Способ прогнозирования рака шейки матки при доброкачественных и предраковых процессах шейки матки у женщин репродуктивного возраста

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

A61B10/02 - Прочие способы и инструменты для диагностики, например инструменты для взятия пробы клеток, для биопсии, для диагностики путем вакцинации (вакцинация для профилактики или терапии A61B 17/20); определение пола ребенка в эмбриональном периоде; определение периода овуляции (таблицы менструального цикла G06C 3/00); приборы для осмотра гортани

Владельцы патента RU 2466392:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России) (RU)

Изобретение относится к способу прогнозирования рака шейки матки при доброкачественных и предраковых процессах шейки матки у женщин репродуктивного возраста, включающему определение клинических факторов риска развития рака шейки матки, метилирования генов MLH1, HIC1, RASSF1A, MGMT, N33, CDH1 в биоптате шейки матки и расчет коэффициента вероятности развития рака шейки матки р.

При величине р больше 0,6 прогнозируют высокую вероятность риска развития рака шейки матки,

при р, равном 0,3-0,59, прогнозируют умеренную вероятность риска развития рака шейки матки,

при р меньше 0,29 прогнозируют низкую вероятность риска развития рака шейки матки.

Способ повышает точность прогнозирования рака шейки матки при доброкачественных и предраковых заболеваниях шейки матки у женщин репродуктивного возраста. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии.

Одним из способов прогнозирования рака шейки матки является выявление и оценка следующих факторов риска: методы контрацепции, наличие инфекции, передающейся половым путем (ИППП), наличие вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска, хронические воспалительные заболевания органов малого таза, многочисленные аборты, отягощенная наследственность (Кравинская Т.А: Лечебно-диагностическая тактика при доброкачественных заболеваниях шейки матки. Дисс.… канд. мед. наук. М., 2009. - 119 с.).

Недостатком способа является невысокая точность, обусловленная выявлением только клинико-анамнестических факторов риска, которые позволяют диагностировать уже существующие патологические изменения, в то время как с позиций онкологической настороженности необходимо выявлять наиболее ранние маркеры, определяющие вероятность развития рака на максимально раннем этапе, еще до фенотипического формирования опухоли.

Прогнозирование рака шейки матки на основании проведения анализа метилирования генов в плоскоклеточных карциномах и аденокарциномах шейки матки по трем генам RARb-2, TIMP-2, TIMP-3 в присутствии ВПЧ инфекции показал, что ВПЧ позитивные плоскоклеточные карциномы отличаются друг от друга по количеству метилированных маркеров и их сочетаний. Автор отмечает, что профиль метилирования генов уникален для каждой опухоли и является доказательством того, что метилирование генов является одним из главных событий развития ВПЧ позитивных плоскоклеточных карцином шейки матки (Иванова Т.А. Гиперметилирование ДНК в опухолях человека. Дисс.…канд. биол. наук. М., 2004).

Недостатком способа является невысокая точность в связи с отсутствием взаимосвязи между клинико-анамнестическими данными и генетическими исследованиями.

Наиболее близким к предлагаемому способу является прогнозирование развития рака шейки матки на основании выявления метилирования генов p16, CDH1, MGMT, MLH1, НСl, N33 при дисплазиях шейки матки. Автор отмечает увеличение % метилирования в ряду: морфологически неизмененная смежная с CIN III ткань (цервикальная интраэпителиальная неоплазия по классификации Richart R.M.) → дисплазия (по классификации J.W.Reagan CIN III - тяжелая дисплазия и CIS), (Подистов Ю.И. Эпителиальные дисплазии шейки матки (диагностика, лечение): Дисс.…докт. Мед. наук. - М., 2005. - 246 с.).

Недостатком этого способа прогнозирования является невысокая точность, вероятно, обусловленная определением метилирования генов-супрессоров опухолевого роста только в образцах предрака шейки матки без детализации степени неопластического процесса, а также без учета доброкачественных заболеваний шейки матки, в то время как эпигенетические нарушения в геноме клетки могут возникнуть задолго до злокачественной трансформации, еще не выявляемой при морфологическом исследовании.

Задачей изобретения является способ повышения точности прогнозирования рака шейки матки.

