Способ количественной оценки гистологической активности при хронических диффузных заболеваниях печени

Авторы патента:

Правдолюбова Ирина Александровна (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2552782:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Петрозаводский государственный университет" (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности гепатологии. Способ количественной оценки гистологической активности в биоптатах печени при хронических диффузных заболеваниях печени приводит к протоколу подсчета в абсолютных числах, процентах и баллах патологических признаков, выявленных при морфологическом изучении биоптатов печени больных хроническими диффузными заболеваниями печени, по разделам: некроз гепатоцитов, крупнокапельная и мелкокапельная жировая, гидропическая дистрофия гепатоцитов, мелкоклеточная дисплазия гепатоцитов, портальная, перипортальная, внутридольковая и центральная инфильтрация. Далее производится перевод абсолютных значений в балльную систему с помощью предложенного протокола, и по количеству баллов устанавливают гистологическую активность. Способ позволяет установить количественную унификацию полученных результатов при указанных заболеваниях.

Изобретение относится к области медицины, в частности гепатологии, и может быть использовано для диагностики хронических диффузных заболеваний печени.

Пункционная биопсия печени играет важную роль в определении активности воспалительного процесса и степени фиброза при различных формах хронического гепатита [5]. В 1981 году был совершен прорыв в данной области, так как был предложен так называемый индекс гистологической активности (ИГА) [4]. ИГА - это способ ранговой оценки степени выраженности воспаления, некроза и фиброза, разработанный R.G. Knodell et al. Данная методика позволяет оценивать динамику некротически-воспалительного процесса в ткани печени при естественном течении хронического гепатита и на фоне этиологической (противовирусной) и патогенетической гепатопротекторной терапии. Система R.G. Knodell претерпевала ряд изменений, наиболее широко известными являются системы J.V. Desmet, K.G. Ishak, P.J. Sheuer, METAVIR [2, 3, 6]. Однако наиболее используемой, в том числе и в Российской Федерации, по-прежнему остается система R.G. Knodell. Принцип данной полуколичественной ранговой системы заключается в балльной оценке гистологических изменений в биоптатах печени: перипортальные и мостовидные некрозы, которые оцениваются от 1 до 10 баллов, паренхиматозное повреждение в виде фокальных внутридольковых некрозов и дистрофии гепатоцитов от 1 до 4 баллов, портальное воспаление от 1 до 4 баллов, оценка уровня фиброза от 1 до 4 баллов. Количество баллов 1-3 соответствует минимальной степени активности гепатита, 4-8 - слабой, 9-12 - умеренной, 13-22 - выраженной активности гепатита. Недостатком данной системы является существенная доля субъективизма в оценке морфологических изменений, размытость границ, скудность морфологических параметров, а также тот факт, что 4-ый компонент системы - фиброз - отражает в большей степени не активность, а стадию заболевания. Включение фиброза в систему подсчета может привести к завышению уровня активности гепатита. В связи с чем рядом авторов [2, 6] было предложено отдельно оценивать ступенчатые и портоцентральные некрозы, как прогностически более серьезные, а 4-ый компонент системы R.G. Knodell выделить отдельно, обозначив его как гистологический индекс склероза или фиброз различной степени 1-4.

В 1996 году В.В. Серов, О.Л. Северигина предложили свой способ оценки хронических гепатитов, в основе которого лежит классификация J.V. Desmet [1]. В новую систему вводится термин гистологический индекс степени хронизации (ГИСХ), расширяется балльная система оценки фиброза. Этими же авторами более подробно детализируется степень активности и предлагается несколько иной термин ГИСА - гистологический индекс степени активности вместо ИГА. Обусловлено это тем, что ИГА разрабатывался для хронического гепатита В, а в связи с существенными отличиями хронического гепатита С вводятся новые гистологические маркеры данной инфекции. Особенностью данной системы является отсутствие хронического гепатита минимальной активности и оценка активности гепатита B и C в разном количественном отношении, что затрудняет количественную их характеристику.

Таким образом, предложенные полуколичественные ранговые системы оценки морфологических изменений при хронических диффузных заболеваниях печени требуют усовершенствования. Методика должна быть простой в использовании, доступной для проведения, емкой по содержанию, и единой для гепатитов различной этиологии для возможности проведения сравнительного анализа.

Технический результат, достигаемый в предлагаемом способе количественной оценки гистологической активности при хронических диффузных заболеваниях печени, состоит в том, что позволяет повысить качество оценки степени активности при хронических диффузных заболеваниях печени, прогнозировать течение гепатита и контролировать эффективность терапии.

