Способ прогнозирования развития хронического травматического остеомиелита при переломах

Авторы патента:

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

Владельцы патента RU 2545767:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Читинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения РФ (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития хронического травматического остеомиелита при переломах. Осуществляют исследование крови и, при выявлении генотипа А/А G-308A гена TNFa, прогнозируют развитие хронического травматического остеомиелита. Изобретение позволяет с большей точностью прогнозировать развитие хронического травматического остеомиелита на стадии доклинических проявлений и вносить необходимую коррекцию в лечение данной группы пациентов. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития хронического травматического остеомиелита при переломах.

Проблема травматического остеомиелита является одной из наиболее актуальных в современной травматологии и ортопедии. Хронический остеомиелит развивается в 21-46,2% случаев после оперативного лечения открытых и в 7,6-13,2% - закрытых переломов [1].

Известен способ прогнозирования развития травматического остеомиелита нижней челюсти [2]. О возможном развитии остеомиелита судят по повышению содержания начальных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и снижения антиокислительной активности (АОС) в сыворотке крови больных. Способ осуществляют путем определения в сыворотке крови в динамике (1-2, 5-6, 12 сутки) содержания первичных (диеновые конъюгаты, диеновый кетон) и промежуточных (малоновый диальдегид) продуктов ПОЛ. Для оценки состояния АОС определяют активность каталазы и супероксид-дисмутазы. При повышении диеновых конъюгатов, диенового кетона, малонового диальдегида и снижении уровня каталазы и супероксиддисмутазы от контрольных величин на 12-е сутки с момента поступления, прогнозируют развитие остеомиелита нижней челюсти.

Однако этот способ имеет ряд недостатков: во-первых, сложность и длительность; во-вторых, исследование только показателей системы «ПОЛ-антиоксиданты» является недостаточно информативным, поскольку дисбаланс в этой системе может регистрироваться при различных патологических состояниях, кроме того, оценка многокомпонентной антиоксидантной защиты по изучению содержания только каталазы и супероксиддисмутазы является не совсем объективной, поскольку антиоксидантная защита обеспечивается большим количеством соединений как ферментативной, так и неферментативной природы [3]. В связи с этим повышение или снижение этого параметра является не достаточно объективным критерием оценки развития остеомиелита.

Прототипом для данного изобретения служит способ прогнозирования развития остеомиелита в послеоперационном периоде при переломах длинных трубчатых костей [4], основанный на определении показателя лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА) в венозной крови больных на 9-10-е сутки после оперативного вмешательства и при значении данного показателя менее 7,5% прогнозируют развитие посттравматического остеомиелита.

К недостаткам способа можно отнести то, что развитие остеомиелита оценивается по значению неспецифического иммунологического параметра (ЛТА), что снижает достоверность прогноза, и не учитывается один из наиболее важных факторов развития воспалительного процесса - генетическая предрасположенность [5].

Для повышения точности прогноза развития хронического травматического остеомиелита при переломах, в буккальной эпителии или венозной крови больных при поступлении определяют полиморфизм гена TNFα (G-308А) и при выявлении А/А генотипа TNFα (G-308A), прогнозируют развитие хронического травматического остеомиелита.

Способ выполняют следующим образом.

При госпитализации в клинику по поводу перелома, у больного осуществляли забор 5,0 мл крови из локтевой вены в гепаринизированную пробирку и выполняли молекулярно-генетический анализ образцов ДНК. Для исследования выбирали точковую мутацию TNF-α в позиции 308 (G>A). Амплификацию фрагмента гена TNF-α проводили в термоцикле (модель Ре «Бис» - Mill (000 «Бис-Н», Новосибирск). В работе использовали стандартные наборы праймеров НПФ «Литех» - «SNP» (Москва). Визуализацию продуктов амплификации выполняли с помощью электрофореза в 3% агарозном геле с добавлением бромистого этидия, проходящем в ультрафиолетовом свете [9]. Полученные данные трактуют следующим образом, при выявлении А/А генотипа TNFα (G-308A) прогнозируют возможность развития хронического травматического остеомиелита.

