Фторированные производные катарантина, их получение и применение в качестве прекурсоров димерных алкалоидов vinca

Изобретение относится к фторированным производным катарантина, соответствующим общей формуле I, в которой: пунктирная линия означает возможность присутствия двойной связи, когда замещение -X отсутствует, либо простой связи, когда -X обозначает замещение группой: Н, R₁, R₂ и R₃ независимо друг от друга представляют собой атом фтора или метилированную группу, и n=2. Изобретение также относится к способу получения указанного производного и к его применению в качестве промежуточного соединения для синтеза фторированных димерных алкалоидов Vinca, в частности винфлунина, котороый, в свою очередь, используется как противораковое средство. 7 н. и 15 з.п. ф-лы.

 

Настоящее изобретение относится к фторированным производным катарантина, к их получению и к их применению в качестве предшественника (прекурсора) фторированных димерных алкалоидов Vinca и, в частности, винфлунина.

Винфлунин 1 представляет собой противораковое средство широкого спектра действия, разработанное лабораториями Pierre Fabre. Эта молекула представляет собой фторированный аналог винорельбина 5 (Navelbine^®), который является стандартным лекарством для лечения рака молочной железы и легкого. Структура винфлунина является очень сходной со структурой винорельбина, от которой она отличается только присутствием гем-дифторированной в положении С_20' группы, и отсутствием двойной связи С_3'-С_4'. Винфлунин 1 (Javlor^®) является наиболее активным фторированным соединением, открытым в последние годы. В настоящее время он находится в фазе III клинических испытаний при лечении рака молочной железы, мочевого пузыря и легкого и на сегодняшний день объявлен наиболее перспективной молекулой, имеющей происхождение из семейства алкалоидов Vinca.

Винфлунин может быть получен из предшественника 3',4'-ангидровинбластина 4, который получают путем сочетания двух субъединиц катарантина 2 и виндолина 3, которые экстрагируют непосредственно из листьев барвинка (схема 1). Альтернативно винфлунин может быть получен путем прямого фторирования винорельбина.

Затем 3',4'-ангидровинбластин 4 может быть преобразован в винорельбин 5 путем сужения кольца или в винфлунин 1 путем введения двух атомов фтора на боковой цепи "северного" фрагмента с последующим сужением кольца (схема 2). Эта реакция фторирования имеет место в сверхкислотной среде (HF-SbF₅) в присутствии хлорированного растворителя. Эти условия реакции являются особенно сильнодействующими, приводящими в результате к частичному распаду димерного алкалоида 4 и, следовательно, к падению общего химического выхода этого преобразования. Дифторирование гема в С_20' протекает с сопутствующим восстановлением двойной связи С_3'-С₄. Стереохимический центр, образованный при 4', имеет абсолютную конфигурацию (R). Винфлунин может быть также получен путем фторирования винорельбина 5 (Navelbine^®). Его синтез осуществляют путем сужения кольца 3',4'-ангидровинбластина 4.

3',4'-Ангидровинбластин 4 является дорогостоящим продуктом. Стадия фторирования, таким образом, вызывает уничтожение значительного количества этого ценного промежуточного соединения. Эта ситуация является рискованной, приводя в результате время от времени к сильному возрастанию потребности в листьях барвинка. Несколько стратегий находятся в стадии исследования для продолжения разработки винфлунина 1.

На основании наблюдения, что фторирование 3',4'-ангидровинбластина в сверхкислотной смеси модифицирует только его "северный" фрагмент, который имеет происхождение от катарантина, в объеме настоящего изобретения предложено решение, состоящее во введении атомов фтора непосредственно в каркас катарантина 2. Этот подход обладает рядом преимуществ: он вводит атом фтора на более ранней стадии в синтезе в продукт с меньшей стоимостью, чем 3',4'-ангидровинбластин 4. Затем синтез винфлунина может быть достигнут посредством сочетания, имитирующего биологическое, с виндолином 3. Действительно, 20',20'-дифторкатарантин 6 можно затем подвергать сочетанию с виндолином 3 с получением 3',4'-ангидро-20',20'-дифторвинбластина 7. Последний, наконец, преобразуют в винфлунин 1 в процессе, знакомом специалистам в данной области техники, путем реакции сужения кольца с последующим восстановлением ненасыщенной двойной связи С_3'-С₄ (схема 3).

Данный подход также дает возможность получения других исходных дифторированных производных (3',4'-ангидро-20',20'-дифторвинбластина 7, 20',20'-дифторвинорельбина 8), которые невозможно получить в общепринятых сверхкислотных условиях. Эти молекулы вызывают все больший интерес, поскольку исследование взаимосвязи структуры и активности показало, что область 4' и 20' алкалоидов Vinca сильно связана с их противоопухолевой активностью. Также в результате сочетания промежуточных соединений синтеза (и производных) фторированного катарантина подобным образом получают другие исходные фторированные производные димерных алкалоидов Vinca.

Таким образом, настоящее изобретение относится к фторированным производным катарантина, соответствующим общей формуле I:

в которой:

- пунктирная линия означает возможность присутствия двойной связи, когда замещение -X отсутствует, либо простой связи, когда -X обозначает замещение группой:

- Н,

- OR,

- NR'R'',

- SR или

- атомом галогена, где R, R' и R'' независимо друг от друга обозначают атом водорода, либо нормальную или разветвленную алкильную группу C₁-C₆,

- R₁, R₂ и R₃ независимо друг от друга представляют собой атом водорода, фтора или метилированную группу, при условии, что по меньшей мере один из радикалов R₁ и R₂ представляет собой атом фтора, и

- n=1 или 2.

Настоящее изобретение также относится к применению этих фторированных производных в качестве промежуточных соединений синтеза, полезных для получения фторированных димерных алкалоидов Vinca, в частности, в качестве участников реакции в реакции сочетания с виндолином или с производным виндолина. В частности, винфлунин должен быть получен путем сочетания виндолина и 20,20-20,20-дифторкатарантина, приводящего в результате к 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластину, который, в свою очередь, следует подвергать реакции сужения кольца с последующей реакцией восстановления внутрикольцевой двойной связи в положении С_3'-С_4'.

Введение атомов фтора в катарантин 2 следует рассматривать посредством окисления боковой цепи катарантина и фторирования.

Получение фторированных производных катарантина по изобретению включает, таким образом, стадию окисления боковой цепи катарантина, которую осуществляют в условиях, приводящих к окисленному производному катарантина, соответствующему общей формуле II:

в которой:

- n=1 или 2,

- Х обозначает группу С=O или C=S,

- Y обозначает группу CO₂R, SO₂R или COR, где R обозначает арильную группу, либо нормальную или разветвленную алкильную группу C₁-C₄, и

- Z обозначает группу СН-ОН или С=O.

Таким образом, настоящее изобретение относится также к окисленным производным катарантина, соответствующим общей формуле II:

в которой:

- n=1 или 2,

- Х обозначает группу С=O или C=S,

- Y обозначает группу CO₂R, SO₂R или COR, где R обозначает арильную группу, либо нормальную или разветвленную алкильную группу C₁-C₄, и

- Z обозначает группу СН-ОН или С=O.

Предпочтительным окисленным производным катарантина в соответствии с формулой II является производное, где:

- n=2,

- Х обозначает группу С=O,

- Y обозначает группу CO₂R, где R обозначает нормальную или разветвленную алкильную группу C₁-C₄, и

- Z обозначает группу СН-ОН или С=O.