Технический результат достигается тем, что выявляют паренхиматозное повреждение и количественно оценивают его компоненты - гидропическую, крупнокапельную и мелкокапельную жировую дистрофию, дополнительно определяют признаки мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов (клеток печени с увеличенным ядерно-цитоплазматическим отношением, уменьшенным количеством цитоплазмы, создающим эффект сдавления ядер), внутридольковой воспалительной инфильтрации, центральной инфильтрации, затем абсолютные значения полученных морфологических данных переводят в баллы с помощью предложенного протокола количественной оценки, в который включают определение при увеличении × 150 в 10 полях зрения некроза гепатоцитов: 1 балл - менее 5 клеток в поле зрения, 2 балла - 5-10 клеток в поле зрения, 3 балла - более 10 клеток в поле зрения; крупнокапельной жировой дистрофии гепатоцитов: 1 балл - менее 20 клеток в поле зрения, 2 балла - 20-50 клеток в поле зрения, 3 балла - 51-100 клеток в поле зрения, 4 балла - более 100 клеток в поле зрения; мелкокапельной жировой дистрофии гепатоцитов: 1 балл - менее 5 клеток в поле зрения, 2 балла - 5-25 клеток в поле зрения, 3 балла - 26-50 клеток в поле зрения, 4 балла - более 50 клеток в поле зрения; гидропической дистрофии: 1 балл - менее 10 клеток в поле зрения, 2 балла - 10-20 клеток в поле зрения, 3 балла - 21-30 клеток в поле зрения, 4 балла - более 30 клеток в поле зрения; портальной инфильтрации: 1 балл - небольшая воспалительная инфильтрации единичных портальных трактов, 2 балла - умеренная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов, 3 балла - выраженная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов, 4 балла - усиленная воспалительная инфильтрация всех портальных трактов с наличием лимфоидных агрегатов и фолликулов; ступенчатых некрозов и перипортальной инфильтрации: 1 балл - ступенчатые некрозы занимают менее 10% от окружности портальных трактов, 2 балла - ступенчатые некрозы занимают 10-20% от окружности портальных трактов, 3 балла - ступенчатые некрозы занимают 20-30% от окружности портальных трактов, 4 балла - ступенчатые некрозы занимают 30-40% от окружности портальных трактов, 5 баллов - ступенчатые некрозы занимают 40-50% от окружности портальных трактов, 6 баллов - ступенчатые некрозы занимают 50-60% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки, 7 баллов - ступенчатые некрозы занимают 60-70% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки с формированием единичных мостовидных портоцентральных и/или портопортальных некрозов, 8 баллов - ступенчатые некрозы занимают 70-80% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и/или портопортальных некрозов, 9 баллов - ступенчатые некрозы занимают 80-90% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и портопортальных некрозов, 10 баллов - ступенчатые некрозы занимают 90-100% от окружности портальных трактов с формированием множества портоцентральных и портопортальных некрозов; внутридольковой воспалительной инфильтрации с некрозом гепатоцитов: 1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 5% площади паренхимы печени в поле зрения, 2 балла - воспалительная инфильтрация занимает менее 5-10% площади паренхимы в поле зрения, 3 балла -воспалительная инфильтрация занимает менее 10-20% площади паренхимы в поле зрения, 4 балла - воспалительная инфильтрация занимает более 20% площади паренхимы в поле зрения; центральной воспалительной инфильтрации с некрозом гепатоцитов: 1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 10% от окружности центральной вены, 2 балла - воспалительная инфильтрация занимает 10-20% от окружности центральной вены, 3 балла - воспалительная инфильтрация занимает 20-30% от окружности центральной вены, 4 балла - воспалительная инфильтрация занимает 30-40% от окружности центральной вены, 5 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 40-50% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки, 6 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 50-60% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки, 7 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 60-70% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/4 расстояния от центральной вены до портального тракта, 8 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 70-80% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта, 9 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 80-90% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта, 10 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 90-100% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта; а также мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов в 10 полях зрения при увеличении × 600: 1 балл - мене 3 клеток в поле зрения, 2 балла - 3-5 клеток в поле зрения, 3 балла - 6-10 клеток в поле зрения, 4 балла - более 10 клеток в поле зрения, после чего на основании результатов балльной оценки изменений в биоптатах печени при значениях от 1 до 11 баллов определяют хронический гепатит с минимальной активностью, при значениях от 12 до 20 баллов - хронический гепатит слабой активности, от 21 до 30 - хронический гепатит умеренной активности, от 31 до 47 - хронический гепатит высокой активности.

Способ количественной оценки гистологической активности при хронических диффузных заболеваниях печени включает в себя следующие операции: выполнение биопсии печени (слепой чрескожной пункционной или прицельной лапароскопической), фиксация ткани печени в 10%-ном формалине, заливка в парафин, подготовка срезов толщиной 3-4 микрона, окраска препаратов гематоксилином и эозином, исследование гистологических препаратов с помощью микроскопа с подсчетом в абсолютных числах, процентах и баллах патологических признаков некроза и дистрофии гепатоцитов, портальной и перипортальной воспалительной инфильтрации, ступенчатых некрозов гепатоцитов, отличающийся тем, что выявляют паренхиматозное повреждение и количественно оценивают его компоненты - гидропическую, крупнокапельную и мелкокапельную жировую дистрофию, дополнительно определяют признаки мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов, внутридольковой воспалительной инфильтрации, центральной инфильтрации. Следующая операция - создание протокола.

