Способ определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной

Авторы патента:

G01N30/90 - плоскостная хроматография, например хроматография в тонком слое или бумажная хроматография

A61K36/28 - Лекарства и медикаменты для терапевтических, стоматологических или гигиенических целей (изготовление специальных лекарственных форм A61J; химические аспекты или использование материалов для дезодорации воздуха, для дезинфекции или стерилизации или для бандажей, перевязочных средств, впитывающих прокладок или хирургических приспособлений A61L; соединения как таковые C01, C07,C08,C12N; мыла C11D; микроорганизмы как таковые C12N)

Владельцы патента RU 2572337:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к способу определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной. Указанный способ предполагает определение в сиропе методом тонкослойной хроматографии доминирующего компонента цветков пижмы обыкновенной - флавоноида тилианина, который предварительно извлекают путем обработки сиропа равным количеством ацетона. Изобретение характеризуется упрощенной стадией пробоподготовки, а также улучшенной методикой определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной и позволяет объективно оценивать качество данной лекарственной формы. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной.

Современные требования, предъявляемые к методикам анализа сырья и препаратов на основе лекарственного растительного сырья, предполагают универсальный подход к определению ведущей группы биологически активных соединений. Следовательно, актуальным являются исследования по совершенствованию стандартизации как цветков пижмы обыкновенной, так и препаратов на их основе.

В современной медицине цветки пижмы обыкновенной применяют в качестве желчегонного и противогельминтного средств (1, 4, 5, 8, 9) благодаря высокому содержанию в них флавоноидов. В Российской Федерации зарегистрированы следующие лекарственные препараты, получаемые из цветков пижмы: «Танацехол таблетки, покрытые оболочкой 0,05 г», «Сибектан таблетки 0,1 г». Также цветки пижмы обыкновенной входят в состав «Желчегонного сбора №3» (1).

Однако вопросы химической стандартизации сырья и препаратов данного растения решены не в полной мере. В Фармакопейной статье на цветки пижмы Государственной Фармакопеи СССР XI издания (2) отсутствует раздел «Качественные реакции», что не соответствует современным тенденциям в области фармацевтического анализа лекарственного растительного сырья (10). Аналогичные подходы используются и при анализе лекарственных средств из цветков пижмы обыкновенной.

Для препарата «Сироп с экстрактом пижмы» (11) приводится методика определения терпеноидов, в том числе туйона, методом тонкослойной хроматографии, в системе петролейный эфир - метилэтиленкетон в соотношении 8:2. Однако при этом способе анализа не идентифицируются биологически активные компоненты - флавоноиды, которые в первую очередь определяют фармакологическую активность сиропа.

В ходе изучения химического состава цветков пижмы обыкновенной нами выделен доминирующий флавоноид - тилианин, позволяющий идентифицировать сырье и препараты пижмы обыкновенной (6) и использовать его в качестве стандартного образца при определении подлинности сырья и препаратов пижмы обыкновенной. На основе результатов данных исследований разработан способ определения подлинности цветков пижмы обыкновенной с использованием тонкослойной хроматографии (7). Этот способ взят в качестве прототипа, однако реализация данного метода для целей анализа лекарственного препарата «Сиропа пижмы обыкновенной» крайне затруднительна в силу того, что сиропы имеют высокую вязкость растворов. Имеется опыт количественного анализа сиропа зверобоя с использованием пробоподготовки в виде экстракции целевых веществ ацетоном (3), однако последующее упаривание и растворение сухого остатка в этиловом спирте делает эту процедуру громоздкой, а полученный при этом сильно разбавленный раствор экстрактивных веществ (для метода спектрофотометрии) неприменим для анализа методом тонкослойной хроматографии.

Следует подчеркнуть, что анализ лекарственной формы сиропа с точки зрения определения подлинности с использованием тонкослойной хроматографии крайне затруднителен в силу того, что сиропы имеют высокую вязкость растворов.

В соответствии с вышеизложенным целью изобретения является разработка способа определения подлинности лекарственного препарата «Сиропа пижмы обыкновенной».

Техническим результатом предлагаемого способа является улучшение методики определения подлинности для идентификации флавоноидов, в частности доминирующего и диагностичного флавоноида тилианина, используя метод тонкослойной хроматографии.

Технический результат достигается тем, что определение доминирующего компонента цветков пижмы обыкновенной - флавоноида тилианина в сиропе из этого лекарственного растительного сырья проводят методом тонкослойной хроматографии благодаря стадии предварительного извлечения из препарата флавоноида в результате обработки равным количеством ацетона, но без предварительного упаривания ацетонового извлечения и последующего растворения анализируемых веществ. Способ осуществляется следующим образом.

