Способ получения богатой тромбоцитами плазмы и ее применения в составе мази

Изобретение относится к медицине, а именно к эфферентной терапии и травматологии, и может быть использовано при необходимости стимуляции костной регенерации. Для этого осуществляют забор крови с последующей стабилизацией ее 3,8% раствором цитрата натрия. Затем кровь центрифугируют при 1000-1500 об/мин (около 300 g) в течение 5-7 мин. После измерения содержания тромбоцитов плазму лиофилизируют. Лиофилизат вводят в состав мази в соотношении, предусматривающем итоговую концентрацию тромбоцитов в ней не менее 800×109/л. Полученную мазь накладывают на поверхность тела в проекции зоны регенерации. Способ обеспечивает эффективную и ускоренную консолидацию костной ткани за счет выраженного увеличения остеобластов в зоне регенерации при одновременном снижении травматичности введения богатой тромбоцитами плазмы. 3 ил.,1 табл.,1 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при лечении больных различных профилей, которым показано применение богатой тромбоцитами плазмы в целях стимуляции регенераторных процессов.

Известно получение и применение богатой тромбоцитами плазмы (БТП) в ортопедии в виде геля при смешивании с хлоридом кальция и тромбином (Гайдуков В.Е. Хирургическое лечение несросшихся переломов и ложных суставов длинных трубчатых костей с использованием богатой тромбоцитами аутоплазмы: Автореф. дис. на соискание …кандидата медицинских наук 14.00.27 - хирургия, 14.00.22 - травматология и ортопедия. - Воронеж, 2009. - 22 с. Доступ URL: ). БТП получают известным способом (Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. / Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.А. и др./ Под ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987. - 368 с.), согласно которому кровь при заборе стабилизируют 3,8% раствором цитрата натрия, центрифугируют при 1000-1500 об/мин (около 300 g) в течение 5-7 мин. Полученную БТП непосредственно перед применением переносят в стерильную емкость, в которую заранее добавляют 10% раствор хлористого кальция из расчета 2 мл на 20 мл аутоБТП в смеси с тромбином, взятым из расчета 50-60 единиц на 20 мл сгустка БТП, перемешивают, а затем вводят в зону псевдоартроза.

Однако этот способ получения и применения БТП осуществим только в процессе оперативного вмешательства при непосредственном доступе в зону стимуляции регенерации, травматичен, требует участия квалифицированного специалиста и соблюдения правил стерильности. Кроме того, этот способ не предусматривает возможности дополнительного концентрирования тромбоцитов после получения БТП, в то время как известно, что эффект стимуляции костной регенерации тем более выражен, чем больше концентрация тромбоцитов (Haynesworth SE, Kadiyala S, Liang LN, et al: Mitogenic stimulation of human mesenchymal stem cells by platelet release suggest a mechanism for enhancement of bone repair by platelet concentrates. Presented at the 48th Meeting of the Orthopedic Research Society, Boston, MA, 2002. - цит. по Marx R.E. Platelet-Rich Plasma: Evidence to Support Its Use. // J. Oral Maxillofac Surg. - 2004. - V.62. - P.489-496, доступ URL: http://www.drkoprp.com/pdfs/prp/PRPbyDr.Marx.pdf).

Задачей изобретения является разработка способа получения и применения БТП, обеспечивающего снижение травматичности его выполнения, расширение показаний к применению, а также возможность дополнительного концентрирования тромбоцитов.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения богатой тромбоцитами плазмы и ее применения в составе мази, включает забор крови, ее стабилизацию 3,8% раствором цитрата натрия, центрифугировании при 1000-1500 об/мин (около 300 g) в течение 5-7 мин, и после измерения содержания тромбоцитов плазму лиофилизируют, лиофилизат вводят в состав мази в соотношении, предусматривающем итоговую концентрацию тромбоцитов в ней не менее 800×109/л, а затем полученную мазь накладывают на поверхность тела в проекции зоны регенерации.

Настоящее изобретение поясняют морфологическими исследованиями, подробным описанием, примером практического использования и иллюстрациями, на которых изображено:

Фиг.1 - рентгенограммы бедра и голени пациента до лечения;

Фиг.2 - рентгенограммы перед началом применения способа;

Фиг.3 - рентгенограммы после окончания применения способа.

