Антикоагулянтные соединения и их применение

Настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I):

или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтически приемлемого N-ацильного производного и основания Манниха в качестве антикоагулянта, к применению указанных соединений в способе менеджмента способности свертывания крови и к фармацевтической композиции на основе указанных соединений. В формуле (I) R¹ представляет собой алкильную группу, включающую алкильные группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 9 атомов углерода, R² представляет собой водород, n равняется 0, 1, 2, 3 или 4, R³ представлен следующей формулой (II)

в которой R^a, R^c, R^d, R^e, q, r, s и имеют значения, указанные в формуле изобретения. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 10 ил., 2 пр.

 

Настоящее изобретение относится к антикоагулянтным соединениям и способам их применения.

Антикоагулянты применяются для остановки неадекватного свертывания крови и лечения болезней, в основе которых лежит данное явление, и могут использоваться, в частности, для предотвращения тромбоза глубоких вен, тромбоэмболии легочной артерии, инфаркта миокарда и удара, а также для поддержания функций искусственного клапана сердца после протезирования с использованием механических, ксено-, гомо- или аутологичных имплантатов, а также для предотвращения тромбообразования в ходе хирургических вмешательств.

Широко используемыми антикоагулянтами являются варфарин и гепарин, при этом кровотечения являются наиболее распространенным осложнением их терапевтического использования.

Неожиданно было обнаружено, что некоторые производные нафтохинона могут проявлять антикоагулянтные свойства. Таким образом, настоящее изобретение относится к альтернативному антикоагулянту.

В соответствии с настоящим изобретением предлагается соединение формулы (I):

в которой

R¹ представляет собой водород, галоген, циано, трифторметил, нитро, -OR^a, SR^a, SOR^a, -SO₂R^a, -SO₂NR^aR^b, -NR^aR^b, -NR^aCOR^b, -NR^aCO₂R^b, -COR^a, -CO₂R^a, -CONR^aR^b или углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, либо гетероциклическую группу, содержащую до 18 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом;

R², независимо в каждом случае, представляет собой водород или, более предпочтительно галоген, циано, трифторметил, нитро, -OR^a, SR^a, SOR^a, -SO₂R^a, -SO₂NR^aR^b, -NR^aRb, -NR^aCOR^b, -NR^aCO₂R^b, -COR^a, -CO₂R^a, -CONR^aR^b или углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, либо гетероциклическую группу, содержащую до 18 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом (например, R¹ или R² представляет собой водород, галоген, циано, трифторметил, нитро, -OR^a, SR^a, SOR^a, -SO₂R^a, -SO₂NR^aR^b, -NR^aR^b, -NR^aCOR^b, -NR^aCO₂R^b, -COR^a, -CO₂R^a, -CONR^aR^b или углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, либо гетероциклическую группу, содержащую до 18 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом);

R³ представляет собой углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный или циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода и замещенный по меньшей мере одним заместителем, включая заместитель -CO₂R^a;

при этом каждый из заместителей R^a и R^b, независимо в каждом случае, представляет собой водород или углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, либо гетероциклическую группу, содержащую до 18 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом (например, каждый из заместителей R^a или R^b независимо представляет собой водород или углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, либо гетероциклическую группу, содержащую до 18 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом);

n равняется 0 или, более предпочтительно, 1, 2, 3 или 4;

либо фармацевтически приемлемый сольват или, более предпочтительно, соответствующая соль или пролекарство;

в качестве антикоагулянта.

В одном из аспектов настоящего изобретения соединение формулы (I) не является витамином K₃.

В другом аспекте настоящего изобретения предлагаются фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем. В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель, используемой в качестве антикоагулянта. Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) либо содержащей данное соединение фармацевтической композиции в производстве лекарственного средства, используемого в качестве антикоагулянта.

Термин «композиция», употребляемый, например, в выражении «фармацевтическая композиция», относится к продукту, содержащему активный(е) компонент(ы) и формирующие наполнитель инертный(е) компонент(ы) (фармацевтически приемлемые наполнители), а также к любому продукту, прямо или опосредованно образующемуся в результате комбинации, агрегации или комплексообразования между любыми двумя или более компонентами, либо в результате диссоциации одного или более компонентов, либо в результате других типов реакций или взаимодействий одного или нескольких компонентов. Таким образом, фармацевтические композиции настоящего изобретения включают любые композиции, полученные путем смешивания соединения формулы (I), дополнительного(ых) активного(ых) ингредиента(ов) и фармацевтически приемлемых наполнителей. Подходящие фармацевтические композиции описаны, например, в руководстве Remington The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed., Mack Printing Company, Easton, Pennsylvania (1995). Для парентерального введения может быть использован пригодный для парентерального введения апирогенный водный раствор, показатели pH, изотоничности и стабильности которого соответствуют требуемым. Подходящие растворы хорошо известны специалистам в данной области техники, в литературе описано множество различных способов их получения. Краткий обзор способов доставки лекарственных средств также можно найти в работе Langer, Science (1990) 249, 1527.

В тексте настоящей заявки ссылка на соединение формулы (I) относится ко всем фармацевтически приемлемым сольватам и, более предпочтительно, солям, пролекарствам или таутомерам, если иное не следует из контекста. Соответственно, в наиболее широком аспекте, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) или их фармацевтически приемлемым сольватам или, более предпочтительно, их солям, пролекарствам или таутомерам для использования в качестве антикоагулянтов, а также в производстве лекарственных средств для использования в качестве антикоагулянтов.

Термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований, в том числе неорганических и органических оснований (например, при наличии заместителя -CO₂R^a в составе R³), или солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот, в том числе неорганических и органических кислот (например, при наличии основного заместителя в составе любого из заместителей R¹ или R²).

Соли, полученные из неорганических оснований, включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, железа(III), железа(II), лития, магния, калия, натрия, цинка и т.п. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклических аминов и основных ионообменных смол; таких как аргинин, бетаин, кофеин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, изопропиламин, лизин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминовые смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и т.п.

Соли, полученные из различных кислот, включают соли бензолсульфоновой, бензойной, камфорсульфоновой, лимонной, этансульфоновой, фумаровой, глутаминовой, бромистоводородной, соляной, изетионовой, молочной, малеиновой, миндальной, метансульфоновой, азотной, памовой, пантотеновой, фосфорной, янтарной, серной, винной, п-толуолсульфокислоты и т.п.

Как упоминалось выше, соединения формулы (I) также включают любые сольваты соединений и их солей. Предпочтительными являются сольваты, образуемые путем включения молекул нетоксичных фармацевтически приемлемых растворителей (далее - сольватирующие растворители) в твердофазную (например, кристаллическую) структуру, образованную соединениями настоящего изобретения. Примеры подобных растворителей включают воду, спирты (такие как этанол, изопропанол и бутанол) и диметилсульфоксид. Сольваты могут быть получены путем перекристаллизации соединения настоящего изобретения из соответствующего растворителя или смеси растворителей, содержащей сольватирующий растворитель. Стандартные методы, такие как термогравиметрический анализ (TGE), дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC) или рентгеноструктурный анализ могут быть использованы для определения, образовался или не образовался сольват в каждом конкретном случае.

Сольваты могут быть стехиометрическими или нестехиометрическими. Особо предпочтительными сольватами являются гидраты, примеры которых включают гемигидраты, моногидраты и дигидраты.

