Способ диагностики нейросифилиса

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ диагностики нейросифилиса, включающий микроскопическое исследование образцов спинномозговой жидкости, причем проводят краевую дегидратацию образцов спинномозговой жидкости, а их микроскопическое исследование проводят в поляризованном свете и при выявлении анизотропных структур в виде дендритов либо сферолитов, внутри которых расположены образования в форме овалов, содержащих липиды, диагностируют раннюю форму нейросифилиса, а при выявлении множества овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и/или отдельно расположенных, диагностируют поздний менинговаскулярный нейросифилис. Задачей изобретения является получение объективных критериев для диагностики нейросифилиса, обеспечение ранней, в том числе доклинической диагностики заболевания, сокращение сроков получения данных, снижение затрат на проведение исследований. Предлагаемый способ в ряде случаев является единственным, позволяющим получить обоснованные критерии диагностики в виде картины разрушения структур мозга, что позволяет уверенно поставить диагноз нейросифилиса и своевременно назначить специфическую терапию. 4 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в определении степени тяжести повреждений структур мозга бледной трепонемой у пациентов с сифилисом в анамнезе.

Проблема своевременной диагностики нейросифилиса остается актуальной, несмотря на создание широкой базы лабораторных тестов, включающих общеклинические и серологические показатели при исследовании спинномозговой жидкости. Однако из-за недостаточной чувствительности используемых тестов нередко возникают ситуации, в которых нельзя исключить или подтвердить инвазию бледной трепонемы в структуры нервной системы. В ряде случаев только опыт клинициста является решающим в диагностике данной патологии, и своевременное назначение адекватной терапии способствует предупреждению необратимых органических нарушений в нервной системе и гибели пациента. В то же время есть и формы раннего асимптомного течения нейросифилиса, т.е. отсутствуют клинические признаки заболевания при потере чувствительности традиционных лабораторных методов и следования.

Известен способ диагностики нейросифилиса при исследовании спинномозговой жидкости с помощью серологических тестов (Лукьянов A.M. Нейросифилис. Современные аспекты клиники, диагностики, терапии. Минск, Парадокс, 2009, с. 246-263), включающий определение и исследование VDRL (Veneral Disease Reserch Laboratory), РПГА, РИФц (РИФ с цельным ликвором), ИФА-IgG.

Однако в настоящее время результаты серологических тестов при исследовании спинномозговой жидкости в большинстве случаев являются нечувствительными или малочувствительными, что не позволяет поставить диагноз нейросифилиса. Такая ситуация сложилась в 21 веке в связи с изменением реакции организма людей на широкое применение антибиотиков, чего не отмечалось ранее (первая половина 20 века), когда вышеперечисленные тесты являлись высокочувствительными и однозначно решали вопросы диагностики нейросифилиса.

Известен способ диагностики нейросифилиса (Патент РФ №2230323, МПК 33/50, опубл. 2004), включающий определение сфингомиелина в ликворе больных с помощью проточной тонкослойной хроматографии, по уровню которого проводят диагностику.

Недостатком этого способа является его сложность и трудоемкость, требуется дорогостоящая аппаратура и реагенты, а также наличие высококвалифицированных кадров. Данный способ может быть осуществлен только в лабораториях специализированных НИИ, поэтому в практической работе сложно его использовать.

Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ диагностики нейросифилиса, включающий микроскопическое исследование спинномозговой жидкости (Лукьянов A.M. Нейросифилис. Современные аспекты клиники, диагностики, терапии. Минск, Парадокс, 2009, с. 233).

Недостатком данного способа является то, что в настоящее время чувствительность организма к воспалительным процессам, вызванным внедрением бледной трепонемы в структуры мозга, резко снизилась за счет широкого использования населением антибактериальных препаратов, что повлияло на снижение иммунной реакции организма на чужеродный антиген.

В связи с этим задачей изобретения является устранение указанных недостатков, получение объективных критериев для диагностики нейросифилиса, обеспечение ранней, в том числе доклинической диагностики заболевания, сокращение сроков получения данных, снижение затрат на проведение исследований.

Для этого в способе диагностики нейросифилиса, включающем микроскопическое исследование образцов спинномозговой жидкости, предложено проводить краевую дегидратацию образцов спинномозговой жидкости, а их микроскопическое исследование осуществлять в поляризованном свете. При этом при выявлении анизотропных структур в виде дендритов либо сферолитов, внутри которых расположены образования в форме овалов, содержащих липиды, диагностируют раннюю форму нейросифилиса; при выявлении множества овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и/или отдельно расположенных, диагностируют поздний менинговаскулярный нейросифилис.

Известно, что состав жидкокристаллических структур базируется на системах «липид - вода», «липид - белок - вода», которые при переводе в твердофазное состояние методом краевой дегидратации биологических жидкостей формируют структуры, наблюдаемые при микроскопии в поляризованном свете (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. М., Триада, 2001, с. 52-54). Мембраны клеток головного и спинного мозга богаты липидами и белками. При их разрушении продукты деструкции попадают в спинномозговую жидкость, одной из функций которой является выведение токсичных веществ из ткани мозга. Так как бледная трепонема проникает в мозг и формирует в нем множественные очаги деструкции, вызывающие патологические изменения в центральной нервной системе (парезы, параличи, инсульты, психические нарушения и др.), возникла идея - исследовать структуры спинномозговой жидкости систем «липид - вода», «липид - белок - вода» у больных, которые перенесли сифилис, с целью диагностики деструктивных процессов в ткани мозга.

