Способ диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов среды обитания

Авторы патента:

ЗАЙЦЕВА Нина Владимировна (RU)

УСТИНОВА Ольга Юрьевна (RU)

ДОЛГИХ Олег Владимирович (RU)

МАКАРОВА Венера Галимзяновна (RU)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2538676:

Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к способу диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов, таких как хром и марганец. Для этого определяют содержание в крови ребенка хрома, марганца и определяют количество поствакцинальных антител класса иммуноглобулина IgG к возбудителю коклюша. При одновременном повышенном содержании в крови ребенка хрома более 0,004 мг/дм³ и марганца более 0,011 мг/дм³ и пониженным по сравнению с протективным уровнем количеством поствакцинальных антител класса IgG к возбудителю коклюша, диагностируют снижение поствакцинального иммунитета ребенка к коклюшу. Использование данного способа позволяет выявить детей с низким поствакцинальным иммунитетом на ранней стадии без клинических проявлений. 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам оценки влияния неблагоприятных химических факторов антропогенного происхождения, в частности хрома и марганца, на изменение поствакцинального иммунитета у детей к коклюшу. Метод может быть использован для проведения эпидемиологических исследований, расследований, экспертиз и направлен на объективную оценку иммунологической эффективности вакцинопрофилактики и выявление контингента детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов, таких как хром и марганец, в отношении которых необходимо осуществление дополнительных мероприятий, направленных на повышение эффективности вакцинации вакциной АКДС - адсорбированной (цельноклеточной) коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакциной.

Для понимания сущности вопроса ниже приведены следующие пояснения.

В 2011 г. вакцинопрофилактика коклюша была осуществлена у 98,1% детей РФ. Ретроспективный анализ показал, что среди заболевших высокий удельный вес составляли привитые лица, что свидетельствует о недостаточном уровне поствакцинального иммунитета у отдельных категорий населения. Установлено, что антропогенное загрязнения среды обитания является одним из ведущих факторов риска формирования у 35%-51,9% детей низкого уровня специфических поствакцинальных антител. На территориях антропогенного загрязнения среды обитания число детей с максимальным содержанием поствакцинальных антител в 7-8 раз ниже аналогичного показателя у лиц, проживающих в условиях относительного санитарно-гигиенического благополучия. По данным литературы у детей 10-14 лет, проживающих на территориях антропогенного загрязнения, установлено отсутствие защитных уровней антител к коклюшу в 90% случаев, несмотря на проведение плановой вакцинации.

Следует отметить, что в настоящее время отсутствуют методические подходы к оценке нарушений поствакцинального иммунитета у детей, проживающих в условиях антропогенного загрязнения среды обитания, не разработан алгоритм формирования доказательной базы роли химических токсикантов в развитии этих нарушений, наличие которой позволит разработать комплекс дополнительных мероприятий, направленных на повышение эффективности вакцинопрофилактики коклюша у детей.

Из Методических указаний “МУ 3.1.2943-11. 3.1. Профилактика инфекционных болезней. Организация и проведение серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики (дифтерия, столбняк, коклюш, корь, краснуха, эпидемический паротит, полиомиелит, гепатит В)” (утв. Роспотребнадзором 15.07.2011), известен способ определения количества антител к коклюшу методом РПГА (реакция непрямой гемагглютинации). Однако указанный известный метод дает определение не поствакцинальных антител, а всех антител к возбудителю коклюша. Его результаты зачастую являются недостоверными и не выявляют детей с нарушениями именно поствакцинального иммунитета, т.к. защиту ребенка при встрече с возбудителем коклюша обеспечивают не все антитела, а именно поствакцинальные. Кроме того, этот известный способ не учитывает влияние химических веществ-загрязнителей, таких как хром и марганец, на количество антител к коклюшу, что также снижает достоверность выводов.

Также известен Способ определения напряженности клеточного поствакцинального иммунитета in vitro (Заявка на Патент РФ №2008136596), согласно которому проводят инкубацию периферической крови пациента с физиологическим раствором в качестве контрольной пробы и водным раствором исследуемой вакцины в качестве опытной пробы, последующую обработку опытной и контрольной проб гемолизирующей смесью и определение в каждой пробе СрИФ с помощью лазерного проточного цитофлюориметра, при этом в тест-системе in vitro используют широкий спектр вакцин (АКДС, АДСМ, коревую, паротитную, полиомиелитную, гепатитную, против краснухи и др.), определяют коэффициент напряженности (КН) по формуле

и если значение КН находится в пределах менее 20%, делают заключение об отсутствие защитного поствакцинального иммунитета, в пределах от 20 до 40% делают заключение о гипоэргической, в пределах от 40 до 60% - нормэргической, превышает 60% - гиперэргической напряженности клеточного поствакцинального иммунитета.

Однако указанный известный способ имеет следующие недостатки:

- не является селективным именно в отношении коклюша;

- не принимает во внимание антропогенные характеристики среды обитания ребенка, что приводит к снижению точности.