Доказано, что к одним из основных факторов, определяющих особенности исхода при переломах, относится иммунная система, нарушение которой может приводить к развитию воспалительных осложнений [6, 7]. Иммунные клетки секретируют многочисленные растворимые медиаторы (цитокины), часть которых является высокоспецифическими [8]. Одним из таких цитокинов является TNF-a, который играет ключевую роль в развитии воспалительного ответа: инициирует синтез IL-1, IL-6, служит хемоаттрактантом для нейтрофильных гранулоцитов, активирует макрофаги, а также стимулирует пролиферацию Т- и В-лимфоцитов. TNF-α вовлечен в патогенез большинства инфекционных и иммунопатологических заболеваний [3, 6, 7, 8].

Согласно исследованиям последних лет, ведущая роль в развитии гнойно-воспалительного процесса отводится наследственным факторам. Генетически запрограммированный повышенный или пониженный синтез TNFα сказывается на способности иммунной системы человека реагировать на разные виды патогенов и на развитии целого ряда иммунопатологических процессов [5, 9]. Вследствие вышесказанного, выявление ассоциации той или иной патологии с определенным генотипом, в конечном итоге, может дать возможность для создания базы данных, позволяющей сделать долгосрочный индивидуальный прогноз для конкретного лица и провести необходимые терапевтические мероприятия для предотвращения развития осложнений заболевания или снижения тяжести его протекания [5].

Способ прогнозирования развития хронического травматического остеомиелита при переломах иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной П., 38 лет, госпитализирован с диагнозом: Закрытый оскольчатый перелом левой большеберцовой кости в нижней трети, малоберцовой кости в верхней трети со смещением отломков. Пациенту выполнено оперативное вмешательство - открытая репозиция металлоостеосинтез пластиной. Послеоперационная терапия проводилась по общепринятым методам. При поступлении пациенту произведено исследование генотипа TNFα (G-308A). Установлено, что у больного G/G генотип. Прогнозировано благоприятное течение посттравматического периода. Послеоперационный период протекал без особенностей, заживление раны первичным натяжением. Терапия в послеоперационном периоде проводилась по стандартной методике (дезагреганты, лечебная физкультура, массаж). В последующем, при контрольных осмотрах через 1, 3, 6 и 12 месяцев - признаков развития остеомиелита не выявлено.

Пример 2. Больной Д., 36 лет, госпитализирован с диагнозом: Закрытый косой перелом левой большеберцовой кости в средней трети со смещением отломков. Пациенту выполнено оперативное вмешательство - закрытая репозиция металлоостеосинтез интрамедуллярным блокируемым стержнем. При поступлении выполнено определение генотипа TNFα (G-308A). Выявлен А/А генотип. Прогнозирована вероятность развития посттравматического остеомиелита в позднем послеоперационном периоде, в результате чего на фоне традиционной терапии дополнительно проведен курс лечения препаратами улучшающими микроциркуляцию и антибактериальная терапия. В раннем послеоперационном периоде осложнений не зафиксировано, однако, через 2 месяца у больного появилась боль, отек в области нижней трети голени, повышение температуры тела, открылся свищ по передне-наружной поверхности нижней трети голени. По клинико-рентгенологическим признакам выставлен диагноз: хронический травматический остеомиелит левой большеберцовой кости в нижней трети, свищевая форма, фаза секвестрации, обострение.

Пример 3. Больной И., 31 лет, госпитализирован с диагнозом: Закрытый оскольчатый перелом левой большеберцовой кости в нижней трети, косой перелом малоберцовой кости в верхней трети со смещением отломков. Пациенту выполнено оперативное вмешательство - открытая репозиция металлоостеосинтез блокируемым стержнем. При поступлении выполнено определение генотипа TNFα (G-308A). Выявлен А/А генотип. Было предположено неблагоприятное течение позднего послеоперационного периода, в результате чего пациенту дополнительно назначен курс иммуномодулирующей, органотропной антибактериальной терапии и препаратов улучшающих микроциркуляцию. В последующем, при контрольных осмотрах через 1, 3, 6 и 12 месяцев - признаков развития остеомиелита не выявлено.

Предложенный способ прогнозирования развития хронического остеомиелита апробирован у 55 пациентов с переломами длинных костей конечностей.

Установлено, что у 11 пациентов выявлен А/А генотип TNFα (G-308A). В данной группе у всех пациентов зафиксировано развитие травматического остеомиелита. У 44 больных данный генотип не обнаружен. При контрольных осмотрах в 3, 6 и 12 месяцев, у всех пациентов остеомиелита не отмечено.

