Способ получения фракции липофильных веществ из чаги

Авторы патента:

Никитина Светлана Александровна (RU)

Хабибрахманова Венера Равилевна (RU)

A61K36/06 - Лекарства и медикаменты для терапевтических, стоматологических или гигиенических целей (изготовление специальных лекарственных форм A61J; химические аспекты или использование материалов для дезодорации воздуха, для дезинфекции или стерилизации или для бандажей, перевязочных средств, впитывающих прокладок или хирургических приспособлений A61L; соединения как таковые C01, C07,C08,C12N; мыла C11D; микроорганизмы как таковые C12N)

Владельцы патента RU 2530636:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский национальный исследовательский технологический университет" (ФГБОУ ВПО "КНИТУ") (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к получению фракции биологически активных липофильных веществ из чаги. Способ заключается в том, что измельченную чагу экстрагируют водой, полученный водный экстракт отделяют от шрота чаги, шрот высушивают, добавляют к нему петролейный эфир, кипятят, полученный органический экстракт отделяют, удаляют растворитель с получением сухого остатка фракции липофильных веществ, при определенных условиях. Способ позволяет извлечь из чаги фракцию липофильных веществ, включающую стериновые соединения, которые обладают выраженной биологической активностью. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению фракции биологически активных липофильных веществ из чаги.

Известны способы выделения липофильных веществ из гриба чаги, включающие экстракцию измельченного гриба органическими растворителями: гексаном (Kahlos К. // Planta Medica. - 1984. - №50. - P.197-198), этиловым спиртом (Shin Y. // Int. J. of Medicinal Mushrooms. - 2001. - V.3. - P.250), хлороформом (Handa N. // Phytochemistry. - 2010. - V.71. - P.1774-1779) и разделение полученных экстрактов на фракции с помощью колоночной хроматографии. Это позволило идентифицировать в грибе к настоящему времени более 20 стериновых соединений, представленных эргостеролом и ланостеролом, а также их различными производными. Для ланостерола и отдельных его производных показана высокая противоопухолевая, иммуномодулирующая и противовоспалительная активность, для эргостерола и его производных - провитаминные и противоопухолевые свойства.

Недостатком данных способов является извлечение малого количества и узкого спектра липофильных веществ из гриба чага.

Известен способ выделения фракции липофильных веществ из гриба чаги (W. Mazurkiewicz [and others] // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2010. - V.67, I.4. - P.397-406). Получают водный экстракт гриба, концентрируют и высушивают. Далее проводят гидролиз сухого остатка хлористоводородной кислотой, отделяют осадок 1, оставшийся фильтрат упаривают досуха и получают осадок 2. Осадки 1 и 2 обрабатывают этилацетатом и метанолом, полученные экстракты объединяют и удаляют растворители под вакуумом с получением сухого остатка черного цвета. Разделение веществ сухого остатка проводят с помощью колоночной хроматографии.

Известен способ получения липофильных веществ из гриба, включающий получение водных экстрактов чаги, которые далее экстрагируют различными органическими растворителями: петролейным эфиром, этилацетатом, хлороформом, хлороформ - этанольной смесью (Сысоева М.А. [и другие] Исследование золя водных извлечений чаги. XI. Липиды водного извлечения чаги // Химия растительного сырья. - 2008 - 3. - С.119-122). Во всех полученных органических экстрактах обнаружены моно-, ди- и триацилглицериды, алифатические спирты и альдегиды, стерины и их эфиры, углеводороды, воски, витамины E и K, кофермент Q, высшие жирные кислоты.

Недостатком данных способов является нерациональное использование сырья, поскольку в водный экстракт чаги переходит около 20±2% веществ гриба. При этом значительная часть биологически активных соединений гриба, обладающих гидрофобными свойствами, остаются в шроте (жоме, остатке сырья). В частности известно, что после водной экстракции гриба стериновые соединения частично эмульгируются и извлекаются водой, но до 80% этих соединений остается в шроте чаги, который является отходом производства и в дальнейшем не используется (Шиврина А.Н. // Продукты биосинтеза высших грибов и их использование. - М.-Л., 1966. - С.49-56.). Это обуславливает актуальность дальнейшей переработки шрота чаги.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является способ получения спиртового экстракта из чаги (патент РФ №2341277, А61К 36/06, B01D 11/02, 2007). Измельченную чагу экстрагируют водой, водный экстракт отделяют от шрота. Шрот заливают 70%-ным этиловым спиртом и кипятят в течение 1-3 часа. Полученный спиртовой экстракт отделяют.

