Способ концентрирования препаратов антител

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ концентрирования препаратов антител. Способ включает последовательные стадии ультрафильтрации первого препарата антитела с получением второго препарата антитела, диафильтрации второго препарата антитела с получением промежуточного препарата антитела и второй ультрафильтрации промежуточного препарата антитела с получением третьего препарата антитела. Все стадии процесса осуществляют при температуре от примерно 30°С до примерно 50°С. 51 з.п. ф-лы, 25 ил., 25 табл.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Способ приготовления высоко сконцентрированного состава антитела, содержащий:
(a) первую ультрафильтрацию первого препарата антитела для получения второго препарата антитела;
(b) диафильтрацию второго препарата антитела для получения промежуточного диафильтрованного препарата антитела; и
(c) вторую ультрафильтрацию промежуточного препарата антитела для получения третьего препарата антитела, в котором вышеуказанные стадии процесса выполняют при температуре от примерно 30°С до примерно 50°С.

2. Способ по п.1, в котором антителом является анти-IgE антитело.

3. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре от примерно 35°С до примерно 50°С.

4. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре от примерно 45±5°С.

5. Способ по п.1, в котором одну или несколько стадий первой ультрафильтрации, второй ультрафильтрации и диафильтрации выполняют при температуре примерно 45°С.

6. Способ по п.1, в котором стадии (а), (b) и (с) выполняют при температуре от примерно 40°C до примерно 50°С.

7. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела имеет концентрацию от примерно 0,1 до примерно 10 г/л.

8. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела имеет концентрацию от примерно 1 г/л до примерно 5 г/л.

9. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 10 г/л до примерно 50 г/л.

10. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 20 г/л до примерно 50 г/л.

11. Способ по п.1, в котором второй препарат антитела имеет концентрацию от примерно 20 г/л до примерно 40 г/л.

12. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 50 г/л до примерно 250 г/л.

13. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 100 г/л до примерно 230 г/л.

14. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 170 г/л до примерно 200 г/л.

15. Способ по п.1, в котором промежуточный препарат антитела и третий препарат антитела содержат ретентат ультрафильтрации.

16. Способ по п.1, в котором промежуточный препарат антитела имеет концентрацию от примерно 25 г/л до примерно 35 г/л, и третий препарат антитела имеет концентрацию от примерно 170 г/л до примерно 200 г/л.

17. Способ по п.1, в котором первая ультрафильтрация первого препарата антитела обеспечивает второй препарат антитела, имеющий концентрацию примерно 30 г/л, и вторая ультрафильтрация концентрирует промежуточный препарат антитела, чтобы обеспечить третий препарат антитела, имеющий концентрацию от примерно 170 до примерно 200 г/л.

18. Способ по п.1, в котором процесс выполняется в течение от примерно 1 ч до примерно 10 ч.

19. Способ по п.1, в котором процесс выполняется от примерно 2 ч до примерно 5 ч.

20. Способ по п.1, в котором процесс выполняется примерно в течение 3 ч.

21. Способ по п.1, в котором первую и вторую ультрафильтрацию выполняют с использованием мембраны ультрафильтрации, имеющей номинальный размер пор, соответствующий молекулярному весу от примерно 5 кДа до примерно 50 кДа.

22. Способ по п.1, в котором первую и вторую ультрафильтрацию выполняют с использованием мембраны ультрафильтрации, имеющей номинальный размер пор, соответствующий молекулярному весу от примерно 10 кДа до примерно 30 кДа.

23. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела содержит антитело, имеющее средний молекулярный вес от примерно 100 кДа до примерно 200 кДа.

24. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела содержит антитело, имеющее средний молекулярный вес примерно 150 кДа.

25. Способ по п.1, в котором на стадиях (а), (b) и (с) используется мембрана ультрафильтрации.

26. Способ по п.1, в котором первая ультрафильтрация и вторая ультрафильтрация выполняется с той же самой мембраной ультрафильтрации.

27. Способ по п.1, в котором мембрана ультрафильтрации, используемая на стадии фильтрации (а), используется на стадии (b) и на стадии (с).

28. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют в режиме тангенциального потока по отношению к мембране ультрафильтрации.

29. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют в режиме тангенциального потока по отношению к одной и той же мембране ультрафильтрации.

30. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию, вторую ультрафильтрацию осуществляют с мембраной ультрафильтрации с композитом регенерированной целлюлозы.

31. Способ по п.1, в котором диафильтрацию выполняют с заменой буфера при постоянном объеме или при постоянной концентрации, или же может использоваться сочетание обоих режимов.

32. Способ по п.1, в котором замену буферного раствора при диафильтрации осуществляют с кратностью от примерно 5 до примерно 15.

33. Способ по п.1, в котором замену объема буферного раствора при диафильтрации осуществляют примерно 8 раз.

34. Способ по п.1, в котором стадия (b) включает более одной стадии диафильтрации.

35. Способ по п.34, в котором первая стадия диафильтрации включает замену буферного раствора при диафильтрации примерно 4 раза, и вторая стадия диафильтрации включает замену буферного раствора при диафильтрации примерно 4 раза.

36. Способ по п.1, в котором при диафильтрации первый буферный раствор заменяют вторым буферным раствором.

37. Способ по п.1, в котором при диафильтрации используют буферный раствор, имеющий состав, который отличается от состава буферного раствора на стадии (а).

38. Способ по п.36, в котором первый буферный раствор содержит смесь водного хлористого натрия и трис-буфера.

39. Способ по п.36, в котором второй буферный раствор включает смесь водного раствора гистидина хлорида и аргинина хлорида.

40. Способ по п.1, в котором выход третьего препарата антитела превышает примерно 70 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.

41. Способ по п.1, в котором выход третьего препарата антитела составляет от примерно 80 до 100 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.

42. Способ по п.2, в котором выход третьего препарата антитела превышает примерно 98 вес.% от веса антитела в первом препарате антитела.

43. Способ по п.1, в котором первую ультрафильтрацию осуществляют при интенсивности рециркуляции от примерно 0,5 л/мин/фут² до примерно 5 л/мин/фут².

44. Способ по п.1, в котором ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют при трансмембранном давлении от примерно 10 psi до примерно 50 psi.

45. Способ по п.1, в котором ультрафильтрацию и диафильтрацию осуществляют при трансмембранном давлении от примерно 10 psi до примерно 50 psi.

46. Способ по п.1, в котором пропускная способность для стадии (с) составляет примерно 80 г/фут²/ч, примерно 120 г/фут² /ч, примерно 135 г/фут²/ч, примерно 145 г/фут²/ч, примерно 175 г/фут²/ч, примерно 180 г/фут²/ч, примерно 265 г/фут²/ч, примерно 285 г/фут²/ч или примерно 290 г/фут²/ч.

47. Способ по п.1, в котором уровень агрегированных загрязнителей составляет менее 2 вес.%.

48. Способ по п.1, в котором обеспечивается концентрация антитела с обнаруживаемым количеством биозагрязнителей менее чем примерно 100 КОЕ/мл.

49. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет количество обнаруживаемых биозагрязнителей порядка 18 КОЕ/мл.

50. Способ по п.1, в котором третий препарат антитела имеет количество обнаруживаемых биозагрязнителей порядка 0,13 КОЕ/мл.

51. Способ по п.1, в котором первый препарат антитела подвергается очистке до поступления на стадию (а).

52. Способ по п.2, в котором антитело, содержавшееся в первом препарате антитела, имеет чистоту примерно 99,8% до поступления на стадию (а).