Протокол

При увеличении × 150 в 10 полях зрения определяются следующие морфологические показатели: среднее число некротизированных гепатоцитов, среднее число клеток в состоянии крупнокапельной жировой дистрофии, мелкокапельной жировой дистрофии и гидропической дистрофии, портальная инфильтрация, ступенчатые некрозы и перипортальная инфильтрация, внутридольковая воспалительная инфильтрация с некрозом гепатоцитов, воспалительная инфильтрация вокруг центральной вены с некрозом гепатоцитов.

В 10 полях зрения при увеличении × 600 определяется среднее число гепатоцитов с признаками мелкоклеточной дисплазии. Клетки в состоянии мелкоклеточной дисплазии определяются как гепатоциты с увеличенным ядерно-цитоплазматическим отношением, уменьшенным количеством цитоплазмы, создающим эффект сдавления ядер.

Некроз гепатоцитов:

1 балл - менее 5 клеток в поле зрения

2 балла - 5-10 клеток в поле зрения

3 балла - более 10 клеток в поле зрения Крупнокапельная жировая дистрофия гепатоцитов:

1 балл - менее 20 клеток в поле зрения

2 балла - 20-50 клеток в поле зрения

3 балла - 51-100 клеток в поле зрения

4 балла - более 100 клеток в поле зрения

Мелкокапельная жировая дистрофия гепатоцитов:

1 балл - менее 5 клеток в поле зрения

2 балла - 5-25 клеток в поле зрения

3 балла - 26-50 клеток в поле зрения

4 балла - более 50 клеток в поле зрения

Гидропическая дистрофия:

1 балл - менее 10 клеток в поле зрения

2 балла - 10-20 клеток в поле зрения

3 балла - 21-30 клеток в поле зрения

4 балла - более 30 клеток в поле зрения

Мелкоклеточная дисплазия гепатоцитов:

1 балл - мене 3 клеток в поле зрения

2 балла - 3-5 клеток в поле зрения

3 балла - 6-10 клеток в поле зрения

4 балла - более 10 клеток в поле зрения

Портальная инфильтрация:

1 балл - небольшая воспалительная инфильтрации единичных портальных трактов

2 балла - умеренная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов

3 балла - выраженная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов

4 балла - усиленная воспалительная инфильтрация всех портальных трактов с наличием лимфоидных агрегатов и фолликулов

Ступенчатые некрозы и перипортальная инфильтрация:

1 балл - ступенчатые некрозы занимают менее 10% от окружности портальных трактов

2 балла - ступенчатые некрозы занимают 10-20% от окружности портальных трактов

3 балла - ступенчатые некрозы занимают 20-30% от окружности портальных трактов

4 балла - ступенчатые некрозы занимают 30-40% от окружности портальных трактов

5 баллов - ступенчатые некрозы занимают 40-50% от окружности портальных трактов

6 баллов - ступенчатые некрозы занимают 50-60% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки

7 баллов - ступенчатые некрозы занимают 60-70% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки с формированием единичных мостовидных портоцентральных и/или портопортальных некрозов

8 баллов - ступенчатые некрозы занимают 70-80% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и/или портопортальных некрозов

9 баллов - ступенчатые некрозы занимают 80-90% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и портопортальных некрозов

10 баллов - ступенчатые некрозы занимают 90-100% от окружности портальных трактов с формированием множества портоцентральных и портопортальных некрозов

Внутридольковая воспалительная инфильтрация с некрозом гепатоцитов:

1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 5% площади паренхимы печени в поле зрения

2 балла - воспалительная инфильтрация занимает менее 5-10% площади паренхимы в поле зрения

3 балла - воспалительная инфильтрация занимает менее 10-20% площади паренхимы в поле зрения

4 балла - воспалительная инфильтрация занимает более 20% площади паренхимы в поле зрения

Центральная воспалительная инфильтрация с некрозом гепатоцитов:

1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 10% от окружности центральной вены

2 балла - воспалительная инфильтрация занимает 10-20% от окружности центральной вены

3 балла - воспалительная инфильтрация занимает 20-30% от окружности центральной вены

4 балла - воспалительная инфильтрация занимает 30-40% от окружности центральной вены

5 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 40-50% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки

6 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 50-60% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки

7 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 60-70% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/4 расстояния от центральной вены до портального тракта

8 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 70-80% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта

9 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 80-90% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта

10 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 90-100% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта

Оценивая степень активности в зависимости от количества баллов, может быть поставлен следующий морфологический диагноз:

