Способ прогнозирования задержки внутриутробного роста плода

Авторы патента:

Тарасова Марина Николаевна (RU)

Чистякова Гузель Нуховна (RU)

Газиева Ирина Александровна (RU)

Ремизова Ирина Ивановна (RU)

G01N33/533 - с флуоресцентными метками

Владельцы патента RU 2526178:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3⁺CD16⁺56⁺-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R). Вычисляют

прогностический индекс (PI) по формуле:

PI=-0,8911X₁-0,0321Х₂-2,3669Х₃+11,0779,

где X₁ - относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов, %;

X₂ - концентрация С3-компонента комплемента, мг/дл;

Х₃ - концентрация sTNF-R, нг/мл.

При PI<0 прогнозируют задержку внутриутробного роста плода во второй половине беременности, а при PI>0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния. Предлагаемый способ является малоинвазивным, позволяет с ранних сроков гестации выявить группу риска по формированию задержки внутриутробного роста плода, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику данного патологического состояния. 5 пр.

Область применения: предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.

Уровень техники

Плацентарная недостаточность, сопровождающаяся глубокими метаболическими и гемодинамическими расстройствами в функциональной системе «мать-плацента-плод», приводит к развитию задержки внутриутробного роста плода (ЗВРП), являющейся одной из основных причин перинатальной заболеваемости и смертности [1, 2]. Патогенетически синдром задержки роста плода обусловлен нарушением плацентарной перфузии, чаще всего формирующимся на фоне экстрагенитальной патологии, преэклампсии и хронических внутриматочных инфекций [3]. Частота данной патологии, по данным литературы, колеблется от 4,5% до 39% [4, 5, 6, 7].

Диагностика ЗВРП основана на сопоставлении фотометрических показателей, полученных в результате ультразвукового исследования, с нормативными показателями для определенного срока беременности, однако информативность этих параметров высока только в третьем триместре беременности. Предикторная ценность способов прогнозирования ЗВРП во второй половине беременности является низкой, поскольку не оставляет достаточного количества времени для профилактики и предотвращения развития данного патологического состояния. Раннее обнаружение маркеров, ассоциированных с недостаточностью фетоплацентарного комплекса, позволяет провести своевременную корригирующую терапию, в связи с чем доклиническая диагностика нарушений состояния плода и определение факторов риска развития ЗВРП является одной из наиболее важных задач современной перинатологии.

В последние годы уточнению причин развития задержки внутриутробного роста плода посвящены многочисленные исследования. По мнению ряда авторов существенную роль в генезе плацентарной недостаточности с исходом в ЗВРП играют нарушения механизмов иммунорегуляции гестационного процесса с ранних сроков беременности [8, 9, 10, 11]. По современным представлениям в первом триместре беременности, осложненной впоследствии ЗВРП, имеет место неадекватный ответ материнской иммунной системы на факторы плодово-плацентарного происхождения, однако эти нарушения не приводят к фатальному исходу, как при невынашивании. В этом случае формируется особый тип регуляции гестационного процесса, способствующий сохранению беременности, но недостаточный для полноценного развития плода. Отечественными исследователями установлено, что в ранние сроки беременности, осложненной впоследствии ЗВРП, нарушается соотношение клеточных популяций лимфоцитов, изменяется характер экспрессии ряда маркеров активации и молекул адгезии, нарушается синтез и продукция цитокинов, иммуноглобулинов [5]. Анализ литературы свидетельствует о том, что на сегодняшний день для оценки риска формирования ЗВРП востребованы лабораторные тесты, являющиеся одновременно доступными, клинически эффективными и экономически оправданными. Изучение иммунных механизмов формирования ЗВРП позволяет разработать ранние прогностические критерии данного патологического состояния.

