Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы

Авторы патента:

Перельмутер Владимир Михайлович (RU)

Крахмаль Надежда Васильевна (RU)

Кайгородова Евгения Викторовна (RU)

Завьялова Марина Викторовна (RU)

Богатюк Мария Вячеславовна (RU)

Слонимская Елена Михайловна (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2566732:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и описывает способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы. Способ характеризуется тем, что проводят иммуногистохимическое исследование препаратов ткани первичной опухоли, при котором определяют процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток, также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности, рассчитывают значение уравнения регрессии и далее рассчитывают значение вероятности развития лимфогенных метастазов Р. При Р≥50% прогнозируют высокий, а при Р<50% низкий риск развития лимфогенных метастазов. Предложенный способ позволяет с высокой точностью и информативностью прогнозировать развитие лимфогенных метастазов при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы и оптимизировать тактику ведения больных. 2 пр., 5 табл., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.

В настоящее время одним из общепризнанных параметров, ассоциированных с частотой лимфогенного метастазирования при раке молочной железы, является размер опухоли. Известно, что по мере увеличения размера новообразования риск метастатического поражения возрастает. Так, при размере новообразования более 5 мм частота регионарного метастазирования увеличивается до 46%, опухоли менее 5 мм метастазируют в 18% [1, 2].

Гистологическим параметром, связанным с риском лимфогенного метастазирования, принято считать степень злокачественности, определяемую по модифицированной схеме P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson на основании степени тканевой и клеточной атипии (образование тубулярных и протокоподобных структур, число митозов и клеточный полиморфизм) [3]. Степень злокачественности отражается на частоте регионального метастазирования, так при первой степени злокачественности лимфогенное метастазирование наблюдается в 21%, при второй - в 44%, при третьей - в 33% [4]. Другим гистологическим параметром, связанным с риском лимфогенного метастазирования, является опухолевая эмболия в сосудах новообразования [5, 6].

Наиболее близким к настоящему способу прогнозирования лимфогенного метастазирования при раке молочной железы является способ, предложенный Ермиловой В.Д. с соавт. Суть этого способа основывается на определении уровня экспрессии Her2/neu иммуногистохимическим методом. При этом уровень экспрессии данного маркера оценивается полуколичественно по характеру, интенсивности мембранной реакции и пропорции иммунопозитивных клеток. Неr2/nеu негативными считаются случаи с отсутствием или слабым прерывистым окрашиванием менее чем в 30% клеток (0) или со слабым прерывистым мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток (1+). Случаи с умеренным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток или интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием менее чем в 10% клеток считаются «сомнительными» (2+). Her2/neu позитивными считаются опухоли с непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток (3+). Установлено, что Неr2/nеu позитивные новообразования (3+) обладают склонностью к более частому метастатическому поражению регионарных лимфатических узлов [7].

Недостатком этого способа является достаточно частое обнаружение случаев с «сомнительной» (2+) экспрессией, требующей дополнительного выявления наличия амплификации гена HER2/neu методом FISH или CISH /SISH.

Новый технический результат - повышение точности и информативности при упрощении способа.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы проводят иммуногистохимическое исследование препаратов ткани первичной опухоли. На основании иммуногистохимического исследования определяют процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток, также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности, рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле

Y=(24+12X₁-39,9Х₂-33,1Х₃+47,7X₄),

где Y - значение уравнения регрессии;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза),

(12) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;

X₄ - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть),

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов рассчитывают по формуле Р=e^Y/(1+e^Y),

где Р - значение вероятности развития признака;

е - математическая константа, равная 2,72.

При Р≥50% прогнозируют высокий, а при Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Способ осуществляют следующим образом.

Макроскопической оценке подвергают ткань первичной опухоли и все удаленные лимфатические узлы.

Материал фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливают согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.

Степень злокачественности оценивают по модифицированной схеме P. Scarff, H. Bloom и W. Richardson. Для определения степени злокачественности исследуют 3 гистологических параметра, каждый из которых оценивают в баллах от 1 до 3: количество тубулярных и протоковых структур (>75% - 1 балл, >10<75% - 2 балла, <10% - 3 балла), число митозов (<10 в 10 полях зрения - 1 балл, >10<20 - 2 балла, >20 - 3 балла), клеточный полиморфизм (клетки одного размера и формы, мелкие, с дисперсным распределением хроматина, без ядрышек - 1 балл, небольшой полиморфизм ядер, некоторое укрупнение клеток - 2 балла, ядра крупные различной формы с одним или несколькими ядрышками, с грубым хроматином - 3 балла). На основании суммы баллов 3 параметров определяют степень злокачественности (3-5 баллов - низкая степень, 6-7 баллов - умеренная степень, 8-9 баллов - высокая степень злокачественности).

