Способ профилактики и лечения крупного рогатого скота от хламидиоза
Владельцы патента RU 2506059:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Чувашская государственная сельскохозяйственная академия" (RU)
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способу профилактики и лечения хламидиоза крупного рогатого скота. Способ профилактики и лечения хламидиоза крупного рогатого скота включает применение в качестве основы лечебного препарата тетрациклина в дозе 10 тыс. Е.Д. на кг массы животного при использовании в качестве растворителя диметилсульфоксид - 20%. Для пролонгации действия тетрациклина и стимуляции иммунной реактивности организма к нему добавляют поливинилпирролидон - 4% и 1,2-пропандиол до 100%. Использование заявленного изобретения позволит снизить кратность введения препарата без увеличения дозы антибиотика на 1 инъекцию. 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к ветеринарной фармакологии, в частности к проблеме разработки фармакологических препаратов пролонгированного действия, используемые для лечения крупного рогатого скота при хламидиозе.
Изобретения направлено для повышения экономичности лечебных мероприятий при заболеваниях сельскохозяйственных животных хламидиозом крупного рогатого скота и другими болезнями.
Отличительной особенностью тетрациклина пролонгированного действия (ТПД) является то, что продолжительность его фармакологической активности значительно выше, чем у тетрациклина гидрохлорида аналога за счет сохранения в организме бактериостатической концентрации от 72 до 96 ч. ТПД позволяет снизить кратность введения препарата с до 2-3 введений с интервалом 72 ч, без увеличения дозы антибиотика на 1 инъекцию.
В качестве основы лечебного препарата применяют тетрациклин при использовании в качестве растворителя диметилсульфоксида, а для пролонгации действия тетрациклина и стимуляции иммунной реактивности организма к нему добавляют поливинилпирролидон и 1,2-пропандиол.
Препараты поливинилпирролидона (ПВП) по МРТУ 42-1928-71 широко применяются в медицине в качестве компонента при комплексном лечении заболеваний, в патогенезе которых ведущее значение имеет интоксикация организма. В последующие годы на основе ПВП разработаны препараты, предназначенные для инфузионного и перорального применения, обладающие высокими сорбционными свойствами, связывающие различные токсические вещества и способствующие их быстрому выведению из организма.
1,2-пропандиол согласно ТУ 6-09-2434-81 бесцветная густая жидкость, без запаха, обладает сладким вкусом, растворяется в воде и спирте, применяется в фармацевтической и парфюмерной промышленности. Диметилсульфоксид согласно ТУ 6-09-3818-89 бесцветная жидкость со специфическим запахом, является очень хорошим противовоспалительным средством с антимикробным действием. Он хорошо проникает через кожу и обладает местноанестезирующим действием.
Патент на тетрациклин пролонгированного действия получен от 10.02.1996 г. №2053772 Российской Федерации, авторы Кузнецова Е.А., Кузнецов В.В., Сметов П.К.
Пример 1. Техническое решение характеризуется следующей совокупностью существенных признаков. Способ получения препарата для лечения или профилактики хламидиоза у крупного рогатого скота, характеризующийся тем, что 1,2-пропандиол и Диметилсульфоксид по отдельности стерилизуют в автоклаве в течение 20 минут, затем при
комнатной температуре с соблюдением асептики последовательно растворяют в диметилсульфоксиде поливинилпирролидон и тетрациклин, после чего к полученному раствору добавляют 1,2-пропандиол, при этом исходные компоненты взяты в следующем соотношении диметилсульфоксид - 20%, поливинилпирролидон - 4%, тетрациклин - 8-12%, 1,2-пропандиол - до 100%.
Готовый препарат представляет собой однородную жидкость темно-коричневого цвета. Хранение в условиях холодильной камеры. При комнатной температуре 4-боС сохраняет активность в течение 12 месяцев.
Пример 2. Для определения оптимальной фармакологической дозы и рациональной схемы применения препарата при лечении хламидиоза нами сформированы 4 группы коров-аналогов, живой массой 500 кг по 6 голов в каждой. В группы включены коровы, заболевание которых сопровождалось абортами на 7-9 месяце беременности с клиническими признаками болезни:
задержание околоплодных оболочек, воспаления слизистой оболочки матки, влагалища, поражения конъюнктивы (истечения с глаз, опухание век, светобоязнь).
Животным 1-й группы препарат вводили в дозе 5,0 тыс.е.д./кг живой массы, внутримышечно, в область крупа, 2-й группы - в дозе 10 тыс.е.д./кг, 3-й группы - 15 тыс.е.д./кг и 4-й контрольной группы - тетрациклин гидрохлорид в дозе 10000 е.д./кг.