1-11 баллов - хронический гепатит минимальной активности

12-20 баллов - хронический гепатит слабой активности

21-30 баллов - хронический гепатит умеренной активности

31-47 баллов - хронический гепатит высокой активности

Предлагаемый способ количественной оценки гистологической активности в биоптатах печени при хронических диффузных заболеваниях печени представляет собой проведение ряда перечисленных выше операций и оценку препаратов с помощью унифицированной балльной системы. Максимальное количество баллов для оценки паренхиматозного повреждения, воспалительных процессов в ткани печени - 47, то есть больше, чем у R.G. Knodell и J.V. Desmet, что связано с более расширенным исследованием гистологических образцов. Оценка паренхиматозного повреждения ткани печени по методу Knodell производится по 4-балльной системе, в которой не уделяется внимания виду дистрофии гепатоцитов, ее распространенности. Также в оценку гистологической активности нами введено определение уровня мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов. Данный показатель рассматривается как дополнительный маркер воспалительных процессов ткани печени. Потомками гепатоцитов в состоянии мелкоклеточной дисплазии являются прогениторные клетки, активация которых происходит при нарастании процессов перекисного окисления липидов, которые связано с процессами воспаления в паренхиме печени. Стоит отметить, что в общепринятой системе Knodell не производится учета внутридольковой воспалительной инфильтрации и инфильтрации вокруг центральной вены (центральной инфильтрации).

Эффективность предлагаемого способа определяется качеством и достоверностью диагностических критериев, которые соответствуют современным мировым стандартам морфологической диагностики хронических гепатитов. Анализ и заполнение протокола для оценки гистологической активности процесса могут быть произведены на основании стандартных методов окраски препаратов гематоксилином и эозином.

Способ количественной оценки гистологической активности при хронических диффузных заболеваниях печени был апробирован в Отделенческой клинической больнице на станции Петрозаводск ОАО «РЖД» на 191 случае хронических гепатитов различной этиологии. 53 пациента имели хронический гепатит В (ХГВ), 49 - хронический вирусный гепатит С (ХГС), 46 пациентов - хронических вирусный гепатит B+C, 43 - стеатогепатит. Диагноз устанавливался на основании традиционных клинико-лабораторных, серологических критериев, а также с использованием полимеразной цепной реакции на ДНК вируса гепатита B и РНК вируса гепатита C в крови и ткани печени.

Способ количественной оценки гистологической активности позволяет извлечь максимально возможную информацию из гистологического материала, используя самую элементарную методику - окраску гематоксилином и эозином.

У 82% наших пациентов отмечалось несоответствие между активностью процесса в ткани печени и показателями аланиновой аминотрансферразы (АЛТ) - традиционного маркера цитолиза и показателями мезенхимально-воспалительного синдрома (СОЭ, уровнем гамма-глобулинов). Так, при хронических гепатитах слабой активности, установленной при гистологическом исследовании, уровень АЛТ не превышал норму (40 Ед/л) у 75% больных, а при умеренной и высокой активности - уровень АЛТ превышал норму лишь в 1,5-2 раза, что еще раз подчеркнуло значимость гистологического исследования.

Таким образом, с помощью апробируемого способа нам удалось получить более точную и специфичную диагностическую информацию о степени активности некротически-воспалительного процесса в печени не только по сравнению с клиническими данными, но и по сравнению с гистологической оценкой, выполненной по методу Knodell [4].

Кроме того визуализация морфологических изменений в виде наличия перипортальных и мостовидных некрозов позволяет на доклинической стадии верифицировать начавшуюся трансформацию хронического гепатита в цирроз печени, то есть прогнозировать неблагоприятное течение хронического диффузного заболевания печени.

Лечение хронических диффузных заболеваний печени в частности хронических вирусных гепатитов) осуществляется дорогостоящими препаратами интерферона и аналогами нуклеозидов с достаточно высокой частотой побочных реакций и негарантированной эффективностью. Гепатопротекторы, препараты урсодеоксихолиевой кислоты, также необходимые в лечении данной группы пациентов, имеют высокую стоимость. Поэтому особое значение имеет возможность контроля за эффективностью лечения не только с помощью традиционных лабораторных, молекулярно-генетических и серологических критериев, но и морфологического метода при повторных биопсиях печени. Предложенный нами способ позволяет выявить даже минимальную динамику гистологической картины, печеночно-клеточного воспаления при хронических диффузных заболеваниях печени, что повышает качество контроля течения заболевания.

Таким образом, способ количественной оценки гистологической активности в биоптатах печени при хронических диффузных заболеваниях печени позволяет оценить степень гистологической активности, а также контролировать эффективность проводимой терапии и прогнозировать риск неблагоприятного течения заболевания, вероятность трансформации хронического гепатита в цирроз печени.

Источники информации

1. Серов В.В., Северигина Л.О. Морфологические критерии оценки этиологии, степени активности и стадии процесса при хронических вирусных гепатитах В и С // Архив патологии. 1996. №4. С.61-64.

2. Desmet J.V., Gerber M., Hoofnagle J.H. et al. Classification of chronic hepatitis: Diagnosis, Grading and Staging // Hepatology. 1994. №6. P.1513-1520.

