Способ персонифицированного прогнозирования эффективности терапии хронического гепатита с пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для персонифицированного прогнозирования эффективности терапии хронического гепатита С пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином. Определяют показатели стадии фиброза печени от F0 до F4, количество тромбоцитов, генотипа полиморфного локуса rs12979860 гена IL28B, уровня анти-ВГС IgM, наличия aнти-NS5a IgG и отношения титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG, после чего данным показателям присваиваются баллы. Далее баллы суммируются, и при значении суммарного балла критерия-предиктора от +9 до +6 определяют очень высокую вероятность достичь устойчивого вирусологического ответа (УВО). При значении от +5 до +2 определяют хорошую вероятность достичь УВО, но впоследствии возможен рецидив. При значении +1 определяют умеренную вероятность достичь УВО, впоследствии очень возможен рецидив. При значении от 0 до -9 УВО не будет достигнут. Предлагаемый способ позволяет эффективно выбрать пациентов для стандартной двойной противовирусной терапии хронического гепатита C на фоне новых схем лечения. 3 табл., 10 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для индивидуальной прогностической оценки эффективности терапии хронического гепатита C пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином, что позволяет более адекватно выбрать пациентов для стандартной двойной противовирусной терапии хронического гепатита C на фоне новых схем лечения.

Вирусом гепатита C (ВГС) инфицировано около 3% населения Российской Федерации [1]. Острый гепатит C в большинстве случаев (в 70-85%) переходит в хроническую инфекцию, которая часто течет бессимптомно первые 10-15 лет. Как установлено, в США продолжительность жизни больных хроническим гепатитом C сокращена на 8-12 лет, если у них не было эффективного курса противовирусной терапии [2]. В нашей стране почти у 40% пациентов с хроническим гепатитом C через 20-25 лет после инфицирования выявляется цирроз печени [3]. Вероятность завершить терапию эффективно, т.е. достичь устойчивого вирусологического ответа (УВО), который включает в себя и нормализацию биохимических показателей печени, значительно выше, если терапия начата в острой фазе инфекции, но и в первые 10 лет течения хронического гепатита она больше, чем в более поздние сроки. Учитывая, что пациенты с впервые диагностированным гепатитом C часто имеют хроническую форму инфекции, то врачу приходится решать сложные задачи: определить степень поражения печени, выбрать схему терапии (традиционную или новую с ингибиторами) и установить вероятность достижения УВО. В настоящее время возможна двойная и тройная терапия больных хроническим гепатитом C, в первом случае используются пегилированный интерферон-альфа и рибавирин, во втором к этим препаратам добавляется телапревир или боцепревир. Двойная терапия дешевле и в ряде случаев легче переносится. Поэтому важно еще до начала терапии выявлять пациентов, которые достигнут УВО на двойной терапии, и тех больных, кому она не поможет и которые нуждаются в новой терапии.

Уровень техники

В конце 90-х годов прошлого века и начале XXI века были созданы основные предпосылки для данного изобретения. Так, международный проект «Геном человека» выявил важную роль однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), особенно для генов, кодирующих белки-регуляторы (цитокины) иммунных и воспалительных реакций. В 2009 г. три независимые группы исследователей, выполняя анализ геномных последовательностей по группам пациентов, достигших и не достигших УВО при лечении пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином, показали, что ОНП в локусе rs 12979860 у гена IL28B ассоциирован с большой вероятностью достижения успеха при лечении [4, 5, 6].

Еще одной важной научно-технической разработкой, повлиявшей на анализ факторов-предикторов, ассоциированных с вероятностью достижения УВО, являются новые подходы оценки стадии фиброза печени: фиброэластография и биохимическая биопсия (FibroTest). Эти методы неинвазивные, в этом их основное преимущество, а их комбинация позволяет более точно дифференцировать стадии фиброза печени от F0 до F4.

Важным этапом при постановке диагноза «гепатит C» является обнаружение маркеров инфицирования: антител и РНК вируса. Известны отечественные тесты, позволяющие обнаруживать антитела к отдельным белкам ВГС. Это иммуноферментные наборы «Анти-ВГС-спектр» и «Анти-ВГС IgM», сконструированные ЗАО «Вектор-Бест» в конце 1990-х годов прошлого века. В отличие от зарубежных тест-систем они позволяют выявлять иммуноглобулины к отдельным антигенам вируса: core, NS3, NS4ab и NS5a. В зарубежных аналогах используется меньший набор вирусных антигенов или их смесь, предлагается визуальная оценка или дорогостоящий детектор и сложно выполнить титрование антител. В последние годы появились отечественные тесты с высокой чувствительностью в 10-15 МЕ/мл для обнаружения РНК ВГС (тест-система «РеалБест РНК ВГС» производитель «Вектор-Бест» или «Амплисенс HCV-FRT-ЮМЕ/мл» производитель «ИнтерЛабСервис»), что позволяет более корректно выделять пациентов, достигших УВО при терапии.

