Композиции, содержащие экстракты andrographis paniculata и ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами
Изобретение относится к композиции для лечения нейродегенеративных заболеваний. Указанная композиция включает экстракт Andrographis paniculata, содержащий 35% андрографолидов, и экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами, где экстракт Ginkgo biloba содержит от 20% до 30% флавонолгликозидов Гинкго и от 2% до 10% смеси из дитерпенов/сесквитерпенов, а фосфолипиды включают от 5% до 50% фосфатидилсерина. Изобретение обеспечивает уменьшение неоваскулярных дегенеративных изменений, типичных для болезни Альцгеймера и рассеянного склероза, а также восстановление когнитивной функции. 5 з.п. ф-лы, 2 табл., 5 пр.
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим экстракты Andrographis paniculata в сочетании с экстрактами Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами, являющимися пригодными для лечения нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера и рассеянного склероза.
Предшествующий уровень техники
Такие заболевания, как болезнь Альцгеймера и рассеянный склероз, являются нарушениями с мультифакториальной этиологией. В частности, среди причин возникновения обоих заболеваний можно выделить аутоиммунные нарушения и патологии, связанные с воспалением сосудов, приводящих к дегенеративным изменениям участков головного мозга.
Указанные дегенеративные процессы могут приводить к потере памяти и утрате периферических функций.
Во всем мире, особенно в индустриальных странах, распространенность данных нарушений стремительно увеличивается вследствие увеличения средней продолжительности жизни.
Болезнь Альцгеймера является наиболее распространенной причиной деменции в индустриальных странах. Она поражает примерно 10% популяции старше 70 лет, приводя к заметной потере памяти. Это значит, что в Западном мире поражено 8-10 миллионов индивидов.
Клинически на начальных стадиях болезнь Альцгеймера проявляется потерей памяти, которая с течением времени усугубляется до тех пор, пока не развивается выраженная старческая деменция с утратой когнитивных и часто функциональных способностей.
С патологической точки зрения в головном мозге наблюдается диффузная атрофия коры головного мозга с гипертрофией борозды и желудочков и образованием внеклеточных бляшек, содержащих β-амилоид (Ab). Кроме того, накопление этого белка в артериальных стенках сосудов головного мозга приводит к их окклюзии, приводящей к атрофии пораженных участков.
Предпосылками возникновения дегенеративных заболеваний, связанных с некоторыми недавно выявленными генами, является диффузное воспаление сосудов, которое катализирует описанные выше процессы изменения.
Что касается доступных в настоящий момент лекарственных средств, используемые продукты включают соединения с антиацетилхолинэстеразной активностью, такие как такрин, донепезил, производные физостигмина и галантамин. Однако, хотя первоначальный эффект этих продуктов является благоприятным, сохраняются сомнения об их эффективности в течение длительного времени.
Альтернативной рекомендацией является применение эстрогенов, которые, вероятно, обладают способностью модифицировать прогрессирование заболевания у женщин, и применение нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, но в обоих случаях данные об их эффективности являются противоречивыми.
Дальнейшие попытки с селективными вакцинами не принесли удовлетворительных результатов.
Кроме того, при повышении дозы указанные выше продукты являются высокотоксичными.
Недавние попытки клинического лечения болезни Альцгеймера с помощью продуктов природного происхождения, таких как продукты, содержащие Ginkgo biloba, продемонстрировавших обнадеживающие результаты в предварительных исследованиях, в дальнейшем признаны неэффективными, возможно, вследствие введения в неподходящих дозировках и/или плохой абсорбции активных ингредиентов.
Среди активных ингредиентов, присутствующих в Ginkgo biloba, в качестве соединений, потенциально пригодных для применения при лечении нейродегенеративных заболеваний, обнаружены дитерпены и сескивитерпены, такие как билобалид и гинкголид, но ни один из них не достиг клинической фазы испытания для терапевтического применения.
Сами по себе экстракты Ginkgo biloba обеспечивают положительное влияние в отношении дисфункций головного мозга, связанных с болезнью Альцгеймера и старческой деменцией, и значимый вклад в отношении активности экстрактов принадлежит билобалиду (Sasaki et al. Life science, 67, 709-15, 2000); применение экстрактов Ginkgo biloba для лечения нарушений головного мозга также известно благодаря Kidd PM (Alternative medicine, 4, 144-61, 1999), сообщавшему об их применении в сочетании с фосфатидилсерином.
