она (40 мг, 0,081 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) добавляют 2н хлористоводородную кислоту (40 мкл) и воду (5 мл). Лиофилизация этой смеси дает гидрохлорид (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она с количественным выходом (40 мг, 0,08 ммоль). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,34 (с, 3H), 0,80-2,85 (м, 24H), 4,47 (д, J=7 Гц, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,31-7,35 (м, 2H), 7,51-7,55 (м, 2H), 7,64 (дд, J=8 и 5 Гц, 1H), 8,18 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,62 (д, J=5 Гц, 1H), 8,90 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 3

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-11-[4-(6-метоксипиридин-3-ил)фенил]-16-метилэстра-4,9-диен-3-она

Взаимодействие (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она и 6-метокси-3-пиридинилбороновой кислоты, с использованием процедуры, описанной в примере 1, стадия h дает указанное в заголовке соединение (выход 54%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,35 (с, 3H), 0,84-0,99 (м, 6H), 1,08-1,15 (м, 1H), 1,33-1,39 (м, 1H), 1,45-1,54 (м, 1H), 1,62-1,70 (м, 2H), 1,91-1,97 (м, 1H), 2,01-2,08 (м, 1H), 2,24-2,53 (м, 6H), 2,58-2,64 (м, 2H), 2,68-2,85 (м, 3H), 3,98 (с, 3H), 4,44 (д, J=8 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 6,80 (д, J=8 Гц, 1H), 7,23 (д, J=7 Гц, 2H), 7,44 (д, J=7 Гц, 2H), 7,75-7,79 (м, 1H), 8,36-8,38 (м, 1H).

Пример 4

Получение (11β,16α,17β)-11-[4-(6-хлорпиридин-3-ил)фенил]-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она

Для получения указанного в заголовке соединения из (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она и 6-хлор-3-пиридинилбороновой кислоты, процедура, описанная в примере 1, стадия h, слегка модифицируется. Реакционную смесь нагревают в течение 4 часов и добавляют дополнительно 2 эквивалента 6-хлор-3-пиридинилбороновой кислоты 4 порциями. Очистка с помощью ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает продукт (выход 11%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,34 (с, 3H), 0,84-2,84 (м, 24H), 4,45 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,25-7,30 (м, 2H), 7,38 (д, J=8 Гц, 1H), 7,45-7,49 (м, 2H), 7,82 (дд, J=8 и 3 Гц, 1H), 8,59 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 5

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-11-[4-(6-фторпиридин-3-ил)фенил]-16-метилэстра-4,9-диен-3-она

Используют (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и 6-фтор-3-пиридинилбороновую кислоту, как описано в примере 1, стадия h. Очистка с помощью ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает продукт (выход 65%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,34 (с, 3H), 0,80-2,85 (м, 24H), 4,45 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,00 (дд, J=8 и 3 Гц, 1H), 7,25-7,29 (м, 2H), 7,44-7,48 (м, 2H), 7,95 (дт, J=8 и 3 Гц, 1H), 8,41 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 6

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(5-метоксипиридин-3-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

Используют (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и 5-метокси-3-пиридинилбороновую кислоту, как описано в примере 1, стадия h. Очистка с помощью ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает продукт (выход 41%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,35 (с, 3H), 0,80-2,86 (м, 24H), 3,92 (с, 3H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,24-7,29 (м, 2H), 7,35 (дд, J=3 и 1 Гц, 1H), 7,48-7,53 (м, 2H), 8,28 (д, J=3 Гц, 1H), 8,45 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 7

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-хинолидинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

(11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и пинаколят хинолин-3-бороновой кислоты нагревают в течение 3 часов в соответствии с процедурой, описанной в примере 1, стадия h. Очистка с помощью ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 18%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,38 (с, 3H), 0,78-2,89 (м, 24H), 4,49 (д, J=7 Гц, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,30-7,34 (м, 2H), 7,58 (дт, J=7 и 1 Гц, 1H), 7,63-7,67 (м, 2H), 7,72 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 7,87 (дд, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,13 (д, J=8 Гц, 1H), 8,29 (д, J=3 Гц, 1H), 9,17 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 8

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(4-пиридазинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

