Способ определения степени активности хронического гепатита

Авторы патента:

Владельцы патента RU 2399056:

Государственное общеобразовательное учреждение высшего профессионального образования Смоленская государственная медицинская академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и касается способа определения степени активности хронического гепатита. Сущность способа заключается в том, что в сыворотке крови исследуют активность церулоплазмина. При значении церулоплазмина 37,9 отн. ед. и ниже диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении церулоплазмина в пределах 38,0-46,4 отн. ед. - среднюю степень активности, при значении церулоплазмина в пределах 46,5-57,9 отн. ед. - умеренную степень. Использование способа позволяет наиболее точно определить степень активности хронического гепатита в амбулаторных условиях. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии.

В настоящее время для оценки степени активности хронического гепатита (ХГ) рекомендуется использовать гистологический индекс степени активности хронического гепатита (по V.Desmet и соавт., 1994), заключающийся в том, что при индексе гистологической активности (ИГА) процесса от 1-3 баллов диагностируется минимальная степень активности хронического гепатита, при ИГА в пределах 4-8 баллов - слабо выраженный хронический гепатит, при ИГА в пределах 9-12 баллов - умеренная степень активности и при ИГА в пределах 13-18 - тяжелая степень активности хронического гепатита (Радченко В.Г., Шабро А.В., Нечаев В.В. Хронические заболевания печени. - СПб.: Лань, 2000. - 53 с.).

Однако следует принимать во внимание то обстоятельство, что по морфологическому исследованию биоптата печени можно оценить лишь 1/50000 ее часть, которая далеко не всегда адекватно отражает состояние целого органа. Во многом результат морфологического исследования зависит от опыта и квалификации морфолога. Кроме того, выполнить биопсию печени в амбулаторных условиях не всегда представляется возможным как из-за наличия тех или иных противопоказаний, так и из-за отказа больного.

В практической медицине известен способ определения степени активности хронического гепатита путем исследования в сыворотке крови активности аланинаминотрансферазы (АЛТ). Если активность АЛТ в сыворотке крови менее 5 норм, то говорят о умеренной степени активности хронического гепатита, от 5 до 10 норм - средней степени активности и более 10 норм - высокой активности (Кишкун А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2007. - 225 с.).

Недостатками данного метода являются высокая стоимость, сложность исследования, при этом от лаборанта требуется высокая квалификация, а также тот факт, что АЛТ является неспецифичным показателем, он повышается при инфаркте миокарда, миокардиодистрофии и т.д.

Известен также способ определения активности хронического гепатита (патент RU №2251108) путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют уровень перекисей липидов (ПЛ) и суммарную антиокислительную активность (АОА) и при значении ПЛ 83,9 отн. ед. и выше, АОА 15,5 отн. ед. и ниже определяют высокую активность хронического гепатита, при ПЛ в пределах 83,8-74,5 отн. ед., АОА - 24,3-15,6 отн. ед. - умеренную степень активности, при ПЛ в пределах 74,4-66,0 отн. ед., АОА - 24,4-33,5 отн. ед. - неактивную степень.

Однако данный способ недостаточно точен, т.к. антиоксидантный статус оценивается по уровню суммарной антиокислительной активности.

Целью изобретения является повышение точности и надежности диагностики степени активности хронического гепатита путем изучения уровня церулоплазмина в сыворотке крови у данных больных.

Сущность изобретения состоит в том, что в сыворотке крови определяют активность церулоплазмина, при значении церулоплазмина 37,9 отн. ед. и ниже диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении церулоплазмина в пределах 38,0-46,4 отн. ед. - среднюю степень активности, при церулоплазмине в пределах 46,5-57,9 отн. ед. - умеренную степень.

Доказано, что целостность клеточных мембран определяется соотношением показателей свободнорадикального окисления липидов (СРОЛ) и антиоксидантной системой. При этом ведущая роль в формировании дисбаланса свободнорадикального окисления липидов (СРОЛ) отводится исключительно антиоксидантной недостаточности. Церулоплазмин (ЦП) является основным «циркулирующим антиоксидантом» сыворотки крови.

Снижение уровня ЦП однозначно свидетельствует о дестабилизации клеточных структур, т.е., в нашем случае, деструкции мембран гепатоцитов.

Способ осуществляется следующим образом: в сыворотке крови определяют активность ЦП методом электронного парамагнитного резонанса на радиоспектрометре РЭ-1306 при температуре жидкого азота по методу Dodd (Dodd N.J.F. Electron spin resonance study of changes during the development of a mouse myeloid leukaemia. Paramagnetic metal ions // Brit. J.Cancer. - 1975. - Vol.32. - P.108).

