Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на деформирующие свойства эритроцитов периферической крови

Авторы патента:

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

Владельцы патента RU 2546532:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН (RU)

Изобретение относится к области медицины и может найти применение для оценки действия цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) на деформабельность эритроцитов в период гестации. Сущность способа: в третьем триместре гестации определяют титр антител к ЦМВИ, содержание аденозинтрифосфата, содержание актина в эритроцитах. При обострении ЦМВИ до титра антител 1:1600, снижении содержания АТФ до 0,40±0,02 мкмоль/л, уменьшении содержания актина в эритроцитах до 8,24±0,09% при контроле 9,30±0,08%, оценивают деформабельность эритроцитов до 0,04±0,0002 усл. ед., что создает угрозу формирования тканевой гипоксии в организме беременной. Снижение деформабельности эритроцитов приводит к нарушению их проходимости через узкие капилляры тканевых систем, что создает угрозу формирования тканевой гипоксии.

1. Цель исследования - выявить, что обострение цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации приводит к снижению содержания в эритроцитах АТФ, формированию актина, понижая их деформабельность.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к прогнозу состояния деформабельности эритроцитов периферической крови под влиянием цитомегаловирусной инфекции, что угрожает развитием тканевой гипоксии.

3. Раскрытие изобретения

Нормальное обеспечение тканей кислородом во многом зависит от проникновения эритроцитов к клеткам через узкие просветы капилляров, испытывая при этом деформабельность своего тела [2]. Деформабельность эритроцитов регулируется через белок актин, формирование которого зависит от АТФ [2]. Проникновение в эритроцит возбудителя ЦМВИ подавляет синтез АТФ, от чего снижается содержание в нем количества актина, обеспечивающего подвижность скелетных белков, что влечет за собой нарушение деформабельности эритроцита. Снижение деформабельности эритроцитов приводит к недостаточному проникновению их через узкие тканевые капилляры к клеткам органов, вызывая формирование в организме тканевой гипоксии [3, 5].

4. Новая техническая задача

Цитомегаловирусные белки, внедряясь через мембрану эритроцитов, оказывают подавляющее влияние на синтез АТФ, от которого зависит формирование актина, белка, обеспечивающего двигательную функцию скелетных белков эритроцита. В результате снижается деформабельность эритроцитов, способность их проникать по мелким капиллярам к клеткам тканей, что создает угрозу формирования тканевой гипоксии.

5. В доступной литературе аналогов по данному вопросу не отмечено.

6. Осуществление изобретения

6.1. Исследования проводились на базе акушерского отделения ФГБУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» СО РАМН. Обследовано 20 беременных на третьем триместре гестации с обострением цитомегаловирусной инфекции с титром 1:1600. Контролем служили 15 беременных, не болевших цитомегаловирусной инфекцией в период гестации. У беременных симптоматически цитомегаловирусная инфекция проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз - обострение цитомегаловирусной инфекции устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также ДНК цитомегаловируса. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г. Верификация цитомегаловируса, определение типоспецифических антител класса IgM и IgG, индекса авидности осуществлялись методами иммуноферментного анализа на микропланшетном ридере «Stat-Fax-2100» с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), выявление ДНК цитомегаловируса методами ПНР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

Содержание АТФ в эритроцитах проводилось по методу Виноградовой И.А., Багрянцевой С.Ю. и Дервиз Г.В. [1]. Уровень содержания актина в мембранах эритроцитов выполнялось методом вертикального одномерного диск-электрофореза в градиентном (10%) полиакриламидном геле в присутствии 0,1% раствора додецилсульфата натрия по методике U. Laemmli [4] на аппарате «Вio Doc-Analize» (Германия). Деформабельность эритроцитов определялась по формуле, разработанной М.Т. Луценко [3].

7. В процессе исследования были получены следующие результаты.

При обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации до титра антител 1:1600 в эритроцитах периферической крови снижался уровень АТФ до 0,40±0,02 мкмоль/мл (контроль - 0,90±0,05 мкмоль/мл). Методом диск-электрофореза отмечалось снижение в эритроцитах содержания актина до 8,24±0,09% (контроль - 9,30±0,08%). Снижение синтеза актина уменьшает деформабельность эритроцитов до 0,04±0,0002 усл. ед. (контроль - 0,22±0,003 усл. ед.). Снижение деформабельности эритроцитов приводит к нарушению их проходимости через узкие капилляры тканевых систем и создает угрозу формирования тканевой гипоксии.