Более детальное описание сольватов и способов их характеризации приведено в руководстве Bryn et al., Solid-State Chemistry of Drugs, второе издание, опубликовано SSCI, Inc. of West Lafayette, IN, USA, 1999, ISBN 0-967-06710-3.

Объем настоящего изобретения также включает использование пролекарств соединений формулы (I). В общем случае такие пролекарства представляют собой функциональные производные соединений формулы (I), которые легко превращаются в необходимые соединения in vivo. Стандартные способы отбора и подготовки подходящих производных/пролекарств хорошо известны в данной области техники.

Термин «пролекарство» соединения формулы (I) относится к любому соединению, которое после введения (например, перорального или парентерального) в ходе метаболизма in vivo в течение определенного времени (например, в интервал дозирования от 6 до 24 часов (соответствующий приему лекарственного средства от одного до четырех раз в день)), превращается в соединение формулы (I) в экспериментально определяемых количествах.

Пролекарства соединений формулы (I) могут быть получены путем модификации входящих в его состав функциональных групп таким образом, чтобы фрагмент, использованный для модификации, отщеплялся in vivo при введении пролекарства в организм млекопитающего. Подобные модификации обычно осуществляются путем синтеза соединения, содержащего фрагмент, соответствующий родительскому соединению, и заместитель, придающий данному соединению свойства пролекарства. Пролекарства включают соединения формулы (I), в которых гидроксильная, амино, сульфгидрильная, карбоксильная или карбонильная группа связана с каким-либо фрагментом, который может отщепляться in vivo, тем самым высвобождая исходное соединение, содержащее свободную гидроксильную, амино, сульфгидрильную, карбоксильную или карбонильную группу, соответственно.

Примеры пролекарств включают, без ограничения, соединения, содержащие этерифицированные и карбамилированные гидроксильные группы, этерифицированные карбоксильные группы, а также N-ацильные производные и основания Манниха. Общая информация о пролекарствах может быть найдена, например, в руководстве Bundegaard, H. «Design of Prodrugs», р.1-92, Elsevier, New York-Oxford (1985).

В одном из аспектов пролекарство не является витамином К. Если не указано иное, используемый в настоящем описании термин «витамин К» относится к витамину K₁ и витамину К₂, но не к синтетическим аналогам витамина К.

Соединения формулы (I) могут содержать двойные связи и, таким образом, могут существовать в виде E (entgegen) и Z (zusammen) геометрических изомеров, в соответствии с конфигурацией каждой из двойных связей. Все подобные изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения.

Соединения формулы (I) могут существовать в виде региоизомеров, а также демонстрировать таутомерию. Все таутомерные формы и их смеси включены в объем настоящего изобретения.

Соединения формулы I могут содержать один или более асимметрических атомов углерода и в связи с этим могут проявлять оптическую и/или диастереоизомерию. Диастереоизомеры могут быть разделены при помощи стандартных способов, например, хроматографии или дробной кристаллизации. Различные стереоизомеры могут быть выделены путем разделения рацемической или иной смеси соединений при помощи стандартных способов, например, дробной кристаллизации или ВЭЖХ. Кроме того, желаемые оптические изомеры могут быть получены в ходе химической реакции, проводимой в условиях, не приводящих к рацемизации или эпимеризации, с использованием оптически активного соединения (взятого из т.н. «хирального пула») в качестве исходного вещества; при помощи реакции подходящего исходного вещества с хиральным вспомогательным реагентом, элиминируемым в ходе дальнейшего синтеза на подходящей стадии; путем дериватизации (расщепления (в том числе динамического) через диастереомерные формы), например, при помощи гомохиральной кислоты, с последующим разделением диастереомерных производных с использованием стандартных способов, таких как хроматография; либо в ходе реакции с подходящим хиральным реагентом или с использованием хирального катализатора; все вышеописанные реакции проводятся в условиях, известных специалистам в данной области техники. Все стереоизомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения.

Соединение формулы (I) или фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы (I), для использования согласно вышеуказанным аспектам настоящего изобретения, могут применяться для оказания медицинской помощи. Таким образом, согласно другим аспектам настоящего изобретения, предлагается

(i) применение соединения формулы (I) или содержащей данное соединение фармацевтической композиции для изготовления лекарственного средства в качестве антикоагулянта и

(ii) способ лечения или предотвращения заболевания или состояния, при которых антикоагулянтная терапия оказывает благоприятное воздействие, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективной дозы соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции.

Значения термина «заболевание или состояние, при которых антикоагулянтная терапия оказывает благоприятное воздействие» будут понятны специалистам в данной области техники и включают тромбоз и связанные с ним заболевания. Заболевания, связанные с тромбозом, включают тромбоз глубоких вен (в частности, настоящее изобретение относится к предотвращению тромбоза глубоких вен), тромбоэмболию легочной артерии, инфаркт миокарда (например, возникающий в ходе хирургических вмешательств и требующий антикоагулянтной терапии) и удар; еще одним аспектом применения антикоагулянтной терапии является поддержание функций сердечного клапана в механических имплантатах или трансплантатах сердца, таких как трансплантаты, полученные от человека, либо, предпочтительно, не являющиеся человеческой тканью (например, после протезирования сердечного клапана с использованием механических, ксено-, гомо- или аутологичных имплантатов, а также для предотвращения тромбообразования в ходе хирургического вмешательства).

Таким образом, в одном из аспектов соединение формулы (I) используется в качестве антикоагулянта для предотвращения тромбоза и связанных с ним заболеваний. Частные случаи заболеваний и состояний, которые могут быть упомянуты в связи с вышеописанными аспектами настоящего изобретения, включают тромбоз.

Соединения и композиции настоящего изобретения, обладающие антикоагулянтной активностью, могут быть использованы для предотвращения или лечения тромбоза, а также связанных с ним заболеваний, например, для предотвращения тромбоза глубоких вен, тромбоэмболии легочной артерии, инфаркта миокарда, возникающего в ходе хирургических вмешательств и требующего антикоагулянтной терапии, ударов, а также для поддержания функций сердечного клапана в механических имплантатах или трансплантатах сердца, таких как трансплантаты, полученные от человека, либо, предпочтительно, не являющиеся человеческой тканью (например, после протезирования сердечного клапана с использованием механических, ксено-, гомо- или аутологичных имплантатов, а также для предотвращения тромбообразования в ходе хирургического вмешательства).

Таким образом, дальнейшие аспекты настоящего изобретения относятся к следующему:

(a) соединение формулы (I) или содержащая данное соединение фармацевтическая композиция согласно вышеприведенным определениям для лечения или предотвращения возникновения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей тромбоз, тромбоз глубоких вен, тромбоэмболию легочной артерии, инфаркт миокарда, возникающий в ходе хирургических вмешательств и требующий антикоагулянтной терапии, удары, а также для поддержания функций сердечного клапана в механических имплантатах или трансплантатах сердца (например, для лечения или предотвращения тромбоза);

(b) применение соединения формулы (I) или содержащей данное соединение фармацевтической композиции согласно вышеприведенным определениям для изготовления лекарственного средства для лечения или предотвращения возникновения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей тромбоз, тромбоз глубоких вен, тромбоэмболию легочной артерии, инфаркт миокарда, возникающий в ходе хирургических вмешательств и требующий антикоагулянтной терапии, удары, а также для поддержания функций сердечного клапана в механических имплантатах или трансплантатах сердца (например, для лечения или предотвращения тромбоза);

(с) способ лечения или предотвращения заболевания или состояния, выбранного из группы, включающей тромбоз, тромбоз глубоких вен, тромбоэмболию легочной артерии, инфаркт миокарда, возникающий в ходе хирургических вмешательств и требующий антикоагулянтной терапии, удары, а также способ поддержания функций сердечного клапана в механических имплантатах или трансплантатах сердца (например, способ лечения или предотвращения тромбоза), включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективной дозы соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции.

