Лиганды рецепторов эстрогенов и способы их применения

Авторы патента:

ДАЛТОН Джеймс Т. (US)

СТЕЙНЕР Митчелл С. (US)

A61P17/06 - противопсориатические средства

A61K31/336 - содержащие трехчленные кольца, например оксиран, фумагиллин

Владельцы патента RU 2543339:

ДжиТиЭкс, ИНК. (US)

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения распространенного рака предстательной железы у субъекта мужского пола. Для этого вводят терапевтически эффективное количество соединения формулы IV или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации:

Способ обеспечивает эффективное лечение, подавление, снижение частоты возникновения, ослабление тяжести или ингибирование распространенного рака предстательной железы, а также паллиативное лечение распространенного рака предстательной железы. 1 н. и 11 з.п. ф-лы, 21 табл., 20 пр., 23 ил.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способам уменьшения уровней тестостерона путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) или независимо от уровней LH у субъекта мужского пола и к способам лечения, подавления, снижения частоты возникновения, ослабления тяжести или ингибирования распространенного рака предстательной железы и паллиативного лечения распространенного рака предстательной железы.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Эстрогены относятся к группе эндогенных и синтетических гормонов, которые важны и используются для поддержания тканей и костей. Эстрогены являются эндокринными регуляторами клеточных процессов, вовлеченных в развитие и поддержание репродуктивной системы. Общепризнана роль эстрогенов в репродуктивной биологии, предупреждении постменопаузальных приливов и предупреждении постменопаузального остеопороза. Важнейшим эндогенным человеческим эстрогеном является эстрадиол, и он обнаружен как у женщин, так и у мужчин.

В проявлении биологических действий эстрогенов и антиэстрогенов участвуют два различных подтипа внутриклеточных рецепторов, рецептор эстрогена альфа (ERα) и рецептор эстрогена бета (ERβ). Обычно эндогенные эстрогены представляют собой сильнодействующие активаторы обоих рецепторных подтипов. Например, эстрадиол действует в качестве агониста ERα во многих тканях, включая ткани молочной железы, костной, сердечно-сосудистой и центральной нервной систем. Обычно селективные модуляторы рецепторов эстрогенов (SERM) в разных тканях действуют по-разному. Например, SERM может быть антагонистом ERα в молочной железе, но может быть частичным агонистом ERα в матке, костной и сердечнососудистой системах. Соответственно, соединения, которые действуют в качестве лигандов рецепторов эстрогенов, полезны в лечении ряда состояний и расстройств.

Рак предстательной железы является одним из наиболее часто диагностируемых типов некожного рака у мужчин в США и второй наиболее общей причиной смерти от рака, и в этом году ожидается более 180000 новых случаев и почти 29000 смертельных исходов. Пациентов с диагнозом распространенный рак предстательной железы подвергают антиандрогенной терапии (ADT), обычно либо посредством агонистов рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона (LHRH), либо посредством билатеральной орхиэктомии. В результате антиандрогенной терапии уменьшается не только уровень тестостерона, но также понижаются уровни эстрогена, поскольку эстроген получается в результате ароматизации тестостерона, уровни которого истощаются в результате ADT. Дефицит эстрогенов, индуцированный антиандрогенной терапией, вызывает значительные побочные эффекты, которые включают приливы, гинекомастию и масталгию, потерю костной массы, ухудшение качества и прочности костей, остеопороз и опасные для жизни переломы, неблагоприятные изменения липидов и более частые случаи сердечнососудистого заболевания и инфаркта миокарда, депрессии и других изменений настроения. Считается, что многие побочные эффекты ADT, обусловленные дефицитом эстрогенов, опосредуются ERα.

Лейпролид ацетат (Lupron®) представляет собой синтетический нонапептидный аналог природного гонадотропин-рилизинг гормона (GnRH или LH-RH). Лейпролид ацетат является суперагонистом LH-RH, который в конечном счете подавляет секрецию LH, происходящую в гипофизе. Лейпролид ацетат действует в качестве сильнодействующего ингибитора секреции гонадотропина, вызывая подавление овариального и тестикулярного стероидогенеза. Введение лейпролида ацетата людям сначала вызывает повышение уровней лютеинизирующего гормона (LH) и фолликулостимулирующего гормона (FSH) в кровотоке, приводящее к временному повышению уровней гонадных стероидов (тестостерона и дигидротестостерона у мужчин и эстрона и эстрадиола у женщин в предменопаузальный период). Однако продолжительное введение лейпролида ацетата приводит к уменьшению уровней LH и FSH. У мужчин содержание тестостерона уменьшается до уровней, соответствующих медицинской кастрации (ниже 50 нг/дл). У женщин в предменопаузальный период содержание эстрогенов уменьшается до постменопаузальных уровней. Тестостерон представляет собой известный стимул для злокачественных клеток предстательной железы. Таким образом, подавление секреции тестостерона или ингибирование действий тестостерона является необходимым компонентом терапии рака предстательной железы. Лейпролид ацетат при лечении рака предстательной железы можно использовать для подавления LH, что выражается в уменьшении и снижении уровней тестостерона в сыворотке крови до уровней, соответствующих медицинской кастрации.

Перед тем, как ввести агонисты LHRH, достигали уровней тестостерона, соответствующих медицинской кастрации, повышая эстрогенную активность в гипофизе посредством эстрогенов, преимущественно диэтилстильбэстрола (DES). В равной степени DES был эффективен в качестве агониста LHRH при подавлении тестостерона до уровней, соответствующих медицинской кастрации. У пациентов, подвергнутых лечению с использованием DES, не было приливов или потери костной массы, но наблюдалась гинекомастия в большей степени, чем при проведении ADT с использованием агонистов LHRH. К сожалению, применение высокоэффективных чистых эстрогенов, подобных DES и эстрадиолу, очень часто ассоциировано с высоким риском серьезных сердечно-сосудистых и тромбоэмболических осложнений, которые ограничивают их клиническое применение.

Соединения по данному изобретению уменьшают уровни тестостерона до уровней, соответствующих медицинской кастрации, что может быть полезно для лечения рака предстательной железы, в то же время предупреждая повышенный риск тромботических событий и не вызывая потери костной массы, приливов и/или гинекомастии.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII, которое изложено в данном описании ниже, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке крови происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII , которое изложено в данном описании ниже, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII , которое изложено в данном описании ниже, где указанное введение указанных соединений формулы I-XII предупреждает возникновение или приводит к лечению побочных эффектов, связанных с проведением антиандрогенной терапии (ADT), при этом указанный субъект имеет рак предстательной железы.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ антиандрогенной терапии для субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII, которое изложено в данном описании ниже. В другом воплощении указанный субъект имеет рак предстательной железы.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ лечения, подавления, снижения частоты возникновения, ослабления тяжести или ингибирования распространенного рака предстательной железы, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII, которое изложено в данном описании ниже.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ паллиативного лечения распространенного рака предстательной железы, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I-XII, которое изложено в данном описании ниже.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Признаваемый изобретением объект указан особо и заявлен отчетливо в заключительной части данного описания. Тем не менее, данное изобретение, как в отношении организации, так и способа действия, вместе с его задачами, признаками и преимуществами лучше всего может быть понято со ссылкой на следующее далее подробное описание при его рассмотрении вместе с прилагаемыми графическими материалами, в которых:

на Фиг.1 представлены уровни тестостерона (непрерывная линия) и андрогенов в целом (пунктирная линия) в сыворотке крови у интактных самцов макак после ежесуточного перорального (п/о) введения Соединения IV в дозе 30 мг/кг (первая доза в 0-е сутки) (см. Пример 8);

на Фиг.2 представлены уровни тестостерона у интактных крыс, обработанных Соединением IV (0,3; 1; 10; 30 мг/кг). ^Iозначает Р<0,05 в сравнении с интактными контролями, обработанными разбавителем. Величины BLOQ (ниже предела количественного определения) представлены графически с пределом количественного определения 0,08 нг/мл (см. Пример 9);

на Фиг.3 представлено ингибирующее влияние Соединения IV на активность фермента 17β-HSD5 (см. Пример 12);

на Фиг.4 представлена агрегация человеческих тромбоцитов in vitro в присутствии DES, 17β-эстрадиола (Е2) и Соединения IV. Обогащенную тромбоцитами плазму (PRP) инкубировали вместе с разбавителем, Е2, DES или Соединением IV в течение 30 секунд, после чего индуцировали агрегацию, используя 0,3 единицы тромбина. Мониторинг агрегации проводили в течение 5 минут и выражали в процентном отношении к контролю - разбавителю (см. Пример 13);

Фиг.5. Типичная схема синтеза для получения Соединений II-XII (см. Пример 1);

Фиг.6. Схема синтеза для получения Соединения IV (см. Пример 2);

Фиг.7. Схема синтеза для получения Соединения VI (см. Пример 3);

Фиг.8. Схема синтеза для получения Соединений IX и Х (см. Пример 5);

на Фиг.9 представлены уровни тестостерона у интактных крыс, обработанных Соединением IV в дозировках 3 мг/кг, 10 мг/кг и 300 мг/кг, через 24 ч, 72 ч и 168 ч (см. Пример 9);

на Фиг.10 представлены уровни LH (Фиг.10А), уровни FSH (Фиг.10 В), уровни тестостерона (Фиг.10С), уровни массы предстательной железы (Фиг.10D), уровни массы семенных пузырьков (Фиг.10Е) и массы леватора (Фиг.10F) у интактных и орхиэктомированных (ORX) крыс, обработанных Соединением IV в дозировках 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг и 30 мг/кг. ^Iозначает Р<0,05 в сравнении с интактными контролями, обработанными разбавителем. ^Oозначает Р<0,05 в сравнении с ORX-контролями, обработанными разбавителем. Величины BLOQ представлены графически с пределом количественного определения 0,08 нг/мл (см. Пример 9);

на Фиг.11 представлен размер предстательной железы у интактных и подвергнутых ORX крыс после введения Соединения IV (Фиг.11А) и DES (Фиг.11В) в различных дозировках (см. Пример 15);

на Фиг.12 представлены различия между DES и Соединением IV; DES дает перекрестную реакцию с глюкокортикоидным рецептором (GR), тогда как Соединение IV нет (Фиг.12А); DES дает перекрестную реакцию с андрогенным рецептором (AR). Он слабо стимулирует и слабо ингибирует действие AR (т.е. является частичным агонистом/антагонистом), тогда как Соединение IV нет (Фиг.12В); DES устраняет трансактивацию рецепторов, родственных рецептору эстрогена, (ERR), тогда как Соединение IV нет (Фиг.12С) (см. Пример 15);

на Фиг.13 представлено влияние Соединения IV в дозировках 5 мг/кг, 10 мг/кг, 15 мг/кг и 30 мг/кг на ослабление приливов в модели отмены морфина. N=7 животных на одну группу. 17β-E2 использовали в дозе 5 мг/кг в 100%-ом DMSO (диметилсульфоксиде) (см. Пример 14);

на Фиг.14 представлено дозозависимое уменьшение массы тела (кг) макак (~20% при дозе 100 мг/кг) после введения Соединения IV в течение 91 суток. Не наблюдали никаких признаков гинекомастии или гиперэстрогении (см. Пример 16);

на Фиг.15 представлено дозозависимое уменьшение уровня тестостерона в сыворотке крови (нг/мл) у макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV в сравнении с положительным контролем (агонистом LHRH). Пунктирная линия указывает на уровень тестостерона у химически кастрированных пациентов, а жирная пунктирная линия указывает на уровень тестостерона у хирургически кастрированных макак (см. Пример 16);

на Фиг.16 представлена зависимость уровня антигена предстательной железы (PSA) (нг/мл) от дозы у макак после введения Соединения IV в исходный момент и на 28-е сутки. Обработка Соединением IV значительно уменьшала уровни PSA (см. Пример 16);

на Фиг.17 представлена зависимость объема предстательной железы, измеренного с использованием трансректальной ультрасонографии (TRUS), от дозы у макак в сравнении с положительным контролем (агонистом LHRH) после введения Соединения IV, для 6-й недели (см. Пример 16);

на Фиг.18 представлена зависимость массы органов (предстательной железы, семенных пузырьков и семенников) от дозы у макак после введения Соединения IV в процентном отношении к контролю на 90-е сутки (Фиг.18А). Масса предстательной железы у макак при вскрытии на 13-е сутки после ежесуточного перорального введения Соединения IV (Фиг.18В) (см. Пример 16);

на Фиг.19 представлена зависимость средних уровней общего тестостерона (нмоль/л) от дозы у людей в период между 1-ми и 11-ми сутками после введения Соединения IV (100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг) (см. Пример 17);

на Фиг.20 представлена зависимость средних уровней LH (МЕ(международные единицы)/л) от дозы у людей в период между 1-ми и 10-ми сутками после введения Соединения IV (100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг) (см. Пример 17);

на Фиг.21 представлена зависимость средних уровней свободного тестостерона (пг/мл) от дозы у людей в период между 1-ми и 10-ми сутками после введения Соединения IV (100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг) (см. Пример 17);

на Фиг.22 представлена зависимость средних уровней PSA (мкг/л) от дозы у людей в период между между 1-ми и 10-ми сутками после введения Соединения IV (100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг) (см. Пример 17);

на Фиг.23 представлена зависимость уровней тестостерона (нг/мл) от дозы у интактных крыс через 14 суток восстановления после введения Соединения IV. ^Iозначает Р<0,05 в сравнении с интактными контролями (см. Пример 10).

Следует иметь в виду, что для простоты и ясности иллюстрации, элементы, показанные на графических материалах, не обязательно должны быть представлены в масштабе. Например, размеры некоторых элементов могут быть преувеличены по сравнению с другими элементами для ясности. Кроме того, там, где это целесообразно, номера позиций для обозначения соответствующих или аналогичных элементов могут повторяться среди графических материалов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

В следующем далее подробном описании изложены многочисленные характерные подробности в целях обеспечения всестороннего понимания изобретения. Однако специалистам в данной области понятно, что настоящее изобретение может быть реализовано на практике без этих характерных подробностей. В других случаях подробно не описаны хорошо известные способы, методики и компоненты, чтобы не загромождать настоящее изобретение.

В одном из воплощений, соединения, которые изложены в данном описании, и/или композиции, содержащие эти соединения, могут быть использованы для снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке.

В одном из воплощений, соединения, которые изложены в данном описании, и/или композиции, содержащие эти соединения, могут быть использованы для снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке.

где

Y представляет собой С(O) или СН₂;

R₁, R₂ независимо представляют собой водород, галоген, гидроксил, алкокси, циано, нитро, CF₃, N(R)₂, сульфонамид, SO₂R, алкил, галогеноалкил, арил, O-Alk-NRaRe или O-Alk-гетероцикл, в котором гетероцикл представляет собой 3-7-членное замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо, возможно ароматическое;

R₃, R₄ независимо представляют собой водород, галоген, гидроксиалкил, гидроксил, алкокси, циано, нитро, CF₃, NHCOR, N(R)₂, сульфонамид, SO₂R, алкил, галогеноалкил, арил или защищенный гидроксил;

R представляет собой алкил, водород, галогеноалкил, дигалогеноалкил, тригалогеноалкил, CH₂F, CHF₂, CF₃, CF₂CF₃, арил, фенил, галоген, алкенил, CN, NO₂ или ОН;

R₅ и R₆ независимо представляют собой водород, фенил, алкильную группу из 1-6 атомов углерода, 3-7-членный циклоалкил, 3-7-членный гетероцикл, 5-7-членный арил; или R₅ и R₆ образуют 3-7-членное кольцо вместе с атомом азота;

j и k независимо равны 1-4;

Alk представляет собой линейный алкил из 1-7 атомов углерода, разветвленный алкил из 1-7 атомов углерода или циклический алкил из 3-8 атомов углерода.

В дополнительных воплощениях способов, изложенных в данном описании, соединение формулы I представлено формулой IA:

где R₁, R₂, R₃, R₄, j и k такие, как определено для формулы I.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, представленного соединением формулы IX:

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации. В другом воплощении субъект мужского пола имеет рак предстательной железы. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 50 нг/дл. В другом воплощении концентрация общего тестостерона в сыворотке крови снижена до уровня меньше примерно 25 нг/дл.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке. В другом воплощении субъект мужского пола имеет рак предстательной железы. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 50 нг/дл. В другом воплощении концентрация общего тестостерона в сыворотке крови снижена до уровня меньше примерно 25 нг/дл.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней свободного тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, причем такое снижение свободного тестостерона в сыворотке происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке. В другом воплощении субъект мужского пола имеет рак предстательной железы.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, причем такое снижение общего тестостерона в сыворотке не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке. В другом воплощении субъект мужского пола имеет рак предстательной железы. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 50 нг/дл. В другом воплощении концентрация общего тестостерона в сыворотке крови снижена до уровня меньше примерно 25 нг/дл.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней свободного тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, причем такое снижение уровней свободного тестостерона в сыворотке не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке. В другом воплощении субъект мужского пола имеет рак предстательной железы.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложены способы снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови или уровней свободного тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, причем указанный субъект мужского пола имеет рак предстательной железы. В другом воплощении указанный субъект имеет распространенный рак предстательной железы.

В одном из воплощений уменьшение концентраций тестостерона в сыворотке крови является обратимым и после лечения соединениями по изобретению наблюдается возврат к уровням исходного момента времени.

В другом воплощении концентрации тестостерона в сыворотке крови являются обратимыми после лечения Соединением IV, согласно Фиг.23 и Примеру 10.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложены способы снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающие введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 50 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 25 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 75 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен примерно до уровня в диапазоне от 75 нг/дл до 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен примерно до уровня в диапазоне от 50 нг/дл до 75 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен примерно до уровня в диапазоне от 40 нг/дл до 50 нг/дл. В другом воплощении концентрация общего тестостерона в сыворотке крови снижена примерно до уровня в диапазоне от 25 нг/дл до 50 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен примерно до уровня в диапазоне от 40 нг/дл до 60 нг/дл.

Уровни тестостерона в сыворотке крови могут быть измерены в виде уровней "свободного" (то есть биодоступного и несвязанного) или в виде "общего" тестостерона (включая процентную долю тестостерона, связанного с белком и недоступного). Мужчины старше 40 лет, у которых нет рака предстательной железы, демонстрируют низкие уровни тестостерона, соответствующие уровню общего тестостерона менее 250 нг/дл (<8,7 нмоль/л) или уровню свободного тестостерона менее 0,75 нг/дл (<0,03 нмоль/л).

В одном из воплощений среди способов по данному изобретению предложен способ снижения уровней общего и/или свободного тестостерона в сыворотке крови независимо от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) или путем уменьшения уровней LH у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы. В другом воплощении изменения уровней тестостерона будут представлять собой уменьшение относительно уровня перед лечением. В другом воплощении уровень общего тестостерона в сыворотке крови снижен до величины меньше 100 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше 50 нг/дл. В другом воплощении общий тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше 25 нг/дл. В другом воплощении уровень свободного тестостерона снижен до величины меньше 2 нг/дл. В другом воплощении уровень свободного тестостерона снижен до величины меньше 1 нг/дл. В другом воплощении уровень свободного тестостерона снижен до величины меньше 0,5 нг/дл. В другом воплощении уровень свободного тестостерона снижен до величины меньше 0,25 нг/дл.

Способы определения уровней свободного тестостерона в сыворотке крови и уровней общего тестостерона в сыворотке крови включают мониторинг уровней тестостерона в продолжение периода лечения посредством проведения анализа крови. Общий тестостерон представляет собой комбинацию циркулирующего в кровотоке тестостерона, связанного с белками-носителями (альбумином, SHBG (глобулин, связывающий половые гормоны (от англ. sex hormone-binding globulin), транскортином, трансферрином), и свободного/несвязанного гормона. На уровни общего тестостерона могут влиять различные факторы, включая уровень белка в крови, который транспортирует этот гормон в организме, возраст, наличие ожирения и помехи, ассоциируемые с обычно используемыми методами тестирования.

Способы, пригодные для измерения свободного тестостерона (FT), могут быть сложными (равновесный диализ и расчет свободного тестостерона (CFT)) или простыми (имеющийся в продаже набор для определения FT "Coat-A-Count") с использованием аналогичного меченого вещества. В другом воплощении измерения уровней общего тестостерона и свободного тестостерона в сыворотке крови можно достичь путем одновременного измерения общего тестостерона и SHBG (например, используя набор для подсчета результатов иммунорадиометрического анализа (от англ. immunoradiometric assay) Irma-Count от DPC (Diagnostic Products Corporation)) и затем расчета свободного тестостерона (CFT). В другом воплощении измерение общего тестостерона и свободного тестостерона находится в компетенции специалиста в данной области.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови или уровней свободного тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества комбинации одной или более чем одной другой формы ADT и соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации. В другом воплощении снижение общего или свободного тестостерона в сыворотке крови происходит путем уменьшения уровня лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке крови. В другом воплощении снижение уровней общего или свободного тестостерона в сыворотке крови не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

Способы по данному изобретению включают введение комбинации других форм ADT и соединения по изобретению. В одном из воплощений другие формы ADT включают применение агониста LHRH. В другом воплощении агонистом LHRH является лейпролид ацетат (Lupron® (US 5480656; US 5575987; 5631020; 5643607; 5716640; 5814342; 6036976; все они включены в данное описание посредством ссылки) или гозерелин ацетат (Zoladex®) (US 7118552; 7220247; 7500964; все они включены в данное описание посредством ссылки). В одном из воплощений другие формы ADT включают применение антагониста LHRH. В другом воплощении антагонистом LHRH является дегареликс. В одном из воплощений другие формы ADT включают применение антиандрогенов. В другом воплощении антиандрогенами являются бикалутамид, флутамид, финастерид, дутастерид, MDV3100, нилутамид, хлормадинон или любая их комбинация.

В одном из воплощений способы по данному изобретению включают введение терапевтически эффективного количества антиандрогена и соединения по изобретению. В одном из воплощений способы по данному изобретению включают введение терапевтически эффективного количества агониста LHRH и соединения по изобретению. В одном из воплощений способы по данному изобретению включают введение терапевтически эффективного количества антиандрогена, агониста LHRH и соединения по изобретению.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона и/или уровней свободного тестостерона в сыворотке крови путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) или независимо от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы, с целью проведения антиандрогенной терапии (ADT), включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII. В другом воплощении этим соединением является Соединение IV.

В другом воплощении согласно данному изобретению предложен способ антиандрогенной терапии (ADT) субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации. В другом воплощении указанный субъект имеет рак предстательной железы. В другом воплощении этим соединением является Соединение IV.