Источники информации

1. Виноградова И.А., Багрянцева С.Ю., Дервиз Г.В. Метод одновременного определения 2,3-ДФГ и АТФ в эритроцитах // Лабораторное дело, 1980, №7, с.424-426.

2. Зинчук В.В. Методика измерения деформабельности эритроцитов // Здравоохранение Белоруссии, 1989, №12, С.93-98.

3. Луценко М.Т. Способ оценки нарушения деформируемости эритроцитов в периферической крови беременных при обострении в третьем триместре гестации герпес-вирусной инфекции. Патент 2463597. Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений РФ 10.10.2012. Опубликован в Бюл. «Изобретения и полезные модели», №28, 10.10.12.

4. Маурер Г. Диск-электрофорез. М.: 1971, 154 с.

5. Kikuchi Y., Da Q.W., Fujino Т. Variation in red cell deformability and possible consequences for oxygen transport to tissue // Microvascul. Res. 1994. Vol.47, №2. P.222-231.

Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на деформабельность эритроцитов периферической крови беременных в третьем триместре гестации, характеризующийся тем, что в третьем триместре гестации определяют титр антител к цитомегаловирусу, содержание аденозинтрифосфата, содержание актина в эритроцитах, и при обострении цитомегаловируса до титра антител 1:1600, снижении содержания аденозинтрифосфата до 0,40±0,02 мкмоль/л, уменьшении содержания актина в эритроцитах до 8,24±0,09% при контроле 9,30±0,08%, оценивают деформабельность эритроцитов до 0,04±0,0002 усл. ед., что создает угрозу формирования тканевой гипоксии в организме беременной.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нарушения почек у собак, включающего стадию измерения уровня экспрессии группы биомаркеров в биологическом образце от собаки, где биомаркеры представляют собой кластерин (CLU), секретируемый связанный с frizzle белок-2 (SFRP2); матрилин-2 (Matn2); лумикан (LUM); декорин (DCN); альфа 1 (III) цепи коллаген, вариант 12 (COL3A1); ретинол-связывающий белок 4 (rbp4); ММР-9; трансферрин (TF); Аро-С-1 (АроС1); и ингибин-бета A (INHBA).

Способ прогнозирования восстановления слуховой функции у больных с острой сенсоневральной тугоухостью // 2545744

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и может использоваться для прогнозирования восстановления слуховой функции у больных с острой сенсоневральной тугоухостью (ОСНТ).

Способ лабораторной оценки эффективности антибактериальной терапии // 2543335

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике для оценки эффективности антибактериальной терапии у больных с бактериальной инфекцией, в том числе с бактериальным сепсисом.

Способ защиты клеток от апоптоза // 2541774

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для защиты лимфоцитов от апоптоза. Для этого в инкубационную среду, содержащую лимфоциты, вводят 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту в конечной концентрации 3,0 ммоль и 0,1 ммоль соответственно.

Способ создания модели перекисного окисления лимфоцитов // 2541771

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности модели перекисного окисления липидов мембран лимфоцитов. Для этого предварительно обрабатывают лимфоциты перекисью водорода в конечной концентрации 0,5 мМ и определяют белково-связанный глутатион.

Способ прогнозирования ранней стадии апоптоза // 2540500

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования ранней стадии апоптоза лимфоцитов. Для этого выделяют клетки, инкубируют их 48 часов при температуре 37°C и 5% содержании CO2 с добавлением индуктора апоптоза дексаметазона в концентрации 10-4 моль/мл.

Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения // 2538632

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исходов мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Способ включает проведение исследования активности 26S протеасом и содержания NF-кВ р65 и р50 в опухолевой ткани.

Способ оценки антиоксидантной защиты организма человека // 2538081

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для определения антиоксидантной защиты организма человека при диагностике и лечении различных заболеваний, сопровождающихся нарушением антиоксидантной защиты.

Способ определения содержания производных гемоглобина в крови // 2536217

Изобретение относится к медицинской диагностике в области гематологии и может быть использовано для одновременного определения всех производных гемоглобина в крови.

Способ проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой // 2535061

Изобретение относится к медицине и касается способа проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой, в котором на мембранной тест-полоске формируют комплексы, в состав которых входят молекулы антигена или антигенов, специфичные к ним антитела и молекулы метки.

Способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой // 2546541

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, который осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза: лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов; прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения: D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы (ед. оп. пл.)+1,127×креатинин (мкмоль/л)+24,801×мочевина(ммоль/л), где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 223,12; при D, равном или большим граничного значения, прогнозируют развитие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, а при D меньше граничного значения прогнозируют отсутствие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой. Техническим результатом заявленного изобретения является обеспечение прогнозирования полипозного риносинусита у больных с бронхиальной астмой с повышенной точностью. 2 пр.