Сироп (точная навеска) помещают в колбу со шлифом объемом 30 мл и экстрагируют равным объемом ацетона путем встряхивания вручную в течение 1-2 минут. Отстаивают двухфазную систему после экстракции до полного расслоения слоев (верхний слой - ацетон, нижний - сироп). В результате в ацетоновый слой переходят анализируемые вещества, в том числе диагностически значимый флавоноид тилианин.

На линию старта хроматографической пластины наносят микропипеткой 0,02 мл ацетонового извлечения из сиропа и 0,05 мл рабочего стандартного образца тилианина в виде пятен диаметром 5 мм. Пластинку с нанесенной пробой помещают в вертикальную камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ-этанол-вода в соотношении 26:16:3 и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей проходит около 9 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин. Хроматограмму опрыскивают раствором диазобензолсульфокислоты и нагревают на плитке в течение 3 мин при 100-105°C. На хроматограмме обнаруживается ряд пятен с R_f от 0,10 до 0,80; при этом доминирующим является пятно на уровне пятна стандарта тилианина с величиной R_f около 0,7 (рис. 1).

Примечание 1: подготовка пластинок. Хроматографические пластинки перед использованием активируют в сушильном шкафу при 110°C в течение 1 ч.

Примечание 2: приготовление раствора диазобензолсульфокислоты. 0,01 г диазобензолсульфокислоты (Государственная Фармакопея X издания, стр. 876) растворяют в 10 мл 10% раствора натрия карбоната. Раствор используют свежеприготовленным.

Технический результат реализуется примером 1.

Пример 1.

5,0 г сиропа (точная навеска) помещают в колбу со шлифом объемом 30 мл и экстрагируют 5 мл ацетона путем встряхивания вручную в течение 1-2 минут. Отстаивают двухфазную систему после экстракции до полного расслоения слоев (верхний слой - ацетон, нижний - сироп).

На линию старта пластинки «Сорбфил - ПТСХ-АФ-А-УФ» микропипеткой 0,02 мл ацетонового извлечения из сиропа и 0,05 мл рабочего стандартного образца тилианина в виде пятен диаметром 5 мм. Пластинку с нанесенной пробой помещают в вертикальную камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ-этанол-вода в соотношении 26:16:3 и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей проходит около 9 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин. Хроматограмму опрыскивают раствором диазобензолсульфокислоты и нагревают на плитке в течение 3 мин при 100-105°С. На хроматограмме обнаруживается ряд пятен с R_f от 0,10 до 0,80; при этом доминирующим является пятно на уровне пятна стандарта тилианина с величиной R_f около 0,7.

Таким образом, предлагаемый способ определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной позволяет объективно оценивать качество данной лекарственной формы путем определения флавоноидов, определяющим фармакологическое действие сиропа и отвечает современным требованиям, предъявляемым к методикам фармацевтического анализа. В заявленном способе по сравнению с препаратом «Зверобоя сироп» упрощена процедура анализа путем исключения стадии упаривания ацетонового извлечения и последующего растворения в этиловом спирте. Это позволяет упростить стадию пробоподготовки и сократить продолжительность анализа.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ:

1. Государственный реестр лекарственных средств [Электронный ресурс]. - Электрон. дан. - 2011. - Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx - Загл. с экрана.

2. Государственная Фармакопея СССР. - Одиннадцатое издание. - Вып. 2. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.

3. Зимина Л.Н. Фармакогностическое исследование по обоснованию по созданию антидепрессантных препаратов на основе травы зверобоя: дис. … канд. фармац. наук: 14.04.03 / Зимина Любовь Николаевна. - Самара, 2011. - 121 с.

4. Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов / В.А. Куркин. - 2-е изд., перераб. и доп. - Самара: Офорт; СамГМУ, 2007. - 1239 с.

5. Куркин В.А. Основы фитотерапии: учебное пособие / В.А. Куркин. - Самара: Офорт; СамГМУ, 2009. - 963 с.

6. Куркина А.В. Флавоноиды цветков Tanacetum vulgare / А.В. Куркина, А.И. Хусаинова, Е.Д. Даева, В.И. Каденцев // Химия природных соединений. - 2011. - №2. - С. 256-257.

7. Куркина А.В. Возможности применения метода ВЭЖХ для стандартизации цветков пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.) / А.В. Куркина, Е.А. Калабухова, Г.И. Власова, Г.А. Демидова, Е.В. Авдеева // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - №5; URL: www.science-education.ru/111-10031 (дата обращения: 30.08.2015).

8. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: Учебник. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.

9. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae (Compositae). - СПб.: Наука, 1993. - С. 190-192.

10. Самылина И.А. Проблемы стандартизации лекарственного растительного сырья и лекарственных средств / И.А. Самылина // Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты: Материалы I Международного научного конгресса. - М.: Институт традиционных методов лечения МЗ РФ, 1994. - С. 254.