Настоящее изобретение также относится к применению этих окисленных производных в качестве промежуточных соединений синтеза, полезных для получения фторированных димерных алкалоидов Vinca, в частности винфлунина. Данное получение включает фторирование окисленного производного катарантина с последующим удалением защиты двух атомов азота, приводящим в результате к фторированному производному катарантина по изобретению. Это получение дополнительно включает реакцию сочетания между указанным фторированным производным и виндолином или производным виндолина. В частности, винфлунин получают в результате сочетания виндолина и 20,20-дифторкатарантина, полученного путем фторирования и удаления защиты двух атомов азота окисленного производного катарантина, как определено выше, для которого n=2, Х=С=O, Y=CO₂R, где R является таким, как определено выше, Z=С=O, что приводит в результате к 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластину, который, в свою очередь, следует подвергать реакции сужения кольца с последующей реакцией восстановления внутрикольцевой двойной связи в положении С_3'-С_4'.

Термин "арил" относится здесь к циклической ароматической группе из 5-7 атомов углерода, возможно содержащей гетероатом, в частности атом кислорода или азота, как, например, фенильная или пиридинильная группа.

Таким образом, в качестве примера, 20,20-дифторкатарантин можно синтезировать, как описано ниже.

Активация боковой цепи может быть достигнута путем изомеризации внутрикольцевой двойной связи во внутрикольцевом положении перед последующим введением функциональной группы. Реакцию изомеризации соединения 2 в соединение 10 проводят при парциальном давлении водорода в присутствии палладия на углероде. Затем индольное кольцо защищают в форме метилкарбамата 11, а третичный атом азота в форме амида 12.

Схема 5

Затем двойную связь соединения 12 дигидроксилируют OsO₄ и полученный в результате диол 13 дважды активируют в форме циклического сульфата 14. Аллиловый спирт 15 получают под действием тетрабутиламмония фторида с последующей обработкой серной кислотой. Затем функциональную группу спирта окисляют MnO₂ и полученный в результате енон 16 дифторируют под действием Deoxofluor^TM (бис(2-метоксиэтил)аминосульфида трифторида). Защитную группу индола (карбамат) удаляют под действием карбоната калия в метаноле. Амидную группу 17, наконец, восстанавливают с получением в результате 20,20-дифторкатарантина 6. Последний можно, таким же путем, как катарантин природного происхождения, подвергать сочетанию с виндолином с получением фторированного аналога 3',4'-ангидровинбластина (7), который после сужения кольца образует в результате фторированный аналог винорельбина (8). Наконец, селективное восстановление двойной связи северного фрагмента приводит в результате к образованию винфлунина 1.

В соответствии с одним из вариантов синтеза аллиловый спирт 15 может быть также получен путем первоначальной защиты индольного кольца катарантина 2 метилкарбаматом (соединение 26) и третичного азота в форме амида 27. Последний затем можно окислять непосредственно до аллилового спирта 15 SeO₂ (схема 6).

Промежуточные соединения синтеза до 20,20-дифторкатарантина 6 можно использовать путем функциональных перегруппировок, которые приводят в результате не к 20,20-дифторкатарантину, а к его структурным аналогам. Эти аналоги можно, таким же путем, что и катарантин природного происхождения, подвергать сочетанию с виндолином с получением в результате соответствующих фторированных димерных алкалоидов.

Соответственно, начиная с промежуточного соединения 13, в результате окисления функциональной группы вторичного спирта получают кетон 18. В результате фторирования кетоспирта 18 DAST (диэтиламиносульфида трифторидом) образуется дифторспирт 19. Последний можно, после обычных стадий удаления защиты (→20), подвергать сочетанию с виндолином с образованием дифторированного аналога 21 винбластина, который, подобно этому алкалоиду, обладает существенными противораковыми свойствами (схема 7).

Кроме того, введение единственного атома фтора в каркас катарантина возможно от промежуточного соединения 15 (схема 8). Когда последнее обрабатывают DAST, образуется монофторированный продукт боковой цепи (22). Как уже упомянуто выше, этот продукт приводит в результате к монофтор-аналогам 3',4'-ангидро-20'-фторвинбластину 24 и 20'-фторвинорельбину 25, которые могут привести к монофторированному аналогу винфлунина в результате дополнительной стадии восстановления двойной связи.

Наконец, изокатарантин 10 можно также использовать в качестве промежуточного соединения синтеза при получении фторированных димерных алкалоидов Vinca, в частности винфлунина. Данное получение включает реакцию сочетания между указанным изокатарантином и виндолином или производным виндолина.

Таким образом, винфлунин 1 может быть получен путем сочетания виндолина 3 и изокатарантина, приводящего в результате к 4',20'-ангидровинбластину 28. Затем данное промежуточное соединение можно подвергать дифторированию, используя условия, описанные для фторирования 3',4'-ангидровинбластина 4 (J.-C.Jacquesy et al., Journal of Fluorine Chemistry, 2002, 114, 139). Полученный продукт, (4'R)-4'-дезокси-20',20'-дифторвинбластин 30, идентичен продукту, образованному путем фторирования 3',4'-ангидровинбластина 4. Преобразование 30 в винфлунин 1 путем сужения кольца описано в литературе (J.-C.Jacquesy et al., Journal of Fluorine Chemistry, 2002, 114, 139) (Схема 9).

Альтернативно винфлунин 1 может быть также получен путем сужения кольца 4',20'-ангидровинбластина 28, приводящего в результате к соединению 29, с последующим гем-дифторированием в соответствии с такими же способами, как описано выше.

Таким образом, оказывается, что в настоящем изобретении предложена альтернативная стратегия классическому синтезу винфлунина, дающая возможность использовать более эффективный и, следовательно, более экономичный способ. Кроме того, использование фторированных промежуточных соединений катарантина согласно изобретению, например: 20-фторкатарантина 23 и 20,20-дифтор-3-гидро-4-гидроксикатарантина 20, в реакциях сочетания с виндолином 3 позволяет получить новые димерные алкалоиды, обладающие потенциальными противораковыми активностями. Другие конкретные структурные аналоги винорельбина и винфлунина также легко доступны посредством данного способа.

Все способы получения и схемы реакций, описанные здесь выше, детализованы в случае получения фторированных производных катарантина, соответствующих общей формуле (I), в которой n=2. Все соответствующие производные, соответствующие общей формуле (I), в которой n=1, могут быть легко получены способом сужения кольца северного участка димеров, имеющего происхождение от катарантина, с помощью методик, известных специалистам в данной области техники, и, в частности, тех, которые описаны в Andriamialisoa, R.Z.; Langlois, N.; Langlois Y.; Potier P. Tetrahedron, 1980, 36, 3053-3060.

Далее настоящее изобретение описано более подробно с помощью примеров получения, упомянутых здесь ниже путем иллюстрации основных стадий, приводящих в результате к фторированным производным катарантина и, в частности, к 20,20-дифторкатарантину.

Изокатарантин (10)

К суспензии палладия (10% мас./мас.) на углероде (5,7 г, 5,4 ммоль, 0,2 экв.), предварительно активированной водородом в МеОН (150 мл), добавляют (+)-катарантин 2 (9,0 г, 26,8 ммоль, 1 экв.) в растворе в МеОН (100 мл). Реакционную смесь помещают при пониженном давлении в атмосферу водорода (0,3 Бар), затем выделяют и оставляют при пониженном давлении при перемешивании при температуре окружающей среды. За реакцией следят с помощью ¹H ЯМР до тех пор, пока исходный продукт не исчезнет (около 2 ч). Затем реакционную смесь фильтруют на целлите 545, затем перекристаллизуют в МеОН с получением соединения 10 (6,5 г, 19,3 ммоль, 72%) в форме полупрозрачных кристаллов.

