Способ диагностики раннего субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью

Авторы патента:

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2431846:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (RU)

Изобретение используется в области медицины, а именно в кардиологии. Сущность способа: в сыворотке крови определяют содержание человеческого тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ (hTIMP-1) твердофазным иммуноферментным методом. При значении hTIMP-1 от 138 нг/мл до 183 нг/мл делают заключение о наличии раннего субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии. Использование способа позволяет диагностировать субклиническое поражение почек на ранней стадии у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии. Также применение способа дает возможность контроля эффективности лечения. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для ранней диагностики субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии.

Известны способы диагностики субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью. С помощью анализа мочи - определение микроальбуминурии (МАУ) и отношение альбумин/креатинин в моче. При МАУ от 30 до 300 мг/сут и отношении альбумин/креатинин более 22 мг/г для мужчин и более 31 мг/г для женщин диагностируют субклиническое поражение почек у больных гипертонической болезнью. Недостатком этих способов диагностики субклинического поражения почек в моче является то, что они выявляются при нарушении фильтрационной способности почек, которая появляется на достаточно позднем этапе поражения почечной ткани при гипертонической болезни.

Наиболее близкими способами диагностики субклинического поражения почек при гипертонической болезни с помощью анализа крови - определение содержания уровня креатинина в плазме и вычисление скорости клубочковой фильтрации (СКФ) расчетным способом с учетом плазменного креатинина. Недостатком этих методов диагностики является то, что увеличение уровня креатинина в плазме крови - у мужчин - 115-133 мкмоль/л или 1,3-1,5 мг/дл и у женщин - 107-124 мкмоль/л или 1,2-1,4 мг/дл и снижение СКФ менее 60 мл/мин/1,73 м² являются достаточно поздними маркерами снижения функции почек при гипертонической болезни и свидетельствуют о уже развившейся хронической почечной недостаточности (The Task Force for the management of arterial hypertension of the European Society of Hypertension and of the European Society of Cardiolody. 2007 Guidelines for the management of arterial hypertension. J. Hypertens 2007; 1105-1187). Тем не менее, патологический процесс в почках при гипертонической болезни начинается еще при нормальном уровне плазменного креатинина и СКФ более 60 мл/мин/1,73 м и связан с изменением внеклеточного коллагенового матрикса в почечной ткани.

Технический результат: обеспечение ранней диагностики субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии.

Поставленная задача достигается тем, что у обследуемого забирают кровь из кубитальной вены в объеме 10 мл, без использования антикоагулянта. Центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин, получают сыворотку крови. Проводят на стриповом иммуноферментном анализаторе Stat Fax 303 («Awareness Technology», США) твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) плазмы крови с помощью оригинального диагностического набора «Bio Source Europe S.A.» (Бельгия) для количественного определения человеческого тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ (hTIMP-1). Референсное значение данного показателя составляет от 111 до 138 нг/мл.

Определяют наличие субклинического поражения почек в виде повышения интегрального показателя изменения внеклеточного коллагенового матрикса в тканях, а именно почек и почечных артерий: при значении hTIMP-1 в пределах от верхней границы референсного значения (138 нг/мл) до 183 нг/мл делают заключение о наличии раннего субклиничекого поражения почек у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии, а значение hTIMP-1 более 183 нг/мл расценивается как клиническое поражение почек.

Контрольным методом оценки поражения почек у больных гипертонической болезнью был избран расчет скорости клубочковой фильтрации (СКФ) по формуле MDRD (The Modification of Diet in Renal Disease Study, 1999 г.)

СКФ=186*(креатинин/88, мкмоль /л)^-1,154*(возраст, годы),

(мл/мин/1,73 м²), для женщин результат умножали на 0,742.

СКФ менее 60 мл/мин/1,73 м² расценивалась как клиническое поражение почек у больных гипертонической болезнью согласно Российским рекомендациям Всероссийского научного общества кардиологов «Профилактика, диагностика и лечение артериальной гипертензии» 2008 года.

Способ осуществляется следующим образом. У обследуемого забирают кровь из кубитальной вены в объеме 10 мл, без использования антикоагулянта. Центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин, получают сыворотку крови. Проводят на стриповом иммуноферментном анализаторе Stat Fax 303 («Awareness Technology», США) твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) плазмы крови с помощью оригинального диагностического набора «Bio Source Europe S.A.» (Бельгия) для количественного определения человеческого тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ (hTIMP-1).

