Способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой

Авторы патента:

Колосов Виктор Павлович (RU)

Нахамчен Леонид Гиршевич (RU)

Перельман Юлий Михайлович (RU)

Самсонов Владимир Петрович (RU)

Захарова Элла Владимировна (RU)

G01N33/52 - использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги

G01N33/49 - крови

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2546541:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (RU)

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, который осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза: лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов; прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения:

D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы (ед. оп. пл.)+1,127×креатинин (мкмоль/л)+24,801×мочевина(ммоль/л),

где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 223,12; при D, равном или большим граничного значения, прогнозируют развитие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, а при D меньше граничного значения прогнозируют отсутствие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой. Техническим результатом заявленного изобретения является обеспечение прогнозирования полипозного риносинусита у больных с бронхиальной астмой с повышенной точностью. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии. Бронхиальная астма, сочетающаяся с полипозным риносинуситом, заслуживает особого внимания. Полипы носа усиливают проявления астмы (8). Доказательством роли полипозного риносинусита как триггера бронхиальной астмы могут служить многочисленные сведения об улучшении течения последней после лечения полипозного риносинусита (9).

Большинство авторов считают полипозный риносинусит инфекционно-аллергическим заболеванием (3).

Существует предположение о возможной этиологической роли инфекции Chlamydia pneumoniae в образовании носовых полипов (6). По данным D.B. Conley et al. (2004) (7), у 50% больных хроническим полипозным синуситом выявляется специфический IgE к стафиллококковому экзотоксину. Инфекция верхних дыхательных путей отображается в лабораторных показателях эндотоксикоза крови и включает биохимические (5) биофизические (4) и гематологические (2) исследования.

Синдром эндогенной интоксикации, в большей или меньшей степени, сопутствует любому соматическому, инфекционному, хирургическому и другим заболеваниям (2).

Существует способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, заключающийся в биопсии слизистой носа с последующим цитологическим (морфологическим) исследованием (1).

Этот способ взят в качестве прототипа.

Недостатки известного способа:

1. Невозможность прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой.

2. Биопсия может спровоцировать осложнения в течении бронхиальной астмы виде бронхоспазма и кровотечения.

3. При заборе биоптата сложно найти и прогнозировать участок пролиферативно измененной слизистой.

Прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой позволяет выбрать наиболее оптимальный метод лечения.

Целью предлагаемого способа является прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой по лабораторным показателям эндотоксикоза с помощью дискриминантного анализа.

Цель достигается тем, что прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, с помощью дискриминантного анализа, осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза - лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов, с последующим введением их в дискриминантное уравнение и его решением.

Исследования проведены у 42 пациентов 1 группы, с бронхиальной астмой и полипозным риносинуситом; у 68 пациентов 2 группы, с бронхиальной астмой без полипозного риносинусита.

Способ содержит следующие приемы.

1. Метод подсчета лейкоцитов в камере.

Взятие и разведение крови производят пробирочным методом. В пробирку (лучше видалевскую) вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение практически считается равным 1:20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так же, как для подсчета эритроцитов.

Лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов (1-2 на большой квадрат), поэтому для точности подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных).

Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм³, а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000×20 и делят на 1600=а×1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля, (норма - 4-9×10^9/л).

2. Определение в крови молекул средней массы.

Для определения среднемолекулярных пептидов экспресс-методом в центрифужную пробирку наливают 1,0 мл крови, добавляют 0,5 мл 10% трихлоруксусной кислоты. Эту смесь встряхивают и цинтрифугируют в течение 30 минут при 3000 об/мин. Детекцию надосадочной части биологической жидкости, освобожденной от грубодисперстных белков, осуществляют после предварительного разведения, при котором к 0,5 мл надосадочной части биологической жидкости добавляют 4,5 мл дистиллированной воды. Измерения осуществляют на спектрофотометре СФ-16 или HITACHI-557 (Япония) при длине волны 280 нм (Е280). Норма - 0,24-0,28 единиц оптической плотности (ед. оп. пл.).

3. Ферментативный метод определения мочевины в крови.

Основанный на использовании фермента лейциндегидрогеназы, позволяющий избежать вмешательства в реакцию эндогенного аммония. Метод основан на использовании фермента лейциндегидрогеназы, связывающей ионы NH4+ в реакции с образованием L-изолейцина после гидролиза мочевины при участии уреазы. Метод проводят в два этапа.