Во избежание неопределенности в контексте настоящего изобретения термин «лечение» относится к терапевтическому или паллиативному лечению пациентов, нуждающихся в таком лечении, а также к предотвращению и/или диагностическим процедурам в отношении пациентов, подверженных соответствующим болезненным состояниям.

Термин «пациент» и «пациенты» относится к млекопитающим (например, к человеку).

Термин «эффективная доза» относится к количеству соединения, обеспечивающему проявление терапевтического эффекта в отношении пациента, получающего соответствующее лечение (например, достаточному для лечения или предотвращения заболевания). Эффект может быть объективным (т.е. измеримым при помощи тех или иных тестов или маркеров) или субъективным (т.е. индивид чувствует или указывает на наличие эффекта).

Используемый в настоящем описании термин «галоген» включает фтор, хлор, бром и йод (например, бром или, более предпочтительно, хлор или фтор).

Термин «углеводород(ный)», используемый в настоящем описании в контексте любого из заместителей R¹, R², R³, R^a и R^b, включает следующие заместители: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, алкил, арил, арилалкил, арилалкенил и арилалкинил.

Подходящие алкильные группы включают линейные или разветвленные алкильные группы, содержащие от 1 до 18 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 9 атомов углерода. Так, типичные примеры могут включать метильную или этильную группу, либо линейную или разветвленную пропильную, бутильную, пентильную, гексильную, гептильную, октильную, нонильную или т.п. группу.

Подходящие алкенильные группы включают линейные или разветвленные алкенильные группы, содержащие от 2 до 18 атомов углерода, и могут включать винильный, аллильный или изопреновый фрагмент, 2-, 3- или 4-пентенил, или 2-, 3- или 4-гексенил и т.п., а также их изомерные формы. Степень ненасыщенности алкенильных групп, входящих в состав соединений настоящего изобретения, может составлять 1 или более.

Подходящие алкинильные группы включают линейные или разветвленные алкинильные группы, содержащие от 2 до 18 атомов углерода. Например, типичными примерами подобных групп могут быть этенильная и пропинильная группы.

Подходящие циклоалкильные группы включают группы, содержащие от 3 до 7 атомов углерода, например, циклопропил или циклогексил.

Подходящие арильные группы могут включать ароматические углеводородные системы, содержащие один либо два или три сочлененных цикла, такие как фенил или нафтил. Особо подходящей арильной группой может быть фенильная группа.

Подходящие гетероциклические группы могут включать циклические системы, состоящие из 5 или 6 атомов в цикле, из которых по меньшей мере один представляет собой атом кислорода, серы или азота. Циклические системы могут быть ароматическими или неароматическими. Примеры подобных систем могут включать пиперазинил, морфолинил, пирролил, имидазолил, тиенил, фуранил или другие известные гетероциклические системы.

В соответствии с предпочтительным воплощением настоящего изобретения R¹ представляет собой углеводородную группу, содержащую линейный, разветвленный либо циклический фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода. Более предпочтительно R¹ представляет собой алкильную группу, содержащую от 1 до 18 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 9 атомов углерода (например, от 1 до 6 атомов, например, от 1 до 5 атомов). Особо предпочтительным фрагментом R¹ является метил.

В соответствии с другим предпочтительным воплощением настоящего изобретения n равняется 0 или 4, а R² в каждом случае представляет собой атом водорода (например, R² представляет собой водород и n равно 4).

В соответствии с еще одним предпочтительным воплощением настоящего изобретения R³ представляет собой углеводородную группу, содержащую линейный или разветвленный фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, предпочтительно подходящую алкильную или алкенильную группу, замещенный по меньшей мере одним заместителем, включая заместитель -CO₂R^a. Более предпочтительно R³ представляет собой линейный или разветвленный С_1-9-алкил или C_2-9-алкенил, замещенный по меньшей мере одним заместителем, включая заместитель -CO₂R^a, в котором R^a по существу соответствует вышеопределенному. Предпочтительно R^a в составе R³ представляет собой водород либо углеводородную группу, содержащую линейный или разветвленный углеводородный фрагмент, каждый содержащий до 18 атомов углерода, предпочтительно содержащий до 9 атомов углерода, более предпочтительно до 6 атомов углерода. Предпочтительно R^a представляет собой водород либо линейный или разветвленный С_1-6-алкил, в частности, метил.

Предпочтительная структура R³ может быть представлена формулой (II)

в которой свободная связь представляет собой место прикрепления структурного фрагмента формулы (II) к оставшейся части соединения формулы (I):

R^a соответствует вышеопределенному в отношении данного фрагмента;

R^c, R^d и R^e независимо выбираются из группы, содержащей водород и С_1-6-алкил (который может представлять собой линейную или разветвленную алкильную группу);

q равняется 1, 2, 3 или 4;

r и s независимо выбираются из группы, содержащей 0, 1, 2, 3 и 4;

представляет собой одинарную или двойную связь, когда она является двойной связью, радикал R^e в вышеприведенной структуре по формуле (II) отсутствует.

Предпочтительно формула (II) относится к линейной или разветвленной С_4-8-алкильной группе, либо к линейной или разветвленной С_4-8-алкенильной группе, замещенной фрагментом -CO₂R^a, в которой R^a предпочтительно представляет собой водород либо линейный или разветвленный С_1-6-алкил, в частности, метил (например, связанная с группой R³ группа R^a представляет собой H или CH₃).

Особенно предпочтительные группы формулы (II) включают

-(CH₂)₇CO₂H;

-CH₂CH=C(CH₃)(CH₂)₂CO₂H; и

-CH₂CH=C(CH₃)CO₂H.

В частности, в контексте настоящего изобретения предлагается одно или несколько из следующих соединений:

(i) 2,3-диметокси-1,4-нафтохинон (XVI);

(ii) менадион (III);

(iii) KCAT-5C-Me (XIX);

(iv) NaQuinate-Me (VII);

(v) (4Е)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновая кислота (VIII);

(vi) (2Е)-4-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-2-метилбут-2-еновая кислота (XIV), и

(vii) 8-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)октановая кислота (XV),

в качестве антикоагулянта.

Во избежание неопределенности при возникновении несоответствия между тем или иным химическим названием и соответствующей ему химической структурой предпочтительной является химическая структура.

Особенно предпочтительной для использования в терапии согласно настоящему изобретению, и по существу в соответствии с вышеописанным в настоящей заявке, является (4Е)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновая кислота (VIII).

