Радиозащитное средство
Предложено использовать в качестве радиопротектора селенотетрацистеин (тетрацистеинат селена (IV)) (СТЦ). СТЦ обладает достаточно высоким уровнем профилактической радиозащитной эффективности при облучении в дозах, близких к абсолютно летальным. По влиянию на 30-суточную выживаемость и среднюю продолжительность жизни мышей и крыс СТЦ аналогичен широко известному в клинической практике цистамина дигидрохлориду (средство-прототип). При этом эффективная доза заявляемого средства в 13 раз меньше, чем у средства-прототипа. По величине терапевтического индекса СТЦ превосходит средство-прототип в 6 раз, что свидетельствует о его существенно большей терапевтической широте. Противолучевая эффективность СТЦ сохраняется на протяжении 2 сут после его введения в организм, в то время как средство-прототип проявляет радиозащитную эффективность в течение 0,5-3,0 ч после введения, а через 24 ч уже не проявляет специфической противолучевой активности. Кроме того, СТЦ отличается хорошей переносимостью. 6 табл.
Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно - к медицинской радиологии, и может быть использовано для профилактики острых радиационных поражений.
Широкое внедрение ядерных технологий во все сферы деятельности человека (промышленное производство, энергетика, наука, медицина и др.) приводит к увеличению общего числа радиационно-опасных объектов и неуклонному повышению вероятности возникновения радиационных аварий. Надежная противорадиационная защита, в том числе фармакологическая, является необходимым условием для обеспечения деятельности ряда специалистов (космонавты, персонал ядерных энергетических и исследовательских установок, личный состав спасательных служб и др.) в аварийных и других экстремальных ситуациях, связанных с риском облучения. Кроме того, имеются достаточно веские основания полагать, что одну из новых реальных угроз в современном мире представляет так называемый «ядерный терроризм».
Рассматривая возможные варианты воздействия ионизирующих излучений (ИИ) на человека и животных, следует отметить, что число лиц, подвергающихся риску сверхнормативного воздействия ИИ, будет постоянно возрастать и проблема их защиты от радиационных поражений на протяжении ближайших десятилетий будет оставаться актуальной.
Противорадиационная защита в широком смысле включает любые действия, в том числе введение в организм фармакологических препаратов, биологически активных веществ и химических соединений, эффекты которых будут способствовать уменьшению риска радиационного поражения. Фармакологическая профилактика лучевых поражений является одним из наиболее эффективных способов противорадиационной защиты [1-3].
В результате многолетних исследований по проблеме фармакологической профилактики острых радиационных поражений создан ряд эффективных средств - так называемых «классических» радиопротекторов (цистамин, гаммафос, мексамин и др.) [4-8]. Большинство из них относится к классу серу- и азотсодержащих химических соединений, радиозащитное действие которых связано с наличием в их структуре легковысвобождаемой SH-группы, инактивирующей радиационно-индуцированные процессы образования свободных радикалов [4, 5]. Выраженность противолучевого эффекта препаратов данной группы пропорциональна дозе введенной действующей субстанции, поэтому «классические» радиопротекторы применяют, как правило, в максимально переносимых (субтоксических) дозах [9]. Практическое применение большинства радиопротекторов, в частности серусодержащих препаратов цистамин (РС-1), цистеин, мексамин и др., ограничено их высокой токсичностью, ограниченной терапевтической широтой и наличием побочных эффектов [10].
Наибольшей радиозащитной эффективностью среди перечисленных «классических» радиопротекторов обладает препарат «Цистамин» (цистамина дигидрохлорид-бис-(β-аминоэтил)дисульфида дигидрохлорид).
Препарат оказывает профилактическое радиозащитное действие и повышает устойчивость организма к действию ионизирующей радиации. Действие препарата основано на способности уменьшать количество радикалов, ионизированных и возбужденных молекул, образующихся при облучении.
В настоящее время цистамина дигидрохлорид является табельным радиопротектором, содержится в спецаптечках и комплектах имущества для оказания медицинской помощи при радиационных поражениях, в связи с чем данный препарат был выбран в качестве средства-прототипа [10].