Иммуногистохимическое исследование осуществляют по стандартной методике с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 antibody (клон G3.1, рабочее разведение 1:500, Abcam, ab5579). Отмечают наличие экспрессии Hsp27. Экспрессию оценивают по процентному содержанию позитивно окрашенных ядер клеток на 1000 клеток в 10 полях зрения при большом увеличении микроскопа (×400). Также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности. Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле

Y=(24+12X₁-39,9Х₂-33,1Х₃+47,7X₄),

где Y - значение уравнения регрессии;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза),

(12) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₄ - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть),

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяют по формуле Р=e^Y/(1+e^Y),

где Р - значение вероятности развития признака;

е - математическая константа, равная 2,72.

При Р≥50% прогнозируют высокий, а при Р<50% низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Hsp27 (HspB1) является одним из представителей малых белков теплового шока (small heat shock proteins, sHsp), который ранее был изучен как р29, srp27 и р24 [8]. Основными функциями Hsp27 является фолдинг, мисфолдинг и рефолдинг белков. Шаперон Hsp27 влияет на регуляцию множества внутриклеточных процессов. Так, Hsp27 защищает клетки от запуска апоптоза, препятствуя образованию апоптосомы и нарушая активацию каспаз, участвует в балансе «спокойного» состояния и интенсивного роста опухоли, принимает участие в регуляции эпителиально-мезенхимального перехода и др. [9, 10, 11, 12]. В настоящее время шаперон Hsp27 рассматривают в качестве молекулярного маркера рака молочной железы [10, 13, 14].

Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больная Т., 56 лет, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, в менопаузе (2), с размером опухоли 1,5 см (1), со второй степенью злокачественности (2), с наличием экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (2).

Рассчитывали значение уравнения регрессии Y:

Y=24+12×2-39,9×1-33,1×2+47,7×2=37,3.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=e^Y/(1+e^Y)=2,72^37,3/(1+2,72^37,3)=0,99.

Таким образом, вероятность развития лимфогенных метастазов составила 99%. В операционном материале в исследованных аксиллярных лимфатических узлах определялось метастатическое поражение.

Пример 2. Больная К., 65 лет, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, в менопаузе (2), с размером опухоли 1,5 см (1), с первой степенью злокачественности (1), с отсутствием экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1).

Рассчитывали значение уравнения регрессии Y

Y=24+12×2-39,9×1 -33,1×1+47,7×1=22,7.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=e^Y/(1+e^Y)=2,72^22,7/(1+2,72^22,7)=0,01.

Вероятность развития лимфогенных метастазов составила 1%. В операционном материале в исследованных аксиллярных лимфатических узлах метастатического поражения обнаружено не было.

Предлагаемый способ основан на анализе результатов клинических наблюдений, данных морфологического и иммуногистохимического исследования биопсийного и операционного материала.

Изучался биопсийный материал от 36 больных инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы стадии T1-3N0-3M0. Средний возраст больных составил 49,1±8,5 лет. Больные не получали неоадъювантной терапии. Операция выполнялась в объеме радикальной мастэктомии или радикальной резекции молочной железы.

Макроскопической оценке подвергалась ткань первичной опухоли и все удаленные аксиллярные лимфатические узлы.

Материал фиксировали в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводка материала и изготовление гистологических препаратов осуществляли по стандартной методике. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливали согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.

Степень злокачественности оценивали по модифицированной схеме P. Scarff, H. Bloom и W. Richardson. При этом учитывали количество тубулярных и протоковых структур, число митозов и клеточный полиморфизм.

Иммуногистохимическое исследование осуществляли по стандартной методике с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 antibody (клон G3.1, рабочее разведение 1:500, Abcam, ab5579). Отмечали наличие экспрессии Hsp27. Экспрессию оценивали по процентному содержанию позитивно окрашенных ядер клеток на 1000 клеток в 10 полях зрения при большом увеличении микроскопа (×400).

Статистическую обработку результатов выполняли с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows». Обсуждали результаты с достоверностью различий при р<0,05, и с тенденцией при р<0,1.