Химическая формула: C₂₁H₂₄N₂O₂ М=336 г.моль^-1

Rf=0.35 (Гексан/AcOEt 3/7)

F=78°C-81°C

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.08 (sl, 1H, NH); 7.53 (d, J=7.3 Гц, 1H, H-11); 7.26 (d, J=7.3 Гц, 1H, H-14); 7.22-7.10 (m, 2H, H-12 и Н-13); 5.48-5.32 (m, 1H, Н-20); 4.05 (s, 1H, Н-5); 3.73 (s, 3Н, СО₂СН₃); 3.62-3.46 (m, 1H, H-7); 3.44-3.24 (m, 2H, Н-7 и Н-8); 3.18-3.10 (m, 1H, Н-19); 3.08-2.92 (m, 2H, Н-19 и Н-8); 2.88-2.74 (m, 1H, Н-1); 2.44-2.26 (m, 2H, Н-3); 2.20-2.08 (m, 1H, Н-2); 1.90-1.78 (m, 1H, Н-1); 1.62 (d, J=6.7 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 175.2; 137.7; 135.9; 129.5; 122.6; 120.1; 119.4; 119.0; 111.2; 111.1; 64.2; 56.1; 53.8; 53.3; 51.1; 38.0; 30.3; 27.9; 22.0; 13.4.

ИК (пленка): 3368, 2916, 2855, 1714, 1461, 1264, 740 см^-1.

MS (ESI TOF): 337 [M+H⁺] (100).

[α]_D ²⁰=+35 (с=2,3; CHCl₃)

N_a-карбометоксиизокатарантин (11)

К суспензии гидрида калия (0,72 г, 6,3 ммоль, 1,5 экв.) в ТГФ (10 мл) при 0°С добавляют по каплям раствор 10 (1,35 г, 4 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (20 мл). После 30 минут при перемешивании при 0°С добавляют по каплям метилхлорформиат (0,5 мл, 6,3 ммоль, 1,5 экв.). После 1 ч при перемешивании при 0°С реакционную смесь доводят до температуры окружающей среды и перемешивание поддерживают в течение 18 ч. Добавляют водный раствор насыщенного К₂СО₃ (10 мл). Водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×20 мл), органические фазы собирают, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/MeOH 97/3) с получением 11 (1,3 г, 3,3 ммоль, 82%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₆N₂O₄ М=394 г.моль^-1

Rf=0,4 (CH₂Cl₂/MeOH 94/6)

F=62°C-64°C

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.08 (d, J=7.9 Гц, 1Н, Н-11); 7.48 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-14); 7.38-7.16 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 5.32-5.18 (m, 1Н, Н-20); 4.06 (s, 1Н, Н-5); 3.86 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.68 (m, 1Н, H-7); 3.54 (s, 3H, СО₂СН₃); 3.40-3.12 (m, 2Н, Н-7 и Н-8); 2.99 (m, 1Н, Н-19); 2.86 (m, 1Н, Н-19); 2.80-2.65 (m, 2Н, Н-8 и Н-1); 2.44 (d, J=16 Гц, 1Н, Н-3); 2.30 (d, J=16 Гц, 1Н, Н-3); 2.06 (m, 1Н, Н-2); 1.76 (d, J=14 Гц, 1Н, H-1); 1.56 (d, J=6.7 Гц, 3H, H-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 173.4; 151.8; 138.1; 135.8; 129.5; 124.6; 122.7; 119.7; 118.2; 115.5; 60.6; 57.9; 54.1; 53.0; 52.0; 37.5; 29.7; 27.9; 21.8; 12.6.

MS (ESI TOF): 395 [М+Н⁺](100).

HRMS (TOF MS ES+):

Значение, вычисленное для C₂₃H₂₇N₂O₄ 395,1971

Обнаруженное значение 395,1956

[α]_D ²⁰=+48 (c=1,0; CHCl₃)

N_a-карбометокси-19-оксоизокатарантин (12)

К 5 мл водного раствора Na₂CO₃ (675 мг, 6,4 ммоль, 9,3 экв.) добавляют раствор 11 (270 мг, 0,69 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (10 мл). Добавляют по каплям раствор йода (800 мг, 3,2 ммоль, 4,6 экв.) в ТГФ (12 мл) при 0°С. Затем реакционную смесь доводят до температуры окружающей среды и перемешивают в течение 18 часов. Затем добавляют насыщенный водный раствор Na₂S₂O₃ (15 мл) и реакционную смесь оставляют при перемешивании на 30 минут. Затем водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×20 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/МеОН 98/2) с получением 12 (230 мг, 0,56 ммоль, 82%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₄N₂O₅ М=408 г.моль^-1

Rf=0,4 (CH₂Cl₂/MeOH 94/6)

F=94°С-96°С

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.04-7.97 (m, 1Н, Н-11); 7.52-7.43 (m, 1Н, Н-14); 7.36-7.21 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 5.53-5.41 (m, 1Н, Н-20); 4.66 (s, 1Н, Н-5); 4.32-4.17 (m, 1Н, H-7); 3.93 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.60 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.28-3.15 (m, 3H, H-7 и Н-8); 2.97 (dd, J=14 Гц и J=1.8 Гц, 1Н, Н-1); 2.84-2.76 (m, 1Н, Н-2); 2.56-2.48 (m, 2Н, Н-3); 2.00-1.89 (m, 1Н, Н-1); 1.59 (d, J=6.7 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 174.6; 172.0; 151.6; 136.4; 135.1; 132.5; 129.2; 124.9; 122.8; 120.9; 118.1; 117.0; 115.6; 61.5; 60.1; 58.7; 53.2; 52.1; 40.3; 38.9; 37.2; 28.5; 21.2; 20.8; 13.9; 13.1.

MS (ESI TOF): 409 [M+H⁺] (100); 817 [2M+H⁺] (34).

[α]_D ²⁰=+255 (с=0,4; CHCl₃)

(4R,20R)-N_a-карбометокси-3-гидро-4,20-дигидрокси-19-оксокатарантин (13)

К раствору 12 (1,26 г, 3,08 ммоль, 1 экв.) в смеси ацетон/вода (8/1) (27 мл) при 0°С добавляют OsO₄ в растворе в t-BuOH (2,5%, 1,9 мл, 0,154 ммоль, 0,05 экв.), затем порциями через 15 минут NMO (0,72 г, 6,2 ммоль, 2 экв.). После 15 минут при 0°С реакционную смесь оставляют при перемешивании при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Реакцию останавливают добавлением насыщенного водного раствора Na₂S₂O₃ (15 мл) и воды (15 мл) и оставляют при перемешивании на 20 минут. Реакционную смесь экстрагируют CH₂Cl₂ (4×30 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/МеОН 97/3) с получением 13 (1,16 г, 2,61 ммоль, 85%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₆N₂O₇ М=442 г.моль^-1

Rf=0,5 (CH₂Cl₂/MeOH 9/1)

F=102°C-104°C

¹Н ЯМР (CDCl₃): 7.98 (d, J=7.9 Гц, 1Н, H-11); 7.44 (d, J=7.9 Гц, 1Н, Н-14); 7.35-7.20 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 4.77 (s, 1Н, H-5); 4.30-4.18 (m, 1Н, H-7); 4.05-3.93 (m, 1Н, H-20); 3.92 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.63 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.34-3.08 (m, 3Н, H-7 и Н-8); 2.88 (dd, J=14.0 Гц J=1.8 Гц, 1Н, Н-1); 2.65-2.60 (m, 1Н, Н-2); 2.02-1.74 (m, 3Н, Н-1 и Н-3); 1.16 (d, J=6.1 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 174.1; 172.5; 151.7; 135.3; 129.0; 125.1; 123.0; 118.2; 117.2; 115.6; 69.8; 59.2; 55.9; 53.4; 53.3; 52.9; 42.1; 38.5; 37.5; 36.7; 21.1; 17.8.

ИК (таблетка KBr): 3402, 2954, 1741, 1657, 1458, 760 см^-1

MS (ESI TOF): 443 [M+H⁺] (11); 465 [M+Na⁺] (100); 907 [2M+Na⁺] (36).