Следовательно, выявление А/А генотипа TNFα (G-308A) у больных с переломами позволяет с большей точностью прогнозировать развитие хронического травматического остеомиелита на стадии доклинических проявлений и вносить необходимую коррекцию в лечение данной группы пациентов.

Источники информации

1. Зайцев А.Б. Реконструктивно-восстановительное лечение больных остеомиелитом голени: автореф. дис.… докт. мед. наук: 14.00.22 / А.Б. Зайцев. - Нижний Новгород, 2009. - 32 с.

2. Хасанов А.И. Значение уровня продуктов перекисного окисления липидов для прогнозирования травматического остеомиелита нижней челюсти / А.И. Хасанов, А.И. Абдуллаев // Стоматология. - 2002. - №2. - С.27-29.

3. Шанин Ю.Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике (теоретическое обоснование и стратегия поведения) // Ю.Н. Шанин, В.Ю. Шанин, Е.В. Зиновьев. - СПб.: ЭЛБИ, 2003. - 128 с.

4. Патент №2412441, РФ, МПК G01N 33/49. Способ прогнозирования развития остеомиелита при переломах длинных трубчатых костей в послеоперационном периоде / A.M. Мироманов и [др.]; заявитель и патентообладатель ГОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия». - №2009119760; заявл. 25.05.2009; опубл. 20.02.2011, Бюл. №5. - 7 с.

5. Рыдловская А.В. Функциональный полиморфизм гена TNF-a и патология / А.В. Рыдловская, А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2005. - №3. - С.4-10.

6. Мироманов A.M. Патогенетическое обоснование использования вилона в комплексном лечении открытых переломов: дис.… канд. мед. наук: 14.00.16 / A.M. Мироманов. - Чита, 2007. - 135 с.

7. Теоретические и клинические аспекты биорегулирующей терапии в хирургии и травматологии / Б.И. Кузник и [др.]. - Новосибирск: Наука, 2008. - 311 с.

8. Кетлинский С.А. Цитокины / С.А. Кетлинский, А.С. Симбирцев. - СПб.: Фолиант, 2008. - 552 с.

9. Коненков В.И. Структурные основы и функциональная значимость аллельного полиморфизма генов цитокинов человека и их рецепторов / В.И. Коненков, М.В. Смольников // Медицинская иммунология. - 2003. - Т.5. - №1-2. - С.11-28.

10. Полиморфизм гена IL-10 (C819T) у больных с воспалительными заболеваниями пародонта в Забайкальском крае / Н.Э. Доржиева и [др.] // [Электронный ресурс] // Забайкальский медицинский вестник. - 2011. - №1. - С.44-48. Режим доступа: http://medacadem.chita.ru/zmv.

Способ прогнозирования развития хронического травматического остеомиелита при переломах, включающий исследование крови, отличающийся тем, что определяют полиморфизм гена TNFa (G-308A) и при выявлении А/А генотипа TNFa (G-308A) прогнозируют развитие хронического травматического остеомиелита.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, неонатологии и пульмонологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования исходов врожденной пневмонии у глубоконедоношенных новорожденных.

Способ прогнозирования риска развития пролапса гениталий у женщин // 2542441

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования степени риска развития пролапса гениталий у женщин. Проводят отбор биоматериала для выделения ДНК.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2542435

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунотерапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения у пациента с раком. Для этого пациенту вводят иммуногенную композицию, которая содержит рекомбинантный вирусный вектор, экспрессирующий in vivo весь или часть MUC-1 антигена.

Способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии тяжелой степени у новорожденных с внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией // 2542429

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и описывает способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии тяжелой степени у новорожденных с внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией.

Способ прогнозирования риска развития хронической плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных // 2540928

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных.

Способ оценки тяжести текущего депрессивного эпизода у больных рекуррентным депрессивным расстройством // 2540491

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для оценки тяжести течения текущего депрессивного эпизода у больных рекуррентным депрессивным расстройством.