Морфологические исследования

Донорами БОТП были интактные мыши. Выделение БОТП проводили по общепринятой методике [Лабораторные методы исследования в клинике: справочник. / Меньшиков В.В. и др./ Под ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987. - 386 с.]. Измерение тромбоцитов проводили на анализаторе агрегации тромбоцитов «Биола».

У животных - реципиентов мази моделировали перелом ребра. В качестве основы мази был выбран препарат Тизоль, разрешенный к медицинскому применению. Средство начинали наносить через сутки после операции на кожную область проекции остеотомии и продолжали в течение 6 суток. В контрольной группе животных (n=5) наносили Тизоль без БОТП, в экспериментальной группе (n=7) - суспензию лиофилизата БОТП на Тизоле. Доза тромбоцитов составила 22,8×109/кг массы реципиента. Через 10 суток после операции проводили забой животных и выделяли материал для морфологических исследований области перелома. Гистоморфометрические исследования включали подсчет количества клеток остеобластической и хондробластической линий дифференцировки на единицу площади периостальной костно-хрящевой мозоли.

Данные представлены в виде медиан и квартилей. Для проверки гипотез использовали критерий Вилкоксона для независимых выборок. Полученные результаты приведены в таблице.

Влияние аппликаций БОТП на морфометрические показатели области остеотомии
Показатель ОБ* ХБ
Контрольная группа (Тизоль в соответствующем разведении) Медиана 0,733 7,317
Квартиль 1 0,533 6,583
Квартиль 3 0,983 7,383
Экспериментальная группа (суспензия лиофилизата БОТП на Тизоле)
Медиана 3,233 3,325
Квартиль 1 1,979 2,979
Квартиль 3 3,383 3,738
р-значение по критерию Вилкоксона для независимых выборок 0,005766 0,005766
*ОБ, ХБ соответственно количество клеток остеобластической и хондробластической линий дифференцировки на единицу площади периостальной костно-хрящевой мозоли (0,0025 мм2).

Таким образом, полученные данные показали достоверно более высокое количество клеток остеобластической линии дифференцировки (440% от контрольных значений) и меньшее количество клеток хондробластической линии дифференцировки (45% от контрольных значений) в регенерате животных экспериментальной группы через 10 суток после операции по остеотомии ребра.

Способ осуществляют следующим образом.

У пациентов забирают кровь в количестве 50-100 мл, стабилизируют 3,8% раствором цитрата натрия, центрифугируют при 1000-1500 об/мин (около 300 g) в течение 5-7 мин.

После измерения содержания тромбоцитов полученную аутоплазму лиофильно высушивают с помощью устройства для лиофильного высушивания. Лиофилизат вводят в имеющий консистенцию мази состав, обладающий способностью проникновения через кожные покровы (например, на основе геля «Тизоль») в таком соотношении, чтобы концентрация тромбоцитов в конечном объеме мази была не менее 800×109/л. Полученный состав апплицируют на поверхность тела пациента в проекции зоны формирования костного регенерата (кожи, кости, сухожилий, мышц, нервов и т.п.).

Практическое использование способа иллюстрируется следующим клиническим наблюдением.

Пациент Л., 32 г., истории болезни № 6937. Диагноз: врожденная аномалия развития верхних и нижних конечностей, вальгусная деформация левой нижней конечности. Произведен монолокальный остеосинтез костей левого бедра и левой голени аппаратом Илизарова.

К 70-му дню после операции у больной отмечалась замедленная регенерация костей бедра и голени. Для стимуляции репаративного процесса больной были назначены аппликации с богатой тромбоцитами аутоплазмой, согласно предложенному способу. Объем плазмы составил 80,0 мл, количество тромбоцитов - 519×109/л. Полученную аутоплазму лиофильно высушили, растворили в 12,5 мл воды для инъекций и соединили с 37,5 г геля «Тизоль». Итоговая концентрация тромбоцитов в мази составила 830×109/л тромбоцитов. Полученную мазь, начиная с 89-го дня после операции, в течение 35 дней наносили на поверхность кожи в проекциях зон регенерации костей бедра и голени. К концу указанного срока рентгенологически отмечали ускорение консолидации костей бедра и голени, что выразилось в формировании хорошо выраженных регенератов однородной плотности. Общий срок фиксации составил 120 дней.