Недостатком данного способа является извлечение из шрота чаги сложного комплекса соединений, включающего фенольные вещества, углеводы и меланин. Это усложняет методику стандартизации полученных экстрактов, выделения из них индивидуальных биологически активных веществ.

Технической задачей настоящего изобретения является разработка способа получения фракции липофильных веществ, включающих стериновые соединения, из чаги.

Поставленная задача достигается способом, в котором измельченную чагу экстрагируют водой, полученный водный экстракт отделяют от шрота чаги, шрот высушивают, добавляют к нему петролейный эфир с температурой кипения 40-70°C, кипятят в течение 1 ч, полученный органический экстракт отделяют, удаляют растворитель с получением сухого остатка фракции липофильных веществ.

Технический результат заключается в получении фракции липофильных веществ, включающих стериновые соединения.

Сущность способа заключается в следующем.

Сначала измельченную чагу экстрагируют водой. Водный экстракт отделяют от шрота и используют, например, для получения меланина. Так же на основе водного экстракта чаги в фармацевтической промышленности получают препарат «Бефунгин». При водной экстракции из сырья в экстракт переходят гидрофильные компоненты, что позволяет органическому растворителю легче проникать внутрь сырья (шрота) и увеличить доступность оставшихся в шроте чаги липофильных (гидрофобных) веществ к их дальнейшему извлечению. Оставшийся после отделения водного экстракта шрот предварительно высушивают при комнатной температуре для удаления остаточной влаги. К высушенному шроту чаги добавляют петролейный эфир с температурой кипения 40-70°C. Выбор растворителя обоснован его селективностью по отношению к липофильным веществам, в том числе к стериновым соединениям. При этом в петролейном эфире не растворяются вещества фенольной природы, содержащиеся в сырье в значительном количестве. Проводят кипячение шрота с органическим растворителем в течение оптимального времени проведения процесса - 1 ч. Увеличение времени кипячения шрота не влияет на выход экстрактивных веществ. Полученный органический экстракт отделяют, удаляют растворитель под вакуумом и получают сухой остаток фракции липофильных веществ.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1

Использовали сырье ООО «КФХ «Кентавр», партия 011209.

Проводили экстракцию чаги водой. Полученный водный экстракт отделяли от шрота, шрот высушивали при комнатной температуре. 5 г высушенного шрота чаги заливали 250 мл петролейного эфира с температурой кипения 40-70°C (массовое соотношение шрот: растворитель 1:50), кипятили 1 ч. Экстракт отделяли, удаляли растворитель на вакуумном испарителе при 25-30°C и получали 0,0179±0,0010 г липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составило 15,33±0,20 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 2

Аналогичен примеру 1, но для экстракции взяли 10 г шрота (массовое соотношение шрот: растворитель 1:25).

Получили 0,0369±0,0015 г липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 12,42±0,50 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 3

Аналогичен примеру 1, но для экстракции взяли 15 г шрота (массовое соотношение шрот: растворитель 1:16).

Получили 0,0507±0,0010 г липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 15,20±0,46 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 4

Аналогичен примеру 1, но использовали сырье ИП Гордеев, партия 041010.

Получили 0,0173±0,0010 г липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 13,40±0,50 мас.% от экстрактивных веществ.

Таблица 1
Качественный состав фракции липофильных веществ, выделенных из чаги
коэффициент распределения (R_f)	Отнесение*
0,81-0,90	углеводороды, эфиры стеринов, воски, сквален
0,55	высшие алифатические альдегиды, витамин K
0,32-0,35	Триацилглицериды
0,16-0,17	высшие жирные кислоты
0,14	высшие алифатические спирты
0,09-0,11	Стерины
0,05-0,06	O-диалкиловые эфиры глицерина
0,02-0,04	1,3- и 1,2-диацилглицериды
0,00	моноацилглицериды, 1-O-моноалкиловые эфиры глицерина
* - Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс. - М., 1975. - 324 с;