Известен Способ определения выраженности клеточного иммунитета у мышей, иммунизированных коклюшной вакциной, путем культивирования взвеси исследуемых иммунокомпетентных клеток с антигеном, с последующим определением миграционной способности клеток (Авт. свид-во СССР №793566). Этот способ характеризуется теми же недостатками, что и вышеприведенные аналоги.

Технический результат, достигаемый предлагаемым способом, заключается в обеспечении диагностики нарушения поствакционального иммунитета к коклюшу у детей, подверженных воздействию химических токсикантов среды обитания, таких как хром и марганец.

Поставленный технический результат достигается предлагаемым способом диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных факторов, таких как хром и марганец, согласно которому при одновременном повышенном содержании в крови ребенка хрома более 0,004 мг/дм³ и марганца более 0,011 мг/дм³ и пониженным по сравнению с протективным уровнем количеством поствакцинальных антител класса IgG к возбудителю коклюша, диагностируют снижение поствакцинального иммунитета ребенка к коклюшу.

Для более полного понимания возможности достижения технического результата следует рассмотреть не только характеристики предлагаемого способа, но и этапы исследований.

Благодаря тому, что на территории проживания определяют перечень конкретных химических веществ-загрязнителей среды обитания, для которых иммунная система является мишенью, обеспечивается практически полный учет приоритетных химических факторов риска для формирования поствакцинального иммунитета к коклюшу ребенка, что позволяет учесть их негативное влияние и повысить достоверность определения. При этом из источника информации «Воздействие на организм человека опасных и вредных экологических факторов. Метрологические аспекты», (в 2-х томах) / Под ред. Исаева Л.К. - М. - 1997. - I том. - 509 с. известно, что, например, такие вещества, как хром и марганец, негативно влияют на иммунную систему человека.

Благодаря тому, что для установленных веществ-загрязнителей осуществляют оценку риска развития нарушений со стороны иммунной системы по критерию индекса опасности HI более 1,0 («Руководство по оценке риска для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду» Р 2.1.10.1920-04), обеспечивается определение селитебных территорий, на которых у детского населения развитие нарушений формирования поствакцинального иммунитета к коклюшу является наиболее вероятным.

Отбор вакцинированных детей, проживающих в указанных условиях, у которых отсутствуют заболевания иммунной системы, обусловлен тем, что важным фактором является выявление таких детей с низким поствакцинальным иммунитетом к коклюшу еще на ранней стадии без клинических проявлений, чтобы в дальнейшем была возможность провести профилактические мероприятия для этих детей с целью исключения их заболевания коклюшем.

Благодаря использованию в качестве исследуемого материала пробы венозной крови обеспечивается простота и надежность исследований, а также получение нужной информативности. Установление содержания химического контаминанта (вещества-загрязнителя) именно в крови обусловлено тем, что кровь является самой гомеостатичной средой (управляемость и регулируемость концентраций составляющих ее компонентов) и единственной, имеющей реферируемые константы в отношении техногенных химических веществ, в частности таких, как хром и марганец.

При дальнейшем отборе детей для проведения исследований использовали такой критерий, как: в пробе крови количество выбранных химических веществ - загрязнителей среды обитания превышало референтный (для металлов) или фоновый региональный уровень (для ароматических углеводородов) не менее чем на 20%. Это обусловлено тем, что согласно источнику информации («Биомаркеры эффекта при воздействии техногенных химических факторов окружающей и производственной среды в системе санитарно-гигиенического анализа» О.В. Долгих, М.А. Землянова. Гигиенические и медико-профилактические технологии управления рисками здоровью населения в промышленно развитых регионах. Мат. Научно-практ. Конф. С международным участием (Пермь, 6-8 октября 2010 г.) с.14-19), именно при таком превышении обеспечивается достоверное влияние химических токсикантов на основные показатели гомеостаза организма ребенка.

Использование для исследования метода иммуноферментного анализа (ИФА) со специфическими тест-системами, посредством которого определяют количество поствакцинальных антител класса иммуноглобулина G к возбудителю коклюша в сыворотке крови, обусловлено следующим. Основными преимуществами ИФА являются: высокая чувствительность и специфичность, возможность одновременного исследования большого количества проб с определением специфических антител различных классов, объективная оценка результатов с помощью спектрофотометра (автоматического ИФА-анализатора), простота постановки и возможность использования внутреннего контроля. В результате этого анализа выявляют лиц, у которых количество поствакцинальных антител к возбудителю коклюша ниже протективного уровня.

Благодаря тому, что при реализации предлагаемого способа устанавливают для этих лиц корреляционную связь снижения количества указанных антител от содержания в крови химических веществ-загрязнителей, таких как хром и марганец, обеспечивается доказательство влияния повышенного содержания этих конкретных химических токсикантов на формирование поствакцинального иммунитета к коклюшу.