В норме активность ЦП составляет 58,0 отн. ед. и выше в сыворотке крови.

Высокую степень активности ХГ диагностируют при величине ЦП 37,9 отн. ед. и ниже, среднюю степень активности при значении ЦП в пределах 38,0-46,4 отн. ед. и умеренную степень при активности ЦП в пределах 46,5-57,9 отн. ед.

Пример 1. Больная П., 24 года. Поступила с жалобами на тяжесть в правом подреберье, выраженную слабость, снижение работоспособности, повышенную утомляемость, сонливость, периодически носовые кровотечения, тошноту, снижение аппетита. Больна в течение 4 лет. При объективном исследовании выявляется умеренная болезненность в правом подреберье. Печень выступает из-под края реберной дуги на 3 см. Размеры 10-15-13 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови - гипохромная анемия, мочи - без особенностей.

Получена сыворотка крови и проведено определение активности ЦП, он составил 35,8 отн. ед. На основании того, что значение ЦП находится в пределах 37,9 отн. ед. и ниже, диагностирована высокая активность ХГ. Это подтверждалось при биохимическом анализе крови (об. белок - 72, альбумины - 55, глобулины - 46 (α₁ - 3, α₂ - 11, β - 12, γ - 20), АЛТ - 884, ACT - 368, ГГТ - 164, Щ.Ф. 137, тимоловая про6а - 8,2). Вирусологические тесты: HBs-Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании: печень - значительно увеличена, отражение от паренхимы усиленное, крупнозернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена. Рекомендовано проводить комплексное лечение ХГ с использованием антиоксидантных препаратов.

Пример 2. Больной С., 30 лет. Поступил с жалобами на повышенную утомляемость, слабость, сонливость, аппетит снижен. Болен в течение 7 лет. При объективном исследовании: печень выступает из-под края реберной дуги 2 см. Размеры на 10-12-11 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи - в пределах нормы.

Проведено биохимическое исследование крови и исследование ЦП. Уровень ЦП составил 41,6 отн. ед. На основании того, что значения ЦП находятся в пределах 38,0-46,4 отн. ед., диагностирована средняя степень активности ХГ. Это подтверждалось при биохимическом анализе крови (об. белок - 72, альбумины - 58, глобулины - 39 (α₁ - 3, α₂- 11, β - 10, γ - 15), АЛТ - 232, ACT - 176, ГГТ - 97, Щ.Ф. - 105, тимоловая проба - 4,1). Вирусологические тесты: HBs-Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании: печень - увеличена, отражение от паренхимы усиленное, среднезернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена.

Пример 3. Больная М., 36 лет. Жалоб не предъявляет. Страдает хроническим вирусным гепатитом С в течение 4 лет. При объективном исследовании: печень по краю реберной дуги. Размеры на 8-9-10 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи - в пределах нормы.

Проведено биохимическое исследование крови и исследование ЦП. Уровень ЦП составил 52,1 отн. ед. На основании того, что значение находится в пределах 46,5-57,9 отн. ед., диагностирована умеренная степень активности ХГ. При биохимическом анализе крови (об. белок - 80, альбумины - 53, глобулины - 46,9 (α₁ - 4,2, α₂- 10,5, β - 16,2, γ - 16), АЛТ - 81, ACT - 55, ГГТ - 19, Щ.Ф. - 126, тимоловая проба - 3,9) определена умеренная степень активности ХГ. Вирусологические тесты: анти-HCV -положительный. При ультразвуковом исследовании: печень - не увеличена, отражение от паренхимы усиленное, мелкозернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена. Показано динамическое наблюдение, при ухудшении показателей показано комплексное лечение с использованием антиоксидантов.

Всего предлагаемым способом обследовано 90 человек. Из них 18 с высокой активностью ХГ, 22 - со средней степенью активности, 20 - с умеренной степенью и 30 практически здоровых людей. Данные сведены в таблицу, где представлены значения ЦП (отн. ед.) сыворотки крови у больных ХГ при различной степени активности заболевания. В норме активность ЦП составила 58,0 отн. ед. и выше в цельной крови.

У всех обследуемых больных (таблица) регистрируется снижение активности ЦП в сыворотке крови независимо от степени активности ХГ по отношению к контрольной группе (Р_3-4<0,05). При сопоставлении изменения степени активности заболевания и уровня ЦП в сыворотке крови у пациентов с ХГ отмечается, что увеличению степени активности заболевания соответствует снижение уровня ЦП.