Качественный состав липофильных веществ во всех полученных экстрактах определяли методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Sorbfil». Для разделения нейтральных липофильных соединений использовали систему растворителей №1: петролейный эфир - диэтиловый эфир - уксусная кислота в соотношении 90:10:1, хроматограммы обрабатывали специфичным реагентом на стериновые соединения - раствором хлорного железа (Кейтс М. Техника липидологии. - М., 1975. - 324 с.). В качестве веществ-метчиков использовали миристиновую кислоту, ланостерол (№ S 446793-1ЕА Sigma-Aldrich) и сквален (№83626-10ML Sigma-Aldrich). Идентификацию веществ проводили сравнением коэффициентов распределения (R_f) с метчиками и данными литературы (таблица 1).

Согласно данным, приведенным в таблице 1, фракция липофильных соединений, выделенная из чаги, кроме стериновых соединений содержит широкий спектр биологически активных веществ, включающих жирные кислоты, алифатические спирты, витамин K, ацилглицериды.

Таблица 2
Состав стериновых соединений фракции липофильных веществ, выделенных из чаги
коэффициент распределения (R_f)	Отнесение*
0,85	сквален
0,77	ланостерол
0,76	не идентифицировано
0,69	эргостерол
0,60
0,49
0,41
0,35
0,20	не идентифицированы
0,13
0,05
0,02
0,00
* - К вопросу о стандартизации препаратов «чаги настойка» и «Бефунгин» / Е.Н. Жукович // Химико-фармацевтический журнал. - 2010. - Т.44, №.3. - С.35-37.

Для разделения стериновых соединений была подобрана другая система растворителей №2: хлороформ - этанол в соотношении 25:1 (К вопросу о стандартизации препаратов «чаги настойка» и «Бефунгин» / Е.Н. Жукович // Химико-фармацевтический журнал. - 2010. - Т.44, №.3. - С.35-37). Результаты хроматографии представлены в таблице 2. Присутствие в экстрактах сквалена и ланостерола подтверждено использованием стандартов-метчиков: Lanosterol (№ S 446793-1ЕА Sigma-Aldrich) и Squalene (№53626-10ML Sigma-Aldrich).

При хроматографировании в системе №2 были идентифицированы сквален, ланостерол, эргостерол (таблица 2), обладающие выраженной биологической активностью (Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I.4. - P.313-316.). Не идентифицированные соединения также можно отнести к стериновым веществам по специфической окраске пятен на хроматограмме. Использование дополнительной системы растворителей толуол - муравьиная кислота - этилацетат в соотношении 5:1:4 при сравнении коэффициентов распределения (R_f) с данными литературы позволило дополнительно идентифицировать инотодиол.

Спектрофотометрическим методом было определено количество стериновых соединений во фракциях липофильных веществ, выделенных из чаги (Антипов Л.В. Физические методы контроля сырья и продуктов в мясной промышленности. - СПб.: ГИОРД, 2006. - 200 с.). Показано, что содержание стериновых соединений во фракциях, полученных по предлагаемому способу, составляет 12,42-15,33 мас.% от экстрактивных веществ фракций. При этом в самом грибе их содержание не превышает 0,60%, а в гидролизатах меланина чаги и спиртовых экстрактах шрота присутствие стериновых соединений обнаружено не было.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет извлечь из чаги фракцию липофильных веществ, включающую стериновые соединения, которые обладают противоопухолевой, иммуномодулирующей и противовоспалительной активностями. Фракция липофильных веществ может быть использована для разработки на ее основе лекарственных препаратов и биологически активных добавок, обеспечивающих терапевтическое действие, которое обусловлено содержанием в них стериновых соединений. Предлагаемое изобретение может быть использовано в промышленных условиях для комплексной переработки сырья чаги.

Способ получения фракции липофильных веществ из чаги, включающий измельчение гриба, экстракцию сырья водой, отделение водного экстракта от шрота, кипячение шрота в органическом растворителе в течение 1 ч, отделение органического экстракта, отличающийся тем, что перед кипячением шрот высушивают, в качестве органического растворителя используют петролейный эфир с температурой кипения 40-70°C, из полученного органического экстракта растворитель удаляют.

Изобретение относится к ликероводочной промышленности. Сырье измельчают, настаивают в водно-спиртовом растворе в две стадии при пульсационном пневматическом перемешивании сжатым воздухом.