Для предсказания риска развития лимфогенных метастазов использовали метод логистической регрессии. Была определена формула

Y=(24+12Х₁-39,9Х₂-33,1Х₃+47,7X₄),

где Y - значение уравнения регрессии;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза), (12) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂- размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=e^Y/(1+e^Y), где Р - значение вероятности развития признака, е - математическая константа, равная 2,72.

При вероятности Р≥50% определяется высокий риск развития лимфогенных метастазов, а при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Модель имеет высокую степень достоверности (х²=34,3; р=0,00000). Чувствительность 100%, специфичность 90%.

При анализе частоты возникновения лимфогенных метастазов от признаков, вошедших в прогностическую модель, оказалось, что метастатическое поражение регионарных лимфатических узлов чаще возникало у больных с более крупными опухолями, размеры которых варьировали в пределах от 2 до 5 см, а также при наличии ядерной экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ткани опухоли, что показано в табл. 1, 2 и на фигуре 1, где изображена ядерная локализация нефосфорилированной формы шаперона Hsp27 в опухолевых клетках инвазивной карциномы неспецифического типа молочной железы (указана стрелкой) на основании применения метода иммуногистохимического окрашивания с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 (клон G3.1, рабочее разведение 1:500).

Кроме того, обнаруживалась зависимость лимфогенного метастазирования от процента клеток с позитивной ядерной экспрессией Hsp27. В случаях с метастатическим поражением регионарных лимфатических узлов процент был выше (табл. 3). Изолированно, вне прогностической модели, связи лимфогенного метастазирования с состоянием менструальной функции и со степенью злокачественности опухоли обнаружено не было (табл. 4, 5).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью и информативностью прогнозировать развитие лимфогенных метастазов при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы и оптимизировать тактику ведения таких больных.

Источники информации, принятые во внимание

1. Завьялова М.В. Зависимость лимфогенного метастазирования от морфологического строения первичного опухолевого узла при уницентическом инфильтрирующем протоковом раке молочной железы у больных с разным состоянием менструальной функции / М.В. Завьялова, В.М. Перельмутер, Е.М. Слонимская, С.В. Вторушин / Сибирский онкологический журнал. - 2008. - №3 (27). - С. 5-9.

2. Page D.L. Prognosis and breast cancer. Recognition of lethal and favourable prognostic types / D. L. Page // The American journal of surgical pathology. -1991. - Vol. 15. - P. 334-346.

3. Ганцев Ш.Х. Онкология: учебник для студентов медицинских вузов. - 2-е изд., испр. и доп. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - 488 с.

4. Elston C.W. Pathological prognostic factors in breast cancer. I. The value of histological grade in breast cancer: experience from a large study with long term follow up / C.W. Elston, I.O. Ellis // Histopathology. - 1991. - Vol. 19. - P. 403-410.

5. 3анкин B.B., Лазаревский M.M., Кометова B.B. Клинико-морфологические факторы прогноза (на примере рака молочной железы) // Тезисы научно-практической конференции «Модниковские чтения». Ульяновский государственный университет. 2009. Режим доступа: (дата обращения 14.05.2014).

6. Mascarel I. D2-40 in breast cancer: should we detect more vascular emboli? /I. Mascarel, G. MacGrogan, M. Debled, G. Sierankowski1, V. Brouste, S. Mathoulin-Pélissier, L. Mauriac // Modern Pathology. - 2009. - Vol. 22. - P. 216-222.

7. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. - 4-е изд., перераб. и доп. - Казань, 2012. 624 с.

8. Ciocca D.R.; Luque, Е.Н. Immunological evidence for the identity between the Hsp27 estrogen-regulated Heat-Shock Protein and the P29 estrogen receptor-associated protein in breast and endometrial cancer / D.R. Ciocca, E.H. Luque // Breast Cancer Research and Treatment. - 1991. - Vol. 20, №1. - P. 33-42.

9. Кайгородова E.В. Молекулярные механизмы регуляторного влияния белка теплового шока 27 кДа на апоптоз опухолевых клеток // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - Т. 10. №4. - С. 71-76.

10. Straume О. Suppression of heat shock protein 27 induces long-term dormancy in human breast cancer / O. Straume, T. Shimamura, M.J. Lampa, J. Carretero, A.M. Oyan, D. Jia, C.L. Borgman, M. Soucheray, S.R. Downing, S.M. Short, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2012. - Vol. 109. N. 22. - P. 8699-8704.