А достоверное прогнозирование снижения поствакцинального иммунитета ребенка к коклюшу при реализации предлагаемого способа обеспечивается в том случае, если выявлены одновременно достоверные зависимости: повышенное содержание в крови ребенка хрома более 0,004 мг/дм³ и марганца более 0,011 мг/дм³ и пониженное количество поствакциональных антител класса IgG к возбудителю коклюша по сравнению с протективным уровнем. Числовые значения количества хрома и марганца были установлены экспериментальным путем (рис.1 и рис.2). На рис.1 показана связь снижения содержания поствакцинального IgG к возбудителю коклюша при увеличении в крови концентрации хрома. На рис.2 показана связь снижения содержания поствакцинального IgG к возбудителю коклюша при увеличении в крови концентрации марганца. И как неожиданно оказалось, они характеризуют максимально недействующую концентрацию этих веществ на организм ребенка. При этом указанную максимально недействующую концентрацию определяли согласно методике количественной оценки неканцерогенного риска факторов среды обитания (Шур П.З., Зубарев А.Ю., Шарифов А.Т. Методические подходы к разработке критериев для количественной оценки неканцерогенного риска факторов среды обитания по результатам эпидемиологических исследований // Сборник материалов Всероссийской конференции с международным участием, посвященная 140-летию образования первой гигиенической кафедры в России «Профилактическая медицины в России: истоки и современность». - Казань: ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет Росздрава». - 2009. - Т.2. - С.105-106). И эти данные о концентрации были подтверждены и нижеприведенными исследованиями, характеризующими пример реализации предлагаемого способа.

Предлагаемый способ реализуется следующим образом.

1. Выбирают территорию экологического риска, характеризующуюся наличием вредных химических факторов, обусловленных экологической средой обитания. На выбранной территории проживания детей группы наблюдения (крупный промышленный центр с многопрофильным производством) ежегодно в атмосферный воздух от стационарных источников поступает более 900 тонн загрязняющих веществ (в том числе соединения хрома, марганца, свинца, фенола и крезолов), среди которых вещества 1-3 классов опасности составляют более 77% (759,6 т/год). Натурные исследования атмосферного воздуха в зонах экспозиции позволили идентифицировать в отобранных пробах хром, свинец, марганец в концентрациях до 1,5 ПДК с.с. и o-крезолы, фенол - до 2,3-4,0 ПДК с.с. Все эти вещества в концентрациях выше 1 ПДК с.с. способны вызывать нарушения со стороны иммунной системы, см. «Руководство по оценке риска для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду». (Руководство Р 2.1.10.1920-04). - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 143 с.

Одновременно выбирали территорию экологического благополучия на территории проживания детей группы сравнения (поселок городского типа), качество атмосферного воздуха в котором соответствовало гигиеническим нормативам как по данным мониторинговых наблюдений, так и по результатам натурных исследований. Факторы антропогенного происхождения в концентрациях менее 1 ПДКс.с.

2. Далее проводили оценку риска развития у детского населения нарушений со стороны иммунной системы по критерию индекса опасности (Н1>1,0) (Оценка риска развития нарушений со стороны иммунной системы осуществляется по стандартизованной методике в соответствии с «Руководство по оценке риска для здоровья населения при воздействии химических веществ, загрязняющих окружающую среду». (Руководство Р 2.1.10.1920-04). - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 143 с.).

В ходе исследований, проведенных на указанной выбранной территории проживания детей группы наблюдения, установлен неприемлемый риск развития иммунных нарушений (Н1>1,0) при ингаляционном поступлении следующих установленных соединений (хром, свинец, марганец, o-крезолы, фенол). Результаты эпидемиологических исследований выявили причинно-следственную связь между изучаемыми химическими факторами риска и возникновением иммунных нарушений (ОШ - отношение шансов = 2,56; ДИ - доверительный интервал = 1,05-6,26). Поэтому все установленные вещества принимаются во внимание при установлении нарушения поствакцинального иммунитета к коклюшу.

Оценка риска развития иммунных нарушений, связанных с неблагоприятным воздействием химических факторов среды обитания, выполненная на территории проживания детей группы сравнения, показала отсутствие риска (HI<1,0).

3. Проводят отбор детей, проживающих на указанной территории. В исследование были включены 276 детей (219 - группа наблюдения, 57 - группа сравнения) в возрасте 4-6 лет, у которых, в соответствии с «Национальным календарем прививок», была выполнена плановая вакцинация вакциной АКДС (базовая вакцинация в возрасте 3; 4,5 и 6 месяцев жизни и первая ревакцинация в 18 месяцев) и не имевших поствакцинальных реакций. Из исследования исключены дети с патологией, сопровождающейся развитием иммунных нарушений.