Существующие способы доклинической диагностики и прогнозирования задержки внутриутробного роста плода обладают рядом недостатков. Некоторые способы не могут применяться в ранних сроках беременности, их использование предполагается только во втором триместре, что не всегда позволяет осуществить превентивные меры по предотвращению данного гестационного осложнения [12, 13, 14, 15]. Ряд способов связан с их использованием в отношении определенного, весьма ограниченного контингента женщин, что существенно сужает круг обследуемых и снижает ценность разработанных технологий. Так, известны способы диагностики и прогнозирования задержки роста плода у женщин с гестозом [16], у ВИЧ-инфицированных беременных [14], при беременности, индуцированной вспомогательными репродуктивными технологиями в связи с лечением бесплодия [15, 17], что уже само по себе чаще всего является условием для отнесения пациенток в группу риска по формированию перинатальной патологии, в том числе и ЗВРП. Вышеперечисленные факторы как изолированно, так и в сочетании друг с другом могут обусловливать нарушения процессов имплантации и плацентации, а также гемодинамические сдвиги, опосредующие в итоге нарушения обмена в системе «мать-плацента-плод». Кроме того, отдельные способы связаны с инвазивным вмешательством (использование амниотической жидкости для оценки содержания в ней аминокислот) [12]. В связи с этим наиболее ценными являются безопасные (неинвазивные или малоинвазивные) способы прогнозирования задержки роста плода с ранних сроков беременности (до клинических проявлений и манифестации патологических состояний).

Аналогами данного изобретения являются вышеуказанные способы доклинической диагностики и прогнозирования задержки роста плода. Наряду с перечисленными недостатками этих способов (использование только у определенного контингента женщин, определение показателей во втором и третьем триместрах беременности, небезопасность при инвазивных вмешательствах), несовершенство имеющихся способов связано с: трудоемкостью, обусловленной использованием методов капиллярного электрофореза или оценкой вирусной нагрузки при наличии инфекционного фактора [12, 14]; применением небезопасных химических реактивов (в том числе трихлоруксусной и соляной кислот) и необходимостью обеспечения специальных условий для работы с такого рода реагентами (оснащения вытяжным боксом и т.п.) [12]; низкой специфичностью, поскольку изменения целого ряда показателей (количества В-лимфоцитов и нейтрофилов, содержания васкуло-эндотелиального фактора роста и др.) [18, 19] могут являться предикторами различных патологических состояний при беременности, в том числе угрозы прерывания, гестоза, плацентарной недостаточности, невынашивания; сложностью применения достаточно громоздкого алгоритма обследования, включающего комплекс методов (сбор анамнестических данных не только матери, но и отца, определение спектра вирусных антигенов методом ПЦР, оценку результатов ультразвуковых и допплерометрических исследований) с итоговым подсчетом прогностического индекса [14].

Прототипом предложенного изобретения является способ раннего прогнозирования синдрома задержки роста плода, заключающийся в определении в сыворотке крови женщины в 6-12 недель гестации содержания васкуло-эндотелиального фактора роста методом иммуноферментного анализа [13].

Несмотря на очевидные достоинства способа-прототипа (возможность прогнозирования задержки роста плода в 6-12 недель беременности с использованием готовых тест-систем и оснащения стандартным оборудованием для иммуноферментного анализа), к недостаткам данного метода можно отнести невозможность прогнозирования задержки роста плода с более ранних сроков беременности. Авторы прогнозируют задержку роста плода при уровне васкуло-эндотелиального фактора роста 20 мг/мл и ниже, в то же время другими исследователями установлено повышение содержания VEGF в ранние сроки беременности, осложнившейся впоследствии клиническими проявлениями плацентарной недостаточности и ЗВРП [20]. По современным представлениям, формирование ЗВРП может быть обусловлено нарушением развития плаценты в результате дисфункции эндотелия, которая существенно ухудшает процессы васкуляризации в ранних сроках беременности. Возникающие при этом недостаточность кровообращения и ишемия плаценты обусловливают активизацию выработки VEGF, поддерживающего способность ворсин плаценты к образованию большого числа ветвящихся сосудов [20]. Кроме того, изменение содержания васкуло-эндотелиального фактора роста является предвестником и других патологических состояний при беременности, в том числе угрозы прерывания беременности, гестоза, невынашивания [3, 5, 6, 11], в связи с чем специфичность способа прогноза, основанного на определении только этого фактора невелика.