3. Ishak K.G., Baptista A., Bianchi L. et al. Histalogical Grading and Staging of chronic hepatitis // J. Hepatology. 1995. Vol.22. P.696-699.

4. Knodell R.G., Ishak K.G., Black W.C. et al. Formulation and application of numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis // Hepatology. 1981. Vol.1. P.431-435.

5. Schaff Z. The value of liver biopsy in chronic hepatitis // Orv. Hetil. 2011. Vol.22. P.856-858.

6. Scheuer P.J. Classification of chronic viral hepatitis: a need for reassessment // J. Hepatology. 1991. Vol.13. P.372-374.

Способ количественной оценки гистологической активности при хронических диффузных заболеваниях печени, включающий выполнение биопсии печени, фиксацию ткани печени в 10%-ном растворе формалина, заливку ткани в парафин, подготовку срезов ткани толщиной 3-4 микрона, окраску гематоксилином и эозином, исследование срезов ткани с помощью микроскопа с подсчетом в абсолютных числах, процентах и баллах патологических признаков некроза и дистрофии гепатоцитов, портальной и перипортальной воспалительной инфильтрации, ступенчатых некрозов гепатоцитов, отличающийся тем, что выявляют паренхиматозное повреждение и количественно оценивают его компоненты - гидропическую, крупнокапельную и мелкокапельную жировую дистрофию, дополнительно определяют признаки мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов (клеток печени с увеличенным ядерно-цитоплазматическим отношением, уменьшенным количеством цитоплазмы, создающим эффект сдавления ядер), внутридольковой воспалительной инфильтрации, центральной инфильтрации, затем абсолютные значения полученных морфологических данных переводят в баллы с помощью предложенного протокола количественной оценки, в который включают определение при увеличении × 150 в 10 полях зрения некроза гепатоцитов: 1 балл - менее 5 клеток в поле зрения, 2 балла - 5-10 клеток в поле зрения, 3 балла - более 10 клеток в поле зрения; крупнокапельной жировой дистрофии гепатоцитов: 1 балл - менее 20 клеток в поле зрения, 2 балла - 20-50 клеток в поле зрения, 3 балла - 51-100 клеток в поле зрения, 4 балла - более 100 клеток в поле зрения; мелкокапельной жировой дистрофии гепатоцитов: 1 балл - менее 5 клеток в поле зрения, 2 балла - 5-25 клеток в поле зрения, 3 балла - 26-50 клеток в поле зрения, 4 балла - более 50 клеток в поле зрения; гидропической дистрофии: 1 балл - менее 10 клеток в поле зрения, 2 балла - 10-20 клеток в поле зрения, 3 балла - 21-30 клеток в поле зрения, 4 балла - более 30 клеток в поле зрения; портальной инфильтрации: 1 балл - небольшая воспалительная инфильтрация единичных портальных трактов, 2 балла - умеренная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов, 3 балла - выраженная воспалительная инфильтрация большинства портальных трактов, 4 балла - усиленная воспалительная инфильтрация всех портальных трактов с наличием лимфоидных агрегатов и фолликулов; ступенчатых некрозов и перипортальной инфильтрации: 1 балл - ступенчатые некрозы занимают менее 10% от окружности портальных трактов, 2 балла - ступенчатые некрозы занимают 10-20% от окружности портальных трактов, 3 балла - ступенчатые некрозы занимают 20-30% от окружности портальных трактов, 4 балла - ступенчатые некрозы занимают 30-40% от окружности портальных трактов, 5 баллов - ступенчатые некрозы занимают 40-50% от окружности портальных трактов, 6 баллов - ступенчатые некрозы занимают 50-60% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки, 7 баллов - ступенчатые некрозы занимают 60-70% от окружности портальных трактов с проникновением вглубь дольки с формированием единичных мостовидных портоцентральных и/или портопортальных некрозов, 8 баллов - ступенчатые некрозы занимают 70-80% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и/или портопортальных некрозов, 9 баллов - ступенчатые некрозы занимают 80-90% от окружности портальных трактов с образованием единичных портоцентральных и портопортальных некрозов, 10 баллов - ступенчатые некрозы занимают 90-100% от окружности портальных трактов с формированием множества портоцентральных и портопортальных некрозов; внутридольковой воспалительной инфильтрации с некрозом гепатоцитов: 1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 5% площади паренхимы печени в поле зрения, 2 балла - воспалительная инфильтрация занимает менее 5-10% площади паренхимы в поле зрения, 3 балла - воспалительная инфильтрация занимает менее 10-20% площади паренхимы в поле зрения, 4 балла - воспалительная инфильтрация занимает более 20% площади паренхимы в поле зрения; центральной воспалительной инфильтрации с некрозом гепатоцитов: 1 балл - воспалительная инфильтрация занимает менее 10% от окружности центральной вены, 2 балла - воспалительная инфильтрация занимает 10-20% от окружности центральной вены, 3 балла - воспалительная инфильтрация занимает 20-30% от окружности центральной вены, 4 балла - воспалительная инфильтрация занимает 30-40% от окружности центральной вены, 5 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 40-50% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки, 6 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 50-60% от окружности центральной вены и незначительно проникает внутрь дольки, 7 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 60-70% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/4 расстояния от центральной вены до портального тракта, 8 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 70-80% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки до 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта, 9 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 80-90% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта, 10 баллов - воспалительная инфильтрация занимает 90-100% от окружности центральной вены и проникает внутрь дольки более 1/3 расстояния от центральной вены до портального тракта; а также мелкоклеточной дисплазии гепатоцитов в 10 полях зрения при увеличении × 600: 1 балл - мене 3 клеток в поле зрения, 2 балла - 3-5 клеток в поле зрения, 3 балла - 6-10 клеток в поле зрения, 4 балла - более 10 клеток в поле зрения, после чего на основании результатов балльной оценки изменений в биоптатах печени при значениях от 1 до 11 баллов определяют хронический гепатит с минимальной активностью, при значениях от 12 до 20 баллов - хронический гепатит слабой активности, от 21 до 30 - хронический гепатит умеренной активности, от 31 до 47 - хронический гепатит высокой активности.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для неинвазивной экспресс-диагностики воспалительного процесса в кишечнике у телят. Способ включает определение в кале лейкоцитов, белка, гемоглобина и pH-реакции кала.