HRMS (TOF MS ES+):

Значение, вычисленное для C₂₃H₂₆N₂O₇Na 465,1638

Обнаруженное значение 465,1631

[α]_D ²⁰=+97 (с=0,5; CHCl₃)

(4R,20R)-N_a-карбометокси-3-гидро-4,20-дигидроксисульфат-19-оксокатарантин (14)

К раствору диола 13 (200 мг, 0,45 ммоль, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (5 мл) при 0°С добавляют триэтиламин (0,15 мл, 1,04 ммоль, 2,3 экв.), затем по каплям тионилхлорид (43 мкл, 0,59 ммоль, 1,3 экв.). После 30 мин при 0°С реакцию останавливают добавлением насыщенного раствора NaCl (5 мл) и воды (5 мл). Водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×10 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме.

Затем сырой продукт помещают непосредственно в смесь 7,5 мл CH₃CN и 6,5 мл H₂O и энергично перемешивают. Затем последовательно добавляют RuCl₃ (5 мг, 0,023 ммоль, 0,05 экв.) и NaIO₄ (242 мг, 1,13 ммоль, 2,5 экв.) и через 1 ч 30 мин добавляют Et₂O (12 мл). Перемешивание продолжают в течение 10 мин. Водную фазу экстрагируют 3×10 мл Et₂O, затем объединенные органические фазы промывают водой (30 мл), насыщенным раствором NaHCO₃ (30 мл) и насыщенным раствором NaCl (30 мл). Затем органическую фазу высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. В результате очистки хроматографией на силикагеле (элюент CH₂Cl₂/MeOH 98/2) получают 14 (137 мг, 0,27 ммоль, 60%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₄N₂O₉S М=504 г.моль^-1

Rf=0,5 (CH₂Cl₂/MeOH 95/5)

F=140°C-142°C

¹H ЯМР (CDCl₃): 7.98 (d, J=7.3 Гц, 1H, Н-11); 7.44 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-14); 7.37-7.30 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 5.12 (s, 1H, Н-5); 4.75 (q, J=6.7 Гц, 1H, Н-20); 4.24-4.13 (m, 1H, Н-5); 3.99 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.68 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.53-3.47 (m, 1H, Н-7); 3.35-2.95 (m, 2Н, H-8); 2.97 (dd, J=14.0 Гц и J=1.6 Гц, 1H, Н-1); 2.90-2.85 (m, 1H, Н-2); 2.45-2.38 (m, 2Н, Н-3); 2.02-1.96 (m, 1Н, Н-1); 1.64 (d, J=6.7 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 173.2; 171.5; 152.4; 136.1; 134.8; 129.3; 125.6; 123.5; 118.8; 117.5; 116.0; 94.8; 84.9; 56.9; 55.1; 54.0; 53.4; 40.9; 38.4; 37.7; 32.3; 21.2; 15.8.

ИК (таблетка KBr): 1735, 1687, 1459, 1382, 1215, 904 см^-1.

MS (ESI TOF): 505 [М+H]⁺ (100); 1009 [M+Na⁺] (13).

[α]_D ²⁰=+165 (c=0,3; CHCl₃)

(20R)-N_a-карбометокси-20-гидрокси-19-оксокатарантин (15)

К раствору сульфата 14 (1,59 г, 3,16 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (25 мл) добавляют по каплям раствор NBu₄F (1M в ТГФ, 6,3 мл, 6,3 ммоль, 2 экв.). После 18 ч перемешивания при температуре окружающей среды добавляют раствор H₂SO₄ 2M в ТГФ (37 мл) и 3,7 мл воды. После 48 ч перемешивания при температуре окружающей среды добавляют насыщенный раствор NaHCO₃ (200 мл). Водную фазу экстрагируют AcOEt (4×50 мл), органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют, затем концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле и 15 (828 мг, 1,95 ммоль, 62%) выделяют в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₄N₂O₆ М=424 г.моль^-1

Rf=0,3 (CH₂Cl₂/MeOH 95/5)

F=188°C-190°C

¹Н ЯМР (CDCl₃): 7.98 (d, J=7.9 Гц, 1H, H-11); 7.44 (d, J=7.9 Гц, 1H, H-14); 7.35-7.20 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 6.43 (d, J=6.3 Гц, 1H, Н-3); 5.24 (d, J=1.7 Гц, 1H, H-5); 4.41-4.33 (m, 1H, H-20); 4.17-4.03 (m, 1H, H-7); 3.94 (s, 3Н, СО₂СН₃); 3.57 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.47-3.17 (m, 4H, H-8, Н-2 и H-7); 2.88 (dd, J=14.0 Гц и J=1.8 Гц, 1H, H-1); 2.02 (dd, J=14.0 Гц и J=1.8 Гц, 1H, Н-1); 1.33 (d, J=6.1 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 174.1; 173.8; 152.0; 145.3; 136.6; 135.3; 129.3; 128.5; 125.1; 123.1; 118.4; 116.7; 115.8; 67.1; 58.0; 54.3; 53.6; 52.8; 44.0; 40.7; 38.4; 21.3; 21.1.

ИК (таблетка KBr): 3414, 2944, 1743, 1653, 1458, 1437, 1327, 1242, 754 см^-1.

MS (ESI TOF): 447 [M+Na⁺] (100); 871 [2M+Na⁺] (64).

[α]_D ²⁰=+181 (с=0,7; CHCl₃)

N_a-карбометокси-19,20-диоксокатарантин (16)

Раствор аллилового спирта 15 (100 мг, 0,236 ммоль, 1 экв.) в 8 мл дихлорметана охлаждают до 0°С. К этому раствору в один прием добавляют 140 мг активированного диоксида марганца (16 ммоль, 70 экв.). Полученную черную суспензию перемешивают при 0°С в течение 1 ч 30 мин в атмосфере азота, затем доводят до температуры окружающей среды.

Реакционную смесь фильтруют на целлите 545, затем тщательно промывают, используя дихлорметан. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением енона 16 (85 мг, 0,201 ммоль, 85%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₂N₂O₆ М=422 г.моль^-1

Rf=0,4 (EtOAc)

F=108°C-110°C

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.01 (d, J=8.5 Гц, 1H, H-11); 7.49 (d, J=7.3 Гц, 1H, Н-14); 7.45 (d, J=6.7 Гц, 1H, H-3); 7.37-7.23 (m, 2H, H-12 и Н-13); 5.80 (d, J=1.8 Гц, 1H, Н-5); 4.18-4.02 (m, 1H, Н-7); 3.91 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.65 (m, 1H, H-2); 3.49 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.48-3.34 (m, 1H, Н-8); 3.32-3.16 (m, 2H, Н-7 и Н-8); 2.82 (dd, J=12.8 Гц и J=2.4 Гц, 1H, Н-1); 2.35 (s, 3H, H-21); 2.07 (dd, J=13.4 Гц и J=3.0 Гц, 1H, Н-1).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 193.3; 172.2; 171.6; 151.9; 143.6; 142.3; 135.8; 135.3; 129.2; 125.2; 123.1; 118.4; 117.0; 115.8; 57.3; 53.5; 52.6; 52.5; 45.5; 41.3; 37.4; 24.6; 20.9.

ИК (таблетка KBr): 1740, 1668, 1252, 751 см^-1.

MS (ESI TOF): 423 [M+H⁺] (10); 445 [M+Na⁺] (100); 867 [2М+Na⁺] (32).