Применение способа в ФГБУ «РНЦ «ВТО» им. акад. Г.А. Илизарова показало, что он сокращает сроки лечения пациентов ортопедо-травматологического профиля (интрамедуллярный остеосинтез, чрескостный остеосинтез и т.д.), прост в выполнении, малоинвазивен и значительно расширяет возможность применения БТП.

Способ получения богатой тромбоцитами плазмы и ее применения в составе мази, включающий забор крови, ее стабилизацию 3,8% раствором цитрата натрия, центрифугирование при 1000-1500 об/мин (около 300 g) в течение 5-7 мин, отличающийся тем, что после измерения содержания тромбоцитов плазму лиофилизируют, лиофилизат вводят в состав мази в соотношении, предусматривающем итоговую концентрацию тромбоцитов в ней не менее 800×109/л, а затем полученную мазь накладывают на поверхность тела в проекции зоны регенерации.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии, и может быть использовано для профилактики и лечения отторжения почечного трансплантата. Для этого проводят экстракорпоральный фотоферез путем введения фотосенсибиллизатора, выделение концентрата мононуклеарных клеток, разведения его физраствором с последующим ультрафиолетовым облучением полученной суспензии.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при лечении пациентов с хроническим бронхитом в сочетании со вторичным иммунодефицитом.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при консервативном лечении эпикондилита плеча. .

Изобретение относится к медицине, в частности к процессам и устройствам сепарации компонентов крови. .

Изобретение относится к медицине, а именно к эфферентной терапии, иммунологии, трансфузиологии и интенсивной терапии, и может быть использовано при лечении эндотоксикозов различной этиологии.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и гематологии, и может быть использовано при лечении больных с рефракторным и рецидивным течением лимфомы Ходжкина.

Изобретение относится к медицине. .
Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии и эфферентной терапии, и может быть использовано при лечении пациентов с черепно-мозговой травмой на фоне гипертензионного синдрома в острый период.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургической стоматологии и физиотерапии, и может быть использовано в дентальной имплантологии для профилактики ранних послеоперационных инфекционно-воспалительных осложнений после проведения вмешательств на костной ткани.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано в комплексном лечении рака желудка. .

Изобретение относится к области медицины. Для заготовки донорской крови проводят взятие дозы донорской крови по весу или объему в емкость для крови с консервирующим раствором с одновременным перемешиванием крови в емкости для крови с консервирующим раствором. Одновременно с взятием дозы крови осуществляют охлаждение крови до нормативно-установленной температуры в течение времени, которое не превышает 12 минут. Способ повышает качественные характеристики заготавливаемой крови за счет одновременного осуществления действий: взятия дозы донорской крови и охлаждения забираемой крови. 5 табл., 4 пр.
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для лечения животных с хирургическим сепсисом. Для этого внутримышечно вводят кобактан в дозе 2 мл на 50 кг массы тела ежедневно в течение 7 дней, подкожно вводят глутоксим в дозе 3 мг на кг массы тела 1 раз в 2 суток в количестве 10 инъекций, а также проводят 1-3 сеанса гемосорбции с интервалом 24-48 часов. Способ позволяет повысить эффективность лечения при снижении летальности за счет подавления микробного фактора, нейтрализации и выведения из организма токсинов, а также нормализации функциональных нарушений. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для экстракорпорального непрямого электрохимического окисления крови у больных с инфекционно-воспалительными заболеваниями органов мочевой системы. Для этого проводят окисление 2-х литров крови 0,06% раствором гипохлорита натрия со скоростью 2-2,5 мл/мин, при скорости кровотока 40-50 мл/мин. При этом кровь пациента окисляется 0,06% раствором гипохлорита натрия в экстракорпоральном венозном контуре в общей дозе 0,75 мг/кг, и может применяться амбулаторно у больных с эндотоксикозом 1 степени. Изобретение обеспечивает возможность использования экстракорпорального непрямого электрохимического окисления крови у больных с инфекционно-воспалительными заболеваниями органов мочевой системы в амбулаторных условиях, в связи с тем что не нарушает основных биохимических гомеостатических констант организма, повышает концентрацию в крови IgG, вызывает минимальный иммунодепрессивный эффект. 17 табл., 4 пр.