Способ выбора первичной схемы антибактериальной терапии при лечении больных с перфорацией язвы желудка и двенадцатиперстной кишки // 2552329

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения больных с перфорацией язвы желудка и двенадцатиперстной кишки. Выполняют лапаротомию, производят оперативное пособие по поводу перфорации язвы, во время операции берут экссудат из брюшной полости, определяют pH экссудата.

Способ диагностики урогенитального трихомониаза // 2552320

Изобретение относится к медицине и касается диагностики урогенитального трихомониаза на основе цитоморфотипа возбудителя. Способ включает комплексное клинико-лабораторное и микробиологическое исследование отделяемого урогенитального тракта пациентов с определением цитоморфотипа возбудителя при культуральном методе исследования и оценки степени выраженности воспаления или лейкоцитоза в урогенитальном тракте обследуемых.

Способ получения клеток и неклеточных элементов атеросклеротической бляшки // 2552314

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения клеток и неклеточных элементов атеросклеротической бляшки. Сущность способа состоит в том, что после выполнения баллонной ангиопластики с поверхности баллонного катетера производят смыв клеток и неклеточных элементов, затем полученную суспензию клеток и неклеточных элементов подвергают центрифугированию, удаляют надосадочную жидкость, осуществляют ресуспензирование клеток и неклеточных элементов, затем суспензии клеток и неклеточных элементов помещают в заряженные цитобакеты, которые центрифугируют, после чего полученные препараты используют для дальнейших исследований.

Способ прогнозирования тромбоэмболических осложнений у больных с заболеваниями легких // 2552309

Изобретение относится к практической медицине, в частности к клинико-лабораторной диагностике и экспериментальной медицине. Изобретение представляет способ прогнозирования тромбоэмболических осложнений при хирургическом лечении больных с онкологическими заболеваниями легких, характеризующийся тем, что при осуществлении хирургического вмешательства на легких до лигирования сосудов поврежденного легкого выполняют доступ к его приводящему и отводящему сосудам с последующим забором пробы крови из каждого сосуда и проводят взятие пробы венозной крови из периферической вены, после хирургического вмешательства определяют количественное значение содержания свободного гепарина в каждой пробе, после чего рассчитывают показатель К, равный среднеарифметическому значению содержания свободного гепарина в приводящем сосуде поврежденного легкого и венозной крови из периферической вены, затем сравнивают рассчитанный показатель К с количественным значением содержания свободного гепарина в отводящем сосуде легкого Р и при К<Р на 25% и менее прогнозируют высокий риск возникновения тромбоэмболических осложнений в послеоперационный период, при К<Р на более чем 25% прогнозируют низкий риск возникновения тромбоэмболических осложнений в послеоперационный период.

Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии // 2552299

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы глутатионредуктазы (ГЛР), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит.

Способ определения степени тяжести бронхиальной астмы // 2552297

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и предназначено для определения тяжести течения бронхиальной астмы. Сущность способа заключается в исследовании сыворотки крови методом краевой дегидратации в поляризованном свете.

Способ лечения местнораспространенного рака желудка с высокой метаболической и пролиферативной активностью // 2552289

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения рака желудка. Предварительно определяют уровни онкомаркеров СЕА, СА 19-9, СА 72-4, М2-ПК, индекс пролиферации Ki-67, выполняют совмещенную позитронно-эмиссионную и компьютерную томографию (ПЭТ/КТ).