HRMS (TOF MS ES+):

Значение, вычисленное для C₂₃H₂₂N₂O₆Na 445,1376

Обнаруженное значение 445,1357

[α]_D ²⁰=+183 (c=1,8; CHCl₃)

20,20-дифтор-19-оксокатарантин (17)

Фторирование: N_a-карбометокси-20,20-дифтор-19-оксокатарантин

Енон 16 (300 мг, 0,71 ммоль, 1 экв.) помещают в раствор в Deoxofluor^TM (3 мл, 16,4 ммоль, 23 экв.). Затем добавляют три капли этанола и реакционную смесь оставляют при перемешивании при 80°С на 24 ч. Затем добавляют 0,6 мл Deoxofluor^TM (3,3 ммоль, 5 экв.) и две капли этанола и перемешивание продолжают при этой температуре еще в течение 48 ч (за реакцией следят по ¹H ЯМР до исчезновения исходного продукта). Реакционную смесь разводят в 200 мл дихлорметана, а затем добавляют 100 мл водного насыщенного раствора К₂СО₃. Смесь оставляют на 15 мин при перемешивании при температуре окружающей среды, затем водную фазу экстрагируют 3×50 мл дихлорметана. Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают двумя фильтрациями на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН 98/2 и C₆H₁₂/AcOEt 6/4), и остаток вступает в следующую стадию.

Химическая формула: C₂₃H₂₂N₂O₅F₂ M=444 г.моль^-1

Rf=0,3 (Гексан/AcOEt 40/60)

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.01-7.99 (m, 1H, H-11); 7.53-7.47 (m, 1H, H-14); 7.38-7.28 (m, 2H, H-12 и Н-13); 6.87-6.77 (m, 1H, Н-3); 5.36 (d, J=1.8 Гц, 1H, Н-5); 4.20-4.03 (m, 1H, H-7); 3.93 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.61-3.54 (m, 1H, Н-2); 3.57 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.45-3.20 (m, 3H, H-8 и H-7); 2.93-2.83 (m, 1H, H-1); 2.09-1.98 (m, 1H, H-1); 1.81 (dd, J=18 Гц, J=18 Гц, 3H, H-21).

Удаление защиты индола: 20,20-дифтор-19-оксокатарантин (17)

К раствору вышеописанного защищенного 20,20-дифторкатарантина в 100 мл метанола добавляют в один прием 2 г карбоната калия (14,5 ммоль) и суспензию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Затем к реакционной смеси, которая теперь стала прозрачной, добавляют 50 мл воды, и смесь экстрагируют 3×50 мл дихлорметана. Объединенные органические фазы высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток осаждают в смеси циклогексан/этилацетат 7/3 с получением 17 (118 мг, 0,307 ммоль, 43% в две стадии) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₁H₂₀F₂N₂O₃ М=386 г.моль^-1

Rf=0,3 (CH₂Cl₂/MeOH 95/5)

¹H ЯМР (CDCl₃): 7.95 (s, 1H, NH); 7.52 (d, J=Гц, 1Н, Н-11); 7.26 (d, J=Гц, 1H, Н-14); 7.16-7.11 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 6.83 (m, 1H, Н-3); 5.55 (d, J=1 Гц, 1H, Н-5); 4.24 (m, 1H, Н-7); 3.67 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.58 (m, 1H, H-2); 3.36-3.24 (m, 3H, Н-8 и Н-7); 2.82 (dd, J=13 Гц, J=2 Гц, 1Н, Н-1); 2.27 (dd, J=13 Гц, J=2 Гц, 1Н, Н-1); 1.82 (dd, J=18 Гц, J=18 Гц, 3Н, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 172.8; 171.6; 139.5 (t, J=30 Гц); 135.8; 135.2 (t, J=9 Гц); 133.8; 127.7; 122.4; 119.7; 119.1 (t, J=233 Гц); 118.4; 110.6; 108.8; 56.3; 53.6; 53.0; 44.0; 42.8; 35.6; 22.4 (t, J=28 Гц); 20.7.

[α]_D ²⁰=+155 (с=0,4; CHCl₃).

20,20-дифторкатарантин (6)

К раствору 17 (140 мг, 0,36 ммоль, 1 экв.) в 50 мл тетрагидрофурана добавляют в один прием 360 мг боргидрида натрия (9,5 ммоль, 26,5 экв.). Полученную в результате суспензию охлаждают до 0°С и помещают при перемешивании в атмосферу азота. Добавляют по каплям 1,9 мл (14,6 ммоль, 40,5 экв.) трифторборана диэтилэфирата, затем реакционную смесь доводят до температуры окружающей среды и перемешивают в течение 3 ч. Растворитель выпаривают в вакууме и заменяют 30 мл метанола, к которому добавляют 6 мл воды и 4,5 мл 10% раствора соляной кислоты. Все вместе перемешивают при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Метанол выпаривают и заменяют 20 мл дихлорметана. Смесь нейтрализуют добавлением 40 мл насыщенного водного раствора гидрокарбоната натрия, затем экстрагируют 3×20 мл дихлорметана. Объединенные органические фазы высушивают на Na₂SO₄, концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/MeOH 98/2) получают 74 мг (0,2 ммоль, 55%) 6 в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₁H₂₂F₂N₂O₂ М=372 г.моль^-1

Rf=0,5 (CH₂Cl₂/MeOH 95/5)

¹H ЯМР (CDCl₃): 7.68 (s, 1H, NH); 7.53 (d, J=7.5 Гц, 1Н, H-11); 7.27 (d, J=7.5 Гц, 1Н, Н-14); 7.20 (td, J=7.5 Гц, J=1.5 Гц, 1Н, Н-13); 7.14 (td, J=7.5 Гц, J=1.5 Гц, 1Н, Н-12); 6.61 (m, 1Н, H-3); 4.64 (d, J=2 Гц, 1Н, Н-5); 3.72 (s, 3Н, СО₂СН₃); 3.63 (ddd, J=14 Гц, J=10 Гц, J=5 Гц, 1H, H-7); 3.43 (ddd, J=14 Гц, J=5 Гц, J=5 Гц, 1Н, H-7); 3.32 (ddd, J=17 Гц, J=10 Гц, J=5 Гц, 1Н, Н-8); 3.01 (ddd, J=17 Гц, J=5 Гц, J=5 Гц, 1Н, Н-8); 2.88 (m, 3Н, Н-2 и Н-19); 2.81 (dd, J=13 Гц, J=2 Гц, 1Н, Н-1); 1.84 (dd, J=18 Гц, J=18 Гц, 3H, Н-21); 1.81 (d, J=13 Гц, 1Н, Н-1).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 173.4; 143.3 (t, J=28 Гц); 136.1; 135.3; 132.1 (t, J=9 Гц); 128.8; 122.1; 119.7 (t, J=232 Гц); 119.4; 118.3; 110.6; 110.4; 57.0; 55.3; 52.7; 52.3; 47.0; 37.0; 30.8; 22.6 (t, J=28 Гц); 21.6.

SM (ESI TOF): 353 [M-HF+H⁺] (6); 373 [М+Н⁺] (100).

[α]_D ²⁰=+43 (с=0,4; CHCl₃).

(4R)-N_a-карбометокси-3-гидро-4-гидрокси-19,20-диоксокатарантин (18)

К раствору оксалилхлорида (0,56 мл, 6,47 ммоль, 2,2 экв.) в CH₂Cl₂ (25 мл), поддерживаемому при -65°С (внутренняя температура), добавляют по каплям ДМСО (1,15 мл, 16,2 ммоль, 5,5 экв.) в растворе в CH₂Cl₂ (0,850 мл). Смесь перемешивают в течение 20 мин, затем добавляют раствор диола 13 (1,3 г, 2,94 ммоль, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (25 мл) по каплям, в то время как температуру регулируют между -60°С и -65°С. После 45 мин перемешивания добавляют триэтиламин (3,7 мл, 26,5 ммоль, 9,0 экв.), затем температуру смеси доводят до температуры окружающей среды за период 45 мин. Добавляют воду (20 мл) и рассол (10 мл), затем реакционную смесь экстрагируют CH₂Cl₂ (3×50 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают флэш-хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/MeOH 97/3) с получением кетоспирта 18 (647 мг, 1,47 ммоль, 50%) в форме белого твердого вещества и 13 (520 мг, 1,17 ммоль, 40%).