В настоящее время перспективным направлением научных исследований, проводимых с целью поиска прогностических критериев формирования перинатальной патологии с ранних сроков беременности, является разработка оптимального комплекса предикторов, отражающих эффективность регуляторных механизмов, направленных на сохранение и успешное прогрессирование беременности. На сегодняшний день общепризнанным является тот факт, что в основе патогенеза гестационных осложнений лежат нарушения механизмов иммунологической регуляции в эмбриональном и раннем фетальном периоде. В результате обобщения опыта многолетних исследований, проводимых в ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации, установлено, что патогенетические механизмы формирования СЗРП связаны с увеличением цитотоксического потенциала лимфоцитов, нарушением процессов иммунного распознавания и формирования иммунологической толерантности материнской иммунной системы в отношении антигенов плода, нарушением апоптоза клеток-эффекторов, а также провоспалительной направленностью иммунного ответа. Такие изменения характера иммунного ответа способствуют нарушению формирования фетоплацентарного комплекса и проявлению эмбриотоксических эффектов. Таким образом, совокупность наиболее информативных факторов, характеризующих состояние клеточного и гуморального звеньев иммунной системы матери, может иметь высокую предикторную значимость для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода.

Сущность изобретения

Целью изобретения является разработка способа прогнозирования задержки внутриутробного роста плода с ранних сроков беременности (с момента наступления беременности до конца первого триместра), заключающегося в определении относительного содержания CD3⁺CD16⁺56⁺-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R) в крови женщины с последующим вычислением прогностического индекса (PI).

Способ осуществляют следующим образом. Забор периферической венозной крови для исследования проводят натощак, в утренние часы, в две пробирки: в пробирку с антикоагулянтом (ЭДТА) в количестве 0,5 мл и в сухую чистую пробирку в количестве 3 мл. Пробирку с ЭДТА используют для определения относительного содержания CD3⁺CD16⁺CD56⁺-клеток методом проточной цитофлюориметрии. Вторую пробирку используют для получения путем центрифугирования сыворотки крови, в которой проводят определение содержания уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R) методом иммуноферментного анализа в соответствии с инструкциями фирм-производителей. Измерение оптической плотности образцов выполняют на иммуноферментном анализаторе «SUNRISE» фирмы «TECAN» (Австрия).

Полученные значения используют для вычисления прогностического индекса (PI) по формуле, разработанной с использованием метода дискриминантного анализа:

PI=-0,8911X₁-0,0321Х₂-2,3669Х₃+11,0779,

где X₁ - относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов, %;

Х₂ - концентрация С3-компонента комплемента, мг/дл;

Х₃ - концентрация sTNF-R, нг/мл.

При PI<0 прогнозируют задержку роста плода во второй половине беременности, а при PI>0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния.

Чувствительность предлагаемого способа составляет 92,1% специфичность - 72,2%. Эффективность способа - 82,2%.

Пример 1. Ковалева Е.О. (история родов №2662). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 25.05.2010. Первобеременная, первородящая. Диагноз: беременность 9-10 недель, носитель ЦМВ, артериальная гипертензия I ст., хронический тонзиллит в стадии ремиссии, аппендэктомия в 13 лет без осложнений, эрозия шейки матки, уреаплазмоз. При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов - 8%, уровень С3-компонента комплемента - 77,02 мг/дл, концентрация sTNF-R - 1,89 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -2,997, отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске развития задержки внутриутробного роста плода, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска по формированию данного осложнения беременности. В сроке 34 недели беременности по данным ультразвукового исследования выявлена задержка внутриутробного роста плода I ст. по асимметричному типу. Женщина была госпитализирована в стационар, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. Беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 39-40 нед. и рождением живого доношенного мальчика с массой тела 2880 г, ростом 50 см. Диагноз ребенка при рождении: синдром задержки роста плода I ст., гипотрофический вариант.