Способ прогнозирования риска формирования миомы матки // 2550933

Изобретение относится к области медицины. Изобретение представляет способ прогнозирования риска развития изолированной миомы матки, включающий забор и исследование периферической венозной крови, отличающийся тем, что из периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят типирование генетических полиморфизмов генов интерлейкинов и анализ сочетаний полиморфизмов гена интерлейкина-1 (-889 ТТ IL-1) и интерлейкина-5 (-703 С IL-5), прогнозируют высокий риск развития изолированной миомы матки в случае выявления сочетания аллеля -889 ТТ IL-1 и аллеля -703 С IL-5 у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья России.

Способ окраски мазков крови для микроскопического определения структурной организации и фаз активности клеток // 2550879

Изобретение относится к ветеринарии и медицине, в частности к способу окраски мазков крови для микроскопического определения структурной организации и фаз активности клеток, и может быть использовано в цитофизиологии, цитопатологии и цитогенетике, а также рекомендовано к применению при проведении гематологических исследований при определении функционального состояния клеток крови.

Способ оценки эффективности коррекции сперматогенеза у животных в условиях воздействия микроволнового излучения // 2552924

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности коррекции сперматогенеза у животных в условиях воздействия микроволнового излучения. Проводят количественную оценку половых клеток семенника. Для этого самцам белых крыс перорально вводят селексен и аскорбиновую кислоту соответственно в дозах 1,5 и 500 мг/кг массы тела животного 1 раз в сутки в течение 50 дней. Через 14 дней на фоне введения селенсодержащего биокомплекса воздействуют микроволновым излучением с частотой 42 ГГц (λ=7,1 мм) в течение 30 дней по 30 минут ежедневно. По окончании схемы экспериментальных воздействий оценивают корректирующие свойства биокомплекса в отношении морфофункционального состояния эпидидимальных сперматозоидов по формуле: ИМФС=А+В, где ИМФС - индекс морфофункционального состояния, А - доля нормальных сперматозоидов относительно контроля, В - доля подвижных сперматозоидов относительно контроля. При значениях ИМФС меньше или равно 1,3 судят о неэффективной коррекции сперматогенеза, а при ИМФС больше 1,3 судят об эффективной коррекции сперматогенеза в условиях воздействия микроволнового излучения. Изобретение позволяет оценить эффективность коррекции сперматогенеза на фоне вводимого биокорректора. 2 табл., 3 ил., 3 пр.

Способ автоматизированной морфометрической диагностики миелофиброза // 2552928

Изобретение относится к медицине, а именно к способу автоматизированной морфометрической диагностики миелофиброза. Сущность способа состоит в том, что выполняют обзорные изображения биологической ткани с выделением на таких изображениях зон с различными оптическими свойствами c определяемыми фиброзными и гемопоэтическими свойствами биологической ткани. Рассчитывают отношения площадей этих зон как минимум трех парафиновых срезов трепанобиоптантов. Вычисляют коэффициент (Коп) как отношение площади фиброзной ткани к площади гемопоэтической ткани по формуле. При значении Коп≥14,5% диагностируют миелофиброз. Использование заявленного способа позволяет повысить точность и улучшить оперативность диагностики миелофиброза. 6 з.п. ф-лы, 1 табл., 4 ил., 1 пр.

Способ прогнозирования преэклампсии во втором триместре беременности // 2552931

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству. Изобретение представляет способ прогнозирования преэклампсии во втором триместре беременности путем исследования крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови женщин в 7-8 недель беременности определяют активность кислых и нейтральных протеиназ и при значении активности кислых протеиназ выше 5,6 мкмоль/л и активности нейтральных протеиназ выше 3,9 мкмоль/л прогнозируют развитие преэклампсии во втором триместре беременности. Изобретение обеспечивает повышение точности и специфичности способа прогнозирования гестоза. 2 пр.

Устройство для неинвазивного потенциометрического определения оксидантной/антиоксидантной активности биологических тканей // 2552942

Группа изобретений относится к медицине, косметологии, производству продуктов питания, витаминов, БАДов, лекарственных средств и описывает варианты устройства для реализации неинвазивного потенциометрического определения оксидантной/антиоксидантной активности биологических тканей, включающего прибор для измерения потенциалов и двухсторонний электрод, выполненный в виде пластины с одинаковыми рабочими поверхностями, покрытыми электропроводящим гелем, содержащим медиаторную систему. Электроды закрепляют на биологической ткани таким образом, что одна рабочая поверхность, выполняющая роль измерительного электрода, находится в непосредственном контакте с биологической тканью через гель, вторая рабочая поверхность выполняет роль электрода сравнения. При этом электроды через гель контактируют друг с другом, а оксидантную/антиоксидантную активность определяют по формулам, используя разность конечного и начального потенциалов. Достигается упрощение, а также повышение точности и достоверности определения. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 ил.

