Кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, способ ее получения и фармацевтическая композиция на ее основе

Изобретение относится к органической химии и касается новой кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина (гефитиниб - международное непатентованное название), которая характеризуется определенным набором дифракционных максимумов (d, Å) и их интенсивностью (I_отн, %), приведенными в п.1 формулы. Изобретение также относится к способу ее получения и к применению её для приготовления фармацевтической композиции, которая может быть использована в фармацевтической промышленности и медицине в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний. Полученная кристаллическая γ-модификация гефитиниба представляет собой порошок белого или почти белого цвета, без запаха, растворимый в диметилсульфоксиде, мало растворимый в этаноле и метаноле, практически не растворимый в воде. Технический результат - повышение биологической активности. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к органической химии и касается новой кристаллической безводной модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина (гефитиниб - международное непатентованное название), названной нами γ-модификацией, способа ее получения и фармацевтической композиции на ее основе, которая может быть использована в фармацевтической промышленности и медицине в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний.

Известны производные хиназолина и их фармацевтически приемлемые соли в качестве селективных ингибиторов протеинтирозинкиназ, способы их получения и содержащие их фармацевтические композиции для лечения онкологических заболеваний (WO 1996/033980 A1 от 31.10.1996; RU 2127263 C1 от 10.03.1999; RU 2153495 С2 от 27.07.2000; RU 2318518 С2 от 10.06.2005; RU 2008136188 А от 20.03.2010; WO 2008/125867 А2 от 23.10.2008; WO 2005/023783 A1 от 17.03.2005; WO 2005/070909 A1 от 04.08.2005).

Однако в данных патентах синтезируемые вещества не охарактеризованы на предмет их принадлежности к той или иной полиморфной модификации и не определены параметры получаемых порошков. Эти свойства в конечном итоге определяют биологическую активность получаемых субстанций.

Известны кристаллические модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина - кристаллогидраты и сольваты, такие как: моногидрат - Form 6 (WO 2006/090413 А1 от 31.08.2006), тригидрат - Form 5 (WO 2003/072108 А1 от 04.09.2003), метанол сольват - Form 2 (WO 2003/072108 А1 от 04.09.2003), диметилсульфоксид сольват - Form 3 (WO 2003/072108 А1 от 04.09.2003). Известны также фармацевтически приемлемые соли производного хиназолина, включающие соли хлористоводородной, бромистоводородной, серной, фосфорной, трифторуксусной, лимонной, малеиновой кислот (RU 2127263 С1 от 10.03.1999; WO 2010/076810 А2 от 08.07.2010), дигидрохлорида соль, дифумарата соль, ди-L-винной кислоты соль, дисульфоновой кислоты соль (ЕПВ №0823900 В1 от 27.12.2000), а также соль кофейной кислоты, соль р-кумаровой кислоты, соль феруловой кислоты и другие соли кислот (WO 2014/016848 А2 от 30.01.2014).

Однако все эти формы отличаются от заявляемой новой кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина химическим составом - наличием в химических формулах «сольватных» или «гидратных» молекул, а также молекул фармацевтически приемлемых солей.

Наиболее близкими к заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина являются кристаллические безводные формы гефитиниба [кристаллическая безводная форма - Form 1 (WO 2003/072108 А1 от 04.09.2003; WO 2010/076810 А2 от 08.07.2010) и безводная форма - производства «AFINE CEMICALS LTD» (Китай)].

Известные кристаллические безводные модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина представляют собой порошки белого или почти белого цвета, без запаха, растворимые в диметилсульфоксиде, мало растворимые в этаноле и метаноле, практически не растворимые в воде.

Известные кристаллические безводные модификации гефитиниба характеризуются физико-химическими методами анализа, такими как: ядерным магнитным резонансом (ЯМР), высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), методом рентгенофазового анализа (РФА) - наборами углов 2θ, град. - межплоскостных расстояний (d, ) и их интенсивностью (I_от = I_i/I_max × 100, %) или непосредственно рентгенограммами (получение дифрактограмм авторы вышеприведенных патентов проводили на CuКα-излучении), термоаналитическими исследованиями и другими.