Цистамина дигидрохлорид представляет собой кристаллический порошок белого или желтоватого цвета со специфическим запахом. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте. Выпускается в таблетках по 0,2 и 0,4 г для перорального применения. Эффективная радиозащитная доза для человека составляет 11-17 мг/кг. Препарат принимается внутрь в количестве 0,8-1,2 г (4-6 таблеток на прием) за 30-60 мин до предполагаемого облучения. Защитный эффект после однакратного приема цистамина дигидрохлорида сохраняется в течение 3 ч. Повторный прием нежелателен в связи с наличием у препарата выраженных побочных эффектов, среди которых наиболее значимыми являются: гипотензивное действие, проявляющееся в значительном и длительном снижении артериального давления, диспепсические проявления (ощущение дискомфорта и жжения в пищеводе и эпигастральной области, боли в области желудка, тошнота, рвота), аллергические реакции и др. Противопоказаниями к применению цистамина дигидрохлорида являются острые заболевания желудочно-кишечного тракта, острая сердечно-сосудистая недостаточность, нарушение функции печени. Препарат обладает весьма ограниченной терапевтической широтой (терапевтический индекс около 3) [11].
Существенными недостатками средства-прототипа, ограничивающими возможности его применения в качестве радиопротектора, являются:
- низкая величина терапевтического индекса;
- большая в весовом отношении эффективная радиозащитная доза;
- наличие выраженного побочного действия;
- малая продолжительность радиозащитного действия.
Учитывая тот факт, что большинство радиопротекторов разработано в 60-е годы прошлого столетия и в настоящее время фактически не соответствуют возросшим современным требованиям по эффективности, безопасности и удобству применения, проблема создания новых средств профилактики радиационных поражений (радиопротекторов) сохраняет свою актуальность для современной медицинской радиологии.
Наиболее значимыми требованиями к разрабатываемым радиопротекторам являются:
- высокий уровень профилактической радиозащитной эффективности (ФИД не менее 1,2);
- относительно невысокая (не превышающая 50 мг/кг веса) величина эффективной радиозащитной дозы;
- высокая терапевтическая широта;
- продолжительность радиозащитного действия не менее 4-6 ч;
- отсутствие (малая выраженность) нежелательных побочных эффектов.
Целью изобретения явилось расширение арсенала средств профилактики острых лучевых поражений в условиях воздействия ионизирующих излучений в дозах, близких к абсолютно летальным, за счет применения радиопротектора, обладающего при аналогичном, по сравнению со средством-прототипом, выраженном противолучевом эффекте, существенно меньшей эффективной радиозащитной дозой, более высоким терапевтическим индексом, большей продолжительностью радиозащитного действия, отличающегося хорошей переносимостью.
Указанная цель достигается применением в качестве радиопротектора препарата селенотетрацистеин (СТЦ) - тетрацистеината селена (IV). Комплексное химическое соединение СТЦ представляет собой четырехвалентный атом селена с присоединенными к нему остатками L-цистеина. Данное химическое соединение было впервые синтезировано в 1942 г. для применения в качестве химического реактива [12]. Сведения о применении СТЦ в медицине и биологии в доступных средствах информации отсутствуют. Данных об изучении и использовании СТЦ в качестве радиозащитного средства не выявлено.
Теоретические предпосылки наличия у СТЦ радиозащитных свойств основаны на том, что содержащаяся в молекуле природная аминокислота L-цистеин обладает слабо выраженными радиозащитными свойствами, связанными с наличием в ее молекуле сульфгидрильной группы [13]. Присутствие в молекуле СТЦ атома селена - одного из самых мощных антиоксидантов, способных блокировать изменение степени окисления металлов переменной валентности, в частности железа, содержащегося в различных ферментных системах, позволяет кардинальным образом увеличить радиозащитную эффективность заявляемого средства.
Возможность достижения цели изобретения доказывается следующими примерами.
Пример 1. Получение заявляемого средства
При синтезе СТЦ использовали L-цистеин гидрохлорид 99% чистоты, химической формулы HSCH2CH(NH2)COOH·HCl [14] (ООО «Баум-Люкс», Москва) и натрий селенистокислый (натрий селенит) чистый, химической формулы Na2SeO3 [15] (ООО «СЕЛЕНИТ», Ставрополь).