н-Бутиллитий (2,76 мл, 6,9 ммоль, 2,5 M в гексане) добавляют по каплям к охлажденному (0°C) раствору диизопропиламина (0,97 мл, 6,9 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) в атмосфере азота. После перемешивания в течение 30 минут реакционную смесь охлаждают до -78°C и одновременно добавляют раствор пиридазина (452 мкл, 6,3 ммоль) и трибутилоловохлорид (1,9 мл, 6,9 ммоль), в то время как температура поддерживается ниже -70°C. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при -78°C; а затем добавляют насыщенный водный раствор NH₄Cl, и реакционную смесь экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои сушат (MgSO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью ЖХ-МС, с получением трибутилстаннилпиридазина (197 мг, 0,53 ммоль, выход 8%). Этот станнилпиридазин (183 мг, 0,49 ммоль), (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он (100 мг, 0,20 ммоль) и хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (3 мг, 0,004 ммоль) растворяют в диоксане (3 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при 110°C, а затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют воду и смесь экстрагируют три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои сушат посредством фильтра с разделением фаз и выпаривают досуха. Очистка с помощью ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(4-пиридазинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он (78 мг, 0,16 ммоль, выход 79%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,33 (с, 3H), 0,85-2,84 (м, 26H), 4,48 (д, J=7 Гц, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,33-7,37 (м, 2H), 7,60-7,64 (м, 3H), 9,21 (дд, J=5 и 1 Гц, 1H), 9,46 (дд, J=3 и 1 Гц, 1H).

Такое же указанное в заголовке соединение также получают с использованием 4-трибутилстаннилпиридазина, полученного в соответствии с процедурой, описанной в Eur. J. Org. Chem. 2885-2896 (1998) и в Tetrahedron Letters 38, 5791-5794(1997).

Пример 9

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(пиразин-2-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

В соответствии с процедурой, описанной в примере 8, (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и 2-трибутилстаннилпиразин нагревают в СВЧ печи при 135°C (150 Вт, 25 минут), с получением указанного в заголовке соединения (выход 35%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,33 (с, 3H), 0,84-2,86 (м, 24H), 4,47 (д, J=7 Гц, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,30-7,34 (м, 2H), 7,92-7,96 (м, 2H), 8,49 (д, J=3 Гц, 1H), 8,61 (дд, J=3 и 1 Гц, 1H), 9,01 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 10

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(2-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

(PPh₃)₂PdCl₂ (4 мг, 0,006 ммоль), ферроценпалладий дихлорид (6 мг, 0,009 ммоль) и 2-пиридилцинк бромид (2 мл, 1,0 ммоль) добавляют к раствору (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она (200 мг, 0,41 ммоль) в ТГФ (4 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 часов при 60°C, а затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют насыщенный водный раствор NH₄Cl и смесь экстрагируют три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои сушат посредством фильтра с разделением фаз и выпаривают досуха. Очистка с помощью ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(2-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он (80 мг, 0,16 ммоль, выход 40%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,33 (с, 3H), 0,80-2,87 (м, 24H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,20-7,23 (м, 1H), 7,25-7,29 (м, 2H), 7,68-7,77 (м, 2H), 7,89-7,92 (м, 2H), 8,67 (дт, J=5 и 1 Гц, 1H).

Пример 11

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(5-метилпиридин-2-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

Указанное в заголовке соединение (выход 10%) получают из (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-она и 5-метил-2-пиридинилцинк бромида, с использованием процедуры, описанной в примере 10. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,33 (с, 3H), 0,80-2,86 (м, 27H), 4,45 (д, J=7 Гц, 1H), 5,79 (с, 1H), 7,22-7,26 (м, 2H), 7,52-7,60 (м, 2H), 7,85-7,88 (м, 2H), 8,48-8,50 (м, 1H).

Пример 12

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(4-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

(11β,16α,17β)-11-(4-Бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и 4-пиридинилбороновую кислоту применяют, как описано в примере 1, стадия h. Очистка с помощью ВЭЖХ, с последующей кристаллизацией (ацетонитрил/вода), дает продукт (выход 44%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,33 (с, 3H), 0,84-2,85 (м, 24H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,26-7,30 (м, 2H), 7,48-7,50 (м, 2H), 7,55-7,59 (м, 2H), 8,63-8,65 (м, 2H).

Пример 13

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-этенил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этенилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она

Взаимодействие циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она и винилмагнийхлорида в соответствии с процедурой, описанной в примере 1, стадия d дает указанное в заголовке соединение (выход 48%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,63 (с, 3H), 0,80-2,66 (м, 21H), 2,71 (д, J=9 Гц, 1H), 3,30-3,39 (м, 1H), 3,99 (с, 4H), 4,84-4,97 (м, 2H), 5,54-5,58 (м, 1H), 5,71-5,81 (м, 1H).

b. (11β,16α,17β)-17-Циклопропилкарбонил-16-этенил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этенилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуют в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h. Очистка с помощью препаративной ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 15% после этих 4 стадий). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,38 (с, 3H), 0,84-0,99 (м, 3H), 1,08-1,15 (м, 1H), 1,46-2,88 (м, 16H), 3,26-3,35 (м, 1H), 4,47 (д, J=7 Гц, 1H), 4,86-4,97 (м, 2H), 5,70-5,79 (м, 1H), 5,81 (с, 1H), 7,26-7,30 (м, 2H), 7,35 (дд, J=8 и 5 Гц, 1H), 7,49-7,53 (м, 2H), 7,86 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,58 (дд, J=5 и 1 Гц, 1H), 8,84 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 14