Применение ланохолестероловой фракции из шерстного жира в качестве биоэмульгатора для косметических антивозрастных средств // 2526158

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к применению ланохолестероловой фракции из шерстного жира в качестве биоэмульгатора для косметических антивозрастных средств.

Способ экстракции цинка из донных осадков ионной жидкостью // 2523469

Изобретение относится к области аналитической химии объектов окружающей среды и направлено на разработку средств аналитического контроля параметров экосистем и полиэлементного фонового мониторинга природных вод и водных экосистем.

Способ получения меланина из чаги // 2523414

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению меланина чаги. Способ получения меланина из чаги, включающий добавление к водному экстракту чаги 25% раствора хлористоводородной кислоты, отделение полученного осадка меланина, добавление к осадку петролейного эфира, перемешивание до получения смеси однородной консистенции, полученную смесь замораживают, после размораживания смеси слой органического экстракта удаляют, а из водного слоя отделяют осадок меланина и высушивают, при определенных условиях.Предлагаемый способ позволяет снизить количество зольных веществ в меланине без изменения его биологической активности. 1 табл., 4 пр. .

Способ выделения билогически активных компонентов из растительного сырья и средство на его основе // 2523038

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения биологически активных компонентов из пырея ползучего. Способ выделения биологически активных компонентов из свежесобранных корней и/или листьев пырея ползучего, включающий предварительное охлаждение сырья, охлаждение минеральной воды, их смешивание и измельчение, при определенных условиях.

Способ получения фракции липофильных веществ из чаги // 2522952

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активных липофильных соединений на основе лекарственного сырья - гриба чаги.

Способ получения средства, обладающего гепатопротекторным действием // 2522281

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего гепатопротекторным действием. Способ получения средства, обладающего гепатопротекторным действием, путем экстракции измельченных столбиков с рыльцами кукурузы спиртом этиловым методом многоступенчатого противоточного экстрагирования с законченным циклом в батарее из 5 диффузоров, дополнительно экстрагируют отработанное сырье в 4 и 5 диффузорах используемым экстрагентом, после чего сливают и пропускают через 5 диффузор, выдерживают, далее отжимают отработанное сырье, затем объединенное извлечение отстаивают, очищенное извлечение сгущают под вакуумом, высушивают в вакуум-сушильном шкафу до получения сухого экстракта и измельчают, при определенных условиях.

Способ раздельного выделения дубильных веществ и флавоноидов из лекарственного растительного сырья // 2522227

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу раздельного выделения дубильных веществ и флавоноидов из лекарственного растительного сырья.

Комплекс биологически активных веществ для лечения и профилактики заболеваний сердечно-сосудистой системы // 2520695

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний. Комплекс биологически активных веществ для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, выделенный из гонад морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis, очищенных от балластных веществ, полученный путем экстракции очищенных гонад раствором 95% этилового спирта при определенных условиях, отделения жидкого спиртового экстракта, высушивания.

Средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием // 2519769

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему противоопухолевым и иммуномодулирующим действием. Средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием, представляющее собой сухой экстракт листьев и цветков аврана лекарственного, полученный путем измельчения их, экстракции спиртом на водяной бане до кипения и кипячения, выпаривания, разведения выпаренного остатка сначала дистиллированной водой, затем добавления хлороформа, охлаждения до комнатной температуры и центрифугирования с последующим отделением водной фракции и высушиванием ее при определенных условиях.

Вызываемая медикаментозными средствами липоатрофия для косметических целей // 2530629

Изобретение относится к области косметологии и представляет собой способ уменьшения объема небольших отложений жира введением нуждающемуся в этом пациенту достаточного количества композиции, содержащей триамцинолон, лидокаин и фенилэфрин с физиологически приемлемой средой.

Десенсибилизирующее средство ухода за зубами // 2530618

Группа изобретений касается композиций для ухода за полостью рта, содержащих в качестве антибактериального агента галогенированный дифениловый эфир, и способа солюбилизации галогенированного дифенилового эфира в композиции.