Поставленная задача решается способом прогнозирования рака шейки матки при доброкачественных и предраковых процессах шейки матки у женщин репродуктивного возраста, включающим определение метилирования генов в биоптате шейки матки, отличием которого является определение клинических факторов риска развития рака шейки матки, и метилирования генов MLH1, HIC1, RASSF1A, MGMT, N33, CDH1, и расчета вероятности развития рака шейки матки по формуле ,

где:

р - коэффициент вероятности риска развития рака шейки матки;

е - основание натурального логарифма, равное 2,71828182845904;

z=-2,4274+2,2163*Х1+0,3791*X1+0,528*X3+1,1373*X4+1,2187*X5+2,1587*X6+26,5802*X7+1,3323*X8+1,9323*X9+1,8596*X10+1,6689*X11+1,2123*X12+1,0690*X13;

X1 - морфотип (доброкачественные процессы - 1, CIN I - 2, CIN II - 3, CIN III - 4),

X2 - метилирование MLH1 (значения: есть - 1, нет - 0),

Х3 - метилирование МGМT (значения: есть - 1, нет - 0),

Х4 - метилирование N33 (значения: есть - 1, нет - 0),

Х5 - метилирование RASSF1 (значения: есть - 1, нет - 0),

Х6 - метилирование HIC1 (значения: есть - 1, нет - 0),

Х7 - метилирование CDH1 (значения: есть - 1, нет - 0),

Х8 - ВПЧ высокого риска (значения: есть - 1, нет - 0),

X9 - дисплазия шейки матки в анамнезе (значения: есть - 1, нет - 0),

X10 - эрозия шейки матки в анамнезе (значения: есть - 1, нет - 0),

X11 - травмы шейки матки после родов/абортов (значения: есть - 1, нет - 0),

X12 - ИППП (значения: есть - 1, нет - 0);

X13 - отягощенная онкологическая наследственность (значения: есть - 1, нет - 0),

и при величине р больше 0,6 прогнозируют высокую вероятность риска развития рака шейки матки, при р, равном 0,3-0,59, - умеренную вероятность, при р меньше 0,29 - низкую вероятность. На основании полученных данных можно определить 3 группы пациенток:

- с низкой вероятностью развития рака - р=0,0-0,29;

- с умеренной вероятностью развития рака - р=0,3-0,59;

- с высокой вероятностью развития рака - р=0,6-1,0.

Практически способ осуществляли следующим образом. После проведения клиническо-анамнестических исследований выявляли клинические факторы риска развития рака шейки матки: наличие ВПЧ высокого риска, дисплазия шейки матки в анамнезе, эрозия шейки матки в анамнезе, травмы шейки матки после родов и абортов, ИППП, отягощенная онкологическая наследственность.

По показаниям производилось выскабливание цервикального канала, биопсия шейки матки. Затем часть биопсийного материала шейки матки направлялась на морфологическое исследование, другая часть - в генетическую лабораторию. Для определения метилирования генов-супрессоров применяли метод метилчувствительной полимеразно-цепной реакции (МЧ-ПЦР).

При постоянном использовании полученные результаты обследования заносились в таблицу Microsoft Office Excel. Затем в ячейки вводились индивидуальные данные каждой пациентки и вычислялся риск злокачественной трансформации эпителия шейки матки.

Вероятность развития события рассчитывалась по формуле , разработанной на основании изучения клинического и лабораторного материала с учетом бинарной логистической регрессии.

Значения коэффициентов вычислялись на основании комплексного обследования и лечения 127 пациенток репродуктивного возраста с доброкачественными и предраковыми процессами шейки матки. После обработки и анализа полученных данных в программах «Microsoft Excel» и пакете прикладных программ «Statistica for Windows» v.7.0, StatSoft Inc. (США) были определены статистически значимые факторы риска и оценен их вклад (коэффициент в формуле бинарной логистической регрессии) в вероятность развития рака шейки матки (Н.И.Пирогов. Логистическая регрессия. Основные понятия и возможности мeтодa. http://www.biometrica.tomsk.ru/logit_1.htm).

Чувствительность - 97%, специфичность - 90%.

Пример 1.

Больная К., 27 лет, обратилась с жалобами на обильные слизистые выделения из половых путей, периодически беспокоящий зуд во влагалище. При обследовании выявлены следующие факторы риска: хламидиоз в анамнезе, эрозия шейки матки, ВПЧ высокого риска. Произведена биопсия шейки матки, выскабливание цервикального канала. Морфологический диагноз - эктопия шейки матки, хр.цервицит. Метилирования генов-супрессоров не выявлено.