Рассмотренные выше модификации гефитиниба получают из исходных компонентов или одну из другой в растворах, варьируя тип растворителей, условия приготовления растворов, а также условия выделения из органических растворителей или их смесей различными методами, такими как кристаллизация из растворов (как правило, методом замены растворителей или охлаждением) с последующим фильтрованием, промыванием и далее сушкой на воздухе, вакуумной сушкой, сушкой в роторном испарителе или сублимационной сушкой (RU 2153495 С2 от 27.07.2000; RU 2008136188 А от 20.03.2010; WO 2006/090413 А1 от 31.08.2006; WO 2003/072108 А1 от 04.09.2003; WO 2005/023781 А1 от 17.03.2005; WO 2010/076781 А2 от 08.07.2010; WO 2005/070909 А1 от 04.08.2005; WO 2014/016848 А2 от 30.01.2014).

Наиболее близким по технической сущности является способ получения кристаллических модификаций гефитиниба, заключающийся в том, что кристаллиты гефитиниба выделяют из органического растворителя методом замены растворителя или охлаждением, фильтруют, промывают и подвергают сублимационной сушке (WO 2014/016848 А2 от 30.01.2014. Авторы не указали конкретных условий сублимационной сушки).

Сходство заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина с известными кристаллическими безводными модификациями гефитиниба заключается в идентичности их химических составов.

Отличие заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, от известных кристаллических модификаций гефитиниба заключается в различии их дифрактограмм рентгенофазового анализа (РФА): определенного набора углов 2θ (град.) - межплоскостных расстояний (d, ) и их интенсивностью (I_от = I_i/I_max × 100, %).

Отличие способа получения заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина от способа получения известных кристаллических форм гефитиниба состоит в том, что кристаллиты гефитиниба после выделения из органического растворителя, фильтрования, промывки и сублимационной сушки подвергают термообработке при температурах от 70 до 125°C в течение 20-40 часов.

Отличие заявляемой фармацевтической композиции, обладающей активностью селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний на основе 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, от известной композиции (Регистр Лекарственных Средств России - Инструкция применения препарата Иресса/Iressa^®) состоит в том, что в качестве действующего вещества используют терапевтически эффективное количество новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина (гефитиниба).

Целью изобретения является получение новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, разработка способа ее получения и применение ее в фармацевтической композиции, обладающей активностью селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний.

Поставленная цель достигнута настоящим изобретением, а именно получением новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина, характеризующейся следующим набором межплоскостных расстояний (d, Å) и соответствующих им интенсивностей (I_oт=I_i/I_max×100, %):

13,786-84,0%; 12,569-53,6%; 10,789-17,4%; 10,659-13,2%; 9,513-14,3%; 8,284-12,4%; 7,914-28,1%; 7,171-29,6%; 6,840-26,2%; 6,314-44,3%; 6,243-34,1%; 5,803-62,0%; 5,599-54,8%; 5,435-39,6%; 5,376-26,2%; 5,024-32,1%; 4,808-35,2%; 4,595-100,0%; 4,418-49,1%; 4,070-28,5%; 3,972-39,5%; 3,914-26,6%; 3,707-67,8%; 3,668-88,4%; 3,630-38,5%; 3,484-58,7%; 3,424-70,5%; 3,378-92,0%; 3,256-22,4%; 3,194-27,6%; 3,148-30,3%; 3,017-20,8%; 2,909-15,2%; 2,799-16,4%; 2,727-13,8%; 2,659-15,3%; 2,653-12,9%; 2,582-11,5%; 2,506-14,8%; 2,331-13,1%; 2,287-14,3%; 2,226-13,7%; 2,145-12,0%; 2,088-12,9%; 2,033-15,4%; 1,939-12,9%; 1,867-10,2%; 1,834-9,5%; 1,826-11,0%.