Для получения СТЦ к 15 мл водного раствора, содержащего 1,58 г (0,01 моль) L-цистеина гидрохлорида, прибавляли 10 мл водного раствора, содержащего 0,44 г (0,0025 моль) селенита натрия. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при охлаждении в ледяной бане. Полученный осадок отфильтровывали, промывали горячей водой и перекристаллизовывали. Выход сухого кристаллического продукта составлял 1,1 г (78,5%).
При элементном анализе продукта найдено, %: C 24,9; H 4,38; N 9,87; Se 13,95.
Исходя из химической формулы СТЦ (C12H24N4O8S4Se) вычислено, %: С 25,73; Н 4,29; N 10,01; Se 14,16.
С нитропруссидом натрия реакция у полученного продукта отрицательная, что свидетельствует об отсутствии в его структуре свободной меркаптогруппы, характерной для L-цистеина и не характерной для СТЦ.
Полученное вещество представляет собой селенотетрацистеин следующей химической формулы - C12H24N4O8S4Se.
Как видно, синтез заявляемого средства отличается простотой, достаточно большим выходом готового продукта и может проводиться с применением химических реактивов, выпускаемых отечественной промышленностью.
Препарат СТЦ плохо растворим в воде, поэтому в экспериментах заявляемое средство использовали в виде суспензии на твин-80 в дистиллированной воде.
Пример 2. Исследование влияния средства-прототипа и заявляемого средства на выживаемость и среднюю продолжительности жизни мышей, облученных в дозе СД95/30
Эксперименты выполнены на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г. Животных подвергали общему однократному относительно равномерному воздействию гамма-излучения в дозе 7,3 Гр, что соответствует СД95/30, при мощности дозы 1,1 Гр/мин [16]. Коэффициент неравномерности распределения поглощенной дозы по сегментам тела - 10%.
В эксперименте формировали 3 группы животных по 12 особей в каждой.
Животным первой группы радиопротекторы не назначали, за 24 ч до облучения внутрибрюшинно вводили 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия (плацебо) и использовали их в качестве контроля.
Животным второй группы вводили средство-прототип в оптимальные сроки и в оптимальной радиозащитной дозе (внутрибрюшинно в дозе 220,0 мг/кг, за 30 мин до облучения).
Животным третьей группы вводили заявляемое средство однократно внутрибрюшинно в дозе 16,5 мг/кг, за 24 ч до облучения. Объем вводимой суспензии не превышал 0,2 мл.
Критериями противолучевой эффективности исследуемых средств служили выживаемость подопытных животных к 30-м суткам после воздействия ионизирующего излучения и средняя продолжительность жизни (СПЖ) павших животных. Достоверность различий средних значений контролируемых показателей в экспериментальных группах оценивали по непараметрическому критерию Гехана-Вилкоксона.
Результаты исследований представлены в таблице 1, из которой видно, что все животные контрольной группы погибали через 10 сут после облучения. Величина СПЖ составляет 10,5±0,6 сут.
В группе животных, получавших профилактически средство-прототип, выживаемость мышей составила 50,0±14,4%. СПЖ данной экспериментальной группы - 23,3±1,2 сут.
Профилактическое введение заявляемого средства способствовало выживанию 50,0±15,5% особей, облученных в абсолютно летальной дозе. Величина СПЖ составила в этой группе 19,4±1,4 сут.
Таким образом, судя по влиянию на выживаемость и среднюю продолжительность жизни мышей, подвергнутых общему относительно равномерному воздействию гамма-излучения в абсолютно летальной дозе, профилактическая радиозащитная эффективность заявляемого средства (СТЦ) не уступает эффективности средства-прототипа (цистамина дигидрохлорида).
Пример 3. Исследование влияния средства-прототипа и заявляемого средства на выживаемость и среднюю продолжительности жизни крыс, облученных в дозе СД95/30
Эксперименты выполнены на белых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г. Животных подвергали общему однократному относительно равномерному воздействию гамма-излучения в дозе 7,4 Гр, что соответствует СД95/30, при мощности дозы 1,1 Гр/мин [16]. Коэффициент неравномерности распределения поглощенной дозы по сегментам тела - 10%.
В эксперименте формировали 3 группы животных по 12 особей в каждой.
Животным первой группы радиопротекторы не назначали, за 24 ч до облучения внутрибрюшинно вводили 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия (плацебо) и использовали их в качестве контроля.