Получение [11β,16α(E),17β]-17-циклопропилкарбонил-16-(2-фенилэтенил)-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

При очистке (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-этенил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она, указанное в заголовке соединение выделяют в виде побочного продукта (выход 2%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,41 (с, 3H), 0,83-1,15 (м, 4H), 1,50-2,91 (м, 16H), 3,43-3,53 (м, 1H), 4,49 (д, J=7 Гц, 1H), 5,82 (с, 1H), 6,12 (дд, J=16 и 8 Гц, 1H), 6,32 (д, J=16 Гц, 1H), 7,17-7,22 (м, 1H), 7,26-7,40 (м, 7H), 7,50-7,54 (м, 2H), 7,85-7,91 (м, 1H), 8,56-8,61 (м, 1H), 8,83-8,87 (м, 1H).

Пример 15

Получение (11β,16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этенил-11-[4-(6-метоксипиридин-3-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этенилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение, с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h (с использованием 6-метокси-3-пиридинилбороновой кислоты на последней стадии). Очистка посредством кристаллизации из гептана дает указанное в заголовке соединение (выход 24%, после этих 4 стадий), т.пл. 197°C. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,39 (с, 3H), 0,84-2,87 (м, 20H), 3,26-3,34 (м, 1H), 3,98 (с, 3H), 4,45 (д, J=7 Гц, 1H), 4,88 (д, J=11 Гц, 1H), 4,95 (д, J=16 Гц, 1H), 5,70-5,81 (м, 2H), 6,81 (д, J=8 Гц, 1H), 7,23 (д, J=8 Гц, 2H), 7,45 (д, J=8 Гц, 2H), 7,77 (дд, J=8 и 3 Гц, 1H), 8,37 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 16

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-этил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она

Взаимодействие циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она и этилмагнийхлорида в соответствии с процедурой, описанной в примере 1, стадия d дает указанное в заголовке соединение (выход 87%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,60 (с, 3H), 0,80-2,64 (м, 28H), 3,99 (с, 4H), 5,54-5,58 (м, 1H).

b. (11β,16α,17β)-17-Циклопропилкарбонил-16-этил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(Циклопропилкарбонил)-16-этилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h. Очистка с помощью препаративной ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 22% после этих 4 стадий). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,35 (с, 3H), 0,82 (т, J=7 Гц, 3H), 0,87-0,98 (м, 3H), 1,07-1,14 (м, 1H), 1,25-1,34 (м, 2H), 1,41-1,64 (м, 5H), 1,91-1,99 (м, 1H), 2,03-2,11 (м, 1H), 2,24-2,85 (м, 10H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,25-7,30 (м, 2H), 7,35 (дд, J=7 и 5 Гц, 1H), 7,48-7,53 (м, 2H), 7,46 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,57 (дд, J=5 и 1 Гц, 1H), 8,84 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 17

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-этил-11-[4-(6-метоксипиридин-3-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16-этилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение, с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h, с использованием 6-метокси-3-пиридинилбороновой кислоты на последней стадии. Очистка с помощью колоночной хроматографии дает указанное в заголовке соединение (выход 14% после этих 4 стадий). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,35 (с, 3H), 0,82 (т, J=8 Гц, 3H), 0,85-0,99 (м, 4H), 1,07-1,13 (м, 1H), 1,25-1,34 (м, 2H), 1,41-2,84 (м, 16H), 3,98 (с, 3H), 4,44 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 6,80 (д, J=8 Гц, 1H), 7,21-7,25 (м, 2H), 7,42-7,46 (м, 2H), 7,77 (дд, J=8 и 2 Гц, 1H), 8,37 (д, J=2 Гц, 1H).

Пример 18

Получение (11β,17β)-17-циклопропилкарбонил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь (17β)-17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она

K-селектрид (1M в ТГФ, 12,1 мл, 12,1 ммоль) добавляют по каплям к охлажденному раствору (-78°C) циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (3,7 г, 10,0 ммоль) в ТГФ (105 мл) в атмосфере азота, в то время как температура реакции поддерживается ниже -70°C. После перемешивания этого раствора в течение 20 минут добавляют по каплям насыщенный водный раствор Na₂SO₄, а затем воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (Na₂SO₄) и выпаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат, 4/1), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (17β)-17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она (2,1 г, 5,8 ммоль, выход 57%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,59 (с, 3H), 0,80-2,59 (м, 23H), 2,86 (т, J=9 Гц, 1H), 3,99 (с, 4H), 5,55-5,60 (м, 1H).