Поставленная цель достигнута также разработкой способа получения новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, который состоит в том, что кристаллиты гефитиниба выделяют из органического растворителя, фильтруют, промывают и проводят их сублимационную сушку с последующей термообработкой при температурах от 70 до 125°С в течение 20-40 часов.

Кроме того, поставленная цель достигнута применением новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина для приготовления фармацевтической композиции в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний, содержащей терапевтически эффективное количество новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина и, по крайней мере, один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, вспомогательное вещество или наполнитель.

Из патентной и научно-технической литературы не известна новая кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, способ ее получения и применение ее в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний.

Нами обнаружена новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, характеризующаяся определенным набором дифракционных максимумов (d, Å) и их интенсивностью (I_oтн, %), предложены способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ для лечения онкологических заболеваний.

Заявляемая новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопроп-окси)хиназолина представляет собой порошок белого или почти белого цвета, без запаха, растворимый в диметилсульфоксиде, мало растворимый в этаноле и метаноле, практически не растворимый в воде.

Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены следующие таблицы и рисунки.

Таблица 1. Углы 2θ с максимальными интенсивностями известных кристаллических модификаций гефитиниба (Form I - безводная; Form 2 - метанол сольват; Form 3 - диметилсульфоксид сольват; Form 5 - тригидрат; Form 6 - моногидрат) (WO 2003/072108 A1 от 04.08.2003; WO 2006/090413 A1 от 31.08.2006).

Таблица 2. Углы 2θ, межплоскостные расстояния (d, Å) и их интенсивности (I_oтн, %) известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай).

Таблица 3. Углы 2θ, межплоскостные расстояния (d, Å) и их интенсивности (I_отн, %) новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина.

Рис. 1. ЯМР ¹H - спектр исходной известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай).

Рис. 2. ЯМР ¹H - спектр новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Рис. 3. Термограмма известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай).

Рис. 4. Типичная термограмма новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Рис. 5. Дифрактограмма известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай).

Рис. 6. Типичная дифрактограмма новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Рис. 7. Дифрактограмма известной кристаллической безводной модификации гефитиниба, представленная в патенте WO 2010/076810 А2 от 08.07.2010 (Fig. 2).

Для идентификации полученного вещества был проведен комплекс физико-химических методов анализа.

Первоначально методами ядерного магнитного резонанса (ЯМР ¹Н), высокоэффективной жидкостной хроматографии и термоаналитическими исследованиями была установлена идентичность химических формул известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай), аттестованной производителем, и новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопроп-окси)хиназолина.

Определение химических сдвигов исходного гефитиниба и полученного из него вещества было проведено в его насыщенном растворе в дейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-D₆) на ЯМР-спектрометре высокого разрешения VXR-400 фирмы "VARIAN" (США). Полученные данные приведены на рис. 1 и 2 соответственно. Сравнение результатов, представленных на рис. 1 [известная кристаллическая безводная модификация гефитиниба - исходная субстанция производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай)], с данными, приведенными на рис. 2 (новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина), показывает, что ЯМР - ¹Н - спектры исходного и полученного нами вещества идентичны, т.е. полученное вещество является 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Хроматографическую подвижность известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) и полученной из нее новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина определяли методом ВЭЖХ на хроматографе Shimadzu LC - 20A с детектором SPD-M20A и с колонкой длиной 150 мм, диаметром 4,6 мм, сорбентом Grace Apollo C18 "Agilent" (США) с детектированием при длине волны 247 нм. В качестве элюента использовали смесь (1:1) ацетонитрил : раствор ацетата аммония (6,00 г NH₄CH₃COO+600,00 г H₂O) при 42°С и скорости 1 мл/мин. Объем испытуемой пробы составил 5 мкл с концентрацией 1,0 мг/мл. Оказалось, что хроматограммы известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) и новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина содержат по одному пику основного компонента с характерными временами удерживания 13,763 мин и 13,929 мин соответственно. Эти величины времен удерживания в пределах ошибки определения - 0,6% одинаковы. Содержание основного вещества в исходной субстанции равно 99,83%, а в полученном из нее веществе - 99,86%).

