Вакцина против псевдомоноза нутрий
Владельцы патента RU 2388488:
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный университет (RU)
Изобретение относится к ветеринарной медицине. Вакцина включает инактивированный антиген и адъювант. В качестве антигена вакцина содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, полученной путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясо-пептонном бульоне до концентрации микробных клеток 5-6 млрд. в 1 см3. Вакцина также содержит формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, выделенной из пораженных органов павших нутрий из местного эпизоотического очага в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3 83,0-85,5, формалин - 1,0-2,0, гидроокись алюминия - остальное. Вакцина безвредна, высокоиммуногенна, стабильна при хранении. 1 табл.
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам, и может быть использовано в учреждениях, занимающихся конструированием биологических препаратов, а также на предприятиях биологической промышленности.
Известна вакцина против сальмонеллеза кур и способ профилактики сальмонеллеза кур, содержащая суспензию клеток вакцинного штамма Salmonella enteritidis ВГНКИ 204 с концентрацией живых микробных клеток 175-250 млрд. в 1 см3 при следующем соотношении компонентов, об.%:
| суспензия клеток штамма Salmonella enteritidis ВГНКИ 204 с концентрацией живых микробных клеток 175-250 млрд. в 1 см3 | 42,0-55,0 |
| сахароза | 5,0-7,5 |
| желатин | 1,5-2,0 |
| дистиллированная вода | остальное |
Для профилактики сальмонеллеза кур эту вакцину вводят цыплятам 2-3 дневного возраста с водой путем выпаивания из расчета 0,5-1,0 млрд. микробных клеток на одного цыпленка, двукратно с интервалом 48 ч после 18-24 часовой голодной выдержки (патент РФ №2030916 от 07.04.92, МКИ А61 39/125, 39/135), для нутрий не применяется.
Известна вакцина против стрептококкоза нутрий (патент РФ на изобретение №2099082 от 30.09.94, МКИ А61 39/125, 39/135). Данная вакцина содержит в качестве антигена суспензию штамма Streptococcus zooepidemicus ВГНКИ №К-ДЕП с титром 4,0-6,0 млрд. микробных клеток в 1 см3 в культуральной среде, глюкозу, формалин и гидроокись алюминия.
Данная вакцина применяется для профилактики стрептококкоза нутрий. Сырье получают путем культивирования штамма возбудителя стрептококкоза нутрий в питательной среде с низкой активностью. Эта вакцина может вызывать у привитых животных различные поствакцинальные осложнения (воспалительные процессы, абсцессы на месте введения, хромоту и др.).
Техническим решением задачи изобретения является устранение перечисленных недостатков, в частности, повышение специфичности и иммуногенности вакцины против псевдомоноза нутрий, стабильной при хранении, путем введения новой культуры возбудителя и эффективных компонентов.
Решение задачи достигается тем, что вакцина против псевдомоноза нутрий, включающая инактивированный антиген, адъювант, в качестве антигена содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, полученной путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясо-пептонном бульоне с глюкозой до концентрации микробных клеток 5-6 млрд. в 1 см3, формалина и гидроокиси алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3 | 83,0-85,5 |
| формалин | 1,0-2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что в отличие от известных вакцин для получения сырья проводят отбор пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовление суспензии, посев на дифференциально-диагностические среды, выделение чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa и выращивание его в мясо-пептонном бульоне, что позволяет повысить специфичность, иммуногенность вакцины и получать концентрацию микробных клеток не менее 5-6 млрд. в 1 см3. Инактивирование баксырья формалином в 0,4-0,5%-ной конечной концентрации при температуре 37°С в течение 48-72 часов при периодическом перемешивании позволяет подавить патогенность возбудителя и сохранить иммуногенные свойства в течение 12 месяцев. Использование 3%-ного раствора гидроокиси алюминия в количестве 20% к объему и тщательное смешивание не вызывает у привитых нутрий поствакцинальных осложнений, позволяет обеспечить формирование напряженного иммунитета через 12-15 суток после однократного внутримышечного или подкожного введения продолжительностью не менее 9 месяцев (срок наблюдения).
По данным научно-технической и патентной литературы не обнаружена аналогичная совокупность признаков, компонентов, что позволяет судить об изобретательском уровне заявленного технического решения.
Что касается критерия «промышленная применимость», то компоненты, входящие в состав вакцины, известны и широко применяются в ветеринарной практике при изготовлении инактивированных вакцин (инструкция по изготовлению и контролю формолвакцины поливалентной гидроокисьалюминиевой против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, телят и ягнят, утвержденная ГУВ МСХ СССР 26.04.1984 г.; инструкция по изготовлению и контролю вакцины против брадзота, инфекционной энтеротоксемии, злокачественного отека овец и дизентерии ягнят, поливалентная концентрированная гидроокисьалюминиевая, утвержденная Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией 10.10.1991 г.).
Предложенная вакцина против псевдомоноза нутрий проста в исполнении, доступна и является промышленно применимой.