Пример 2. Кузнецова М.И. (история родов №3714). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 28.12.2009. Повторно беременная, первородящая. Диагноз: беременность 9-10 недель, отягощенный акушерский анамнез (привычное невынашивание, бесплодие II - 12 лет), множественная субсерозно-интерстициальная миома матки небольших размеров с атипичным расположением одного из узлов, гиперандрогения, хронический аднексит, хронический пиелонефрит в стадии ремиссии, остеохондроз, грыжа межпозвоночных дисков, уреаплазмоз, микоплазмоз, хронический гепатит C, ожирение I ст., угроза выкидыша (жалобы на боли внизу живота). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов - 2%, уровень С3-компонента комплемента - 184,4 мг/дл, концентрация sTNF-R - 1,442 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -0,036 отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске развития задержки внутриутробного роста плода, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска по формированию данного осложнения беременности. В сроке 21-22 нед. по результатам ультразвукового и допплерометрического исследований выявлено нарушение маточно-плацентарного кровообращения I А ст., синдром задержки внутриутробного роста плода I ст. по асимметричному типу. Женщина была госпитализирована в стационар, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. Беременность завершилась преждевременными оперативными родами в сроке 34 нед. и рождением живой недоношенной девочки с массой тела 2220 г, ростом 44 см. Диагноз ребенка при рождении: недоношенность, синдром задержки роста плода I ст., гипотрофический вариант.

Пример 3. Мелкомукова Е.В. (история родов №2359). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 26.04.2010 г. Повторно беременная, первородящая. Диагноз: беременность 10 недель, отягощенный акушерский анамнез (медицинский аборт), носитель ВПГ, ЦМВ, миопия I ст., синдром дисплазии соединительной ткани (аномальная хорда левого желудочка), вегетососудистая дистония по гипотоническому типу, нефроптоз справа, дрожжевой кольпит при данной беременности. При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов - 9%, уровень С3-компонента комплемента - 95,17 мг/дл, концентрация sTNF-R - 1,23 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен -2,908 отрицательное значение индекса свидетельствует о высоком риске развития задержки внутриутробного роста плода, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска по формированию данного осложнения беременности. В сроке 31-32 нед. по результатам ультразвукового исследования выявлено маловодие, синдром задержки роста плода I ст. по асимметричному типу. Женщина была госпитализирована в стационар, наблюдалась и получала терапию в соответствии со стандартом оказания медицинской помощи. Беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 39-40 нед. и рождением живой доношенной девочки с массой тела 2765 г, ростом 49 см. Диагноз ребенка при рождении: перенесенная умеренная асфиксия, синдром задержки роста плода I ст., гипотрофический вариант.

Пример 4. Фомина И.А. (история родов №3782). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 25.01.2010. Повторно беременная, повторнородящая. Диагноз: беременность 6 недель, отягощенный акушерский анамнез (самопроизвольный выкидыш в 12 недель беременности, 2 медицинских аборта), микроаденома гипофиза, гиперпролактинемия, гиперандрогения, носитель ЦМВ, двусторонний диспластический коксартроз I ст. (деформация шеек бедер), эрозия шейки матки (криодеструкция в 1990 г.). При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов - 2%, уровень С3-компонента комплемента - 78,7 мг/дл, концентрация sTNF-R - 1,668 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 2,821, положительное значение индекса свидетельствует о низком риске развития задержки внутриутробного роста плода. При дальнейшем наблюдении, по данным ультразвуковых и допплерометрических исследований в течение беременности состояние плаценты и плода оценивалось как нормальное, соответствующее сроку гестации, беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 39-40 нед. и рождением живой доношенной девочки с массой тела 3410 г, ростом 51 см. Диагноз ребенка при рождении: здоров.

Пример 5. Кузнецова О.Д. (история родов №3915). Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России 24.02.2010. Повторно беременная, повторнородящая. Диагноз: беременность 8 недель, привычное невынашивание, бесплодие II (8 лет), язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, обострение хронического гайморита, отит, уреаплазмоз и трихомониаз санированы в 2002 г., носитель ЦМВ, ВПГ, аутоиммунный тиреоидит, субклинический гипотиреоз. При лабораторном исследовании крови получены следующие показатели: относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов - 2%, уровень С3-компонента комплемента - 144,9 мг/дл, концентрация sTNF-R - 1,467 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 1,172, положительное значение индекса свидетельствует о низком риске развития задержки внутриутробного роста плода. При дальнейшем наблюдении, по данным ультразвуковых и допплерометрических исследований в течение беременности состояние плаценты и плода оценивалось как нормальное, соответствующее сроку гестации, беременность завершилась самостоятельными срочными родами в сроке 39-40 нед. и рождением живого доношенного мальчика с массой тела 3700 г, ростом 52 см. Диагноз ребенка при рождении: здоров.