Таким образом, проведенные методом ВЭЖХ эксперименты свидетельствуют о том, что при получении новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина распада вещества не происходит.

Термоаналитические исследования проводили на термоанализаторе STA 449 С Jupiter (NETZSCH) в токе аргона при повышении температуры 10 град/мин. В качестве держателей образцов использовали алюминиевые кюветы. Навески проб составляли 3,4-5,1 мг. Полученные данные приведены на рис. 3 и рис. 4. Видно, что кривые ДСК известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) (рис. 3) и полученной из него новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина (рис. 4) практически не различаются. До температуры ~193°С - начало процесса плавления на термогравиметрических кривых и кривых дифференциальной сканирующей калориметрии эффектов, связанных с удалением воды, органических растворителей или других процессов не наблюдаются. Кроме того, температуры плавления известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CFIEMICALS LTD» (Китай) (рис. 3) и полученной из него новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина (рис. 4) практически не различаются и равны 199,4°С и 198,4°С соответственно.

Таким образом, проведенные эксперименты свидетельствуют о том, что при получении новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопроп-окси)хиназолина распада вещества не происходит. Не происходит также образования кристаллогидратов или кристаллосольватов.

Экспериментальные результаты ядерного магнитного резонанса (ЯМР-¹H), высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и термоаналитических исследований однозначно свидетельствуют о том, что полученное вещество является 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Для подтверждения того, что полученное вещество является новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ модификацией 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, был проведен рентгенофазовый анализ (РФА).

Рентгенофазовый анализ (РФА) известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) и полученного из нее вещества проводили на дифрактометре Rigaku D/MAX-2500 (Rigaku, Япония) на CuKα-излучении (λ-1,54056 ). Полученные результаты для известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) приведены в табл. 2 и на рис. 5, а для полученного из него вещества - в табл. 3 и на рис. 6. В табл. 1 и на рис. 7 представлены литературные данные РФА безводной модификации Form 1. Сравнение полученных данных, представленных в табл. 1, 2 и табл. 3, а также на рис. 5, 7 и на рис. 6, свидетельствует о том, что полученный порошок гефитиниба является новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Таким образом, экспериментальные результаты рентгенофазового анализа однозначно свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Она характеризуется отличными от других кристаллических безводных модификаций гефитиниба: набором межплоскостных расстояний (d, ) и соответствующих им интенсивностей (I_отн, %): 13,786 - 84,0%; 12,569 - 53,6%; 10,789 - 17,4%; 10,659 - 13,2%; 9,513 - 14,3%; 8,284 - 12,4%; 7,914 - 28,1%; 7,171 - 29,6%; 6,840 - 26,2%; 6,314 - 44,3%; 6,243 - 34,1%; 5,803 - 62,0%; 5,599 - 54,8%; 5,435 - 39,6%; 5,376 - 26,2%; 5,024 - 32,1%; 4,808 - 35,2%; 4,595 -100,0%; 4,418-49,1%; 4,070-28,5%; 3,972-39,5%; 3,914-26,6%; 3,707-67,8%; 3,668-88,4%; 3,630-38,5%; 3,484-58,7%; 3,424-70,5%; 3,378-92,0%; 3,256-22,4%; 3,194-27,6%; 3,148-30,3%; 3,017-20,8%; 2,909-15,2%; 2,799-16,4%; 2,727-13,8%; 2,659-15,3%; 2,653-12,9%; 2,582-11,5%; 2,506-14,8%; 2,331-13,1%; 2,287-14,3%; 2,226-13,7%; 2,145-12,0%; 2,088-12,9%; 2,033-15,4%; 1,939-12,9%; 1,867-10,2%; 1,834-9,5%; 1,826-11,0%.

