Способ извлечения витамина в12 из водного раствора

Авторы патента:

C07H23 - Соединения, содержащие бор, кремний или металл, например хелаты, витамин B12 (эфиры неорганических кислот C07H 11/00; соли металлов классифицируются в группах исходных соединений)

Владельцы патента RU 2425835:

Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Военный авиационный инженерный университет" (г. Воронеж) Министерства обороны Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к химии органических соединений, и может быть использовано при разработке процессов извлечения и определения витаминов. Способ включает приготовление водно-солевого раствора витамина B₁₂ путем его растворения в насыщенном растворе высаливателя, экстракцию и анализ равновесной водной фазы, причем в качестве экстрагента применяют водный раствор полиэтиленгликоля с молярной массой 5000 г/моль, в качестве высаливателя - сульфат аммония, готовят водно-солевой раствор витамина B₁₂, который имеет рН 5,3±0,3, для чего навеску витамина B₁₂ фармакопейной чистоты, взятую на аналитических весах, помещают в мерную колбу, доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, затем экстрагируют витамин B₁₂ водным раствором полиэтиленгликоля с концентрацией 10^-4 моль/дм³, для этого к полученному раствору витамина B₁₂ добавляют водный раствор полиэтиленгликоля при соотношении объемов водно-солевого раствора витамина B₁₂ и раствора полимера 10:1, экстрагируют 6-7 мин до установления межфазного равновесия, для расслаивания системы раствор помещают на 5-7 мин в лабораторную центрифугу при скорости вращения 1000 об/мин, затем водно-солевую фазу отделяют от водно-органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации витамина B₁₂, измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора на УФ-спектрофотометре в кварцевой кювете при толщине светопоглощающего слоя 1 см и длине волны 360 нм, по градуировочному графику находят концентрацию витамина B₁₂ в водном растворе. Достигается повышение коэффициентов распределения и концентрирования, а также - ускорение и повышение безопасности процесса. 1 табл.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является способ экстракционного извлечения и спектрофотометрического определения витамина В₁₂ в водных растворах с применением синергентных смесей монокарбоновая кислота - бензиловый спирт или монокарбоновая кислота - алкилфенол, а также их растворов в хлороформе [Смольская Е.Л. Синергентные смеси для экстракции витамина В₁₂ из водных растворов. / Е.Л.Смольская, О.М.Вострикова, Н.Л.Егуткин // Журн. прикл. химии. - 1993. - Т.66, №3. - С.686-689], включающий приготовление синергентных смесей, экстракцию и спектрофотометрический анализ водного концентрата.

Недостатками способа являются невысокий коэффициент распределения витамина В₁₂, продолжительность за счет стадии приготовления синергентных смесей, применение больших объемов вредно действующих экстрагентов, отсутствие стадии концентрирования для определения малых концентраций витамина В₁₂.

Технический результат заключается в повышении коэффициента распределения витамина В₁₂, концентрировании его из водного раствора полиэтиленгликолем и определении витамина В₁₂ после экстракции в водном растворе УФ-спектрофотометрическим методом без применения синергентных смесей вредно действующих органических растворителей.

Указанный технический результат изобретения достигается тем, что в предлагаемом способе извлечения витамина В₁₂ из водного раствора, включающем приготовление водно-солевого раствора витамина В₁₂ путем его растворения в насыщенном растворе высаливателя, экстракцию и анализ равновесной водной фазы, новым является то, что в качестве экстрагента применяют водный раствор полиэтиленгликоля с молярной массой 5000 г/моль, в качестве высаливателя - сульфат аммония. Готовят водно-солевой раствор витамина B₁₂, который имеет рН 5,3±0,3, для чего навеску витамина В₁₂ фармакопейной чистоты, взятую на аналитических весах, помещают в мерную колбу, доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, затем экстрагируют витамин B₁₂ водным раствором полиэтиленгликоля с концентрацией 10^-4 моль/дм³, для этого к полученному раствору витамина B₁₂ добавляют водный раствор полиэтиленгликоля при соотношении объемов водно-солевого раствора витамина В₁₂ и раствора полимера 10:1, экстрагируют 6-7 мин до установления межфазного равновесия, для расслаивания системы раствор помещают на 5-7 мин в лабораторную центрифугу при скорости вращения 1000 об/мин, водно-солевую фазу отделяют от водно-органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации витамина B₁₂, измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора на УФ-спектрофотометре в кварцевой кювете с толщиной светопоглощающего слоя 1 см при длине волны 360 нм, по градуировочному графику находят концентрацию витамина B₁₂ в водном растворе.