Животным второй группы вводили средство-прототип внутрибрюшинно в дозе 120,0 мг/кг, за 30 мин до облучения.
Животным третьей группы вводили заявляемое средство однократно внутрибрюшинно в дозе 8,0 мг/кг, за 24 ч до облучения. Объем вводимой суспензии не превышал 0,2 мл.
Критериями противолучевой эффективности исследуемых средств служили выживаемость подопытных животных к 30-м суткам после воздействия ионизирующего излучения и СПЖ павших животных. Достоверность различий средних значений контролируемых показателей в экспериментальных группах оценивали по непараметрическому критерию Гехана-Вилкоксона.
Результаты проведенных исследований, представленные в таблице 2, показали, что облучение контрольной группы животных привело к гибели 100% крыс при СПЖ, составляющей 9,4±2,1 сут.
Применение средства-прототипа приводит к увеличению выживаемости облученных животных до 50,0±14,4% и возрастанию величины СПЖ до 19,8±4,2 сут.
Профилактическое введение в тех же условиях заявляемого средства способствует увеличению выживаемости облученных животных до 41,7±14,2% и возрастанию величины СПЖ до 13,2±2,6 сут.
Таким образом, судя по влиянию на выживаемость и СПЖ крыс, подвергнутых общему относительно равномерному воздействию гамма-излучения в абсолютно летальной дозе, профилактическая радиозащитная эффективность заявляемого средства не уступает эффективности средства-прототипа.
Пример 4. Оценка профилактической радиозащитной эффективности средства-прототипа и заявляемого средства по влиянию на величину ФИД в опытах на мышах
Величина фактора изменения дозы (ФИД) является одним из основных критериев оценки специфической противолучевой активности средств профилактики острых радиационных поражений (радиопротекторов) и представляет отношение величины среднесмертельной дозы облучения (СД50/30) в экспериментальной группе при применении радиопротектора к величине СД50/30 в контрольной группе (при введении плацебо) [10].
В экспериментах, выполненных на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г., были сформированы 33 экспериментальные группы по 12 особей в каждой.
Животным 1-11 экспериментальных групп радиопротекторы не назначали, за 24 ч до облучения внутрибрюшинно вводили 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия (плацебо) и использовали их в качестве контроля.
Животным 12-22 экспериментальных групп вводили средство-прототип внутрибрюшинно в дозе 220,0 мг/кг, за 30 мин до облучения.
Животным 23-33 экспериментальных групп вводили заявляемое средство однократно внутрибрюшинно в дозе 16,5 мг/кг, за 24 ч до облучения. Объем вводимой суспензии не превышал 0,2 мл.
После введения исследуемых препаратов подопытных животных всех экспериментальных групп подвергали общему однократному относительно равномерному воздействию гамма-излучения в дозах от 4,0 до 9,0 Гр с шагом по 0,5 Гр. Мощность дозы - 1,1 Гр/мин. Коэффициент неравномерности распределения поглощенной дозы по сегментам тела - 10%.
Результаты исследований, представленные в таблице 3, показали, что величина среднесмертельной дозы гамма-облучения (СД50/30) в данных условиях составляет 6,1 Гр. Профилактическое введение средства-прототипа увеличивает величину СД50/30 до 7,5 Гр, что соответствует значению ФИД, составляющему 1,23. В случае профилактического введения заявляемого средства величина СД50/30 возрастает до 7,6 Гр, что соответствует значению ФИД, равному 1,25.
Таким образом, профилактическая радиозащитная эффективность заявляемого средства, оцениваемая по величине фактора изменения дозы, не уступает радиозащитной эффективности средства-прототипа.
Пример 5. Определение величины терапевтического индекса, оптимальных радиозащитных и среднесмертельных доз средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на мышах
В экспериментах, выполненных на белых беспородных мышах-самцах массой 18-22 г, условия проведения которых описаны в примере 2, осуществляли определение величины терапевтического индекса, среднесмертельных (СД50/3) и эффективных (ЕД) доз заявляемого средства и средства-прототипа.
Результаты исследований, приведенных в таблице 4, показали, что среднесмертельная доза средства-прототипа для мышей составляет 450,0 мг/кг, тогда как его эффективная доза равна 220,0 мг/кг. Терапевтический индекс средства-прототипа, представляющий отношение среднесмертельной (СД50/3) и эффективной (ЕД) доз, равен 2,0.