Таким образом: Х1=1, Х2=0, Х3=0, Х4=0, Х5=0, Х6=0, Х7=0, Х8=0,59, Х9=0, Х10=1, X11=0, Х12=1, Х13=0.

Вероятность развития рака шейки матки по предлагаемому способу составила р=0,29, что указывало на низкий риск развития рака шейки матки.

После проведения этиопатогенетической терапии произведена лазеровапоризация патологически измененных участков шейки матки. Обследование через 6 месяцев не выявило патологических изменений.

Пример 2.

Больная Н., 33 лет, обратилась с жалобами на обильные слизистые выделения из половых путей. При обследовании выявлены следующие факторы риска: разрыв шейки матки 1 ст. после родов, два аборта, криодеструкция по поводу эрозии шейки матки в анамнезе, отягощенная онкологическая наследственность, ВПЧ высокого риска в клинически значимой концентрации. Произведена биопсия шейки матки, выскабливание цервикального канала: гистоанализ - цервикальная эктопия, хр.цервицит. Методом МЧ-ПЦР выявлено метилирование генов MLH1, HICl, RASSF1A.

Таким образом: Х=1, Х2=1, Х3=0, Х4=0, Х5=1, Х6=1, Х7=0, Х8=0,65, Х9=0, Х10=1, X11=1, Х12=0, Х13=1.

Расчетное р=0,5, что указывало на умеренный риск развития рака шейки матки.

После проведения противовоспалительной и противовирусной терапии пациентке была проведена радиоволновая деструкция шейки матки. Повторное обследование через 6 мес. не выявило патологических изменений.

Пример 3.

Больная В., 36 лет, обратилась с жалобами на обильные слизистые выделения из половых путей, периодически «контактные» кровотечения. При обследовании выявлены факторы риска: разрыв шейки матки 1 ст. после родов, 3 аборта, лазеродеструкция по поводу дисплазии легкой степени, ВПЧ высокого риска, хламидиоз, уреаплазмоз. После проведения этиопатогенетической терапии пациентке произведено выскабливание цервикального канала, биопсия шейки матки. Морфологически обнаружены признаки CIN II. Методом МЧ-ПЦР выявлено метилирование генов N33, HICl, RASSF1, MLH1.

Таким образом: Х1=3, Х2=1, Х3=0, X4=1, X5=1, X6=0, X7=0, X8=0,77, Х9=1, Х10=0, X11=1, Х12=1, Х13=0.

Получили р=0,8, что указывало на высокую вероятность развития рака шейки матки. Пациентке назначено этиопатогенетическое лечение, предложена радиоволновая конизация шейки матки. Пациентка отказалась от предложенного лечения. Повторное обследование через 6 мес. выявило аденокарциному шейки матки.

Способ изобретения повышает чувствительность и прогностическую значимость прогнозирования риска развития рака шейки матки.

Способ прогнозирования рака шейки матки при доброкачественных и предраковых процессах шейки матки у женщин репродуктивного возраста, включающий определение метилирования генов в биоптате шейки матки, отличающийся тем, что определяют клинические признаки и метилирование генов MLH1, HIC1, RASSF1A, MGMT, N33, CDH1 и рассчитывают вероятность риска развития рака шейки матки по формуле:

где р - коэффициент вероятности риска развития рака шейки матки;
е - основание натурального логарифма, равное 2,71828182845904;
z=-2,4274+2,2163*Х1+0,3791*Х2+0,528*Х3+1,1373*Х4+1,2187*Х5+2,1587*Х6+26,5802*Х7+1,3323*Х8+1,9323*Х9+1,8596*Х10+1,6689*Х11+1,2123*Х12+1,0690*Х13,
X1 - морфотип (доброкачественные процессы - 1, CIN I - 2, CIN II - 3 CIN III - 4)
X2 - метилирование MLH1
Х3 - метилирование MGMT
Х4 - метилирование N33
Х5 - метилирование RASSF1
Х6 - метилирование HIC1
Х7 - метилирование CDH1
Х8 - ВПЧ высокого риска
Х9 - дисплазия шейки матки в анамнезе
X10 - эрозия шейки матки в анамнезе
X11 - травмы шейки матки после родов и абортов
Х12 - ИППП
Х13 - отягощенная онкологическая наследственность,
и при величине р больше 0,6 прогнозируют высокую вероятность риска развития рака шейки матки,
при р равном 0,3-0,59 прогнозируют умеренную вероятность риска развития рака шейки матки,
при р меньше 0,29 прогнозируют низкую вероятность риска развития рака шейки матки.