Приведенные клинические примеры показывают, что нарушение иммунорегуляции, характеризующееся сдвигами в клеточном и гуморальном звеньях иммунной системы женщины в ранние сроки беременности, является патогенетической основой формирования задержки внутриутробного роста плода, манифестирующей во второй половине гестации. Вышеизложенное подтверждает прогностическую ценность заявляемого способа.

Таким образом, заявляемый способ прогнозирования задержки внутриутробного роста плода в сравнении с известными имеет следующие преимущества:

1. Способ является малоинвазивным, поскольку прогнозирование осуществляется по результатам исследования периферической крови.

2. Способ позволяет прогнозировать риск формирования задержки роста плода с использованием иммунологических параметров, являющихся ключевыми регуляторами гестационного процесса и вовлеченных в патогенез данного осложнения беременности.

3. Предлагаемый способ позволяет с ранних сроков гестации (с момента наступления беременности) выявить группу риска по формированию задержки внутриутробного роста плода, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику данного патологического состояния.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Павлова Н.Г. Плацентарная недостаточность: учебно-методическое пособие / Н.Г.Павлова, О.Н.Аржанова, М.С.Зайнулина, А.В.Колобов // СПб.: ООО «Издательствово Н-Л», 2007. - 32 с.

2. Доброхотова Ю.Э. Плацентарная недостаточность. Современная терапия. Особенности течения плацентарной недостаточности при варикозной болезни: учебно-методическое пособие / Ю.Э.Доброхотова, Э.М.Джобава // М.: «АдамантЪ», 2011. - 32 с.

3. Ранние сроки беременности / Под ред. В.Е.Радзинского, А.А.Оразмурадова. - М.: «Status Preasens», 2009.

4. Игнатко И.В. Профилактика плацентарной недостаточности у беременных высокого перинатального риска / И.В.Игнатко // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2007. - Т.6, №5. - С.11-18.

5. Кудряшова А.В. Роль иммунной системы в формировании задержки внутриутробного развития плода / А.В.Кудряшова, Н.Ю.Сотникова, Л.В.Посисеева, И.А.Панова, М.В.Веденеева // Иваново, 2009. - 240 с.

6. Орлов В.И. Продукция факторов роста и вазоактивных веществ при синдроме задаржки роста плода / В.И.Орлов, В.В.Авруцкая, З.С.Крымшокалова, И.И.Крукиер // Журнал акушерства и женских болезней. - 2008. - Т.LVII, выпуск 2. - С.84-89.

7. Стрижаков А.Н. Клиническое значение приобретенных и наследственных форм тромбофилий в патогенезе синдрома задержки роста плода / А.Н.Стрижаков, А.Д.Макацария, Е.В.Тимохина, С.М.Баймурадова, У.А.Козлова // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2009. - Т.8, №2. - С.16-21.

8. Иммунологическая загадка беременности. Под ред. Н.Ю.Сотниковой. - Иванове: Издательство МИК. - 2005. - 276 с.

9. Ширшев С.В. Иммунология материнско-фетальных взаимодействий / С.В.Ширшев. - ЕкатеринбургУрО РАН, 2009. - 584 с.

10. Сельков С.А. Иммунологические механизмы контроля развития

плаценты / С.А.Сельков, Д.И.Соколов // Журнал акушерства и женских болезней. - 2010. - Т.LIX, выпуск 1. - С.6-10.

11. Левкович М.А. Роль иммуно-гормональных взаимодействий в генезе угрозы прерывания беременности ранних сроков / М.А.Левкович, В.А.Линде, В.О.Андреева, Т.Г.Плахотя, Д.Д.Нефедова // Акушерство и гинекология. - 2012. - Спецвыпуск. - С.3-7.

12. Крукиер И.И. Способ диагностики задержки роста плода / И.И.Крукиер, Т.Н.Погорелова, В.В.Авруцкая, Е.В.Нарежная, А.А.Никашина, Н.А.Друккер, А.Т.Лигидова // Патент RU №2425379 от 27.07.2011 г.

13. Сотникова Н.Ю. Способ раннего прогнозирования синдрома задержки развития плода / Н.Ю.Сотникова, А.В.Кудряшова // Патент RU №2295132 от 10.03.2007.