Способ определения о-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-n-метилкарбамата в биологическом материале // 2548742

Изобретение относится к биологии, токсикологической и аналитической химии, а именно к способам определения O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и ветеринарных лабораторий. Способ осуществляется следующим образом: биологический материал, содержащий O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамат, измельчают, трижды обрабатывают смесью этилацетата и ацетона, взятых в соотношении 1:1 по объему, каждый раз в течение 30 минут, полученные извлечения объединяют, экстрагент испаряют, остаток растворяют в ацетонитриле, полученный раствор разбавляют водой в соотношении 1:4 по объему, дважды экстрагируют этилацетатом при соотношении объемов водной и органической фаз 1:1 на каждом этапе экстракции, этилацетатные экстракты объединяют, упаривают до сухого остатка, остаток растворяют в ацетонитриле, к раствору прибавляют воду до достижения объемного соотношения между ацетонитрилом и водой 4:6, полученный раствор вносят в колонку сорбента «Силасорб С-18», процесс хроматографирования осуществляют, используя двухкомпонентную подвижную фазу ацетонитрил-вода в соотношении 4:6 по объему, фракции элюата, содержащие O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамат, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в метаноле и проводят определение физико-химическим методом, которым является хромато-масс-спектрометрия, в капиллярной колонке DB-5 MS EVIDEX длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой, представляющей собой 5%-фенил-95%-метилполисилоксан, при толщине пленки неподвижной фазы 0,33 мкм, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура повышается от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 16 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя 150°C, температура интерфейса детектора 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата по площади хроматографического пика. Способ обеспечивает повышение чувствительности. 4 табл., 3 пр.

Способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и меди в той же пробе // 2548751

Изобретение относится к области медицинской биохимии и представляет собой способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и катионов меди, включающий использование в качестве основного реагента раствор дитизона в четыреххлористом углероде, инкубацию при комнатной температуре в щелочной среде, удаление органической фазы и колориметрию коллоидных растворов пробы сыворотки крови и стандартного раствора при 535 нм, расчет концентрации катионов цинка, колориметрию коллоидных растворов пробы сыворотки крови и стандартного раствора при при 435 нм и расчет молярного соотношения катионов цинка и меди. Изобретение обеспечивает определение наряду с концентрацией катионов цинка в крови также их соотношения с катионами меди в той же пробе без применения дополнительных реактивов. 4 пр.

Способ диагностики миопии у детей дошкольного возраста // 2549457

Изобретение относится к медицине, а именно к детской офтальмологии, и описывает способ диагностики миопии у детей дошкольного возраста, заключающийся в том, что в слезной жидкости ребенка определяют активность фермента γ-глутамилтранспептидазы и при ее значении свыше 11 Е/л диагностируют заболевание. Изобретение обеспечивает выявление миопии у детей дошкольного возраста в условиях невозможности проверки остроты зрения с помощью таблицы Орловой. 4 пр.

Способ неинвазивной дифференциальной диагностики новообразований кожи // 2551978

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии. С помощью спектроскопа комбинированного рассеяния проводят серию регистрации спектров области новообразования и здоровой кожи. Рабочую часть спектроскопа располагают непосредственно над исследуемой областью на расстоянии 3-4 мм. После регистрации полученных спектров проводят математическую обработку результатов на персональном компьютере. Для анализа выделяют два фазовых признака - отношение максимумов интенсивностей комбинированного рассеяния в полосах 1300-1340 см-1 и 1640-1680 см-1 к полосе 1430-1470 см-1. Представляют данные спектроскопии комбинированного рассеяния каждого измерения в виде точки на фазовой плоскости. Точка оказывается в одной из трех областей фазовой плоскости. В зависимости от того, в какую из трех областей фазовой плоскости попадает точка, у пациента диагностируют либо меланому; либо базальноклеточный или плоскоклеточный рак; либо отсутствие новообразований кожи. Способ позволяет получить объективные данные, позволяющие дифференцировать разные типы новообразований кожи, что обеспечивает высокую точность дооперационной диагностики. 1 пр.

Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии // 2552299

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы глутатионредуктазы (ГЛР), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит. Изобретение обеспечивает снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности. 4 пр., 1 табл.

Способ диагностики некроза кишки при мезентериальной ишемии в эксперименте // 2552338

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано для диагностики некроза кишки при мезентериальной ишемии. Сущность изобретения заключается в моделировании у крыс острой мезентериальной ишемии с последующим определением количества лимфоцитов в центральной венозной крови, и при снижении их более чем на 80% от средних нормальных значений диагностируют некроз кишки. Применение способа обеспечивает повышение точности и упрощение дигностики некроза кишки при мезентериальной ишемии. 3 пр.