Настоящее изобретение также относится к новым соединениям для использования в терапии, по существу в соответствии с вышеописанным в настоящей заявке. Конкретно, эти новые соединения представляют собой (2Е)-4-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-2-метилбут-2-еновую кислоту (XIV) и 8-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)октановую кислоту (XV)

В одном из частных воплощений настоящего изобретения соединение формулы (I) не является менадионом.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) либо содержащей данное соединение фармацевтической композиции в производстве лекарственного средства, используемой в качестве антикоагулянта.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I), либо содержащей данное соединение фармацевтической композиции, для изготовления лекарственного средства для предотвращения тромбообразования или вызванных им заболеваний у пациента, которому предстоит проведение хирургического вмешательства. Таким образом, настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) либо к содержащей данное соединение фармацевтической композиции для предотвращения тромбообразования или вызванных им заболеваний у пациента, которому предстоит проведение хирургического вмешательства, а также к способу предотвращения тромбообразования или вызванных им заболеваний у пациента, которому предстоит проведение хирургического вмешательства, заключающемуся во введении пациенту эффективной дозы соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции (например, до или после проведения хирургического вмешательства).

В одном из аспектов соединения настоящего изобретения могут применяться в составе комбинированной терапии вместе с другим терапевтическим агентом.

Изобретение также относится к комбинации соединения формулы (I) с коагулянтом, таким как витамин К. В одном из аспектов соединение формулы (I) предназначено для модуляции коагулирующего действия коагулянта (например, соединение формулы (I) модулирует коагулирующий эффект коагулянта). В другом аспекте коагулянт предназначается для модуляции антикоагулянтного эффекта соединения формулы (I).

Настоящее изобретение также относится к применению витамина К для изготовления лекарственного средства для нейтрализации антикоагулянтых эффектов соединения формулы (I).

В другом аспекте настоящего изобретения предлагается способ лечения или предотвращения заболеваний, вызванных сворачиванием крови, который включает введение пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, терапевтически эффективной дозы соединения или композиции настоящего изобретения (например, соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции). Также предлагается соединение формулы (I) или содержащая его фармацевтическая композиция для использования в лечении или предотвращении заболеваний, вызванных сворачиванием крови, а также применение соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции для изготовления лекарственного средства для лечения или предотвращения заболеваний, вызванных сворачиванием крови.

В другом аспекте настоящего изобретения предлагается способ менеджмента способности свертывания крови у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, терапевтически эффективной дозы соединения или композиции настоящего изобретения (например, соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции), для достижения антикоагулянтного эффекта, с последующим введением коагулянта для модуляции или нейтрализации антикоагулянтного эффекта. Также предлагается соединение формулы (I) или содержащая его фармацевтическая композиция, используемая в способе менеджмента способности свертывания крови у пациента, включающего введение пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, терапевтически эффективной дозы соединения или композиции настоящего изобретения (например, соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции), для достижения антикоагулянтного эффекта, с последующим введением коагулянта для модуляции или нейтрализации антикоагулянтного эффекта, а также применение соединения или композиции настоящего изобретения (например, соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции), для изготовления лекарственного средства, используемого в способе менеджмента способности свертывания крови у пациента, включающего введение пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, терапевтически эффективной дозы соединения или композиции настоящего изобретения (например, соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции), для достижения антикоагулянтного эффекта, с последующим введением коагулянта для модуляции или нейтрализации антикоагулянтного эффекта.

Например, получающий антикоагулянтную терапию пациент, которому предстоит хирургическая операция, должен получать коагулянт для предотвращения избыточного кровотечения при хирургическом вмешательстве. Применение соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции в качестве антикоагулянта позволяет быстро и эффективно нейтрализовать их антикоагулянтный эффект при помощи введения витамина К (например, витамина К₁ или K₂), а также за счет их быстрого выведения из организма. Другими словами, применение соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции в качестве антикоагулянта позволяет быстро и эффективно нейтрализовать их антикоагулянтный эффект путем

(а) введения витамина К (например, витамина К₁ или K₂) и/или

(b) прекращения введения соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции, поскольку соединения формулы (I) быстро выводится из организма.

Для сравнения, нейтрализация эффекта другого антикоагулянта - варфарина является более медленным и требует больше времени для достижения эффекта, поскольку варфарин характеризуется сравнительно большим временем полужизни (2,5 дня).

Таким образом, в одном из аспектов настоящее изобретение относится к схеме лечения, включающей введение пациенту соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции, с последующим введением тому же пациенту после хирургического вмешательства витамина К или другого коагулянта для восстановления свертывающей способности крови. В некоторых случаях соединение формулы (I) или содержащая его фармацевтическая композиция могут вводиться пациенту после завершения хирургического вмешательства. Настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или содержащей его фармацевтической композиции в такой схеме лечения, а также для изготовления лекарственного средства для реализации в такой схеме лечения.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) с другим активным компонентом, например, с другим антикоагулянтом.

Данные соединения могут использоваться вместе в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения.

В соответствии с настоящим изобретением соединения формулы (I) можно вводить по отдельности (т.е. использовать в монотерапии, например, в монотерапии для предотвращения или лечения тромбоза и т.д.). Однако в альтернативных воплощениях настоящего изобретения соединения формулы (I) могут вводиться в комбинации с другим терапевтическим агентом (например, в комбинации с другим терапевтическим агентом для предотвращения или лечения тромбоза или же, в ином случае, в комбинации с коагулянтом (например, витамином K)).

Таким образом, дальнейшие аспекты настоящего изобретения относятся к комбинированному продукту, включающему

(A) соединение формулы (I) согласно вышеопределенному и

(B) другой терапевтический агент (например, коагулянт (например, витамин К) или антикоагулянт),

в котором каждый из компонентов (А) и (В) комбинируется в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем.

Используемый в настоящем описании термин «другой терапевтический агент» относится к одному или нескольким (например, одному) терапевтическому(им) агенту(ам) (например, одному терапевтическому агенту), выбранному(ым) из группы, содержащей коагулянты и/или антикоагулянты.

В частности, другие терапевические агенты, которые могут быть упомянуты в контексте настоящего описания, включают, например, коагулянты витамин K₁ в витамин K₂ и антикоагулянт варфарин.

Используемый в настоящем описании термин «вводимый (вводить) последовательно, одновременно или параллельно» относится к

введению отдельных фармацевтических препаратов (один из которых содержит соединение формулы (I), а другой(ие) (один или более) содержит(ат) другой(ие) (один или более) терапевтический(е) агент(ы));

введению одного фармацевтического препарата, содержащего соединение формулы (I) и другой(ие) терапевтический(ие) агент(ы).

Вышеописанный комбинированный продукт обеспечивает возможность введения компонента (А) в сочетании с компонентом (B) и, таким образом, может быть представлен в виде отдельных композиций, по меньшей мере одна из которых содержит компонент (А) и по меньшей мере одна из которых содержит компонент (B), либо может быть представлен (т.е. составлен) в виде комбинированного препарата (т.е. представлен в виде одной композиции, включающей как компонент (А), так и компонент (В)).

Таким образом, также предлагается

(I) фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы (I) согласно определенному выше, и другой терапевтический агент, в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем (далее в настоящем описании называемая «комбинированный препарат») и

(II) набор, включающий

(i) фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I) согласно определенному выше в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем и

(ii) фармацевтическую композицию, включающую другой терапевтический агент, в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем,

при этом каждый из компонентов (i) и (ii) представлен в форме, пригодной для введения в сочетании с другим компонентом.

Таким образом, компонент (i) данного набора представляет собой компонент (А) в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем. Аналогично, компонент (ii) данного набора представляет собой компонент (B) в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу изготовления комбинированного препарата, включающему комбинирование коагулянта, например, витамина К, с соединением формулы (I).

При необходимости комбинированный препарат может быть представлен в комбинации с любым фармацевтически приемлемым наполнителем, разбавителем или носителем с получением фармацевтической композиции.