4. Далее у указанных детей были взяты пробы крови, в которых устанавливали количество выбранных вредных химических веществ среды обитания (хром, свинец, марганец, o-крезолы, фенол). Химико-аналитические исследования содержания металлов (марганец, свинец, хром) в биосубстратах (кровь) проводится методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии на спектрофотометре PERKIN-ELMER-3110 (США) (регистрационный номер в Государственном реестре №14427-95) с атомизацией в пламени и масс-спектрометре с индуктивно-связанной плазмой ICP-MS фирмы Agilent 7500 cx (США) (регистрационный номер в Государственном реестре №24863-08). Исследование содержания фенола и o-крезола в биосубстратах (кровь) проводится методом капиллярной газовой хроматографии и парафазного анализа в соответствии с методическими указаниями (МУК 4.1.763-4.1.779-99; МУК 4.1.2102-4.1.2116-06). Все исследования выполняются с использованием газового хроматографа (модели 6890, 6890N, 6850, 7890А, Рег. №15118-07, страна производитель США), аппаратно-программного комплекса «Хроматэк-Кристалл-5000» (№ ФСР 2009/04091, ТУ 9443-004-12908609-99). Данные, полученные в ходе испытаний, приведены в табл.1.

Таблица 1
Содержание химических веществ антропогенного происхождения в крови детей исследуемых групп, мг/дм³
Вещество	Группа наблюдения	Группа сравнения	Референтный (р) / фоновый (ф) уровень [Тиц, 2003]	Р
Марганец	0,021±0,003	0,013±0,0024	1,09·10^-2-6,0·10^-4 (р)	0,0001
Свинец	0,131±0,013	0,109±0,009	0,1 (р)	0,006
Хром	0,0191±0,0035	0,0107±0,0020	0,007-0,028 (р)	0,03
Фенол	0,0494±0,0071	0,0087±0,0004	0,01±0,005 (ф)	0,0001
O-крезол	0,0143±0,0046	0,0033±0,0012	0 (ф)	0,0001
р - достоверность различий группы наблюдения и группы сравнения

Статистическая обработка материала проводится с использованием пакета прикладных программ «Microsoft Office Excel 2010» и Statistica 6.0. При оценке содержания в крови химических веществ и соединений рассчитываются средние величины и ошибки средних. Статистическую достоверность различий оценивают по непарному t-критерию Стьюдента. Для отклонения нулевой гипотезы (отсутствие различий) принимают уровни статистической значимости р<0,05.

Результаты исследования крови (табл.1) детей группы наблюдения показали, что содержание марганца (0,021±0,003 мг/дм³), свинца (0,131±0,013 мг/дм³), хрома (0,0191±0,0035 мг/дм³), фенола (0,0494±0,0071 мг/дм³) и o-крезола (0,0143±0,0046 мг/дм³) достоверно (р=0,01-0,0001) в 1,4-4 раз превышало референтные/фоновые уровни. Кроме того, содержание данных химических веществ было в 1,2-4,9 раза выше аналогичных показателей детей группы сравнения (марганец - 0,013±0,0024 мг/дм³, свинец - 0,109±0,009 мг/дм³, хром - 0,0107+0,0020 мг/дм³, фенол - 0,0087±0,0004 мг/дм³, o-крезол - 0,0033±0,0012 мг/дм³; р=0,03-0,0001).

5. Для дальнейшего исследования из числа детей в группе наблюдения были выбраны дети, у которых количество вредных веществ превышало референтный (по металлам), фоновый (по органическим соединениям) уровень не менее чем на 20%. Такой подход обусловлен установленным порогом развития нарушений реакций поддержания гомеостаза у детей при повышении концентрации химических веществ техногенного происхождения в крови относительно референтных/фоновых («Биомаркеры эффекта при воздействии техногенных химических факторов окружающей и производственной среды в системе санитарно-гигиенического анализа» О.В. Долгих, М.А. Землянова. Гигиенические и медико-профилактические технологии управления рисками здоровью населения в промышленно развитых регионах. Мат. Научно-практ. Конф. С международным участием (Пермь, 6-8 октября 2010 г.) с.14-19).

6. Далее в сыворотке крови выбранных лиц определяют количество поствакцинальных антител класса IgG к возбудителю коклюша. Для этого использовали метод иммуноферментного анализа на полуавтоматическом иммуноанализаторе «ELx808» с использованием тест-системы «RIDASCREEN Bordetella IgG ELISA», предназначенной для количественного in vitro определения антител класса IgG к коклюшному анатоксину (Bordetella Toxoid) в сыворотке крови.

Оценка состояния поствакцинального иммунитета к коклюшу проведена через три, четыре и пять лет после первой ревакцинации АКДС на основании исследования содержания циркулирующих специфических поствакцинальных антител. Данные, полученные в ходе испытаний, приведены в табл.2.

Анализ среднегрупповых показателей содержания поствакцинальных антител к коклюшу показал, что их уровень в обеих исследуемых группах в анализируемые сроки после первой ревакцинации/вакцинации соответствует протективному. В группе наблюдения уровень поствакцинальных антител к возбудителю коклюша составлял: min - 19,13 Ед/мл (протективный уровень - 14,0-18,0 Ед/мл, р=0,02), max - 39,19 Ед/мл (р<0,001). В тоже время у детей группы наблюдения через 4 года после первой ревакцинации АКДС уровень антител к возбудителю коклюша (30,07±7,69 Ед/мл) в 1,4 раза ниже показателей группы сравнения (43,31±2,0 Ед/мл р=0,001).