Способ получения новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина заключается в том, что кристаллиты гефитиниба выделяют из органического растворителя, фильтруют, промывают и проводят их сублимационную сушку с последующей термообработкой при температурах от 70 до 125°С в течение 20-40 часов.

Отличие способа получения заявляемой новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина от способа получения известных кристаллических безводных форм гефитиниба состоит в том, что кристаллиты гефитиниба после выделения из органического растворителя, фильтрования, промывки и сублимационной сушки их подвергают термообработке при температурах от 70 до 125°С в течение 20-40 часов.

Предложенная нами совокупность, а именно: выделение кристаллитов гефитиниба из органического растворителя, фильтрование их, промывка и сублимационная сушка с последующей термической обработкой в указанных выше условиях - приводит к получению новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Только термическая обработка при температурах от 70 до 125°С в течение 20-40 часов непосредственно известной кристаллической безводной модификации гефитиниба без выделения кристаллитов из органического растворителя, фильтрования, промывки и сублимационной сушки не позволяет получить новую, не известную ранее, кристаллическую безводную γ-модификацию 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

Сублимационная сушка кристаллитов гефитиниба необходима для получения неагрегированного порошка, состоящего из отдельных кристаллитов 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина. Предпочтительным режимом сублимационной сушки является сушка, которую проводят при температурах: на конденсаторе -48…-56°С; на продукте от -10…+30°С и остаточном давлении в камере (9-5)·10^-2 Торр в течение 22-26 ч.

Термическая обработка кристаллитов гефитиниба после выделения кристаллитов гефитиниба из органического растворителя, фильтрования их, промывки и сублимационной сушки необходима для получения новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина.

При температурах термической обработки кристаллитов гефитиниба меньше 70°С получить новую, не известную ранее, кристаллическую безводную γ-модификацию 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина в чистом виде не удается.

Увеличение температуры термической обработки кристаллитов выше 125°С нецелесообразно, так как не приводит к увеличению выхода целевого продукта - новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина и лишь удорожает процесс.

При времени термической обработки кристаллитов гефитиниба меньше 20 часов при температурах от 70 до 125°C получить новую, не известную ранее, кристаллическую безводную γ-модификацию 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина в чистом виде не удается.

Увеличение времени термической обработки кристаллитов гефитиниба более 40 часов при температурах от 70 до 125°C нецелесообразно, так как не приводит к увеличению выхода целевого продукта - новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина и лишь удорожает процесс.

Возможность осуществления предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается ими.

Пример 1. 1,00 г известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства фирмы «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) растворяют при 55°C в 140 мл органического растворителя - метанола и из полученного раствора выделяют кристаллиты гефитиниба методом замены растворителя - выливанием реакционной смеси в 410 мл дистиллированной воды, которые отфильтровывают от маточного раствора и промывают 90 мл дистиллированной воды. Полученный осадок переносят на поддон из нержавеющей стали и замораживают непосредственно на плите сублимационной камеры в течение 4 часов. Замороженный продукт подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -48…-56°С; на продукте от -10…+30°С и остаточном давлении в камере (7-5)·10^-2 Торр в течение 22 ч. Полученный продукт сублимационной сушки - легкий пушистый порошок почти белого цвета, помещали в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносили его в предварительно разогретый до 70°С сушильный шкаф и выдерживали при этой температуре в течение 20 часов. Выход продукта составил 0,94 г (94 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 6, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, представленными в табл. 3. По данным термического анализа полученное вещество характеризуется типичными термограммами, представленными на рис. 4 и совпадающими с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Величина эндотермического эффекта плавления равна (134,7±0,4) Дж/г при температуре (198,3±0,5)°С. Кроме того, на термогравиметрической кривой и кривой дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) полученного вещества вплоть до температуры плавления тепловых эффектов и потери массы не наблюдается, т.е. полученное вещество не содержит дополнительных молекул «сольватных» или «гидратных», а также молекул фармацевтически приемлемых солей.