В другом воплощении ADT применяют для лечения рака предстательной железы, для замедления прогрессирования рака предстательной железы или для предупреждения и/или лечения рецидива рака предстательной железы.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ лечения рака предстательной железы, замедления прогрессирования рака предстательной железы, предупреждения и/или лечения рецидива рака предстательной железы, включающий введение соединения по изобретению. В другом воплощении введение соединения по изобретению в комбинации с аналогами LHRH, обратимыми антиандрогенами (такими как бикалутамид или флутамид), антиэстрогенами, противораковыми лекарственными средствами, ингибиторами 5-альфа-редуктазы, ингибиторами ароматазы, прогестинами, селективными модуляторами андрогеновых рецепторов (SARM) или агентами, действующими через другие рецепторы ядерных гормонов.

В одном из воплощений согласно настоящему изобретению предложен способ лечения рака предстательной железы и уменьшения уровней общего тестостерона в сыворотке крови и/или свободного тестостерона в сыворотке крови путем уменьшения уровней LH или независимо от уменьшения уровней LH, включающий введение соединения формулы IA, I-XII. В другом воплощении, включающий введение Соединения IV.

В результате антиандрогенной терапии уменьшается не только уровень тестостерона, но также понижаются уровни эстрогена, поскольку эстроген получается в результате ароматизации тестостерона. Дефицит эстрогенов, индуцированный антиандрогенной терапией, вызывает значительные побочные эффекты, которые включают приливы, гинекомастию, масталгию, потерю костной массы, ухудшение качества и прочности костей, остеопороз, остеопению и опасные для жизни переломы, неблагоприятные изменения липидов и более частые случаи сердечно-сосудистого заболевания и инфаркта миокарда, потери либидо, импотенции, потери мышечной массы (саркопении), утомляемости, когнитивной дисфункции и депрессии и других изменений настроения.

В других воплощениях согласно настоящему изобретению предложен способ лечения любого заболевания, расстройства или симптома, ассоциируемого с ADT. В других воплощениях согласно настоящему изобретению предложен способ лечения любого заболевания, расстройства или симптома, ассоциируемого с утратой тестостерона. Каждое заболевание, расстройство или симптом представляет отдельное воплощение настоящего изобретения.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови у субъекта мужского пола, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации, где указанное введение указанного соединения формулы IA, I-XII или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации предупреждает возникновение или приводит к предупреждению, подавлению, снижению частоты возникновения, ингибированию или лечению побочных эффектов, связанных с проведением антиандрогенной терапии (ADT), при этом указанный субъект имеет рак предстательной железы. В другом воплощении такое уменьшение уровней общего или свободного тестостерона в сыворотке крови осуществляется путем уменьшения уровней LH или независимо от уменьшения уровней LH.

В одном из воплощений введение соединений по изобретению приводит к подавлению, снижению частоты возникновения, ингибированию или лечению типичных побочных эффектов, связанных с проведением традиционной антиандрогенной терапии (ADT). В другом воплощении субъект имеет рак предстательной железы. Такое предупреждение и/или уменьшение побочных эффектов происходит относительно плацебо или контрольной группы. В одном из воплощений типичные побочные эффекты, связанные с традиционной антиандрогенной терапией (ADT), включают приливы, гинекомастию, сниженную минеральную плотность кости и повышенную склонность к перелому кости. В другом воплощении введение соединений по изобретению предотвращает появление приливов, которые могут быть обнаружены при применении традиционных форм антиандрогенной терапии (ADT). В другом воплощении введение соединений по изобретению предотвращает появление гинекомастии, которая может быть обнаружена при применении традиционных форм антиандрогенной терапии (ADT). В другом воплощении введение соединений по изобретению предотвращает появление сниженной минеральной плотности кости (BMD), которая может быть обнаружена при применении традиционных форм антиандрогенной терапии (ADT). В другом воплощении введение соединений по изобретению предотвращает появление повышенной склонности к перелому кости, которая может быть обнаружена при применении традиционных форм антиандрогенной терапии (ADT). В другом воплощении повышенная склонность к перелому кости представляет собой патологические переломы, нетравматические переломы, перелом позвоночника, невертебральные переломы, новые морфометрические переломы, клинический перелом или их комбинацию.

В одном из воплощений термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к орхиэктомии (хирургической кастрации), когда хирург удаляет яички. В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению аналогов рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона (LHRH); эти лекарственные средства понижают количество тестостерона, вырабатываемого яичками. Примеры аналогов LHRH, общедоступных в Соединенных Штатах Америки, включают лейпролид (лупрон, виадур (viadur), элигард), гозерелин (золадекс), трипторелин (трелстар) и гистрелин (вантас). В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению антиандрогенов; антиандрогены блокируют способность организма использовать какие-либо андрогены. Даже после орхиэктомии или в процессе лечения аналогами LHRH, надпочечниками все еще производится небольшое количество андрогенов. Примеры антиандрогенных лекарственных средств включают флутамид (эулексин), бикалутамид (казодекс) и нилутамид (ниландрон). В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению антагонистов рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона (LHRH), таких как абареликс (пленаксис); дегареликс (фирмагон) представляет собой новый антагонист LHRH, который в 2008 г. был одобрен FDA (Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов, медикаментов и косметических средств) к применению для лечения распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению ингибиторов 5α-редуктазы, таких как финастерид (проскар) и дутастерид (аводарт); ингибиторы 5α-редуктазы блокируют способность организма превращать тестостерон в более активный андроген 5α-дигидротестостерон (DHT). В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению ингибиторов биосинтеза тестостерона, таких как кетоконазол (низорал). В другом воплощении термин "традиционная антиандрогенная терапия" относится к введению эстрогенов, таких как диэтилстильбэстрол или 17β-эстрадиол.

В одном из воплощений термин "приливы" относится к внезапному ощущению жара в верхней части тела или во всем теле, покраснению лица и шеи, красным пятнам, появляющимся на грудной клетке, спине и руках, интенсивному потовыделению, холодной дрожи и т.д.

В одном из воплощений термин "гинекомастия" относится к доброкачественному увеличению молочных желез у лиц мужского пола, являющейся результатом пролиферации железистого компонента молочной железы, что может ассоциироваться или может не ассоциироваться с болью. Клинически гинекомастию определяют по наличию эластичной или твердой опухоли, концентрически расширяющейся от сосков. Состояние, известное как псевдогинекомастия или липомастия, характеризуется отложением жира без железистой пролиферации. Хотя обычно гинекомастия бывает двусторонней, она может быть и односторонней.

В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к лечению мужчин с диагнозом рак предстательной железы или распространенный рак предстательной железы путем уменьшения уровня тестостерона, помимо этого не вызывающего потери костной массы и приливов. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют Соединения IA, I-XII, причем данные соединения обладают способностью уменьшать уровень тестостерона, первостепенной причины рака предстательной железы, также не вызывая некоторых побочных эффектов, таких как потеря костной массы и приливы, которые обычно наблюдаются при проведении современных антиандрогенных терапий (ADT) в отношении рака предстательной железы.

В другом воплощении в приведенной ниже Таблице 8 (Пример 11) продемонстрировано уменьшение количества тестостерона, также не вызывающее потери костной массы в результате введения Соединения IV.

В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к уменьшению уровней тестостерона, что далее приводит к излечению распространенного рака предстательной железы, путем введения соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к уменьшению уровней тестостерона, что далее приводит к подавлению, снижению частоты возникновения, ослаблению тяжести или ингибированию распространенного рака предстательной железы, путем введения соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к уменьшению уровней тестостерона, что далее обеспечивает паллиативное лечение распространенного рака предстательной железы, путем введения соединения формулы IA, I-XII.

В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к лечению распространенного рака предстательной железы. В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к подавлению, снижению частоты возникновения, ослаблению тяжести или ингибированию распространенного рака предстательной железы. В одном из воплощений способы по данному изобретению относятся к паллиативному лечению распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют Соединения IA, I-XII. В другом воплощении данное изобретение относится к лечению распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении данное изобретение относится к подавлению распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении данное изобретение относится к снижению частоты возникновения распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении данное изобретение относится к ослаблению тяжести распространенного рака предстательной железы. В другом воплощении данное изобретение относится к ингибированию распространенного рака предстательной железы.

Термин "распространенный рак предстательной железы" относится к метастатическому раку, возникающему в предстательной железе и дающему метастазы далеко за пределами предстательной железы, как например, в окружающие ткани, охватывая семенные пузырьки, лимфоузлы или кости тазовой области или другие части тела. Патологические состояния рака предстательной железы классифицируются по шкале Глисона от 1 до 5 в порядке увеличения злокачественности. В другом воплощении в данное определение должны быть включены пациенты с существенным риском прогрессирующего заболевания и/или смерти от рака предстательной железы, и любой такой пациент с раком, выходящим за пределы капсулы предстательной железы и характеризующимся такими стадиями заболевания, как IIB и хуже, очевидно имеет "распространенное" заболевание.

В одном из воплощений способы, которые предложены в данном описании и/или в которых используются соединения, предложенные в данном описании, эффективны в отношении обеспечения обратной связи в гипоталамо-гипофизарно-тестикулярной оси (НРТ оси). Обратная связь относится к способности вещества, продуцируемого в одном органе или ткани, регулировать активность другого органа или ткани, которая влияет на его собственную активность. В одном из воплощений обратная связь в гипоталамо-гипофизарно-тестикулярной оси (НРТ оси) приводит к уменьшению уровней LH. В одном из воплощений обратная связь в гипоталамо-гипофизарно-тестикулярной оси (НРТ оси) приводит к уменьшению уровней общего тестостерона в сыворотке крови. В одном из воплощений обратная связь в гипоталамо-гипофизарно-тестикулярной оси (НРТ оси) приводит к уменьшению уровней свободного тестостерона в сыворотке крови. В одном из воплощений обратная связь в гипоталамо-гипофизарно-тестикулярной оси (НРТ оси) приводит к уменьшению уровней андрогенов в сыворотке крови, тканях или опухолях.

Гипоталамо-гипофизарно-тестикулярная (НРТ) ось относится к эндокринной физиологической системе, которая регулирует уровни гормонов в гипоталамусе, гипофизе и яичках. LHRH (рилизинг-фактор лютеинизирующего гормона) высвобождается гипоталамусом и стимулирует гипофиз на предмет синтеза и секреции LH и FSH (гонадотропинов). Далее LH и FSH воздействуют на яички, стимулируя выработку тестостерона и спермы. Затем тестостерон оказывает прямое негативное влияние по типу обратной связи на гипоталамическую секрецию LHRH и опосредованное негативное влияние по типу обратной связи на продуцирование LH и FSH в гипофизе. Эстрогены, андрогены и сывороточные белки (например, ингибин) также оказывают негативное влияние на секрецию LHRH и секрецию LH и FSH.

Гипофиз представляет собой одну из желез, которая регулирует уровень тестостерона в организме. Когда уровень тестостерона понижается, гипофиз высвобождает лютеинизирующий гормон (LH). Этот гормон индуцирует производство большего количества тестостерона в яичках. Уровень тестостерона увеличивается во время полового созревания. Самый высокий уровень тестостерона достигается в возрасте 20-40 лет и затем постепенно уменьшается у пожилых мужчин. В организме женщин количество тестостерона сильно снижено по сравнению с мужчинами. Однако тестостерон играет важную роль для всего организма как мужчин, так и женщин. Он влияет на головной мозг, костную и мышечную массу, распределение жировых отложений, сосудистую систему, уровни энергии, ткани (наружных) половых органов и половую функцию. Большая часть тестостерона в крови находится в связанном состоянии с белком, называемым как глобулин, связывающий половые гормоны, (SHBG) или с другим сывороточным белком, называемым альбумином. Тестостерон, который не связан (или "свободный"), также можно определить клинически.

В другом воплощении снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или уровней свободного тестостерона в сыворотке крови, независимое от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови, происходит вследствие увеличения уровня глобулина, связывающего половые гормоны, (SHBG). В другом воплощении снижение уровней свободного тестостерона, независимое от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови, происходит вследствие увеличения уровня глобулина, связывающего половые гормоны, (SHBG). В другом воплощении снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, независимое от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке крови, происходит вследствие ингибирования продуцирования или секреции тестостерона клетками Лейдига в яичках. В другом воплощении снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, независимое от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке крови, происходит вследствие уменьшения стероидогенеза в надпочечниках.

В одном из воплощений соединения, которые изложены в данном описании, и/или композиции, содержащие данные соединения, можно использовать для уменьшения уровней лютеинизирующего гормона (LH). В другом воплощении соединения и/или композиции по данному изобретению можно использовать для уменьшения уровня эндогенных половых гормонов.

Члены семейства гидроксистероид-дегидрогеназ (HSD) вовлечены в превращение циркулирующих в кровотоке стероидов. 17β-HSD5 превращает андростендион в тестостерон, а эстрон в эстрадиол. В дополнение к этому, она также вовлечена в синтез простагландинов. В одном из воплощений соединения по изобретению ингибируют HSD, конкретно ингибируют 17β-гидроксистероид-дегидрогеназу 5 (17β-HSD5). Такое ингибирование может быть полезным при ADT, предупреждая периферический/внегонадный синтез тестостерона, который может выходить из-под контроля НРТ оси и приводить к недостаточному снижению общего или свободного тестостерона в сыворотке крови или делать возможным наличие локально повышенных внутриклеточных уровней тестостерона, что в обоих случаях может быть неблагоприятно при ADT.

Антиандрогенная терапия (ADT), обеспечиваемая терапией агонистами LHRH, т.е. введением агонистов рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона (LHRH) или их аналогов, сначала вызывает стимуляцию высвобождения гонадотропина из гипофиза и продуцирование тестостерона из яичек (так называемую "острую реакцию" (от англ. flare reaction)), затем уменьшение высвобождения гонадотропина и уменьшение уровней как тестостерона, так и эстрогена. Эта "острая реакция", вызываемая терапией агонистами LHRH, оказывает негативное влияние на лечение рака предстательной железы вследствие повышения уровней андрогенов/тестостерона. В дополнение к этому LHRH-терапия ассоциирована с повышенным риском диабета и сердечнососудистого заболевания (Smith (2008) Current Prostate Reports. 6: 149-154).

Для преодоления "острых" эффектов LHRH-терапии предложены антиандрогенная монотерапия (бикалутамидом, флутамидом, хлормадиноном), подходы с комбинированной LHRH/антиандрогенной терапией и применение антагонистов LHRH (дегареликса) (Suzuki et al., (2008) Int. J. Clin. Oncol. 13; 401-410; Sharifi, N. et al., (2005) JAMA. 294(2): 238-244). Антиандрогенная монотерапия не снижает уровней андрогенов у субъекта. Было показано, что антиандрогенная монотерапия бикалутамидом менее эффективна, чем ADT для пациентов с раком предстательной железы с костными метастазами. К тому же, неблагоприятные эффекты, наблюдаемые при терапии бикалутамидом, включают болезненность и гипертрофию (гинекомастию и мастодинию) молочных желез. (Suzuki и соавт., там же). Дополнительный риск, связанный с антиандрогенной терапией, включает повышение уровня трансаминаз печени (Sharifi и соавт., там же).

В одном из воплощений согласно настоящему изобретению предложено уменьшение уровней LH и тем самым уменьшение уровней общего тестостерона в сыворотке крови и/или свободного тестостерона в сыворотке крови, не вызывающее "острого" эффекта и в то же время преодолевающее неблагоприятные эффекты, ассоциированные с дефицитом эстрогенов, обусловленным уменьшением уровней тестостерона при использовании традиционных способов ADT. Способы/применения соединений, являющихся объектом изобретения, предусматривают проявление тканеселективных эстрогенных активностей, обеспечивающих поддержание костной ткани (агонистический эффект на костную ткань), снижение свертывающего потенциала и/или приливов и/или менее сильное или нейтральное воздействие на ткань молочной железы по сравнению с эстрадиолом или диэтилстильбэстролом.

В одном из воплощений Соединение IV проявляет агонистические, но не антагонистические эффекты (Примеры 6 и 7), то есть применение Соединения IV не будет приводить к повышению уровней гонадотропинов и тестостерона.

В одном из воплощений Соединение IV проявляет агонистическую активность (Примеры 8-11), демонстрируя устойчивый фармакологический ответ в виде снижения уровней гормонов сыворотки крови, тестостерона и андрогенов в целом.

В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, эффективны для уменьшения или устранения резорбтивных эффектов в костной ткани, вызванных уменьшением уровня LH при использовании традиционных форм ADT. В одном из воплощений способы, которые предложены в данном описании и/или в которых применяют композиции, предложенные в данном описании, эффективны для уменьшения или устранения резорбтивных эффектов в костной ткани, вызванных снижением уровней тестостерона при использовании традиционных форм ADT. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют композиции, предложенные в данном описании, эффективны для уменьшения или устранения резорбтивных эффектов, вызванных снижением уровня эстрогена в результате уменьшения уровня LH. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, предотвращают резорбтивные эффекты в костной ткани, ассоциированные с уменьшением уровня LH при использовании традиционных форм ADT. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, предотвращают потерю костной массы, ассоциированную с уменьшением уровней эндогенных LH, тестостерона и/или эстрадиола при использовании традиционных форм ADT. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, повышают плотность костной массы (BMD), обеспечивая при этом снижение уровня LH. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, увеличивают процентный объем кости, обеспечивая при этом снижение уровней эндогенных LH, тестостерона и/или эстрадиола.

В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложен способ предупреждения и/или ослабления тромбоэмболии путем введения соединения по изобретению или его изомера, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации.

В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, эффективны в ткани молочной железы. В одном из воплощений способы, предложенные в данном описании, в которых применяют соединения и/или композиции, предложенные в данном описании, обеспечивают уменьшение уровня LH при одновременном предупреждении гинекомастии, ассоциированной с уменьшением уровня LH, получающимся в результате традиционной ADT.

В одном из воплощений, в Примере 13, приводятся результаты специальных исследований токсичности, причем исследования in vitro на тромбоцитах человека показали, что Соединение IV обладало гораздо более низкой прокоагулирующей активностью, чем DES. Таким образом, Соединение IV, ER-селективный агонист, в отношении рака предстательной железы может обеспечивать полезное действие DES с меньшим риском тромботических событий, чем DES, а также обеспечивать полезное действие агониста или антагониста LHRH, не вызывая потери костной массы, приливов или неблагоприятных липидных профилей.

Терапия одним диэтилстильбэстролом (DES) или совместно с другой ADT показала, что применение DES предотвращало резорбцию костной ткани у пациентов с диагнозом рак предстательной железы. Хотя применение DES внедрено в качестве терапии рака предстательной железы, считается, что эффекты DES на ангиогенез и злокачественное новообразование опосредуются метаболитами DES, а не его действием через рецептор эстрогенов. К тому же, уровни дозировок DES, вводимые для терапевтических применений, дают многочисленные неблагоприятные побочные эффекты, включая сосудистое заболевание, сердечно-сосудистые осложнения, тромботические осложнения вследствие токсичности, гинекомастию, эректильную дисфункцию и снижение либидо (Scherrand Pitts, там же, и Presti, J.C. Jr. (1996) JAMA. 275(15): 1153-6).

В одном из воплощений настоящее изобретение преодолевает негативные побочные эффекты терапии агонистами или антагонистами LHRH, применяемыми по отдельности или в комбинации с антиандрогенами или DES. В другом воплощении способы рассматриваемого изобретения предусматривают осуществление антиандрогенной терапии без неблагоприятных побочных эффектов, связанных с утратой эстрогенов, таких как неблагоприятные состояния, связанные с костной тканью, и без неблагоприятных побочных эффектов, ассоциированных со стимуляцией эстрогенов, таких как гинекомастия. В другом воплощении способы по настоящему изобретению предусматривают уменьшение уровней LH и тем самым уменьшение уровней общего и/или свободного тестостерона в сыворотке крови, без вызывания "острого" эффекта при одновременном преодолении неблагоприятных эффектов, ассоциированных с дефицитом эстрогенов, вызванным уменьшением LH, и преодолении неблагоприятных эффектов, ассоциированных с общим увеличением уровня агонистов эстрогенов, наблюдаемым при терапии с использованием DES. Способы/применения соединения, являющегося объектом изобретения, предусматривают проявление тканеселективных эстрогенных активностей, тем самым обеспечивая поддержание костной ткани (агонистический эффект на костную ткань), снижение свертывающего потенциала и нейтральное воздействие на ткань молочной железы.

Антиэстрогенные эффекты традиционных селективных модуляторов рецепторов эстрогенов (SERM), таких как тамоксифен, торемифен и ралоксифен, на гипоталамическом уровне выражаются в увеличении уровней гонадотропинов или увеличении уровней LH у мужчин и тем самым потенциально приводят к повышению уровней тестостерона в сыворотке крови (Tsouri et al., 2008, Fertility and Sterility doi: 10.1016). И наоборот, способы поданному изобретению, включающие введение Соединения формулы IA, I-XII, предусматривают уменьшение уровня LH у субъекта мужского пола.

Дополнительные воплощения Соединения формулы I

В одном из воплощений способов по данному изобретению Y в Соединении формулы I представляет собой С(O). В другом воплощении Y представляет собой CH₂. В другом воплощении R₁ и R₂ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой О-Alk-NR₅R₆ или O-Alk-гетероцикл. В другом воплощении Alk в указанных группах O-Alk-гетероцикл, O-Alk-NR₅R₆, -Alk-гетероцикл и Alk-NR₅R₆, которые изложены в данном описании выше, представляет собой линейный алкил из 1-7 атомов углерода, разветвленный алкил из 1-7 атомов углерода или циклический алкил из 3-8 атомов углерода. В другом воплощении алкил представляет собой этилен (-CH₂CH₂-). В другом воплощении Alk представляет собой метилен (-CH₂-). В другом воплощении Alk представляет собой пропилен (-СН₂СН₂СН₂-). В другом воплощении Alk представляет собой 2-метилпропилен (-СН₂СН(СН₃)СН₂-).

В одном из воплощений способов по данному изобретению R₁ в Соединении формулы I или IA находится в пара-положении. В одном из воплощений способов по данному изобретению R₁ и R₂ в Соединении формулы I или IA являются разными. В другом воплощении способов по данному изобретению R₁ и R₂ в Соединении формулы I или IA являются одинаковыми. В другом воплощении способов по данному изобретению R₁ в Соединении формулы I или IA представляет собой . В другом воплощении способов R₁ в Соединении формулы I или IA представляет собой гидроксил. В другом воплощении способов R₁ в Соединении формулы I или IA представляет собой алкокси. В другом воплощении способов R₁ и R₂ независимо представляют собой водород, галоген, гидроксил, алкокси, циано, нитро, CF₃, N(R)₂, сульфонамид, SO₂R, алкил, галогеноалкил, арил, O-Alk-NR₅R₆ или O-Alk-гетероцикл, где гетероцикл представляет собой 3-7-членное замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо, возможно ароматическое. В другом воплощении способов R₁ и R₂ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой галоген, гидроксил, алкокси, циано, нитро, CF₃, N(R)₂, сульфонамид, SO₂R, алкил, галогеноалкил, арил, O-Alk-NR₅R₆ или O-Alk-гетероцикл, где гетероцикл представляет собой 3-7-членное замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо, возможно ароматическое. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I или IA представляет собой галоген. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I или IA представляет собой F. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I представляет собой Cl. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I или IA представляет собой Br. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I или IA представляет собой I. В другом воплощении способов R₂ в Соединении формулы I или IA представляет собой гидроксил. В другом воплощении способов R₁ и/или R₂ представляет собой CF₃. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой СН₃. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой галоген. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой F. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой Cl. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой Br. В другом воплощении R₁ и/или R₂ представляет собой I. В другом воплощении R₂ в Соединении формулы I находится в пара-положении.