Среднесмертельная доза заявляемого средства составляет 200,0 мг/кг, эффективная доза - 16,5 мг/кг, а величина терапевтического индекса - 12,0.
Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что эффективная (оптимальная радиозащитная) доза заявляемого средства в 13 раз меньше, чем у средства прототипа.
По значению показателя терапевтического индекса заявляемое средство превосходит средство-прототип в 6 раз.
Пример 6. Определение продолжительности радиозащитного действия средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на мышах
В экспериментах, выполненных на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г., были сформированы 12 экспериментальных групп по 12 особей в каждой.
Животным 1-4 экспериментальных групп радиопротекторы не назначали, за 24 ч до облучения внутрибрюшинно вводили 0,2 мл изотонического раствора хлорида натрия (плацебо) и использовали их в качестве контроля.
Животным 5-8 экспериментальных групп вводили средство-прототип внутрибрюшинно в дозе 220,0 мг/кг.
Животным 9-12 экспериментальных групп вводили заявляемое средство однократно внутрибрюшинно в дозе 16,5 мг/кг. Объем вводимой суспензии не превышал 0,2 мл.
Препараты вводили за 30 мин, 6 ч, 24 ч и 48 ч до облучения.
После введения исследуемых препаратов подопытных животных всех экспериментальных групп подвергали общему однократному относительно равномерному воздействию гамма-излучения в дозе 7,4 Гр. Мощность дозы - 1,1 Гр/мин. Коэффициент неравномерности распределения поглощенной дозы по сегментам тела - 10%.
Результаты проведенных исследований, представленные в таблице 5, показали, что наибольшую противолучевую эффективность средство-прототип проявляет через 30 мин после введения. Выживаемость мышей, облученных в абсолютно летальной дозе через 30 мин после введения средства-прототипа, составила 50±14%. В группе животных, подвергнутых облучению через 6 ч после введения средства-прототипа, выживаемость составила лишь 20±10%. Через 24 ч после введения средство-прототип уже не проявляет специфическую противолучевую активность.
В результате облучения, проведенного через 6 ч после профилактического введения заявляемого средства, выживаемость подопытных животных составила 20±10%. Выживаемость мышей, облученных через 24 ч и 48 ч после профилактического введения заявляемого средства, находится на достаточно высоком уровне, составляющем 50±14% и 40±13% соответственно.
Полученные данные свидетельствуют о большей продолжительности радиозащитного действия заявляемого средства. Высокая противолучевая эффективность заявляемого средства сохраняется на протяжении 2 сут после его введения, в то время как средство-прототип через 24 ч после введения уже не проявляет специфическую противолучевую активность.
Пример 7. Исследование переносимости средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на крысах
В экспериментах, выполненных на белых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г., осуществляли сравнительную оценку влияния средства-прототипа и заявляемого средства на показатели поведенческой активности крыс с использованием метода «открытое поле». Условия введения исследуемых препаратов описаны в примере 3.
Результаты экспериментов представлены в таблице 6. Как видно, введение крысам средства-прототипа существенно изменяет поведение подопытных животных. К моменту развития противолучевого эффекта (через 30 мин после введения препарата) у крыс наблюдается вялость, сонливость, малоподвижность, снижение реакции на внешние раздражители. Тестирование подопытных животных по методу «открытое поле» показало, что уровень двигательной и ориентировочно-исследовательской активности при этом существенно ниже, чем у крыс контрольной группы. Так, на фоне увеличения времени неподвижного сидения у крыс, получавших средство-прототип, число пересечений границ квадратов было в 1,75 раз меньше, чем в контрольной группе, а число вертикальных стоек и норковых реакций было ниже в 2,2 и 3,3 раза соответственно.
Введение животным заявляемого средства не вызывает заметных изменений в поведении крыс, оцениваемом по общей двигательной активности и наличию сложных ориентировочно-исследовательских форм поведения (вертикальные стойки, норковые реакции). Это свидетельствует о том, что заявляемое средство отличается хорошей переносимостью.