Из приведенных данных табл.1 выявлено, что выведение из организма антибиотиков тетрациклинового ряда происходит с мочой, о чем судили по зоне диффузии в агар. Исследования проводили через 24, 48, 72, 96, 144, 192 и 240 часов после однократного введения препарата. При исследовании динамики выведения тетрациклина пролонгированного действия в дозе 5000 е.д./кг массы животных с мочой после однократного внутримышечного введения установлено, что период выделения препарата из организма с 12-96 часов ниже терапевтической концентрации; в дозе 10000 е.д./кг -терапевтическая концентрация продолжала выделяться с мочой до 96 часов зона диффузии в агар 26,9±0,14 и через 96 часов 14,2±0,49, затем выявлено снижение зоны диффузии в агар; в 3-ей группе эти показатели были через 12 часов 28,7±0,31 и через 96 часов 14,9±0,14. В дальнейшем наблюдали снижение выделения тетрациклина ниже терапевтической концентрации. Животным контрольной группе вводили тетрациклин гидрохлорид в инструктивной дозе. При этом выделение тетрациклина с мочой в терапевтической концентрации выявлено через 12 часов 14,3±0,47. Через 24 часа этот показатель был 11,0±0,24 не в терапевтической концентрации. В связи с тем, что терапевтическая концентрация тетрациклина пролонгированного действия через 96 часов снижается до порогового значения при лечении хламидиоза, было принято повторное введение препарата.
Пример 3. Для лечения крупного рогатого скота при хламидийной инфекции в базовом хозяйстве нами были сформированы 2 группы коров-аналогов (опытная и контрольная) по 6 животных в каждой. Коров опытной группы лечили тетрациклином пролонгированного действия, который назначался в дозе 10000 е.д./кг живой массы, трехкратно, внутримышечно, в область крупа, с интервалом 72 часа. Коровам контрольной группы назначался препарат аналог - тетрациклин гидрохлорид в дозе 10000 е.д./кг живой массы, предусмотренной наставлением (2 раза в сутки, с интервалом между введениями 12 часов, внутримышечно, в область крупа).
При этом нами изучена динамика титров специфических антител в РСК, ИФА и ПЦР крупного рогатого скота при ликвидации хламидиоза в СХПК им. Калинина Ибресинского района ЧР.
По данным таблицы 2 видно, что при серологическом исследовании сыворотки крови коров опытной и контрольной групп в РСК и ИФА через 30 дней мы установили снижение титров антител и количество положительно реагирующих в РСК животных. Так, у животных опытной группы на 15-й день после проведения лечебных мероприятий в сыворотке крови обнаружены антитела к возбудителю хламидий в РСК были на уровне в титрах 1:5+++. В контрольной группе животных этот показатель на 15-е сутки был 1:10+++, затем на 30-е сутки 1:10++ и на 60-е сутки 1:5+.
При исследовании сывороток крови животных опытных групп в ИФА до проведения лечебных мероприятий обнаружены антитела в титре 1:640, а через 15 суток после лечения тетрациклином пролонгированного действия выявлены антитела в титре 1:320 и на 30-е сутки 1:40. На 60-е сутки исследования титр антитела в ИФА не обнаружены. В контрольной группе антитела в ИФА выявлены до лечения 1:1280, после проведения лечебных мероприятий ИФА, эти результаты плавно снижались от 1:640 до 1:160, при коэффициенте специфичности >2,1.
Результаты исследования ПНР показало, что до лечения в опытной и контрольной группах были выделены хламидий. У животных опытной группы на 15-, 30- и 60-сутки исследования хламидий не выделены. В контрольной группе во все сроки исследования выделены хламидий.
Бактериологические исследования патологического материала крупного рогатого скота на наличие хламидий проведены путем заражения белых мышее. При бактериологическом исследовании паренхиматозных органов зараженных мышей установлено, что до проведения лечебных мероприятий выделена культура хламидий. После трехкратного введения препарата ТПД в опытной группе происходило оздоровление организма крупного рогатого скота, т.е. при исследовании на 30-е и 60-е сутки хламидий не выделены. В контрольной группе во все сроки исследования выделены хламидий.
Пример 4. Нами были изучены показатели неспецифической резистентности коров за 60, 30, 7 дней до отела, сразу после отела и через 10 дней после родов на фоне применения ТПД и тетрациклина гидрохлорида.