Способ дифференциальной диагностики анемии у детей // 2538722

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике и может быть использовано для дифференциальной диагностики анемии у детей. На гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) и гемоглобин ретикулоцитов (Ret-He), а в сыворотке крови определяют уровень растворимого рецептора трансферрина (p-ТФР), эритропоэтина сыворотки (ЭПО), сравнивают полученные показатели с референсными интервалами.

Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности // 2537241

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки).

Способ диагностики прогрессирующих форм рака яичников // 2536272

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и описывает способ диагностики стадий распространенного рака яичников, включающий исследование плазмы крови, где у пациентки определяют стадию заболеванию по международной гинекологической классификации (FIGO) и относят его к III или IV клинической стадии по уровню окислительной модификации белков (ОМБ) в плазме крови, причем III стадия определяется уровнем ОМБ от 4,638 до ∞, а IV стадия - уровнем ОМБ от 0 до 4,638.

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности свободноягодника колючего, элеутерококка (eleutherococcus senticocus (rupr. et maxim.) maxim.) // 2535064

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности свободноягодника колючего, элеутерококка (Eleutherococcus senticocus (Rupr.

Способ ранней диагностики синдрома жировой эмболии при переломах длинных трубчатых костей и костей таза // 2545805

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии; может быть использовано для ранней диагностики синдрома жировой эмболии при переломах длинных трубчатых костей и костей таза и контроля эффективности проводимого лечения. Способ диагностики синдрома жировой эмболии заключается в исследовании сыворотки венозной крови, забранной у пациента в первые сутки посттравматического периода, и определении в ней концентрации белка S100B иммуноферментным методом. При превышении нормы белка S100B, составляющей 125 нг/л, диагностируется синдром жировой эмболии. Предложенный способ позволяет повысить точность ранней диагностики СЖЭ без необходимости выполнения спинальной пункции или пункции бедренной артерии, способных привести к серьезным осложнениям. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования течения хронической сердечной недостаточности у больных ишемической болезнью сердца // 2545899

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования течения хронической сердечной недостаточности у пациентов с ишемической болезнью сердца. У пациентов определяют полиморфизм гена белка p53. При наличии аллеля Arg и генотипа Arg/Arg полиморфного локуса Arg72Pro экзона 4 прогнозируют неблагоприятное течение заболевания. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование неблагоприятного течения хронической сердечной недостаточности у больных ишемической болезнью сердца, что позволяет выделить приоритетную группу больных для диспансерного наблюдения с организацией мероприятий, направленных на предотвращение у них преждевременной смертности. 5 табл., 2 пр.

Способ диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы и набор для его осуществления // 2545995

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности онкологии и молекулярной биологии. Предложены способ и набор праймеров и зонда с последовательностями SEQ ID NO: 1, 2 и 3 для осуществления полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы (СПК). Оценивают количественное содержание мРНК гена ACY1. При сниженном содержании мРНК в предположительно пораженной раком ткани человека по сравнению с количеством мРНК в здоровой ткани диагностируют СПК. Предложенная группа изобретений позволяет с высокой достоверностью диагностировать СПК, в том числе на ранней стадии опухолевого заболевания. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 6 пр.

Способ диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы и набор для его осуществления // 2545998

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности онкологии и молекулярной биологии. Предложены способ и набор праймеров и зонда с последовательностями SEQ ID NO: 1, 2 и 3 для осуществления полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы (СПК). Оценивают количественное содержание мРНК гена NETO2. При повышенном содержании мРНК в предположительно пораженной раком ткани человека по сравнению с количеством мРНК в здоровой ткани диагностируют СПК. Предложенная группа изобретений позволяет с высокой достоверностью диагностировать СПК, в том числе на ранней стадии опухолевого заболевания. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 6 пр.

Способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии средней степени тяжести у новорожденных с внутритрубной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией // 2546010

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии. Целью предлагаемого изобретения является ранняя диагностика вентрикуломегалии при церебральной ишемии средней степени тяжести, обусловленной внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией у новорожденных, где при отсутствии развития вентрикуломегалии на 5 сутки жизни в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата сразу после рождения концентрация серомукоида составляет 0,136-0,166 единиц оптической плотности, а при развитии вентрикуломегалии на 5 сутки жизни в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата сразу после рождения концентрация серомукоида равняется 0,167-0,196 единиц оптической плотности. 2 табл., 3 пр.