Таким образом, проведенные исследования показали, что заявляемое средство (СТЦ) обладает достаточно высоким уровнем профилактической радиозащитной эффективности при облучении в дозах, близких к абсолютно летальным. По влиянию на 30-суточную выживаемость и среднюю продолжительность жизни мышей и крыс заявляемое средство аналогично широко известному в клинической практике средству-прототипу (цистамина дигидрохлорид). При этом эффективная доза заявляемого средства в 13 раз меньше, чем у средства-прототипа. По величине терапевтического индекса заявляемое средство превосходит средство-прототип в 6 раз, что свидетельствует о его существенно большей терапевтической широте. Противолучевая эффективность заявляемого средства сохраняется на протяжении 2 сут после его введения в организм, в то время как средство-прототип проявляет радиозащитную эффективность в течение 0,5-3,0 ч после введения, а через 24 ч уже не проявляет специфической противолучевой активности. Кроме того, заявляемое средство отличается хорошей переносимостью.
На основании полученных экспериментальных данных можно сделать вывод о достижении цели изобретения - расширении арсенала средств эффективной фармакологической противорадиационной зашиты организма в условиях воздействия ионизирующих излучений в дозах, близких к абсолютно летальным.
Заявляемое изобретение удовлетворяет критерию «новизна», так как впервые доказано наличие у препарата СТЦ специфического профилактического радиозащитного действия, проявляющегося в повышении выживаемости, величины средней продолжительности жизни и показателя ФИД. По радиозащитной эффективности заявляемое средство сопоставимо со средством-прототипом (цистамина дигидрохлорид), но существенно превосходит его по таким показателям, как терапевтический индекс, величина эффективной радиозащитной дозы и продолжительность действия.
Заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень», так как на основании доступной информации возможность применения селенотетрацистеина в качестве радиопротектора при радиационных поражениях не представляется очевидной.
Соответствие заявляемого изобретения критерию «пригодность для применения» подтверждается приведенными примерами, показавшими достаточно простую технологию синтеза заявляемого радиопротектора с применением недорогих, доступных, выпускаемых отечественной промышленностью химических реактивов, а также результатами многочисленных исследований, подтвердившими его высокую профилактическую эффективность при облучении в дозах, близких к абсолютно летальным, сочетающуюся с существенно меньшей по весу эффективной дозой, более высоким терапевтическим индексом, более продолжительным радиозащитным действием и хорошей переносимостью.
Литература
1. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных. - М.: Высшая школа, 2004. - 549 с.
2. Радиация. Дозы, эффекты, риск. (Обзор НКДАР при ООН): Пер. с англ. - М.: Мир, 1990. - 79 с.
3. Военная токсикология, радиобиология и медицинская защита. - Под ред. С.А.Куценко. - СПб.: Фолиант. 2004. - 248 с.
4. Легеза В.И., Гребенюк А.Н., Бутомо Н.В. Медицинские средства противорадиационной защиты. - СПб.: Лань, 2001. - С.26-31.
5. Владимиров В.Г., Красильников И.И., Арапов О.В. Радиопротекторы: структура и функция / Под ред. Владимирова В.Г. - Киев: Наук, думка, 1988. - 264 с.
6. Куна П. Химическая радиозащита. - М.: Медицина, 1989. - 193 с.
7. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения - М.: Изд-во МГУ, 1985. - 147 с.
8. Владимиров В.Г., Поддубский Г.А., Разоренов Г.И. Радиозащитные рецептуры. Оптимизация состава и механизмы действия. - Л, 1988. - 144 с.
9. Uma Devi P. Normal tissue protection in cancer therapy // Acta Oncologica. 1998. - Vol.37, №3. - P.247-252.
10. Васин M.B. Средства профилактики и лечения лучевых поражений. - М., 2004. - 329 с.
11. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. Т.2 - Изд. 13-е, новое. - Харьков: Торсинг, 1997, - С.220.
12. Stekol J.A. Selenium Tetracysteine / J.A. Stekol // J. Amer. Chem. Soc. - 1942. - Vol.64, №7. - P.1742.
13. Бак З., Александер П. Основы радиобиологии. - М.: Изд. иностранной литературы, 1963. - С.429.
14. ТУ 1359-61. L-цистеин гидрохлорид 99% чистоты. Технические условия.