Известно, что геном человека определяет генетически детерминированные возможности индивидуума, но реализуются они через протеом (совокупность белков), на последний влияют факторы окружающей среды, к числу которых относятся и патогены. Поэтому оценка вероятности пациента завершить противовирусную терапию эффективно должна учитывать не только полиморфизм генов, но и адаптивные функциональные параметры организма. Сделаны попытки оценки адаптивных изменений у больных хроническим гепатитом C для прогностической оценки тяжести течения и эффективности интерферонотерапии. Однако в них не учитываются генетические данные пациентов, и эти технические разработки касаются больных детей [7, 8]. Более детальный анализ, сочетающий молекулярно-генетические и адаптивные функциональные параметры организма, применен в исследовании, в котором изучали влияния генетических факторов вируса гепатита C и полиморфизм генов инфицированных людей на развитие фиброза печени [9]. Аналогом настоящего изобретения может служить разработка «Способ прогнозирования прогрессирующего течения хронического гепатита C (развитие цирроза печени) путем анализа комбинации полиморфных генов цитокинов» (патент RU №2317335) [10]. В указанной разработке учитывается полиморфизм генов трех цитокинов (IL-1b, IL-6, TGF-b1), аллельные формы которых могут влиять на развитие цирроза печени. Недостатками этого технического решения является то, что анализируются ОНП только трех генов, что явно мало; не учитываются адаптивные реакции организма пациента на патоген; выявляются случаи неоднозначного результата анализа, описанные как «сомнительно». Однако эта разработка демонстрирует важность молекулярно-генетических параметров пациента.

Используя перечисленные выше научно-технические достижения, был проведен сравнительный анализ когорты больных, состоящей из трех групп: первая - пациенты, достигшие УВО; вторая - больные, завершившие терапию безрезультатно, и третья - пациенты с последующим, через несколько лет, рецидивом; определены наиболее значимые прогностические показатели, базирующиеся на оценке клинических, иммуногенетических и серологических данных пациента; создан алгоритм их количественной оценки и разработан критерий-предиктор.

Цель предлагаемого изобретения - создание предсказательной модели для оценки индивидуальных возможностей пациента как генетически детерминированных, так и фенотипически сложившихся защитных реакций организма, позволяющей с большей достоверностью подбирать пациентов для стандартной двойной терапии пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином хронического гепатита C на фоне новых схем лечения.

Техническая задача настоящего изобретения - создание способа персонифицированного прогнозирования эффективности терапии хронического гепатита C, заключающегося в том, чтобы на основе количественной оценки ведущих прогностических признаков пациента, а именно клинических, иммуногенетических и серологических данных: (1) стадии фиброза печени, (2) количества тромбоцитов, (3) аллельных вариантов полиморфного локуса rs 12979860 гена IL28B, (4) уровня анти-ВГС IgM, (5) наличия анти-NS5a IgG, (6) отношения титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG, разработать критерий-предиктор, позволяющий более адекватно выбрать пациентов для стандартной двойной противовирусной терапии хронического гепатита C на фоне новых схем лечения.

Раскрытие изобретения

Известно, что на эффективность противовирусной терапии влияет много факторов: лекарственные препараты и схема их применения, генотип ВГС и такие факторы пациента, как пол, возраст, этническая принадлежность, сопутствующие заболевания, вредные привычки, генетические особенности обмена железа, углеводов, витаминов и генетически обусловленный уровень ряда цитокинов. Если значимость первых двух факторов (лекарственные препараты и генотип ВГС) общепризнанна, то ранжировать по актуальности факторы пациента непросто, возможно, для каждого этноса они могут менять значимость.

При анализе индивидуальных факторов пациентов в настоящем изобретении учитывали следующие показатели: пол, возраст, этническая принадлежность, длительность инфицирования, клинический анализ крови за последние 12 месяцев, индекс массы тела, генетические особенности обмена железа и витаминов B12 и D3, генотип вируса, вирусная нагрузка, стадия фиброза печени, аллельный вариант гена интерлейкина-28B (IF28B) по локусу rs 12979860 и параметры специфического гуморального ответа на отдельные антигены вируса гепатита C.

В результате логического регрессионного анализа выявлены следующие ведущие прогностические признаки: стадия фиброза печени, количество тромбоцитов крови, аллельный вариант гена IL28B, уровень анти-ВГС IgM, отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG и наличие анти-NS5a IgG. Алгоритм анализа и оценка прогностических признаков приведены ниже.

Один из ведущих факторов, влияющих на достижение УВО, - это степень поражения печени, т.е. стадия фиброза. В нашем исследовании пациенты со стадией фиброза печени F3 не достигали УВО. Трем пациентам удавалось получить вирусологический ответ в конце курса терапии, но он в течение 6 месяцев завершался рецидивом, т.е. появлением РНК ВГС в крови. Поэтому пациенты со стадией фиброза F2 еще могут завершить успешно двойную терапию, а больные со стадией F3 нуждаются в новой терапии, основанной на других препаратах (p<0,01). Однако стадии фиброза F2 и F3 сложно разграничить, поэтому для их подтверждения использовали комбинацию двух методов: фиброэластографию и биохимическую биопсию. Учитывая влияние стадии фиброза на вероятность достижения УВО, была введена следующая количественная оценка стадий: для F0 - два положительных балла, для F1 - один положительный балл, для F2 - ноль баллов, для F3 - один отрицательный балл, для F4 - два отрицательных балла. Примеры анализа прогностических признаков пациента и их количественная оценка представлены ниже в таблицах 1 и 2, где под каждым выявленным показателем (данными исследования) находится оценочный балл, отмеченный знаком «+», если он позитивный, и знаком «-», если он негативный.