Для углубленной оценки иммунологической эффективности вакцины АКДС в изучаемых группах была проанализирована частота нарушений формирования поствакцинального иммунитета к коклюшу (табл.3).

Результаты исследования, приведенные в табл.3, показали, что у 50-67% детей группы наблюдения и 21-46% детей группы сравнения содержание поствакцинальных антител не обеспечивало протективного уровня иммунитета к коклюшу, при этом частота случаев формирования у привитых детей группы наблюдения низких титров поствакцинальных антител была в 1,8-2,0 раза выше группы сравнения (р=0,03-0,0001).

Содержание поствакцинальных противококлюшных антител на протективном уровне и выше в группе наблюдения имели только 46-50% детей, в то время как в группе сравнения таких детей было в 1,5-1,6 раза больше (70-78%, р=0,003-0,0001). В целом, в группе наблюдения количество детей с уровнем противококлюшных антител ниже протективного в 1,5-2,4 раза (р=0,03-0,0001) превышало показатель группы сравнения (табл.3).

7. Выделяют лиц, у которых количество поствакцинальных антител класса IgG к возбудителю коклюша ниже протективного уровня, и устанавливают для этих лиц корреляционную связь снижения количества указанных антител от содержания в крови выбранных химических веществ - загрязнителей среды обитания. Статистическая обработка материала проводится с использованием пакета прикладных программ «Microsoft Office Excel 2010» и Statistica 6.0. При оценке содержания в крови химических веществ и соединений рассчитываются средние величины и ошибки средних. Статистическую достоверность различий оценивают по непарному t-критерию Стьюдента. Для отклонения нулевой гипотезы (отсутствие различий) принимают уровни статистической значимости р<0,05. Математическое моделирование включает анализ отношения шансов изменения показателей поствакцинального иммунитета при возрастании концентрации химических веществ в биологических средах.

8. Далее устанавливают причинно-следственную связь снижения количества антител класса IgG к возбудителю коклюша от содержания в крови выбранных химических веществ - загрязнителей среды обитания. Анализ показателя отношения шансов изменения уровня поствакцинального специфического иммунитета при различном уровне токсикантной нагрузки позволил установить достоверную связь: повышенное содержание в крови ребенка хрома более 0,004 мг/дм³ и марганца более 0,011 мг/дм³ и пониженное количество поствакциональных антител класса IgG к возбудителю коклюша. Результаты приведены на рис.1 и рис.2. С другими химическими токсикантами (свинец, o-крезол, фенол) причинно-следственная связь снижения количества антител класса IgG к возбудителю коклюша не выявлена.

Данные, приведенные на рис.1 и рис.2, доказывают установление причинно-следственной связи нарушения поствакцинального иммунитета к коклюшу от влияния таких токсикантов антропогенного происхождения, как хром и марганец, при указанном их количественном содержании (достоверно значимое снижение содержания JgG к возбудителю коклюша при увеличении в крови концентрации хрома (недействующий уровень - 0,004 мг/дм³; R²=0,76; р≤0,0001) (рис.1) и марганца (недействующий уровень - 0,011 мг/дм³; R²=0,80; p≤0,0001) (рис.2). Из всего спектра установленных вредных веществ-загрязнителей в крови ребенка, поступивших из среды обитания, именно эти два вещества оказывают влияние на снижение поствакцинального иммунитета к коклюшу.

Для доказательства того, что у детей из группы наблюдения, по сравнению с детьми из группы сравнения, снижен поствакцинальный иммунитет, было проведено изучение показателей системного иммунитета. При этом было установлено, что у детей, проживающих в условиях антропогенного загрязнения среды обитания, достоверно более низкое, относительно группы сравнения, абсолютное содержание лимфоцитов СД19+ и CD16+56+ (р=0,01-0,001) и сывороточного иммуноглобулина А (р=0,02) (табл.4). Данные, приведенные в табл.4, показывают, что у детей группы наблюдения по сравнению с детьми группы сравнения достоверно на 30% ниже содержание антителопродуцирующих клеток (СД19+) (р≤0,01), в 1,8 раза выше содержание клеток-киллеров (CD16+56+) (р≤0,001) и более чем на 10% ниже уровень иммуноглобулина А (р≤0,02). Эти показатели как раз и характеризуют снижение о поствакцинального иммунитета.

Предлагаемый способ позволяет оценить влияние неблагоприятных химических факторов антропогенного происхождения на адекватность поствакцинального иммунитета к коклюшу, с целью выявления контингента детей, в отношении которых необходимо осуществление дополнительных мероприятий, направленных на повышение эффективности вакцинопрофилактики. При этом рекомендуется диспансерное наблюдение таких детей у аллерголога-иммунолога с проведением специализированных программ, например, контроль уровня поствакцинального иммунитета - 2 раза в год, иммунограмма - 2 раза в год, разработка индивидуальных программ вакцинопрофилактики.