b. Циклический 1,2-этандиилацеталь (17β)-17-(циклопропилгидроксиметил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она

Раствор циклического (1,2-этандиилацеталя) 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она (2,1 г, 5,8 ммоль) в простом диэтиловом эфире (54 мл) медленно добавляют к охлажденной (0°C) суспензии литийалюмогидрида (262 мг, 6,9 ммоль) в простом диэтиловом эфире (36 мл) в атмосфере азота. Через 1 час перемешивания при 0°C добавляют насыщенный водный раствор Na₂SO₄ до тех пор, пока не исчезнет серый цвет. Добавляют твердый Na₂SO₄ и смесь фильтруют, промывают этилацетатом, и фильтрат выпаривают досуха, с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (17β)-17-(циклопропилгидроксиметил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она (2,2 г, 5,8 ммоль, выход>100%, продукт по-прежнему содержит некоторое количество растворителя). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,20-0,59 (м, 4H), 0,70 (с, 3H), 0,82-2,59 (т, 21Н), 2,85 (дт, J=9 и 4 Гц, 1H), 3,99 (с, 4H), 5,53-5,58 (т, 1Н).

c. Циклический 1,2-этандиилацеталь (5α,11β,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилгидроксиметил)-5-гидроксиэстр-9-ен-3-она

В соответствии с процедурами, описанными в примере 1, стадии e и f, циклический 1,2-этандиилацеталь (17β)-17-(циклопропилгидроксиметил)эстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуется в указанное в заголовке соединение (выход 26%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,12-0,57 (м, 7Н), 0,79-0,89 (м, 1Н), 1,10-2,12 (м, 17Н), 2,27-2,40 (м, 2Н), 2,65-2,76 (м, 2Н), 3,88-4,03 (м, 4H), 4,14 (д, J=7 Гц, 1H), 4,34 (с, 1H), 7,08-7,13 (м, 2Н), 7,32-7,36 (м, 2H).

d. Циклический 1,2-этандиилацеталь (5α,11β,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидроксиэстр-9-ен-3-она

К раствору циклического (1,2-этандиилацеталя) (5α,11β,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилгидроксиметил)-5-гидроксиэстр-9-ен-3-она (726 мг, 1,3 ммоль) в ацетоне (25 мл) добавляют N-оксид 4-метилморфолина (438 мг, 3,7 ммоль) и тетра-N-пропиламмоний перрутенат (VII) (28 мг, 0,08 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляют двуокись кремния и гептан (14 мл) и смесь перемешивают в течение 1 часа, затем фильтруют через дикалит и промывают, как следует, этилацетатом. Фильтрат выпаривают досуха с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (5α,11β,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидроксиэстр-9-ен-3-она (732 мг, 1,3 ммоль, выход 100%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,21 (с, 3H), 0,80-2,39 (м, 22H), 2,66-2,74 (м, 2H), 3,88-4,05 (м, 4H), 4,23 (д, J=7 Гц, 1H), 4,37 (с, 1H), 7,06-7,10 (м, 2H), 7,34-7,38 (м, 2H).

e. (11β,17β)-11-(4-Бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-4,9-диен-3-он

В соответствии с процедурой, описанной в примере 1, стадия g, циклический 1,2-этандиилацеталь (5α,11β,17β)-11-(4-бромфенил)-17-(циклопропилкарбонил)-5-гидроксиэстр-9-ен-3-она преобразуется в указанное в заголовке соединение (выход 65%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,27 (с, 3H), 0,83-2,83 (м, 22H), 4,34 (д, J=7 Гц, 1H), 5,79 (с, 1H), 7,02-7,07 (м, 2H), 7,37-7,42 (м, 2H).

f. (11β,17β)-17-Циклопропилкарбонил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

(11β,17β)-11-(4-Бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-4,9-диен-3-он преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедур, описанных в примере 1, стадия h. Очистка с помощью препаративной ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 66%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,32 (с, 3H), 0,84-2,82 (м, 21H), 2,92 (д, J=13 Гц, 1H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,27-7,32 (м, 2H), 7,34 (дд, J=8 и 5 Гц, 1H), 7,49-7,54 (м, 2H), 7,86 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5 Гц, 1H), 8,84 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 19

Получение (11β,17β)-17-циклопропилкарбонил-11-[4-(6-метоксипиридин-3-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

(11β,17β)-11-(4-Бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-4,9-диен-3-он преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедуры, описанной в примере 1, стадия h, с использованием 6-метокси-3-пиридинилбороновой кислоты в качестве реагента. Очистка с помощью препаративной ЖХ-МС, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 60%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,32 (с, 3H), 0,83-2,81 (м, 21H), 2,91 (д, J=13 Гц, 1H), 3,98 (с, 3H), 4,44 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 6,80 (д, J=8 Гц, 1H), 7,22-7,26 (м, 2H), 7,42-7,46 (м, 2H), 7,77 (дд, J=8 и 2 Гц, 1H), 8,37 (д, J=2 Гц, 1H).