Пример 1. Больной Н.О.А, 49 лет,

диагноз: Гипертоническая болезнь I ст., АГ 2 ст., риск 2.

СКФ 68 мл/мин/1,73 м², микроальбуминурии нет.

Забирали кровь из кубитальной вены в объеме 10 мл, без использования антикоагулянта. Центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин, получают сыворотку крови. Проводят на стриповом иммуноферментном анализаторе Stat Fax 303 («Awareness Technology», США) твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) плазмы крови с помощью оригинального диагностического набора «Bio Source Europe S.A.» (Бельгия) для количественного определения человеческого тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ (hTIMP-1).

Полученный результат составил 167 нг/мл, что выше нормальных значений, но ниже пороговой цифры 183 нг/мл и указывает на наличие субклинического поражения почек на фоне нормальной СКФ при отсутствии микроальбуминурии.

Пример 2. Больной М.И.С., 48 лет, диагноз: Гипертоническая болезнь I ст., АГ 1 ст., риск 2.

СКФ 78 мл/мин/1,73 м², микроальбуминурии нет.

Полученный результат составил 124 нг/мл, что находится в пределе референсных значений для данного показателя и указывает на отсутствие субклинического поражения почек на фоне нормальной СКФ при отсутствии макроальбуминурии.

Средний уровень hTIMP-1 у больных гипертонической болезнью с нормальной функцией почек составил - 173,29±29,19 нг/мл, со СКФ менее 60 мл/мин/1,73 м²- 219,17±46,44 нг/мл соответственно (p=0,049). Наблюдалась достоверная обратная корреляционная связь между СКФ и уровнем hTIMP-1 (r=-0,61, p=0,01), что свидетельствует о том, что со снижением СКФ у больных гипертонической болезнью уровень hTIMP-1 увеличивается. Таким образом, уровень hTIMP-1 может отражать повреждение почечной ткани в виде изменения ее экстрацеллюлярного коллагенового матрикса раньше, чем снизится СКФ, - стандарт диагностики поражения почек при артериальной гипертонии.

Таблица 1
Показатель hTIMP-1 у больных гипертонической болезнью, СКФ>60 мл/мин/1,73 м²
№ п/п	Больные	СКФ	Уровень hTIMP-1, нг/мл
1	Больной С.А.М., 39 лет	64	216
2	Больной Н.О.А, 49 лет	68	167
3	Больной Р.А.А., 39 лет	70	198
4	Больной К.В.А., 35 лет	71	160
5	Больной Ш.В.А., 41 год	73	178
6	Больной П.К.В., 38 лет	73	170
7	Больной М.И.С., 48 лет	78	124
M±m		72,29±5,56	173,29±29,19

Таблица 2
Показатель hTIMP-1 у больных гипертонической болезнью, СКФ<60 мл/мин/1,73 м²
№ п/п	Больные	СКФ	Уровень hTIMP-1, нг/мл
1	Больной Г.Ю.И, 60 лет	42	184
2	Больной З.А.А., 65 лет	43	278
3	Больной Р.О.В., 60 лет	53	212
4	Больной Т.Г.Л., 56 лет	56	272
5	Больная И.Г.М., 60 лет	57	205
6	Больная Х.А.В., 60 лет	57	174
M±m		51,33±7,00	220,81±44,19

Используя способ оценки точности диагностического метода путем расчета его операционных характеристик (Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. / Реброва О.Ю. // М., «МедиаСфера». - 2002 - С.247-249), была определена точка разделения, которая составила 183 нг/мл. С учетом выбранных точек разделения были рассчитаны диагностическая чувствительность, диагностическая специфичность, прогностическая ценность положительного результата.

Расчетная чувствительность метода составила 83,3%, специфичность - 85,7%, прогностическая ценность положительного результата - 83,3%.

Преимуществами предлагаемого способа являются простота, высокая скорость выполнения, объективность, а также возможность контроля эффективности лечения.

Способ диагностики раннего субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью с помощью анализа крови, отличающийся тем, что у обследуемого забирают кровь из кубитальной вены, получают сыворотку крови, проводят твердофазный иммуноферментный анализ человеческого тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ (hTIMP-1) и при его значении от 138 нг/мл до 183 нг/мл делают заключение о наличии раннего субклинического поражения почек у больных гипертонической болезнью с нормальной скоростью клубочковой фильтрации при отсутствии микроальбуминурии.