Таблица 4
Показатели системного иммунитета у детей, проживающих в различных условиях антропогенного загрязнения среды обитания (%)
Показатель	Физиологический уровень	Группа наблюдения	Группа сравнения	р
Процент фагоцитоза (%)	35-60	56,0±2,5	56,5±4,5	0,92
Фагоцитарное число (у.е.)	0,8-1,2	1,05±0,08	1,0±0,09	0,40
Фагоцитарный индекс (у.е.)	1,5-2,0	1,85±0,08	1,70±0,12	0,06
Абсолютный фагоцитоз (109/дм3)	0,964-2,988	2,541±0,247	2,170±0,323	0,07
CD3+-лимфоциты отн. (%)	55-84	67,5±2,0	66,5±6,5	0,89
CD3+-лимфоциты абс. (109/дм3)	0,690-2,540	2,037±0,213	2,160±0,276	0,48
CD3+CD4+-лимфоциты отн. (%)	31-60	34,5±2,5	38,0±4,0	0,64
CD3+CD4+-лимфоциты абс. (109/дм3)	0,410-1,590	1,047±0,132	1,233±0,166	0,08
CD3+CD8+-лимфоциты отн. (%)	13-41	25,5±2,0	23,0±3,0	0,71
CD3+CD8+-лимфоциты абс. (109/дм3)	0,190-1,140	0,773±0,089	0,757±0,112	0,82
CD9+-лимфоциты отн. (%)	6-25	13,5±1,5	17,0±2,5	0,52
CD9+-лимфоциты абс. (109/дм³)	0,090-0,660	0,417±0,065	0,545±0,079	0,01
CD16+56+-лимфоциты отн. (%)	5-27	15,5±2,5	8,0±1,5	0,16
CD16+56+-лимфоциты абс.(109/дм3)	0,090-0,590	0,463±0,084	0,253±0,05	0,001
CD3+CD25+-лимфоциты отн. (%)	5,5	4,5±0,5	4,5±0,5	1,0
CD3+CD25+-лимфоциты абс. (109/дм³)	0,155	0,136±0,023	0,154±0,021	0,26
IgA (г/дм³)	2,0-2,8	1,14±0,07	1,29±0,11	0,02
IgM (г/дм³)	1,0-1,6	1,09±0,04	1,17±0,09	0,1
IgG (г/дм³)	12,0-16,0	10,01±0,33	10,25±0,73	0,35
р - достоверность различий показателей системного иммунитета у детей группы наблюдения и группы сравнения

Способ диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов, таких как хром и марганец, характеризующийся тем, что при одновременном повышенном содержании в крови ребенка хрома более 0,004 мг/дм³ и марганца более 0,011 мг/дм³ и пониженным по сравнению с протективным уровнем количеством поствакцинальных антител класса IgG к возбудителю коклюша, диагностируют снижение поствакцинального иммунитета ребенка к коклюшу.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа оценки того, имеет ли беременная женщина повышенный риск развития преэклампсии, заключающегося в том, что с использованием моноклонального антитела, обладающего реактивностью в отношении Н2-релаксина, измеряют концентрацию Н2-релаксина в биологическом образце, полученном из организма беременной женщины до проявления симптома преэклампсии, где моноклональное антитело получено с помощью гибридомы, депонированной в Американской коллекции типовых культур под регистрационным номером РТА-8423; и определяют, что беременная женщина имеет повышенный риск развития преэклампсии, если концентрация Н2-релаксина меньше предельного значения нижнего квартиля концентрации, характерной для беременной женщины; способа оценки того, имеет ли беременная женщина преэклампсию; способа ослабления преэклампсии.

Способ прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гтперплазии // 2538642

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гиперплазии.

Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения // 2538632

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исходов мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Способ включает проведение исследования активности 26S протеасом и содержания NF-кВ р65 и р50 в опухолевой ткани.

Электрохимический способ иммуноанализа для определения микроорганизмов // 2538153

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к определению содержания микроорганизмов в различных объектах и средах. Способ предусматривает конъюгацию бактерий с электрохимической меткой, в качестве которой используют Fe0, MgFe2O4 или Fe3O4, осуществляемую в водной среде при заданных параметрах.

Способ получения биотинилированного производного окисленного декстрана // 2537246

Изобретение относится к медицине, экспериментальной и клинической фармакологии. Суть способа: окисленный декстран растворяют в трис-ацетатном буферном растворе с рН 5,0-5,5, добавляют к полученному раствору гидразид биотина в соотношении к окисленному декстрану, равном 1:(20-25), после чего полученный раствор нагревают до 80-90°С и выдерживают в течение 30-60 минут.

Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности // 2537241

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки).

Способ оценки ингибирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность карбоангидразы в эритроцитах периферической крови беременных // 2537180

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гемической гипоксии у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции.

Способ оценки нарушения микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации, при обострении цитомегаловирусной инфекции // 2537119

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки устойчивости мембран эритроцитов периферической крови у беременных с цитомегаловирусной инфекцией на третьем триместре гестации.

Способ оценки местного гуморального противохолерного иммунитета in vitro на модели экспериментальных животных // 2536707

Изобретение относится к медицине, в частности к вопросу изучения антиадгезивной активности противохолерных иммуноглобулинов и усиления ее для совершенствования специфической профилактики холеры.