В одном из воплощений способов по данному изобретению R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA являются одинаковыми. В другом воплощении способов по данному изобретению R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA являются разными. В другом воплощении способов j и k в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой 1. В другом воплощении способов R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой галоген, галогеноалкил, гидроксил или алкил. В другом воплощении способов R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой F. В другом воплощении способов R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой Br. В другом воплощении способов R₃ и R₄ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой Cl. В другом воплощении R₄ находится в пара-положении. В другом воплощении R₃ находится в орто-положении. В другом воплощении R₃ находится в мета-положении. В другом воплощении R₃ и/или R₄ представляет собой CF₃. В другом воплощении R₃ и/или R₄ представляет собой СН₃.

В одном из воплощений способов по данному изобретению R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют 3-7-членное кольцо вместе с атомом азота. В другом воплощении кольцо представляет собой насыщенное или ненасыщенное кольцо. В другом воплощении кольцо представляет собой замещенное или незамещенное кольцо. В другом воплощении способов по данному изобретению R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пиперидиновое кольцо вместе с азотом. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пиразиновое кольцо вместе с азотом. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пиперазиновое кольцо вместе с азотом. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют морфолиновое кольцо вместе с азотом. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пиррольное кольцо вместе с азотом. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пирролидин. В другом воплощении способов R₅ и R₆ в Соединении формулы I или IA образуют пиридиновое кольцо вместе с азотом. В другом воплощении данное кольцо замещено галогеном, алкилом, алкокси, алкиленом, гидроксилом, циано, нитро, амино, амидом, СООН или альдегидом.

В другом воплощении способов по данному изобретению R₁ в Соединении формулы I или IA и R₂ в Соединении формулы I или IA независимо представляют собой O-Alk-гетероцикл или OCH₂CH₂-гетероцикл. В другом воплощении термин "гетероциклическая" группа относится, в одном из воплощений, к кольцевой структуре, содержащей в дополнение к атомам углерода атомы серы, кислорода, азота или любую их комбинацию, как часть кольца. В другом воплощении гетероцикл представляет собой 3-12-членное кольцо. В другом воплощении гетероцикл представляет собой 6-членное кольцо. В другом воплощении гетероцикл представляет собой 5-7-членное кольцо. В другом воплощении гетероцикл представляет собой 4-8-членное кольцо. В другом воплощении гетероциклическая группа может быть незамещенной или может быть замещена галогеном, галогеноалкилом, гидроксилом, алкокси, карбонилом, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, циано, нитро, СО₂Н, амино, алкиламино, диалкиламино, карбоксилом, тио и/или тиоалкилом. В другом воплощении гетероциклическое кольцо может быть конденсировано с другим насыщенным или ненасыщенным циклоалкильным или гетероциклическим 3-8-членным кольцом. В другом воплощении гетероциклическое кольцо представляет собой насыщенное кольцо. В другом воплощении гетероциклическое кольцо представляет собой ненасыщенное кольцо. В другом воплощении гетероцикл представляет собой пиперидин. В другом воплощении гетероцикл представляет собой пиридин. В другом воплощении гетероцикл представляет собой пиперидин, пиридин, фуран, тиофен, пиррол, пирролидин, пиразин, пиперазин или пиримидин.

Термин "циклоалкил" относится к неароматическому моноциклическому или полициклическому кольцу, содержащему атомы углерода и водорода. Циклоалкильная группа может содержать одну или более чем одну углерод-углеродную двойную связь в кольце при условии, что кольцо не становится ароматическим вследствие их присутствия. Примеры циклоалкильных групп включают, но этим не ограничиваются, (С3-С7)циклоалкильные группы, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил и насыщенные циклические и бициклические терпены, и (С3-С7)циклоалкенильные группы, такие как циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил и циклогептенил и ненасыщенные циклические и бициклические терпены. Циклоалкильная группа может быть незамещенной или может быть замещена одним или двумя заместителями. Предпочтительно, циклоалкильная группа представляет собой моноциклическое кольцо или бициклическое кольцо.

Термин "алкил" относится, в одном из воплощений, к насыщенному алифатическому углеводороду, в том числе к группам с прямой цепью, разветвленной цепью и циклическим алкильным группам. В одном из воплощений алкильная группа содержит 1-12 атомов углерода. В другом воплощении алкильная группа содержит 1-7 атомов углерода. В другом воплощении алкильная группа содержит 1-6 атомов углерода. В другом воплощении алкильная группа содержит 1-4 атома углерода. В другом воплощении циклическая алкильная группа содержит 3-8 атомов углерода. В другом воплощении циклическая алкильная группа содержит 3-12 атомов углерода. В другом воплощении разветвленный алкил представляет собой алкил, замещенный алкильными боковыми цепями, содержащими 1-5 атомов углерода. В другом воплощении разветвленный алкил представляет собой алкил, замещенный галогеноалкильными боковыми цепями, содержащими 1-5 атомов углерода. Алкильная группа может быть незамещенной или может быть замещена галогеном, галогеноалкилом, гидроксилом, алкокси, карбонилом, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, нитро, амино, алкиламино, диалкиламино, карбоксилом, тио и/или тиоалкилом.

Термин "алкенильная" группа относится, в другом воплощении, к ненасыщенному углеводороду, в том числе к группам с прямой цепью, разветвленной цепью и циклическим алкильным группам, содержащим одну или более двойных связей. Алкенильная группа может иметь одну двойную связь, две двойных связи, три двойных связи и т.д. В другом воплощении алкенильная группа содержит 2-12 атомов углерода. В другом воплощении алкенильная группа содержит 2-6 атомов углерода. В другом воплощении алкенильная группа содержит 2-4 атома углерода. Примерами алкенильных групп являются этенил, пропенил, бутенил, циклогексенил и т.д. Алкенильная группа может быть незамещенной или может быть замещена галогеном, гидрокси, алкокси, карбонилом, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, нитро, амино, алкиламино, диалкиламино, карбоксилом, тио и/или тиоалкилом.

Термин "арильная" группа относится к ароматической группе, содержащей по меньшей мере одну карбоциклическую ароматическую группу или гетероциклическую ароматическую группу, которая может быть незамещенной или может быть замещена одной или более группами, выбранными из галогена, галогеноалкила, гидрокси, алкокси, карбонила, амидо, алкиламидо, диалкиламидо, нитро, амино, алкиламино, диалкиламино, карбокси или тио или тиоалкила. Неограничивающими примерами арильных колец являются фенил, нафтил, пиранил, пирролил, пиразинил, пиримидинил, пиразолил, пиридинил, фуранил, тиофенил, тиазолил, имидазолил, изоксазолил и тому подобное. В одном из воплощений арильная группа представляет собой 4-8-членное кольцо. В другом воплощении арильная группа представляет собой 4-12-членное кольцо(а). В другом воплощении арильная группа представляет собой 6-членное кольцо. В другом воплощении арильная группа представляет собой 5-членное кольцо. В другом воплощении арильная группа представляет собой систему из 2-4 конденсированных колец.

Термин "альдегидная" группа относится, в одном из воплощений, к алкилу или алкенилу, замещенному формильной группой, где алкил или алкенил такие, как определено выше. В другом воплощении альдегидная группа представляет собой арильную или фенильную группу, замещенную формильной группой, где арил такой, как определено выше. Примерами альдегидов являются формил, ацеталь, пропаналь, бутаналь, пентаналь, бензальдегид. В другом воплощении альдегидная группа представляет собой формильную группу.

Термин "галогеноалкильная" группа относится, в другом воплощении, к алкильной группе, которая определена выше, которая замещена одним или более чем одним атомом галогена, например F, Cl, Br или I.

Термин "гидроксильная" группа относится, в другом воплощении, к группе ОН. Специалистам в данной области ясно, что когда R₁, R₂ или R₃ в соединениях по настоящему изобретению представляют собой OR, то R не является ОН.

В одном из воплощений термин "галоген" или "галогено" относится к галогену, такому как F, Cl, Br или I.

В другом воплощении слово "фенол" относится к любому производному бензола, имеющему спиртовую группу (ОН).

Ссылка на защищенный гидроксил, сделанная в некоторых воплощениях, включает введение заместителя, связанного с кислородной группировкой бензольного кольца, при этом данный заместитель может быть легко удален. В некоторых воплощениях защитные группы фенола могут включать группы: простого метилового эфира (метокси), простого алкилового эфира (алкокси), простого бензилового эфира (Bn), простого метоксиметилового (MOM) эфира, простого бензоилоксиметилового (ВОМ) эфира, бензил, карбобензокси, простого метоксиэтоксиметилового (MEM) эфира, простого 2-(триметилсилил)этокси-метилового (SEM) эфира, простого метилтиометилового (МТМ) эфира, простого фенилтиометилового (РТМ) эфира, простого азидометилового эфира, простого цианометилового эфира, простого 2,2-дихлор-1,1-дифторэтилового эфира, простого 2-хлорэтилового эфира, простого 2-бромэтилового эфира, простого тетрагидропиранилового (ТНР) эфира, простого 1-этоксиэтилового (ЕЕ) эфира, простого фенацилового эфира, простого 4-бромфенацилового эфира, простого циклопропилметилового эфира, простого аллилового эфира, простого пропаргилового эфира, простого изопропилового эфира, простого циклогексилового эфира, простого трет-бутилового эфира, простого 2,6-диметилбензилового эфира, простого 4-метоксибензилового эфира, простого о-нитробензилового эфира, простого 2,6-дихлорбензилового эфира, простого 3,4-дихлорбензилового эфира, простого 4-(диметиламино)карбонилбензилового эфира, простого 4-метилсульфинил-бензилового эфира, простого 4-антрилметилового эфира, простого 4-пиколилового эфира, гептафтор-п-толил, простого тетрафтор-4-пиридилового эфира, простого триметилсилилового (TMS) эфира, простого трет-бутилдиметилсилилового (TBDMS) эфира, простого трет-бутилдифенилсилилового (TBDPS) эфира, простого триизопропилсилилового (TIPS) эфира, арилформиат, арилацетат, ариллевулинат, арилпивалат, арилбензоат, арил-9-флуоренкарбоксилат, арилметилкарбонат, 1-адамантил-карбонат, трет-бутилкарбонат, 4-метилсульфинилбензилкарбонат, 2,4-диметилпент-3-илкарбонат, арил-2,2,2-трихлорэтилкарбонат, арилбензилкарбонат, арилкарбамат, сложного диметилфосфинилового эфира (Dmp-OAr), сложного диметилфосфинотионилового эфира (Mpt-OAr), сложного дифенилфосфино-тионилового эфира (Dpt-OAr), арилметансульфонат, арилтолуолсульфонат или арил-2-формилбензолсульфонат.

В одном из воплощений в способах по данному изобретению используют N,N-бис(4-гидроксифенил)-4-пропилбензамид (II) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 4,4'-(2,3-диметил-бензилазандиил)дифенол (III) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 3-фтор-N-(4-фторфенил)-4-гидрокси-N-(4-гидроксифенил)бензамид (IV) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют N,N-бис(4-гидроксифенил)-2,3-диметилбензамид (V) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-нафтиламид (VI) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 3-фтор-4-гидрокси-N,N-бис(4-гидроксифенил)-бензамид (VII) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 4-((4-фторфенил)(4-гидроксибензил)амино)фенол (VIII) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 4-фтор-N-(4-гидрокси-фенил)-N-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил]-2-трифторметил-бензамид (IX) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют гидрохлоридную соль соединения IX (HCl соль соединения IX) или гидрохлорид 4-фтор-N-(4-гидрокси-фенил)-N-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил]-2-трифторметил-бензамида (X) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 3-фтор-4-гидрокси-N-(4-гидроксифенил)-N-фенилбензамид (XI) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию. В другом воплощении в способах по данному изобретению используют 3-фтор-N,N-бис-(4-гидрокси-фенил)-2-метил-бензамид (XII) или его изомер, фармацевтически приемлемую соль, фармацевтический продукт, полиморф, гидрат или любую их комбинацию.

В одном из воплощений в способах по данному изобретению используют "фармацевтически приемлемые соли" соединения, которые могут быть получены в результате взаимодействия соединения по изобретению с кислотой или основанием.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли аминов соединений согласно способам по данному изобретению могут быть получены из неорганической кислоты или из органической кислоты. В одном из воплощений, примерами неорганических солей аминов являются бисульфаты, бораты, бромиды, хлориды, гемисульфаты, гидроброматы, гидрохлораты, 2-гидроксиэтилсульфонаты (гидроксиэтансульфонаты), иодаты, иодиды, изотионаты, нитраты, персульфаты, фосфаты, сульфаты, сульфаматы (sulfamates), сульфанилаты, соли сульфоновых кислот (алкилсульфонаты, арилсульфонаты, галогензамещенные алкилсульфонаты, галогензамещенные арилсульфонаты), сульфонаты и тиоцианаты.

В одном из воплощений примеры органических солей аминов могут быть выбраны из классов алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых органических кислот, примерами которых являются ацетаты, аргинины, аспартаты, аскорбаты, адипаты, антранилаты, альгенаты (algenates), алкан-карбоксилаты, замещенные алкан-карбоксилаты, альгинаты, бензолсульфонаты, бензоаты, бисульфаты, бутираты, бикарбонаты, битартраты, карбоксилаты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклогексилсульфаматы, циклопентан-пропионаты, эдетаты кальция, камзилаты, карбонаты, клавуланаты, циннаматы, дикарбоксилаты, диглюконаты, додецилсульфонаты, дигидрохлориды, деканоаты, энантаты, этансульфонаты, эдетаты, эдизилаты, эстолаты, эзилаты, фумараты, формиаты, фториды, галактуронаты, глюконаты, глутаматы, гликоляты, глюкораты, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, глюцептаты, гликолиларсанилаты, глутараты, глутамат, гептаноаты, гексаноаты, гидроксималеаты, соли оксикарбоновых кислот, гексилрезорцинаты, гидроксибензоаты, гидроксинафтоаты, гидрофлуораты, лактаты, лактобионаты, лаураты, малаты, малеаты, метиленбис(бета-оксинафтоат), малонаты, манделаты, мезилаты, метансульфонаты, метилбромиды, метилнитраты, метилсульфонаты, монокалиймалеаты, мукаты, монокарбоксилаты, нитраты, нафталинсульфонаты, 2-нафталинсульфонаты, никотинаты, напсилаты, N-метилглюкамины, оксалаты, октаноаты, олеаты, памоаты, фенилацетаты, пикраты, фенилбензоаты, пивалаты, пропионаты, фталаты, пектинаты, фенилпропионаты, пальмитаты, пантотенаты, полигалактураты, пируваты, соли хинной кислоты, салицилаты, сукцинаты, стеараты, сульфанилаты, субацетаты, тартраты, теофиллинацетаты, п-толуолсульфонаты (тозилаты), трифторацетаты, терефталаты, таннаты, теоклаты, тригалогенацетаты, триэтиодид, трикарбоксилаты, ундеканоаты и валераты.

В одном из воплощений примеры неорганических солей карбоновых кислот или фенолов могут быть выбраны из солей аммония, щелочных металлов включая литий, натрий, калий, цезий; щелочно-земельных металлов, включая кальций, магний, алюминий; цинка, бария, холинов, четвертичного аммония.

В другом воплощении примеры органических солей карбоновых кислот или фенолов могут быть выбраны из солей аргинина, органических аминов, включая алифатические органические амины, алициклические органические амины, ароматические органические амины, бензатины, трет-бутиламины, бенетамины (N-бензилфенетиламин), дициклогексиламины, диметиламины, диэтаноламины, этаноламины, этилендиамины, гидрабамины, имидазолы, лизины, метиламины, меглумины, N-метил-D-глюкамины, N,N'-дибензилэтилендиамины, никотинамиды, органические амины, орнитины, пиридины, пиколины, пиперазины, прокаин, трис(гидроксиметил)метиламины, триэтиламины, триэтаноламины, триметиламины, трометамины и мочевины.

В одном из воплощений такие соли могут быть образованы традиционными способами, например, в результате приведения во взаимодействие продукта в форме свободного основания или свободной кислоты с одним или более эквивалентами соответствующей кислоты или основания в растворителе или среде, в которой соль является нерастворимой, или в растворителе, таком как вода, который удаляют в вакууме, или с использованием сублимационной сушки, или посредством обмена ионов имеющейся в наличии соли на другой ион на подходящей ионообменной смоле.

В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют фармацевтически приемлемую соль соединений по данному изобретению. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют фармацевтически приемлемую соль Соединений формулы IA, I-XII. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют соль амина Соединений формулы IA, I-XII по данному изобретению. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют соль фенола Соединений формулы IA, I-XII по данному изобретению.

В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют соединение формулы IA, I-XII и/или его изомер, фармацевтический продукт, гидрат, полиморф или их комбинацию в форме свободного основания, свободной кислоты, в незаряженной форме или в форме, не образующей комплекса.

В некоторых воплощениях данного изобретения соединения по изобретению содержат три фенильные группы, которые удерживают вместе посредством амидной связи. В одном из воплощений соединения по изобретению представляют собой незаряженные структуры. В другом воплощении соединения по изобретению представляют собой структуры в форме свободного основания. В другом воплощении соединения по изобретению представляют собой структуры в форме свободной кислоты. В другом воплощении соединения по изобретению представляют собой не образующие комплексов структуры. В другом воплощении соединения по изобретению представляют собой неионизованные структуры. В другом воплощении соединения по изобретению представляют собой фармацевтически приемлемые соли. В другом воплощении некоторые соединения по изобретению представляют собой соли гидрохлорида (HCl).

В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют изомер Соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют фармацевтический продукт Соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют гидрат Соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют полиморф Соединения формулы IA, I-XII. В одном из воплощений в способах по данному изобретению применяют метаболит Соединения формулы IA, I-XII. В другом воплощении в способах по данному изобретению применяют композицию, содержащую Соединение формулы IA, I-XII, как изложено в данном описании, или, в другом воплощении, комбинацию изомера, метаболита, фармацевтического продукта, гидрата, полиморфа Соединения формулы IA, I-XII.

В одном из воплощений термин "изомер" включает в себя оптические изомеры и аналоги, структурные изомеры и аналоги, конформационные изомеры и аналоги и тому подобное, но этим не ограничивается.

В одном из воплощений термин "изомер" предусматривает включение в себя оптических изомеров соединения. В одном из воплощений термин "изомер" предусматривает включение в себя стереоизомеров соединения. В соединениях по изобретению имеется амидная связь, которая может быть охарактеризована своей цис- или транс-изомеризацией. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любые оптически активные или стереоизомерные формы или их смеси, и считается, что их использование для любого применения находится в пределах объема данного изобретения.

В другом воплощении данное изобретение также включает гидраты соединения. В одном из воплощений термин "гидрат" относится к полугидрату, моногидрату, дигидрату, тригидрату или другим формам, которые известны в данной области техники.

Способы синтеза

Соединения формулы I или IA легко могут быть получены, например, в результате взаимодействия замещенного дифениламина с бензойной кислотой или бензоилгалогенидом в присутствии основания с получением бензамида. В одном из воплощений основанием является пиридин. В другом воплощении бензоилгалогенид представляет собой бензоилхлорид. В другом воплощении гидроксильный заместитель защищают во время реакции между дифениламином и бензойной кислотой или бензоилгалогенидом. В другом воплощении защитную группу гидроксила возможно удаляют на последней стадии. См. также публикацию заявки США №2009/00624231, которая включена во всей своей полноте посредством ссылки.

Например, Соединение формулы IA:

где R₁, R₂, R₃ и R₄, j и k такие, как описаны выше,

может быть получено способом, включающим приведение во взаимодействие

с получением

; и

приведение во взаимодействие дифениламина (3) с

в присутствии основания с получением

где если R₁, R₂, R₃ и R₄ независимо представляют собой ОН, O-Alk-R₅R₆ или O-Alk-гетероцикл, то R₁', R₂', R₃', R₄' представляют собой защищенную гидроксильную группу, причем защитную группу удаляют с получением свободного гидроксила, или, возможно, с последующим взаимодействием с Cl-Alk-гетероциклом или Cl-Alk-NR₅R₆ с получением Соединения формулы IA:

где если R₁, R₂, R₃ и R₄ независимо не являются группами ОН, O-Alk-NR₅R₆ или O-Alk-гетероцикл, то R₁', R₂', R₃' и R₄' представляют собой R₁, R₂, R₃ и R₄ соответственно.

Другой пример способа получения Соединения формулы IA:

где R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как описано выше, включает приведение во взаимодействие

в присутствии основания с получением

где если R₁, R₂, R₃ и R₄ независимо представляют собой ОН, O-Alk-R₅R₆ или O-Alk-гетероцикл, то R₁', R₂', R₃' и R₄' представляют собой защищенную гидроксильную группу, где защитную группу удаляют с получением свободного гидроксила, или, возможно, с последующим взаимодействием с Cl-Alk-гетероциклом или Cl-Alk-NR₅R₆ с получением соединения формулы IA:

В одном из примеров Соединение II получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

В другом примере Соединение III получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

В следующем примере соединение формулы IV:

может быть получено в результате взаимодействия

в присутствии основания с получением

с последующим удалением защиты с защищенных групп с получением Соединения IV:

где Р и Р' представляют собой одинаковые или разные защитные группы. В одном из примеров Соединение IV получают в соответствии с Примером 2 и Фиг.6.

В другом примере Соединение V получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

В следующем примере Соединение VI получают в соответствии с Примером 3 и Фиг.7.

В другом примере Соединение VII получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

В другом примере Соединение VIII получают в соответствии с Примером 4 и Фиг.5.

В другом примере Соединение IX получают в соответствии с Примером 5 и Фиг.8.

В другом примере гидрохлорид Соединения Х получают в соответствии с Примером 5 и Фиг.8.

В другом примере Соединение XI получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

В другом примере Соединение XII получают в соответствии с Примером 1 и Фиг.5.