На фиг. 1 представлен сферолит спинномозговой жидкости здорового человека. Видно, что его структура монолитна и в ней отсутствуют какие-либо дополнительные включения (×300); на фиг. 2 представлен анизотропный дендрит с наличием включений в виде овалов, содержащих липиды у больного с ранним асимптомным нейросифилисом. Аморфные овалы характеризуют процессы деструкции в центральной нервной системе (×300); на фиг. 3 - множество овалов, сгруппированных в форме шаров, расположенных внутри сферолита и вне его (×50), на фиг. 4 - то же (×200). Способ осуществляется следующим образом.

У больного, в анамнезе которого был сифилис (серопозитивная реакция сыворотки крови на сифилис), получают спинномозговую жидкость с целью диагностики нейросифилиса. Для этого проводят исследование методом краевой дегидратации, для чего на поверхность предметного стекла наносят каплю спинномозговой жидкости и накрывают ее покровным стеклом (создание аналитической ячейки). Через 72 часа ячейки микроскопируют в поляризованном свете при различных увеличениях и при выявлении структур диагностируют раннюю или позднюю форму нейросифилиса.

Пример 1

Пациент М., 36 лет. 2 года назад установлен диагноз сифилиса. Получил курс специфической терапии. В настоящее время пациент находится в психиатрической больнице, неадекватен, дезориентирован в пространстве. Результаты общеклинического исследования спинномозговой жидкости: концентрация белка - 0,47; цитоз 5/3 (лимфоциты - 3, моноциты - 2), что соответствует параметрам нормы.

Серологические исследования: VDRL - отрицательно, РПГА - слабоположительно (2+), РИФц - положительно (3+), ИФА G - отрицательно, т.е. результат сомнительный.

Результаты исследования заявляемым способом: обнаружены дендриты с включенными в их структуру овалами (фиг. 2).

Заключение: нейросифилис, ранняя форма.

Осмотр клиницистом: имеются анамнестические и психоневрологические данные, которые в совокупности с результатами, полученными заявляемым способом, позволяют поставить диагноз нейросифилиса и назначить курс специфической терапии по нейросифилису.

Было проведено адекватное лечение, через 6 месяцев повторное исследование спинномозговой жидкости по предлагаемому способу не выявило структур, характерных для нейросифилиса.

Пример 2

Пациентка Ф., 52 года. Установлен поздний сифилис. Курс специфической терапии не получала. В настоящее время поступила в неврологическое отделение по поводу последствий инфаркта мозга, правостороннего гемипареза.

Результаты общеклинического исследования спинномозговой жидкости: концентрация белка - 0,21; цитоз 8/3 (лимфоциты - 8), что соответствует параметрам нормы.

Серологические исследования: VDRL - отрицательно, РПГА - слабоположительно (2+), РИФц - слабоположительно (2+), ИФА G - слабоположительно (КП=2,5), т.е. результат сомнительный.

Результаты исследования заявляемым способом: в аналитических ячейках обнаружено большое количество овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и вне их (фиг. 3, 4). Заключение: нейросифилис, поздняя менинговаскулярная форма.

Осмотр клиницистом: имеются неврологические данные, которые в совокупности с результатами, полученными заявляемым способом, позволяют поставить диагноз поздней формы нейросифилиса и назначить курс специфической терапии по нейросифилису.

Пример. 3

Пациент О., 40 лет. Перенес сифилис 8 лет назад. Получил 2 курса специфической терапии.

Проведено исследование по вышеописанной методике.

Результаты исследования заявляемым способом: во всех аналитических ячейках обнаружены сферолиты с параметрами нормы (фиг. 1).

Заключение: признаки нейросифилиса отсутствуют.

Осмотр клиницистом: клинические признаки нейросифилиса не обнаружены.

По предлагаемому способу были проведены исследования у 106 человек, имеющих в анамнезе сифилис и различную неврологическую симптоматику, была получена спинномозговая жидкость с целью диагностики нейросифилиса.

Были проведены исследования известными способами: нейросифилис был подтвержден серологическими исследованиями и результатами подсчета клеток ликвора у 42 человек. У остальных 64 пациентов были получены отрицательные или слабоположительные результаты анализа.

Тем пациентам (64 человека), которым требовалось уточнение диагноза, было проведено исследование заявленным способом. Полученные результаты показали, что деструктивный процесс в центральной нервной системе, вызванный бледной трепонемой, имел место только у 26 человек. Этим больным было назначено дополнительное лечение и при контрольном исследовании через 6 месяцев отмечалась положительная динамика неврологической симптоматики (восстановление речи, чувствительности, двигательных функций) и отсутствие признаков нейросифилиса по заявленному способу при повторном исследовании. Остальным 38 пациентам диагноз нейросифилис был снят.

Заявленный способ диагностики нейросифилиса в ряде случаев является единственным, позволяющим получить обоснованные критерии диагностики в виде картины разрушения структур мозга, что позволяет уверенно поставить диагноз нейросифилиса и своевременно назначить специфическую терапию. В ГБУЗ МО МОККВД данный способ востребован клиницистами, особенно в тех случаях, когда постановка диагноза нейросифилиса является спорной. Проведение своевременной диагностики обеспечивает целенаправленную и, следовательно, эффективную терапию.

Способ диагностики нейросифилиса, включающий микроскопическое исследование образцов спинномозговой жидкости, отличающийся тем, что проводят краевую дегидратацию образцов спинномозговой жидкости, а их микроскопическое исследование проводят в поляризованном свете и при выявлении анизотропных структур в виде дендритов либо сферолитов, внутри которых расположены образования в форме овалов, содержащих липиды, диагностируют раннюю форму нейросифилиса, а при выявлении множества овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и/или отдельно расположенных, диагностируют поздний менинговаскулярный нейросифилис.