Способ прогнозирования дизадаптации сердечной деятельности у детей, перенесших кардиохирургическую коррекцию врожденного порока сердца // 2430378

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской кардиологии, и касается способа прогнозирования дизадаптации сердечной деятельности у детей, перенесших кардиохирургическую коррекцию врожденного порока сердца, включающего исследование сыворотки крови и определение уровня тропонина-Т и активности миокардиальной изоформы креатинфосфокиназы, отличающегося тем, что за 5-7 дней до операции определяют уровень тропонина-Т и активность миокардиальной изоформы креатинфосфокиназы в сыворотке крови и при величине уровня тропонина-Т от 9 до 13 нг/мл и активности миокардиальной изоформы креатинфосфокиназы 0,35 до 0,38 мккат/л, прогнозируют выраженную дизадаптацию сердечной деятельности в ранние сроки послеоперационного периода, а при величине уровня тропонина-Т от 1,6 до 6,0 нг/мл и активности миокардиальной изоформы креатинфосфокиназы от 0,082 до 0,11 мккат/л, прогнозируют умеренную дизадаптацию сердечной деятельности на ранних сроках послеоперационного периода.

Способ ранней диагностики поражения почек у больных ревматоидным артритом // 2429487

Изобретение относится к области медицины, а именно ревматологии, и касается способа ранней диагностики поражения почек у больных ревматоидным артритом (РА). .

Способ оценки склероза клубочков при остром нефритическом синдроме // 2428697

Изобретение относится к терапии, в частности к нефрологии и патологической анатомии. .

Способ прогнозирования течения раннего послеоперационного периода после операции на артерии или артериях, выполненной по поводу облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей // 2426988

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования. .

Способ структурной характеристики рекомбинантного поликлонального белка или поликлональной клеточной линии // 2426795

Экспресс-тест для диагностирования болезни альцгеймера // 2426130

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу диагностирования болезни Альцгеймера (БА). .

Способ прогнозирования состояния новорожденных от женщин с гестозом различной степени тяжести // 2421732

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и неонатологии. .

Способ прогнозирования эффективности лечения атипичными нейролептиками больных шизофренией // 2417377

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности терапии больных шизофренией атипичными нейролептиками.

Апоптотическая чувствительность к apo2l/trail путем тестирования экспрессии galnac-t14 в клетках/тканях // 2416097

Изобретение относится к способам прогнозирования чувствительности образца ткани или клеток млекопитающих (например, злокачественных клеток) к Apo2L/TRAIL или антителу-агонисту рецептора смерти.

Способ прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса g k chlamydia trachomatis // 2431844

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis.

Способ выделения и идентификации бактерий // 2431843

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии и медицины и может быть использовано для идентификации бактерий, выделенных из окружающей среды, клинических образцов или полученных в результате биотехнологического производства.

Способ прогнозирования риска развития гестоза на основе генетических маркеров // 2431842

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, может быть использовано для прогнозирования риска развития гестоза. .

Способ диагностики скрытого внутрисосудистого фибринообразования // 2431841

Изобретение относится к медицине и касается способа диагностики скрытого внутрисосудистого фибринообразования. .

Способ иммунохимической оценки пролиферации лимфоцитов человека с помощью нового маркера - ядрышкового белка а3 // 2431670

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам иммунохимической оценки пролиферации лимфоцитов человека, и может быть использовано в фундаментальных исследованиях и в клинико-лабораторной практике для оценки пролиферативной активности клеток при онкологических и онкогематологических заболеваниях.

Способ получения "диагностикума геморрагической лихорадки с почечным синдромом культурального, поливалентного для непрямого метода иммунофлюоресценции" // 2431148

Способ прогнозирования риска развития осложнений у пациентов с травмой костей таза // 2430377

Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования риска развития осложнений течения травматической болезни у пациентов с травмой костей таза. .

Способ получения псевдотуберкулезного антигенного полимерного диагностикума // 2430376

Изобретение относится к области медицины, а именно клинической лабораторной диагностике опасных инфекций. .

Способ прогнозирования степени риска возникновения инфекционно-воспалительных осложнений у детей после кардиохирургической коррекции врожденного порока сердца // 2430375

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской кардиологии, и касается способа прогнозирования степени риска возникновения инфекционно-воспалительных осложнений при врожденных пороках сердца у детей на ранних сроках послеоперационного периода, перенесших кардиохирургическую операцию.

Способ прогнозирования характера течения аутоиммунной пузырчатки // 2429482

Изобретение относится к области лабораторных исследований и может быть использовано в дерматологии. .

Способ исследования клеток с помощью биочипа // 2433175

Изобретение относится к области медицины, биологии и ветеринарии