11. Wei L. Hsp27 participates in the maintenance of breast cancer stem cells through regulation of epithelial-mesenchymal transition and nuclear factor-kappa В / L. Wei, T.T. Liu, Н.H. Wang, H.M. Hong, A.L. Yu, H.P. Feng, W.W. Chang // Breast Cancer Res. - 2011. - Vol. 13. - R101.

12. Arrigo A.P., Gibert, B. HspB1, HspB5 and HspB4 in Human Cancers: Potent Oncogenic Role of Some of Their Client Proteins // Cancers (Basel). - 2014. - Vol. 6. N. 1. - P. 333-365.

13. Targeting heat shock protein 27 (HspB1) interferes with bone metastasis and tumour formation in vivo / B. Gibert, B. Eckel, V. Gonin, D. Goldschneider, J. Fombonne, B. Deux, P. Mehlen, A-P. Arrigo, P. Clézardin, C. Diaz-Latoud // Br. J. Cancer. - 2012. - Vol. 107, №1. - P. 63-70.

14. Upregulated HSP27 in human breast cancer cells reduces Herceptin susceptibility by increasing Her2 protein stability / Kang SH, Kang KW, Kim KH, Kwon B, Kim SK, Lee HY, Kong SY, Lee ES, Jang SG, Yoo B.C. // BMC Cancer. - 2008. Oct 4;8:286. doi: 10.1186/1471-2407-8-286.

Таблица 1. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от размера опухоли.

Таблица 2. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от наличия экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток.

Таблица 3. Процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток в зависимости от наличия лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа.

Таблица 4. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от состояния менструальной функции.

Таблица 5. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от степени злокачественности.

Таблица 1
Размер опухоли	Наличие лимфогенных метастазов
Нет (N0)	Есть (N+)
До 2 см	14/24 (58%)	1/12 (8%)
2-5 см	10/24 (42%)	11/12 (92%)
χ2=8,2; р=0,004

Таблица 2
Наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток	Наличие лимфогенных метастазов	p
Нет (N0)	Есть (N+)
Нет	18/24 (75%)	6/12 (50%)	0,07
Есть	6/24 (25%)	6/12 (50%)	0,07

Таблица 3
Наличие лимфогенных метастазов	Процент экспрессии молекулярного шаперона Hsp27(M±SD)
Нет (N0)	0,5±1,1 (n=24)
Есть (N+)	5,5±11,6 (n=12)
	F=4,4; р=0,04

Таблица 4
Состояние менструальной функций	Наличие лимфогенных метастазов
Нет (N0)	Есть (N+)
сохранена	5/24 (21%)	3/12 (25%)
менопауза	19/24 (79%)	9/12 (75%)
χ2=0,08; р=0,77

Таблица 5
Степень злокачественности	Наличие лимфогенных метастазов
Нет (N0)	Есть (N+)
первая	2/24 (8%)	1/12 (8%)
вторая	19/24 (79%)	10/12 (84%)
третья	3/24 (13%)	1/12 (8%)
χ2=0,06; р=0,96

Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы путем проведения иммуногистохимического исследования препаратов ткани первичной опухоли, отличающийся тем, что определяют процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток, также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности, рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле
Y=24+12X₁-39,9Х₂-33,1Х₃+47,7X₄,
где Y - значение уравнения регрессии;
24 - значение коэффициента регрессии свободного члена;
X₁ - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза);
12 - значение коэффициента регрессии для X₁;
Х₂ - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см);
-39,9 - значение коэффициента регрессии для X₂;
Х₃- степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая);
-33,1 - значение коэффициента регрессии для X₃;
Х₄ - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть);
47,7 - значение коэффициента регрессии для X₄.
Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяют по формуле Р=e^Y/(l+e^Y),
где Р - значение вероятности развития признака;
е - математическая константа, равная 2,72.
При вероятности Р≥50% определяют высокий риск развития лимфогенных метастазов, при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и предназначено для диагностики ранений ободочной кишки, в частности ранений ее забрюшинного отдела. Пострадавшему с подозрением на повреждение ободочной кишки выполняют первичную хирургическую обработку раны с ее ревизией.

Способ дифференциальной диагностики экссудативных плевритов туберкулезной этиологии с использованием клиновидной дегидратации плевральной жидкости // 2566719

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики между туберкулезным плевритом, экссудативным плевритом при неспецифической пневмонии и плевритом на фоне рака легкого.