Пример 20

Получение (11β,17β)-17-циклопропилкарбонил-17-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь (17β)-17-(циклопропилкарбонил)-17-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она

L-селектрид (3,0 мл, 3,0 ммоль, 1M в ТГФ) медленно добавляют к охлажденному (-78°C) и перемешиваемому раствору циклического 1,2-этандиилацеталя 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (500 мг, 1,4 ммоль) и добавляют 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1H)-пиримидинон (0,33 мл, 2,7 ммоль) в сухом ТГФ (20 мл) в атмосфере азота. Через 1 час при -78°C добавляют метилйодид (1,7 мл, 27 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 1,5 часов, в то время как температуру увеличивают до -30°C. Реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ и насыщенным раствором соли, сушат (MgSO₄) и растворители выпаривают в вакууме. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, гептан/этилацетат=9/1, об./об.), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (17β)-17-(циклопропилкарбонил)-17-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она (255 мг, 0,67 ммоль, выход 49%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,67 (с, 3H), 0,78-2,72 (м, 27H), 1,23 (с, 3H), 3,96-4,02 (м, 4H), 5,57-5,61 (м, 1H).

b. (11β,17β)-17-Циклопропилкарбонил-17-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

Циклический 1,2-этандиилацеталь (17β)-17-(циклопропилкарбонил)-17-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3-она преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h. Очистка с помощью ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 19% после этих 4 стадий). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,42 (с, 3H), 0,80-2,82 (м, 24H), 2,28 (с, 3H), 4,48 (д, J=8 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,30 (д, J=8 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=4 и 8 Гц, 1H), 7,50 (д, J=8 Гц, 1H), 7,85 (дт, J=2 и 8 Гц, 1H), 8,57 (дд, J=2 и 4 Гц, 1H), 8,84 (д, J=2 Гц, 1H).

Пример 21

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16,17-дигидро-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-3'H-циклопропа[16,17]эстра-4,9,16-триен-3-она

a. Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16,17-дигидро-3'H-циклопропа[16,17]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она

Гидрид натрия (60% масляная дисперсия, 197 мг, 4,9 ммоль) добавляют к перемешиваемому раствору йодида триметилсульфоксония (960 мг, 1,1 ммоль) в ДМСО (20 мл) в атмосфере азота. Через 30 минут добавляют раствор циклического (1,2-этандиилацеталя) 17-(циклопропилкарбонил)эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (400 мг, 1,1 ммоль) в сухом ТГФ (4 мл). Через 1 час реакционную смесь выливают в воду со льдом и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат (MgSO₄) и растворители выпаривают в вакууме. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии (SiO₂, градиент от гептан/этилацетат=9/1, об./об., до гептан/этилацетат=3/7, об./об.), с получением циклического 1,2-этандиилацеталя (16α,17β)-17-(циклопропилкарбонил)-16,17-дигидро-3'H-циклопропа[16,17]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она (102 мг 0,25 ммоль, выход 91%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,72-2,50 (м, 28H), 0,98 (с, 3H), 3,97-4,02 (м, 4H), 5,56-5,60 (м, 1H).

b. (11β,16α,17β)-17-Циклопропилкарбонил-16,17-дигидро-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-3'H-циклопропа[16,17]эстра-4,9,16-триен-3-он

Циклический 1,2-этандиилацеталь (16α,17β,)-17-(циклопропилкарбонил)-16,17-дигидро-3'H-циклопропа[16,17]эстра-5(10),9(11),16-триен-3-она преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение с использованием процедур, описанных в примере 1, стадии e, f, g и h. Очистка с помощью ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 24% после этих 4 стадий). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,70 (с, 3H), 0,68-2,78 (м, 23H), 3,03 (д, J=12, 1H), 4,41 (д, J=8 Гц, 1H), 5,78 (с, 1H), 7,31 (д, J=8 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=4 и 8 Гц, 1H), 7,49 (д, J=8 Гц, 1H), 7,86 (дт, J=2 и 8 Гц, 1H), 8,57 (дд, J=2 и 5 Гц, 1H), 8,83 (д, J=3 Гц, 1H).