Первый этап - связывание эндогенного NH4+. NH4+, содержащийся в исследуемом образце (сыворотка крови или моча), реагирует с 2-кетоизокапроновой кислотой в присутствии НАД (никотинамидадениндинуклеотид) H₂ и лейциндегидрогеназы с образованием L-изолейцина.

Второй этап. Определение концентрации NH4+ проводят с помощью той же реакции после добавления в среду инкубации фермента уреазы (норма 2,5-6,4 ммоль/л).

4. Ферментативный метод определения креатинина в крови.

Принцип данного метода заключается в том, что под действием креатининдеаминазы, содержащейся в стартовом реактиве креатинин превращается в устойчивое производное 1-метилгидантоин с высвобождением молекулы аммиака. Затем под действием глутаматдегидрогеназы осуществляется окисление НАДФ (никотинамидадениндинуклеотидфосфат)Н, сопровождающееся уменьшением поглощения при 340 нм и пропорциональное концентрации аммиака в смеси. Весь содержащийся в образце пациента аммиак предварительно удаляется глутаматдегидрогеназой перед добавлением стартового реактива, содержащего креатининдеаминазу.

Креатининдеаминаза

Креатинин+Н₂О→1-метилгидантоин+NH₃

Глутаматдегидрогеназа

NH₃+а-Окоглутарат+НАДФН+Н⁺→L-Глутамат+НАДФ⁺+Н₂О

Норма: мужчины - 53-97 ммоль/л

Женщины - 62-115 ммоль/л

Методика определения скорости оседания эритроцитов Вестергрена включает следующие этапы:

1. венозная кровь берется в вакуумные пробирки с К-ЭДТА (калий-этилендиаминтетраацетат) (капиллярная кровь берется в пробирки с К-ЭДТА);

2. пробу венозной (капиллярной) крови смешать с 5% раствором натрия цитрата в соотношении 4:1;

3. произвести забор крови в капилляр Вестергрена;

4. через 1 ч измерить скорость оседания эритроцитов по высоте столба прозрачной плазмы.

Нормы - мужчины - 1-10 мм/ч

Женщины- 2-15 мм/ч

Дискриминантами анализ позволил выявить функциональные параметры, по которым больные 2 группы отличались от больных 1 группы, и построить прогностическое дискриминантное уравнение:

D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы(ед. оп. пл.)+1,127×креатинин (мк моль/л)+24,801×мочевина(ммоль/л)

Граничное значение дискриминантной функции 223,12. При D больше или равно граничному значению дискриминантной функции можно прогнозировать развитие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой. При D меньше граничного значения дискриминантной функции прогнозируют отсутствие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой.

Данным методом обследовано 110 пациентов, из них 42 больных с бронхиальной астмой и полипозным риносинуситом, у 68 пациентов была бронхиальная астма без полипозного риносинусита.

Правильный прогноз подтвердился в 97,5% случаев.

Пример 1.

Больной А., 43 лет. Поступил с жалобами на приступы удушья. Клинический диагноз: Бронхиальная астма легкое персистирующее течение. Показатели крови: лейкоциты - 5,2×10X 9/л, скорость оседания эритроцитов - 5 (мм/ч), молекулы средней массы - 0,116 (ед. оп. пл.), креатинин - 64 (мк моль/л), мочевина - 2,8 (ммоль/л).

Указанные параметры вносили в дискриминантное уравнение:

D=6,900×5,2×10^9/л+2,640×5(мм/ч)+17,819×0,116(ед. оп. пл.)+1,127×64(мк моль/л)+24,801×2,8(ммоль/л)

Граничное значение дискриминантной функции 192,3; D меньше граничного значения (223,12), поэтому прогнозировано отсутствие полипозного риносинусита у больного с бронхиальной астмой.

Пример 2.

Больной К., 51 года. Поступил в стационар с жалобами на кашель, приступы удушья, заложенность носа. Клинический диагноз: Бронхиальная астма легкое персистирующее течение. Показатели крови: лейкоциты-8,5×10Х 9/л (%), скорость оседания эритроцитов - 10 (мм/ч), молекулы средней массы - 0,132 (ед. оп. пл.), креатинин - 97 (мк моль/л), мочевина - 7,2 (ммоль/л).