Пример 2. 1,50 г известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства фирмы «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) растворяют при 50°С в 210 мл органического растворителя - ацетона и из полученного раствора выделяют кристаллиты гефитиниба методом замены растворителя - выливанием реакционной смеси в 610 мл дистиллированной воды, которые отфильтровывают от маточного раствора и промывают 130 мл дистиллированной воды. Полученный осадок замораживают перенесением в предварительно охлажденный и наполненный жидким азотом (Т_кип=-196°С) поддон из нержавеющей стали. Замороженный продукт подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -48…-56°С; на продукте от -196…+30°С и остаточном давлении в камере (9-7)·10^-2 Торр в течение 24 ч. Полученный продукт сублимационной сушки - легкий пушистый порошок почти белого цвета, помещали в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносили его в предварительно разогретый до 125°С сушильный шкаф и выдерживали при этой температуре в течение 40 часов. Выход продукта составил 1,39 г (92,7 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 6, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, представленными в табл. 3. По данным термического анализа полученное вещество характеризуется типичными термограммами, представленными на рис. 4 и совпадающими с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Величина эндотермического эффекта плавления равна (134,9±0,4) Дж/г при температуре (198,5±0,5)°С. Кроме того, на термогравиметрической кривой и кривой ДСК полученного вещества вплоть до температуры плавления тепловых эффектов и потери массы не наблюдается, т.е. полученное вещество не содержит дополнительных молекул «сольватных» или «гидратных», а также молекул фармацевтически приемлемых солей.

Пример 3. 1,00 г известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства фирмы «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) растворяют при 55°C в 140 мл органического растворителя - этанола и из полученного раствора выделяют кристаллиты гефитиниба методом замены растворителя - выливанием реакционной смеси в 410 мл дистиллированной воды, которые отфильтровывают от маточного раствора и промывают 90 мл дистиллированной воды. Полученный осадок переносят на поддон из нержавеющей стали и замораживают непосредственно на плите сублимационной камеры в течение 4 часов. Замороженный продукт подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -48…-56°C; на продукте от -10…+30°C и остаточном давлении в камере (6-3)·10^-2 Торр в течение 23 ч. Полученный продукт сублимационной сушки - легкий пушистый порошок почти белого цвета, помещали в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносили его в предварительно разогретый до 70°C сушильный шкаф и выдерживали при этой температуре в течение 40 часов. Выход продукта составил 0,95 г (95 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 6, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, представленными в табл. 3. По данным термического анализа полученное вещество характеризуется типичными термограммами, представленными на рис. 4 и совпадающими с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Величина эндотермического эффекта плавления равна (134,9±0,4) Дж/г при температуре (198,4±0,5)°С. Кроме того, на термогравиметрической кривой и кривой ДСК полученного вещества вплоть до температуры плавления тепловых эффектов и потери массы не наблюдается, т.е. полученное вещество не содержит дополнительных молекул «сольватных» или «гидратных», а также молекул фармацевтически приемлемых солей.