Изобретение предлагает колонку для очистки крови. Устройство содержит цилиндрический корпус, первую насадку, имеющую первый канал для крови, вторую насадку, имеющую второй канал для крови, носитель-адсорбент, первую концевую пластину, вторую концевую пластину и трубку для протекания крови с отверстиями, при этом: один конец трубки для протекания крови сообщается с первым каналом для крови, а другой конец закрыт; первая концевая пластина установлена таким образом, чтобы ее наружная периферийная поверхность плотно контактировала с внутренней периферийной поверхностью цилиндрического корпуса; между наружной периферийной поверхностью второй концевой пластины и внутренней периферийной поверхностью цилиндрического корпуса предусмотрен зазор; отношение наружного диаметра трубки для протекания крови в поперечном сечении, перпендикулярном продольному направлению, D1, к внутреннему диаметру цилиндрического корпуса в поперечном сечении, перпендикулярном продольному направлению, D2, составляет 0,35-0,50; а емкость крови составляет 6-10 мл. Целью данного изобретения является предоставление колонки для очистки крови с уменьшенной емкостью крови 10 мл или менее, которая обладает низким риском закупоривания трубки для протекания крови и допускает ручное обматывание носителя-адсорбента. 6 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к центрифугам сепараторов компонентов донорской крови или аутогемотрансфузеров. Центрифуга сепаратора компонентов крови содержит корпус, привод центрифуги, вращающийся столик для крепления сменной емкости и муфту, соединяющую вращающийся столик с выходным валом привода центрифуги. Муфта содержит переходную втулку, жестко закрепленную на выходном валу привода центрифуги и имеющую опорный буртик в нижней части втулки для фиксации осевого положения вращающегося столика, многогранный наконечник для передачи крутящего момента на вращающийся столик и резьбу в верхней части канала втулки, шайбу, охватывающую наконечник муфты и жестко закрепленную на полочке вращающегося столика, и замыкающий элемент, выполненный в виде винта с плоской поджимающей поверхностью, взаимодействующей с поверхностью шайбы. Технический результат - обеспечение высокой надежности крепления вращающегося столика на валу привода центрифуги при малых осевых размерах узла крепления. 8 з.п. ф-лы, 3 ил.

Группа изобретений относится к медицинской технике. Кассета для текучей среды для системы обработки крови содержит корпус кассеты, образующий конструкцию кассеты и имеющий путь для текучей среды, по меньшей мере, частично проходящий через корпус. Путь для текучей среды выполнен с возможностью обеспечения прохождения текучей среды через корпус. Жесткая конструкция образует полость, сообщающуюся по текучей среде с путем для текучей среды. Жесткая конструкция имеет границу раздела для сопряжения с устройством контроля давления и обеспечения измерения давления в пути для текучей среды посредством устройства контроля давления. Полость выполнена с возможностью удерживания объема воздуха, расположенного между путем для текучей среды и границей раздела, при прохождении текучей среды через корпус. Раскрыты способ контроля давления в кассете для текучей среды для системы обработки крови и система контроля давления для использования в устройстве для обработки крови. Технический результат состоит в упрощении изготовления и подготовки к работе. 3 н. и 35 з.п. ф-лы, 6 ил.