14. Рымашевский А.Н. Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода во 2-м триместре у ВИЧ-инфицированных / А.Н.Рымашевский, А.В.Опруженков // Патент RU №2435515 от 10.12.2011.

15. Башмакова Н.В. Способ прогноза задержки внутриутробного развития плода во втором триместре беременности после вспомогательных репродуктивных технологий / Н.В.Башмакова, Ю.М.Трапезникова, Н.Р.Шабунина-Басок, К.А.Изместьева, А.Д.Мазуров // Патент на изобретение №2436087 от 10.12.2011.

16. Кудряшова А.В. Способ диагностики задержки внутриутробного развития плода у женщин с гестозом / А.В.Кудряшова, И.А.Панова, Н.Ю.Сотникова, Н.Ю.Филинова, А.Г.Филинов // Патент RU №2188427 от 27.08.2002.

17. Башмакова Н.В. Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода при беременности после вспомогательных репродуктивных технологий / Н.В.Башмакова, Ю.М.Трапезникова, Н.Р.Шабунина-Басок, К.А.Изместьева, А.Д.Мазуров // Патент на изобретение №2444995 от 20.03.2012.

18. Сотникова Н.Ю. Способ оценки состояния плода / Н.Ю.Сотникова, А.В.Кудряшова, А.Г.Филинов, Ю.С.Анциферова, Н.В.Крошкина // Патент RU №2086981 от 10.08.1997.

19. Орлов А.В. Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода / А.В.Орлов, И.И.Крукиер, И.В.Маркарьян, Н.А.Друккер, Т.Н.Погорелова, Э.Ю.Мелконов // Патент на изобретение №2246733 от 20.02.2005 г.

20. Plaiser M., Dennert I., Rost E. et al. Decidual vascularization and the expression of angiogenic growth factors and proteases in first trimester spontaneous abortions. Human Reprod 2009; 24 (1):185-197.

Способ прогнозирования задержки внутриутробного роста плода, отличающийся тем, что с ранних сроков беременности определяют относительное содержание CD3⁺CD16⁺56⁺-лимфоцитов, уровень С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R) в венозной крови женщины, вычисляют прогностический индекс (PI) по формуле:
PI=-0,8911X₁-0,0321Х₂-2,3669Х₃+11,0779,
где X₁ - относительное содержание CD3⁺CD16⁺CD56⁺-лимфоцитов, %;
Х₂ - концентрация С3-компонента комплемента, мг/дл;
Х₃ - концентрация sTNF-R, нг/мл
и при PI менее 0 прогнозируют задержку внутриутробного роста плода во второй половине беременности, а при PI более 0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исходов бактериальных гнойных менингитов (БГМ) различной этиологии у детей.

Технология получения костного мозга от доноров-трупов с бьющимся и не бьющимся сердцем // 2523563

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для получения костного мозга (КМ) от доноров-трупов. Для этого пунктируют крылья подвздошных костей в передней и задней трети крыльев, устанавливая в каждое по два троакара.

Комплексный способ определения циркулирующих опухолевых клеток в крови больных раком молочной железы // 2522923

Изобретение относится к диагностическим методам в медицине и может быть использовано в онкологии при адъювантной терапии опухолей, а также при длительном наблюдении за пациентами после оперативного удаления опухолей.

Способ прогнозирования эффективности противовирусной терапии у взрослых больных хроническим гепатитом с с генотипом 1b // 2522500

Изобретение относится к области медицины, а именно к гепатологии, и может использоваться для прогнозирования эффективности противовирусной терапии у взрослых больных хроническим гепатитом C с генотипом 1b.

Способ прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом // 2521372

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционного синдрома у больных острым лейкозом.

Способ дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных беспигментных новообразований кожи // 2518350

Изобретение относится к медицине. При осуществлении способа через 3 ч после перорального введения препарата «Аласенс» в дозе 15 мг/кг массы тела получают трехканальное RGB флуоресцентное изображение зоны интереса.

Способ количественного определения клеток-предшественников (cd34+) в кроветворной ткани // 2513511

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для количественного определения клеток-предшественников в кроветворной ткани.