Пример 4. 2,00 г известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства фирмы «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) растворяют при 50°С в 300 мл органического растворителя - ацетона и из полученного раствора выделяют кристаллиты гефитиниба методом замены растворителя - выливанием реакционной смеси в 920 мл дистиллированной воды, которые отфильтровывают от маточного раствора и промывают 250 мл дистиллированной воды. Полученный осадок замораживают перенесением в предварительно охлажденный и наполненный жидким азотом (Т_кип=-196°С) поддон из нержавеющей стали. Замороженный продукт подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -48…-55°С; на продукте от -196…+30°С и остаточном давлении в камере (8-6)·10^-2 Торр в течение 26 ч. Полученный продукт сублимационной сушки - легкий пушистый порошок почти белого цвета, помещали в химический термостойкий стакан вместимостью 400 мл, вносили его в предварительно разогретый до 125°С сушильный шкаф и выдерживали при этой температуре в течение 20 часов. Выход продукта составил 1,86 г (93,0 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 6, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, представленными в табл. 3. По данным термического анализа полученное вещество характеризуется типичными термограммами, представленными на рис. 4 и совпадающими с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина. Величина эндотермического эффекта плавления равна (135,1±0,4) Дж/г при температуре (198,6±0,5)°С. Кроме того, на термогравиметрической кривой и кривой ДСК полученного вещества вплоть до температуры плавления тепловых эффектов и потери массы не наблюдается, т.е. полученное вещество не содержит дополнительных молекул «сольватных» или «гидратных», а также молекул фармацевтически приемлемых солей.

Пример 5. Фармацевтическая композиция. Для приготовления 10,00 г известной композиции, включающей в качестве действующего вещества кристаллическую безводную модификацию гефитиниба и вспомогательные вещества в соотношении (мас. %):

Безводная модификация гефитиниба	50,0
Микрокристаллическая целлюлоза	10,0
Лактоза моногидрат	32,7
Кроскармеллоза натрия	4,0
Повидон (К29-32)	2,0
Лаурилсульфат натрия	0,3
Магний стеарат	1,0

5,00 г порошка новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′- фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина смешивают в течение 5 минут в керамической ступке с вспомогательными веществами: 3,27 г лактозой моногидратом (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 1,00 г микрокристаллической целлюлозы (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,40 г кроскармеллозы натрия (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,20 г повидона (К29-32) (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,03 г лаурилсульфата натрия (по фармакопее США и Европейской фармакопее) и 0,10 г магния стеарата (по ТУ 6-09-16-1533-90). Полученную смесь подвергали физико-химическим и биологическим методам анализа. По данным РФА в полученной смеси присутствует вещество, которое характеризуется набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой, не известной ранее, кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, представленными в табл. 3.

Аналогичным способом и идентичным по составу была приготовлена композиция на основе известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай). По данным РФА в полученной смеси присутствует вещество, которое характеризуется набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для известной кристаллической безводной модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай), представленными в табл. 2.

Биологические эксперименты проводили на кроликах-самцах массой 2,0-2,5 кг. Для получения надежных результатов в параллельных сериях опытов использовали не менее 5 кроликов. Определение времени появления гефитиниба в крови проводили методом in vivo при пероральном введении композиции с последующим забором плазмы из ушной раковины. Во всех случаях количество вводимого в животное действующего вещества составляло 6,0 мг смеси (3,0 мг гефитиниба). Оказалось, что для композиции, содержащей новую, не известную ранее, кристаллическую безводную γ-модификацию 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина время появления гефитиниба в крови кроликов равно 14±3 мин, а для известной композиции, содержащей в качестве действующего вещества известную кристаллическую безводную модификацию гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) - 23±3 мин.

Таким образом, нами обнаружена новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, предложены способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции для лечения онкологических заболеваний.

Полученная новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина характеризуется отличным от известных кристаллических безводных модификаций гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай) и кристаллической безводной модификации Form 1, набором межплоскостных расстояний (d, Å) и соответствующих им интенсивностей (I_отн, %): 13,786-84,0%; 12,569-53,6%; 10,789-17,4%; 10,659-13,2%; 9,513-14,3%; 8,284-12,4%; 7,914-28,1%; 7,171-29,6%; 6,840-26,2%; 6,314-44,3%; 6,243-34,1%; 5,803-62,0%; 5,599-54,8%; 5,435-39,6%; 5,376-26,2%; 5,024-32,1%; 4,808-35,2%; 4,595-100,0%; 4,418-49,1%; 4,070-28,5%; 3,972-39,5%; 3,914-26,6%; 3,707-67,8%; 3,668-88,4%; 3,630-38,5%; 3,484-58,7%; 3,424-70,5%; 3,378-92,0%; 3,256-22,4%; 3,194-27,6%; 3,148-30,3%; 3,017-20,8%; 2,909-15,2%; 2,799-16,4%; 2,727-13,8%; 2,659-15,3%; 2,653-12,9%; 2,582-11,5%; 2,506-14,8%; 2,331-13,1%; 2,287-14,3%; 2,226-13,7%; 2,145-12,0%; 2,088-12,9%; 2,033-15,4%; 1,939-12,9%; 1,867-10,2%; 1,834-9,5%; 1,826-11,0%.