Так высокой степени активности ХГ соответствует наименьший уровень ЦП в сыворотке крови (P_1-2<0,05, P_1-3<0,05).

Предлагаемый способ оценки степени активности патологического процесса в печени наиболее информативен, точен и надежен, не обременителен и безвреден для больного, исключает влияние субъективных факторов и в сочетании с доступностью и простотой может использоваться как экспресс-метод диагностики степени активности хронического гепатита в поликлинических условиях. Вышеперечисленное позволяет упростить и ускорить обследование данных больных с минимальными затратами сил и средств, определяет показание для назначения антиоксидантных препаратов, а также для оценки эффективности проводимой терапии.

Таблица
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА
	Высокая активность	Средняя степень активности	Умеренная степень активности	Здоровые
N	18	22	20	30
Церулоплазмин (ЦП) M±m (отн.ед.)	34,08±1,16	42,14±1,12	51,18±1,05	65,10±1,43
А (отн.ед.)	37, 9 и ниже	38,0- 46,4	46,5 -57,9	58,0 и выше
Р	P_1-2<	Р_2-3<	P_1-3<	Р_3-4<

Способ оценки степени активности хронического гепатита путем исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют активность церулоплазмина и при значении церулоплазмина 37,9 отн. ед. и ниже диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении церулоплазмина в пределах 38,0 отн. ед. - 46,4 отн. ед.- среднюю степень активности, при церулоплазмине в пределах 46,5 отн. ед. - 57,9 отн. ед. - умеренную степень.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике внутренних болезней. .

Способ изготовления рабочего стандарта сывороток, содержащих антитела к вирусу гепатита с // 2380711

Изобретение относится к способу изготовления рабочего стандарта (PC) сывороток, содержащих антитела к вирусу гепатита С. .

Набор антигенов для раздельного выявления антител к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита с // 2370776

Изобретение относится к диагностическим средствам медицинского назначения, и касается набора для раздельного выявления антител к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.

Способ выявления антител к антигенам вирусов гепатитов // 2360253

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике инфекционных заболеваний и касается способа выявления антител к антигенам вирусов гепатитов. .

Иммуноферментная тест-система для определения поверхностного антигена вируса гепатита в и способ определения поверхностного антигена вирусного гепатита в // 2325655

Изобретение относится к области иммунологии, медицины и биотехнологии. .

Способ одновременного обнаружения антигенов и антител против инфекционного микроорганизма // 2300769

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике in vitro инфекции, вызванной микроорганизмом, а также касается применения реактивов и наборов для обнаружения антигенов и антител против инфекционного микроорганизма.

Тест-система для количественного определения анти-hbs в биологическом образце // 2290642

Изобретение относится к иммунологии. .

Определение комплекса hcv-антиген/антитело // 2274863

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике гепатита С, и касается определения комплекса HCV-антиген/антитело и включает способ определения комплекса, образуемого между HCV-антикоровым антигеном и NS3/4a-антителом, который может распознавать как HCV антигены, так и антитела, присутствующие в образце, при использовании единой твердой основы, а также и твердые подложки для применения в иммуноанализе.

Выделенный оболочечный белок hcv, способ его получения и лекарство, вакцина, фармацевтическая композиция (варианты) его содержащие // 2274643

Изобретение относится к области вирусологии и биотехнологии. .

Способ прогнозирования исходов острого вирусного гепатита с // 2269134

Изобретение относится к медицине, точнее к клинической вирусологии, и может найти применение в клинике инфекционных заболеваний для раннего прогноза исходов острого гепатита С.

Способ диагностики стеатоза печени по биохимическим маркерам // 2403576

Способ дифференциальной диагностики стадий хронизации хронического вирусного гепатита в у подростков // 2407016

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в педиатрии, инфектологии и гепатологии

Способ прогнозирования обострения хронического гепатита с у детей подросткового возраста // 2412444

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть применено для определения обострения течения хронического гепатита С у детей подростков

Способ изготовления панели сывороток с hbsag ad- и ay-субтипов для контроля качества диагностики гепатита в // 2463610

Изобретение относится к технологии изготовления референс-панелей сывороток, содержащих антигены вирусных инфекций

Способ получения слабоположительной контрольной сыворотки, содержащей ad и ay субтипы hbsag // 2473913