Способ ранней диагностики хронической болезни почек // 2566709

Изобретение относится к медицине и предназначено для диагностики начальной стадии хронической болезни почек. В крови больного определяют уровень липокалина-2 и альбумина, рассчитывают отношение липокалина-2 к альбумину и при значении больше 0,27 диагностируют хроническую болезнь почек.

Способ диагностики развития стенозирования стентов // 2566287

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики возникновения рестеноза в ранее стентированном сегменте. Сущность способа состоит в том, что исследуют кровь пациентов, определяют уровень циркулирующих СD45+ и при показателе, равном 0,91% и более от общего числа тромбоцитов, судят о наличии рестеноза.

Способ подготовки биоматериала для пцр диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота (вл крс) // 2566071

Изобретение относится к области ветеринарии. Предложен способ подготовки биоматериала для ПЦР диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС).

Способ оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей // 2566070

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита. Сущность способа состоит в том, что в ротовой жидкости ребенка спектрофотометрически определяют величину содержания меди и кальция и при соотношении величины содержания меди к величине содержания кальция свыше 45 лечение считают эффективным.

Способ комплексной оценки прогноза течения и эффективности лечения гипертрофии глоточной миндалины и хронического аденоидита у детей по оксидант/антиоксидантной активности кожи // 2565838

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано при выборе тактики лечения гипертрофии глоточной миндалины и хронического аденоидита.

Способ диагностики нарушений рубцового пищеварения у жвачных // 2565412

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для оценки степени нарушения рубцового пищеварения у жвачных животных. Определяют в содержимом рубца количество веществ, имеющих «средний» (500-5000 D) диапазон молекулярной массы.

Способ прогнозирования исхода инфаркта миокарда у больных сахарным диабетом 2 типа старше 45 лет на госпитальном этапе // 2565103

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии. Оценивают обширность поражения миокарда, нарушение сердечной проводимости, признаки хронической сердечной недостаточности, уровень гликемии, мочевины в крови и артериальное систолическое давление при поступлении, и рассчитывают вероятность благоприятного или неблагоприятного прогноза (Р) по формуле.

Способ прогнозирования эффективности комбинированной терапии хронического гепатита с у детей // 2564933

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования эффективности комбинированной терапии ХГС у детей, включающий исследование абсолютного количества нейтрофилов крови, отличающийся тем, что до начала терапии определяют исходный уровень абсолютного количества нейтрофилов, при этом уровень 2000-3400/мкл считают положительным предиктором получения первичной вирусологической ремиссии, а уровень, превышающий 3500/мкл, расценивают как отрицательный предиктор получения ремиссии; в динамике через 12 и 24 недели от начала комбинированной терапии определяют уровень абсолютного количества нейтрофилов, и при уровне нейтрофилов ≤1400/мкл делают вывод о положительном прогнозе эффективности терапии, а при уровне абсолютного числа нейтрофилов ≥2500/мкл достижение первичной вирусологической ремиссии маловероятно.

Способ прогнозирования развития кардиоваскулярных осложнений острого коронарного синдрома с подъемом сегмента st // 2567031

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается прогнозирования развития кардиоваскулярных осложнений острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST. Для этого осуществляют подсчет баллов по шкале GRACE при поступлении, определение в 1-3 сутки госпитализации содержания липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов (s-NGAL) в крови и фракции выброса по ЭхоКГ. Затем определяют показатель GRACE-NGAL-ФВ = 3,6462 + (0,028388 × баллы по шкале GRACE) + (0,0035581 × величина s-NGAL) + (-0,16614 × величина ФВ). При величине показателя «GRACE-NGAL-ФВ» более 0,5298 прогнозируют развитие кардиоваскулярных осложнений в госпитальном периоде острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST. Способ обеспечивает возможность прогнозирования кардиоваскулярных осложнений независимо от стратегии лечения. 3 пр., 2 ил.

Способ оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание s-фосфолипазы a2 в гомогенате плаценты в третьем триместре гестации // 2567034

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы повреждения фетоплацентарного барьера при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу, содержание в гомогенате плаценты иммуноферментным методом содержание S-фосфолипазы А2 и в синцитиотрофобласте количество ядер в состоянии апоптоза. При нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, содержании в гомогенате плаценты S-фосфолипазы А2 до 12,0 нг/мл и увеличении числа ядер в синцитиотрофобласте до 3,0% создается угроза повреждения фетоплацентарного барьера ворсинок плаценты. Способ позволяет оценить угрозу повреждения фетоплацентарного барьера при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации за счет нарастания в нем содержания S-фосфолипазы А2 и увеличении числа ядер в синцитиотрофобласте в состоянии апоптоза.