15. ТУ 6-09-17-209-88. Натрий селенистокислый (Натрий селенит) чистый. Технические условия.
16. Михайлов П.П., Коровкина Э.П. Методические указания по доклиническому изучению радиопротекторных свойств фармакологических веществ. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ; под. общ. ред. Хабриева Р.У. - М.: «Медицина», 2005. - С.724-729.
| Таблица 1 | |||
| Влияние средства-прототипа и заявляемого средства на выживаемость и среднюю продолжительность жизни (СПЖ) мышей, облученных в дозе 7,3 Гр (M±m, n=12) | |||
| Применяемое средство | Доза препарата, мг/кг | Выживаемость, % | СПЖ, сут |
| Плацебо (контроль) | - | 0,0+8,0 | 10,5±0,6 |
| Средство-прототип | 220,0 | 50,0±14,4* | 23,3±1,2* |
| Заявляемое средство | 16,5 | 50,0±15,5* | 19,4±1,4* |
| * - различия достоверны (p≤0,05) по сравнению с контролем |
| Таблица 2 | |||
| Влияние средства-прототипа и заявляемого средства на выживаемоcть и среднюю продолжительность жизни (СПЖ) крыс, облученных в дозе 7,4 Гр (M±m, n=12) | |||
| Применяемое средство | Доза препарата, мг/кг | Выживаемость, % | СПЖ, сут |
| Плацебо (контроль) | - | 0,0+12,0 | 9,4±2,1 |
| Средство-прототип | 120,0 | 50,0±14,4* | 19,8±4,2* |
| Заявляемое средство | 8,0 | 41,7±14,2* | 13,2±2,6* |
| * - различия достоверны (p≤0,05) по сравнению с контролем |
| Таблица 3 | ||
| Оценка среднесмертельных доз (СД50/30) и фактора изменения дозы (ФИД) средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на мышах (n=132) | ||
| Применяемое средство | СД50/30, Гр | ФИД |
| Плацебо (контроль) | 6,1 | - |
| Средство-прототип | 7,5 | 1,23 |
| Заявляемое средство | 7,6 | 1,25 |
| Таблица 4 | |||
| Сравнительная оценка средне-смертельных (СД50/3) и эффективных радиозащитных (ЕД) доз, а также величины терапевтического индекса средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на мышах (n=12) | |||
| Применяемое средство | СД50/3, мг/кг | ЕД, мг/кг | Терапевтический индекс |
| Средство-прототип | 450,0 | 220,0 | 2,0 |
| Заявляемое средство | 200,0 | 16,5 | 12,0 |
| Таблица 5 | ||||
| Продолжительность радиозащитного действия средства-прототипа и заявляемого средства в экспериментах на мышах, облученных в дозе 7,3 Гр (M±m, n=48) | ||||
| Применяемое средство | Выживаемость, % | |||
| время до облучения, ч | ||||
| 0,5 | 6,0 | 24,0 | 48,0 | |
| Плацебо (контроль) | 0+8 | 0+8 | 0+8 | 0+8 |
| Средство-прототип | 50±14* | 20±10 | 0+8 | 0+8 |
| Заявляемое средство | 0+8 | 20±10 | 50±14* | 40±13* |
| * - различия достоверны (p≤0,05) по сравнению с контролем |
| Таблица 6 | ||||
| Влияние средства-прототипа и заявляемого средства на показатели поведенческой активности крыс, оцениваемой по методу «открытое поле» (M±m, n=12) | ||||
| Применяемое средство | Показатели поведенческой активности животных | |||
| Двигательная активность, усл. ед. | Кол-во вертикальных стоек, абс. ед. | Кол-во норковых реакций, абс. ед. | Время неподвижного сидения, с | |
| Плацебо (контроль) | 67,2±11,4 | 9,9±1,8 | 1,0±0,3 | 48,3±9,7 |
| Средство-прототип | 38,3±8,3* | 4,4±1,4* | 0,3±0,2* | 62,2±7,6 |
| Заявляемое средство | 61,7±10,5 | 9,5±1,7 | 1,1±0,3 | 32,9±8,1 |
| * - различия достоверны (p≤0,05) по сравнению с контролем |
Применение селенотетрацистеина (тетрацистеината селена (IV)) в качестве средства профилактики острых радиационных поражений.