Указанные параметры вносили в дискриминантное уравнение:

D=6,900×8,5×10^9/л(%)+2,640×10(мм/ч)+17,819×0,132(ед. оп. пл.)+1,127×97(мк моль/л)+24,801×7,2(ммоль/л)

Полученный результат был больше граничного значения дискриминантной функции - 375,26, указывал на развитие полипов носа у больного бронхиальной астмой, которое подтвердилось морфологическим результатом исследования биоптата, выявившим слизисто-железистые полипы носа.

Используемые информационные источники

1. Агапов К.Т. Полипозный риносинусит. [Текст] / К.Т. Агапов. - М.: МЕДИЦИНА, 1991. - 152 с.

2. Беляков Н.А., Мирошниченко А.Г., Малахова М.Я., Изотова О.Г. Верификация эдотоксикоза у больных с разлитым перитонитом // Эфферентная терапия. - 1995. - Т.1, №2 - с. 14-19.

3. Муминов А.И., Плужников М.С., Рязанцев С.В. Полипозные риносинуситы. - Ташкент, 1990. - С. 67-69

4. Федоровский Н.М., Каперская К.С., Куренков Д.В., Смоляр А.В. Связывающая способность альбумина в оценке эндотоксемии // Вест, интенсивной терапии. - 1998. - N4. - С. 21-23.

5. Харьков А.Л. Эндогенные токсины в хирургии: современные исследования в биологии и медицине. Сообщение II. Диагностика // Клин. хирургия. - 1997. - N 11-12. - С. 90-93.

6. Apan T.Z. The possible association of Chlamydia pneumoniae infection with nasal polyps [Text] / T.Z. Apan, D. Alpay, Y.Alpay // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. - 2007. - Vol. 264, №1. - P. 27-31.

7. Conley D.B. Chronic sinusitis with nasal polyps: staphylococcal exotoxin immunoglobulin E and cellular inflammation [Text] / D.B. Conley, A. Tripathi, A.M. Ditto, K. Reid, L.C. Grammer, R.C. Kern // Am.J. Rhinol. - 2004. - Vol. 18, №5. - P. 273-278.

8. Miller M.R. Standardisation of spirometry [Text] / M.R. Miller, J. Hankinson, V. Brusasco [et al.] // Eur. Respir. J. - 2005. - Vol. 26. - P. 319-338.

9. Smart B.A. Is rhinosinusitis a cause of asthma? [Text] / B.A. Smart // Clin. Rev. Allergy Immunol. - 2006. - Vol. 30, №3. - P. 153-164.

Способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза: лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов; прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения:
D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы(ед. оп. пл.)+1,127×креатинин (мкмоль/л)+24,801×мочевина(ммоль/л),
где D - дискриминантная функция с граничным значением, равным - 223,12; при D, равном или большим граничного значения, прогнозируют развитие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, а при D меньше граничного значения прогнозируют отсутствие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой.

Изобретение относится к области медицины и может найти применение для оценки действия цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) на деформабельность эритроцитов в период гестации.

Композиции и способы для диагностики и лечения нарушений почек у собак // 2546016

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нарушения почек у собак, включающего стадию измерения уровня экспрессии группы биомаркеров в биологическом образце от собаки, где биомаркеры представляют собой кластерин (CLU), секретируемый связанный с frizzle белок-2 (SFRP2); матрилин-2 (Matn2); лумикан (LUM); декорин (DCN); альфа 1 (III) цепи коллаген, вариант 12 (COL3A1); ретинол-связывающий белок 4 (rbp4); ММР-9; трансферрин (TF); Аро-С-1 (АроС1); и ингибин-бета A (INHBA).

Способ прогнозирования восстановления слуховой функции у больных с острой сенсоневральной тугоухостью // 2545744

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и может использоваться для прогнозирования восстановления слуховой функции у больных с острой сенсоневральной тугоухостью (ОСНТ).

Способ лабораторной оценки эффективности антибактериальной терапии // 2543335

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике для оценки эффективности антибактериальной терапии у больных с бактериальной инфекцией, в том числе с бактериальным сепсисом.

Способ защиты клеток от апоптоза // 2541774

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для защиты лимфоцитов от апоптоза. Для этого в инкубационную среду, содержащую лимфоциты, вводят 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту в конечной концентрации 3,0 ммоль и 0,1 ммоль соответственно.