Способ прогнозирования степени риска развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных, рожденных от матерей с внутриутробной инфекцией // 2567037

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, может быть использовано для прогнозирования развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных. Способ заключается в том, что в результате анамнестического, клинического, лабораторного, эхографического обследования беременных женщин получают результаты, которые оценивают по балльной системе с учетом их информативности. Обращается внимание в анамнезе: на наличие или отсутствие самопроизвольных выкидышей, неразвивающихся беременностей, хронических заболеваний женских половых органов, мочевыделительной системы, верхних дыхательных путей; в клинико-лабораторных исследованиях: на воспалительные заболевания вульвы и влагалища, вирусные инфекции во время беременности, дисбиоза влагалища, рецидивирующие угрозы прерывания беременности, ассоциации микроорганизмов в бак. посевах из цервикального канала, в общем анализе крови лейкоцитоза >12×109/л, СРБ>6 мг/л, ПАМГ - 1≥30 мг/мл, кол-во микроорганизмов более 10; клинико-эхографические: маркеров ВУИ: синдром инфицирования плода, синдром инфицирования околоплодных вод, синдром инфицирования плаценты, нарушения плодово-плацентарного кровотока, повышение тонуса миометрия в сочетании с укорочением и дилатацией шейки матки. Сумма набранных баллов укажет на степень риска развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных, рожденных от матерей с ВУИ. Количество баллов 50 свидетельствует о 100% прогнозировании внутриутробной инфекции. Сумма баллов 1-20 указывает на низкую степень риска развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных, 21-39 - на среднюю степень риска, 40-50 соответствует высокой степени риска. Использование способа позволяет с высокой точностью прогнозировать формирование ВУИ у беременных женщин, степень риска развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных в короткий срок с малыми экономическими затратами и может быть использован в качестве динамической оценки в процессе лечения внутриутробной инфекции и подготовки к родам с целью рождения здоровых детей. 1 табл., 2 пр.

Способ оценки подавляющего действия цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на активность цитохромоксидазы в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты, приводящей к нарастанию числа ядер в состоянии апоптоза // 2567042

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Для этого измеряют титр антител к цитомегаловирусу, и при его значении 1:1600, снижении активности цитохрооксидазы в синцитиотрофобласте до 2,50±0,015 усл.ед. и увеличении числа ядер в состоянии апоптоза до 3,0±0,03% создается угроза гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода. Способ позволяет оценить угрозу гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода за счет подавления цепи окислительных процессов. 2 ил.

Способ получения подложек с мнонослойным покрытием на основе полиэлектролитных микрокапсул, содержащих биологически активные материалы // 2567320

Изобретение относится к способу получения многослойных покрытий на основе полиэлектролитных микрокапсул, содержащих биологически активные материалы, для применения в областях диагностики и медицины. Способ включает этап формирования полиэлектролитных микрокапсул, содержащих ядро из композиции по меньшей мере одного биологически активного вещества и формообразующего компонента. На следующем этапе наносят первый полиэлектролитного мультислой на стеклянную подложку, затем наносят промежуточный слой микрокапсул на первый мультислой. Затем наносят второй полиэлектролитный мультислой на поверхность микрокапсул, образующий вместе с первым мультислоем и промежуточным слоем микрокапсул многослойное покрытие. Для повышения максимальной активности используемых биологически активных материалов удаляют формообразующие компоненты из внутреннего объема микрокапсул, устанавливая положение подложки с нанесенным многослойным покрытием таким образом, чтобы подложка занимала верхнее положение по отношению к многослойному покрытию, что позволяет обеспечить возможность вывода молекул растворяемого формообразующего компонента из объема микрокапсул не только за счет диффузии, но и за счет действия сил тяжести. При этом наклон подложки, по отношению к горизонтальной поверхности, выбирают в пределах от 0 до 90 градусов. Указанные многослойные покрытия могут быть использованы для исследования и анализа биологических материалов, например крови, мочи, а также для определения биологически активных соединений в экологии, пищевой промышленности, сельском хозяйстве. 11 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа // 2567724

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности иммунологии, и предназначено для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека. Изобретение раскрывает способ непрямого твердофазного иммуноферментного анализа, в котором в качестве антигена на поверхность полистирола иммобилизуют конъюгат прогестерона с гемоцианином: гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон. Предлагаемый способ технически прост, информативен, обладает высокой чувствительностью и специфичностью при определении антител к прогестерону в сыворотке и плазме крови больных с привычным невынашиванием беременности и бесплодием, его применение позволяет получить достоверные результаты при хранении готовых планшетов до 1 года. Изобретение может быть применено для обследования больных с различной акушерско-гинекологической патологией. 7 табл., 7 пр.