Смеси экстрактов Ginkgo biloba с фосфатидилсерином присутствуют на рынке США в форме "пищевых добавок", предназначенных для улучшения когнитивных функций и предотвращения болезни Альцгеймера (US 6572899 -JP 2003 169632 A - J. Geriatric и Neurology 11, 163-73, 1998). Контролируемые исследования не подтвердили желаемую терапевтическую эффективность, таким образом, для получения хороших результатов требуются различные технологические и терапевтические подходы.
Известно, что при образовании комплекса экстрактов Ginkgo biloba с фосфолипидами повышается биодоступность химических продуктов экстрактов, считающихся активными ингредиентами. Всасывание активных ингредиентов и достаточная их концентрация в головном мозге является очень важной необходимостью при лечении нарушений головного мозга.
Недавно в WO 2005/074956 и Human Psychopharmacology 22, 1999-2010, 2007 было показано, что введение комплекса Ginkgo biloba с фосфолипидами, в частности с фосфолипидами, содержащими от 10 до 50% фосфатидилсерина, является эффективным при лечении и профилактике нарушений, связанных со снижением когнитивных способностей, таких как старческое слабоумие и болезнь Альцгеймера.
В EP 0441297 B1 раскрыт комплекс билобалида с фосфолипидами, включая фосфатидилсерин, который демонстрирует выраженный противовоспалительный эффект при местном или системном введении.
Позднее было показано, что введение комплексов Ginkgo biloba с фосфолипидами приводит к обнаружению больших количеств активных ингредиентов в головном мозге, чем при введении не связанных в комплекс форм (Rossi R. et al., J. Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 50, 224-27, 2009).
WO 2005/074953 раскрывает композиции из лабдановых дитерпенов, полученных из Andrographis paniculata, являющихся эффективными при лечении аутоиммунных заболеваний и болезни Альцгеймера.
Не все смеси, описанные в литературе и присутствующие на рынке, полностью удовлетворяют терапевтическим потребностям. Таким образом, существует необходимость для выявления новых композиций, являющихся эффективными при лечении нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера и рассеянного склероза, и учитывающих различные эффекты, такие как иммуномодулирующий, противовоспалительный и вазодвигательный.
Так как патогенез нейродегенеративных нарушений является комплексным и мультифакторным, понятно, что один активный ингредиент, маловероятно, способен модифицировать его развитие; таким образом, есть необходимость в создании комбинаций экстрактов, которые, по разным причинам, могут влиять на ряд инициирующих факторов этих нарушений, для того чтобы снизить степень прогрессирования.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей:
(a) экстракт Andrographis paniculata или чистый андрографолид,
(b) экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами.
Настоящее изобретение также относится к применению композиции, включающей:
(a) экстракт Andrographis paniculata или чистый андрографолид,
(b) экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами для лечения нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера и рассеянного склероза.
Подробное описание изобретения
Неожиданно было обнаружено, что композиции, полученные с помощью соединения экстрактов Andrographis paniculata с экстрактами Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами, являются эффективными при лечении нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера и рассеянного склероза.
Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей:
(a) экстракт Andrographis paniculata или чистый андрографолид,
(b) экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами.
Экстракт Andrographis paniculata предпочтительно получают из наземной части свежего или высушенного растения с помощью экстрагирования биомассы с помощью спиртов, смешанных с водой, предпочтительно с этанолом или, в зависимости от исходного растительного сырья, с кетонами и/или алифатическими сложными эфирами и простыми эфирами. После концентрирования под вакуумом первичных экстрактов до небольшого объема оставшееся вещество распределяют между водой и несмешивающимися растворителями для концентрирования активного ингредиента, андрографолида избирательно до тех пор, пока не будет достигнута концентрация конечного экстракта.
Экстракт Andrographis paniculata предпочтительно содержит андрографолиды (такие как андрографолид, 14-дезокси-11, 12-дидегидроандрографолид и неоандрографолид) от 20% до 60%, и более предпочтительно 35%.
Кроме того, по другому аспекту изобретения, чистый андрографолид, получаемый согласно известным способам, можно использовать для конкретных составов, хотя экстракты, обогащенные Andrographis paniculata, являются особенно предпочтительными, так как они обеспечивают наилучшие данные в отношении биодоступности и активности.
Применяемый экстракт Ginkgo biloba предпочтительно содержит от 20 до 30% флавонолгликозидов Гинкго, более предпочтительно 24%, и смесь из дитерпенов/сесквитерпенов предпочтительно в диапазоне от 2 до 10% и более предпочтительно приблизительно 6%.
Экстракт Ginkgo biloba в комплексе со смесью фосфолипидов получают согласно известным способам получения (такими как способы, описанные в US 5043323 и US 5202313).