Способ диагностики обострения цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации при снижении в эритроцитах глютатионредуктазы // 2552954

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики обострения цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Способ включает определение в крови беременных титра антител к цитомегаловирусу и активности глутатионредуктазы в эритроцитах рожениц с цитомегаловирусной инфекцией. При значении титра антител к цитомегаловирусу 1:1600 и значении активности глутатионредуктазы ниже 4,48±0,22 Ед/гНb диагностируют обострение цитомегаловирусной инфекции.

Способ выявления форм урогенитальных трихомонад // 2553307

Изобретение относится к области медицины и предназначено для выявления атипичных форм трихомонад. Способ включает взятие биологического ткани, введение в нее биологически активного вещества, выдержку полученной смеси в термостате при 37°C с последующей инкубацией, проведение микроскопического исследования для выявления форм трихомонад. В качестве биологической ткани осуществляют забор материала со слизистых оболочек мочеполовых органов, который инкубируют в течение суток в питательной среде. Отделяют полученный осадок и добавляют к нему в качестве биологически активного вещества нитрозогуанидин в количестве 500 мкг/мл. Инкубируют 15 мин при температуре +37°C, добавляют подогретый до температуры +37°C фосфатный буфер с pH 5,6 с последующим двойным центрифугированием при 1000 об/мин в течение 10 мин. Затем помещают в питательную среду для выращивания трихомонад, инкубируют не менее суток и при микроскопии выявляют атипичные безжгутиковые и типичные округлые и амебовидные формы трихомонад. Использование заявленного изобретения позволяет эффективно, быстро и достоверно выявлять типичные измененные и атипичные формы трихомонад. 3 ил., 3 пр.

Способ диагностирования нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с миомой матки и бесплодием // 2553340

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и предназначено для диагностирования нарушения репродуктивной функции у пациенток с миомой матки. Способ заключается в определении количества пиноподий в поверхностном эпителии, уровня экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогена-альфа в строме эндометрия, их соотношения, а также уровня экспрессии имплантационного фактора LIF на 21-24 день менструального цикла (в «окно имплантации»). При количестве пиноподий менее 35%, уровне соотношения экспрессии прогестероновых и эстрогеновых рецепторов в строме эндометрия менее 3,5, а также уровне экспрессии LIF менее 2 баллов диагностируют нарушение фертильности, связанное с миомой матки. Данный метод позволяет применять дифференцированный подход к ведению пациенток, планирующих беременность, с миомой матки, не деформирующей полость матки, а также с размерами миоматозных узлов до 5,0 см в диаметре. 2 пр., 4 ил.

Способ прогнозирования развития нарушений ритма сердца у пациентов с синдромами преждевременного возбуждения желудочков // 2553346

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и аритмологии, и может быть использовано для прогнозирования развития нарушений ритма сердца у пациентов с синдромами преждевременного возбуждения желудочков. Для этого в плазме крови больного определяют концентрацию матриксной металлопротеиназы-9 (ММП-9) и при ее значении менее 90,6 нг/мл прогнозируют благоприятное течение заболевания без развития нарушений ритма сердца (НРС), при значении концентрации ММП-9 более 90,6 нг/мл прогнозируют развитие НРС. Способ позволяет прогнозировать развитие НРС у пациентов с синдромами преждевременного возбуждения желудочков за счет высокой чувствительности и специфичности метода при малой инвазивности способа и отсутствии противопоказаний. 3 пр.

Способ выявления симптомов эндогенной интоксикации и ассоциированных дыхательных расстройств // 2553359

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для выявления симптомов эндогенной интоксикации (ЭИ) пациентов, страдающих колоктеральным раком. Для этого исследуют клинический анализ крови и расчитывают интегральный показатель интоксикации (ИПИ) по формуле: И П И = ( Ю н + П а л + С е г + М и е л + П л а з ) * 10 ( Б а з + Э о з + Л и м + М о н ) * Э р * Ц п где ИПИ - интегральный показатель интоксикации, Юн - юные лейкоциты в %, Пал - палочкоядерные нейтрофилы в %, Сег - сегментоядерные нейтрофилы в %, Миел - миелоциты в %, Плаз - плазматические клетки в %, Баз - базофилы в %, Эоз - эозинофилы в %, Лим - лимфоциты в %, Мон - моноциты в %, Эр - эритроциты в абсолютном значении в 1012 степени, ЦП - цветовой показатель в абсолютном значении. Изобретение обеспечивает диагностику отсутствия (при ИПИ=4,6) или наличия (при ИПИ=10,4) симптомов ЭИ и ассоциированных с нею дыхательных расстройств и позволяет оценить эффективность проводимой терапии.

Определение чувствительности клеток к обработке ингибитором b-raf путем детекции мутации k-ras и уровней экспрессии rtk // 2553379

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ, включающий определение наличия или отсутствия мутации K-rasG12D. Наличие мутации K-rasG12D указывает на то, что пациент не ответит на лечение ингибитором В-Raf. Изобретение обеспечивает эффективный способ идентификации пациента, не отвечающего на лечение ингибитором B-Raf. 5 з.п. ф-лы, 34 ил., 12 табл., 3 пр.