Способ количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма "москва 3253" // 2511440

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253». Способ предусматривает обеззараживание и выделение РНК из вируссодержащего материала, постановку реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме «реального времени» с использованием специфичных праймеров RV5-5'-GTTGGGCACTGAAACTGCTA-3', RV6-5'-GAATCTCCGGGTTCAAGAGT-3' и зонда RV7-5'-ROX-AATCCTCCTTGAACTCCATGCGACAGA-BHQ2.

Способ определения протеолитической модификации клеточных рецепторов на модели выделенных лимфоцитов периферической крови // 2510026

Изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано для определения протеолитической модификации клеточных рецепторов на модели выделенных лимфоцитов периферической крови.

Способ прогнозирования туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью // 2504787

Изобретение относится к области медицины, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью у впервые выявленных больных туберкулезом легких (ТБ).

Способ прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения рака почки // 2528100

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения при раке почки. Для этого в ткани опухоли определяют экспрессию NF-kB p50, HIF-1α содержание сосудистого эндотелиального фактора роста VEGF. Рассчитывают дискриминантные функции Y1, Y2 по уравнениям: Y1=-3,2+0,026·Х1+0,03·Х2-0,02·Х3+0,34·Х4+0,3·Х5; Y2=-33,3-0,01·Х1+0,11-Х2-1,2·Х3+1,57·Х4+1,8·Х5, где X1 - тотальная активность протеасом ·10-3 МЕ/мг белка; Х2 - содержание VEGF, пг/мг белка ; Х3 - экспрессия HIF-1, УЕ/мг белка в лунке; Х4 - экспрессия NF-kВ p50, УЕ/мг белка в лунке. При значениях Y1>Y2 прогнозируют отсутствие, а при Y1<Y2 - развитие гематогенных метастазов. Использование данного способа позволяет прогнозировать прогрессирование рака почки, а следовательно, назначить своевременное назначение наиболее адекватных лечебных мероприятий. 1 табл., 2 пр.

Способ дифференциальной диагностики злокачественной и доброкачественной патологии молочной железы // 2530557

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и клинической биохимии. Сущность способа заключается в том, что фиксированные клетки периферической крови обрабатывают первичными антителами к эстроген-связываюшему белку, специфически взаимодействующими с антигенами на поверхности сегментоядерных гранулоцитов, затем к полученному комплексу антиген-антитело добавляют вторичные антивидовые флуоресцентно-меченные антитела, и при наличии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют злокачественные новообразования, а при отсутствии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют доброкачественные новообразования. Способ неинвазивен, позволяет быстро и со 100%-ной точностью дифференцировать пациенток, имеющих злокачественные опухоли молочной железы, от пациенток с доброкачественными новообразованиями и здоровых женщин. Данный тест может быть использован для экспресс-диагностики наличия рака молочной железы. 6 пр., 6 ил.

Способ прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа // 2531947

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у пациентов с постинфарктной хронической сердечной недостаточностью, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа. Для этого проводят измерение циркулирующих в периферической крови прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD 133 dim, CD45-. При снижении вышеуказанных клеток ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов прогнозируют неблагоприятный прогноз течения заболевания, проявляющийся в прогрессировании сердечной недостаточности и увеличении риска сердечно-сосудистой летальности. Изобретение обеспечивает прогнозирование показателей выживаемости у данной группы больных путем использования нового биомаркера крови. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Способ определения биологической активности эмбрионированных яиц trichuris // 2540145

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного. Представленное изобретение может быть использовано при получении безопасных фармацевтических продуктов, терапевтически эффективных при применении у человека. 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 6 пр.

Способ определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ммр9-1562 с>т (rs3918242) // 2548811

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242). Способ основан на снятии кривых плавления с флуоресцентно-мечеными аллель-специфичными олигонуклеотидными пробами. В способе используют общую для всех аллелей пару праймеров, отличающиеся для каждого аллеля флуоресцентно-меченые аллель-специфичные олигонуклеотидные пробы и универсальный олигонуклеотид, меченый гасителем флуоресценции следующего нуклеотидного состава: MMP9-1562s CGAAACCAGCCTGGTCAACG; ММР9-1562а TCTGCCTCCCGGGTTCAAGC; ММР9-1562р1 GGCGCACGCCTATAA-FAM; ММР9-1562р2 GGCGCATGCCTATAA-HEX; ММР9-1562pq BHQ1-ACCAGCTACTCGGGAGGC-3'-(P), где FAM - означает флуоресцентный краситель FAM, HEX - означает флуоресцентный краситель HEX, BHQ1 - означает присоединенный к 5'-концевому нуклеотиду темновой гаситель флуоресценции. Отнесение образца к гомозиготе или гетерозиготе по данному аллелю оценивается по форме кривых плавления ДНК - по максимуму первой производной графиков флуоресценции. Изобретение позволяет повысить надежность и доступность генотипирования. 1 ил.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2555340