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии и представляет собой способ получения слабоположительной контрольной сыворотки, содержащей AD и AY субтипы HBsAg, включающий отбор донорских сывороток с помощью ИФА, титрование положительной сыворотки, содержащей AD & AY субтипы HBsAg в разводящем стабилизированном растворе, генотипирование, проведение теста термодеградации для установления сроков годности панели, отличающийся тем, что положительные контрольные сыворотки, содержащие AY и AD субтипы HBsAg, разводят до диапазона концентраций от 0,05 до 0,025 МЕ/мл и вязкости, равной вязкости нормальной сыворотки человека, а в качестве разводящего стабилизированного раствора используют отрицательную дефибринизированную и безлипидную сыворотку, не содержащую маркеры HBV инфекции, для выявления которой предназначена искомая тест-система

Способ комплексной диагностики инфекционных заболеваний человека путем твердофазного иммуноферментного анализа // 2488832

Изобретение относится к комплексному иммуноферментному анализу

Способ получения диагностикума для обнаружения антигена гепатита с в реакции агломерации объемной (рао) // 2542475

Изобретение относится к медицинской вирусологии. Предложен способ получения диагностикума для обнаружения антигена гепатита С в реакции агломерации объемной (РАО). Благодаря повышению специфичности реакции и уменьшению сроков исследования крови изобретение может быть успешно использовано в лабораторной диагностике для прямого обнаружения в крови людей вируса гепатита С. 3 табл., 3 пр.

Способ оценки уровня антител, специфичных к различным вариантам hbsag вируса гепатита в // 2616236

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к иммунобиотехнологии, и может быть использовано для оценки потенциала, эффективности и специфической активности вакцин против вируса гепатита В (ВГВ), для изучения антигенных свойств HBsAg с разными субтипами и несущих различные мутации, в том числе серологически значимые мутации иммунологического и вакцинального ускользания, а также для клинической диагностики. Сущность изобретения: при оценке уровня специфических по отношению к тому или иному варианту HBsAg антител, полученных в результате иммунизации, используют сэндвич-ИФА. В качестве иммуносорбента применяют полистироловые планшеты, покрытые поликлональными антителами к HBsAg. Планшеты обрабатывают нативным или рекомбинантным HBsAg, охарактеризованным по генотипу, субтипу и наличию мутаций, после чего добавляют тестируемую сыворотку. На финальном этапе планшеты обрабатывают конъюгатом антител к суммарным иммуноглобулинам IgG, IgM и IgA с пероксидазой хрена и выявляют связавшийся конъюгат по цветной реакции с ТМБ. Способ позволяет увеличить спектр тестируемых антител, специфичных к различным формам HBsAg вируса гепатита В, включая субтипические и мутантные формы, а также провести количественную оценку уровня этих антител. 6 ил., 2 пр.

Средства и способы предсказания ответа на лечение гепатита b // 2640256

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа определения, имеется ли у пациента с гепатитом В (HBV) повышенная вероятность положительного результата лечения гепатита В по сравнению со средней вероятностью в популяции пациентов с гепатитом В. Представленный способ включает установление, содержит ли содержащий нуклеиновую кислоту образец указанного пациента с гепатитом В ассоциированный с положительным результатом G аллель SNP rs 12356193. Изобретение позволяет определить, будет ли пациент с HBV отвечать на HBV-терапию до начала такой терапии, и дает возможность избежать лишних расходов и появления побочных эффектов и осложнений при лечении. 8 з.п. ф-лы, 24 ил., 3 табл., 4 пр.

Способ прогнозирования эффективности лечения гепатита с у детей первого года жизни // 2646510

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и касается способа прогнозирования эффективности лечения гепатита С у детей первого года жизни. Сущность способа: перед проведением противовирусной терапии у ребенка определяют полиморфизм генов, кодирующих IL28 (γIFN) rs809917 и rs12979860, и при наличии:- гомозиготных форм [ТТ] по гену rs809917 и [СС] по гену rs12979860 - прогноз благоприятный,- форм [TG] или [GG] по гену rs809917 и [ТТ] или [СТ] по гену rs12979860 - прогноз неблагоприятный.Способ позволяет заранее, до начала лечения скорректировать терапию, позволяет предсказать его эффективность и, тем самым, выделить группу детей, терапия которым строго показана ввиду очень высокого шанса на излечение до возникновения осложнений, и группу, в которой шанс на успех проводимой терапии минимален, и, учитывая длительность и относительную дороговизну препаратов при отсутствии эффективности, лечение не целесообразно. Предлагаемый способ прост и может найти широкое применение в клинической практике в стационарах и консультативно-диагностических центрах. 2 ил., 2 пр.