Группа изобретений относится к медицине. Устройство содержит применяемое на индивидууме средство взятия крови, блок анализа, связанный со средством для взятия крови, для определения и предоставления характеристик крови в виде результата анализа крови, исполнительный блок, связанный с применяемым на индивидууме средством обратной подачи и выполненный с возможностью передачи вещества индивидууму через средство обратной подачи. При этом исполнительный блок содержит блок резервуара, который создает запас веществ. С блоком резервуара предусмотрен блок дозирования, который с учетом результатов анализа крови выбирает вещества или изготавливает смесь веществ. Устройство также содержит блок оценки и контроля, выполненный с возможностью осуществления обмена информацией с блоком анализа и блоком дозирования и генерации управляющих сигналов для управления блоком дозирования. При осуществлении способа у индивидуума берут кровь, которую подвергают анализу. Затем с учетом результата анализа крови и критериев оценки определяют тип и количество веществ или смеси веществ. Причем вещества или смесь веществ в дозированной форме подмешивают к взятой крови для получения модифицированной крови, которую используют для реперфузии в индивидуум, или в форме перфузионного раствора используют вместо взятой крови для реперфузии в индивидуум. Группа изобретений позволяет осуществлять реанимацию автоматически без риска возникновения ишемических повреждений портативным автономным устройством и увеличить временной промежуток между возникновением остановки сердца и вводом реанимационных мероприятий. 2 н. и 23 з.п. ф-лы, 4 ил.

Группа изобретений относится к медицинской технике. Устройство содержит ротор центрифуги, приспособленный для вращения вокруг оси вращения, разделительную ячейку на роторе, которая приспособлена для приема разделительного мешка, содержащего объем крови. Разделительный мешок имеет соединение с комплектом мешков. Комплект содержит мешок для компонентов и вспомогательный мешок. Разделительная ячейка расположена радиально снаружи от оси вращения в области с большой центробежной силой. Полость на роторе для помещения мешка для компонентов расположена радиально снаружи от оси вращения и радиально внутри от разделительной ячейки в области с промежуточной центробежной силой. Множество клапанов приспособлено для взаимодействия с трубками, соединяющими мешки. Углубление на роторе для вспомогательного мешка расположено радиально снаружи от оси вращения и радиально внутри относительно полости в области с низкой центробежной силой относительно положения полости. Раскрыт способ использования устройства. Изобретения обеспечивают возможность обработки множества проб крови. 2 н. и 13 з.п.ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к геронтологии, и может быть использовано для реабилитации больных с хронической обструктивной болезнью легких старших возрастных групп в стадии ремиссии. Для этого проводят озонотерапию путем внутривенного введения 200,0 мл озонированного физиологического раствора с концентрацией озона в озоно-кислородной газовой смеси 600 мкг/л, через день. При этом больным проводят 8 процедур озонотерапии на фоне постоянного барботажа физиологического раствора озоно-кислородной газовой смесью, при этом первые четыре процедуры выполняют со скоростью введения раствора 5-7 мл/мин и длительностью процедуры 30-40 минут, а последующие процедуры осуществляют, увеличивая скорость введения раствора до 8-10 мл/мин при сокращении длительности процедуры до 20-25 минут. Изобретение обеспечивает безопасность и эффективность восстановительного лечения больных ХОБЛ старших возрастных групп, сокращение сроков клинико-метаболической реабилитации, повышение качества жизни указанной группы больных. 4 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, травматологии и ортопедии, и может быть использовано для лечения остеоартроза коленного сустава. Проводят внутрисуставную инъекцию обогащенной тромбоцитами аутогенной плазмы. Для ее подготовки проводят забор венозной крови с добавлением 10 мл 5% цитрата натрия, отделение эритроцитов путем первого центрифугирования при 1800 об/мин и концентрацию тромбоцитов путем второго центрифугирования при 3400 об/мин, с последующим забором не более 5 мл подготовленной плазмы. В ней перед введением в коленный сустав активируют тромбоциты путем добавления 10% раствора хлорида кальция в объеме не более 0,1 мл. При этом забор венозной крови осуществляют перед инъекцией в коленный сустав в объеме не более 50 мл, первое центрифугирование при 1800 об/мин проводят в течение 10 мин, затем проводят второе центрифугирование верхнего слоя плазмы при 3400 об/мин. И после этого производят забор осадка плазмы, который вводят в коленный сустав непосредственно после забора. Дополнительно через неделю после данной однократной внутрисуставной инъекции плазмы, обогащенной тромбоцитами, в коленный сустав дважды, с периодичностью в одну неделю, вводят препарат гиалуроновой кислоты - русвиск. Способ обеспечивает выраженный и стойкий обезболивающий эффект, улучшение функции коленного сустава. 1 пр.
Наверх