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения еx-vivo эффективности лечения рака. Для этого после введения одной или более доз иммуногенной композиции субъекту измеряют уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) в организме. Уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) выше приблизительно 10,4% свидетельствуют о том, что субъект является таким, который демонстрирует успешный клинический выход для лечения, то есть повышение коэффициента выживания. Использование уровня активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) позволяет применять их в качестве биомаркера для мониторинга, модификации или корректировки лечения рака. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 ил.

Иммунологические исследования с использованием недисперсного хемилюминесцентного реактива // 2559581

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы. 2 н. и 19 з.п. ф-лы, 5 ил., 11 пр.

Способ диагностики наследственной оптической нейропатии // 2566271

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для диагностики наследственной оптической нейропатии (НОН). Для этого проводят клинические и цитологические исследования и дополнительно из кожи пациента получают культуру фибробластов плотностью 5000-10000 клеток на см2, окрашивают митохондриальным потенциалзависимым флюоресцентным красителем TMRE до конечной концентрации 25 нМ. Измеряют в культуре интенсивность флюоресценции митохондрий до и через 30 мин после добавления олигомицина до конечной концентрации 10 мкМ и при ее увеличении не более чем на 7% или снижении диагностируют НОН. Изобретение обеспечивает повышение точности диагностики заболевания для осуществления корректного лечения, прогнозирования течения заболевания у пробанда, прогноза для родственников и потомства пробанда, а также упрощение способа. 15 ил., 4 пр.

Способ лабораторной диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии // 2574968

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Для этого окрашивают исследуемый образец крови моноклональными антителами CD235a (FITC)/ CD59(PE)/CD71 (АРС). Наличие ПНГ-клона среди эритроцитов и ретикулоцитов оценивают по отсутствию защитного белка CD59 на мембране ретикулоцитов, выделенных по гейту CD235a - панэритроцитарному маркеру и CD71- рецептору к трансферрину. Для оценки ПНГ-клона среди ретикулоцитов в гейте CD71+ собирают не менее 20000 событий, в зависимости от гейта CD71+ строят график FSC(log) vs SSC(log), на котором с помощью дополнительного гейта CD71str выделяют ретикулоциты, очищая таким образом популяцию ретикулоцитов от дебриса и дуплетов методом последовательного гейтирования. При наличии 100% положительных по CD59 ретикулоцитов судят об отсутствии ПНГ-клона и диагностируют отсутствие заболевания пароксизмальной ночной гемоглобинурии. При выявлении у пациента с клиническими симптомами негативных CD59- ретикулоцитов и значении полученных показателей более 1% дают диагностическое заключение о наличии ПНГ-клона и для подтверждения диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии рекомендуют дополнительное исследование по международному стандартизованному протоколу. При выявлении негативных по CD59-ретикулоцитов и значении полученных показателей 0,1-1% судят о наличии минорного ПНГ-клона и рекомендуют повторное определение ПНГ-клона через 6 мес на предмет увеличения его значения и развития пароксизмальной ночной гемоглобинурии, и при подтверждении такого размера клона диагностируют субклиническую форму пароксизмальной ночной гемоглобинурии без клинических признаков. Использование многопараметрического гейтирования CD71+ клеток позволяет добиться исключения из анализа дебриса, дублетов и от неспецифически связавшихся моноклональных антител. 1 ил.

Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы // 2578448

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы. Для этого в крови больного определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14+/HLA-DR+ методом проточной цитометрии и статистического ROC-анализа. При содержании CD14+/HLA-DR+ ниже 85% диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы. Использование данного способа позволяет диагностировать нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы, что позволяет определять тактику ведения таких больных и осуществлять выбор оперативного вмешательства. 2 пр., 1 табл.