Химическая формула: C₂₃H₂₄N₂O₇ M=440 г.моль^-1

F=123°C-125°C

Rf=0,2 (AcOEt)

¹H ЯМР (CDCl₃): 7.97 (d, J=8.5 Гц, 1Н, Н-11); 7.44 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-14); 7.35-7.20 (m, 2H, Н-12 и Н-13); 5.16 (sl, 1Н, ОН); 5.04 (s, 1Н, Н-5); 4.23-4.04 (m, 1Н, H-7); 3.91 (s, 3Н, СО₂СН₃); 3.48 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.41-3.35 (m, 2H, Н-7 и Н-8); 3.35-3.11 (m, 1Н, Н-8); 2.85 (dd, J=14.0 Гц и J=1.8 Гц, 1Н, Н-1); 2.79-2.71 (m, 1Н, Н-2); 2.59 (d, J=14.0 Гц, 1Н, Н-3); 2.25 (s, 3Н, Н-21); 2.26-2.15 (m, 1Н, Н-3); 1.91-1.79 (m, 1Н, Н-1).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 204.5; 174.3; 173.0; 151.9; 137.1; 135.0; 129.3; 125.1; 123.1; 118.4; 116.6; 115.8; 57.6; 54.9; 53.5; 52.7; 42.1; 38.9; 38.6; 34.9; 24.7; 21.2.

ИК (таблетка KBr): 3270, 2953, 1732, 1652, 1461, 759,747 см^-1.

MS (ESI TOF): 441 [M+H⁺] (100).

HRMS (TOF MS ES+):

Значение, вычисленное для C₂₃H₂₄N₂O₇Na 463,1481

Обнаруженное значение 463,1472

[α]_D ²⁰=+121 (с=0,4; CHCl₃)

(4R)-N_a-карбометокси-20,20-дифтор-3-гидро-4-гидрокси-19-оксокатарантин (19)

К раствору кетоспирта 18 (44 мг, 0,1 ммоль, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (1 мл) при -78°С добавляют DAST (67 мкл, 0,5 ммоль, 5 экв.). Затем реакционную смесь оставляют при перемешивании при температуре окружающей среды на 18 ч. Затем добавляют по каплям 10% водный раствор NaHCO₃ (5 мл) при 0°С, смесь оставляют на 15 мин при перемешивании при температуре окружающей среды, затем водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×10 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: Гексан/AcOEt 6/4) с получением 19 (26 мг, 0,056 ммоль, 56%).

Химическая формула: C₂₂H₂₄F₂N₂O₆ М=462 г.моль^-1

Rf=0,3 (EtOAc)

¹Н ЯМР (CDCl₃): 7.98 (d, J=8.5 Гц, 1Н, Н-11); 7.49 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-14); 7.36-7.26 (m, 2H, Н-12 и Н-13); 5.74 (s, 1Н, Н-5); 4.21-4.05 (m, 1Н, H-7); 3.97 (s, 3Н, СО₂СН₃); 3.66 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.30-3.15 (m, 4H, Н-8, H-7 и Н-1); 2.73 (m, 1Н, Н-2); 2.62-2.52 (m, 1H, Н-1); 2.15-2.05 (m, 1H, H-3); 1.83 (d, J=14 Гц, 1Н, Н-1); 1.66 (dd, J=19 Гц, J=19 Гц, 3H, H-21).

MS (ESI TOF): 485 [M+Na⁺] (100).

N_a-карбометокси-20-фтор-19-оксокатарантин (22)

К раствору DAST (8 мкл, 0,06 ммоль, 1,2 экв.) в CH₂Cl₂ (0,1 мл) добавляют аллиловый спирт 15 (20 мг, 0,05 ммоль, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (0,7 мл). Затем реакционную смесь оставляют при перемешивании при температуре окружающей среды на 15 мин. Затем добавляют по каплям насыщенный раствор К₂СО₃ (2 мл) при 0°С, смесь оставляют на 15 мин при перемешивании при температуре окружающей среды, затем водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×2 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают на препаративной пластине силикагеля (элюент CH₂Cl₂/MeOH 98/2) с получением 22 (10 мг, 0,023 ммоль, 49%) в форме двух эпимеров А и В (белое твердое вещество).

Химическая формула: C₂₃H₂₃FN₂O₅ М=426 г.моль^-1

Rf=0,4 (CH₂Cl₂/MeOH 95/5)

¹Н ЯМР (CDCl₃): 8.02 (d, J=7.9 Гц, 1H, H-11); 7.49 (d, J=7.3 Гц, 1H, H-14); 7.35-7.20 (m, 2H, Н-12 и Н-13); 6.53-6.48 (m, 1H, H-3); 5.26 (d, J=1.8 Гц, 1H A, H-5); 5.22 (d, J=1.8 Гц, 1H В, Н-5); 4.98 (dq, J=47.6 Гц и J=6.1 Гц, 1H, Н-20); 4.20-4.04 (m, 1H, H-7); 3.93 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.59 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.53-3.48 (m, 1H, Н-7); 3.43-3.19 (m, 3H, H-8 и Н-2); 2.89-2.77 (m, 1H, Н-1); 1.90 (d, J=13.4 Гц, 1H, Н-1); 1.51 (dd, J=23.8 Гц, J=6.7 Гц, 1H А, Н-21); 1.46 (dd, J=23.8 Гц, J=6.7 Гц, 1H В, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 173.5; 171.8; 171.6; 151.9; 142.1; 141.9; 136.5; 136.4; 135.3; 130.0; 129.3; 125.1; 123.1; 118.3; 116.8; 115.8; 87.7 (d, J=161 Гц); 87.6 (d, J=161 Гц); 57.9; 57.7; 55.2; 54.7; 53.4; 53.3; 52.6; 44.3; 41.1; 40.9; 40.6; 38.7; 37.4; 29.6; 21.5; 21.1; 19.1 (d, J=23 Гц); 18.4 (d, J=23 Гц).

MS (ESI TOF): 465 [M+K⁺] (100), 891 [2M+K⁺] (33).

N_a-карбометоксикатарантин (26)

Раствор (+)-катарантина 2 (1,0 г, 3,0 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (6 мл) добавляют по каплям к суспензии гидрида калия при 0°С (510 мг, 4,5 ммоль, 1,5 экв.) в ТГФ (5 мл). После 1 ч при перемешивании при 0°С добавляют по каплям метилхлорформиат (0,35 мл, 4,5 ммоль, 1,5 экв.). После 30 минут при перемешивании при 0°С добавляют насыщенный водный раствор К₂СО₃ (10 мл). Водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×10 мл), органические фазы собирают, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/MeOH 97/3) с получением 26 (280 мг, 2,1 ммоль, 70%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₆N₂O₄ М=394 г.моль^-1

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.10 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-11); 7.49 (d, J=7.3 Гц, 1Н, Н-14); 7.33-7.24 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 5.99 (m, 1Н, Н-3); 4.21 (s, 1Н, Н-5); 3.87 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.65 (m, 1Н, H-7); 3.54 (s, 3H, CO₂CH₃); 3.23 (m, 1Н, H-8); 3.03-2.85 (m, 3H, Н-7 и Н-19); 2.47 (m, 2Н, Н-2 и H-8); 2.48 (d, J=8.5 Гц, 1Н, Н-1); 2.24 (m, 1Н, Н-20); 1.91 (m, 1Н, Н-20); 1.71 (d, J=10.3 Гц, 1Н, Н-1); 1.08 (d, J=7.3 Гц, 3H, Н-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 172.9; 151.7; 147.3; 138.6; 135.9; 129.5; 124.5; 123.3; 122.7; 119.6; 118.2; 115.4; 58.5; 55.9; 55.8; 52.9; 52.7; 52.0; 38.2; 31.5; 26.7; 21.9; 10.3.