Способ диагностики аллергических реакций // 2536291

Группа изобретений относится к способу обнаружения множественных цитокинов из отдельно взятых клеток и предназначено для создания набора иммунологических характеристик заболеваний.

Гуманизированное антитело // 2538709

Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использована для лечения глазной болезни, ассоциированной со связанными с амилоидом-бета патологическими аномалиями/изменениями в тканях зрительной системы. Для этого пациенту вводят фармацевтическую композицию, которая содержит терапевтически эффективное количество гуманизированного антитела или его антигенсвязывающий фрагмент, где гуманизированное антитело или его фрагмент способно(ен) связывать амилоид-бета. Также предложено предупреждение, лечение или облегчение симптомов глазной болезни, снижение загрузки бляшками ганглиозных клеток сетчатки, диагностика глазной болезни и диагностика предрасположенности к глазной болезни, прогнозирование чувствительности пациентов, которых лечат фармацевтической композицией для лечения глазной болезни. Группа изобретений обеспечивает эффективное лечение указанной глазной патологии за счет применения композиции, содержащей высокоспецифичные антитела, которые специфически распознают и связываются со специфическими эпитопами различных β-амилоидных белков. 6 н. и 14 з.п. ф-лы, 18 ил., 9 табл., 18 пр.

Способ диагностики нарушений клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида // 2539391

Изобретение относится к области медицины и иммунологии, и направлено на выявление неблагоприятного воздействия формальдегида на организм человека, а именно на клеточный иммунитет. Сущность способа: производят отбор пробы венозной крови у работников, устанавливают в ней концентрацию формальдегида, определяют количество лимфоцитов - основных параметров T-клеточного иммунитета, затем устанавливают критериальный показатель, по которому судят о нарушении клеточного иммунитета. В качестве основных параметров T-клеточного иммунитета определяют в процентах число активированных T-лимфоцитов CD3+CD95+ и также определяют в процентах число T-регуляторных лимфоцитов CD4+CD25+CD127-, а в качестве критериального показателя используют интегральный показатель, равный отношению установленного процента числа CD3+CD95+ - лимфоцитов к проценту числа CD4+CD25+CD127- - лимфоцитов. При значении этого интегрального показателя, равного и более 40, диагностируют нарушение клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида. Использование изобретения обеспечивает повышение информативности оценки влияния ксенобиотика - формальдегида, на нарушение клеточного иммунитета организма работников химических производств. 2 табл., 2 пр.

Способ определения биологической активности эмбрионированных яиц trichuris // 2540145

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного. Представленное изобретение может быть использовано при получении безопасных фармацевтических продуктов, терапевтически эффективных при применении у человека. 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 6 пр.

Патрон для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости и содержащая его система // 2540424

Группа изобретений относится к области лабораторной диагностики. Устройство для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости содержит матрицу адресуемых блоков анализа для проведения химической реакции, которая дает различимый сигнал, несущий информацию о наличии или отсутствии аналита; матрицу адресуемых блоков реагентов, в которой обращаются к индивидуальному адресуемому блоку реагента, соответствующему индивидуальному адресуемому блоку анализа, и в которой индивидуальный блок реагента выполнен с возможностью калибровки по опорному сигналу соответствующего индивидуального блока анализа до сборки матриц на устройстве, причем индивидуальный блок анализа содержит наконечник для количественного анализа, имеющий внутреннюю поверхность, содержащую реагенты, фиксированные на поверхности, для обнаружения аналита. Группа изобретений относится также к варианту указанного устройства, дополнительно содержащему блок отбора пробы, а также к системам, содержащим указанные устройства, способам анализа с использованием указанных устройств, способу сборки указанного устройства и способу отбора плазмы из пробы крови в указанных системах. Группа изобретений обеспечивает повышение гибкости и надежности системы, а также предотвращает перекрестное загрязнение блоков устройства. 10 н. и 55 з.п. ф-лы, 21 ил., 3 табл., 7 пр.

Способ иммунологического прогнозирования осложнений q-инфаркта миокарда // 2540492

Изобретение относится к области медицины, а именно кардиологии, и может быть использовано для раннего иммунологического прогнозирования возникновения нарушений ритма в остром периоде Q-инфаркта миокарда. Для этого на 1-е сутки Q-инфаркта миокарда определяют содержание IgM и IgG к к вирусу простого герпеса (ВПГ1+2), α-интерферона и α-интерфероновых антител в сыворотке крови. При низких титрах диагностически значимого результата специфических иммуноглобулинов класса М к ВПГ1+2, превышающих диагностически значимый результат в 0,12-0,20 раза, и класса G к ВПГ1+2 - в 0,73-2,09 раза, превышении концентрации α-интерферона от 1,50 до 9,33 пг/мл и α-интерфероновых антител от 11,01 до 12,02 нг/мл прогнозируют благоприятное клиническое течение Q-инфаркта миокарда, не осложненное аритмиями сердца. При значениях специфических иммуноглобулинов к ВПГ1+2, превышающих диагностически значимый результат для класса М - в 0,86-1,75 раз, класса G в 2,71-2,96 раза, низкого уровня α-интерферона от 0,072 до 0,084 пг/мл и низкой концентрации α-интерфероновых антител от 0,025 до 0,031 нг/мл прогнозируют клиническое течение Q-инфаркта миокарда с развитием аритмий сердца. Использование данного способа позволяет прогнозировать осложнения Q-инфаркта миокарда с первых суток с ранним определением реактивации вирусной инфекции, что позволяет провести своевременную противовирусную терапию, улучшая результаты клинического течения и исхода заболевания. 5 пр., 1 табл.