Способ создания модели перекисного окисления лимфоцитов // 2541771

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности модели перекисного окисления липидов мембран лимфоцитов. Для этого предварительно обрабатывают лимфоциты перекисью водорода в конечной концентрации 0,5 мМ и определяют белково-связанный глутатион.

Способ прогнозирования ранней стадии апоптоза // 2540500

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования ранней стадии апоптоза лимфоцитов. Для этого выделяют клетки, инкубируют их 48 часов при температуре 37°C и 5% содержании CO2 с добавлением индуктора апоптоза дексаметазона в концентрации 10-4 моль/мл.

Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения // 2538632

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исходов мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Способ включает проведение исследования активности 26S протеасом и содержания NF-кВ р65 и р50 в опухолевой ткани.

Способ оценки антиоксидантной защиты организма человека // 2538081

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для определения антиоксидантной защиты организма человека при диагностике и лечении различных заболеваний, сопровождающихся нарушением антиоксидантной защиты.

Способ определения содержания производных гемоглобина в крови // 2536217

Изобретение относится к медицинской диагностике в области гематологии и может быть использовано для одновременного определения всех производных гемоглобина в крови.

Способ прогнозирования эффективности противовирусного лечения хронического вирусного гепатита с // 2546032

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для определения прогноза эффективности комбинированной противовирусной терапии (ПВТ) хронического вирусного гепатита С (ХГС).

Способ повышения проницаемости мембраны эритроцитов для депонирования ими лекарственных веществ // 2545992

Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, и описывает способ повышения проницаемости мембраны клеток крови для депонирования ими лекарственных средств, включающий добавление к клеточной массе, полученной путем центрифугирования крови, лекарственных препаратов и последующее проведение фотогемотерапии, причем в качестве «контейнеров» для лекарственного вещества используют отмытые в физиологическом растворе эритроциты, выделенные из клеточной массы после удаления тромбоцитарно-лейкоцитарной пленки, образовавшейся в процессе центрифугирования, помещают их в среду с лекарственным веществом и воздействуют на эритроциты ультрафиолетовым облучением (УФО) с длиной волны 360 нм и общей дозой облучения 0,72 Дж/см2.

Способ оценки воздействия света, генерируемого светодиодными источниками освещения, на функции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови // 2545871

Изобретение относится к области медицины, а именно к исследованиям нейтрофилов крови при действии факторов различной природы, и может быть использовано для оценки влияния света, генерируемого светодиодными источниками освещения, на клеточные факторы врожденного иммунитета.

Способ определения физико-биологических параметров кожи и концентраций производных гемоглобина в крови // 2545814

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в медицинской диагностике и терапии. Способ определения физико-биологических параметров кожи и концентраций производных гемоглобина в крови путем посылки на кожу поляризованного оптического излучения с известным спектром, регистрации сигналов диффузно-отраженного кожей света с поляризацией, ортогональной поляризации посылаемого на кожу излучения.

Способ оценки антиагрегантной функции эндотелия // 2545802

Изобретение относится к медицине и может быть применено в практическом здравоохранении для повышения точности диагностики и снижения риска тромботических, геморрагических и тромбоэмболических осложнений.

Способ прогнозирования преэклампсии у беременных с плацентарной недостаточностью // 2545760

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет осуществить прогнозирование преэклампсии у беременных с плацентарной недостаточностью.

Способ тестирования тромбоцитов и устройство для тестирования тромбоцитов // 2543652

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для тестирования функции тромбоцитов. Для этого предоставляют возможность антикоагулированной крови проходить через капилляр, имеющий склеивающую тромбоциты поверхность, и наблюдают или измеряют поведение крови в капилляре для оценки функции тромбоцитов.

Способ оценки функционального состояния лимфоцита человека // 2543340

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и описывает способ оценки функционального состояния лимфоцита человека.

Способ прогнозирования иммунного ответа пациента на действие внешних факторов // 2543336

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для in vitro оценки прогнозирования иммунного ответа пациента на действие внешних факторов.

Способ лабораторной оценки эффективности антибактериальной терапии // 2543335

Способ прогнозирования выраженности болевого синдрома после липосакции // 2546536

Изобретение относится к медицине и описывает способ прогнозирования выраженности болевого синдрома после липосакции с помощью забора липоаспирата и его центрифугирования, при этом измеряют в миллиметрах высоту образовавшихся верхнего и нижнего слоев жира, вычисляют отношение верхнего слоя жира к нижнему и при значении данного показателя более 0,2 прогнозируют выраженный болевой синдром.