N_a-карбометокси-9-оксокатарантин (27)

К 15 мл водного раствора Na₂CO₃ (2,07 г, 19,5 ммоль, 9,3 экв.) добавляют раствор 26 (820 мг, 2,1 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (30 мл). Добавляют по каплям раствор йода (2,46 г, 9,7 ммоль, 4,6 экв.) в ТГФ (40 мл) при 0°С. Затем реакционную смесь доводят до температуры окружающей среды и перемешивают в течение 18 часов. Затем добавляют насыщенный водный раствор Na₂S₂O₃ (30 мл) и реакционную смесь оставляют при перемешивании на 30 минут. Затем водную фазу экстрагируют CH₂Cl₂ (3×30 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/МеОН 98/2) с получением 27 (787 мг, 1,93 ммоль, 92%) в форме белого твердого вещества.

Химическая формула: C₂₃H₂₄N₂O₅ М=408 г.моль^-1

¹H ЯМР (CDCl₃): 8.06-7.98 (m, 1H, Н-11); 7.53-7.44 (m, 1H, Н-14); 7.36-7.22 (m, 2Н, Н-12 и Н-13); 6.23-6.17 (m, 1H, Н-3); 4.84 (d, J=1.8 Гц, 1H, Н-5); 4.19-4.03 (m, 1H, H-7); 3.92 (s, 3H, СО₂СН₃); 3.60 (s, 3Н, CO₂CH₃); 3.47-3.37 (m, 1H, Н-2); 3.36-3.15 (m, 3Н, Н-8 и H-7); 2.83-2.73 (m, 1H, Н-1); 2.24-1.89 (m, 3Н, Н-20 и Н-1); 1.08 (t, J=7.3 Гц, 3H, H-21).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 174.5; 171.9; 151.8; 144.1; 136.8; 135.3; 129.3; 125.6; 125.0; 123.0; 118.2; 116.8; 115.7; 59.0; 57.7; 53.4; 52.4; 44.1; 41.0; 37.8; 26.5; 21.1; 11.0.

ИК (пленка): 2996, 2959, 2881, 1739, 1681, 1461, 1443 см^-1.

MS (IC): 409 [М+Н⁺] (100).

[α]_D ²⁰=+141 (с=1,9; CHCl₃)

Аллиловое окисление защищенного катарантина (27) с получением (20R)-N_a-карбометокси-20-гидрокси-19-оксокатарантина (15)

В пробирке под давлением на 25 мл 50 мг защищенного катарантина 27 (0,123 ммоль, 1 экв.) растворяют в 1,5 мл этанола 95%. Добавляют 51 мг диоксида селена (0,459 ммоль, 3,7 экв.) в растворе в 2,5 мл 95% этанола. Пробирку герметично закрывают тефлоновой пробкой (оборудованной соединением) и помещают при 120°С (температура масляной бани) при магнитном перемешивании. Через 24 часа добавляют 40 мг (0,36 ммоль, 2,9 экв.) SeO₂ одной порцией (в твердой форме). Данную операцию повторяют каждые 24 часа в течение 4 суток (перед каждым добавлением пробирку доводят до температуры окружающей среды для безопасного открытия). После 5 суток реакции исходное вещество полностью расходуется. Реакционную смесь доводят до температуры окружающей среды и разбавляют Et₂O. Смесь промывают 20 мл рассола. Водную фазу экстрагируют Et₂O (3×20 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/MeOH 98/2, затем 95/5) с получением 35 мг (0,083 ммоль, 67%) белого твердого вещества, соответствующего аллиловому спирту 15, спектральные характеристики которого идентичны характеристикам аллилового спирта, полученным по протоколу с использованием изокатарантина.

Таким образом, 20,20-дифторкатарантин (6), (4R)-N_a-карбометокси-20,20-дифтор-3-гидро-4-гидрокси-19-оксокатарантин (19) после удалений защиты и N_a-карбометокси-20-фтор-19-оксокатарантин (22) после удалений защиты можно подвергать сочетанию способом, который сам по себе хорошо известен на уровне техники, с виндолином, затем подвергать реакции сужения кольца и, если необходимо, восстановлению внутрикольцевой двойной связи С3'-С4', что, соответственно, приводит в результате к винфлунину (1), 20',20'-дифторвинбластину (21) и 20'-фторвинорельбину (25), которые, в свою очередь, можно подвергать дополнительной стадии восстановления двойной связи с получением в результате монофторированного аналога винфлунина.

4',20'-Ангидровинбластин (28)

К смеси 60 мл глицинового буфера и 100 мл 0,1 М водного раствора соляной кислоты добавляют в один прием 1 г (2,98 ммоль, 1 экв.) изокатарантина 10. Затем после полного растворения 1,36 г (1 экв.) виндолина добавляют 2,43 г (5 экв.) FeCl₃. Реакционную смесь, помещенную в атмосферу азота, перемешивают при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Реакцию останавливают добавлением по каплям раствора 172 мг (1,5 экв.) NaBH₄ в 15 мл 28% водного раствора NH₃. После 10 минут перемешивания при температуре окружающей среды добавляют 30 мл CH₂Cl₂ и 30 мл раствора сегнетовой соли и смесь энергично перемешивают в течение 4 ч. Затем ее экстрагируют CH₂Cl₂ (4×80 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Затем сырой продукт очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/MeOH 95/5) с получением 28 (1,18 г, 1,49 ммоль, 50%).

Химическая формула: C₄₆H₅₆N₄O₈ М=792 г.моль^-1

¹H ЯМР (CDCl₃): 9.82 (sl, 1H); 7.99 (sl, 1H); 7.45 (d, J=7.6 Гц, 1Н); 7.20-7.05 (m, 3Н); 6.52 (s, 1Н); 6.10 (s, 1Н); 5.85 (dd, J=4 и 10 Гц, 1Н); 5.57 (q, J=6.4 Гц, 1Н); 5.43 (s, 1H); 5.28 (d, J=12 Гц, 1H); 3.81 (s, 3Н); 3.78 (s, 3Н); 3.76 (s, 1H); 3.61 (s, 3Н); 3.60-3.08 (m, 10Н); 2.91-2.79 (m, 2H); 2.72 (s, 3Н); 2.65 (s, 1H); 2.45-2.31 (m, 3Н); 2.16-2.05 (m, 5H); 1.84-1.71 (m, 2H); 1.67 (d, J=6.4 Гц, 3Н); 1.35-1.29 (m, 1H); 1.24-1.18 (m, 1Н); 0.78 (t, J=7.6 Гц, 3Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 8.3; 12.8; 21.1; 24.6; 30.7; 31.8; 33.3; 34.7; 38.2; 42.6; 44.6; 47.5; 50.0; 50.2; 52.2; 52.4; 53.2; 55.2; 55.8; 56.9; 59.9; 65.2; 76.4; 79.7; 83.2; 94.0; 110.5; 116.8; 118.2; 119.0; 119.8; 120.6; 122.5; 122.7; 123.3; 124.6; 129.0; 129.9; 130.0; 133.1; 135.1; 152.8; 158.0; 170.9; 171.6; 174.6.

MS (ESI-TOF): 793 [M+H⁺] (100).