При необходимости комбинированный препарат или фармацевтическая композиция могут быть представлены в составе таблетки для перорального приема.

Величина профилактической или терапевтической дозы соединения формулы (I), разумеется, будет варьироваться в зависимости от характера и тяжести подлежащего лечению состояния, а также в зависимости от использования того или иного конкретного соединения формулы (I) и способа его введения. Данный показатель также будет меняться в зависимости от различных факторов, включающих возраст, вес, общее состояние здоровья, пол, диету, время введения, скорость выведения, сочетание с другими лекарственными средствами и реакцию данного конкретного пациента на лечение. В общем случае суточная доза составляет от примерно 0,001 мг до примерно 1000 мг (например, от 0,001 мг до примерно 100 мг) на кг массы тела млекопитающего, предпочтительно от 0,01 мг до примерно 10 мг на кг. С другой стороны, в некоторых случаях может быть необходимо использовать дозировки, лежащие вне указанных пределов. В любом случае, врач или другой специалист будет способен в рабочем порядке определить дозу, наиболее подходящую для данного конкретного пациента.

Количество активного ингредиента, которое может быть комбинировано с носителем для получения дозированной формы, соответствующей однократной дозе, будет варьироваться в зависимости от пациента, получающего лечение, и конкретного способа введения. Например, препарат, предназначенный для перорального введения человеку, может содержать от 0,05 мг до 5 г активного вещества, смешанного с подходящим количеством материала носителя, которое может варьироваться от приблизительно 5 до приблизительно 99,95 процентов от общего состава. Единица дозирования обычно содержит от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 0,4 г активного вещества, как правило, 0,5 мг, 1 мг, 2 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 50 мг, 100 мг, 200 мг или 400 мг.

Предпочтительными дозами соединения формулы (I) являются дозы, превышающие 40 мг в день, более предпочтительно по меньшей мере 45 мг в день.

Общая суточная доза может быть введена за один прием или разделена на несколько разовых доз, вводимых в течение дня, отдельно или в комбинации с другими терапевтическими препаратами.

Соединения формулы (I) могут быть введены любым подходящим способом, например, перорально, путем ингаляции, местно, парентерально или ректально в виде дозированных форм, содержащих стандартные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные вещества и основы. Используемый в настоящем описании термин «парентеральный» относится к подкожным инъекциям, а также внутривенным, внутримышечным и загрудинным инъекциям или инфузиям.

Содержащие активный ингредиент фармацевтические композиции могут быть представлены в форме, пригодной для перорального применения, например, в виде таблеток, драже, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, либо сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, могут быть изготовлены любым способом, известным в данной области техники в отношении производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или несколько агентов, выбранных из группы, состоящей из подсластителей, ароматизаторов, красителей и консервантов, для получения фармацевтически полноценного препарата с приемлемыми показателями вкуса и запаха. Таблетки содержат активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми наполнителями, пригодными для изготовления таблеток. Этими наполнителями могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие агенты и разрыхлители, например, кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие вещества, например, крахмал, желатин или аравийская камедь, и смазывающие вещества, например, стеарат магния, стеариновая кислота или тальк.

Таблетки могут быть лишены покрытия или же на них при помощью известных способов может быть нанесено покрытие для замедления разрушения и всасывания в желудочно-кишечном тракте, что позволяет обеспечить стабильную активность в течение более длительного периода времени. Например, в качестве подобных задерживающих материалов могут быть использованы глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Также таблетки могут быть покрыты таким образом, чтобы получить терапевтические осмотические таблетки для контролируемого высвобождения.

Препараты для перорального введения могут быть также представлены в форме твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешивается с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, либо в форме мягких желатиновых капсул, в которых активные ингредиенты смешиваются с растворителями, способными смешиваться с водой, такими как пропиленгликоль, ПЭГ и этанол, либо с масляной основой, например, с арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.

Например, твердые композиции для перорального применения, такие как таблетки или капсулы, могут содержать от 1 до 99% масс./масс. активного ингредиента; от 0 до 99% масс./масс. разбавителя или наполнителя; от 0 до 20% масс./масс. разрыхлителя; от 0 до 5% масс./масс. смазывающего вещества; от 0 до 5% масс./масс. скользящего вещества; от 0 до 50% масс./масс. гранулирующего или связующего агента; от 0 до 5% масс./масс. антиоксиданта; и от 0 до 5% масс./масс. пигмента. Таблетки, представляющие собой лекарственную форму контролируемого высвобождения, могут дополнительно содержать от 0 до 90% масс./масс. полимера, контролирующего высвобождение.

Водные суспензии содержат активное вещество в смеси с наполнителями, пригодными для изготовления водных суспензий. Такие наполнители представляют собой суспендирующие агенты, например, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик; диспергирующие или увлажняющие агенты могут представлять собой природные фосфатиды, например, лецитин. Водные суспензии могут также содержать один или более консервант(ов), один или более краситель(ей), один или более ароматизатор(ов) и один или более подсластитель(ей).

Препарат для парентерального введения (например, раствор или суспензия для инъекций, или раствор для инфузий) может содержать от 1 до 50% масс./масс. активного ингредиента, от 50% масс./масс. до 99% масс./масс. жидкости или полужидкого носителя (например, растворителя, такого, как вода); и 0-20% масс./масс. одного или нескольких других наполнителей, таких как буферизующие агенты, антиоксиданты, стабилизаторы суспензий, агенты, модифицирующие тоничность и консерванты.

Масляные суспензии могут быть получены путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле, например, в арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, либо в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Масляные суспензии могут содержать загустители, например, пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Для изготовления препарата, подходящего для перорального приема, могут быть добавлены подсластители и ароматизаторы. Данные композиции могут быть стабилизированы путем добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота, витамин Е, или какого-либо подобного эквивалента.

Диспергируемые порошки и гранулы, пригодные для получения водной суспензии путем добавления воды, содержат активный ингредиент в смеси с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или несколькими консервантами. Примеры подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов, а также суспендирующих агентов приведены выше. Также могут присутствовать дополнительные наполнители, например, подсластители, ароматизаторы и красители.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут быть также получены в виде водно-масляной эмульсии. В качестве масляной фазы может быть использовано растительное масло, например оливковое масло или арахисовое масло, либо минеральное масло, например жидкий парафин, либо их смеси. Подходящие эмульгаторы могут представлять собой природные фосфатиды, например, соевый лецитин, сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гекситола, например, сорбитанмоноолеат, и продукты конденсации подобных неполных сложных эфиров с оксидом этилена, например, полиоксиэтилен-сорбитанмоноолеат. Эмульсии также могут содержать подсластители и ароматизаторы.

Сиропы и эликсиры могут содержать подсластители, например глицерин, пропиленгликоль, сорбит или сахарозу. Такие препараты также могут содержать консерванты, ароматизаторы и красители. Фармацевтические композиции могут представлять собой стерильные инъекционные лекарственные формы в виде водных или масляных суспензий. Данные суспензии может быть получены при помощи известных способов с использованием диспергирующих или увлажняющих агентов, а также суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном разбавителе или растворителе, подходящих для парентерального введения, например, раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, могут быть упомянуты вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Также могут быть использованы сорастворители, такие как этанол, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Кроме того, в качестве растворителя или суспензионной среды традиционно используют стерильные жирные масла. Для этих целей может быть использовано любое лишенное вкуса жирное масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для изготовления инъекционных форм используются жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Соединения формулы (I) также могут быть применяться в форме суппозиториев для ректального введения лекарственного средства. Данные композиции могут быть получены путем смешивания лекарственного средства с подходящим лишенным раздражающих свойств наполнителем, который представляет собой твердое вещество при температуре окружающей среды и жидкость при температуре, соответствующей таковой в прямой кишке и, таким образом, плавящийся в прямой кишке, высвобождая при этом лекарственное средство. Такими материалами являются масло какао и полиэтиленгликоли.