Таблица 1
Анализ прогностических признаков пациентов и их количественная оценка
Прогностические признаки Пациент №1 Пациент №2 Пациент №3 Пациент №4 Пациент №5
Стадия фиброза F0 F0 F0 F1 F0
+2 +2 +2 +1 +2
Аллельный вариант TT гена IL-28B, локус rs 12979860 нет нет нет нет да
+1 +1 +1 +1 -1
Содержание анти-ВГС IgM нет низкое умеренное низкое умеренное
+1 +1 0 +1 0
Количество тромбоцитов норма норма норма норма норма
+1 +1 +1 +1 +1
Аллельный вариант CC гена IL-28B локус rs 12979860 да да
+1 +1
Аллельный вариант CT гена IL-28B локус rs12979860 да да
0 0
Отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NSS IgG 1 >1 1 1 <1
+1 +2 +1 +1 -2
Анти-NS5a IgG есть есть нет нет нет
+1 +1 -1 -1 -1
Количество баллов +8 +9 +5 +5 +3
-1 -1 -4
Сумма набранных баллов +8 +9 +4 +4 -1
Таблица 2
Анализ прогностических признаков пациентов и их количественная оценка
Прогностические признаки Пациент №6 Пациент №7 Пациент №8 Пациент №9 Пациент №10
Стадия фиброза F1 F2 F1 F3 F2
+1 0 +1 -1 0
Аллельный вариант ТТ гена IL-28В, локус rs12979860 да нет да нет да
-1 +1 -1 +1 -1
Содержание анти-ВГС IgM низкое умеренное низкое высокое низкое
+1 0 +1 -1 +1
Количество тромбоцитов норма низкое норма низкое низкое
+1 -1 +1 -1 -1
Аллельный вариант СС гена IL-28B локус rs12979860
Аллельный вариант СТ гена IL-28B локус rs12979860 да да
0 0
Отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG <1 1 <1 <1 1
-2 +1 -2 -2 +1
Анти-NS5a IgG нет есть нет есть есть
-1 +1 -1 +1 +1
Количество баллов +3 +3 +3 +2 +3
-4 -1 -4 -5 -2
Сумма набранных баллов -1 +2 -1 -3 +1

Следующий важный прогностический признак - это аллельный вариант (или генотип) ТТ локуса rs12979860 гена IL28B. Лишь 7,7% пациентов с таким генотипом достигали УВО в нашем исследовании, но у всех в последующие 1-2 года отмечен рецидив. Остальные пациенты (92,3%) не достигали УВО (р<0,001). Вероятно, больные с аллельным вариантом ТТ в позиции rs12979860 гена IL28B - кандидаты на новые схемы лечения. При количественной оценке наличие генотипа ТТ было расценено в один отрицательный балл, его отсутствие - в один положительный балл.

При анализе содержания (титров) иммуноглобулинов М к суммарным антигенам ВГС установлено, что высокие титры этих антител являются одним из показателей безуспешности терапии, особенно, если количество тромбоцитов крови у пациента низкое (р<0,001). При нормальном количестве тромбоцитов возможно достижение УВО, но в последующие 1-2 года у пациентов происходил рецидив. Роль тромбоцитов крови в формировании УВО при терапии гепатита C была обнаружена несколько лет назад, хотя ранговая значимость этого показателя среди всех анализируемых параметров была непонятна [11]. Пациенты с высокими титрами анти-ВГС IgM и низким количеством тромбоцитов (меньше нижней границы нормы), возможно, тоже являются кандидатами на новые схемы лечения. Градация величин титров на высокие, умеренные и низкие приведена в разделе «Материалы и методы». Высокие анти-ВГС IgM оценены в один отрицательный балл, содержание тромбоцитов меньше нижней границы нормы - в один отрицательный балл.

Следующий прогностический признак - наличие генотипа CC гена IL28B. Пациенты, имеющие аллельный вариант СС гена IF28B и низкие титры анти-ВГС IgM или с отсутствием этих антител, при нормальном содержании тромбоцитов и отношении титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG, больше или равным единице, с очень высокой вероятностью достигнут УВО и сохранят его в последующем (p<0,001). В случае, когда отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NSS IgG у таких пациентов меньше единицы, то возможен рецидив, вероятность которого выше при отсутствии иммуноглобулинов G к антигену NS5a. В последнем варианте есть вероятность, что терапия закончится безуспешно. По литературным данным около 25-40% больных с генотипом СС гена IL28B завершают двойную терапию без УВО [4,12]. Низкие титры анти-ВГС IgM или их отсутствие оценены в один положительный балл, нормальное содержание тромбоцитов - в один положительный балл, отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG больше единицы - в два положительных балла, а отношение титров этих антител, равное единице - в один положительный балл, отношение меньше единицы - в два отрицательных балла, наличие анти-NS5a IgG - в один положительный балл, а их отсутствие - в один отрицательный балл.