11. Якусевич Р.В. Разработка состава, технологии и норм качества корригированной лекарственной формы - сиропа на основе пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.): автореф. дис. … канд. фармац. наук: 14.04.01 / Якусевич Роман Викторович. Пятигорск, 2013. - 23 с.

Способ определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной методом тонкослойной хроматографии, отличающийся тем, что определение доминирующего компонента цветков пижмы обыкновенной - флавоноида тилианина в сиропе из этого лекарственного растительного сырья проводят методом тонкослойной хроматографии благодаря стадии предварительного извлечения из препарата флавоноида в результате обработки равным количеством ацетона.

Изобретение относится к способам стандартизации лекарственных препаратов, биологически активных добавок, премиксов, лекарственного растительного сырья, растительных масел, масляных экстрактов, изделий пищевой, химической и косметологической отраслей промышленности по содержанию основных жирорастворимых витаминов и может быть использовано в фармацевтической, химической, косметологической и пищевой отраслях промышленности для определения подлинности и степени чистоты жирорастворимых витаминов A, D2, E и β-каротина при совместном присутствии в одно- и многокомпонентных препаратах.

Способ определения кодеина // 2523408

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для обнаружения и количественного определения кодеина в различных объектах, в частности в лекарственных препаратах.

Способ количественного определения классов липидов и подклассов фосфолипидов в биологических материалах // 2517086

Настоящее изобретение относится к области биохимии и описывает способ количественного определения классов липидов и подклассов фосфолипидов в биологических материалах, заключающийся в том, что методом тонкослойной хроматографии разделяют общие липиды на классы и фосфолипиды на подклассы, проявляют их на хроматограмме и количество определяют с использованием денситометрии, причем липиды, остающиеся на старте после разделения общих липидов на классы, сдвигают на 0,5 см выше, проявляют классы липидов и подклассы фосфолипидов на хроматограмме парами йода и рассчитывают площади пиков, соответствующие интенсивности окраски треков на хроматограмме с помощью денситометра, а количество общих фосфолипидов, других классов липидов и подклассов фосфолипидов определяют расчетным методом, выделяя линиями каждый трек отдельно и производят суммарный расчет площадей треков, берут эту цифру за 100% и определяют процент каждого класса липидов от общих липидов или каждого подкласса фосфолипидов от общих фосфолипидов, составляя пропорцию.

Способ выделения монослоя вещества // 2512630

Изобретение относится к области аналитической химии и предназначено для выделения монослоя вещества для целей последующего анализа свойств вещества. Способ выделения монослоя вещества включает нанесение жидкой пробы с растворенным в ней веществом на линию старта на хроматографическую пластину, содержащую слой сорбента.

Способ хроматографического анализа органических веществ // 2512252

Изобретение относится к области хроматографического анализа веществ и позволяет осуществить анализ органических веществ. Способ хроматографического анализа органических веществ включает растворение исследуемого органического вещества в летучем растворителе с получением раствора пробы, последующее нанесение капли раствора пробы на хроматографическую пластину со слоем сорбента, при этом в качестве растворителя выбирают вещество, не вступающее в химическое взаимодействие с пробой и сорбентом, последующий качественный и количественный анализ проявившихся колец.

Сэндвич-камера с контрпластинкой для тонкослойной хроматографии // 2494393

Изобретение относится к тонкослойной хроматографии (TCX) и может быть использовано в аналитической химии и в физической химии. Сэндвич-камера с контрпластинкой для TCX содержит разделяющую хроматографическую пластинку с адсорбционным слоем на подложке и контрпластинку - хроматографическую пластинку с адсорбционным слоем на подложке.

Способ разделения методом тонкослойной хроматографии // 2494392

Изобретение относится к тонкослойной хроматографии (ТСХ) и может быть использовано в аналитической химии. Способ разделения исследуемой смеси методом тонкослойной хроматографии включает нанесение исследуемой смеси на разделяющую хроматографическую пластинку и последующее разделение компонентов исследуемой смеси подвижной фазой в сэндвич-камере, включающей разделяющую хроматографическую пластинку и сухую контрпластинку, которая не касается подвижной фазы.

Способ хроматографического анализа в закрытом тонком слое сорбента и устройство для его осуществления // 2494391

Способ и устройство могут использоваться в различных научных и практических областях медицины, биологии, химии, пищевой промышленности, охране окружающей среды и других отраслей народного хозяйства для анализа смесей органических и неорганических веществ методом тонкослойной хроматографии.

Способ определения имидаклоприда в биологических объектах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии // 2484458

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и санитарии, а именно к определению остаточных количеств инсектицида в органах и тканях животных при подозрении на отравление имидаклопридом, а также в продуктах животного происхождения.