Неочищенную смесь из фосфолипидов, предпочтительно содержащую от 5 до 50% фосфатидилсерина, увеличивающую биодоступность активных ингредиентов, можно использовать для образования комплекса Ginkgo biloba с фосфолипидами. По предпочтительному аспекту по изобретению смесь фосфолипидов содержит 20% фосфатидилсерина.
Неожиданно было обнаружено, что при объединении экстракта Andrographis paniculata с экстрактом Ginkgo biloba в комплексе со смесью фосфолипидов, предпочтительно содержащей фосфатидилсерин, у лабораторных животных уменьшаются проявления неоваскулярных дегенеративных изменений, типичных для болезни Альцгеймера и, частично, для рассеянного склероза, и восстанавливаются когнитивные функции после всего одной недели перорального применения.
Дозы экстракта Andrographis paniculata, для которых подтверждена эффективность в составе композиции, находится в диапазоне от 0,5 до 2 мг на килограмм массы тела для введения от одного до трех раз в сутки. Для комплекса Ginkgo biloba с фосфолипидами доза находится в диапазоне от 100 до 300 мг на фармацевтическую форму, как показано в примерах ниже.
В конкретных тестах композиции по изобретению проявляли способность контролировать прогрессирование нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и рассеянный склероз.
Кроме того, заявителем было неожиданно обнаружено, что описанные выше композиции при введении в форме масел, обогащенных ω-3 полиненасыщенными жирными кислотами, проявляют дополнительный синергический эффект между экстрактом Andrographis paniculata и экстрактом Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами.
Композиции можно вводить в наиболее общепринятых фармацевтических составах, таких как мягкие или твердые желатиновые капсулы и капсулы из целлюлозы, в частности, пригодные для содержания масел, таблетки и суппозитории.
Особенно предпочтительным является применение капсул из целлюлозы.
Предпочтительным составом является состав из целлюлозы, где активные ингредиенты композиции находятся во взвеси с маслами растительного или животного происхождения, обогащенными ω-3 полиненасыщенными жирными кислотами.
В качестве применяемых масел могут быть масла растительного происхождения, такие как льняное масло, масло энотеры двухлетней и масло черной смородины и их производные, или масла животного происхождения, такие как рыбий жир и его производные.
Согласно другому предпочтительному варианту 250 мг комплекса Ginkgo biloba с фосфолипидами, содержащими фосфатидилсерин, могут быть распределены в составе в маслом совместно со 150 мг экстракта Andrographis paniculata с содержанием 35% андрографолида.
В еще одном аспекте композиции по изобретению можно вводить в сочетании с другими соединениями, обладающими полезной или дополнительной видами активности.
Фармацевтические композиции по изобретению можно разрабатывать согласно общепринятым способам, таким как описанные выше в "Remington's Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co., N.Y., USA. В частности, композиции по изобретению будут разработаны согласно общепринятым способам разработки компонентов растения, требующим тщательного внимания для предотвращения взаимодействий с эксципиентами и компонентами состава капсулы.
ПРИМЕРЫ
Примеры, приведенные ниже, дополнительно поясняют изобретение.
Пример 1 - Получение капсулы из целлюлозы с маслом энотеры
Экстракт Andrographis paniculata (35% андрографолидов) 150 мг
Экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами 250 мг
Масло энотеры в количестве, достаточном для 600 мг
Пример 2 - Получение капсулы из целлюлозы с модифицированным рыбьим жиром
Экстракт Andrographis paniculata (35% андрографолидов) 150 мг
Экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами 250 мг
Этил эйкозапентаеноат в количестве, достаточном для 600 мг
Пример 3 - Получение твердых желатиновых капсул
Экстракт Andrographis paniculata (35% андрографолидов) 150 мг
Ginkgo biloba с фосфатидилсерином 150 мг
Пример 4 - Влияние композиции (пример 1) на время пролета у двойных трансгенных мышей линии APPswe/PS1
Экспериментальной моделью, на которой проводили исследование, являлись трансгенные мыши линии APPswe/PS1.
В данной модели на животных экспрессирован ген пресенилина 1 человека (дельта E9) и химерный ген мышь/человек белка-предшественника амилоида (APP), который, в свою очередь, содержит мутацию типа Swedish.
Ранее было показано, что данная модель на животных характеризуется аномальными отложениями амилоида с прогрессирующей потерей памяти (Borchelt D. et al. Neuron 19, 1997, 939-945) и, таким образом, является одной из наиболее наглядных моделей в отношении прогноза для исследования лекарственных средств, предназначенных для лечения болезни Альцгеймера.