Еще один важный прогностический признак - аллельный вариант CT гена IL28B. У пациентов с генотипом CT гена IL28B при низком количестве тромбоцитов (меньше нижней границы нормы), сохраняющимся в течение полугода, с большой вероятностью терапия будет безуспешной (p<0,001). Если у пациентов с таким же генотипом количество тромбоцитов нормальное и отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG меньше единицы, то терапия с большой вероятностью завершится безуспешно или будет рецидив через несколько лет (p<0,001). Вероятность достичь УВО высокая у пациентов с генотипом CT гена IL28B, нормальным содержанием тромбоцитов крови и отношением титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG, большим или равным единице (p<0,01). Шанс будет ниже, если нет антител к вирусному антигену NS5a (p<0,05). Персонифицированное прогнозирование вероятности достижения УВО при терапии определяется по сумме набранных пациентом баллов и сопоставлению ее с критерием-предиктором, как представлено в таблице 3.

Таблица 3
Определение вероятности достижения УВО при терапии по критерию-предиктору
Критерий-предиктор Прогноз
От +9 до +6 Очень высокая вероятность достичь УВО
От +5 до +2 Хорошая вероятность достичь УВО, но впоследствии возможен рецидив
+1 Умеренная вероятность достичь УВО, впоследствии очень возможен рецидив
От 0 до -9 УВО не будет достигнут

Анализ описанных выше параметров прогностических признаков пациента как генетически детерминированных, так и фенотипически сложившихся защитных реакций его организма и их количественная оценка позволяет выявлять пациентов, для которых двойная терапия будет безуспешной или успешной с последующим длительным отсутствием РНК ВГС, и пациентов, достигших УВО, но с последующим, через нескольких лет, рецидивом.

Осуществление изобретения

Материалы и методы

Критерии формирования когорты пациентов. Анализируемая когорта была сформирована из 105 пациентов, завершивших двойную терапию пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином 1-5 лет назад. Пациенты с хроническим гепатитом B, ВИЧ-инфекцией, токсическим гепатитом и онкологическими заболеваниями не включались в исследование.

Для определения стадии фиброза печени использовали метод кратковременной эластографии, выполненный с помощью аппарата «Фиброскан» («Echosense», Франция). Этот метод основан на регистрации отраженного ультразвукового колебания средней амплитуды и низкой частоты. Ультразвуковой сигнал, проходя через ткань печени, приобретает сдвиг и изменяет скорость в зависимости от эластичности ткани. В процессе анализа исследуется эластичность 2-3 фрагментов правой доли печени размером 1×4 см на глубину до 6,5 см от поверхности кожи. В результате анализа определяется средний показатель эластичности печени, выраженный в килопаскалях, который соответствует определенной величине шкалы METAVIR. Информативность метода наиболее высокая при установлении стадии F4, хорошая при разграничении стадий F0, F1, F2 и F3.

Для определения стадии фиброза печени использовали еще один метод - биохимическую биопсию, называемую также «фибротест» (разработчик «BioPredictive», Франция). Анализируется венозная кровь на определенные биохимические показатели по протоколу производителя, стадии фиброза выражаются в единицах шкалы METAVIR. Достоинство метода - получение информации не только о стадии фиброза печени, но и степени воспалительной активности. Информативность метода наиболее высокая при разграничении F0, F1, F2 и F3.

Обнаружение РНК ВГС выполняли методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с применением тест-наборов «РеалБест РНК ВГС, качественный» и «РеалБест РНК ВГС, количественный» (ЗАО «Вектор-Бест», Россия). Чувствительность этих тест-систем 15 МЕ/мл. Амплификацию проводили в приборе Rotor-Gene 3000/6000 («Corbett Research», Австралия), используя программную версию производителя.

Анализ полиморфного локуса (rs 12979860) гена IL28B осуществляли методом ПЦР в реальном времени, используя комплект реагентов для определения генетических полиморфизмов «Иммуногенетика IL28B» (НПО «ДНК-технология», Россия). В положении rsl2979860 выявляли аллельные варианты CC, CT или TT. Амплификацию проводили в приборе ДТ-332 (НПО «ДНК-технология», Россия), используя программную версию производителя.

Иммуноглобулины M и G, специфичные к вирусным антигенам core, NS3, NS4ab, NS5a, выявляли с помощью иммуноферментных коммерческих тест-систем «Бест анти-ВГС-IgM» и «Бест анти-ВГС - спектр» (ЗАО «Вектор-Бест», Россия). Отношение анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG определяли как отношение титров. Содержание анти-ВГС IgM считалось высоким при оптической плотности выше порога чувствительности в пятом разведении, умеренным - в третьем и четвертом разведении, в остальных - низким.