Пример 22

Получение 3-оксима (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

Гидрохлорид гидроксиламина (20 мг, 0,30 ммоль) и воду (1 мл) добавляют к перемешиваемому раствору 100 мг (0,20 ммоль) (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она в диоксане (2 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, а затем экстрагируют три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои сушат посредством фильтра с разделением фаз и выпаривают досуха. Очистка сырого продукта с помощью ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает 3-оксим (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она в виде смеси E/Z (2:1) (85 мг, 0,17 ммоль, выход 84%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,31 и 0,32 (2×с, in total 3H), 0,83-2,95 (м, 25H), 4,37-4,42 (м, 1H), 5,89 и 6,55 (2×с, in total 1H), 7,26-7,32 (м, 2H), 7,35 (дд, J=8 и 5 Гц, 1H), 7,47-7,51 (м, 2H), 7,86 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,57 (дд, J=5 и 1 Гц, 1H), 8,84 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 23

Получение (11β)-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-17,24-цикло-19,21-динорхола-4,9-диен-3,20-диона

В соответствии с процедурами, описанными в примере 1, стадии e, f, g и h, циклический 3-(1,2-этандиилацеталь) 17,24-цикло-19,21-динорхола-5(10),9(11)-диен-3,20-диона (патент США №5084450) преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение. Очистка с помощью препаративной ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 18%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,47 (с, 3H), 1,24-2,82 (м, 22H), 4,48 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,23-7,27 (м, 2H), 7,35 (дд, J=8 и 4 Гц, 1H), 7,46-7,51 (м, 2H), 7,84 (дт, J=8 и 1 Гц, 1H), 8,58 (дд, J=4 и 1 Гц, 1H), 8,82 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 24

Получение (11β)-11-[4-(6-метоксипиридин-3-ил)фенил]-17,24-цикло-19,21-динорхола-4,9-диен-3,20-диона

С использованием процедур, применяемых в примере 25, и с использованием 6-метокси-3-пиридинилбороновой кислоты в виде бората на последней стадии, указанное в заголовке соединение получают из циклического 3-(1,2-этандиилацеталя) 17,24-цикло-19,21-динорхола-5(10),9(11)-диен-3,20-диона (выход 17%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,47 (с, 3H), 1,25-2,81 (м, 22H), 3,98 (с, 3H), 4,46 (д, J=7 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 6,80 (д, J=9 Гц, 1H), 7,18-7,22 (м, 2H), 7,40-7,44 (м, 2H), 7,75 (дд, J=9 и 2 Гц, 1H), 8,36 (д, J=2 Гц, 1H).

Пример 25

Получение гидрохлорида (11β)-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-17,24-цикло-19,21-динорхола-4,9-диен-3,20-диона

С использованием процедуры, описанной в примере 2, (11β)-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-17,24-цикло-19,21-динорхола-4,9-диен-3,20-дион преобразуется в гидрохлорид (11β)-11-[4-(3-пиридинил)фенил]-17,24-цикло-19,21-динорхола-4,9-диен-3,20-диона (выход 100%). ¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃): (0,45 (с, 3H), 1,33-2,80 (м, 22H), 4,50 (д, J=7 Гц, 1H), 5,82 (с, 1H), 7,30-7,33 (м, 2H), 7,50-7,53 (м, 2H), 7,69-7,72 (м, 1H), 8,25 (д, J=7 Гц, 1H), 8,64 (д, J=5 Гц, 1H), 8,90 (д, J=1 Гц, 1H).

Пример 26

(6β,11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-6,16-диметил-11-[4-(3-пиридинил)фенил]эстра-4,9-диен-3-он

В соответствии с процедурами, описанными в примере 1, циклический 3-(1,2-этандиилацеталь) (6β)-6-метилэстра-5(10),9(11)-диен-3,17-диона преобразуется в сырое указанное в заголовке соединение. Очистка с помощью препаративной ВЭЖХ, с последующей лиофилизацией, дает указанное в заголовке соединение (выход 14%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,38 (с, 3H), 0,85-2,88 (м, 24H), 0,99 (д, J=8 Гц, 3H), 1,32 (д, J=8 Гц, 3H), 4,46 (д, J=8 Гц, 1H), 5,84 (с, 1H), 7,27 (д, J=8 Гц, 1H), 7,41 (дд, J=5 и 8 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8 Гц, 1H), 7,94 (дт, J=2 и 8 Гц, 1H), 8,59 (дд, J=2 и 4 Гц, 1H), 8,90 (д, J=2 Гц, 1H).

Пример 27

Получение (11β,16α,17β)-17-циклопропилкарбонил-16-метил-11-[4-(пиримидин-2-ил)фенил]эстра-4,9-диен-3-она

В соответствии с процедурой, описанной в примере 8, (11β,16α,17β)-11-(4-бромфенил)-17-циклопропилкарбонил-16-метилэстра-4,9-диен-3-он и 2-трибутилстаннилпиримидин нагревают в течение четырех часов при 110°C, с получением указанного в заголовке соединения (выход 17%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): (0,32 (с, 3H), 0,83-2,87 (м, 24H), 4,47 (д, J=7,0 Гц, 1H), 5,80 (с, 1H), 7,18 (т, J=4,7 Гц, 1H), 7,28-7,31 (м, 2H), 8,32-8,35 (м, 2H), 8,79 (д, J=4,7 Гц, 2H).