Способ определения катехоламинов и их метаболитов с использованием твердофазного флуоресцентного биосенсора // 2554499

Изобретение относится к области медицины и может быть применено для определения катехоламинов их метаболитов в объектах на основе матриц сложного состава, в том числе нерастворимых в воде, без их дополнительной пробоподготовки. Способ осуществляют путем изменения принципиальной схемы формирования и измерения аналитического сигнала, регистрируемого в чувствительном слое биосенсора, - переходом к твердофазной флуоресценции. Действие биосенсора основано на реакции ферментативной дериватизации катехоламинов и их метаболитов с органическими аминами (o-фенилендиамин, этилендиамин) с образованием производных хиноксалина, флуоресцирующих в области 450-550 нм. При этом компоненты индикаторной реакции иммобилизованы в чувствительном слое на поверхности биосенсора, в результате флуоресцентный сигнал формируется и регистрируется непосредственно на твердой поверхности в режиме отражения. Наибольшую интенсивность флуоресцентного сигнала получают при использовании в качестве дериватизирующего агента o-фенилендиамина и проведении процесса при концентрации пероксидазы хрена - 10-25 нМ; концентрации пероксида водорода - 250-500 мкМ; концентрации o-фенилендиамина - 50-100 мкМ; концентрации катехоламинов и метаболитов - 5-2000 нМ. В качестве буферного раствора берут 5 мМ фосфатный буферный раствор pH 9.5-10.0. Чувствительный слой биосенсора представляет собой двухслойную пленку {хитозан - o-фенилендиамин/хитозан - пероксидаза}, нанесенную ровным слоем на поверхность стеклянной пластинки (14×40 мм). Изобретение обеспечивает простое и чувствительное определение катехоламинов и их метаболитов в объектах, анализ которых с использованием оптических методов детектирования по инструментальным причинам был ранее затруднен или невозможен вследствие мешающего влияния матрицы реального объекта, а также недостаточной чувствительности и воспроизводимости биосенсоров. 3 з.п. ф-лы, 4 ил.

Способ оценки уровня адаптации у работников химической, нефтехимической и нефтеперерабатывающей промышленности, контактирующих с вредными и опасными факторами производственной среды // 2554778

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, в частности к биохимии, гигиене, стоматологии, медицинской экологии, может быть использовано для выявления степени адаптации к производственным условиям при взаимодействии с вредными и опасными факторами. Определяют значения спонтанного свечения, периода индукции и амплитуды быстрой вспышки за 5 мин регистрации, рассчитывают коэффициент адаптационного риска (КАР) по формуле: КАР=Сn-А/π, где: КАР - коэффициент адаптационного риска; Сn - спонтанное свечение; А - амплитуда быстрой вспышки; π - период индукции. При значении КАР 0,066-3,85 усл.ед. адаптацию оценивают как удовлетворительную или компенсированную, при значении КАР 3,88-6,5 усл.ед. адаптацию оценивают как напряженную, при значении КАР 6,6-9,5 усл.ед. адаптацию оценивают как неудовлетворительную, при значении КАР 9,6 усл.ед. и более - как срыв адаптации. Использование изобретения повышает точность оценки за счет определения критериев для отнесения обследуемых в группы по уровню адаптации. 1 табл., 8 пр.

Портативный анализатор для исследования пробы (варианты) // 2554816

Группа изобретений относится к медицине. Представлен портативный анализатор для исследования пробы биологической жидкости, содержащий корпус с магазином, имеющим отделения для размещения используемых для анализа диагностических полосок или тест-полосок, имеющих зону для биологической жидкости, анализирующее устройство с щелевидным приемником для используемой диагностической полоски или тест-полоски, оснащенной с одного конца электрическими контактами, и индикаторное устройство для отображения не менее одного результата анализа, причем корпус со стороны задней части выполнен с понижением, образующим плоскую поверхность, на которой вдоль корпуса или поперечно ему выполнены выступы, разделяющие плоскую поверхность понижения на отделения для размещения диагностических полосок или тест-полосок и образующие магазин, расположенных параллельно не менее чем в один ряд, при этом отделения закрыты снимаемой или открываемой крышкой, являющейся частью корпуса. Также описаны 2 других варианта портативного анализатора. Достигается расширение эксплуатационных качеств и повышение эффективности. 3 н. и 22 з.п. ф-лы, 12 ил.