Статистический анализ и выявление достоверных различий. Для установления различий в сравниваемых признаках в группах пациентов определяли среднее арифметическое количественных показателей со стандартным отклонением или среднее геометрическое со стандартным отклонением. Статистическую достоверность различий признаков при их нормальном распределении оценивали с помощью t-критерия, при ненормальном распределении - по критерию χ2. Уровень значимости имел общепризнанное для медико-биологических исследований значение p<0,05.

В связи с тем, что в последние годы появляются новые препараты и новые схемы лечения хронического гепатита C, важно еще до начала терапии выявлять пациентов, которые достигнут УВО на двойной терапии пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином, и тех больных, кому она не поможет и которые нуждаются в новой схеме лечения. Предлагаемый способ позволяет решать эту задачу. Способ базируется на определении персональной количественной оценки прогностических признаков пациента и сопоставлении их с разработанным критерием-предиктором. Предлагаемая предсказательная модель персонифицированной прогностической оценки позволяет более адекватно выбрать пациентов для стандартной двойной противовирусной терапии хронического гепатита C на фоне новых схем лечения.

Список литературы

1. Alter M.J. Epidemiology of hepatitis С virus infection. // World J. Gastroenterol. 2007, v. 13, 2436-2441.

2. Center for Disease Control and Prevention. HCV. // http://www.cdc.gov/hepatitis/HCV. Accessed 8 Oct 2010.

3. Самохвалов Е.И., Николаева Л.И., Альховский С.В. и др. Частота встречаемости отдельных субтипов вируса гепатита C в Московском регионе. // Вопросы вирусологии. 2013, №1, с.36-40.

4. Ge D.I., Fellay J., Thompson A.J. et al. Genetic variation in IL-28B predicts hepatitis С treatment-induced viral clearance. // Nature. 2009, v.461, 399-401.

5. Suppiah V., Moldovan M., Ahlensiel G. et al. IL-28B is associated with response to chronic С interferon-alpha and ribavirin therapy. // Nat. Genet. 2009, v. 41, 1100-1104.

6. Tanaka Y., Nishida N., Sugiyama M. et al. Genome-wide association with response to pegylated interferon-alpha and ribavirin therapy for chronic hepatitis C. // Nat. Genet. 2009, v.41, 1105-1109.

7. Жукова E.А., Шабунина E.И., Каплина H.А. и др. Способ прогнозирования эффективности интерферонотерапии вирусных гепатитов у детей // Патент RU №2379689.

8. Чурбакова О.В., Кельцев В.А., Минаев Ю.Л. Способ прогнозирования тяжести течения хронических вирусных гепатитов B и C у детей и подростков. Патент RU №2477072.

9. Николаева Л.И., Колотвин А.В., Самоходская Л.М. и др. Анализ влияния генетических факторов вируса гепатита С и полиморфизма генов инфицированных людей на развитие фиброза печени. // Эпидемиология и инфекционные болезни, 2012, №5, стр.7-13.

10. Самоходская Л.М., Абдуллаев С.М., Целищева Ю.Н. и др. Способ прогнозирования прогрессирующего течения хронического гепатита C (развитие цирроза печени) путем анализа комбинации полиморфных генов цитокинов. Патент RU №2317335.

11. Mauss S., Zehnter Е., Manns М. et al. Baseline platelet count predicts sustained viral response (SVR) in the treatment of chronic hepatitis С with PEG-IFNα-2b and ribavirin: results from the German PEG-IFNα-2b observational study. // Hepatology. 2009, v.50, 1032A.

12. Montes-Cano M.A., Garcia-Lozano J.R., Abad-Molina С et al. Interleikin-28B genetic variants and hepatitis С virus infection by different genotypes. // Hepatology. 2010, v.52, 33-37.

Способ персонифицированного прогнозирования эффективности терапии хронического гепатита С пегилированным интерфероном-альфа и рибавирином путем определения персональной количественной оценки прогностических признаков пациента, включающих выявление клинических, иммуногенетических и серологических данных, при которых определяются показатели стадии фиброза печени от F0 до F4, количества тромбоцитов, генотипа полиморфного локуса rs12979860 гена IL28B, уровня анти-ВГС IgM, наличия aнти-NS5a IgG и отношения титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG, после чего данным показателям присваиваются баллы:
(1) стадию фиброза печени F0 оценивают как значение +2, стадию F1 оценивают как +1, стадию F2 оценивают как 0, стадию F3 оценивают как -1, стадию F4 оценивают как -2;
(2) количество тромбоцитов в норме оценивают как +1, ниже нормы как -1;
(3) наличие генотипа ТТ полиморфного локуса rs12979860 гена IL28B оценивают как -1, отсутствие как +1; наличие генотипа СС оценивают как +1; наличие генотипа СТ оценивают как 0;
(4) если анти-ВГС IgM не определяются или выявляются в низком уровне, ставят значение +1, при умеренном уровне ставят 0, при высоком ставят -1;
(5) наличие анти-NS5a IgG оценивают как +1, отсутствие как -1;
(6) отношение титров анти-NS4ab IgG к анти-NS3 IgG больше единицы оценивают как +2, отношение, равное единице, оценивают как +1, отношение меньше единицы оценивают как -2;
далее баллы суммируются, и при значении суммарного балла критерия-предиктора от +9 до +6 определяют очень высокую вероятность достичь устойчивого вирусологического ответа (УВО); при значении от +5 до +2 определяют хорошую вероятность достичь УВО, но впоследствии возможен рецидив; при значении +1 определяют умеренную вероятность достичь УВО, впоследствии очень возможен рецидив; при значении от 0 до -9 УВО не будет достигнут.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения спермаспецифического ингибитора трипсина человека из семенной плазмы, заключающегося в том, что выделение проводят сочетая преципитацию сульфатом аммония и аффинную хроматографию на иммобилизованном лектине бодяги речной.