Инъецируемая комбинация агонистов адренергических рецепторов с наполнителями для уменьшения кожных реакций на инъекцию // 2530604

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой инъецируемую композицию в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения для сокращения, уменьшения или избегания возникновения кожных реакций, инициируемых инъекцией, в частности красноты, экхимоза, гематомы, кровотечения, эритемы, отека, некроза, изъязвления, припухлости и/или воспаления, содержащую наполнитель, способный заполнить кожные ткани, или ботулинический токсин, агонист α-адренергических рецепторов.

Способ изготовления внутрикостных имплантатов с биоактивным покрытием // 2530573

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой хирургии и травматологии, и может быть использовано для изготовления внутритканевых эндопротезов на титановой основе.

Состав грязевой лечебно-профилактический // 2530570

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к составу грязевому лечебно-профилактическому. Состав грязевой лечебно-профилактический содержит предварительно подготовленные илово-глинистые отложения озера Тамбукан, Витепсол W 35, Витепсол Н 15, полиэтиленгликоль 1500, кремофор RH, а также углекислотные растительные экстракты, выбранные из группы, в которую входят, по меньшей мере, ива белая, облепиха, дуб, календула, солодка, шиповник, шалфей и/или углекислотный экстракт прополиса, взятые в определенном соотношении.

Состав грязевой лечебно-профилактический // 2530569

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к составу грязевому лечебно-профилактическому. Состав грязевой лечебно-профилактический содержит предварительно подготовленные илово-глинистые отложения озера Тамбукан, полиэтиленгликоль 4000, полиэтиленгликоль 1500, кремофор RH, а также углекислотный экстракт прополиса и/или углекислотный растительный экстракт, выбранный из группы, в которую входят, по меньшей мере, эвкалипт, шиповник, хмель, лавр, ромашка, солодка и дуб, взятые при определенном соотношении компонентов.

Оральная композиция для лечения неприятного запаха изо рта // 2529819

Группа изобретений касается композиции для ухода за полостью рта и использования такой композиции для борьбы с неприятным запахом изо рта. Предлагаемая оральная композиция для уменьшения неприятного запаха изо рта, вызванного индолом, содержит L-серин аминокислоту в количестве от 0,3 до 10% масс./масс.

Наружное средство для кожи // 2529818

Изобретение относится к области косметологии и представляет собой наружный препарат для кожи, включающий (а) от 0,01 до 5 вес.% 4-изобутилрезорцинола или его соли и (б) от 0,01 до 5 вес.% одного или более соединения, выбранного из L-аскорбиновой кислоты или ее соли и 3-О-этил-L-аскорбиновой кислоты или ее соли, и ингредиенты, которые обычно применяются в наружных препаратах для кожи - остальное.

Способ консервации водных препаратов минеральных веществ, консервированные водные препараты минеральных веществ и применение консервирующих соединений в водных препаратах минеральных веществ // 2529816

Изобретение относится к способу консервации водного препарата соединений кальция, который включает следующие стадии: (a) получение водного препарата по меньшей мере одного соединения кальция; (b) добавление к водному препарату стадии a) одного или более источников ионов лития в таком количестве, чтобы общее количество ионов лития в водном препарате составляло от 750 до менее 3000 промилле, вычисленное по отношению к воде в препарате; (c) добавление к водному препарату стадии a) одного или более источников ионов натрия и/или калия в таком количестве, чтобы общее количество ионов натрия и/или калия в водном препарате составляло от 3000 до менее 7500 промилле, вычисленное по отношению к воде в препарате, где стадии (b) и (c) могут быть выполнены одновременно или по отдельности в любом порядке.

Биологически активная композиция // 2529812

Изобретение относится к биологически активной композиции для лечения заболеваний мочеполовой системы у мужчин и женщин, поверхностных повреждений кожи, а также для интимной гигиены.

Способ получения фракции фенольных веществ из чаги // 2530637

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активных фенольных соединений из чаги. Способ получения фракции фенольных веществ из чаги включает измельчение гриба, экстракцию сырья водой, отделение водного экстракта от шрота, кипячение шрота в органическом растворителе, отделение органического экстракта, при этом перед кипячением шрот высушивают, в качестве органического растворителя используют этилацетат, из полученного экстракта растворитель удаляют, при определенных условиях. Способ позволяет эффективно извлечь из чаги фракцию фенольных веществ, включающих флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, фенолы простого строения, которые обладают выраженной биологической активностью. 1 табл., 2 пр.