Для местного применения могут быть использованы содержащие соединение формулы (I) кремы, мази, гели, растворы или суспензии и т.д. (В контексте настоящей заявки термин «местное применение» также относится к препаратам, предназначенным для полоскания полости рта и горла). В большинстве случаев препараты для местного применения могут содержать фармацевтический носитель, сорастворитель, эмульгатор, агент, способствующий проникновению через естественные барьеры, консервант и смягчающий агент.

Список фигур

Настоящее изобретение далее будет проиллюстрировано посредством примеров, не имеющих ограничительного характера, со ссылками на прилагаемые фигуры, на которых

Фиг.1 демонстрирует пример пути синтеза соединения VIII (также называемого в настоящем описании NaQuinate);

Фиг.2А демонстрирует пример пути синтеза соединения V, используемого в схеме, продемонстрированной на Фиг.1;

Фиг.2B демонстрирует пример пути синтеза соединения V, используемого в схеме, продемонстрированной на Фиг.1;

Фиг.3 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи KCAT-5C (XIV) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1);

Фиг.4 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи KCAT-5C-Me (XIX) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1);

Фиг.5 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи NaQuinate (VIII) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1);

Фиг.6 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи NaQuinate-Me (VII) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1);

Фиг.7 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи QCAT-Me (XVIII) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1);

Фиг.8 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи DMK (XVI) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1); и

Фиг.9 демонстрирует ингибирование γ-карбоксилазы при помощи витамина К₃ (III) в присутствии 220 мкМ гидрохиноновой формы витамина K₁ (n=1).

Соединения настоящего изобретения могут быть синтезированы любым подходящим способом. Один из подходящих способов раскарыт ниже со ссылкой на Ruttimann et al. «Chimica» (1986) 40 (9) 290-306, Gerorkzan et al. «Chem. Hetrocyclic Compd» (Engl. Trans.) (1989) 2, 269, а также фиг.8 и 9. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть получены аналогично способам, раскрытым в GB 2314773 и включенным в настоящее описание посредством ссылки. Следует понимать, что соединения настоящего изобретения могут быть получены по аналогии со способами, описанными в вышеупомянутых ссылках или же могут быть куплены (там, где это указано).

В соответствии с продемонстрированным на Фиг.1 настоящего описания в качестве исходного вещества был использован менадион (Aldrich Chemical Company, III), который был введен в реакцию с циклопентадиеном при 25ºС, в результате чего был получен продукт их конденсации (IV). Введение заместителя в положение 3 (VI) проводили при помощи обработки полученного продукта основанием O^-K⁺ (например, трет-бутоксидом калия) с последующей обработкой метил-4-метил-6-бромгекс-4-енатом. Полученный промежуточный продукт далее нагревали при температуре от 70ºС до 110ºС, что приводило к элиминированию циклопентадиена, и выделяли полученный продукт, представляющий собой метиловый эфир NaQuinate (VII). Характеризация данного соединения приведена в вышеупомянутой работе Ruttimann et al., включенной в настоящее описание посредством ссылки.

Соединение (VII) преобразуется в соответствующую карбоновую кислоту с помощью щелочного гидролиза, например, при помощи KOH, с последующей обработкой кислотой, например, H₃O⁺ (например, водным раствором соляной кислоты) или ее эквивалентом, с использованием известных способов, что приводит к получению NaQuinate (VIII). Характеризация данного соединения приведена в вышеупомянутой работе Ruttimann et al.

Получение промежуточного продукта (V), используемого в контексте вышеописанного способа, осуществляется в соответствии с продемонстрированным на Фиг.2А. Пренилбромид (Aldrich Chemical Company) (IX, где L = Br) преобразовывали в эпоксидное производное при помощи mCPBA, в результате нагревания которого получали промежуточный продукт (X), в котором L = Br. В результате обработки данного продукта Ac₂O-DMAP получали сложный эфир (XII), в котором L = Br, который далее подвергали перегруппировке Кляйзена (например, в варианте Айрленд-Кляйзена) при помощи стандартных реагентов, таких как LDA и TMSCI (TMSU на Фиг.2А). Продукт перегруппировки (XIII), в котором L = Br, превращали в метиловый эфир (V) реакцией с CH₂N₂ для применения в получении NaQuinate в соответствии с вышеопределенным. Характеризация данного соединения приведена в вышеупомянутой работе Gerorkzan et al., раскрытие которой включено в настоящее описание посредством ссылки.

Альтернативный и более предпочтительный способ получения промежуточного продукта (V), используемого в контексте вышеописанного способа, продемонстрирован на Фиг.2B. Прениловый спирт (17) защищали при помощи трет-бутилметилсилилхлорида (TBDMSCl) с образованием TBDMS-эфира 18. В результате реакции 18 с мета-хлорпероксибензойной кислотой получали эпоксид 19, которые далее в ходе высокотемпературного кипячения с обратным холодильником подвергался перегруппировке с образованием спирта 20. В результате реакции 20 с триметилортоацетатом в присутствии пропионовой кислоты получали сложный эфир 21, из которого путем снятия защиты (при помощи фторида тетрабутиламмония) получали свободный спирт 22. Для последующей замены функциональной группы в соединении 22 с получением бромида 23 (также называемый в настоящем описании соединением (V)) использовали тетрабромид углерода и трифенилфосфин.

Для получения других соединений, включенных в объем настоящего изобретения, могут быть использованы эквивалентные способы.

Определение биологической активности: различные соединения формулы (I) могут быть протестированы с помощью любого из нижеследующих тестов для определения их активности в качестве антикоагулянтов: определение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ, aPPT), определение протромбинового времени (ПВ, PT) и его производных: протромбинового индекса (ПИ, PR) и международного нормализованного отношения (МНО, INR), определение фибриногена (часто по методу Клосса), определение численности тромбоцитов, исследование функции тромбоцитов (часто PFA-100), TCT и исследование времени кровотечения.

Для определения протромбинового времени чаще всего используется плазма крови. Кровь собирают в пробирку с раствором цитрата, который действует как антикоагулянт за счет связывания кальция в образце. Кровь перемешивают, а затем центрифугируют для отделения клеток крови от плазмы. Плазму анализируют при помощи автоматических анализаторов, осуществляющих отбор пробы плазмы и анализ при 37ºС. К образцу плазмы добавляется избыток кальция (тем самым нейтрализуется эффект цитрата), что возвращает способность плазмы к свертыванию. Далее к образцу добавляется тканевой фактор (также известный как фактор III) и при помощи оптических измерений определяется время до образования сгустка. Протромбиновое время определяют как время от добавления тканевого фактора (животного происхождения) до образования в плазме сгустка. Данный показатель является мерой состояния внешней системы свертывания крови, а также финального пути активации свертывания крови, общего для обеих (внешней и внутренней) систем коагуляции.