Рассчитывают коэффициент распределения (D) и степень извлечения витамина В₁₂ (R, %) по формулам:

где с_о и с_в - концентрации витамина B₁₂ в водно-органической и водно-солевой фазе; f - соотношение равновесных объемов водно-солевой и водно-органической фаз.

В раствор полимера переходит 98% витамина B₁₂ от его исходного содержания в анализируемом водном растворе.

Осуществление способа иллюстрируется следующим примером.

Пример. Готовят водно-солевой раствор витамина В₁₂, который имеет рН 5,3±0,3, для чего навеску витамина B₁₂ фармакопейной чистоты массой 2 мг, взятую на аналитических весах, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония. Затем экстрагируют витамин B₁₂ водным раствором полиэтиленгликоля с молярной массой 5000 г/моль и концентрацией 10^-4 моль/дм³, для этого к полученному раствору витамина B₁₂ добавляют водный раствор полиэтиленгликоля при соотношении объемов водно-солевого раствора витамина B₁₂ и раствора полимера 10:1. Экстрагируют 7 мин, для расслаивания системы раствор помещают на 5 мин в лабораторную центрифугу при скорости вращения 1000 об/мин. Затем водно-солевую фазу отделяют от водно-органической и анализируют методом УФ-спектро-фотометрии. Строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации витамина B₁₂. Измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора на УФ-спектро-фотометре в кварцевой кювете при толщине светопоглощающего слоя 1 см и длине волны 360 нм, по градуировочному графику находят концентрацию витамина B₁₂ в водном растворе. Рассчитывают коэффициент распределения и степень извлечения витамина B₁₂ по приведенным выше формулам.

В раствор полимера переходит 98% витамина B₁₂ от его исходного содержания в анализируемом водном растворе.

Достигается практически полное извлечение витамина B₁₂, способ выполним. Сравнительные данные известного и предлагаемого способов приведены в таблице.

Согласно прототипу степень однократного извлечения витамина B₁₂ из водного раствора синергентной смесью монокарбоновая кислота - бензиловый спирт около 98%, коэффициент распределения - 53.

Сравнительные характеристики известного и предлагаемого способов
Показатель	Прототип	Данные примера
Экстрагент	Монокарбоновая кислота - бензиловый спирт	Полиэтиленгликоль
Высаливатель	-	(NH₄)₂SO₄
Степень извлечения, %	≈98	98
Коэффициент распределения	53	4200
Соотношение объемов водной и органической фаз	1:1	10:1
Коэффициент концентрирования	≈1	≈80

Если использовать водно-солевые растворы витамина B₁₂, приготовленные с другим высаливателем или с предложенным высаливателем иной концентрации, применять другие экстрагенты, при соотношении объемов фаз водно-солевого раствора витамина В₁₂ и экстрагента, например 20:1, то коэффициент распределения витамина B₁₂ не достигает 4200.

По предлагаемому способу извлечения витамина B₁₂ из водного раствора при практически одинаковой степени извлечения коэффициенты распределения и концентрирования повышаются почти в 80 раз, появляется возможность определения витамина B₁₂ при концентрациях на уровне 0,3-30 мкг/см³, используется небольшой объем экологически безопасного экстрагента, отсутствует стадия приготовления синергентных смесей вредно действующих растворителей.

Способ извлечения витамина В₁₂ из водного раствора, включающий приготовление водно-солевого раствора витамина В₁₂ путем его растворения в насыщенном растворе высаливателя, экстракцию и анализ равновесной водной фазы, отличающийся тем, что в качестве экстрагента применяют водный раствор полиэтиленгликоля с молярной массой 5000 г/моль, в качестве высаливателя - сульфат аммония, готовят водно-солевой раствор витамина В₁₂, который имеет рН 5,3±0,3, для чего навеску витамина В₁₂ фармакопейной чистоты, взятую на аналитических весах, помещают в мерную колбу, доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, затем экстрагируют витамин В₁₂ водным раствором полиэтиленгликоля с концентрацией 10^-4 моль/дм³, для этого к полученному раствору витамина В₁₂ добавляют водный раствор полиэтиленгликоля при соотношении объемов водно-солевого раствора витамина В₁₂ и раствора полимера 10:1, экстрагируют 6-7 мин до установления межфазного равновесия, для расслаивания системы раствор помещают на 5-7 мин в лабораторную центрифугу при скорости вращения 1000 об/мин, затем водно-солевую фазу отделяют от водно-органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации витамина В₁₂, измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора на УФ-спектрофотометре в кварцевой кювете при толщине светопоглощающего слоя 1 см и длине волны 360 нм, по градуировочному графику находят концентрацию витамина В₁₂ в водном растворе.