Кроме того, новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопроп-окси)хиназолина отличается повышенной биологической активностью в составе фармацевтической композиции по сравнению с действием известной кристаллической безводной модификации гефитиниба - исходной субстанции производства «AFINE CHEMICALS LTD» (Китай).

Из вышеизложенного можно сделать вывод о том, что заявляемая новая, не известная ранее, кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, способ ее получения и применение ее для приготовления фармацевтической композиции для лечения онкологических заболеваний, содержащей в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ полученную кристаллическую модификацию, являются новыми и удовлетворяют критериям «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

[1] - Патент WO 2003/072108 А1 от 4.08.2003 г;

[2] - Патент WO 2006/090413 А1 от 31.08.2006 г.

1. Кристаллическая безводная γ-модификация 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина, характеризующаяся следующим набором межплоскостных расстояний (d, Ǻ) и соответствующих им интенсивностей: (I_отн, %): 13,786 - 84,0%; 12,569 - 53,6%; 10,789 - 17,4%; 10,659 - 13,2%; 9,513 - 14,3%; 8,284 - 12,4%; 7,914 - 28,1%; 7,171 - 29,6%; 6,840 - 26,2%; 6,314 - 44,3%; 6,243 - 34,1%; 5,803 - 62,0%; 5,599 - 54,8%; 5,435 - 39,6%; 5,376 - 26,2%; 5,024 - 32,1%; 4,808 - 35,2%; 4,595 - 100,0%; 4,418 - 49,1%; 4,070 - 28,5%; 3,972 - 39,5%; 3,914 - 26,6%; 3,707 - 67,8%; 3,668 - 88,4%; 3,630 - 38,5%; 3,484 - 58,7%; 3,424 - 70,5%; 3,378 - 92,0%; 3,256 - 22,4%; 3,194 - 27,6%; 3,148 - 30,3%; 3,017 - 20,8%; 2,909 - 15,2%; 2,799 - 16,4%; 2,727 - 13,8%; 2,659 - 15,3%; 2,653 - 12,9%; 2,582 - 11,5%; 2,506 - 14,8%; 2,331 - 13,1%; 2,287 - 14,3%; 2,226 - 13,7%; 2,145 - 12,0%; 2,088 - 12,9%; 2,033 - 15,4%; 1,939 - 12,9%; 1,867 - 10,2%; 1,834 - 9,5%; 1,826 - 11,0%.

2. Способ получения кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина по п. 1, характеризующийся тем, что растворяют 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин в органическом растворителе, выделяют кристаллиты из органического растворителя методом замены растворителя с последующим фильтрованием, промывкой и сублимационной сушкой, затем подвергают термообработке при температурах от 70 до 125°C в течение 20-40 часов.

3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что сублимационную сушку проводят при температурах: на конденсаторе -48…-56°C; на продукте от -10…+30°C и остаточном давлении в камере (9-5)·10^-2 Торр в течение 22-26 ч.

4. Применение кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина по п. 1 для приготовления фармацевтической композиции для лечения онкологических заболеваний, содержащей в качестве селективного ингибитора тирозинкиназ терапевтически эффективное количество кристаллической безводной γ-модификации 4-(3′-хлор-4′-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолина по п. 1 и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, вспомогательное вещество или наполнитель.