Показатель МНО был разработан для стандартизации результатов. МНО представляет собой отношение протромбинового времени данного пациента к таковому, измеренному в нормальном (контрольном) образце, возведенное в степень, равную значению МИЧ используемой аналитической системы. Каждый производитель указывает значение МИЧ (Международный Индекс Чувствительности) для любого производимого ими препарата тканевого фактора. Значение МИЧ показывает, насколько конкретная партия тканевого фактора сопоставима с международным стандартным образцом. Нормальный диапазон значений МНО для здорового человека составляет 0,9-1,3, а для людей, получающих терапию варфарином, - 2,0-3,0, хотя целевые значения МНО в определенных ситуациях могут быть выше, например, для индивидов с механическим имплантатом сердечного клапана.

Идеи всех работ, ссылки на которые включены в настоящую заявку, включая патентные заявки и выданные патенты, полностью включены в настоящее описание посредством ссылки. Любая патентная заявка, приоритет которой испрашивается настоящей заявкой, полностью включена в настоящее описание посредством ссылки в соответствии с указанным в настоящем описании в отношении публикаций и ссылок.

Во избежание неопределенности заявителями предполагается, что используемые в настоящей заявке термины «содержащий», «содержать» и «содержит» могут при необходимости во всех случаях заменяться на «состоящий из», «состоять из» и «состоит из». Термин «приблизительно» (или «около») при употреблении в контексте описания числовых значений допускает 5% отклонение, т.е. значение около 1,25% относится к диапазону значений 1,19%-1,31%.

Следует понимать, что конкретные воплощения, приведенные в настоящем описании, продемонстрированы в качестве иллюстраций и не в качестве ограничений настоящего изобретения. Ключевые отличительные признаки настоящего изобретения могут быть использованы в различных воплощениях без отступления от объема настоящего изобретения. Специалисты в данной области техники смогут привести или выявить в ходе обычного исследования множество эквивалентов конкретных процедур, приведенных в настоящем описании. Подобные эквиваленты входят в объем настоящего изобретения и включены в формулу изобретения. Все публикации и патентные заявки, приведенные в настоящем описании, являются показателями уровня компетентности специалистов в данной области техники, которым принадлежит настоящее изобретение. Все публикации и патентные заявки включены в настоящее описание посредством ссылки, в той же мере, как если бы каждая отдельная публикация или патентная заявка была особым образом индивидуально включена в настоящее описание посредством ссылки.

Использование термина «один»/«один из» в сочетании с термином «содержать» в формуле изобретения и/или в его описании может обозначать «один», однако, также включает значения «один или более», «по меньшей мере один» и «один или более одного». Термин «или» в формуле изобретения относится к значению «и/или», если однозначно не указано, что данный термин относится только к выбору из двух или более альтернатив, либо подобные альтернативы являются взаимоисключающими, хотя раскрытие допускает значения данного термина, относящиеся к выбору из двух или более альтернатив и «и/или». Во всем тексте настоящей заявки термин «приблизительно» используется для указания на то, что тот или иной показатель демонстрирует присущую ему вариабельность ошибки измерения, способа, применяемого для его определения, либо на вариабельность данного показателя в исследуемой группе индивидов.

Используемый в настоящем описании термин «или их комбинации/сочетания» включает все сочетания и комбинации пунктов, перечисленных непосредственно перед данным термином.

Все композиции и/или способы, раскрытые в настоящем описании и включенные в формулу изобретения, могут быть изготовлены/реализованы в свете настоящего изобретения без проведения излишних экспериментов. Хотя композиции и способы настоящего изобретения были описаны в терминах предпочтительных воплощений, специалистам в данной области техники будет понятно, что данные композиции и/или способы могут претерпевать значительные изменения на каждом этапе реализации описанного в настоящей заявке способа без отступления от замысла, сущности и объема изобретения. Все подобные замены и модификации, очевидные специалистам в данной области техники, являются частью замысла, сущности и объема изобретения, определенных прилагаемой формулой изобретения.

Любой индивидуальный аспект настоящего изобретения может быть скомбинирован с любым другим аспектом, за исключением тех случаев, когда иное прямо следует из контекста.

Настоящее изобретение будет далее проиллюстрировано нижеследующими примерами, не имеющими ограничительного характера:

Примеры

Пример 1: Наблюдаемая антикоагулянтная активность

Мышам вводили одно из соединений настоящего изобретения (4E)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновую кислоту (VIII) [также называемую в настоящем описании NaQuinate] в одну внутрибрюшинную инъекцию (15 мкг/мышь/день) в виде солевого раствора, содержащего 10% этанола. Контрольным мышам вводили вещество-носитель, но не активный компонент NaQuinate.

Было выявлено, что мыши, получавшие NaQuinate, демонстрировали значительно более интенсивные кровотечения, нежели мыши, не получавшие NaQuinate, что указывает на то, что NaQuinate оказывает антикоагулянтный эффект.

Пример 2: NaQuinate ингибирует витамин К-зависимую ферментативную реакцию гамма-карбоксилирования

Активность NaQuinate и родственных соединений была изучена в контексте цикла витамина K.

Цикл витамина К для витамина К ₁

1. Анализ карбоксилазной активности

Был использован метод Houben et al. (1997) [Houben, R.J. et al. (1997). «Assay of Vitamin K-Dependent Carboxylase Activity in Hepatic and Extrahepatic Tissues.» Methods in Enzymology 282: 358-368].

Все экспериментальные пробы были получены путем смешивания 25 мкл препарата бычьих микросом, 5 мкл 10% раствора 3-[(3-холамидопропил)диметиламмоний]-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты (CHAPS), 25 мкл насыщенного раствора сульфата аммония (Sigma) и 5 мкл 0,1М раствора дитиотреитола (DTT) (Sigma), 25 мкл насыщенного раствора сульфата аммония и 5 мкл 500 мкМ раствора декарбоксилированного остеокальцина (d-Oc). Поскольку соединения растворяли в 10 мкл диметилсульфоксида (DMSO), в пробы, соответствующие позитивному и негативному контролям, добавляли по 10 мкл DMSO. Для получения одинакового объема реакционной смеси во всех пробирках (125 мкл), в каждую пробу добавляли буфер D (500 мм NaCl и 25 мм Tris-HCl (рН 7,5)). Соединения KCAT-5C (XIV), KCAT-5C-Me (XIX), NaQuinate (VIII), NaQuinate-Me (VII), QCAT-Me (XVIII), DMK (XVI) и витамин K₃ (III), либо витамин K₁ (в концентрации 889 мкМ) (Konakion®, смешанные мицеллы от Hoffmann-La Roche) добавляли в соответствующие пробирки, за исключением пробирки, соответствующей отрицательному контролю. Сразу после добавления соединений реакцию инициировали добавлением в каждую пробирку 5 мкл раствора NaH¹⁴CO₃ (New England Nuclear) до достижения финальной радиоактивности 5 мкКи. Содержимое пробирок перемешивали при помощи вортекса и помещали на 30 минут в водяную баню при температуре 20ºС. После этого 100 мкл содержимого каждой пробирки переносили в пробирку, содержащую 800 мкл 5% (масс./об.) раствора трихлоруксусной кислоты (TCA) для преципитации белка и остановки реакции. Невключенный ¹⁴CO₂ удаляли при помощи кипячения на протяжении 3 минут. После охлаждения в пробы добавляли 5 мл реагента Optifluor, и степень включения ¹⁴CO₂ определяли при помощи жидкостного сцинтилляционного счетчика Wallac 1414 winspectral.