Подходящие защитные группы гидроксила включают, например группы простого метилового эфира (метокси), простого бензилового эфира (бензилокси), простого метоксиметилового (MOM) эфира, простого бензоилоксиметилового (ВОМ) эфира, бензил, карбобензокси, простого метоксиэтоксиметилового (MEM) эфира, простого 2-(триметилсилил)этокси-метилового (SEM) эфира, простого метилтиометилового (МТМ) эфира, простого фенилтиометилового (РТМ) эфира, простого азидометилового эфира, простого цианометилового эфира, простого 2,2-дихлор-1,1-дифторэтилового эфира, простого 2-хлорэтилового эфира, простого 2-бромэтилового эфира, простого тетрагидропиранилового (ТНР) эфира, простого 1-этоксиэтилового (ЕЕ) эфира, простого фенацилового эфира, простого 4-бромфенацилового эфира, простого циклопропилметилового эфира, простого аллилового эфира, простого пропаргилового эфира, простого изопропилового эфира, простого циклогексилового эфира, простого трет-бутилового эфира, простого бензилового эфира, простого 2,6-диметилбензилового эфира, простого 4-метоксибензилового эфира, простого о-нитробензилового эфира, простого 2,6-дихлорбензилового эфира, простого 3,4-дихлорбензилового эфира, простого 4-(диметиламино)карбонилбензилового эфира, простого 4-метилсульфинил-бензилового эфира, простого 4-антрилметилового эфира, простого 4-пиколилового эфира, гептафтор-п-толил, простого тетрафтор-4-пиридилового эфира, простого триметилсилилового (TMS) эфира, простого трет-бутилдиметилсилилового (TBDMS) эфира, простого трет-бутилдифенилсилилового (TBDPS) эфира, простого триизопропилсилилового (TIPS) эфира, арилформиат, арилацетат, ариллевулинат, арилпивалат, арилбензоат, арил-9-флуоренкарбоксилат, арилметилкарбонат, 1-адамантил-карбонат, трет-бутилкарбонат, 4-метилсульфинилбензилкарбонат, 2,4-диметилпент-3-илкарбонат, арил-2,2,2-трихлорэтилкарбонат, арилбензилкарбонат, арилкарбамат, сложного диметилфосфинилового эфира (Dmp-OAr), сложного диметилфосфинотионилового эфира (Mpt-OAr), сложного дифенилфосфино-тионилового эфира (Dpt-OAr), арилметансульфонат, арилтолуолсульфонат или арил-2-формилбензолсульфонат.

Способы по данному изобретению включают применение соединений IA, I-XII, при этом способ получения соединений по изобретению включает приведение во взаимодействие дифениламина с бензоилхлоридом в присутствии основания. Подходящие основания включают, например пиридин, триэтиламин, K₂СО₃, Cs₂CO₃, Na₂CO₃, метиламин, имидазол, бензимидазол, гистидин, трибутиламин или любую их комбинацию. В одном из воплощений основание представляет собой пиридин.

Способы по данному изобретению включают применение Соединений IA, I-XII, при этом способ получения соединений по изобретению включает удаление защиты с защищенного гидроксила. В другом воплощении условия удаления защиты зависят от защитной группы. В некоторых воплощениях стадия удаления защиты включает гидрирование в присутствии Pd/C. В другом воплощении удаление защиты включает взаимодействие с BBr₃. В другом воплощении стадия удаления защиты включает взаимодействие с кислотой.

В следующих примерах Соединения IA, I-XII защищают в соответствии с Фиг.5-8 и Примерами 1-5.

Фармацевтические композиции

В некоторых воплощениях согласно данному изобретению предложены способы применения, которые включают введение композиции, содержащей описанные соединения. Как использовано в данном описании, "фармацевтическая композиция" означает "терапевтически эффективное количество" активного ингредиента, т.е. соединения по изобретению, вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Термин "терапевтически эффективное количество", как он использован в данном описании, относится к тому количеству, которое обеспечивает терапевтический эффект для заданного состояния и режима введения.

Как он использован в данном описании, термин "введение" относится к приведению субъекта в контакт с соединением по настоящему изобретению. Как использовано в данном описании, введение может быть осуществлено in vitro, т.е. в пробирке, или in vivo, т.е. в клетках или тканях живых организмов, например людей. В одном из воплощений настоящее изобретение охватывает введение соединений по настоящему изобретению субъекту мужского пола.

Согласно данному изобретению предложены, в других воплощениях, фармацевтические продукты соединений, изложенных в данном описании. Термин "фармацевтический продукт" относится, в других воплощениях, к композиции, подходящей для фармацевтического применения (фармацевтической композиции), например, которая изложена в данном описании.

Соединения по изобретению могут быть введены сами по себе или в качестве активного ингредиента композиции. Таким образом, настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции Соединений формулы I, содержащие, например, один или более фармацевтически приемлемых носителей.

Доступно огромное количество стандартных ссылок, в которых описаны методики приготовления различных композиций, подходящих для введения соединений по изобретению. Примеры возможных композиций и препаратов содержатся, например, в Handbook of Pharmaceutical Excipients (Американская фармацевтическая ассоциация, текущее издание); Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (редакторы Lieberman, Lachman и Schwartz, текущее издание, опубликовано Marcel Dekker, Inc.), а также Remington's Pharmaceutical Sciences (редактор Arthur Osol), 1553-1593 (текущее издание).

Способ введения и лекарственные формы тесно связаны с терапевтическими количествами соединений или композиций, которые являются желательными и эффективными для данного терапевтического применения.

Подходящие лекарственные формы включают таковые для перорального, ректального, сублингвального, мукозального, назального, офтальмического, подкожного, внутримышечного, внутривенного, трансдермального, спинального, интратекального, внутрисуставного, интраартериального, субарахноидального, внутрибронхиального, лимфатического и внутриматочного введения и другие лекарственные формы для системной доставки активных ингредиентов, но ими не ограничиваются. Предпочтительны композиции, подходящие для перорального введения.

Чтобы приготовить такие фармацевтические лекарственные формы, активный ингредиент можно смешать с фармацевтическим носителем в соответствии с традиционными методами смешивания фармацевтических средств. Носитель может находиться в большом разнообразии форм в зависимости от формы препарата, необходимого для введения.

При изготовлении композиций в составе пероральной лекарственной формы можно использовать любую из обычных фармацевтических сред. Так, для жидких пероральных препаратов, таких как, например суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки включают воду, гликоли, масла, спирты, корригенты, консерванты, красители и тому подобное. Для твердых пероральных препаратов, таких как, например, порошки, капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие вещества, разрыхлители и тому подобное. Благодаря легкости при их введении таблетки и капсулы представляют собой наиболее предпочтительную пероральную стандартную лекарственную форму. Если желательно, то с использованием стандартных методов на таблетки может быть нанесено сахарное или энтеросолюбильное покрытие.

Для парентеральных композиций носитель обычно будет содержать стерильную воду, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например ингредиенты, способствующие растворимости или сохранению. Также можно приготовить вводимые инъекцией растворы, в этом случае можно использовать соответствующие стабилизаторы.

В некоторых случаях может быть выгодно использовать активный агент в "векторизованной" форме, как например, путем инкапсулирования активного агента в липосому или другую инкапсулирующую среду или путем "фиксации" активного агента, например, в результате ковалентного связывания, хелатирования или образования ассоциативных координационных связей, на подходящей биологической молекуле, такой как молекулы, выбранные из белков, липопротеинов, гликопротеинов и полисахаридов.

Способы лечения по настоящему изобретению с применением композиций, подходящих для перорального введения, могут быть представлены способами с применением отдельных единиц, таких как капсулы, облатки, таблетки или пастилки, каждая из которых содержит предварительно определенное количество активного ингредиента в виде, например, порошка или гранул. Возможно, что может быть использована суспензия в водном растворе или неводной жидкости, такая как сироп, эликсир, эмульсия или вытяжка.

Таблетка может быть изготовлена путем прессования или формования или влажной грануляции, возможно вместе с одним или более чем одним вспомогательным ингредиентом. Прессованные таблетки могут быть изготовлены путем прессования в подходящей для этого машине, при этом активное соединение находится в свободно текучей форме, такой как порошок или гранулы, которое возможно смешивают, например, со связующим веществом, разрыхлителем, смазывающим веществом, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом или осветляющим агентом. Формованные таблетки, состоящие из смеси порошкообразного активного соединения с подходящим носителем, могут быть изготовлены формованием в подходящей для этого машине.

Сироп может быть изготовлен путем добавления активного соединения к концентрированному водному раствору сахара, например сахарозы, куда также может быть добавлен любой вспомогательный ингредиент(ы). Такой вспомогательный ингредиент(ы) может включать корригенты, подходящий консервант, агенты для замедления кристаллизации сахара и агенты для увеличения растворимости любого другого ингредиента, такие как многоатомный спирт, например глицерин или сорбит.

Препараты, подходящие для парентерального введения, могут содержать стерильную водную композицию активного соединения, которая предпочтительно изотонична крови реципиента (например, физиологический раствор). Такие препараты могут включать суспендирующие агенты и загущающие агенты и липосомы или другие системы, состоящие из микрочастиц, которые сконструированы для осуществления направленной доставки данного соединения к компонентам крови или к одному или более органам. Такие препараты могут быть представлены в однократной лекарственной форме или в лекарственной форме для многократного приема.

Парентеральное введение может относиться к любой подходящей форме системной доставки. Введение может быть, например внутривенным, интраартериальным, интратекальным, внутримышечным, подкожным, интраабдоминальным (например, внутрибрюшинным) и т.д., и может быть осуществлено посредством инфузионных насосов (внешних или имплантируемых) или любого другого подходящего средства, соответствующего желаемому способу введения.

Назальные композиции и другие композиции для введения распылением на слизистые (например, ингалируемые формы) могут содержать очищенные водные растворы активных соединений с консервантами и изотоническими агентами. Предпочтительно, чтобы рН и изотоническое состояние таких композиций были подведены до величин, совместимых с назальной или другими слизистыми оболочками. Альтернативно, они могут быть в форме тонкоизмельченных твердых порошков, взвешенных в газообразном носителе. Такие композиции можно доставлять с использованием любого подходящего средства или способа, например, посредством небулайзера, атомайзера, дозирующего ингалятора или тому подобного.

Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозитория с подходящим носителем, таким как масло какао, гидрогенизированные жиры или гидрогенизированные жирные карбоновые кислоты.

Трансдермальные композиции могут быть приготовлены путем введения активного агента в тиксотропный или гелеобразный носитель, такой как целлюлозная среда, например метилцеллюлоза или гидроксиэтилцеллюлоза, при этом полученную композицию затем помещают в трансдермальное устройство, адаптированное для гарантированного обеспечения дермального контакта с кожей пользователя.

Помимо вышеупомянутых ингредиентов композиции по данному изобретению дополнительно могут включать один или более чем один вспомогательный ингредиент(ы), выбранный из, например, разбавителей, буферов, корригентов, связующих веществ, разрыхлителей, поверхностно-активных веществ, загустителей, смазывающих веществ, консервантов (включая антиоксиданты) и тому подобного.

Композиции по настоящему изобретению могут иметь профиль немедленного высвобождения, непрерывного высвобождения, высвобождения с задержкой начала действия или любой другой профиль высвобождения, известный специалисту в данной области.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложены способы а) уменьшения уровней общего тестостерона в сыворотке; b) снижения уровней свободного тестостерона в сыворотке крови путем уменьшения лютеинизирующего гормона (LH) или независимо от уменьшения гормона LH у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы, включающие введение пероральной композиции, содержащей Соединение формулы IA, I-XII. В дополнительных воплощениях в способах по данному изобретению применяют пероральную композицию, содержащую Соединение формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы IX, формулы X, формулы XI или формулы XII.

В одном из воплощений согласно данному изобретению предложен способ лечения рака предстательной железы путем уменьшения уровней LH или независимо от уменьшения уровней LH у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы, включающий введение пероральной композиции, содержащей Соединение формулы IA, I-XII, В дополнительных воплощениях согласно данному изобретению предложены способы лечения рака предстательной железы путем уменьшения уровней LH или независимо от уменьшения уровней LH у субъекта мужского пола, имеющего рак предстательной железы, включающие введение пероральной композиции, содержащей Соединение формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы IX, формулы X, формулы XI или формулы XII.

Следует понимать, что данное изобретение охватывает любое воплощение соединения, которое изложено в данном описании и которое в некоторых воплощениях называют как "соединение по изобретению".

В одном из воплощений способы по данному изобретению могут включать введение соединения по изобретению в различных дозировках. В одном из воплощений соединение по изобретению вводят в дозировке 1-1500 мг в сутки. В дополнительных воплощениях соединение по изобретению вводят в дозе 1-10 мг в сутки, 3-26 мг в сутки, 3-60 мг в сутки, 3-16 мг в сутки, 3-30 мг в сутки, 10-26 мг в сутки, 15-60 мг в сутки, 50-100 мг в сутки, 50-200 мг в сутки, 150-300 мг в сутки, 20-50 мг в сутки, 5-50 мг в сутки, 200-500 мг в сутки, 150-500 мг в сутки, 200-1000 мг в сутки, 300-1500 мг в сутки или 100-1000 мг в сутки.

В одном из воплощений способы по данному изобретению могут включать введение соединения по изобретению в различных дозировках. В одном из воплощений соединение по изобретению вводят в дозировке 0,1 мг/кг/сутки. В дополнительных воплощениях соединение по изобретению вводят в дозировке от 0,2 до 30 мг/кг/сутки или 0,2 мг/кг/сутки, 0,3 мг/кг/сутки, 1 мг/кг/сутки, 3 мг/кг/сутки, 5 мг/кг/сутки, 10 мг/кг/сутки, 20 мг/кг/сутки или 30 мг/кг/сутки.

В одном из воплощений способы по данному изобретению предложены для применения фармацевтической композиции, содержащей Соединение формулы IA, I-XII. В дополнительных воплощениях способы по данному изобретению предложены для применения фармацевтической композиции, содержащей Соединение формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы IX, формулы X, формулы XI или формулы XII.

В некотором воплощении фармацевтическая композиция представляет собой твердую лекарственную форму. В другом воплощении фармацевтическая композиция представляет собой таблетку. В другом воплощении фармацевтическая композиция представляет собой капсулу. В другом воплощении фармацевтическая композиция представляет собой раствор. В другом воплощении фармацевтическая композиция представляет собой трансдермальный пластырь.

В одном из воплощений применение соединения по изобретению или композиции, содержащей данное соединение, будет использовано в ингибировании, подавлении, усилении или стимуляции желаемого ответа у субъекта, что очевидно специалисту в данной области. В другом воплощении композиции также могут содержать дополнительные активные ингредиенты, активность которых полезна для конкретного применения, для которого вводят данное соединение по изобретению.

При введении млекопитающим и в частности, людям, ожидается, что врач определит фактическую дозировку и продолжительность лечения, которая будет наиболее подходить для индивидуума и может варьировать в зависимости от возраста, массы, наследственности и/или ответа конкретного индивидуума.

В некоторых воплощениях любая из композиций по данному изобретению будет содержать соединение по изобретению в любой форме или любом воплощении, которые изложены в данном описании. В некоторых воплощениях в состав любой из композиций по данному изобретению будет входить соединение по изобретению в любой форме или любом воплощении, которые изложены в данном описании. В некоторых воплощениях композиции по данному изобретению будут состоять по существу из соединения по изобретению в любой форме или любом воплощении, которые изложены в данном описании. В некоторых воплощениях термин "содержат" относится к включению указанного активного агента, такого как соединение по изобретению, а также включению других активных агентов и фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов, смягчающих веществ, стабилизаторов и т.д., таких, которые известны в фармацевтической промышленности. В некоторых воплощениях термин "состоящий по существу из" относится к композиции, активным ингредиентом которой является только указанный активный ингредиент, однако могут быть включены и другие соединения, предназначенные для стабилизации, сохранения и т.д. данной композиции, но не участвующие непосредственно в терапевтическом действии указанного активного ингредиента. В некоторых воплощениях термин "состоящий по существу из" может относиться к компонентам, которые способствуют высвобождению активного ингредиента. В некоторых воплощениях термин "состоящий" относится к композиции, которая содержит активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент,

Следует понимать, что любое применение любого из Соединений, которые изложены в данном описании, можно использовать в лечении любого заболевания, расстройства или состояния, которые изложены в данном описании, и оно представляет собой воплощение данного изобретения. В одном из воплощений соединения представляют собой соединение в форме свободного основания, свободной кислоты, в незаряженной форме или в форме, не образующей комплекса.

Следующие далее примеры представлены для более полной иллюстрации предпочтительных воплощений изобретения. Их никоим образом не следует истолковывать как ограничивающие широкий объем изобретения.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1

Общие методики синтеза Соединений формул II-XII и синтетических промежуточных соединений

Органические растворители, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты и т.д., которые могут быть использованы в композициях, изложенных в данном описании, обычно доступны из коммерческих источников. Например, ПЭГ-300, полисорбат 80, Captex™ 200, Capmul™ MCM C8 можно приобрести, например, в Dow Chemical Company (Midland, Ml), ICI Americas, Inc. (Wilmington, DE) или Abitec Corporation (Janesville, WI).

Лиганды рецепторов эстрогенов, изложенные в данном описании, могут быть получены разными способами, хорошо известными специалистам в данной области. Например, лиганды рецепторов эстрогенов, изложенные в данном описании, могут быть получены способами синтеза, описанными в заявке на патент США №2009/0062341; тем самым описание каждого их них включено во всей своей полноте посредством ссылки.

Общий синтез производных N,N-бис-арилбензамидов

Общий синтез диариланилинов (Фиг.5). Ариламин (1,5 эквивалента), арилиодид (1 эквивалент), K₂СО₃ (2 эквивалента), CuI (0,1 эквивалента) и L-пролин (0,2 эквивалента) смешивали вместе и растворяли в безводном DMSO при комнатной температуре. Затем реакционную смесь перемешивали и нагревали до 90°С в течение 28 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и гидролизовали водой. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. EtOAc-содержащий слой отделяли, промывали рассолом и сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердый остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель), используя смесь 5% EtOAc/гексаны в качестве элюента, что позволило получить соответствующий диариланилин.

Бис-(4-метоксифенил)амин (1а): бледно-желтое твердое вещество, выход 73%. Т.пл. 98,6-99,0°С. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 6.93-6.81 (m, 8Н), 5.37 (s, br, 1H), 3.78 (s, 6H). MS m/z 228,4 (M-H)⁺.

N-(4-Метоксифенил)-фениламин (1b): бледно-желтое твердое вещество, выход 70%. Т.пл. 106,3-106,5°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.24-7.18 (m, 3Н), 7.08-7.06 (m, 2Н), 6.92-6.84 (m, 4H), 5.61 (s, br, 1H), 3.79 (s, 3Н). MS m/z 200,1 (M+H)⁺.

N-(4-Фторфенил)-N-4-метоксифениламин (1с): бледно-желтое твердое вещество, выход 54%. Т.пл. 60,6-61,0°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.01-6.83 (m, 8Н), 3.78 (s, 3Н). MS m/z 217 (M)⁺.

N-(4-Бензилоксифенил)-N-4-метоксифениламин (1d): бледно-желтое твердое вещество, выход 54%. Т.пл. 108,0-108,4°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.34-7.08 (m, 5H), 6.90-6.81 (s, 3Н), 3.78 (s, 3Н). MS m/z 306 (М+Н)⁺.

Общий синтез бензамидов. Ариланилин (1 эквивалент), бензоилхлорид (1,3 эквивалента) и пиридин (6 эквивалентов) смешивали вместе и растворяли в безводном THF (тетрагидрофуране) при комнатной температуре. Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 24 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и гидролизовали, добавляя 2 н. раствор HCl. Раствор экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃ для удаления избытка кислоты, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя EtOAc/гексаны (3/7 об./об.), что позволило получить соединения соответствующих бензамидов.

3-Фтор-N-(4-фторфенил)-4-метокси-N-(4-метоксифенил)бензамид (2а): желтое твердое вещество. Т.пл. 54-56°С. ¹H ЯМР (CDCl₃/TMS (тетраметилсилан)) δ 7.24-7.11 (m, 4H), 7.05-6.97 (m, 4H), 6.85-6.78 (m, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.79 (s, 3H). MS (ESI (ионизация электрораспылением)) m/z 370,1 [M+H]⁺.

4-Фтор-N,N-бис(4-метоксифенил)-2-(трифторметил)бензамид (2b): бесцветное масло, выход 84,2%. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.34-7.26 (m, 4H), 7.09-7.01 (m, 3H), 6.91 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.87 (d, 2H, J=8,7 Гц), 3.80 (s, 3H), 3.71 (s, 3H). MS m/z 442,1 (M+Na)⁺.

4-Метокси-N-(4-метоксифенил)-N-(4-фторфенил)-бензамид (2с): белое твердое вещество, выход 97%. Т.пл. 133,5-134,5°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) 6 8.11-6.66 (m, 15H), 3.74 (s, 3H), 3.73 (s, 3H). MS m/z 384 (M+H)⁺.

N-(4-ПЛетоксифенил)-N-(4-бензилоксифенил)-2-нафтиламид (2d): белое твердое вещество, выход 58%. Т.пл. 174,9-175,5°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8.04 (s, 1H), 7.77-7.74 (m, 2H), 7.64-7.61 (m, 1H), 7.51-7.43 (m, 4H), 7.40-7.31 (m, 4H), 7.13-7.10 m, 4H), 6.88-6.78 (m, 4H), 4.99 (s, 2H), 3.74 (s, 3H). MS m/z 460 (M+H)⁺.

4-Фтор-N,N-бис(4-метоксифенил)-2-(трифторметил)бензамид (2е): бесцветное масло, выход 84,2%. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.34-7.26 (m, 4H), 7.09-7.01 (m, 3H), 6.91 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.87 (d, 2H, J=8,7 Гц), 3.80 (s, 3H), 3.71 (s, 3H). MS m/z 442,1 (M+Na)⁺.

Общая методика деметилирования производных бензамидов с использованием BBr₃. Соединение метоксибензамида растворяли в безводном CH₂Cl₂. По каплям добавляли BBr₃ (1,0 М раствор в CH₂Cl₂) при 0°С. Реакционный раствор медленно нагревали до комнатной температуры и оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 0°С в ледяной бане и гидролизовали, добавляя воду. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. Органический слой отделяли; водный слой экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали рассолом и сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя СН₃ОН/CH₂Cl₂ (1/9 об./об.), что позволило получить соединения соответствующих фенолов.

4-Фтор-N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-(трифторметил)бензамид (3а): белое твердое вещество, выход 92,5%. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.55 (s, 1H), 9.53 (s, 1H), 7.69-7.58 (m, 2H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.18 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.93 (d, 4H, J=8,7 Гц), 7.03 (d, 2H, J=8,4 Гц), 6.78 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.57 (d, 2H, J=8,7 Гц). MS m/z 392,1 (M+H)⁺.

Следующие далее соединения синтезировали, как изложено в данном описании выше, определяли характеристики и результаты обобщали в Таблице 1: N,N-бис(4-гидроксифенил)-4-пропилбензамид (II); 3-фтор-N-(4-фторфенил)-4-гидрокси-N-(4-гидроксифенил)бензамид (IV); N,N-бис(4-гидроксифенил)-2,3-диметилбензамид (V); 3-фтор-4-гидрокси-N,N-бис(4-гидроксифенил)-бензамид (VII); 3-фтор-4-гидрокси-N-(4-гидроксифенил)-N-фенилбензамид (XI); и 3-фтор-N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-метилбензамид (XII).

Общие методики дебензилирования бензилоксифенил-бензамидов. Соединение растворяли в EtOH в сосуде для гидрирования емкостью 250 мл. К раствору добавляли порошок Pd/C (5 моль%). Реакционный сосуд устанавливали в аппарат для гидрирования под давлением газообразного водорода 20 ф/кв. дюйм (138 кПа). За ходом реакции следили с использованием ТСХ (тонкослойной хроматографии) до исчезновения исходного вещества. Затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя гексаны/EtOAc (3/2 об./об.), что позволило получить желаемый продукт.

Следующие далее соединения синтезировали, как изложено в данном описании выше, определяли характеристики и результаты обобщали в Таблице 1: N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-нафтиламид (VI).

Общие методики восстановления бензамидов со снятой защитой. Соединения бензамидов растворяли в 20 мл безводного THF при комнатной температуре. С помощью шприца при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли Н₃В(SMe₂). Реакционный раствор перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации в течение 6 часов. Затем реакцию гасили, добавляя 10 мл МеОН при 0°С. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток подвергали колоночной флэш-хроматографии (силикагель, CH₂Cl₂/МеОН=9/1 об./об.), что позволило получить желаемый продукт.

Следующие далее соединения синтезировали, как изложено в данном описании выше, определяли характеристики и результаты обобщали в Таблице 1: 4,4'-(2,3-диметилбензилазандиил)дифенол (III); 4-((4-фторфенил)(4-гидроксибензил)амино)фенол (VIII).

Общий синтез O-(2-пиперидин-1-илэтокси)-бензамидов и аналогов. К раствору аналога гидроксифенилсодержащего бензамида (1 эквивалент) в ацетоне добавляли K₂СО₃ (3 эквивалента) и соль гидрохлорида N-хлорэтилпиперидина (1,2 эквивалента). Раствор нагревали до температуры дефлегмации в течение 6 часов. Раствор упаривали досуха. Остаток гидролизовали, добавляя воду, и затем экстрагировали этилацетатом. Органические слои отделяли и сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией, используя метиленхлорид/метанол (9/1 об./об.), с получением желаемого соединения. Соли гидрохлорида получали, добавляя HCl в Et₂O к метанольному раствору соединений с последующим выпариванием растворителей.

Следующие далее соединения синтезировали, как изложено в данном описании выше, определяли характеристики и результаты обобщали в Таблице 1: 4-фтор-N-(4-гидроксифенил)-N-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)-2-(трифторметил)бензамид (IX); и 4-фтор-N-(4-гидроксифенил)-N-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)-2-(трифторметил)бензамида гидрохлорид (X), который представляет собой соль HCl соединения IX.

ТАБЛИЦА 1.
Физические характеристики соединений формул II-XII
№ соед.	Структура	Физические характеристики
II		¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.46 (s, 2H, 2×ОН), 7.27-7.26 (m, 2H, ArH), 7.06-7.04 (m, 2H, ArH), 6.99-6.97 (m, 4H, ArH), 6.66-6.65 (m, 4H, ArH), 2.50 (s, 2H, CH₂, перекрывающийся с пиком DMSO), 1.53-1.52 (m, 2H, CH₂), 0,82 (t, J=7,33 Гц, 3Н, СН₃). m/z 346,0 (М-Н)^-.
III		Рыжевато-коричневая пена, выход 41%. Т.пл. 147-150°С. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 8.92 (s, 2H), 7.07 (d, J=7,33 Гц, 1 Н), 7.00-6.94 (m, 2H), 6.76-6.72 (m, 4H), 6.63-6.59 (m, 4H), 4.72 (s, 2H), 2.23 (s, 3Н), 2.16 (s, 3Н). m/z 320,2 (M+H)⁺.
IV		Рыжевато-коричневое твердое вещество, выход 92%. Т.пл. 110-112°С. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 10.14 (bs, 1H),9.71 (bs, 1H), 7.26-7.11 (m, 5H), 7.05-6.99 (m, 3Н), 6.78 (t, J=8,61 Гц, 2H), 6.68 (d, J=8,68 Гц, 2H). m/z 364,1 (M+Na)⁺.
V		¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.47 (bs, 2H, 2×ОН), 7.18 (d, J=8,30 Гц, 2Н, ArH), 7.06 (d, J=7,08 Гц, 1Н, ArH), 7.00-6.92 (m, 4H, ArH), 6.78 (d, J=8,30 Гц, 2Н, ArH), 6.51 (d, J=8,06 Гц, 2Н, ArH), 2.22 (s, 3Н, СН₃), 2.15 (s, 3Н, СН₃). m/z 334,3 (М+Н)⁺.
VI		Белое твердое вещество, выход 70%. Т.пл. 264,3-265,2°С (с разложением). ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 500 МГц) δ 9.46 (s, 2Н), 7.98 (s, 1Н), 7.85-7.75 (m, 2Н), 7.75-7.73 (m, 2Н), 7.54-7.48 (m, 2Н), 7.45-7.43 (m, 1Н), 7.05 (s, 4H), 6.66 (s, 4H). m/z 356 (М+Н)⁺.
VII		¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 10.25 (bs, 1H, ОН), 9.48 (bs, 2Н, 2×ОН), 7.12-6.95 (m, 6H, ArH), 6.80-6.65 (m, 5Н, ArH). m/z 338,0 (М-Н)^-.
VIII		Желтое масло, выход 92%. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 500 МГц) δ 9.29 (s, 1Н), 9.24(s, 1Н), 7.09 (d, 2Н, J=8,3 Гц), 6.98 (d, 2Н, J=9,0 Гц), 6.94-6.91 (m, 2Н), 6.73 (d, 2Н, J=9,0 Гц), 6.68-6.64 (m, 4H), 4.70 (s, 2Н). m/z 307,8 (М-Н)^-.
IX и Х (соль HCl соединения IX)		Белое твердое вещество, выход 57,7%. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.57 (s, 1Н), 7.71-7.68 (m, 2Н), 7.47-7.44 (m, 1 H), 7.28 (d, 1H, J=9,0 Гц), 7.18 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.13 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.05 (d, 1H, J=8,4 Гц), 6.97 (d, 1H, J=9,0 Гц), 6.80-6.76 (m, 2Н), 6.57 (d, 1Н, J=8,7 Гц), 4.06 (t, 1 H, J=6,0 Гц), 3.93 (t, 1H, J=6,0 Гц), 2.66 (t, 1 H, J=5,7 Гц), 2.55 (t, 1H, J=5,4 Гц), 2.44 (s, 2Н), 2.36 (s, 2Н), 1.49-1.37 (m, 6H). m/z 501,0 (М-Н)^-.
XI		¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.95 (bs, 1Н, ОН), 9.47 (bs, 2Н, 2×ОН), 7.02-6.95 (m, 6H, ArH), 6.75-6.72 (m, 1Н, ArH), 6.68-6.66 (m, 4H, ArH). m/z 324,0 (M+H)⁺.
XII		Бледно-красное твердое вещество. Выход 72,0%. Т.пл. > 240°С. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.50 (bs, 2H), 7.19-6.79 (m, 7H), 6.61 (d, J=8,93 Гц, 2H), 6.53 (d, J=7,79 Гц, 2H), 2.23 (s, 3H). m/z 336,0 (M-H)^-.

ПРИМЕР 2

Синтез Соединения формулы IV (Фиг.6)

Стадия 1: синтез 4-фтор-N-(4-метоксифенил)анилина (1с)

4-Фторанилин (78,63 г; 0,708 моль), 4-йоданизол (138,00 г; 0,590 моль), безводный K₂СО₃ (122,23 г; 0,884 моль), CuI (11,23 г; 58,96 ммоль) и L-пролин (13,58 г; 0,118 моль) смешивали вместе в высушенной трехгорлой круглодонной колбе емкостью 1 л, снабженной стержнем для перемешивания, обратным холодильником и входным отверстием для аргона. Добавляли безводный DMSO (300 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали и нагревали до 90°С в течение 20 часов в атмосфере аргона. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и гидролизовали водой (300 мл). Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc (200 мл). EtOAc-содержащий слой отделяли. Водный слой экстрагировали 100 мл EtOAc. EtOAc-содержащие слои объединяли, промывали рассолом (2×100 мл) и сушили над безводным MgSO₄ (50 г). Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток в виде коричневого масла очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, гексаны/EtOAc=9/1 об./об.), что позволило получить продукт 4-фтор-N-(4-метоксифенил)анилин (1с) в виде желтого твердого вещества (99,70 г); выход 77,8%. Т.пл. 46-48°С. MS (ESI) m/z 218,1 [M+Н]⁺. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 7.77 (bs, 1H), 7.03-6.98 (m, 4H), 6.93-6.82 (m, 4H), 3.70 (s, 3H).

Стадия 2: синтез 3-фтор-N-(4-фторфенил)-4-метокси-N-(4-метоксифенил) бензамида (2а)

4-Фтор-N-(4-метоксифенил)анилин (1с) (90,78 г; 0,418 моль) и 3-фтор-4-метоксибензоилхлорид (94,55 г; 0,501 моль) смешивали вместе и растворяли в безводном THF (200 мл) в высушенной трехгорлой круглодонной колбе емкостью 1 л, снабженной стержнем для перемешивания, обратным холодильником и входным отверстием для аргона. С помощью шприца при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли безводный пиридин (132,22 г; 1,672 моль). Реакционную смесь перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для удаления соли пиридина. Раствор концентрировали для удаления растворителя THF. Остаток в виде масла промывали 200 мл 2 н. раствора HCl и экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным водным раствором Na₂CO₃ (150 мл) для удаления избытка бензоилхлорида и кислоты, сушили над MgSO₄ (50 г), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая масло. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя силикагель и CH₂Cl₂/ацетон (50/1 об./об.), что позволило получить чистое соединение соответствующего бензамида в виде желтого твердого вещества. Т.пл. 54-56°С. MS (ESI) m/z 370,1 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (CDCl₃/TMS) δ 7.24-7.11 (m, 4H), 7.05-6.97 (m, 4Н), 6.85-6.78 (m, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.79 (s, 3H).

Стадия 3: синтез 3-фтор-N-(4-фторфенил)-4-гидрокси-N-(4-гидроксифенил)бензамида (IV)

Соединение 3-фтор-N-(4-фторфенил)-4-метокси-N-(4-метоксифенил)-бензамид (2а) (138,0 г; 0,374 моль) растворяли в безводном CH₂Cl₂ (600 мл) при комнатной температуре (КТ) в атмосфере аргона. По каплям с помощью шприца с перемешиванием добавляли BBr₃ (374,75 г; 1,496 моль) при 0°С в ледяной бане в атмосфере аргона. Реакционный раствор оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Затем раствор выливали в 1 л ледяной воды с перемешиванием. Эту суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Белый осадок отфильтровывали, промывали водой (2×100 мл) и сушили под вакуумом. Слой CH₂Cl₂ отделяли, сушили над безводным MgSO₄ (50 г), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении досуха. Белый осадок и остаток из раствора CH₂Cl₂ объединяли и очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/ацетон/МеОН=90/7/3 об./об./об.), получая светловато-рыжевато-коричневое твердое вещество, которое дважды перекристаллизовывали из горячего раствора EtOAc/гексаны, что позволило получить белое кристаллическое твердое вещество (104,0 г); выход 81,6%. Т.пл. 110-112°С. MS (ESI) m/z 364,1 [M+Na]⁺. ¹H ЯМР (DMSO-d₆) δ 10.14 (bs, 1Н),9.71 (bs, 1H), 7.25-7.11 (m, 5H), 7.05-6.99 (m, 3Н), 6.78 (t, J=8,6 Гц, 1Н), 6.68 (d, J=8,7 Гц, 2H).

ПРИМЕР 3

Синтез соединения формулы VI (Фиг.7)

Синтез 4-(бензилокси)-N-(4-метоксифенил)анилина (1d) 4-Бензилоксианилин (16,6 г; 83,31 ммоль), 4-йоданизол (15,0 г; 64,09 ммоль), K₂СО₃ (17,72 г; 128,18 ммоль), CuI (1,22 г; 6,41 ммоль) и L-пролин (1,48 г; 12,82 ммоль) смешивали вместе и растворяли в безводном DMSO (120 мл) при комнатной температуре. Затем реакционную смесь перемешивали и нагревали до 90°С в течение 48 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и гидролизовали водой. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. EtOAc-содержащий слой отделяли, промывали рассолом, сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердый остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель), используя EtOAc/гексаны (1/9 об./об.), что позволило получить соответствующий диариланилин в виде желтого твердого вещества (9,8 г); выход 50%. Т.пл. 108,0-108,4°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.34-7.25 (m, 5Н), 6.90-6.81 (m, 8H), 5.02 (s, 2H), 3.78 (s, 3H). MS m/z 306 (M+H)⁺.

Синтез N-(4-бензилоксифенил)-N-(4-метоксифенил)-2-нафтамида(2d) Один эквивалент 4-(бензилокси)-N-(4-метоксифенил)анилина (0,80 г; 2,62 ммоль) смешивали с 1,5 эквивалента 2-нафтоилхлорида (0,75 г; 3,93 ммоль) и 4 эквивалентами пиридина (Ру) (0,83 г; 10,48 ммоль) в высушенной трехгорлой круглодонной колбе, снабженной магнитным стержнем для перемешивания и обратным холодильником. Смесь растворяли в безводном THF (30 мл) и нагревали до температуры дефлегмации в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя силикагель и EtOAc/гексаны (3/7 об./об.), что позволило получить чистое соединение соответствующего нафтамида в виде белого твердого вещества (0,70 г); выход 58%. Т.пл. 174,9-175,5°С. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8.04 (s, 1H), 7.77-7.74 (m, 2H), 7.64-7.61 (m, 1H), 7.51-7.43 (m, 4H), 7.40-7.31 (m, 4H), 7.13-7.10 (m, 4H), 6.88-6.78 (m, 4H), 4.99 (s, 2H), 3.74 (s, 3H). MS m/z460 (M+H)⁺.

Синтез N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-нафтиламида (VI)

Соединение N-(4-бензилоксифенил)-N-(4-метоксифенил)-2-нафтамид (2d) (0,50 г; 1,09 ммоль) растворяли в безводном CH₂Cl₂ (30 мл) при комнатной температуре. По каплям с помощью шприца с перемешиванием добавляли BBr₃ (3,26 мл 1,0 М раствора в CH₂Cl₂; 3,26 ммоль) при комнатной температуре. Реакционный раствор оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 0°С в ледяной бане и гидролизовали, добавляя воду. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. Органический слой отделяли; водный слой дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли, промывали рассолом и сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя силикагель и СН₃ОН/CH₂CH₂ (1/9 об./об.), что позволило получить желаемое чистое соединение фенола в виде белого твердого вещества (0,27 г); выход 70%. Т.пл. 264,3-265,2°С (с разложением). ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 500 МГц) δ 9.46 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.85-7.75 (m, 2H), 7.75-7.73 (m, 2H), 7.54-7.48 (m, 2H), 7.45-7.43 (m, 1H), 7.05 (s, 4H), 6.66 (s, 4H). MS m/z356 (M+H)⁺.

ПРИМЕР 4

Синтез Соединения формулы VIII

Синтез 4-((4-фторфенил)(4-гидроксибензил)амино)фенола (VIII)

Соединение N-(4-фторфенил)-4-гидрокси-N-(гидроксифенил)бензамид (0,30 г; 0,93 ммоль) растворяли в 20 мл безводного THF при комнатной температуре. С помощью шприца добавляли Н₃В(SMe₂) (1,86 мл 2 М раствора в THF; 3,71 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Реакционный раствор перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации в течение 6 часов. Затем реакцию гасили, добавляя 10 мл МеОН при 0°С. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток подвергали колоночной флэш-хроматографии (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH=9/1 об./об.), получая желтое масло (0,26 г); выход 92%. ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 500 МГц) δ 9.29 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.09 (d, 2H, J=8,3 Гц), 6.98 (d, 2H, J=9,0 Гц), 6.94-6.91 (m, 2H), 6.73 (d, 2H, J=9,0 Гц), 6.68-6.64 (m, 4H), 4.70 (s, 2H). MS m/z 307,8 (M-H)^-.

ПРИМЕР 5 Синтез Соединений формул IX и Х (Фиг.8)

Синтез диариланилинов. Ариламин (1,5 эквивалента), арилиодид (1 эквивалент), K₂СО₃ (2 эквивалента), CuI (0,1 эквивалента) и L-пролин (0,2 эквивалента) смешивали вместе и растворяли в безводном DMSO при комнатной температуре. Затем реакционную смесь перемешивали и нагревали до 90°С в течение 28 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и гидролизовали водой. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. EtOAc-содержащий слой отделяли, промывали рассолом, сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердый остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель), используя EtOAc/гексаны (3/7 об./об.) в качестве растворителя, что позволило получить соответствующий диариланилин. Бис-(4-метоксифенил)амин (1а): бледно-желтое твердое вещество; выход 73%. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 6.93-6.81 (m, 8H), 5.37 (s, br, 1H), 3.78 (s, 6H). MS m/z 228,4 (M-H)⁺.

Синтез 4-фтор-N,N-бис(4-метоксифенил)-2-(трифторметил)бензамида (2е)

Смешивали 1 эквивалент бис-(4-метоксифенил)амина (1а) (0,73 г; 3,18 ммоль) с 1,2 эквивалента 4-фтор-2-трифторметилбензоилхлорида (0,87 г; 3,82 ммоль) и 6 эквивалентами пиридина (1,51 г; 19,08 ммоль) в высушенной трехгорлой круглодонной колбе, снабженной магнитным стержнем для перемешивания и обратным холодильником. Смесь растворяли в безводном THF (20 мл) и нагревали до 90°С в течение 20 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя силикагель и EtOAc/гексаны (3/7 об./об.), что позволило получить чистое соединение соответствующего бензамида в виде бесцветного масла (1,12 г); выход 84,2%. ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.34-7.26 (m, 4Н), 7.09-7.01 (m, 3Н), 6.91 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.87 (d, 2H, J=8,7 Гц), 3.80 (s, 3Н), 3.71 (s, 3Н). MS m/z 442,1 (M+Na)⁺.

Синтез 4-фтор-N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-(трифторметил)бензамида (3а)

Соединение 4-фтор-N,N-бис(4-метоксифенил)-2-(трифторметил)бензамид (2е) (1,00 г; 2,38 ммоль) растворяли в безводном CH₂Cl₂ (30 мл) при комнатной температуре. С помощью шприца по каплям добавляли BBr₃ (10 мл 1,0 М раствора в CH₂Cl₂; 10,0 ммоль) при комнатной температуре. Реакционный раствор оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Смесь охлаждали до 0°С в ледяной бане и гидролизовали, добавляя воду. Чтобы осуществить разделение раствора, добавляли EtOAc. Органический слой отделяли; водный слой дважды экстрагировали EtOAc. Органические слои объединяли, промывали рассолом и сушили над безводным MgSO₄. Растворитель удаляли под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией, используя силикагель и СН₃ОН/CH₂Cl₂ (1/9 об./об.), что позволило получить желаемое чистое соединение фенола в виде белого твердого вещества (0,86 г); выход 92,5%. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) 59.55 (s, 1Н), 9.53 (s, 1H), 7.69-7.58 (m, 2H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.18 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.93 (d, 4Н, J=8,7 Гц), 7.03 (d, 2H, J=8,4 Гц), 6.78 (d, 2H, J=8,7 Гц), 6.57 (d, 2H, J=8,7 Гц). MS m/z 392,1 (M+H)⁺.

Синтез 4-фтор-N-(4-гидроксифенил)-N-[4-(2-пиперидин-1-ил)-этокси)фенил]-2-(трифторметил)бензамида (IX)

К раствору 4-фтор-N,N-бис(4-гидроксифенил)-2-(трифторметил)бензамида (3а) (0,61 г; 1,56 ммоль) в ацетоне добавляли K₂CO₃ (1,29 г; 9,36 ммоль) и соль гидрохлорида N-хлорэтилпиперидина (0,34 г; 1,87 ммоль). Раствор нагревали до температуры дефлегмации в течение 20 часов. Раствор упаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель; метиленхлорид/метанол=9/1 об./об.), получая желаемое соединение в виде белого твердого вещества (0,45 г); выход 57,7%. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 9.57 (s, 1H), 7.71-7.68 (m, 2H), 7.47-7.44 (m, 1H), 7.28 (d, 1H, J=9,0 Гц), 7.18 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.13 (d, 1H, J=8,7 Гц), 7.05 (d, 1H, J=8,4 Гц), 6.97 (d, 1H, J=9,0 Гц), 6.80-6.76 (m, 2H), 6.57 (d, 1H, J=8,7 Гц), 4.06 (t, 1H, J=6,0 Гц), 3.93 (t, 1H, J=6,0 Гц), 2.66 (t, 1H, J=5,7 Гц), 2.55 (t, 1H, J=5,4 Гц), 2.44 (s, 2H), 2.36 (s, 2H), 1.49-1.37 (m, 6H). MS m/z 501,0 (М-Н)^-.

Соль гидрохлорида соединения (X) получали, добавляя HCl в Et₂O к метанольному раствору соединений, с последующим выпариванием растворителей.

ПРИМЕР 6

Аффинности связывания с рецептором эстрогенов, агонистическая и антагонистическая активность

Аффинность связывания соединений с ER определяли, применяя анализ конкурентного связывания радиоактивного лиганда in vitro с использованием природного обладающего высокой аффинностью лиганда ER [2,4,6,7-³H(N)]-эстрадиола ([³H]E₂) и бактериально экспрессированного, слитого с GST белка, содержащего лиганд-связывающий домен (LBD) рецептора ER-α или ER-β.

Метод

Рекомбинантный ER-α или ER-β объединяли с [³H]E₂ для определения равновесной константы диссоциации (K_d) для [³H]E₂. Белок инкубировали с [³Н]E₂ в возрастающих концентрациях в присутствии и в отсутствие немеченого E₂ в высокой концентрации при 4°С в течение 18 ч для определения общего и неспецифического связывания. Данные по неспецифическому связыванию вычитали и K_d для E₂ (ERα: 0,71 нМ; ERβ: 1,13 нМ) определяли, используя метод нелинейной регрессии. Кроме этого определяли концентрацию [³Н]Е₂, необходимую для насыщения ER-α- и ER-β-LBD, которая оказалась равной 4-6 нМ.

Соединения в возрастающих концентрациях (диапазон: 10^-11-10^-6 M) инкубировали с [³Н]Е₂ (5,7 нМ) и ER-LBD в описанных выше условиях. После инкубации материал с планшетов собирали с использованием фильтров GF/B, применяя харвестер Unifilter-96 (PerkinElmer) и промывали три раза охлажденным во льду буфером В (50 мМ Трис; рН 7,2). Фильтровальные планшеты сушили при комнатной температуре, затем в каждую лунку добавляли по 35 мкл коктейля Microscint-O и фильтровальные планшеты плотно закрывали, используя TopSeal-A. Радиоактивность подсчитывали на сцинтилляционном счетчике для микропланшетов TopCount® NXT, используя установочные параметры для ³H, в коктейле Microscint (PerkinElmer).

Специфическое связывание [³H]E₂ для каждой из концентраций соединений определяли, вычитая данные для неспецифического связывания [³Н]Е₂ (определенные посредством инкубации с немеченым Е₂ в концентрации 10^-6 М) и выражая его в процентах от специфического связывания в отсутствие тестируемого соединения. Определяли концентрацию соединений, которая приводит к уменьшению специфического связывания [³Н]E₂ на 50% (IC₅₀). Далее рассчитывали равновесную константу связывания (K_i) для соединений: K_i=K_d×IC₅₀/(K_d+L), где K_d представляет собой равновесную константу диссоциации [³H]Е₂ (ER-α=0,71 нМ; ER-β=1,13 нМ), а L представляет собой концентрацию [³H]Е₂ (ER-a: 5,7 нМ; ER-β: 5,7 нМ).

Результаты

Анализы связывания подтвердили, что лиганды связываются с ER-α и ER-β в различных концентрациях в диапазоне от 3,75 нМ до более чем 1000 нМ, и селективность изменяется от соединения, являющегося селективным к изоформе, до не являющегося селективным к изоформе. Результаты для репрезентативных соединений перечислены в Таблице 2.

Таблица 2.
Результаты связывания для отдельных соединений
СОЕДИНЕНИЯ	K_i (нМ) для ER-α	K_i (нМ) для ER-β
	3,75	81,6
	3,81	6,44
	21,7	15,2
	7,13	35,9
	9	72
	6,06	76,92
	13	19
	14,79	646,32
	15	57
	15,12	25,02

Соединение IV связывается с ERα и ERβ. Аффинность связывания Соединения IV с ER определяли, применяя анализ конкурентного связывания радиоактивного лиганда in vitro с использованием природного обладающего высокой аффинностью лиганда ER - [2,4,6,7-³H(N)]-эстрадиола ([³H]Е₂) и бактериально экспрессированного, слитого с GST белка, содержащего лиганд-связывающий домен (LBD) рецептора ER-α или ER-β. Согласно этому анализу аффинности связывания (величины K_i) Соединения IV с ERα и ERβ составляли 21,7±1,7 нМ (n=3) и 15,2±4,1 нМ (n=3) соответственно. После связывания с ER Соединение IV инициирует сложную серию молекулярных событий, приводящих к тканеселективной экспрессии или репрессии генов-мишеней, связанных с фармакологическим ответом. В анализах с временной трансфекцией Соединение IV ведет себя как агонист ERα и ERβ, демонстрируя более высокую эффективность в отношении стимулирования ERα-опосредованной транскрипционной активации по сравнению с ERβ. В то время как эстрадиол активирует ERα и ERβ, проявляя в 5,1 раза большую селективность к ERα, Соединение IV демонстрирует в 49,0 раза большую селективность к ERα. Таким образом, относительная трансактивационная эффективность (нормированная к величинам для эстрадиола) Соединения IV характеризуется в 9,7 раза более высокой селективностью в отношении ERα по сравнению с ERβ. Кроме того, под действием Соединения IV в концентрациях до 10 мкМ включительно не наблюдали никаких антагонистических эффектов в отношении стимулированной эстрадиолом (1 нМ) транскрипционной активации. Несмотря на то, что многие стероидные лиганды дают перекрестную реакцию с другими рецепторами ядерных гормонов, действие Соединения IV является специфичным в отношении ERα и ERβ. В анализах на транскрипционную активацию проводили скрининг на предмет перекрестной реактивности как агонистической, так и антагонистической активности Соединения IV в отношении изоформ глюкокортикоидного рецептора (GR), рецептора минералокортикоидов (MR), рецептора прогестерона (PR), рецептора андрогенов (AR) крысы и изоформ фарнезоидного Х-рецептора (FXR), печеночного Х-рецептора (LXR), рецепторов, активируемых пролифератором пероксисом (PPAR-α и PPAR-γ) и ретиноидного X-рецептора (RXR-α) человека. Соединение IV не демонстрировало никакой агонистической или антагонистической активности в каком-либо из этих анализов, что подтверждает вывод о том, что Соединение IV не обладает функциональной перекрестной реактивностью в отношении членов этого суперсемейства рецепторов ядерных гормонов.

ПРИМЕР 7

Трансактивация под действием отдельных соединений

С целью определения, является ли соединение агонистом, антагонистом или частичным агонистом или антагонистом, проводили анализы трансактивации на предмет агонистического и антагонистического образа действия.

Метод

Рецепторы эстрогенов (ER-α и ER-β) крысы клонировали из кДНК яичников крысы в остов плазмидного вектора PCR3.1. Для установления отсутствия каких-либо мутаций проводили секвенирование. Клетки НЕК-293 (почки человеческого эмбриона) рассевали в количестве 100000 клеток на лунку в 24-луночном планшете в минимальной поддерживающей среде Дульбекко (DMEM), дополненной 5% очищенной на активированном угле фетальной телячьей сыворотки (csFBS). Клетки трансфицировали, используя липофектамин (Invitrogen, Carlsbad, CA) вместе с 0,25 мкг ERE-LUC (конструкции эстрогенового ответного элемента и люциферазы; от англ. estrogen response element-luciferase), 0,02 мкг CMV-LUC (конструкции (промотора) цитомегаловируса и люциферазы) (люциферазы коралла Renilla) и 12,5 нг ER-α крысы или 25 нг ER-β крысы. Через 24 ч после проведения трансфекции клетки обрабатывали соединениями в различных концентрациях или комбинацией соединений и эстрадиола с целью определения антагонистической активности. Анализы люциферазы проводили через 48 ч после трансфекции.

Результаты

Скрининг соединений по данному изобретению в системе для анализа трансактивации выявил, что соединения принадлежали ко всем трем классам, то есть агонистам, антагонистам и частичным агонистам. Пример агониста и антагониста приведен в Таблице 3. Результаты по трансактивации очень хорошо согласуются с результатами по связыванию на предмет селективности в отношении изоформ.

В Таблице 3 приведены величины EC₅₀ и IC₅₀, полученные в анализе трансактивации для некоторых отдельных соединений по данному изобретению.

Таблица 3.
Результаты анализа трансактивации (как для агониста, так и антагониста) под действием отдельных Соединений по изобретению
СОЕДИНЕНИЕ	ЕС₅₀ (нМ) для ER-α	EC₅₀ (нМ) для ER-β	IC₅₀ (нМ) для ER-α	IC₅₀ (НМ)для ER-β
	0,65	40,4	>1000	>1000
	>1000	>1000	2,207	145

ПРИМЕР 8

Подавление тестостерона у яванских макак

Интактных в отношении половых желез самцов яванских макак в возрасте двух лет (n=2) содержали во время проведения исследования в соответствии с руководящими указаниями USDA (Министерства сельского хозяйства США (United States Department of Agriculture)) со свободным доступом к корму для приматов и воде (за исключением голодания перед пероральным введением дозы). Животные один раз в сутки в течение 7 последующих суток перорально через желудочный зонд получали дозу Соединения формулы IV (30 мг/кг) в виде микроэмульсии в разбавителе Твин 80/деионизованная вода. Образцы крови для получения сыворотки отбирали посредством венопункции перед пероральным введением дозы на 0-е (исходная точка), 2-е, 3-и, 4-е, 5-е и 6-е сутки. Уровни тестостерона и андрогенов в целом измеряли количественно, используя метод иммуноферментного анализа (EIA), объединенного или не объединенного с HPLC (высокоэффективной жидкостной хроматографией) соответственно. После обработки Соединением формулы IV в течение 6 суток становилось очевидным времязависимое уменьшение уровней тестостерона и андрогенов в целом (тестостерона/дигидротестостерона). Соединение формулы IV подавляло уровни тестостерона на 58% и 64% у животного №1 и животного №3, соответственно, относительно исходных величин (см. сплошные линии на Фиг.1, Таблицу 4). Аналогично, уровень андрогенов в целом был подавлен на 56% у обоих животных №1 и №3 (см. пунктирные линии на Фиг.1, Таблицу 4) по сравнению с исходными величинами.

Согласуясь с наличием эстрогенной обратной связи в гипофизарно-тестикулярной оси у особей мужского пола, эти результаты демонстрируют надежный фармакологический ответ в отношении подавления гормонов сыворотки крови (тестостерона и андрогенов в целом) у интактных приматов, не являющихся человеком, (яванских макак) после повторного введения пероральных доз (30 мг/кг) Соединения формулы IV.

Таблица 4.
Уровни тестостерона и андрогенов в целом в сыворотке крови интактных самцов макак при ежесуточном пероральном введении Соединения формулы IV (30 мг/кг; первая доза в 0-е сутки)
	Тестостерон	Андрогены в целом
	Уровень в сыворотке (пг/мл)	Уровень в сыворотке (пг/мл)
Сутки	Животное 1	Животное 3	Животное 1	Животное 3
0
(исходная точка)	1120	617	1868	1643
2	937	479	1178	847
3	784	437	1078	786
4	552	415	988	924
5	403	276	966	664
6	474	221	819	726
	Процент уменьшения от исходной точки	Процент уменьшения от исходной точки
Сутки	Животное 1	Животное 3	Животное 1	Животное 3
0
(исходная точка)	100	100	100	100
2	16	22	37	48
3	30	29	42	52
4	51	33	47	44
5	64	55	48	60
6	58	64	56	56

ПРИМЕР 9

Подавление уровней LH и гормона тестостерона у крыс

Для оценки влияния Соединения IV на подавление LH у интактных и орхиэктомированных (ORX) самцов крыс проводили исследование зависимости эффекта от дозы in vivo. У интактных и подвергнутых ORX животных Соединение IV в дозах S10 мг/кг в сутки значительно подавляло уровни LH по сравнению с соответствующими контролями. (Аналогичную картину подавления наблюдали для уровней FSH.) Подавление LH приводило к устойчивому снижению уровней тестостерона ниже предела количественного определения (BLOQ), который составляет 0,08 нг/мл, и уменьшению масс предстательной железы, семенных пузырьков и мышечной массы леватора, поскольку они являются в высшей степени андроген-зависимыми органами. У интактных животных было отмечено дозозависимое уменьшение массы этих органов-мишеней, при этом масса семенных пузырьков и мышечная масса леватора достигали уровня контролей, соответствующих медицинской кастрации. Хотя массы предстательной железы у интактных животных значительно уменьшались, эти величины не достигали уровня контролей, соответствующих медицинской кастрации. Результаты суммированы в приведенной ниже Таблице 6.

Материалы и методы

Самцов крыс Sprague-Dawley массой приблизительно 200 г поддерживали в режиме цикла свет/темнота по 12 ч с неограниченным доступом к корму (корму для грызунов с содержанием белка 16% Teklad Global 2016, Harlan, Madison, WI) и воде. Протокол работы с животными был рассмотрен и одобрен Комитетом по биоэтике Университета Теннесси.

Тестируемый в этом исследовании продукт взвешивали и растворяли в 10%-ом DMSO (Fisher), разбавленным ПЭГ300 (Acros Organics, NJ), для получения композиций с соответствующими дозами. Для этого исследования шестьдесят (60) самцов крыс Sprague-Dawley распределяли случайным образом по массе тела и причисляли к одной из двенадцати подвергаемых обработке групп (n=5 животных/группа). Подвергаемые обработке группы перечислены в Таблице 5. Животных содержали в группах по 2-3 животных на клетку. Контрольным группам (интактным и орхиэктомированным (ORX)) ежесуточно вводили разбавитель. Соединение IV вводили подкожной инъекцией (200 мкл) в дозах 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки животным как интактных, так и подвергнутых ORX групп.

После осуществления режима введения в течение 14 суток животных умерщвляли под анестезией (кетамин/ксилазин, 87:13; мг/кг) и регистрировали массы тела. Помимо этого извлекали вентральную долю предстательной железы, семенные пузырьки и леватор, очищали от посторонней ткани и взвешивали по отдельности. Массу органа нормировали на массу тела и выражали в процентном отношении к интактному контролю. Под анестезией изофлураном проводили отбор крови из брюшной аорты и оставляли для коагулировать. Сыворотку крови отделяли центрифугированием и хранили при -80°С до определения в ней уровней гормонов. Концентрации лютеинизирующего гормона (LH) и фолликулостимулирующего гормона (FSH) в сыворотке крови определяли, используя анализ Luminex для определения гормонов гипофиза крыс (Rat Pituitary Luminex Assay) (Millipore, Billerica, MA) в соответствии с инструкциями производителя. Нижний предел количественного определения (LLOQ) для этого анализа составлял 3,2 пг/мл для LH и 32 пг/мл для FSH. Тестостерон измеряли, используя EIA для определения тестостерона (Alpco Diagnostics, Salem, NH) с LLOQ 0,08 нг/мл. Уровни гормонов сыворотки крови ниже нижнего предела количественного определения (BLOQ) отбрасывали при анализах средних значений внутри группы. Ввиду этого, сообщаемое значение для LH и Т (тестостерона) в группах с образцами BLOQ, будет выше истинного значения. Этот метод анализа дает заведомо заниженную оценку подавления LH и Т. Для сравнения групп, получавших индивидуальные дозы, с интактными группами и подвергнутыми ORX контрольными группами, получавшими разбавитель, использовали тест Фишера для определения статистически достоверных различий. Статистическая значимость была определена a priori как значение Р<0,05.

Таблица 5.
Подвергаемые обработке группы
Группа	Гонадный статус	Доза (мг/кг/сутки)	Тестируемый продукт
1	Интактные	-	Разбавитель
2	ORX	-	Разбавитель
3	Интактные	0,3	Соединение IV
4	Интактные	1	Соединение IV
5	Интактные	3	Соединение IV
6	Интактные	10	Соединение IV
7	Интактные	30	Соединение IV
8	ORX	0,3	Соединение IV
9	ORX	1	Соединение IV
10	ORX	3	Соединение IV
11	ORX	10	Соединение IV
12	ORX	30	Соединение IV

Уровни лютеинизирующего гормона у интактных и подвергнутых ORX крыс (Таблица 6)

Уровни LH (среднее ± SD (стандартное отклонение)) в интактных и подвергнутых ORX контрольных группах, получавших разбавитель, составляли 1,46±0,64 и 11,1±3,9 нг/мл соответственно. Соединение IV дозозависимым образом уменьшало уровни LH у интактных животных с получением статистически значимых уменьшений при использовании суточных доз ≥ 3 мг/кг. Уровни LH у интактных обработанных Соединением IV животных составляли 0,863±0,384, 0,704±0,530, 0,395±0,302, 0,226±0,165 и 0,236±0,176 нг/мл после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Уровни LH у подвергнутых ORX самцов также значительно уменьшались в результате обработки Соединением IV. У подвергнутых ORX животных уровни LH составляли 15,4±2,9, 13,5±2,2, 6,5±5,6, 0,425±0,135 и 0,368±0,119 нг/мл после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сут соответственно. Результаты представлены графически на Фиг.10А.

Уровни фолликулостимулирующего гормона у интактных и подвергнутых ORX крыс (Таблица 6)

Уровни FSH в сыворотке крови в интактных и подвергнутых ORX контрольных группах, получавших разбавитель, составляли 20,9±8,5 и 93,5±13,8 нг/мл соответственно. У интактных животных Соединение IV дозозависимым образом уменьшало уровни FSH с получением статистически значимых уменьшений, наблюдаемых в дозах ≥ 10 мг/кг/сутки. Уровни FSH у интактных обработанных Соединением IV животных составляли 17,3±6,4; 15,7±7,3; 18,4±7,7; 9,2±4,0 и 6,3±1,8 нг/мл после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. У подвергнутых ORX животных уровни LH составляли 115±17, 114±22, 65,2±31,9, 27,6±8,2 и 15,1±4,1 нг/мл после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Результаты представлены графически на Фиг.10В.

Уровни тестостерона у интактных и подвергнутых ORX крыс

Уровни тестостерона в сыворотке крови у интактных получавших разбавитель контрольных групп составляли 2,4±1,1 нг/мл. Нижний предел количественного определения для Т составлял 0,08 нг/мл. Величины меньше 0,08 нг/мл рассматриваются как величины ниже предела количественного определения (BLOQ). У интактных животных Соединение формулы IV дозозависимым образом снижало уровни Т со значительным уменьшением, наблюдаемым при дозах ≥ 3 мг/кг в сутки. Уровни тестостерона у интактных животных, обработанных Соединением формулы IV, составляли 2,6±1,7, 1,6±1,0, 0,7±0,4, BLOQ и BLOQ нг/мл после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг в сутки соответственно. У подвергнутых ORX животных уровни Т были BLOQ для всех групп, обработанных Соединением IV, и группы, обработанной разбавителем. Результаты для интактных животных представлены графически на Фиг.10С (и Фиг.2) (для графических целей величины BLOQ представлены пределом количественного определения).

Быстрое и эффективное подавление тестостерона в сыворотке крови у интактных самцов крыс, измеренное после введения Соединения IV в дозировках 3 мг/кг, 10 мг/кг и 300 мг/кг через 24 ч, 72 ч и 168 ч, представлено на Фиг.9.

Массы органов (Таблица 6)

Массы предстательной железы, семенных пузырьков и мышечную массу леватора измеряли для подтверждения подавления Т. Массы органов (среднее ±SD) представлены на Фиг.10D, 10Е и 10F соответственно. Дозозависимые уменьшения массы предстательной железы, семенных пузырьков и мышечной массы леватора наблюдали у интактных животных, обработанных Соединением IV. Массы предстательной железы у интактных животных составляли 84,0±19,2, 75,2±20,7, 68,2±8,1, 45,1±20,0 и 43,6±8,8% после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Массы предстательной железы у подвергнутых ORX животных составляли 19,0±4,2, 17,4±3,4, 19,6±6,7, 22,9±5,4 и 20,6±2,1% после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Массы семенных пузырьков у интактных животных составляли 76,2±7,8, 66,3±27,2, 51,8±28,5, 19,1±7,0 и 17,9±3,3% после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Массы семенных пузырьков у подвергнутых ORX животных составляли 12,2±1,3, 16,6±5,4, 16,5±4,8, 13,3±1,9 и 12,9±2,1% после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Массы леватора у интактных животных составляли 86,9±10,0, 82,1±12,1, 65,2±4,4, 57,8±11,2 и 58,1±4,7% после введения доз 0,3, 1,3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно. Массы леватора у подвергнутых ORX животных составляли 54,5±6,6, 49,6±7,0, 53,6±10,0, 51,1±4,9 и 49,2±4,2% после введения доз 0,3, 1, 3, 10 и 30 мг/кг/сутки соответственно.

Данные относительно подавления LH и уменьшения масс органов суммированы в Таблице 6.

Таблица 6.
Влияние in vivo Соединения формулы IV на гормоны сыворотки крови и массу органов
Гонадный статус	Соединение	Доза (мг/кг в сутки)		LH (нг/мл)	FSH (нг/мл)	Предстат. железа (% от интактн.)	Семенные пузырьки (% от интактн.)	Леватор (% от интактн.)
Интактн.	Разбавитель	-	Среднее SD	1,46^b 0,642	20,9^b 8,49	100,0^b 28,6	100,0^b 13,4	100,0^b 4,97
ORX	Разбавитель	-	Среднее SD	11,1^a 3,87	93,5^a 13,8	13,7^a 2,56	14,0^a 2,93	58,8^a 6,62
Интактн.	Соединение IV	0,3	Среднее SD	0,863^b 0,384	17,3^a 6,44	84,0^b 19,2	76,2^a,b 7,83	86,9^a,b 10
Интактн.	Соединение IV	1	Среднее SD	0,704^b 0,53	15,7^b 7,26	75,2^b 20,7	66,3^a,b 27,2	82,1^a,b 12,1
Интактн.	Соединение IV	3	Среднее SD	0,395^a,b 0,302	18,4^b 7,72	68,2^a,b 8,12	51,8^a,b 28,5	65,2^a 4,35
Интактн.	Соединение IV	10	Среднее SD	0,226^a,b 0,165	9,25^a,b 3,97	45,1^a,b 20	19,1^a 6,98	57,8^a 11,2
Интактн.	Соединение IV	30	Среднее SD	0,236^a,b 0,176	6,25^a,b 1,82	43,6^a,b 8,75	17,9^a 3,33	58,1^a 4,71
ORX	Соединение IV	0,3	Среднее SD	15,4^a 2,94	116^a 17,2	19,0^a,b 4,19	12,2^a 1,31	54,5^a 6,56
Гонадный статус	Соединение	Доза (мг/кг в сутки)		LH (нг/мл)	FSH (нг/мл)	Предстат. железа (% от интактн.)	Семенные пузырьки (% от интактн.)	Леватор (% от интактн.)
ORX	Соединение IV	1	Среднее SD	13,5^a 2,18	114^a 22,3	17,4^a 3,4	16,6^a 5,36	49,6^a 7,04
ORX	Соединение IV	3	Среднее SD	6,5 5,63	65,2^a 31,9	19,6^a 6,67	16,5^a 4,82	53,6^a 10
ORX	Соединение IV	10	Среднее SD	0,425^a,b 0,135	27,6^b 8,16	22,9^a,b 5,44	13,3^a 1,91	51,1^a 4,88
ORX	Соединение IV	30	Среднее SD	0,368^a,b 0,119	15,1^b 4,11	20,6^a,b2,08	12,9^a 2,14	49,2^a,b 4,21
^а Р<0,05 по сравнению с интактными, получавшими разбавитель. ^b Р<0,05 по сравнению с подвергнутыми ORX, получавшими разбавитель.

ПРИМЕР 10

Восстановление уровней тестостерона после подавления под действием Соединения IV у крыс и макак

Исследовали обратимость химической кастрации под действием Соединения IV.

Материалы и методы

Тридцать пять (35) самцов крыс Sprague-Dawley массой приблизительно 200 г поддерживали в режиме цикла свет/темнота по 12 ч с неограниченным доступом к корму (корму для грызунов с содержанием белка 16% Teklad Global 2016, Harlan, Madison, WI) и воде. Протокол работы с животными был рассмотрен и одобрен Комитетом по биоэтике Университета Теннесси.

Тестируемый в этом исследовании продукт взвешивали и растворяли в ПЭГ300 (100%) (Acros Organics, NJ) для получения композиций с соответствующими дозами. Животных случайным образом причисляли к одной из десяти подвергаемых обработке групп (n=5 животных/группа). Подвергаемые обработке группы перечислены в Таблице 7. Животных содержали в группах по 2-3 животных на клетку. Животных группы 1 умерщвляли в начале исследования (1-е сутки) с целью определения исходных уровней тестостерона у интактных животных. Животные групп 2-7 перорально через желудочный зонд получали суточные дозы 1, 3 или 30 мг/кг (~200 мкл) в течение трех суток. Животных групп 2, 3 и 4 умерщвляли на 4-е сутки для измерения максимального подавления тестостерона. Животных групп 5, 6 и 7 оставляли для восстановления в течение периода вымывания (14 суток) без введения лекарственных средств.

Таблица 7.
Подвергаемые обработке группы
Группа	Соединение IV, п/о доза	Обработка
Группа 1	-	Исходная точка
Группа 2	1 мг/кг в течение 3 суток	Без восстановления
Группа 3	3 мг/кг в течение 3 суток	Без восстановления
Группа 4	30 мг/кг в течение 3 суток	Без восстановления
Группа 5	1 мг/кг в течение 3 суток	Восстановление в течение 14 суток
Группа 6	3 мг/кг в течение 3 суток	Восстановление в течение 14 суток
Группа 7	30 мг/кг в течение 3 суток	Восстановление в течение 14 суток

Результаты

Уровни тестостерона в сыворотке крови у интактных крыс составляли 6,4±3,1 нг/мл (среднее значение ± SD) в исходной точке. Соединение IV, вводимое в дозах 3 и 30 мг/кг в течение трех суток, значительно подавляло уровни тестостерона в сыворотке до 1,47±0,26 и 1,62±0,49 нг/мл соответственно. Никакого значительного подавления не наблюдали у животных, которые получали Соединение IV в дозе 1 мг/кг в течение трех суток. Наиболее важно, что уровни тестостерона в сыворотке крови составляли 3,3±1,92, 3,00±1,06 и 3,8±1,72 нг/мл у животных, которые в течение трех суток получали Соединение IV в дозе 1, 3 или 30 мг/кг, соответственно, по результатам измерений через 14 суток восстановительного периода, и не было статистически значимых различий от концентраций тестостерона в сыворотке крови в исходной точке у интактных крыс, что представлено на Фиг.23.

Это исследование подтверждает предыдущие результаты, показывающие, что Соединение IV быстро подавляет уровни тестостерона в сыворотке крови у интактных самцов крыс. Авторы изобретения наблюдали подавление уровней тестостерона в сыворотке крови в группах, получающих дозу ≥ 3 мг/кг/сутки в течение 3 суток. Значительное уменьшение уровня тестостерона в сыворотке крови не наблюдали для группы с дозой 1 мг/кг. Однако после 14 суток восстановления уровни тестостерона в сыворотке обратно возвращались к уровню интактных контролей. Это исследование показывает, что фармакологическая кастрация у крыс под действием Соединения IV является обратимой.

Влияние Соединения IV на подавление и восстановление уровней тестостерона у интактных самцов макак оценивали в сочетании с пероральным фармакокинетическим исследованием. Трем обрабатываемым, ранее не подвергаемым экспериментам самцам яванских макак (в возрасте 2-3 лет) перорально через желудочный зонд в течение 7 последующих суток ежесуточно вводили Соединение IV в дозе 30 мг/кг. Образцы крови собирали и разделяли для получения сыворотки и плазмы для количественных измерений тестостерона и Соединения IV соответственно. Результаты показывают, что ежесуточное введение пероральных доз Соединения IV значительно уменьшало уровни циркулирующих андрогенов (главным образом тестостерона и дигидротестостерона) у всех трех самцов макак на величину до 47% включительно по сравнению с исходными уровнями (уровнями, составляющими 1591±72,5, 997±104 и 852±136 нг/мл, соответственно для исходной точки, на 2-е сутки и 6-е сутки обработки (среднее ± SEM (стандартная ошибка среднего))). После 18-суточного восстановительного периода без введения лекарственных средств уровни андрогенов возвращались к нормальным и существенно не отличались от исходных уровней до обработки (1757,7±369,5 нг/мл после восстановления).

ПРИМЕР 11

Сохранность костной массы невзирая на снижение уровней LH и тестостерона у крыс (Таблица 8)

Исследовали влияние на костную ткань, вызываемое обработкой Соединением формулы IV. Перорально введенное Соединение формулы IV полностью предотвращало потерю костной массы, связанную с подавлением LH у интактных самцов крыс. Значительное снижение уровня LH индуцировалось Соединением формулы IV у интактных животных при уровнях доз ≥ 10 мг/кг в сутки. Хотя в дозе 1 мг/кг в сутки Соединение формулы IV существенно не снижало уровень LH, при этой дозе было очевидным значительное уменьшение массы предстательной железы, семенных пузырьков и мышечной массы леватора, указывающее на то, что уменьшение уровня циркулирующего тестостерона было физиологически релевантным по отношению к этим восприимчивым к андрогенам органам. Однако введение Соединения формулы IV в дозе 1 мг/кг в сутки поддерживало объем трабекулярной кости (измеренный в дистальной части бедра) на уровне интактных контролей. При введении в дозах 10 и 30 мг/кг в сутки Соединение формулы IV увеличивало объем кости в дистальной части бедра значительно больше, чем у интактных контролей. Эти данные показывают, что Соединение IV повышает минеральную плотность трабекулярной кости (BMD) и процентный объем кости при уровнях доз, которые снижают уровни LH у интактных крыс. Данные этого исследования представлены в Таблице 8.

Таблица 8.
Влияние in vivo Соединения формулы IV на кости, массу органов и гормональные параметры сыворотки крови у крыс
Гонадный статус	Соединение	Доза (мг/кг в сут)		Минерал. плотность кости (г/см³)	Процент, объем кости (BV/TV) (%)	Предстат. железа (% от интактн.)	Семенн. пузырьки (% от интактн.)	Леватор (% от интактн.)	FSH (нг/мл)	LH (нг/мл)
Интактн.	Разбавитель	-	Средн. SD	0,274^b 0,033	20,2^b 3,57	100,0^b 11,1	100,0^b 15,9	100,0^b 11,6	9,93^b 2,94	0,781^b 0,263
ORX	Разбавитель	-	Средн. SD	0,224^a 0,025	15,4^a 2,6	14,8^a 4,08	10,3^a 0,767	59,4^a 7,26	117^a 40,2	22,0^a 5,81
Интактн.	Соединение IV	1	Средн. SD	0,273^b 0,04	20,0^b 4,08	69,2^a,b 13,5	44,6^a,b 15,7	80,0^a,b 6,69	14,1^a,b 4,07	0,820^b 0,392
Интактн.	Соединение IV	10	Средн. SD	0,326^a,b 0,048	25,9^a,b 4,76	30,7^a,b 12,4	12,8^a,b 0,886	58,1^a 9,68	5,48^a,b 1,97	0,060^a,b 0,092
Интактн.	Соединение IV	30	Средн. SD	0,326^a,b 0,046	25,5^a,b 4,49	30,1^a,b 17,4	14,4^a,b 1,45	56,1^a 4,67	6,32^a,b 3,4	0,078^a,b 0,114
^а Р<0,05 по сравнению с интактными, получавшими разбавитель. ^b Р<0,05 по сравнению с подвергнутыми ORX, получавшими разбавитель. BV/TV=отношение объема (трабекулярной) кости к общему объему (кости) (от англ. bone volume/total volume).

ПРИМЕР 12

Влияние на активность фермента 17β-гидроксистероид-дегидрогеназы 5 типа (17β-HSD5)

Члены HSD-семейства вовлечены в превращение циркулирующих стероидов. 17β-HSD5 превращает андростендион в тестостерон, а эстрон в эстрадиол. К тому же она также вовлечена в синтез простагландинов. Здесь была продемонстрирована способность некоторых отдельных соединений по изобретению ингибировать активность 17β-HSD5.

Метод

Человеческую 17β-HSD5 клонировали в вектор pGEX 4t1 и получали очищенный белок. Очищенный белок инкубировали вместе с репрезентативным соединением по изобретению, ¹⁴С-андростендионом и NADPH (восстановленной формой никотинамидадениндинуклеотидфосфата) в соответствующем буфере. Синтезированный тестостерон экстрагировали, используя этилацетат, сушили на воздухе, наносили на пластинку для тонкослойной хроматографии (ТСХ) и проводили разделение. ТСХ-пластинку экспонировали на экран фосфоимиджера и интенсивность полосы тестостерона определяли количественно. В качестве положительного контроля (агониста LHRH) использовали индометацин.

Результаты

Протестированное Соединение IV оказывало частичный ингибирующий эффект на активность фермента 17β-HSD5. Положительный контроль - индометацин (агонист LHRH), как и ожидалось, демонстрировал сильное ингибирование этого фермента, как представлено на Фиг.3.

ПРИМЕР 13

Исследования токсичности

Для сравнения свертывающего потенциала Соединения IV и диэтилстильбэстрола (DES, положительный контроль) проводили исследование с применением анализа агрегации тромбоцитов человека in vitro. В этом исследовании использовали кровь здоровых доноров мужского пола, поскольку мужчины представляют собой контингент, для которого предназначено лечение Соединением IV (подавление LH). Обогащенную тромбоцитами плазму крови предварительно инкубировали вместе с каждым из следующего: эстрадиола (Е2), DES, Соединения IV или разбавителя, в течение 30 секунд и затем добавляли тромбин (0,3 единицы) для индукции агрегации тромбоцитов. Результаты исследования показывают, что предварительная инкубация с DES повышает индуцируемую тромбином агрегацию тромбоцитов приблизительно в 10 раз. Однако Соединение IV и эстрадиол снижают агрегацию в обогащенной тромбоцитами плазме крови. Эти данные демонстрируют, что Соединение IV уменьшает реактивность человеческих тромбоцитов in vitro по сравнению с DES, и наводят на мысль, что Соединение IV может иметь более низкий тромбоэмболический потенциал, чем DES (Фиг.4).

ПРИМЕР 14

Влияние Соединения IV на "приливы"

Проводили исследование влияния Соединения IV на "приливы", используя морфин-зависимую крысиную модель (MD-модель), разработанную Simpkins и соавт. (1983), для которой был показан ряд сходств с относящимися к менопаузе "приливам". В дополнение к сходствам с человеческой природой эта экспериментальная животная модель характеризуется коротким сроком выполнения, что делает ее полезным инструментом для высокопроизводительного скрининга с использованием измерений температуры кожи хвоста (TST) с целью идентификации соединений, которые могут облегчать вазомоторные симптомы. TST-датчики ТА-40 (Data Sciences International, MN) прикрепляли липкой лентой к основанию хвостов и проводили регистрацию исходной температуры в течение 15 минут. Через 15 минут животных обрабатывали налоксоном (1 мг/кг, SQ) для отмены эффектов морфина. В ходе эксперимента температуру кожи хвоста (TST) измеряли в течение одного часа после обработки налоксоном с частотой измерения 5 с. После сбора данных рассчитывали скользящее среднее значение температуры, зарегистрированной в течение каждых 60 секунд для каждого животного, и подвергали последующему анализу. Исходную температуру вычисляли как среднее за 15 минут, предшествующих введению налоксона. Площадь под кривой (AUC) рассчитывали, вычитая все значения после введения налоксона от исходного значения с использованием линейного метода трапеций.

Соединение IV ослабляло приливы в модели отмены морфина (см. Фиг.13) с наилучшими результатами для 10 мг Соединения IV. 17β-Е2 использовали в концентрации 5 мг/кг в 100%-ом DMSO.

ПРИМЕР 15

Сравнение Соединения IV и DES на крысах

Перед введением агонистов LHRH достигали уровней тестостерона, соответствующих медицинской кастрации, повышая эстрогенную активность в гипофизе посредством эстрогенов, преимущественно диэтилстильбэстрола (DES). DES был столь же эффективен, как и агонисты LHRH при подавлении тестостерона до уровней, соответствующих медицинской кастрации. У пациентов, подвергнутых лечению с использованием DES, не было приливов или потери костной массы, но наблюдалась гинекомастия в большей степени, чем при проведении ADT с использованием агонистов LHRH. К сожалению, применение высокоэффективных чистых эстрогенов, подобных DES и эстрадиолу, очень часто ассоциировано с высоким риском серьезных сердечно-сосудистых и тромбоэмболических осложнений, которые ограничивают их клиническое применение.

Была высказана, но не доказана, гипотеза, что повышенный риск развития венозных тромбоэмболических осложнений в результате действия DES связан с его перекрестной реактивностью с рецепторами других гормонов. Исследования in vitro с использованием тромбоцитов человека показали, что Соединение IV обладает гораздо меньшей прокоагулирующей активностью, чем DES. Таким образом, Соединение IV, селективный агонист ER-альфа, в отношении рака предстательной железы может обеспечивать полезное действие DES и также обеспечивать полезное действие агониста LHRH, не вызывая остеопороза или неблагоприятных липидных профилей.

Соединение IV так же эффективно, как и DES, в уменьшении размера предстательной железы у крыс (Фиг.11А) и дает умеренное увеличение размера предстательной железы у подвергнутых ORX крыс (Фиг.11В).

Различия между DES и Соединением IV представлены на Фиг.12А-12С, где видно, что DES дает перекрестную реакцию с глюкокортикоидным рецептором (GR) (Фиг.12А) и андрогенным рецептором (AR) (Фиг.12В), тогда как Соединение IV нет. В дополнение к этому DES антагонизирует трансактивацию рецепторов, родственных рецептору эстрогена, (ERR), тогда как Соединение IV нет. Соединение IV не демонстрирует перекрестной реакции ни с одной из трех изоформ ERR (ERR-α, ERR-β и ERR-γ), как представлено на Фиг.12С.

ПРИМЕР 16

Исследование токсичности на макаках - 90 суток

Из Маврикия были получены жившие семьями яванские макаки. Было спланировано проспективное исследование для получения фармакологической и токсикологической оценки результатов перорального введения Соединения IV и положительного контроля (агониста LHRH) в течение 39 недель на самцах яванского макака с промежуточным периодом в 13 недель. В общей сложности 39 половозрелых самцов макак в возрасте 5-8 лет случайным образом распределяли на пять групп перед началом обработки. Группы включали: 1) разбавитель в качестве контроля, 2) Соединение IV в дозе 1 мг/кг, 3) Соединение IV в дозе 10 мг/кг, 4) Соединение IV в дозе 100 мг/кг и 5) положительный контроль (агонист LHRH). Лекарственное средство доставляли перрорально, используя введение по типу "cage-side" один раз в сутки в течение 39 недель, при этом вводили разбавитель в качестве контроля (Твин 80/PRANG™) для Групп 1 и 5 или Соединение IV в разбавителе для Групп 2, 3 и 4. Уровни доз Соединения IV составляли 1, 10 и 100 мг/кг/сутки для Групп 2, 3 и 4 соответственно. Пероральные дозы доставляли в объеме дозы 10 мл/кг, рассчитанном на основании самого последнего измерения массы тела для каждого животного (Фиг.14). Животные в Группе 5 помимо этого получали один раз в сутки подкожную инъекцию положительного контроля (агониста LHRH) (постоянно в объеме 0,02 мл) в течение периода исследования 39 недель. Ежесуточно отмечали и регистрировали общий внешний вид и клинические симптомы. Общепринятые оценки и некоторые другие исследования проводили, как указано в протоколе исследования. Параметры выборки включают тестостерон, антиген предстательной железы (PSA) и объем и массу предстательной железы, но ими не ограничиваются.

Уровни тестостерона и общие уровни PSA количественно определяли в образцах сыворотки крови (следуя стандартной процедуре), используя метод иммуноферментного анализа (EIA) и хемилюминесцентного иммуноанализа (LIA, ALPCO Diagnostics, Salem, NH) соответственно. Образцы крови для оценки уровня тестостерона отбирали у всех животных (натощак) в исходный момент (т.е. перед началом обработки) и на 1-е, 3-и, 7-е, 14-е, 28-е, 64-е и 90-е сутки. Образцы крови для определения PSA отбирали у всех животных (натощак) в исходный момент и в течение 6-й недели. Чтобы провести обсуждение, результаты для образцов с концентрациями ниже предела количественного определения (BLOQ) в анализах тестостерона и PSA учитывали в виде ½ от нижнего предела количественного определения (LLOQ) в анализе и рассматривали как "оценочные конечные концентрации". Данные, приведенные в Таблицах 9-16, представлены в виде "только концентраций, поддающихся количественному определению" (то есть величины BLOQ исключены) в дополнение к "оценочным конечным концентрациям" (то есть образцы с результатом BLOQ включены в виде ½ LLOQ анализа). Объем предстательной железы измеряли на живых животных под анестезией с использованием процедуры трансректальной ультрасонографии (TRUS) в исходной точке и на 6-й неделе. Регистрировали ширину и высоту предстательной железы. Объем предстательной железы рассчитывали как (ширина × ширина × высота × π/6) и нормировали на массу тела. Влажную массу предстательной железы регистрировали при вскрытии после очистки ткани от жира и посторонней ткани.

Результаты и обсуждение

Уровни тестостерона в сыворотке крови представлены на Фиг.15 и в Таблицах 9-12. В исходной точке уровни тестостерона для всех макак в данном исследовании находились в диапазоне, обычном для половозрелых взрослых самцов яванских макак. Однако уровни тестостерона существенно уменьшались у макак, получающих Соединение IV в дозе 100 мг/кг/сутки, и у макак, обработанных положительным контролем (агонистом LHRH). Было продемонстрировано бифазное изменение уровней тестостерона в группе положительного контроля (агониста LHRH), сначала со значительным увеличением (т.е. "острой" реакцией), составляющим 47,4% и 547% (р<0,01) на 1-е и 3-и сутки, соответственно, затем с уменьшением на 3,6%, 67%, 73%, 83% и 85% на 7-е, 14-е, 28-е, 64-е и 90-е сутки (см. Фиг.15 и Таблицы 9-12). Аналогичную "острую" реакцию не наблюдали для какого-либо животного, обработанного Соединением IV даже с самым высоким уровнем дозы (т.е. 100 мг/кг/сутки). Доза и продолжительность обработки были важны для фармакологического действия Соединения IV, при этом дозы 100 мг/кг/сутки подавляли уровни тестостерона в сыворотке крови на 60%, 51%, 42%, 79% и 92% на 3-и, 7-е, 14-е, 28-е и 64-е сутки, соответственно, относительно величины исходной точки (См. Фиг.15 и Таблицы 9 и 10). Через 90 суток обработки Соединением IV (100 мг/кг/сутки) уровень тестостерона у 6 из 10 макак Группы 4 уменьшался до концентраций ниже предела количественного определения данного анализа (ссылка на Таблицу 11). Средний уровень тестостерона в сыворотке крови макак Группы 4 был снижен на 96% по сравнению с соответствующими исходными величинами ("оценочные конечные концентрации", т.е. уровни тестостерона для 6/10 макак с величинами BLOQ рассчитывают как 50% от концентрации LLOQ, см. Таблицу 10). Важно отметить, что на 90-е сутки Соединение IV в дозе 100 мг/кг/сутки снижало уровни тестостерона в сыворотке крови до значительно более низких уровней, чем положительный контроль (агонист LHRH) (р=0,013).

Таблица 9.
Средние уровни тестостерона в сыворотке крови (нг/мл) у интактных самцов макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV; ^@ оценочные конечные концентрации
Сутки	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль (агонист LHRH)
Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N
0 (исх. точк.)	6,1	1,2	10	7,3	1,0	6	4,9	0,6	6	4,4	0,6	10	4,9	0,9	7
1	8,0	1,7	10	11	1,6	6	7,6	1,1	6	8,0	2,2	10	7,2	0,8	7
3	8,2	2,3	10	7,4	1,2	6	5,1	1,1	6	1,8*	0,5	10	32^#$	3,8	7
7	5,9	1,2	10	6,7	0,8	6	7,7	1,9	6	2,2*	0,7	9	4,7	2,6	7
14	3,4	0,5	10	3,8	0,4	6	7,1	1,6	6	2,6	0,9	9	1,6^#	0,2	7
28	3,8	0,6	10	4,7	0,9	6	9,4	2,1	6	0,9*	0,2	10	1,3^#	0,2	7
64	5,1	1,1	10	4,3	0,6	6	5,4	1,5	6	0,3*	0,1	9	0,8^#$	0,2	7
90	3,6	0,6	9	4,2	0,6	4	4,6	1,0	5	0,2*	0,0	10	0,8^#$	0,2	7
LLOQ в анализе тестостерона=0,246 нг/мл; ^@ величины BLOQ рассчитаны как 0,123 нг/мл, половина от LLOQ. *: Статистически значимые (р<0,05) результаты для Соединения IV (100 мг/кг) в сравнении с контролем - разбавителем. #: Статистически значимые (р<0,05) результаты для положительного контроля (агониста LHRH) в сравнении с контролем - разбавителем. $: Статистически значимые (р<0,05) результаты для положительного контроля (агониста LHRH) в сравнении с Соединением IV (100 мг/кг).

Таблица 10.
Процентное изменение (%) средних уровней тестостерона в сыворотке крови по сравнению с исходной точкой; ^@ оценочные конечные концентрации
Сутки	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положит. контроль
1	31	44	54	82	47
3	35	1,8	3,5	-60	547
7	-3,2	-8,1	57	-51	-3,6
14	-44	-48	45	-42	-67
28	-38	-35	92	-79	-73
64	-16	-41	11	-92	-83
90	-42	-42	-5,5	-95	-85
LLOQ в анализе тестостерона = 0,246 нг/мл; ^@ величины BLOQ рассчитаны как 0,123 нг/мл, половина от LLOQ.

Таблица 11.
Средние уровни тестостерона в сыворотке крови (нг/мл) у интактных самцов макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV; ^λ только концентрации, поддающиеся количественному определению
Сутки	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль (агонист LHRH)
Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N
0 (исх. точк.)	6,1	1,2	10	7,3	1,0	6	4,9	0,6	6	4,4	0,6	10	4,9	0,9	7
1	8,0	1,7	10	11	1,6	6	7,6	1,1	6	8,0	2,2	10	7,2	0,8	7
3	8,2	2,3	10	7,4	1,2	6	5,1	1,1	6	1,8	0,5	10	32	3,8	7
7	5,9	1,2	10	6,7	0,8	6	7,7	1,9	6	2,2	0,7	9	4,7	2,6	7
14	3,4	0,5	10	3,8	0,4	6	7,1	1,6	6	2,6	0,9	9	1,6	0,2	7
28	3,8	0,6	10	4,7	0,9	6	9,4	2,1	6	0,9	0,2	10	1,3	0,2	7
64	5,1	1,1	10	4,3	0,6	6	5,4	1,5	6	0,3	0,1	9	0,8	0,2	7
90	3,6	0,6	9	4,2	0,6	4	4,6	1,0	5	0,2	0,0	4	0,8	0,2	7
LLOQ в анализе тестостерона=0,246 нг/мл; ^λ величины BLOQ исключены.

Таблица 12.
Процентное изменение (%) средних уровней тестостерона по сравнению с исходной точкой; ^λ только концентрации, поддающиеся количественному определению
Сутки	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 м г/кг	Соединение IV 100 м г/кг	Положит. контроль
1	31	44	54	82	47
3	35	1,8	3,5	-60	547
7	-3,2	-8,1	57	-51	-3,6
14	-44	-48	45	-42	-67
28	-38	-35	92	-79	-73
64	-16	-41	11	-92	-83
90	-42	-42	-5,5	-95	-85
LLOQ в анализе тестостерона=0,246 нг/мл; ^λ величины BLOQ исключены.