Для этого в базовом хозяйстве сформированы две группы коров-аналогов черно-пестрой породы, за 60 дней до родов по 6 голов в каждой. В группы включены положительно реагирующие в РСК и ПЦР животные. Из таблица 3. видно что, у коров, которым назначался ТПД, фагоцитарная активность лейкоцитов до родов достоверно увеличивалась и за 60, 30 и 7 суток до отела показатели были равны 47,6±2,3%, 56,4±1,9 и 58,8±3,4%,. В послеродовой период фагоцитарная активность постепенно снижалась. Так, если в первый день после отела этот показатель был равен 57,2±1,8%, то на 10 сутки - 50,8±1,1% (Р<0,02). Такая закономерность в динамике фагоцитарной активности при лечении коров тетрациклином пролонгированного действия указывает об улучшении обменных процессов в организме, которые направлены на повышение неспецифической резистентности в периоды наивысшего напряжения.
Анализируя полученные результаты можно заключить, что ТПД является более эффективным лечебным препаратом в терапии хламидиоза по сравнению с тетрациклином гидрохлоридом, о чем свидетельствует быстрое клиническое выздоровление. Таким образом, при лечении хламидийной инфекции ТПД, который животным вводили трехкратно до исчезновения клинических симптомов, улучшение наступало в среднем за 4,5±0,3 суток. Лечение животных контрольной группы тетрациклином гидрохлоридом привело к исчезновению клинических признаков болезни через 7,1±0,3 суток. За все время лечения животным опытной группы сделали всего по 3 инъекции, в контрольной - по 14, т.е. в опытной группе 4,7 раза меньше введений препарата.
| Таблица 1 | ||||
| Динамика выделения тетрациклина с мочой коров после однократного введения (n=6) | ||||
| Сроки исследования (в часах) | Зона диффузии в агар, мм | |||
| 1-я опытная, 5000 ед/кг | 2-я опытная, 10000 ед/кг | 3-я опытная, 15000 ед/кг | 4-я контр., 10000 ед/кг | |
| 12 | 14,1±0,19 | 26,9±0,12 | 28,7±0,31 | 14,3±0,47 |
| 24 | 13,5±0,24 | 26,0±0,14 | 26,9±0,39 | 11,0±0,24 |
| 48 | 11,5±0,17 | 21,9±0,34 | 25,9±0,34 | следы |
| 72 | 10,3±0,12 | 19,3±0,27 | 21,3±0,25 | - |
| 96 | 9,1±0,15 | 14,5±0,49 | 14,9±0,14 | - |
| 144 | следы | 13,2±0,26 | 13,7±0,36 | - |
| 192 | - | 11,3±0,35 | 11,7±0,43 | - |
| 240 | - | 10,4±0,21 | 10,9±0,25 | - |
| Таблица 2 | ||||
| Динамика титров специфических антител в РСК крупного рогатого скота при лечении хламидиоза | ||||
| Сроки исследования, сутки | Опытная, тетрациклин пролонгированного действия | Контрольная, тетрациклин гидрохлорид | ||
| РСК | ИФА | РСК | ИФА | |
| до лечения | 1:10++++ | 1:640 | 1:10++++ | 1:1280 |
| 15 | 1:5+++ | 1:320 | 1:10+++ | 1:640 |
| 30 | - | 01:40:00 | 1:10++ | 1:320 |
| 60 | - | - | 1:5+ | 1:160 |
| Таблица 3 | |||
| Активность клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности коров (n=6) | |||
| Сроки исследования животных | Группы животных | Фагоцитарная активность лейкоцитов, % | Бактерицидная активность сыворотки крови, % |
| 60 суток до родов | опытная | 47,6±2,3 | 50,2±1,2 |
| контрольная | 47,6±3,9 | 49,9±1,9 | |
| 30 суток до родов | опытная | 56,4±1,9* | 53,9±2,8 |
| контрольная | 49,8±1,2 | 49,4±1,6 | |
| 7 суток до родов | опытная | 58,8±1,4* | 53,0±1,9 |
| контрольная | 49,8±2,8 | 49,5±1,5 | |
| В первый день после родов | опытная | 57,2±1,8* | 51,5±1,2 |
| контрольная | 50,2±2,2 | 49,7±1,6 | |
| 10 суток после родов | опытная | 50,8±1,1 | 51,9±1,2 |
| контрольная | 51,2±3,7 | 50,0±1,7 |
Способ профилактики и лечения хламидиоза крупного рогатого скота, включающий применение в качестве основы лечебного препарата тетрациклина в дозе 10 тыс.ЕД/кг массы животного при использовании в качестве растворителя диметилсульфоксида - 20%, отличающийся тем, что для пролонгации действия тетрациклина и стимуляции иммунной реактивности организма к нему добавляют поливинилпирролидон - 4% и 1,2-пропандиол до 100%.