Изобретение относится к медицине. Сущность способа оценки детоксикационной функции организма у работающих в условиях химического комплекса включает определение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы в лизатах эритроцитов, глутатионредуктазы в эритроцитах, рассчитывают показатель детоксикационной функции организма (ПD) по формуле.

Изобретение относится к способу ранней детекции мышечных дегенеративных заболеваний и к способу прогнозирования и/или определения терапевтической эффективности терапевтического средства и/или способа терапии заболеваний посредством измерения тетранор-PGDM (11,15-диоксо-9α-гидрокси-2,3,4,5-тетранорпростан-1,20-диовой кислоты) в образце мочи субъекта и сравнения его содержания относительно образца, выделенного у здорового индивидуума.

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ идентификации соединения, пригодного для лечения гингивита, включающий: взаимодействие первого гингивального образца, полученного от млекопитающего, страдающего от гингивита, с исследуемым соединением; взаимодействие второго гингивального образца из ротовой полости млекопитающего с положительным контролем - соединением, подавляющим экспрессию одной или более матриксных металлопротеиназ (галогенированный дифениловый эфир); измерение степени, с которой экспрессия одной или более матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения; измерение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; и сравнение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения, со степенью, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; в котором исследуемое соединение, которое подавляет экспрессию одной или более из матриксных металлопротеиназ в равной или большей степени, чем положительный контроль, является соединением, пригодным для лечения гингивита; где одна или более матриксных металлопротеиназ, для которых измеряют экспрессию, включают, по меньшей мере, ММР-9 и ММР-13.

Изобретение относиться к области микробиологии. Сущность способа обнаружения и идентификации микроорганизма на твердой и полутвердой среде состоит в том, что осуществляют a) сканирование твердой или полутвердой ростовой среды, о которой известно, что она содержит или может содержать одну или более чем одну колонию микроорганизма, для локализации любых колоний, присутствующих на среде; b) непосредственное исследование на указанной ростовой среде одной или более чем одной колонии, локализованной на стадии (а) с диаметром возбуждающего пучка менее чем приблизительно 1000 мкм, с получением измерений собственной флуоресценции (СФ), характеристических для микроорганизма в колонии; c) идентификацию микроорганизма в колонии на основании измерений СФ, где микроорганизмы характеризуют на уровне семейства, рода, вида или на уровне штамма.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для выявления высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе у больных стабильной стенокардией напряжения на фоне приёма бета-адреноблокаторов (ББ) без дополнительных вазодилатирующих свойств.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использована в диагностике заболеваний печени при формулировке предварительного диагноза.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ диагностики гигиенического состояния полости рта у субъекта, в соответствии с которым у субъекта берут пробу жидкости десневой борозды и определяют в указанной пробе содержание одного или нескольких метаболитов.
Изобретение относится к медицине. Более подробно изобретение относится к диагностике ревматоидного артрита.

Изобретение относится к области медицины, кардиологии и может быть использовано для прогнозирования риска развития рестеноза после коронарного стентирования. Сущность способа: определяют значения дополнительных факторов риска - измерения толщины эпикардиальной жировой ткани, уровней лептина, липопротеина «a» и глюкозы в крови, после чего осуществляют математическую обработку числовых значений факторов риска с получением вероятности возникновения рестеноза по формуле: Р= [ехр(-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·Х5+0,0665·X6)]/ [1+ехр (-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·X5+0,0665·X6)], где P - вероятность возникновения рестеноза в %, X1 - значение лептина пациента в нг/мл; X2 - значение липопротеина «a» в мг/л; X3 - толщина эпикардиальной жировой ткани в миллиметрах; X4 - значение холестерина липопротеидов высокой плотности в ммоль/л; X5 - значение глюкозы крови в ммоль/л; X6 - значение интерлейкина-6 в пкг/мл; -8,0248 - свободный член уравнения.