Пример 28

Активность рецептора B прогестерона при трансактивации

Прогестагенная активность соединения по настоящему изобретению (EC₅₀ и собственная агонистическая активность) определяется в биологическом анализе in vitro клеток яичников китайского хомячка (CHO), как описано W.G.E.J. Schoonen et al., (Anal. Biochem. 261 (1998), 222-224).

Антипрогестагенная активность соединения по настоящему изобретению (IC₅₀ и собственная антагонистическая активность) определяется при условиях, сравнимых с агонистическим анализом, описанным выше, посредством ингибирования трансактивации посредством рецептора B прогестерона фермента люциферазы в присутствии 0,1 нМ индуктора (16α)-16-этил-21-гидрокси-19-норпрегн-4-ен-3,20-диона. Эффективность антагонистического воздействия выражается как процент воздействия, производимого стандартным антагонистом (6β,11β,17β)-11-[4-(диметиламино)фенил]-4',5'-дигидро-6-метилспиро[эстра-4,9-диен-17,2'(3'H)-фуран]-3-оном. Агонистические лиганды не ингибируют трансактивации активности люциферазы, осуществляемой индуктором, в то время как сильные и слабые антипрогестагены, а также соединения со смешанным прогестагенным/антипрогестагенным профилем могут ингибировать трансактивацию, зависящую от уровня дозы используемого антипрогестагена или рассматриваемого соединения со смешанным профилем.

Специалисты в данной области заметят, что при условиях, описанных выше, определенная EC₅₀ является более или менее абсолютной и зависит от собственного свойства самого исследуемого соединения; однако IC₅₀ зависит от количества и агонистической EC₅₀ индуктора, а также от собственного свойства самого исследуемого соединения. Таким образом, при одном и том же количестве индуктора относительно сильный антагонист будет способен создавать измеримую IC₅₀, в то время как относительно слабый антагонист может оказаться неспособным давать детектируемый результат.

Таблица
Пример	PRBago, EC50 [M]	PRBago, Эфф. (%)	PRBant, EC50 [M]	PRBant, Эфф.(%)
1	2E-10	49,2	2,67E-10	46,4
2	3,4E-10	44,5	3,3E-09	47
3	1,2E-10	41,5	6,28E-10	59
4	1,1E-09	46,5	4,7E-10	43
5	4,9E-10	50,5	8,48E-09	50
6	1,3E-09	54	2,8E-08	34
7	1E-09	50	3,14E-09	24
8	3,6E-10	50,5	3,64E-09	37
9	1,13E-09	54	1,3E-09	35
10	2,6E-09	49,25	1,48E-08	32,5
11	1,7E-09	56	8E-10	35
12	4E-09	56	2,5E-09	26,5
13	6,6E-10	46,8	6,10E-10	38
14	5,7E-09	49,75	2,9E-08	34,5
15	7,4E-10	41,4	9,80E-10	44,5
16	2,3E-10	34	5,96E-10	53
17	1,3E-09	42	7,89E-09	51,7
18	8,2E-10	36	7,51E-10	66
19	5,1E-10	28,3	4,27E-10	57
20	4,9E-10	37,5	1,3E-10	58
21	2E-09	18	1,4E-09	58
22	6,4E-10	43	1,47E-09	32
23	2,9E-10	17	3,25E-10	70,8
24	1,5E-10	20	5,46E-10	62
25	4,8E-10	17	1,1E-09	66
26	8,09E-10	46	2,75E-09	17
27	2,54E-09	52	3,25E-09	>27

1. Соединение формулы I

где X представляет собой О, NOH;
А₁-А₅ представляют собой С, замещенный R₁, или N, при условии, что, по меньшей мере, один, но не более чем два из А₁-А₅ представляют собой N; или
один или два из А₁, А₂ и А₅ представляют собой N, а остальные представляют собой С, замещенный R₁, и A₃ и А₄ вместе представляют собой конденсированное бензольное кольцо или конденсированное пяти- или шестичленное азотсодержащее ароматическое кольцо, оба необязательно являются замещенными одним или несколькими атомами галогенов и/или (1-4С)алкилом;
каждый R₁ независимо выбирается из Н, галогена, (1-4С)алкила и (1-4С)алкокси;
R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-6С)алкенил, оба
необязательно замещенные (6-10С)арильной группой; и
R₃ представляет собой Н; и
R₄ представляет собой циклопропил; или
R₂ вместе с R₃ образуют 4- или 5-членное карбоциклическое кольцо;
или
R₃ вместе с R₄ образуют 5- или 6-членное насыщенное карбоциклическое кольцо;
R₅ представляет собой Н или (1-4С)алкил;
или его фармацевтически приемлемая соль и/или гидратированная форма, и/или его пролекарства.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что А₁-А₅ представляют собой С, замещенный R₁, или N, при условии, что, по меньшей мере, один, но не более чем два из А₁-А₅ представляют собой N.