Способ определения имидаклоприда в биологических объектах с использованием тонкослойной хроматографии // 2467323

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и санитарии, а именно к определению остаточных количеств имидаклоприда в органах или тканях животных при подозрении на отравление инсектицидом, а также продуктах животного происхождения.

Средство для лечения кишечных инфекций и состояний, вызванных дисбактериозом // 2572225

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой средство для лечения и профилактики дисбактериоза кишечника, характеризующееся тем, что оно представлено в виде таблетки и содержит Bifidobacterium bifidum штамм №1, лиофилизированный в среде культивирования с активностью 1×104-1×1010 КОЕ /г, кальция стеарат, тальк, топинамбур и лактозу, причем компоненты в средстве находятся в определенном соотношении в мас.

Способ и композиция // 2571566

Группа изобретений относится к фармацевтике. Описан фармацевтический водный раствор, содержащий 2-(гидроксиметил)-2-(метоксиметил)хинуклидин-3-она или его фармацевтически приемлемую соль и средство, регулирующее pH.

Фармацевтическая композиция, содержащая азапентацен (варианты) // 2571279

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения катаракты, выполненную в виде глазной мази, характеризующуюся тем, что содержит дигидроазапентацен полисульфонат натрия, консервант и компоненты основы, причем ингредиенты в композиции находятся в определенном соотношении, в мас.%.

Лечение и предупреждение вич-инфекции // 2569058

Группа изобретений относится к долговременному применению парентерального состава для производства лекарственного препарата для лечения субъекта, инфицированного ВИЧ, причем данный препарат предназначен для подкожной или внутримышечной инъекции и состоит из бреканавира, или его соли в форме водной суспензии микро- или наночастиц, содержащей полисорбат-20, и вводится периодически с интервалами от 6 до 12 месяцев и к указанной фармацевтической композиции.

Средство для кардиоплегии (варианты) // 2568911

Группа изобретений относится к фармацевтике. Описаны средства для кардиоплегии в виде инъекционных водных растворов.

Кислотный диализный концентрат // 2568846

Изобретение относится к медицине и описывает предшественник кислотного диализного концентрата, состоящий из двух отдельно приготовленных частичных концентратов, причем из составных частей кислотного диализного концентрата образованы два отдельно приготовленных частичных концентрата, причем только первый частичный концентрат содержит глюкозу, в то время как второй частичный концентрат не содержит глюкозу, причем первый частичный концентрат наряду с глюкозой содержит воду, подкислитель и KCl и/или MgCl, и/или CaCl2, а количества солей выбраны таким образом, что они являются полностью растворимыми в насыщенном растворе глюкозы при температуре приблизительно в 5°C, причем составные части глюкозы остаются в нерастворенном состоянии, так что первый частичный концентрат находится в состоянии взвеси, кроме того, первый частичный концентрат устанавливается до значения pH от 2.5 до 3.2, преимущественно 3.0, а второй частичный концентрат содержит хлорид натрия, и/или хлорид калия, и/или хлорид кальция, и/или хлорид магния или соответствующие гидраты, воду и подкислитель, а также находится в состоянии взвеси, при котором части хлорида натрия остаются в нерастворенном состоянии, а другие составные части являются растворенными.

Средство ухода за кожей, обладающее антифунгальными свойствами (варианты) // 2567036

Изобретение относится к косметической и фармацевтической промышленности и представляет собой средство для ухода за кожей, обладающее антифунгальными свойствами и содержащее гидрохлорид метилового эфира 2-бензимидазолилкарбаминовой кислоты, салициловую кислоту, диметилсульфоксид и спирт этиловый, причем компоненты в средстве находятся в определенном соотношении в масс.%.

Композиция водного раствора рекомбинантного интерферона альфа-2 человека для ректального применения // 2564951

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтике, и может быть использовано для создания препарата на основе рекомбинантного интерферона альфа-2 человека в жидкой форме для ректального применения.

Способ профилактики и лечения бронхиальной астмы // 2564915

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для профилактики и лечения бронхиальной астмы. Для этого назначают ингаляции фитосбором, диспергированным в виде водного фитоаэрозоля.

Способ лечения больных ограниченной склеродермией // 2564905

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии, и может быть использовано при лечении больных ограниченной склеродермией. В качестве нового способа повышения эффективности лечения ограниченной склеродермии предлагается способ лечения дезоксинатом, который характеризуется высокой эффективностью при меньшей длительности курса лечения по сравнению с другими методами терапии.

Способ получения антибактериального препарата из листьев эвкалипта прутовидного // 2572231

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения антибактериального препарата. Способ получения антибактериального препарата путем экстракции листьев эвкалипта прутовидного петролейным эфиром с температурой кипения 40-70°C, объединяют экстракты, упаривают, высушивают и сухой остаток растворяют в 95% этиловом спирте, при определенных условиях.