Способ определения глубины залегания липидных ядер атеросклеротических бляшек методом ик-фурье спектроскопии // 2567729

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения глубины залегания липидных ядер, являющихся центром атеросклеротических бляшек. Изобретение представляет способ определения глубины залегания липидных ядер атеросклеротических бляшек методом ИК-Фурье спектроскопии, заключающийся в том, что подготавливаются срезы атеросклеротически измененного участка сосудистого русла, записываются инфракрасные спектры пропускания подготовленных срезов, идентифицируются характеристические пики поглощения, отличающийся тем, что определяется срез, имеющий максимальное поглощение в диапазоне 1720-1760 см-1, соответствующем валентным колебаниям связей C=O сложных эфиров холестерина, который отвечает глубине залегания липидного ядра. Изобретение обеспечивает определение качественного состава атеросклеротических бляшек и глубину залегания липидных ядер. 2 ил.

Способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните // 2567732

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, отличающийся тем, что после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводят исследование диализата методом клиновидной дегидратации, при этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения, при наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения, при их отсутствии - как неудовлетворительную. Применение способа позволяет ускорить оценку эффективности антибактериальной терапии и повысить точность оценки. 4 пр., 3 ил.

Способ прогноза тромбоцитопении у больных хроническим гепатитом с, получающих комбинированную противовирусную терапию // 2567818

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза тромбоцитопении у больных хроническим гепатитом С (ХГС) в результате проведения комбинированной противовирусной терапии (КПТ). У больных ХГС перед началом КПТ определяют уровень вирусной нагрузки (ВН, МЕ/мл). Определяют уровень фиброза по результатам непрямой фиброэластографии печени (F, кПа). Определяют количество тромбоцитов в крови перед началом КПТ (Трисходн, х109/л). На основании полученных данных проводят расчет прогнозируемой величины минимального количества тромбоцитов (Tpmin, х109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии. Значения Tpmin≤150,0х109/л свидетельствуют о наличии риска развития тромбоцитопении у больных ХГС, получающих КПТ. Причем значения Tpmin от 75,0х109/л до 150,0х109/л позволяют предполагать развитие легкой, от 50,0х109/л до 75,0х109/л - умеренной и <50,0х109/л - тяжелой степени тромбоцитопении. Способ позволяет точно, быстро и просто провести прогноз развития тромбоцитопении за счет комплексной оценки наиболее значимых факторов возникновения тромбоцитопении. 1 табл., 2 пр.

Способ выделения личинок t.canis методом переваривания паренхимы легких и печени плотоядных животных // 2567845

(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для посмертной диагностики токсокароза плотоядных животных. Способ включает отбор проб массой 50,0 г. Пробу измельчают на мясорубке с диаметром решетки 3-4 мм. Приготовливают искусственный желудочный сок по следующей прописи: 11,0 см3 концентрированной соляной кислоты (удельная масса 1,2) доводят до 1000,0 см3 водопроводной водой, подогретой до 41-42°С, добавляют 7,0 г пищевого свиного пепсина. ИЖС заливают в реактор аппарата «Гастрос» и прогревают до 41-42°С. Помещают стакан с измельченной пробой и аппарат устанавливают в режим переваривания 50 мин с активным перемешиванием и временем отстоя перевара 10 мин. Осадок сливают в объеме 20,0 см3. Наличие личинок определяют под лупой. Для концентрации применяют метод центрифугирования при 5000 об/мин в течение 10 мин. Далее из пробирки аспирируют 10,0 см3 верхнего слоя жидкости. Оставшийся осадок с личинками сохраняют для дальнейших исследований замораживанием при -20°С. Заявленный способ позволяет эффективно обнаруживать возбудителя токсокароза при посмертной диагностике данной болезни. 1 пр.