Лечение 20 трансгенных мышей на группу с помощью описанной в примере 1 композиции и отдельными составными компонентами показало, что композиция по изобретению достоверно снижает потерю памяти, вызванную накоплением амилоида в трансгенных мышах, как показан с помощью теста водный лабиринт Морриса (Morris GM, J. Neurosci. Methods 1984; 11:47-60).
В частности, обнаружили неожиданный эффект синергии взаимодействия между компонентами композиции (таблица 1).
| Таблица 1 | ||
| Группа | Время пролета (сек) | Повышение (%) |
| Нормальная мышь | 15±2 | - |
| Трансгенная мышь | 75±3 | 400 |
| Экстракт Andrographis paniculata | 50±2 | 233 |
| Комплекс Ginkgo biloba с фосфолипидами | 65±3 | 333 |
| Композиция по изобретению (пример 1) | 25±2 | 66 |
Пример 5 - Влияние композиции (пример 1) на аутоиммунный энцефалит мыши
Моделью на животных, используемой для оценки эффективности продуктов для лечения рассеянного склероза, является экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (ЭАЭ) на модели мыши. Данная экспериментальная модель характеризуется возникновением фокальных очагов демиелинизации в центральной нервной системе с потерей аксональных функций и прогрессирующим возрастающим параличом задних и передних лап (Iruretagoyena M.I. et al., J. Pharm. Exp. Therapeutics, 312, 366-372, 2005).
Самкам мышей линии C57BL/6 вводили подкожно 50 мкг пептида MOG35-55 (MOG обозначает миелин-олигодендроцитарный гликопротеин мыши), эмульгированного в адъюванте Фрейнда, (Gibco B L, JPET # 725128 NY) с добавлением производных Mycobacterium tuberculosis H37 RA (Difco Laboratories, Detroit, MI). В момент сенсибилизации и через 48 часов после этого мышам также осуществляли интраперитонеальную инъекцию 500 нг токсина коклюша (Calbiochem La Jolla, CA). Клинические признаки заболевания появлялись между 15 и 18 сутками после сенсибилизации и ежедневно регистрировались на основании следующих баллов:
0 - отсутствие проявлений ЭАЭ
1- снижение тонуса хвоста
2 - слабость задних лап или аномальная походка
3 - полный паралич задних лап
4 - полный паралич задних и передних лап
5 - смерть
Вычисление среднего значения, исходя из клинических данных, осуществляли суммированием ежедневных баллов мышей, принадлежащих к одной группе лечения, и затем делением на количество мышей в группе. Лечение 20 трансгенных мышей на группу с помощью описанной в примере 1 композиции и отдельными составными компонентами (начинавшееся за 1 неделю до осуществления сенсибилизации с помощью пептида MOG и продолжавшееся на всем протяжении эксперимента) показало, что композиция по изобретению достоверно снижает все оцениваемые параметры и одновременно демонстрирует неожиданный синергетический эффект взаимодействия между составными компонентами композиции (таблица 2).
| Таблица 2 | |||
| Группа | Количество | Баллы (максимально) | Среднее значение максимальных баллов |
| Контроль | 20/20 (100%) | 5 | 3,9±0,1 |
| Экстракт Andrographis paniculata | 7/20 (35%) | 4 | 2,9±0,1* |
| Комплекс Ginkgo biloba с фосфолипидами | 4/20 (20%) | 5 | 3,3±0,1 |
| Композиция по изобретению (пример 1) | 12/20 (75%) | 2 | 2,2±0,1** |
| *p<0,05 критерий Стьюдента **p<0,01 vs. Контроль |
1. Композиция для лечения нейродегенеративных заболеваний, содержащая:
(a) экстракт Andrographis paniculata, содержащий 35% андрографолидов,
(b) экстракт Ginkgo biloba в комплексе с фосфолипидами,
причем экстракт Ginkgo biloba содержит от 20% до 30% флавонолгликозидов Гинкго, и от 2% до 10% смеси из дитерпенов/сесквитерпенов, причем фосфолипиды содержат от 5% до 50% фосфатидилсерина.
2. Композиция по п. 1, где андрографолидами являются андрографолид, 14-дезокси-11,12-дидегидроандрографолид и неоандрографолид.
3. Композиция по любому из пп. 1 или 2, дополнительно содержащая масла растительного или животного происхождения, обогащенные ω-3 полиненасыщенными жирными кислотами.
4. Композиция по п. 3, где масла выбраны из льняного масла, масла энотеры двухлетней, масла черной смородины, рыбьего жира и их производных.
5. Композиция по любому из пп. 1-4 для лечения болезни Альцгеймера.
6. Композиция по любому из пп. 1-4 для лечения рассеянного склероза.