Изобретение относится к судебной медицине, в частности к судебно-медицинской экспертизе. .

Способ прогнозирования развития рака тела матки при патологических процессах эндометрия у женщин репродуктивного возраста // 2466390

Изобретение относится к способу прогнозирования развития рака тела матки, включающему определение клинических признаков и метилирования генов MLH1, RASSF1, GSTP1, р16, RAR-b, CDX1, и расчет коэффициента вероятности развития рака тела матки.

Способ оценки функционального состояния сердца // 2466389

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки функционального состояния сердца. .

Управление быстрым зарядом и питанием выполненного с батарейным питанием измерителя аналитов в текучей среде // 2465811

Способ диагностики острого и хронического риносинусита // 2465594

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии. .

Способ количественного определения антиоксидантной активности микроорганизмов // 2465593

Изобретение относится к микробиологии и клинической лабораторной диагностике. .

Способ определения цитотоксичности антигенов burkholderia pseudomallei in vitro // 2465592

Изобретение относится к области микробиологии и иммунологии и касается применения клеточной модели для оценки цитотоксичности антигенов возбудителя мелиоидоза in vitro, позволяющей получить объективные данные о токсических свойствах ряда антигенов Burkholderia pseudomallei с помощью реакции цитотоксичности, выполняемой на перевиваемых монослойных клеточных линиях мышиных фибробластов L929 или клеток яичника китайского хомячка СНО-К1.

Способ прогнозирования неблагоприятного течения реабилитационного периода после острой кишечной инфекции у детей первого года жизни // 2465591

Изобретение относится к медицине, а именно гастроэнтерологии. .

Способ прогнозирования возникновения злокачественных новообразований // 2465590

Изобретение относится к медицине, а именно к профболезням, и может быть использовано для прогнозирования возникновения злокачественных новообразований. .

Способ прогнозирования неразвивающейся беременности // 2465589

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности - в крови беременных женщин определяют концентрацию фактора некроза опухоли альфа (ФНО ), интерлейкина 1 бетта (ИЛ 1 ), интерлейкина 6 (ИЛ6).

Способ подготовки образцов недекальцинированного суставного хряща с подлежащей субхондральной костью для многоцелевых исследований // 2466375

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для обработки биопсийного материала с целью диагностики патологии и изучения влияния различных факторов на состояние суставного хряща и субхондральной кости.

Установка для исследования транспорта тканевой жидкости // 2465833

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к установкам для исследования транспорта тканевой жидкости на лабораторных животных, и может быть использовано для исследования интерстициального транспорта и лимфатического дренажа метаболитов путем определения времени удаления из тканей в лимфатический капилляр введенного в ткань лимфотропного красителя.

Способ прогнозирования остеопоротических переломов позвоночника у женщин старше 50 лет // 2465832

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и ревматологии. .

Способ прогнозирования постинфарктного ремоделирования миокарда левого желудочка у больных инфарктом миокарда // 2464936

Изобретение относится к области медицины, а именно кардиологии. .

Способ оценки функциональных резервов организма человека // 2464935

Изобретение относится к области медицины, а именно к функциональной диагностике, и может быть использовано в поликлиниках, центрах профилактической медицины, санаториях, а также в кабинетах восстановительной медицины в виде компьютерной программы для диагностики.

Способ диагностики рака и потенциальной устойчивости злокачественных клеток к гипоксии // 2463963

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии. .

Способ лабораторного контроля уровня физической нагрузки на организм спортсмена-бадминтониста // 2463962

Изобретение относится к области спортивной медицины, а именно к методам лабораторной диагностики. .

Способ диагностики дисфункции билиарного тракта у детей // 2463961

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии. .

Способ оценки эстетических результатов стоматологического лечения // 2463955

Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии и предназначено для оценки эстетических результатов стоматологического лечения. .

Способ оценки интенсивности деструктивных процессов при травматическом повреждении коленного сустава и прогнозирования развития посттравматического артроза // 2463000

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии. .

Способ диагностики состояния кожи пациента (варианты) // 2466680

Изобретение относится к области биофармакологии, биотехнологии, медицины и косметологии и может быть использовано в лечебно-профилактических учреждениях косметологического профиля