Способ оценки генетической предрасположенности к развитию тромбоэмболии легочной артерии // 2546296

Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки генетической предрасположенности к развитию тромбоэмболии легочной артерии (ТЭЛА). При наличии клинических факторов риска развития ТЭЛА у пациента забирают 3 мл венозной крови и выполняют анализ полиморфизмов -174 G>C гена IL-6 и -308 G>A гена TNFальфа методом полимеразной цепной реакции. Результаты генотипирования оценивают путем присвоения определенного числа баллов: при выявлении генотипа GG гена IL-6 присваивают 3 балла, GC - 1 балл, CC - 0 баллов, при наличии генотипа GG гена TNFальфа присваивают 3 балла, GA - 1 балл, AA - 0 баллов, после чего баллы конкретного пациента суммируют. При числе баллов 4 и выше делают вывод о наличии индивидуальной предрасположенности к развитию ТЭЛА. Изобретение обеспечивает эффективную оценку генетической предрасположенности к развитию ТЭЛА. 2 табл., 2 пр.

Способ выявления белков в разных типах клеток млекопитающих и человека с помощью флуоресцеин-5-изотиоцианата на микроскопическом уровне // 2547594

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для анализа локализации и содержания белкового компонента в клетках млекопитающих с различным уровнем синтетических процессов. Предлагается способ выявления внутриклеточных белков с помощью флуоресцеин-5-изотиоционата (ФИТЦ) в клетках разных типов млекопитающих, которые характеризуются различным уровнем синтетических процессов, с применением метода конфокальной лазерной микроскопии. Клетки млекопитающих фиксируют параформальдегидом (ПФА), предотвращающим экстракцию белков на последующих стадиях окрашивания, пермеабилизуют детергентом, затем в течение 2 ч окрашивают ФИТЦ в концентрации 1 мкг/мл. Клетки заключают в Мовиол 4-88 с добавлением DABCO (1,4-диазобицикло [2.2.2] октан). Полученные препараты используют для анализа локализации и содержания белкового компонента клеток с помощью конфокальной микроскопии. Изобретение позволяет получить информацию и исследовать расположение белков внутри клеток и производить сравнительный анализ содержания белков в клетках с разным уровнем метаболизма. 7 ил., 7 пр.

Мультимаркерная панель для гипертрофии левого желудочка // 2548710

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается диагностики различных видов гипертрофии левого желудочка. Для этого определяют количество маркера некроза - сердечного тропонина Т, маркера сердечной функции - NT-proBNP и одного из маркера воспаления - GDF-15. По сравнению их количеств с эталонными значениями диагностируют физиологическую или патологическую гипертрофию левого желудочка. Кроме того, при наличии патологической гипертрофии определяют соотношения между маркером сердечной функции и воспалительным маркером, а также между маркером некроза и воспалительным маркером и, сравнивая эти соотношения с эталонными значениями, определяют, страдает ли субъект гипертрофической необструктивной кардиомиопатией, или гипертрофической обструктивной кариомиопатией, или гипертрофией при перегрузке давлением. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.

Способ определения доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы человека // 2548773

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы (ЩЖ) человека. Осуществляют взятие образца ткани опухоли ЩЖ и прилежащей неизмененной ткани железы в качестве контроля, выделение микроРНК из образцов, проведение реакции обратной транскрипции, измерение уровня экспрессии микроРНК-21, -221, -222, -155, -205 методом ПЦР в реальном времени с последующим сравнительным анализом изменения уровня экспрессии микроРНК в норме и при опухолевых образованиях ЩЖ и составлением заключения о наличии и типе новообразования. В случае изменения уровня экспрессии вышеуказанных микроРНК не более чем в 4 раза как в сторону повышения, так и в сторону понижения экспрессии по отношению к контрольному образцу, делают заключение о доброкачественном новообразовании. В случае изменения уровня экспрессии микроРНК более чем в 4 раза делают заключение о злокачественном новообразовании. Изобретение обеспечивает эффективное определение доброкачественных и злокачественных новообразований ЩЖ человека, что способствует выбору тактики последующей терапии. 5 ил., 1 табл., 4 пр.

Набор синтетических олигонуклеотидов для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (calluna vulgaris (l.) hull.) // 2549453

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (Calluna vulgaris (L.) Hull.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.