Группа изобретений относится к области биотехнологии и касается способа получения белков, выделенных при лизисе клеток Vero, включающего следующие стадии: культивирование и сбор клеток Vero; разрушение и лизис клеток Vero; очистку выделенных при лизисе клеток Vero белков путем гидрофобной хроматографии на фенилсефарозе 6FF, эксклюзивную хроматографию на сефарозе, элюцию, концентрирование, выделенные белки представляют собой смесь белков с молекулярными массами 11 кДа, 17-34 кДа, 55 кДа и 72-170 кДа. Выделенные при лизисе клеток Vero белки, полученные по настоящему изобретению, имеют широкий спектр применения. Они могут быть использованы для контроля и анализа качества в ходе получения вакцин с применением клеток Vero при высокой чувствительности и хорошей воспроизводимости метода. В настоящем изобретении также предусмотрен набор для анализа НСР клеток Vero, характеризующийся высокой специфичностью, высокой чувствительностью и хорошей воспроизводимостью. Набор может быть использован для контроля и анализа качества в ходе получения не только не секретируемых вирусных вакцин против таких вирусов, как вирус гепатита А, но и других вакцин, получаемых с применением клеток Vero. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 14 табл., 14 пр., 6 ил.
Изобретение относится к медицине. Способ прогнозирования риска возникновения переломов заключается в том, что выделяют ДНК из лейкоцитов периферической венозной крови, методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией, генотипируют 3 полиморфных варианта -1997G>T (g.3011T>G, rs1107946), -1663IndelT (g.3344_3345delTT, rs2412298) и +1245G>T (c.104-441G>T (rs1800012), расположенных в регуляторном регионе гена COLIA1. При идентификации сочетания генотипов: 1997∗G∗T/-1663∗I∗D/ +1245∗G∗T прогнозируют категорию лиц с повышенным риском развития возникновения переломов. Использование заявленного способа позволяет получить критерии оценки риска возникновения переломов с высокой прогностической значимостью. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения биологического возраста у беременных женщин. Сущность способа состоит в том, что используют данные общего и биохимического анализов крови, показателей коагулограммы крови, массы тела, окружности живота (ОЖ) по формуле для I, II, III триместра беременности, затем определяют должный биологический возраст по формуле для I, II, III триместра беременности. Из величины биологического возраста вычитают величину должного биологического возраста и при значении разницы от -15,00 до -5,00 лет определяют замедленное старение, от -4,99 до +4,99 лет - физиологическое старение, от +5,00 до +15,00 лет - ускоренное старение. Использование заявленного способа позволяет точно определить биологический возраст у беременной женщины. 9 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и представляет собой способ диагностики наружного генитального эндометриоза, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют уровень липопротеинов высокой плотности и при величине 0,77 ммоль/л и выше диагностируют наружный генитальный эндометриоз. Изобретение позволяет повысить точность и упростить процедуру диагностики наружного генитального эндометриоза. 3 пр.