Ингибирование рекомбинантной человеческой гамма-карбоксилазы

Подготовка соединений

Тестируемые соединения восстанавливали в гидрохиноновую форму путем добавления к их растворам в DMSO 0,2М DTT до достижения конечного объемного отношения DTT:DMSO 1:3 с последующей инкубацией на водяной бане при 37ºС в течение ночи.

Анализ карбоксилазной активности

В данном эксперименте использовали препарат микросом, отличный от описанного выше. Используемый препарат состоял из микросом, полученных из клеток Trichoplusia ni High Five, ДНК которых содержит кДНК, кодирующую человеческую γ-карбоксилазу. Данные микросомы были получены из пулов, полученных в соответствии с описанным в Houben, R. J., D. Jin, et al. (1999). «Osteocalcin binds tightly to the gamma- glutamylcarboxylase at a site distinct from that of the other known vitamin K-dependent proteins.» Biochem. J. 341 (Pt 2): 265-9.

Стандартные реакционные смеси содержали 5 мкл препаратов микросом, 5 мкл 500 мкМ декарбоксилированного остеокальцина (d-OC) (за исключением пробирки, соответствующей негативному контролю), 25 мкл насыщенного раствора сульфата аммония, 5 мкл PC/CHAPS. В дополнение к этому, в силу того, что тестируемые соединения использовались в виде раствора в DMSO:0,2M DTT 1:3, в реакционную смесь добавляли раствор DMSO:0,2M DTT 1:3 (об./об.) до финального объема данного раствора 40 мкл на реакционную смесь. Для получения одинакового объема реакционной смеси во всех пробирках в каждую пробу добавляли буфер D до конечного объема реакционной смеси 125 мкл. Реакцию инициировали добавлением в каждую пробирку 10 мкл смеси гидрохиноновой формы витамина К (конечная концентрация 220 мкМ) и NaH¹⁴CO₃ (конечная радиоактивность 5 мкКи) 1:1 (об./об.) с последующим добавлением тестируемых соединений в различных концентрациях.

Результаты

Активация гамма-карбоксилазы бычьей печени

Ни одно из протестированных соединений не повышало включение ¹⁴CO₂ в остеокальцин в большей степени, нежели негативный контроль. Таким образом, можно заключить, что ни одно из этих соединений не обладает активностью кофактора γ-карбоксилазы.

Ингибирование рекомбинантной человеческой гамма-карбоксилазы

Было показано, что все протестированные соединения ингибируют γ-карбоксилазу в присутствии восстановленной формы витамина К₁. Ниже приведены кривые зависимости ответ-концентрация. Результаты выражены как зависимость включения ¹⁴CO₂ от концентрации тестируемого компонента.

Результаты кратко изложены в следующем виде:

Приведена ингибиторная активность тестируемых компонентов, при этом тестируемые компоненты ранжированы в соответствии с ингибиторной активностью

Соединение	IC50 в присутствии 220 мкМ витамина K1 (мкМ)
DMK (XVI)	82,5
NaQuinate (VIII)	152
KCAT-5C (XIV)	340
NaQuinate-Me (VII)	358
Витамин K3 (III)	460
KCAT-5C-Me (XIX)	514
QCAT-Me (XVIII)	534

2,3-диметокси-1,4-нафтохинон DMK (XVI)

Витамин K₃ = менадион (III)

Не ограничиваясь теорией, заявители полагают, что антикоагулянтный эффект, продемонстрированный в Примере 1, опосредован ингибированием (например, ингибированием посредством NaQuniate) ферментативной активности карбоксилазы в энзиматическом цикле витамина К.

Настоящее изобретение относится ко всем специфическим соединениям, приведенным в Примерах, предназначенным для применения в соответствии с раскрытым в настоящем описании.

1. Применение соединения формулы (I):

в которой
R¹ представляет собой алкильную группу, включающую алкильные группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 9 атомов углерода;
R² представляет собой водород;
n равняется 0, 1, 2, 3 или 4;
R³ представлен следующей формулой (II):

в которой свободная связь представляет собой место прикрепления структурного фрагмента формулы (II) к оставшейся части соединения формулы (I):
R^a представляет собой водород или алкильную группу с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 9 атомов углерода;
R^c, R^d и R^e независимо выбираются из группы, содержащей водород и C_1-6-алкил (который может представлять собой линейную или разветвленную алкильную группу);
q равняется 1, 2, 3 или 4;
r и s независимо выбираются из группы, содержащей 0, 1, 2, 3 или 4;
представляет собой одинарную или двойную связь, когда она является двойной связью, радикал R^e в вышеприведенной структуре по формуле (II) отсутствует;
или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтически приемлемого N-ацильного производного и основания Манниха в качестве антикоагулянта.

2. Применение соединения по п. 1, в котором R¹ представляет собой метил.

3. Применение соединения по п. 1, в котором n равняется 0.

4. Применение соединения по п. 1, в котором n равняется 4.

5. Применение соединения по п. 1, в котором R³ представляет собой неразветвленный или разветвленный C_1-9-алкил или C_2-9-алкенил, замещенные -CO₂R^a.

6. Применение соединения по п. 5, в котором R^a представляет собой водород или неразветвленную алкильную группу или метил.

7. Применение соединения по п. 1, в котором структурный фрагмент формулы (II) выбирают из группы, содержащей
-(CH₂)₇CO₂H;
-CH₂CH=C(CH₃) (CH₂)₂CO₂H и
-CH₂CH=C(CH₃) CO₂H.

8. Применение соединения по п. 1, где соединение формулы (I) выбирают из следующих:
(iii) KCAT-5C-Me (XIX);
(iv) NaQuinate-Me (VII); более предпочтительно
(v) (4E)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновая кислота (VIII);
(vi) (2E)-4-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-2-метилбут-2-еновая кислота (XIV), и
(vii) 8-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)октановая кислота (XV).

9. Применение соединения по п. 8, где соединение формулы (I) выбирают из следующих:
(a) (4E)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновая кислота (VIII);
(b) (2E)-4-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-2-метилбут-2-еновая кислота (XIV) и
(c) 8-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)октановая кислота (XV).

10. Применение соединения по п. 9, где соединение формулы (I) представляет собой (4E)-6-(1,4-дигидро-2-метил-1,4-диоксонафталин-3-ил)-4-метилгекс-4-еновую кислоту (VIII).

11. Применение соединения формулы (I) по п. 1 для предотвращения тромбообразования или вызываемых им заболеваний у пациента, которому предстоит хирургическое вмешательство.

12. Применение соединения формулы (I) по любому одному из пп. 1-10 в способе менеджмента способности свертывания крови у пациента, включающего введение пациенту, нуждающемуся в подобном лечении, терапевтически эффективной дозы вышеуказанного соединения для достижения антикоагулянтного эффекта, с последующим введением коагулянта для модуляции или нейтрализации антикоагулянтного эффекта.

13. Фармацевтическая композиция, пригодная в качестве антикоагулянта, содержащая соединение формулы (I) по любому одному из пп. 1-10 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

14. Фармацевтическая композиция по п. 13 для предотвращения тромбообразования или вызываемых им заболеваний у пациента, которому предстоит хирургическое вмешательство.

15. Фармацевтическая композиция в качестве антикоагулянта, включающая эффективную дозу соединения формулы (I) по любому одному из пп. 1-10 и другого терапевтического агента в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем.