Средство с липосомами, содержащими янтарную кислоту и экстракт прополиса, обладающее дезинтоксикационной и антиоксидантной активностью

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармации, и касается разработки средства в форме медицинских капсул с липосомами, которые могут быть использованы в комплексном лечении заболеваний, связанных с отравлением солями тяжелых металлов, в роли антидота при интоксикациях мышьяком, свинцом, ртутью и т.д. Капсулы для перорального введения содержат липосомы, полученные при смешивании яичного лецитина и холестерина. Липосомы содержат в качестве действующих веществ янтарную кислоту и 10% спиртовой экстракт прополиса, в качестве вспомогательных веществ сахарозу и воду очищенную при следующем соотношении компонентов, г на 1 капсулу: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,2% водный раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 - 0,3. Предлагаемое средство обладает дезинтоксикационным и антиоксидантным, а также противоотечным, спазмолитическим, противовоспалительным, регенерирующим и антибактериальным действием, равномерным высвобождением действующих веществ и выраженным пролонгированным действием, удобно для применения больными самостоятельно. 2 з.п. ф-лы, 5 табл., 6 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к фармации, и касается разработки средства в форме медицинских капсул с липосомами, содержащими янтарную кислоту и экстракт прополиса, и может быть использовано в комплексном лечении заболеваний, связанных с отравлением солями тяжелых металлов, в роли антидота при интоксикациях мышьяком, свинцом, ртутью и т.д.

Известен препарат биологически активная добавка к пище (БАД) янтарной кислоты в виде капсул 100 мг «Эликсир янтарный» и «Эликсир янтарный плюс», содержащий янтарную кислоту 100 мг и экстракт корня солодки 100 мг, капсулы. Эликсир янтарный G плюс. Янтарная кислота + экстракт корня солодки + женьшеня биомасса сухая. Капсулы (100 мг + 100 мг + 50 мг) [Янтарная кислота, эликсир янтарный [Электронный ресурс] Режим доступа: http://bestonline-medicine.ru/news/jantarnaja_kislota_succinic_acid_ehliksir_jantarnyj_elixir_am berous/2012-03-18-7. Дата обращения: 15.11.2013 г.].

Известно средство в виде раствора для инъекций - Тетацин-кальций (Tetacinum-calcium), комплексообразующее соединение. Раствор 10% в ампулах по 20 мл и по 10 мл, в упаковке 10 штук. Применяется для лечения отравления тяжелыми металлами и редкоземельными элементами (свинец, кадмий, кобальт, ртуть, уран, иттрий, цезий и др.) и их солями. Синонимы: Натрия кальция эдетат, Натрий кальций эдетат, Кальций динатриевый, Хелатон, Эдатакал, Эдатамил кальций динатрий, ЭДТА, Мозатил, Тетрацемин, Верзенат кальций динатриевый [Инструкция к лекарственному средству «Тетацин-кальций» [Электронный ресурс] Режим доступа: http://medprep.info/drug/medicament/2266. Дата обращения: 15.11.2013 г.].

Известно применение леспефлана перрорально по 1-3 ст. ложки 2-4 раза в день в качестве средства для лечения отравлений ртутью [патент RU 1807595, 1996 г.].

Известна фармацевтическая композиция, оказывающая антитоксическое, радиопротекторное и антигипоксическое действие, которая содержит фармацевтически приемлемый носитель и в качестве действующего вещества - эффективное количество смеси L-глутаминовой кислоты, глицина и серосодержащей аминокислоты, выбранной из группы, включающей цистеин, цистин и метионин, при массовом соотношении компонентов 1:1:1. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в виде порошка, таблетки или раствора, при этом она содержит каждый из указанных компонентов в количестве от 0,1 до 0,2 г на единичную дозу. Фармацевтически приемлемый носитель представляет собой воду или метилцеллюлозу [патент RU 2096034, 1997 г.].

Известно применение 2,4-дифенил-7,8-бензо-5,6-дигидроселенохромена в качестве средства для лечения и профилактики отравлений соединениями тяжелых металлов [патент RU 2325155, 2008 г.].

Известна композиция, содержащая в качестве действующих компонентов бетулин, янтарную, аскорбиновую и глутаминовую (или глутамат натрия) кислоты и пищевые добавки. Данная композиция используется для снижения степени алкогольного опьянения, предупреждения и снятия алкогольной интоксикаций и похмельного синдрома [патент RU 2436415, 2011 г.].

Известно, что показаниями для применения препаратов янтарной кислоты являются отравления тяжелыми металлами (ртутью, свинцом, мышьяком) [Лечение янтарной кислотой [Электронный ресурс] Режим доступа: http://www.astromeridian.ru/medicina/jantarnaja_kislota.html. Дата обращения: 15.11.2013 г.]

Наиболее близким аналогом изобретения является препарат Янтарь-антитокс, содержащий в качестве действующего вещества янтарную кислоту в количестве 200 мг, а в качестве вспомогательных веществ целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат. Янтарь-антитокс оказывает положительный эффект на внутриклеточные аэробные процессы, нормализует кислотно-щелочное состояние и газовый состав крови при тканевом ацидозе, препятствует активации перекисного окисления липидов, уменьшает продукцию свободных радикалов, способствует утилизации жирных кислот и глюкозы. Янтарь-антитокс восстанавливает энергетический потенциал клетки при интоксикациях. Под действием препарата активируются ферментативные процессы цикла Кребса, происходит увеличение синтеза АТФ за счет активации быстрого метаболического кластера митохондрий. Нормализуя энергетический метаболизм, препарат повышает процессы детоксикации и элиминации различных токсических веществ, оказывает антигипоксическое, антиоксидантное, цитопротекторное действие [ЯНТАРЬ-АНТИТОКС (AMBER-ANTITOX) [Электронный ресурс] Режим доступа: http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/amber-antitox_36507.html. Дата обращения: 15.11.2013 г.].

Задачей изобретения является расширение арсенала средств для комплексного лечения заболеваний, связанных с отравлением солями тяжелых металлов, в роли антидота при интоксикациях.

Технический результат - получение нового лекарственного средства перорального применения в форме твердых желатиновых капсул с липосомами, обладающего дезинтоксикационной и антиоксидантной активностью, обеспечивающего максимальное поступление действующих веществ из желудочно-кишечного тракта в кровоток.

Указанный технический результат достигается тем, что средство, обладающее дезинтоксикационной и антиоксидантной активностью, содержащее янтарную кислоту в качестве действующего вещества и вспомогательные вещества, согласно изобретению включено в липосомы, полученные при смешивании яичного лецитина и холестерина, заключенные в капсулы для перорального введения, при этом липосомы содержат дополнительно в качестве действующего вещества 10% спиртовой экстракт прополиса, а в качестве вспомогательных веществ суспензию фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2, сахарозу и воду очищенную при следующем соотношении компонентов липосомы, г на 1 капсулу:

кислота янтарная	0,1
экстракт прополиса спиртовой 10%	0,2
раствор сахарозы водный 0,2%	0,02
суспензия фосфатидилхолина и холестерина 1:0,2	0,3

При этом в качестве растворителя для получения 10% спиртового экстракта прополиса используют спирт этиловый 70%; используют капсулы номер 0, имеющие диаметр 7,65 мм, длину 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, полученные при следующем соотношении компонентов, г на 1 капсулу:

желатин	0,0423
глицерин	0,0184
титана двуокись	0,00025
вода очищенная	0,0351

Методика получения липосом с кислотой янтарной и экстрактом прополиса 10% спиртовым

5 г яичного лецитина (Лецитин яичный по ТУ 6-09-0001-87 Д) и 1 г холестерина растворяют в диэтиловом эфире при постоянном перемешивании на шейкере в течение 10 минут, эфир выпаривают, полученную фосфолипидную пленку гидратируют 10 мл раствора сахарозы с янтарной кислотой (1,0 г янтарной + 0,2 г сахарозы). Полученный раствор взбалтывают в течение 1 часа на шейкере (шейкер лабораторный S-3.02L, тип движения - орбитальное вращение, скорость 300 об/мин), затем добавляют 2 мл экстракта прополиса и продолжают перемешивание в течение 2 часов.

Полученные липосомы заключают в капсулы для перорального введения, например, номер 0, имеющие диаметр 7,65 мм, длину 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, полученные при следующем соотношении компонентов, г на 1 капсулу:

желатин	0,0423
глицерин	0,0184
титана двуокись	0,00025
вода очищенная	0,0351

Изобретение иллюстрируется следующими материалами: в таблице 1 - определение биофармацевтической доступности капсул, содержащих кислоту янтарную, и капсул, содержащих липосомальную форму кислоты янтарной; в таблице 2 - определение степени включения кислоты янтарной в зависимости от содержания в растворе сахарозы по примерам 1-5; в таблице 3 показаны результаты динамики включения янтарной кислоты в состав липосомальной формы в зависимости от соотношения фосфатидилхолин:холестерин; в таблице 4 показаны результаты по определению концентрации малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты; в таблице 5 показано влияние кислоты янтарной на активность каталазы в опытах in vitro.

При определении биофармацевтической доступности капсул, содержащих кислоту янтарную, и липосомальную форму кислоты янтарной (таблица 1), приведены объекты исследования: 1) капсулы, заполненные кислотой янтарной в количестве 0,1 г; 2) капсулы, заполненные липосомальной формой кислоты, эквивалентной 0,1 г кислоты янтарной. Из капсул высвобождение происходит в среде, близкой к щелочной. Из представленных данных следует, что липосомальная форма замедляет процесс высвобождения, что подтверждает эффект пролонгации. При этом лекарственная форма в форме липосом отличается большей стабильностью по сравнению с обычной лекарственной формой. При исследовании полученных растворов (фосфатный буфер) через 24 часа установлено, что кислота янтарная практически полностью инактивировалась в случае капсул, наполненных субстанцией кислоты янтарной, а растворы, которые содержали липосомальную форму, имели практически ту же оптическую плотность, процесс инактивации янтарной кислоты в липосомальной форме не отмечен. Спектр поглощения кислоты янтарной в фосфатном буферном растворе характеризуется максимумом светопоглощения при 230 нм. В этой области компоненты пустых липосом не имеют светопоглощения. Было установлено, что раствор капсул, содержащих кислоту янтарную в форме субстанции, и капсул, содержащих кислоту янтарную в форме липосом, характеризуется одинаковым спектром поглощения с максимумом при 230 нм. Однако в течение времени величина оптической плотности раствора, содержащего капсулы с субстанцией кислоты янтарной значительно уменьшается, а раствор, содержащий липосомальную форму кислоты, имеет те же спектральные характеристики. Таким образом, капсулы с липосомальной формой янтарной кислоты оставались стабильными, с высоким эффектом пролонгации.

Определение степени включения кислоты янтарной

10 мл липосом (точная навеска) центрифугировали до полного осаждения липосом, надосадочную жидкость помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 10 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида, растворяли не включившуюся кислоту янтарную. Объем раствора доводили до метки 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида, хорошо перемешивали. Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре СФ - 56 в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Определение проводили в зависимости от прибавленного раствора сахарозы (таблица 2).

Определение качественного состава

Методика. Растворяли 1 часть неразведенной фосфолипидной смеси в 10 частях подвижной фазы (хлороформ:метанол (2:1)).

1 часть липосом растворяли в 10 частях подвижной фазы.

1 часть РСО кислоты янтарной растворяли в 10 частях подвижной фазы. По 2 мкл полученного липидного раствора и растворов свидетелей наносили в виде пятен диаметром около 3 мм на линию старта хроматографической пластинки "Silufol" или "Сорбтон" размером 10×15 см. Пластинку высушивали в сушильном шкафу при температуре 40-45°С в течение 5 минут, помещали в хроматографическую камеру с системой растворителей хлороформ-метанол-вода (65:24:4), предварительно насыщенную в течение 30 минут, и хроматографировали восходящим способом. Когда фронт растворителей проходил не менее 10 см, пластинку вынимали из камеры, сушили на воздухе. Идентификацию проводили проявлением в парах йода. На хроматограмме обнаруживались различные пятна ФЛ с определенными значениями Rf и Rs-. В качестве свидетелей использовали тест-набор стандартов ФЛ («Sigma», USA) следующего состава: фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, сфингомиелин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозит. На хроматограмме должны проявляться 7 пятен со следующими значениями Rf: 0,15±0,01 (фосфатидилсерин); 0,18±0, (сфингомиелин); 0,24±0,01 (фосфатидилинозит); 0,33+0,01 (фосфатидилхолин); 0,60+0,01 (фосфатидилэтаноламин); 0,74±0,01 (цереброзиды); 0,90±0,02 (холестерин) и не более 3 неидентифицированных пятен с Rf 0,29+0,01; 0,49±0,02; 0,52+0,01, а также одно пятно, которое по совокупности величины Rf и интенсивности окраски совпадает с пятном РСО кислоты янтарной. И одно пятно, соответствующее РСО рутина.

При этом в качестве растворителя для получения 10% спиртового экстракта прополиса используют спирт этиловый 70%.

В процессе получения липосомальной формы установлена динамика увеличения эффективности включения кислоты янтарной и соотношение фосфатидилхолин (ФХ):холестерин (таблица 3). Холестерин приводит к увеличению жесткости мембраны липосом, уменьшает текучесть липидного бислоя, а также увеличивает его упругость и механическую прочность. Таким образом, присутствие холестерина способствует повышению стабильности структуры везикул [Козеев С.Г. Разработка липосомальной лекарственной формы противоопухолевого препарата араноза. - Автореферат дисс…канд. фарм. наук, Москва, 2013, 25 с.]. ФХ и холестерин в экспериментальных исследованиях вводили в различных соотношениях (количество сахарозы оставляли прежнее 0,2 г на 100 г), но именно при соотношении 1:0,2 установлен наибольший процент включения кислоты янтарной в липосомальную форму (таблица 3). Увеличение содержания холестерина не целесообразно, так как и эффективность включения уменьшается, и высвобождение кислоты янтарной снижается.

В процессе хранения липосомальной формы, и препаратов полученных на их основе, наблюдается окисление липидов с образованием малонового диальдегида и гидроперекисей липидов, а так же увеличивается содержание непредельных группировок в липидах. Подобные изменения напрямую отражаются на стабильности липосомальной мембраны и могут приводить к снижению времени сохранения целостности мембраны и разрушению липосомального препарата. Введение в препарат стабилизирующих добавок может как ингибировать процесс окисления, так и ускорять его. Полученные образцы инкубировались при температуре 37°C. На 1, 2, 6, 10 сутки производился забор образцов в объеме 1 мл, которые до экспериментов хранились в морозильной камере при -20°C. В образцах определяли следующие параметры: содержание тиобарбитуровой кислоты (ТБК-активных продуктов), содержание непредельных соединений, изменение pH внелипосомальной среды (таблица 4).

Определение ТБК-активных продуктов

ТБК позволяет определить концентрацию малонового альдегида [Патент RU №2112241. Способ определения концентрации малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты]. К 50 мкл суспензии липосом добавляли 450 мкл раствора тиобарбитуровой кислоты (2,5 мг/мл) в 2% ортофосфорной кислоте. Полученный раствор инкубировался при 100°C в течение 1 часа и затем после добавления 500 мкл 96% этилового спирта регистрировался спектр в диапазоне 450-650 нм. Оптическая плотность при 460, 500 и 532 нм, которые характерны для максимумов поглощения соответствующих ТБК-КС (карбонильных соединений).

Содержание рассчитывали по формуле

С=0,81+106(А535-А580)

Содержание малонового альдегида определяли в фосфолипиде, в липосомах с кислотой янтарной и липосомах с кислотой янтарной и экстрактом прополиса (таблица 4).

Для определения пероксида водорода в нейтрофилах в качестве объекта исследования использовали кровь доноров мужского пола в возрасте 20-25 лет. Количество НФ в клеточной суспензии подсчитывали в камере Горяева с использованием прижизненной окраски раствором метиленового синего в кислоте уксусной 3%. Необходимую концентрацию 5*106 НФ/мл клеточной суспензии достигали разведением. Определение пероксида водорода в НФ проводили спектрофотометрически (метод Pick А. и Keisari Y.) с использованием раствора фенолового красного 0,2%. Метод основан на способности пероксида водорода образовывать неидентифицированный продукт (таблица 5). Для этого к 1,64 мл фосфатного буферного прибавляли 30 мкл раствора фенолового красного и 600 мкл суспензии нейтрофилов. В опытный образец вносили растворы испытуемых образцов, исходя из разовой потребности в кислоте янтарной. Для этого приготовили капсулы, содержащие суспензии липосом, и капсулы, содержащие кислоту янтарную в такой же концентрации. Готовили растворы исследуемых образцов в фосфатном буферном растворе с pH 6,8. В раствор сравнения вместо испытуемого лекарственного средства добавляли воду очищенную. Пробирки инкубировали при 37°C в течение 60 минут, а затем реакцию останавливали введением в реакционную смесь 20 мкл 1 М раствора натрия гидроксида. Интенсивность светопоглощения определяли на спектрофотометре СФ - 56 в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Измерение проводили против контрольной пробы, в которой реакция была остановлена сразу после добавления красителя. Определение активности каталазы в НФ проводили по реакции с аммония молибдатом. Для этого в опытную пробирку отмеряли 2 мл свежеприготовленного 0,03% раствора перекиси водорода, 100 мкл выделенной суспензии нейтрофилов и растворы испытуемых образцов. В пробирку сравнения вместо раствора лекарственного средства прибавляли в том же объеме воду очищенную. В контрольный раствор отмеряли 2,1 мл воды очищенной и 100 мкл суспензии нейтрофилов. В качестве плацебо пробы использовали раствор, состоящий из 2 мл 0,03% раствора пероксида водорода и 0,2 мл воды очищенной. Подготовленные таким образом растворы инкубировали при 37°C в течение 10 минут, а затем в каждую пробирку добавляли по 1 мл 4% раствора аммония молибдата. Интенсивность окраски измеряли при 410 нм против контрольной пробы. Присутствие перекиси ингибирует выделение свободных форм кислорода и приводит к гибели клеток, так как, возможно, наступает разрушение антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутаза и др.), ответственных за выделение перекиси клетками нейтрофилов. Определение активности каталазы проводили при введении раствора кислоты янтарной субстанции в форме капсул и липосомальной лекарственной формы с кислотой янтарной проводилось в несколько этапов. Для этого проведен эксперимент с растворами в фосфатном буфере сразу, через 1, 2, 6 часов после приготовления. Установлено, что растворы субстанции кислоты янтарной в течение времени теряют свою активность, и активность каталазы уменьшается. Более стабильными являются капсулированные формы кислоты янтарной. Аналогичные результаты были получены при исследовании концентрации пероксида водорода. Показатель оптической плотности в интактных нейтрофилах был выше данного показателя в образцах, содержащих кислоту янтарную. При этом в течение времени также происходит изменение активности раствора.

Янтарная кислота (ГОСТ 6341-75) является регулятором энергетического обмена, предназначенным для профилактики нарушений энергетического баланса в организме, а также для восстановления угасающих с возрастом функций. Препарат обладает антиоксидантным, цитопротекторным, антитоксическим действием. Нормализуя энергетический метаболизм, янтарная кислота способствует повышению антитоксической функции печени, ускоряет выведение ксенобиотиков. Препарат также способствует утилизации молочной кислоты, этанола, глюкозы; нормализует кислотно-щелочной баланс; обладает иммуномодулирующим действием. Хорошо переносится, нетоксична, не имеет побочных эффектов, не является стимулятором и может сочетаться с различными лекарственными препаратами, повышая их эффективность, уменьшая при этом их отрицательное токсическое действие на организм.

Прополис ТУ ГОСТ 28886-90. Введение в состав капсул с липосомами экстракта прополиса спиртового в сочетании с янтарной кислотой повышает антимикробную активность, регенерацию тканей, способствует проявлению обезболивающего, гемостатического, иммуномодулирующего, репаративного эффекта лекарственной формы.

В доступной научно-медицинской и патентной литературе сведений об известности капсул с липосомами, содержащими в качестве действующих веществ янтарную кислоту и спиртовой экстракт прополиса, а в качестве вспомогательных веществ липосомальной основы суспензию фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 и водный раствор сахарозы при определенном соотношении компонентов, не обнаружено. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «новизна».

В результате проведенных экспериментальных исследований было установлено, что предлагаемые капсулы с липосомами обладают высокой биодоступностью и целым рядом преимуществ: они имеют удовлетворительный внешний вид, однородны. Состав капсул, содержащих липосомы, способствует быстрому и далее пролонгированному высвобождению действующих веществ: янтарной кислоты и экстракта прополиса. Придание лекарственному средству формы капсул с липосомами обеспечивает удобство и гигиеничность применения, стойкость при хранении. За счет введения в состав лекарственного средства янтарной кислоты в сочетании с экстрактом прополиса, капсулы с липосомами обладают широким спектром биологической и лечебной активности: оказывают дезинтоксикационное и антиоксидантное действие в сочетании с противоотечным, спазмолитическим, противовоспалительным регенерирующим и антибактериальным действием. Кроме этого капсулы с липосомами обладают равномерным высвобождением действующих веществ и выраженным пролонгированным действием, удобны для перорального применения больными самостоятельно. Помимо проявления известных свойств, каждый компонент заявляемого состава, в совокупности усиливает свое воздействие, что объясняется, очевидно, эффектом их синергизма. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Пример 1. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Состав липосомальной лекарственной формы в одной капсуле, г: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,2% водный раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 - 0,3.

Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Методика получения липосом с кислотой янтарной и экстрактом прополиса 10% спиртовым: 5 г яичного лецитина (Лецитин яичный по ТУ 6-09-0001-87 Д) и 1 г холестерина растворяли в диэтиловом эфире при постоянном перемешивании на шейкере в течение 10 минут, эфир выпаривали, полученную фосфолипидную пленку гидратировали 10 мл водного раствора сахарозы с янтарной кислотой (1 г янтарной + 0,2 г сахарозы). Полученный раствор взбалтывали в течение 1 часа на шейкере (шейкер лабораторный S-3.02L, тип движения - орбитальное вращение, скорость 300 об/мин), затем добавляли экстракт прополиса и продолжали перемешивание в течение 2 часов.

Подготовленные капсулы для перорального введения наполняют липосомальной массой, вместимость - 0,62 г, после чего качество капсул с липосомами оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы с липосомами правильной формы, твердые и однородные. Проводят определение биофармацевтической доступности капсул, содержащих кислоту янтарную и липосомальную форму кислоты янтарной (таблица 1); проводят определение степени включения кислоты янтарной (таблица 2), по результатам 69,7% степени включения кислоты янтарной оптимальное введение сахарозы в раствор составляет 0,2%; в таблице 3 показаны результаты динамики включения янтарной кислоты в состав липосомальной формы и соотношение фосфатидилхолин (ФХ):холестерин; в таблице 4 показаны результаты по определению концентрации малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты; в таблице 5 показано влияние кислоты янтарной на активность каталазы в опытах in vitro.

Пример 2. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Состав липосомальной лекарственной формы в одной капсуле, г: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,1% водный раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 - 0,3. Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Изготавливают капсулы с липосомами аналогичным образом.

Качество капсул с липосомами оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы с липосомами правильной формы, твердые и однородные. Степень включения кислоты янтарной составляет 49,6% (таблица 2).

Пример 3. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Состав липосомальной лекарственной формы в одной капсуле, г: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,3% водный раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 - 0,3.

Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Изготавливают капсулы с липосомами аналогичным образом.

Качество капсул с липосомами оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы с липосомами правильной формы, твердые и однородные. Степень включения кислоты янтарной составляет 63,1% (таблица 2).

Пример 4. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Состав липосомальной лекарственной формы в одной капсуле, г: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,4% раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфолипида и фосфатидилхолина в соотношении 1:0,2 - 0,3. Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Изготавливают капсулы с липосомами аналогичным образом.

Качество капсул с липосомами оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы с липосомами правильной формы, твердые и однородные. Степень включения кислоты янтарной составляет 62,1% (таблица 2).

Пример 5. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Состав липосомальной лекарственной формы в одной капсуле, г: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; 0,5% водный раствор сахарозы - 0,02, суспензия фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2 - 0,3.

Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Изготавливают капсулы с липосомами аналогичным образом.

Качество капсул с липосомами оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы с липосомами правильной формы, твердые и однородные. Степень включения кислоты янтарной составляет 64,1% (таблица 2).

Пример 6. Капсула белого цвета (номер 0, диаметр 7,65 мм, длина 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, масса 0,096 г) получена при следующем соотношении компонентов, г: желатина - 0,0423; глицерина - 0,0184; титана двуокиси - 0,00025; воды очищенной - 0,0351. Капсула содержит наполнитель, г на 1 капсулу: кислота янтарная - 0,1; экстракт прополиса спиртовой 10% - 0,2; вода очищенная - 0,32.

Общая масса 1 капсулы - 0,716 г.

Методика получения наполнителя капсул, содержащего кислоту янтарную и экстракт прополиса 10% спиртовой:

Кислоту янтарную, воду очищенную взбалтывали в течение 1 часа на шейкере (шейкер лабораторный S-3.02L, тип движения - орбитальное вращение, скорость 300 об/мин), затем добавляли экстракт прополиса и продолжали перемешивание в течение 2 часов.

Подготовленные капсулы наполняют наполнителем массой 0,62 г, после чего качество капсул оценивают по внешнему виду, однородности, растворимости. Полученные капсулы правильной формы, твердые и однородные. Проводят определение биофармацевтической доступности капсул, содержащих кислоту янтарную, в сравнении с капсулами с липосомальной формой кислоты янтарной, приготовленными по примеру 1 (таблица 1).

Из приведенных примеров видно, что оптимальным с точки зрения высокого высвобождения действующих веществ и одновременно эффекта пролонгации, а также удобства применения является состав, описанный в примере 1.

Получение предлагаемых капсул с липосомами легко осуществимо, и при их использовании достигается указанный технический результат. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «промышленная применимость».

Клинические испытания показали, что количество высвободившихся препаратов при данном соотношении компонентов в одной капсуле с липосомами одинаково у исследуемых больных. Это дает возможность врачу в практической медицине, в зависимости от формы и тяжести заболевания, рекомендовать больным необходимое количество капсул с липосомами для самостоятельного лечения, при пероральном приеме, что делает заявляемые капсулы с липосомами перспективной лекарственной формой в комплексном лечении заболеваний, связанных с отравлением солями тяжелых металлов, в роли антидота при интоксикациях.

СРЕДСТВО С ЛИПОСОМАМИ, СОДЕРЖАЩИМИ ЯНТАРНУЮ КИСЛОТУ И ЭКСТРАКТ ПРОПОЛИСА, ОБЛАДАЮЩЕЕ ДЕЗИНТОКСИКАЦИОННОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

СРЕДСТВО С ЛИПОСОМАМИ, СОДЕРЖАЩИМИ ЯНТАРНУЮ КИСЛОТУ И ЭКСТРАКТ ПРОПОЛИСА, ОБЛАДАЮЩЕЕ ДЕЗИНТОКСИКАЦИОННОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Таблица 3
Динамика включения янтарной кислоты в состав липосомальной формы и соотношение фосфатидилхолин (ФХ):холестерин
Соотношение (ФХ):холестерин	включение кислоты янтарной, %
1:0,1	73,1
1:0,2	78,4
1:0,3	77,5
1:0,4	76,9

СРЕДСТВО С ЛИПОСОМАМИ, СОДЕРЖАЩИМИ ЯНТАРНУЮ КИСЛОТУ И ЭКСТРАКТ ПРОПОЛИСА, ОБЛАДАЮЩЕЕ ДЕЗИНТОКСИКАЦИОННОЙ И АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

1. Средство, обладающее дезинтоксикационной и антиоксидантной активностью, содержащее янтарную кислоту в качестве действующего вещества и вспомогательные вещества, отличающееся тем, что включено в липосомы, полученные при смешивании яичного лецитина и холестерина, заключенные в капсулы для перорального введения, при этом липосомы содержат дополнительно в качестве действующего вещества 10% спиртовой экстракт прополиса, а в качестве вспомогательных веществ суспензию фосфатидилхолина и холестерина в соотношении 1:0,2, сахарозу и воду очищенную при следующем соотношении компонентов липосомы, г на 1 капсулу:

кислота янтарная	0,1
экстракт прополиса спиртовой 10%	0,2
раствор сахарозы водный 0,2%	0,02
суспензия фосфатидилхолина и холестерина 1:0,2	0,3

2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что в качестве растворителя для получения 10% спиртового экстракта прополиса используют спирт этиловый 70%.

3. Средство по любому из пп. 1 и 2, отличающееся тем, что используют капсулы номер 0, имеющие диаметр 7,65 мм, длину 21,7 мм, объем наполнения 0,68 мл, полученные при следующем соотношении компонентов, г на 1 капсулу:

желатин	0,0423
глицерин	0,0184
титана двуокись	0,00025
вода очищенная	0,0351