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что один или два из А₁, А₂ и А₅ представляют собой N, а остальные представляют собой С, замещенный R₁, и A₃ и А₄ вместе представляют собой конденсированное бензольное кольцо или конденсированное пяти- или шестичленное азотсодержащее ароматическое кольцо, оба необязательно являются замещенными атомами галогенов и/или (1-4С)алкилом.

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что
R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-6С)алкенил, оба необязательно замещенные (6-10С)арильной группой; и
R₃ представляет собой Н; и
R₄ представляет собой циклопропил.

5. Соединение по п.1, отличающееся тем, что
R₂ вместе с R₃ образуют 4- или 5- членное карбоциклическое кольцо; и
R₄ представляет собой циклопропил.

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R₂ представляет собой Н или (1-4С)алкил; и
R₃ вместе с R₄ образуют 5-, или 6-членное насыщенное карбоциклическое кольцо.

7. Соединение по п.2, отличающееся тем, что
R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-6С)алкенил, оба необязательно замещенные (6-10С)арильной группой, и
R₃ представляет собой Н и
R₄ представляет собой циклопропил.

8. Соединение по п.2, отличающееся тем, что
R₂ вместе с R₃ образуют 4- или 5-членное карбоциклическое кольцо; и
R₄ представляет собой циклопропил.

9. Соединение по п.2, отличающееся тем, что R₂ представляет собой Н или (1-4С)алкил; и
R₃ вместе с R₄ образуют 5- или 6-членное насыщенное карбоциклическое кольцо.

10. Соединение по п.3, отличающееся тем, что
R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-6С)алкенил, необязательно замещенный (6-10С)арильной группой, и
R₃ представляет собой Н.

11. Соединение по п.3, отличающееся тем, что
R2 вместе с R3 образуют 4- или 5-членное карбоциклическое кольцо; и
R4 представляет собой циклопропил.

12. Соединение по п.3, отличающееся тем, что R₂ представляет собой Н или (1-4С)алкил; и
R₃ вместе с R₄ образуют 5- или 6-членное насыщенное карбоциклическое кольцо.

13. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Х представляет собой О.

14. Соединение по п.4, отличающееся тем, что R₄ представляет собой циклопропил.

15. Соединение по п.5, отличающееся тем, что R₄ представляет собой циклопропил.

16. Соединение по п.2, отличающееся тем, что А₁, A₃, А₄ и А₅ представляют собой С, замещенный R₁, и А₂ представляет собой N.

17. Соединение по п.4, отличающееся тем, что R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-4С)алкенил.

18. Соединение по п.13, отличающееся тем, что А₁, A₃, А₄ и А₅ представляют собой С, замещенный R₁, и А₂ представляет собой N;
R₂ представляет собой Н, (1-4С)алкил или (2-4С)алкенил; и R₃ представляет собой Н; и R₄ представляет собой циклопропил; или R₂ вместе с R₃ образуют 4- или 5-членное карбоциклическое кольцо; и R₄ представляет собой циклопропил.

19. Соединение по п.13, отличающееся тем, что А₁, A₃, А₄ и А₅ представляют собой С;
А₂ представляет собой N;
R₁ представляет собой Н;
R₂ представляет собой метил;
R₃ представляет собой Н;
R₄ представляет собой циклопропил;
R₅ представляет собой Н.

20. Соединение по п.13, отличающееся тем, что А₁, A₃, А₄ и А₅ представляют собой С;
А₂ представляет собой N;
R₁ представляет собой Н;
R₂ представляет собой этенил;
R₃ представляет собой Н;
R₄ представляет собой циклопропил;
R₅ представляет собой Н.

21. Соединение по любому из пп.1-20, предназначенное для применения в терапии.

22. Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из пп.1-20 и фармацевтически приемлемый носитель.

23. Фармацевтическая композиция по п.22, предназначенная для контрацепции.

24. Фармацевтическая композиция по п.22, предназначенная для гормонзамещающей терапии.

25. Фармацевтическая композиция по п.22, предназначенная для лечения гинекологического расстройства.

26. Применение соединения по любому из пп.1-20 для получения лекарственного средства.

27. Применение соединения по любому из пп.1-20 для получения контрацептива.

28. Применение по п.26, где лекарственное средство предназначено для гормонзамещающей терапии или для лечения гинекологического расстройства.

29. Способ контрацепции, включающий введение фармацевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-20 субъекту, нуждающемуся в этом.

30. Способ лечения гинекологического расстройства, включающий введение фармацевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-20 субъекту, нуждающемуся в этом.