Способ прогнозирования риска развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных // 2540504

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных. В сыворотке крови больного определяют одновременно содержание трансформирующего фактора роста β1 (TGF β1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). При выявлении уровня TGF β1 менее 10000 пкг/мл и VEGF больше 500 пг/мл прогнозируют риск развития отслойки сетчатки. Способ является простым в исполнении и обеспечивает возможность выбора адекватной лечебной тактики. 1 ил., 5 пр.

Способ прогнозирования детского церебрального паралича у детей 1-го года жизни // 2540514

Изобретение относится к области медицины, педиатрии, детской неврологии и может быть использовано для прогнозирования детского церебрального паралича у детей 1-го года жизни. Сущность способа: в сыворотке крови новорожденных и детей первых 3 месяцев жизни определяют тип иммунного ответа по уровню иммуноцитокинов, исследуемых методом твердофазного иммуноферментного анализа: при уровне ИЛ-2 195,2 пг/мл и выше, ФНО-α 164,8 пг/мл и выше, ИНФ-γ 91,2 пг/мл и выше определяют поляризацию иммунного ответа по Th1-типу; при уровне ИЛ-4 78,4 пг/мл и выше и ИЛ-6 192,4 пг/мл и выше определяют поляризацию иммунного ответа по Th2-типу. Если поляризация иммунного ответа развивается по Th-1 типу иммунного ответа, то прогнозируют развитие детского церебрального паралича к 1-му году жизни ребенка, а если поляризация иммунного ответа развивается по Th-2 типу иммунного ответа, то развитие детского церебрального паралича не происходит. Изобретение обеспечивает возможность формирования групп риска по развитию тяжелых инвалидизирующих расстройств ЦНС, вплоть до формирования различных форм ДЦП у детей на 1-м году жизни. Способ обладает высокой точностью и объективностью. 1 табл., 2 пр.

Способ получения антигенного эритроцитарного диагностикума для обнаружения антител к антигенам возбудителей сапа и мелиоидоза // 2540902

Изобретение относится к способу получения антигенного эритроцитарного диагностикума для обнаружения антител к антигенам возбудителей сапа и мелиоидоза. Указанный способ включает стерилизацию культуры авирулентного штамма Burkholderia pseudomallei 107, суспендирование высушенной бактериальной массы в 0,15 М растворе NaCl, обработку полученной суспензии ультразвуком, центрифугирование взвеси разрушенных клеток с последующим отделением супернатанта и высаливание из него гликопротеиновой фракции, на основе которой получают диагностикум. Изобретение позволяет определять в реакции непрямой гемагглютинации специфические антитела в ранние сроки как сапной, так и мелиоидозной инфекций. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Способ диагностики анемического синдрома у детей // 2540908

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики анемического синдрома в детском возрасте. Сущность способа: на гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) и средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (МСНС), а в сыворотке крови определяют гепцидин, ИЛ-6, ферритин и трансферрин. Сравнивают полученные показатели с референсными интервалами и при значениях: гемоглобин ≤114 г/л, МСНС ≤302 г/л, ферритин ≥45 нг/мл; трансферрин ≤250 мг/дл; ИЛ-6≥11 пг/мл; гепцидин ≥120 нг/мл делают вывод об анемическом синдроме, развившемся на фоне воспалительных изменений в организме при остром или хроническом заболевании. Применение изобретения обеспечивает возможность адекватной оценки воспалительного ответа организма при хронических и острых воспалительных заболеваниях. 3 пр.

Способ оценки угрозы гибели эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на ранних этапах гестации, приводящей к снижению содержания кортизола в периферической крови // 2541176

Изобретение относится к области медицины, а именно к проблеме создания новых способов диагностики угрозы гибели эмбриона при цитомегаловирусной инфекции. Выполняют измерение у беременной в момент обострения заболевания в периферической крови титра антител IgG к цитомегаловирусу и уровня кортизола. Сущность способа: в периферической крови беременных на момент обострения цитомегаловирусной инфекции определяют титр антител IgG к цитомегаловирусу и уровень кортизола. При титре IgG 1:1600 к цитомегаловирусу и уровне кортизола 563,0±19,2 нмоль/л при исходном 1399,4±25,5 нмоль/л определяют наличие угрозы самопроизвольного выкидыша или замершей беременности. Применение изобретения обеспечивает определение угрозы гибели эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на ранних этапах гестации в зависимости от содержания кортизола в периферической крови.