нор-7'-4',20'-Ангидровинбластин (29)

При 0°С раствор 30 мкл (1 экв.) трифторуксусной кислоты в 3 мл CH₂Cl₂ добавляют по каплям к раствору 296 мг (0,374 ммоль, 2 экв.) 4',20'-ангидровинбластина 28, растворенного в 3 мл безводного CH₂Cl₂. После 10 мин перемешивания смесь охлаждают до -78°С и добавляют по каплям 67 мг (1 экв.) NBS в растворе в 3 мл CH₂Cl₂. После 20 мин при -78°С охлаждающую баню удаляют и через 15 мин добавляют 15 мл 10% водного раствора К₂СО₃. Смесь экстрагируют CH₂Cl₂ (3×15 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. Сырой продукт растворяют в 40 мл смеси ТГФ/вода 1/1 и добавляют 182 мг (2,5 экв.) тетрафторбората серебра в один прием. Смесь доводят до температуры окружающей среды и добавляют 30 мл 10% водного раствора Na₂CO₃. Смесь экстрагируют Et₂O (2×30 мл), затем CH₂Cl₂ (2×30 мл). Органические фазы объединяют, высушивают на Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме. В результате очистки хроматографией на силикагеле (Элюент: CH₂Cl₂/МеОН 93/7) получают 29 (58 мг, 0,075 ммоль, 20%) в форме бежевого твердого вещества.

Химическая формула: C₄₅H₅₄N₄O₈ M=778 г.моль^-1

¹H ЯМР (CDCl₃): 9.81 (s, 1H); 8.40 (s, 1H); 7.81 (d, J=8 Гц, 1Н); 7.18-7.09 (m, 3Н); 6.28 (s, 1H); 6.09 (s, 1H); 5.84 (dd, J=4 и 10.4 Гц, 1H); 5.74 (q, J=6.4 Гц, 1H); 5.38 (s, 1H); 5.26 (d, J=10.8 Гц, 1H); 4.55-4.45 (m, 2H); 3.86 (d, J=13.6 Гц, 1H); 3.82 (s, 3Н); 3.77 (s, 3Н); 3.71 (s, 1H); 3.68 (s, 3Н); 3.50-3.21 (m, 5H); 2.81-2.71 (m, 6H); 2.63-2.45 (m, 4H); 2.12-2.05 (m, 4H); 1.83 (m, 12H); 1.77 (d, J=6.4 Гц, 3Н); 1.91 (m, 1H); 1.41 (m, 1H); 1.23 (m, 1H); 0.69 (t, J=7.6 Гц, 3Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃): 8.1; 13.0; 21.0; 30.0; 30.6; 32.4; 33.5; 38.1; 42.6; 44.5; 45.4; 47.5; 49.7; 50.2; 52.1; 52.7; 53.2; 55.0; 55.7; 59.8; 65.0; 76.3; 79.6; 83.0; 93.9; 110.4; 118.9; 119.8; 120.6; 122.2; 122.9; 123.3; 124.8; 128.4; 129.7; 133.5; 134.5; 152.9; 157.9; 170.8; 171.5; 174.0.

MS (ESI-TOF): 779 [M+H⁺] (100).

1. Фторированные производные катарантина, соответствующие общей формуле I:

в которой пунктирная линия означает возможность присутствия двойной связи, когда замещение -X отсутствует, либо простой связи, когда -X обозначает замещение группой:
H,
R₁, R₂ и R₃ независимо друг от друга представляют собой атом фтора или метилированную группу, и
n=2.

2. Производное 20,20-дифторкатарантин по п.1 формулы I, в которой двойная связь, обозначенная пунктирной линией, присутствует, R₁ представляет собой метилированную группу, каждый R₂, R₃ представляет собой атом фтора, и n=2.

3. Применение фторированного производного катарантина по любому из пп.1 и 2 в качестве промежуточного соединения синтеза, используемого для получения фторированных димерных алкалоидов Vinca, и, в частности винфлунина.

4. Применение по п.3, отличающееся тем, что получение димерного алкалоида включает реакцию сочетания с виндолином или с производным виндолина.

5. Применение по п.4, отличающееся тем, что винфлунин получают путем сочетания виндолина с 20,20-дифторкатарантином с получением в результате 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластина.

6. Применение по п.5, отличающееся тем, что 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластин, полученный в результате указанного сочетания, подвергают реакции сужения кольца с последующей реакцией восстановления внутрикольцевой двойной связи в положении С_3'-С_4'.

7. Способ получения фторированного производного катарантина по любому из пп.1 и 2, характеризующийся тем, что включает окисление боковой цепи катарантина перед реакцией фторирования, где окисление осуществляют в условиях, приводящих к образованию окисленного производного катарантина формулы II:

где n=2;
X означает группу C=O;
Y означает группу CO₂R, где R означает нормальную или разветвленную;
С₁-С₄ алкильную группу; и
Z означает группу СН-ОН или С=O.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанному окислению предшествует стадия активации боковой цепи путем изомеризации внутрикольцевой двойной связи во внекольцевое положение путем каталитической гидрогенизации.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что внекольцевую двойную связь подвергают реакции дигидроксилирования после защиты двух атомов азота, приводящей в результате к образованию диола.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что полученный диол активируют в форме циклического сульфата, преобразуют в аллиловый спирт, затем окисляют до соответствующего енона, который подвергают реакции дифторирования, затем удалению защиты индола и восстановлению амидной группы с получением в результате 20,20-дифторкатарантина.

11. Способ по п.7, отличающийся тем, что включает защиту двух атомов азота катарантина с последующим аллильным окислением боковой цепи катарантина до спирта или до кетона перед реакцией фторирования.

12. Окисленное производное катарантина, соответствующее общей формуле II:

в которой n=2;
X обозначает группу С=O;
Y обозначает группу CO₂R, где R обозначает нормальную или разветвленную С₁-С₄ алкильную группу; и
Z обозначает группу СН-ОН или С=O.

13. Применение окисленного производного катарантина по п.12 в качестве промежуточного соединения синтеза, используемого для получения фторированных димерных алкалоидов Vinca, и, в частности винфлунина.

14. Применение по п.13, отличающееся тем, что получение димерного алкалоида включает реакцию фторирования окисленного производного катарантина с последующим удалением защиты двух атомов азота, что приводит в результате к получению фторированного производного катарантина по любому из пп.1 и 2.

15. Применение по п.14, отличающееся тем, что получение димерного алкалоида дополнительно включает реакцию сочетания между указанным фторированным производным катарантина, полученным в результате реакций фторирования и удаления защиты, и виндолином или производным виндолина.

16. Применение по любому из пп.13-15, отличающееся тем, что винфлунин получают путем сочетания виндолина с 20,20-дифторкатарантином, полученным путем фторирования и удаления защиты двух атомов азота окисленного производного катарантина по п.12, для которого Z представляет собой С=O, что приводит в результате к получению 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластина.

17. Применение по п.16, отличающееся тем, что 20',20'-дифтор-3',4'-ангидровинбластин, полученный в результате указанного сочетания, подвергают реакции сужения кольца с последующей реакций восстановления внутрикольцевой двойной связи в положении С_3'-С_4'.

18. Изокатарантин формулы (10):

19. Применение изокатарантина в качестве промежуточного соединения синтеза, используемого для получения фторированных димерных алкалоидов Vinca, и, в частности винфлунина.

20. Применение по п.19, отличающееся тем, что получение димерного алкалоида включает реакцию сочетания с виндолином или с производным виндолина.

21. Применение по любому из пп.19 и 20, отличающееся тем, что винфлунин получают путем сочетания виндолина с изокатарантином с получением в результате 4',20'-ангидровинбластина.

22. Применение по п.21, отличающееся тем, что 4',20'-ангидровинбластин, полученный в результате указанного сочетания, подвергают реакции сужения кольца с последующей реакцией гем-дифторирования, причем порядок этих двух стадий является обратимым.