Вакцина против псевдомоноза нутрий содержит инактивированную формалином чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, адсорбированную на гидрате окиси алюминия. По внешнему виду вакцина представляет собой жидкость светло-желтого цвета с рыхлым осадком, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь. Срок хранения в сухом, темном месте при температуре от 2 до 10°С 1 год. Вакцина против псевдомоноза нутрий предназначена для профилактики инфекционного заболевания нутрий. Она вызывает образование специфического иммунитета против псевдомоноза нутрий. Вакцина безвредна и ареактогенна. Иммунитет у нутрий, привитых вакциной против псевдомоноза, формируется через 12-15 суток после вакцинации и сохраняется не менее 9 месяцев. Вакцину применяют в благополучных, неблагополучных и угрожаемых по псевдомонозу нутрий хозяйствах. В благополучных и угрожаемых по псевдомонозу хозяйствах вакцину вводят однократно внутримышечно в область бедра молодняку с 2-месячного возраста по 0,5 см3, а взрослым животным по 1,0 см3. В неблагополучных хозяйствах вакцину вводят внутримышечно в область бедра с 2-месячного возраста двукратно с интервалом 7-10 дней: первая вакцинация в дозе 0,5 см3, вторая - в дозе 1,0 см3. Продукты убоя вакцинированных нутрий используют без ограничений независимо от сроков вакцинации.
К факторам, обуславливающим получение вакцины заданного свойства, относятся последовательность изготовления и процентное соотношение между компонентами, входящими в препарат. Приведено пять примеров, содержащих компоненты в различных соотношениях на 100 см3 вакцины.
Пример 1.
Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию клеток чистой культуры 82,0 с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 0,9, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, выделенная из пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага при псевдомонозе в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. в 1 см3 | 82,0 |
| формалин | 0,9 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против псевдомоноза нутрий обладает незначительной эффективностью, может у отдельных животных вызывать слабое раздражение на месте введения.
Пример 2.
Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 83,0 с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 1,0, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензию клеток чистой культуры | |
| возбудителя Pseudomonas aeruginosa, | |
| выделенной из местного эпизоотического очага | |
| в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. | |
| микробных клеток в 1 см3 | 83,0 |
| формалин | 1,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против псевдомоноза нутрий обладает хорошей иммуногенной активностью, не вызывает у животных поствакцинальных осложнений.
Пример 3.
Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 84,5 с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 1,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, выделенной из местного эпизоотического очага в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3 | 84,5 |
| формалин | 1,5 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против псевдомоноза нутрий обладает незначительной эффективностью, может у отдельных животных вызывать слабое раздражение на месте введения.
Пример 4.
Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток чистой культуры 85,5 с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 2,0, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры | |
| возбудителя Pseudomonas aeruginosa, | |
| выделенной из местного эпизоотического очага | |
| в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. | |
| микробных клеток в 1 см3 | 85,5 |
| формалин | 2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против псевдомоноза нутрий обладает выраженной эффективностью, не вызывает у животных воспалительных процессов на месте введения (таблица 1).
Пример 5.
Берут пораженные органы от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготавливают суспензию из патологического материала, делают посев на дифференциально-диагностические среды, выделяют чистую культуру возбудителя Pseudomonas aeruginosa, заражают мясо-пептонный бульон, культивируют, получают, инактивируют и смешивают (мас.%) суспензию микробных клеток 86,5 с титром 5-6 млрд. микробных клеток в 1 см3, инактивируют внесением формалина 2,5, затем добавляют гидроокись алюминия - остальное, тщательно смешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры | |
| возбудителя Pseudomonas aeruginosa, | |
| выделенной из местного эпизоотического очага | |
| в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд. | |
| микробных клеток в 1 см3 | 86,5 |
| формалин | 2,5 |
| гидроокись алюминия | остальное |
При данном соотношении компонентов вакцина против псевдомоноза нутрий обладает слабой иммуногенной активностью, не вызывает у животных поствакцинальных осложнений.
Таким образом, предлагаемая вакцина против псевдомоноза нутрий более специфична и эффективнее по сравнению с прототипом.
Вакцина против псевдомоноза нутрий, включающая инактивированный антиген, адъювант, отличающаяся тем, что в качестве антигена содержит суспензию клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa, полученной путем отбора пораженных органов от павших нутрий из местного эпизоотического очага, приготовления суспензии, посева на дифференциально-диагностические среды, выделения чистой культуры возбудителя и выращивания в мясо-пептонном бульоне до концентрации микробных клеток 5-6 млрд в 1 см3, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| суспензия клеток чистой культуры возбудителя | |
| Pseudomonas aeruginosa, выделенной из пораженных | |
| органов павших нутрий из местного эпизоотического | |
| очага в мясо-пептонном бульоне с титром 5-6 млрд | |
| микробных клеток в 1 см3 | 83,0-85,5 |
| формалин | 1,0-2,0 |
| гидроокись алюминия | остальное |