Изобретение относится к области офтальмологии и представляет собой способ прогнозирования развития пороговой стадии ретинопатии недоношенных у детей без офтальмоскопических признаков заболевания, отличающийся тем, что на сроке по 33 неделю гестационного возраста в сыворотке крови определяют содержание фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и при уровне VEGF, равном или превышающем 1300 пг/мл, прогнозируют развитие пороговой стадии ретинопатии недоношенных. Изобретение обеспечивает возможность коррекции тактики ведения недоношенных детей на этапах выхаживания. 2 ил., 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ оценки эффективности тромболитической терапии у больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST. Способ включает контроль состояния пациента, при котором пациенту исходно и каждые 60 минут после начала тромболизиса в течение до 4-х часов определяют концентрацию тропонина I в крови, и при увеличении концентрации тропонина I в 10 и более раз по сравнению с предыдущим показателем судят об эффективности тромболитической терапии. Изобретение может быть использовано в неотложной кардиологии для оценки эффективности тромболитической терапии у больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST и позволяет оценить эффективность тромболитической терапии в короткие сроки и с высокой точностью, при этом на результаты исследования не влияют повторные инфаркты в анамнезе, интервенционные процедуры на сердце и кардиохирургические операции. 3 ил., 2 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для лечения некротического энтероколита у новорожденных и детей младшего грудного возраста. Для этого проводят антибактериальную, инфузионную, посиндромную, иммунозаместительную терапии, хирургическое лечение с учетом тяжести состояния ребенка и стадии процесса. При этом дополнительно определяют наличие внутриутробной инфекции. Определяют наличие и выраженность гнойно-септических показателей: прокальцитонина, С-реактивного белка, лейкоцитарного индекса интоксикации Кальф-Калифа и иммуноглобулина А. При наличии не менее одной внутриутробной инфекции и повышении гнойно-септических показателей более чем в 1,5 раза выше нормы назначают лимфотропную терапию один раз в сутки в течение 7-10 дней в виде разовой подкожной инъекции антибактериального препарата широкого спектра действия в правую паховую область на 1 см выше пупартовой связки и два внутривенных введения другого антибиотика. Изобретение позволяет сократить лекарственную нагрузку на пациентов, снизить риск развития осложнений и уменьшить летальность у новорожденных и детей младшего грудного возраста. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для исследования всасывания аминокислот из пищеварительного тракта. Для этого проводят исследование крови утром натощак и после приема аминокислотной смеси. При этом сначала утром натощак определяют объем циркулирующей крови, гематокрит и суммарное расчетное содержание азота аминокислот в крови. После этого перорально вводят 100,0 мл раствора аминокислот, транспортируемых по одному из вариантов всасывания с известной концентрацией раствора и содержания в нем азота аминокислот. Через 30, 40, 50, 60 и 70 минут после введения аминокислотной смеси повторно определяют объем циркулирующей крови, гематокрит и суммарное расчетное содержание азота аминокислот. Рассчитывают в пробах крови коэффициент всасывания аминокислот по формуле: К = N n × О Ц К n × ( 100 − H t n / 100 ) − N 1 × О Ц К 1 × ( 100 − H t 1 / 100 ) N , где К - коэффициент всасывания аминокислот, N - содержание азота в аминокислотной смеси, N1 - показатели азота аминокислот в крови до приема аминокислот, Nn - показатели азота аминокислот в крови после приема аминокислот, ОЦК1 - объем циркулирующей крови до приема аминокислот, ОЦКn - объем циркулирующей крови после приема аминокислот, Ht1 - гематокрит до приема аминокислот, Htn - гематокрит после приема аминокислот, n - время после перорального введения аминокислот. После этого с учетом результатов показателя коэффициента К и времени, прошедшего после приема раствора аминокислот, строят график, отражающий скорость всасывания аминокислот в пищеварительном тракте. Способ позволяет оценить скорость суммарного всасывания аминокислот из пищеварительного тракта с учетом особенностей транспортной системы. 1 пр.
Изобретение относится к медицине и касается диагностики острого токсического повреждения печени крыс. Способ заключается в выделении липидов, а именно в том, что добавляют 25 мкг 10% раствора тезита при одновременном перемешивании смеси с помощью шейкера при 20°C и частоте колебаний 120 в минуту в течение 30 минут с последующим определением в растворе общих фосфолипидов и триглицеридов. При их соотношении, равном 1,01-1,19, при росте активности в крови аланинаминотрансферазы 0,50-0,62 ммоль/л и более диагностируют острое токсическое повреждение печени крыс. Использование способа позволяет повысить эффективность и точность диагностики острого токсического повреждения печени крыс. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для повышения эффективности лечения пациентов с синдромом диспепсии в сочетании с избыточной массой тела. Способ включает определение уровня тревоги (HARS) и депрессии (HDRS) по шкалам Гамильтона, оценку пищевого статуса с использованием биоимпедасметрии, степень выраженности нарушений сна, оценку уровня глюкозы, теста толерантности к глюкозе, иммунореактивного инсулина, холестерина, липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), триглицеридов в венозной крови. Если у больного выявляют дислипидемию и нарушение толерантности к глюкозе или изменение уровня иммунореактивного инсулина, то вводят препарат дибикор в дозе 500 мг в сутки в течение трех месяцев. Если у больного выявляют дислипидемию и оба указанных нарушения, то вводят дибикор в дозе 1000 мг в сутки в течение трех месяцев. Если у больного имеется избыточная масса тела с ИМТ в диапазоне от 27 до 29,9 условных единиц и по данным биоимпедансметрии процент активной клеточной массы (АКМ) составляет от 45 до 55 процентов, то вводят препарат диетресса в дозе 1 таблетке 3-4 раза в день в течение трех-шести месяцев. Если у больного имеется избыточная масса тела с ИМТ от 27 до 29,9 условных единиц и АКМ составляет менее 45 процентов или более 55 процентов, то вводят препарат диетресса в дозе по 2 таблетки 3-4 раза в день в течение трех-шести месяцев. Если у больного имеются нарушения сна легкой и средней степени выраженности, эмоциогенный тип пищевого поведения в сочетании с аффективными расстройствами легкой степени выраженности, то вводят антидепрессант вальдоксан по 25 мг в сутки однократно на ночь в течение двух недель. Отслеживают динамику по уровню тревоги и депрессии через две недели после начала лечения, если динамика положительная, то дозу вальдоксана в 25 мг сохраняют до конца курса терапии в течение от трех до шести месяцев. Если динамика отсутствует, то дозу увеличивают до 50 мг в сутки и продолжают лечение в течение от четырех до восьми месяцев. Если у больного имеются нарушения сна высокой степени выраженности, эмоциогенный тип пищевого поведения в сочетании с аффективными расстройствами средней степени выраженности, то вводят антидепрессант вальдоксан по 50 мг однократно на ночь в течение двух-трех месяцев. Способ позволяет в каждом конкретном случае ускорить купирование клинических симптомов, в т.ч. снизить массу жировой ткани и нормализовать содержание активной клеточной массы и воды, нормализовать суточные ритмы вегетативного баланса, а также удлинить период ремиссии. 3 табл., 2 пр.
Наверх