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к химии органических соединений, и может быть использовано при разработке процессов выделения и определения витаминов.

Производные кобаламина, предназначенные для диагностики и лечения аномальной пролиферации клеток // 2394042

Способ получения оксикобаламина // 2368618

Ассоциат, содержащий трегалозу и хлорид кальция, в форме кристаллического моногидрата или безводного кристалла // 2317299

Полирибонуклеотидный дуплекс на основе полирибоаденилата и полирибоуридилата // 2165937

Изобретение относится к биохимии, а именно к получению биологически активных веществ, обладающих противовирусным действием. .

Калиевые соли разнолигандных координационных соединений магния с гистидином, аденозин-5'-трифосфатом и креатинфосфатом, проявляющие защитное действие на миокард от ишемического повреждения // 2144922

Изобретение относится к фармакологии, в частности к металлоорганическим соединениям, обладающим биологической активностью, которые могут найти применение в разработке лекарственных средств для профилактики и лечения ишемической болезни сердца.

Способ соединения нуклеозидов 3'-5'-межнуклеотидным силильным звеном // 2079508

Способ получения глюконата кальция // 1810346

Способ выделения витамина в @ // 1717634

Изобретение относится к микробиологии , биохимии и физхимии, в частности к способу выделения витамина 812 из клеток пропионовокислых бактерий. .

Способ получения комплекса иона металла с олигоили полигалактуроновыми кислотами // 886750

Способ раздельного определения витаминов в1 и в12 в водном растворе // 2425836

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к органическому анализу, и может быть использовано при разработке процессов выделения, разделения и определения витаминов в водном растворе

Производное 3'-этинилцитидина // 2441876

Изобретение относится к производным 3 -этинилцитидина, представленным формулой (1): (в которой X представляет собой атом водорода, алкилкарбонильную группу, в которой алкильный фрагмент представляет собой неразветвленную или разветвленную C1 -С6алкильную группу, которая в качестве заместителя(ей) может содержать моно- или дизамещенную неразветвленной или разветвленной С1-С6алкильной группой аминогруппу, или алкоксикарбонильную группу, в которой алкокси-фрагмент представляет собой неразветвленную или разветвленную C1-С6 алкоксигруппу;один из Y и Z представляет собой атом водорода или группу (R1)(R2)(R 3)Si-, а другой представляет собой группу (R4 )(R5)(R6)Si-; и каждый R1, R 2, R3, R4, R5 и R 6, которые могут быть одинаковыми или отличаться друг от друга, представляют собой неразветвленную или разветвленную C 1-С10алкильную группу или С6-С 14арильную группу), или к их солям

Способ получения координационных соединений олигогалактуроновой кислоты с биогенными металлами (ii), как систем доставки биогенных металлов (ii) и систем выведения тяжелых металлов (ii) // 2599494

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и описывает способ получения координационных соединений олигогалактуроновой кислоты с биогенными металлами (II). Способ включает получение из пектинсодержащего препарата олигогалактуроновой кислоты со степенью полимеризации не менее 10, подвергаемой взаимодействию с солью металла (II): меди, кобальта, железа, цинка, марганца, магния в водной среде при нейтральной pH, экспозицию реакционной смеси при комнатной температуре, нейтрализацию образовавшейся кислоты, водную промывку, центрифугирование и высушивание осадка. Согласно изобретению к 1 л 5,0·10-3 M водного раствора очищенной олигогалактуроновой кислоты при перемешивании добавляют сначала 2 M водный раствор гидрата аммиака до pH 8, затем 1 л 4,5·10-2 M водного раствора ацетата металла (II); образующийся гелеобразный осадок обрабатывают 96% этанолом при объемном соотношении 1:2, выдерживают 2 ч. Изобретение обеспечивает доставку биогенных металлов (II), а также выведение катионов тяжелых металлов (II) из организма. 8 табл., 4 ил., 6 пр.