Уровни PSA в сыворотке крови также значительно подавлялись Соединением IV через четыре недели после начала обработки. Уменьшение уровня PSA на 69% и 87% (в среднем) были отмечены для макак, получающих Соединение IV в дозе 10 мг/кг и 100 мг/кг в течение 4 недель, в то время как в группе положительного контроля (агониста LHRH) уровни PSA уменьшались на 60% (Фиг.16 и Таблицы 13-16).

Таблица 13.
Средние уровни PSA в сыворотке крови (нг/мл) у интактных самцов макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV; ^@ оценочные конечные концентрации
	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль (агонист LHRH)
Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N
До обраб.	1,1	0,2	10	1,0	0,2	6	0,8	0,1	6	1,0	0,1	10	1,0	0,1	7
4-я нед.	1,0	0,2	10	0,9	0,2	6	0,3^*	0,1	6	0,1^&	0,1	10	0,4^#$	0,1	7
LLOQ в анализе PSA=0,0575 нг/мл; ^@ величины BLOQ рассчитаны как 0,02875 нг/мл, половина от LLOQ. *: Статистически значимые (р<0,05) результаты для Соединения IV (10 мг/кг) в сравнении с контролем - разбавителем. &: Статистически значимые (р<0,05) результаты для Соединения IV (100 мг/кг) в сравнении с контролем - разбавителем. #: Статистически значимые (р<0,05) результаты для положительного контроля (агониста LHRH) в сравнении с контролем - разбавителем. $: Статистически значимые (р<0,05) результаты для положительного контроля (агониста LHRH) в сравнении с Соединением IV (100 мг/кг).

Таблица 14.
Процентное изменение (%) средних уровней PSA по сравнению с исходной точкой; ^@ оценочные конечные концентрации
	Контроль	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль (агонист LHRH)
4-я нед.	-7,1	-11	-69	-87	-60
LLOQ в анализе PSA=0,0575 нг/мл; ^@ величины BLOQ рассчитаны как 0,02875 нг/мл, половина от LLOQ.

Таблица 15.
Средние уровни PSA в сыворотке крови (нг/мл) у интактных самцов макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV; ^λ только концентрации, поддающиеся количественному определению
	Контроль - разбавитель	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль (агонист LHRH)
Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N	Среднее	SEM	N
До обраб.	1,2	0,2	9	1,0	0,2	6	0,8	0,1	6	1,0	0,1	10	1,0	0,1	7
4-я нед.	1,1	0,1	9	0,9	0,2	6	0,3	0,1	5	0,3	0,1	4	0,4	0,1	7
LLOQ в анализе PSA=0,0575 нг/мл; ^λвеличины BLOQ в этой таблице исключены.

Таблица 16.
Процентное изменение (%) средних уровней PSA по сравнению с исходной точкой; ^λ только концентрации, поддающиеся количественному определению
	Контроль	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль
4-я нед.	-7,1	-11	-64	-72	-60
LLOQ в анализе PSA=0,0575 нг/мл; ^λ величины BLOQ в этой таблице исключены.

Объемы предстательной железы измеряли периодически с использованием TRUS на протяжении исследования. Результаты, полученные через шесть недель обработки, демонстрируют мощный эффект Соединения IV и положительного контроля (агониста LHRH) на предстательную железу макак. Соединение IV значительно, на 25% и 45%, подавляло объемы предстательной железы при уровнях доз 10 мг/кг и 100 мг/кг, соответственно, тогда как в группе положительного контроля (агониста LHRH) объемы предстательной железы уменьшались на 28% (Фиг.17 и Таблицы 17 и 18).

Таблица 17.

Средние объемы предстательной железы (в относительных единицах) у самцов макак после ежесуточного перорального введения Соединения IV

Контроль -разбавитель

Соединение IV 1 мг/кг

Соединение IV 10 мг/кг

Соединение IV 100 мг/кг

Положительный контроль (агонист LHRH)

Среднее

SEM

Среднее

SEM

Среднее

SEM

Среднее

SEM

Среднее

SEM

6-я нед.

438

468

327

242

315

Таблица 18.
Процентное изменение (%) средних объемов предстательной железы по сравнению с исходной точкой
	Контроль	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг	Положительный контроль
6-я нед.	0	6,8	-25	-45	-28

Ассоциированное с Соединением IV уменьшение объема предстательной железы было подтверждено результатами оценки массы предстательной железы при вскрытии. Через тринадцать недель обработки Соединением IV значительно, на 24% и 21%, уменьшались средние массы предстательной железы у животных, получающих 10 и 100 мг/кг/сутки, соответственно (Фиг.18В и Таблицы 19 и 20).

Таблица 19.

Средние массы предстательной железы (в граммах) при вскрытии у макак при ежесуточном пероральном введении Соединения IV

Контроль - разбавитель

Соединение IV 1 мг/кг

Соединение IV 10 мг/кг

Соединение IV 100 мг/кг

Среднее

SEM

Среднее

SEM

Среднее

SEM

Среднее

SEM

13-я нед.

1,8

0,2

1,8

0,4

1,3

0,1

1,4

0,1

Таблица 20.
Процентное изменение (%) средних масс предстательной железы по сравнению с исходной точкой
	Контроль	Соединение IV 1 мг/кг	Соединение IV 10 мг/кг	Соединение IV 100 мг/кг
13-я нед.	0	1,7	-24	-21

Никаких выраженных эффектов на агрегацию тромбоцитов, протромбиновое время (РТ) или активированное частичное тромбопластиновое время (АРТТ) не наблюдали.

ПРИМЕР 17

Исследования Соединения IV на людях

Проводили исследование с целью определения влияния Соединения IV на мужчин. Исследования проводили на 12 субъектах на одну группу, используя дозировки Соединения IV 100, 300, 600 и 1000 мг. В Таблице 21 представлены средние изменения уровней LH, PSA, свободного тестостерона и общего тестостерона в сыворотке крови у мужчин после введения Соединения IV в дозировках 100, 300, 600 и 1000 мг. Дозозависимые средние уровни общего тестостерона (нмоль/л) у людей измеряли в период между 1-ми и 11-ми сутками (Фиг.19). Уровень общего тестостерона понижался на 51,9% и 47,9% для дозировок 600 мг и 1000 мг соответственно.

Дозозависимые средние уровни LH (МЕ/л) у людей измеряли в период между 1-ми и 10-ми сутками (Фиг.20). Уровни LH повышались на 20,7%, 46,9%, 27,6% и 29,2% для дозировок 100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг соответственно.

Дозозависимые средние уровни свободного тестостерона (пг/мл) у людей измеряли в период между 1-ми и 10-ми сутками (Фиг.21). Уровни свободного тестостерона понижались на 17,0%, 18,5%, 72,7% и 53,2% для дозировок 100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг соответственно.

Дозозависимые средние уровни PSA (мкг/л) у людей измеряли в период между 1-ми и 10-ми сутками (Фиг.22). Уровни PSA понижались на 9,2%, 24,4%, 27,5% и 29,9% для дозировок 100 мг, 300 мг, 600 мг и 1000 мг соответственно. Не отмечено никаких изменений для доз 10 и 30 мг.

Таблица 21.
Среднее изменение от исходной точки
	100 мг	300 мг	600 мг	1000 мг
PSA сыворотки крови	-9,2%	-24,4%	-27,5%	-29,9%
LH	20,7%	46,9%	27,6%	29,2%
Свободный тестостерон	-17,0%	-18,5%	-72,7%	-53,2%
Общий тестостерон	3,9%	7,3%	-51,9%	-47,9%

ПРИМЕР 18

Биодоступность Соединения IV

Соединение IV быстро всасывалось после перорального введения крысам, собакам и макакам. Пероральная биодоступность Соединения IV для крыс лежала в диапазоне от 6% до 25% в зависимости от композиции, в которой вводили дозу. Композиции, приготовленные с использованием полиэтиленгликоля 300 (ПЭГ300), как правило оказывали большее воздействие, чем микроэмульсии, приготовленные на Твине 80, разбавленном деионизованной водой. Визуальный контроль профилей "концентрация в плазме крови-время" на собаках позволил сделать предположение, что Соединение IV подвергается кишечно-печеночной рециркуляции, о чем свидетельствует второй пик в конечной фазе. Важно отметить, что воздействие на собак в группе самцов, получающих пероральную дозу 30 мг/кг в ПЭГ300, превышало воздействие, необходимое для оказания максимального эффекта на уменьшение предстательной железы в крысиной модели подавления LH. Предварительные фармакокинетические исследования на макаках позволили сделать предположение, что пероральная биодоступность у этого вида приблизительно соответствует таковой или превышает таковую у собак, что подтверждалось измерением концентраций Соединения IV в плазме крови и подавлением уровня тестостерона в сыворотке крови на протяжении семи суток. В целом эти данные говорят о том, что достаточное воздействие при пероральном введении может быть достигнуто у двух видов животных, не являющихся грызунами, для получения желаемого фармакологического эффекта (на основании данных о AUC). Далее, данные по эндокринной системе у крыс и макак говорят о том, что фармакологические эффекты Соединения IV являются обратимыми (т.е. концентрации тестостерона в сыворотке крови возвращаются к исходной точке или нормальным уровням после прекращения лечения Соединением IV).

ПРИМЕР 19

Фармакокинетика Соединения IV

Предварительные данные исследований метаболизма in vitro (мышь, крыса, собака, макак и человек) и in vivo (крыса) позволили сделать предположение, что совместное участие Соединения IV, его гидроксилированного метаболита(ов) и его N-деалкилированного метаболита вносит вклад в общее распределение Соединения IV у животных и людей. Результаты межвидовых сравнений, хотя и являются только качественными, показывают, что общие метаболические профили у видов, не участвующих в клинических исследованиях, адекватно отражают профиль, генерируемый в микросомах печени человека. Согласно этим результатам крысы и собаки представляют собой виды грызунов и животных, не являющихся грызунами, соответственно, подходящие для фармакологических и токсикологических оценок. Исследования in vitro показывают, что Соединение IV не индуцирует релевантные изоформы CYP450 (цитохром Р450-зависимой монооксигеназы) (CYP1A2, CYP2B6 или CYP3A4) и не ингибирует CYP1A2, CYP2C19, CYP2D6 или CYP3A4/5 в концентрациях < 30 мкМ. CYP2C9 ингибируется Соединением IV, но только при высоких концентрациях (K_i=8 мкМ) и возможные фармакокинетические межлекарственные взаимодействия считаются маловероятными.

ПРИМЕР 20

Биологическая активность Соединения IV

Соединение IV оказывает незначительное ингибирующее влияние или не оказывает никакого ингибирующего влияния in vitro (IC₅₀ ≥ 300 мкМ) на hERG-канал (продукт гена специфических калиевых каналов сердца человека, от англ. human ether a-go-go-related gene). Соединение в концентрации 10 и 100 мкМ дозозависимым образом снижает APD₅₀ и APD₉₀ (длительности потенциала действия при 50% и 90% реполяризации) в изолированных волокнах Пуркинье собаки in vitro. Однако Соединение IV не затрагивает гемодинамическую или сердечную функцию (кровяное давление, частоту сердечных сокращений, структуру электрокардиограммы или интервалы QT (минутный объем сердца)) при измерении посредством телеметрии у собак в любой дозе (до 300 мг/кг включительно). Не наблюдали никаких нейрофармакологических или легочных эффектов. Не отмечено никаких значительных эффектов на почечную функцию при использовании однократной пероральной дозы Соединения IV до 30 мг/кг включительно. Наблюдали только повышенное выделение мочи и выделение в мочу ионов калия и хлора при введении самой высокой протестированной дозы (100 мг/кг). Пероральное введение Соединения IV в дозах 30-300 мг/кг у крыс вызывало значительное усиление перистальтики, а пероральное введение Соединения IV в дозе 30 мг/кг у крыс вызывало значительное усиление моторики желудочно-кишечного тракта и кислотности желудочного сока (по всей вероятности не вследствие влияния на гладкую мускулатуру).

Соединение IV в концентрациях до 200 мкМ включительно не являлось мутагенным и не вызывало структурных или количественных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови человека in vitro. Соединение IV хорошо переносилось крысами и собаками после однократного и повторного перорального введения (до 28 суток включительно). Не наблюдали никаких патологических изменений в почках, печени, сердце и других органах, не являющихся мишенями. Не было никаких серьезных физических симптомов, эффектов на массу тела, клинических патологических изменений, офтальмологических, электрокардиографических или гистопатологических изменений, связанных с пероральным введением Соединения IV самцам или самкам собак на протяжении до 28 суток включительно.

Наряду с тем, что в данном описании проиллюстрированы и изложены некоторые признаки изобретения, специалисты в данной области далее будут находить многочисленные модификации, замены, изменения и эквиваленты. Поэтому следует понимать, что формула изобретения предназначена для включения всех таких модификаций и изменений, которые подпадают под понятие реальной сущности изобретения.

1. Способ лечения распространенного рака предстательной железы у субъекта мужского пола, по существу состоящий из введения терапевтически эффективного количества соединения формулы IV или его изомера, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, полиморфа, гидрата или любой их комбинации:

2. Способ по п.1, где указанное лечение распространенного рака предстательной железы осуществляют путем снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, и где указанное снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

3. Способ по п.1, где указанное лечение распространенного рака предстательной железы осуществляют путем снижения уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, и где указанное снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

4. Способ по п.3, где указанное снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови происходит вследствие увеличения уровней глобулина, связывающего половые гормоны (SHBG), ингибирования продуцирования или секреции тестостерона клетками Лейдига в яичках или уменьшения стероидогенеза в надпочечниках.

5. Способ по п.4, где указанный общий тестостерон в сыворотке крови содержит свободный тестостерон и связанный тестостерон, где снижение указанных уровней свободного тестостерона, независимое от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови, происходит вследствие увеличения уровней SHBG.

6. Способ по п.2 или 3, где общий тестостерон в сыворотке крови или свободный тестостерон в сыворотке крови снижен до уровня меньше примерно 100 нг/дл, 50 нг/дл или 25 нг/дл.

7. Способ по п.1, где введение указанного соединения производит снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, не вызывая побочных эффектов, связанных с антиандрогенной терапией (ADT).

8. Способ по п.1, где введение указанного соединения производит снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови, не вызывая приливов, гинекомастии, сниженной минеральной плотности кости или повышенной склонности к перелому кости.

9. Способ по п.8, где указанное снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови происходит путем уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

10. Способ по п.8, где указанное снижение уровней общего тестостерона в сыворотке крови или свободного тестостерона в сыворотке крови не зависит от уменьшения уровней лютеинизирующего гормона в сыворотке крови.

11. Способ по п.1, где указанный способ также подавляет, снижает частоту возникновения, ослабляет тяжесть или ингибирует распространенный рак предстательной железы.

12. Способ по п.1, где указанный способ также обеспечивает паллиативное лечение распространенного рака предстательной железы.

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ лечения псориаза или симптомов, связанных с ним, у субъекта, включающий местное введение на участок кожи субъекта местной композиции, включающей терапевтически эффективное количества агониста α2 адренергических рецепторов и фармацевтически приемлемый носитель, где поверхность кожи подвержена воздействию псориаза или симптома, связанного с ним, или склонна к этому, и где агонистом α2 адренергических рецепторов является бримонидин.

Композиции, содежащие берберин или его аналоги для лечения кожных заболеваний, связанных с розацеа или с покраснением лица // 2533458

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой местную фармацевтическую композицию для лечения розацеа, содержащую по меньшей мере 0,02% берберина или биологически эквивалентного аналога берберина, такого как пальматин и компонент, выбранный из группы, состоящей из воды, метанола, этанола и диметилсульфоксида, где берберин или биологически эквивалентный аналог берберина представляет собой основной фармацевтический активный компонент.

Стабилизированная композиция для лечения псориаза // 2526162

Изобретение относится к медицине и описывает неводную мазь, включающую соединение витамина D, кортикостероид и сложный эфир N,N-ди(C1-C8)алкиламино-замещенной (C4-C18)алкил(C2-C18)карбоновой кислоты в вазелине, необязательно содержащую минеральное масло и токоферол.

Производные циклоспорина для лечения глазных и кожных заболеваний и состояний // 2521358

Изобретение относится к соединению, выбранному из группы, состоящей из соединений, представленных формулой В указанной формуле R1 представляет собой S-Alk-R, где Alk представляет собой метилен, C2-C6 полиметиленовую связь или C3-C6 алкениленильную связь, R представляет собой -N=C(NR3R4)(NR5R6) или -NR7[(NR3R4)C=NR5], или -N=C(R8)(NR9R10), где R3-R10 представляет собой H, Alk, Ar или (CH2)nAr, где Ar представляет собой арильную группу, и n представляет собой целое число от 1 до 13, или R3 и R4, или R4 и R5, или R5 и R7, или R3 и R7, или R9 и R10, или R8 и R9 вместе могут представлять собой -(CH2)x-, где x представляет собой целое число от 2 до 5, и R2 выбран из группы, состоящей из гидроксила, алкила, имеющего от 1 до 7 атомов углерода, и замещенного гидроксилом алкила, имеющего от 1 до 7 атомов углерода.

Режим дозировки селективного агониста рецептора s1p1 // 2519660

Предложены применение (R)-5-[3-хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[2]илиден]-2-([2]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-она (Соединение 1) или его соли для получения лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения болезни или расстройства, связанного с активацией иммунной системы, где лекарственный препарат представляет собой набор доз Соединения 1, причем в течение начальной фазы лечения доза индуцирует десенсибилизацию сердца и она ниже конечной дозы, и при указанной начальной фазе лечения доза вводится с частотой, которая обеспечивает поддерживание десенсибилизации сердца до тех пор, пока не произойдет следующее острое снижение частоты сердечных сокращений, а затем дозу титруют с повышением до конечной дозы Соединения 1; соответствующие способ лечения и набор доз.

Экстракт из надземных частей овса, выращенного до начала колошения // 2517346

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции, обладающей иммуномодулирующими и противовоспалительными свойствами. Дерматологическая композиция, обладающая иммуномодулирующими и противовоспалительными свойствами, содержит в качестве активного ингредиента экстракт надземной части/частей овса, собранных до начала колошения.

Феноксипиридиниламидные производные и их применение в лечении pde4-опосредованных болезненных состояний // 2509077

Изобретение относится к соединению формулы (I): где R1 представляет собой NR7C(O)R8 или NR9R10; R2 представляет собой водород; R3 представляет собой галоген; R4 представляет собой водород, галоген, циано, гидрокси, С1-4алкил, C1-4алкокси, CF3, OCF3, С1-4алкилтио, S(O)(С1-4алкил), S(O)2(С1-4алкил), СО2Н или CO2(С1-4алкил); R5 представляет собой C1-6алкил (замещенный NR11R12 или гетероциклилом, который представляет собой неароматическое 5-7-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу); R6 представляет собой водород, галоген, гидрокси, С1-4алкокси, CO2H или C1-6алкил (возможно замещенный группой NR15R16, морфолинилом или тиоморфолинилом); R7 представляет собой водород; R8 представляет собой С3-6циклоалкил (возможно замещенный группой NR24R25), фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом или с одним 6-членным ароматическим гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу; R9 представляет собой водород или C1-6алкил (возможно замещенный пиразолилом); R10 представляет собой C1-6алкил (возможно замещенный группой фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу; где вышеуказанные фенильные и гетероарильные группировки в R8, R9 и R10 независимо возможно замещены группой: галоген, гидрокси, C(O)R42, C1-6алкил, C1-6гидроксиалкил, C1-6галогеноалкил, С1-6алкокси(С1-6)алкил или С3-10циклоалкил; если не указано иное, то гетероциклил возможно замещен группой C1-6алкил, (С1-6алкил)ОН, (С1-6алкил)С(O)NR51R52 или пирролидинилом; R42 представляет собой C1-6алкил; R12, R15 и R25 независимо представляют собой C1-6алкил (возможно замещенный группой гидрокси или NR55R56); R11, R16, R24, R51, R52, R55 и R56 независимо представляют собой водород или C1-6алкил; или к его фармацевтически приемлемым солям.

Пептид-антагонист активности интерлейкина-15 // 2506270

Изобретение относится к области молекулярной фармакологии и, в частности, к пептиду, представляющему собой производное последовательности интерлейкина-15 (IL-15), оптимизированное для ингибирования биологической активности этого соединения.

Способ лечения локализованных форм псориаза // 2501563

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для лечения локализованных форм псориаза. Для этого вводят глутоксим по периметру псориатической бляшки на расстоянии 1,0-1,5 см по 0,1 мл 1% раствора глутоксима один раз в сутки курсом 7-12 процедур.

Способ лечения псориаза // 2500443

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии. Предложен способ лечения псориаза, включающий нанесение на область поражения мази и воздействие на нее ультразвуком.

Солнцезащитные композиции, содержащие каротиноиды // 2446792

Замещенные циклоалкеновые производные // 2386613

Изобретение относится к новым замещенным циклоалкеновым производным формулы (I) в которой X и Y представляют собой группу, в которой Х и Y вместе с атомом углерода кольца В, к которому они присоединены, образуют кольцо А, Х и Y вместе представляют заместитель кольца В или Х и Y каждый представляет собой атом водорода.

Общий синтез мириапоронов // 2328492

Изобретение относится к соединению формулы I, где R выбран из Н, SiR'3, SOR', SO 2R', C(=O)R' или необязательно замещенного C 1-С6алкила; R' выбран из C 1-С6алкильной группы; R'' выбран из CH2OR, C1 -С6алкила, C1-С 6галогеналкила, С2-С 6алкенила или C1-С 6алкилидена; заместителями являются алкоксигруппы.

Способ получения 1,2-5,6-диангидро-3,4-бис-( @ - карбоксипропионил)-дульцита или его динатриевой соли // 1225487

Способ получения производных дульцита или их солей // 1205769

Производные дульцита,обладающие ингибирующим действием в отношении злокачественных опухолей // 1194863

Способ получения четвертичных солей простых эфиров 6,11- дигидродибензо @ тиепин-11- @ -алкилнорскопина // 1144618

Способ получения производных бензопирана или их солей // 741797

Способ получения 1-арилселено-2,3 -эпоксипропанов // 527422

Патент 156641 // 156641

Эпоксиды 3-метил-6-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-3-ен-1,2-диола-новые противопаркинсонические и противосудорожные средства // 2571299

Изобретение касается применения эпоксидов 3-метил-6-(1-метилэтенил)циклогекс-3-ен-1,2-диола, описываемых формулами 1-3, включая их пространственные изомеры, в том числе оптически активные формы, в качестве средств для лечения болезни Паркинсона и противосудорожных средств, и может быть использовано в медицине. Средства обладают высокой активностью и могут быть получены из доступного природного сырья. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 9 пр.