Способ прогнозирования достоверности ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином у пациентов с хроническим гепатитом с, генотипом 1в

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

C12Q1/68 - использующие нуклеиновые кислоты

Владельцы патента RU 2578030:

Федеральное государственное казенное учреждение Главный клинический военный госпиталь ФСБ России (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию у пациентов с хроническим гепатитом С (ХГС), генотипом 1в. Для прогнозирования достоверности ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином у пациентов с хроническим гепатитом С, генотипом 1в, осуществляют генетическое исследование крови на полиморфизм гена IL28B и определяют групповую принадлежность крови. Прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 100% случаев у пациентов с группой крови 0αβ (I) и полиморфизмом гена IL28B в rs12979860 с генотипом С/С и генотипом Т/Т в rs8099917. Прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 80% случаев у пациентов с группой крови Аβ (II) и при однонуклеотидной замене цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs12979860 гена IL28B. При однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в rs8099917 гена IL28B устойчивый вирусологический ответ прогнозируют только у пациентов с группой крови Вα (III). Использование изобретения позволяет повысить достоверность и эффективность прогнозирования стандартной противовирусной терапии. 2 табл.

Способ относится к медицине, в частности к прогнозированию ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином.

Хронические вирусные поражения печени являются одной из главных причин роста смертности населения в Российской Федерации и за рубежом от цирроза печени (ЦП) и гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) (А.А. Яковлев и соавт., 2002; И.В. Шахгильдян и соавт. 2003; Alberti A. et al., 2004).

Длительная и дорогостоящая противовирусная терапия (ПВТ) с широким спектром серьезных побочных эффектов (цитопения, неврологические и психические расстройства, аутоиммунные нарушения и др.) далеко не у всех эффективна, особенно при 1-м генотипе вируса гепатита С (ВГС), при котором результативность редко превышает 40% (Jansen D. et al., 2006, Mangia A et al., 2005, Zenzem S., et al., 2006). В Российской Федерации преобладает 1 генотип ВГС и составляет около 60% инфицированных (Simmonds P. et al., 2002, Ж.Ж. Байжанова и соавт., 2011).

На эффективность противовирусной терапии влияют факторы вируса и факторы хозяина. К ним относятся: возраст, пол, масса тела, инсулинорезистентность, фиброз, вирусная нагрузка, ко-инфекция. Коррекция модифицируемых факторов перед началом противовирусной терапии увеличивает ее эффективность.

Выявление детерминант противовирусного ответа имеет большое значение для врача, которому необходимы критерии прогноза эффективности лечения, и пациента, который перед началом стандартной терапии должен быть информирован о соотношении вероятности устойчивого вирусологического ответа и риска развития побочных воздействий используемых противовирусных препаратов.

В настоящее время большое значение придают генетическим особенностям организма, прежде всего состоянию генов, регулирующих иммунный ответ организма на вирус. Точно установлено, что изменения в кластере генов цитокинов (IL28A, IL28B, IL29), локализованных на 19 хромосоме (19q13) человека, являются основным фактором, определяющим особенности противовирусной защиты организма. Наибольшее значение имеет полиморфизм в регионе, примыкающем к гену интерлейкина 28 В (IL28B) (Ge D. и соавт. 2009).

В 2009 г. Ge D. и соавт. выявили в 19 хромосоме (19q13) человека простую нуклеотидную последовательность на расстоянии 3 килобаз от гена IL28B, которая, с учетом локализации, была обозначена как rs12979860. В зависимости от нуклеотида, располагающегося в данном локусе, выделены 2 аллеля: rs12979860 С (цитозин) и rs12979860 Τ (тимин). У пациентов с генотипом С/С в rs12979860 частота устойчивого вирусологического ответа была в 2 раза выше, чем у пациентов с генотипом Т/Т. Генотип С/С был предиктором устойчивого ответа независимо от вирусной нагрузки, стадии фиброза и этнической принадлежности (Ge D., Fellay J., Thompson A. et al. Genetic variation in IL28B predicts hepatitis С treatment-induced viral clearance. Nature, 2009, 461, 399-401; Т.Н. Лопаткина, И.С. Кудлинский. Роль полиморфизмов гена интерлейкина 28 В в оценке эффективности противовирусной терапии хронического гепатита С. Клиническая гепатология, 2011, 2, 28-38; А.В. Лапшин и соавт. Влияние генетических полиморфизмов гена IL28B на эффективность противовирусной терапии хронического гепатита С стандартным интерфероном-α. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии, 2013, Т23, 1, с. 23).

Тогда же в 2009 г. Y. Tanaka и соавт. обнаружили в 19 хромосоме вблизи гена IL28B дополнительную полинуклеотидную последовательность rs8099917. В зависимости от нуклеотида, располагающегося в данном локусе, выделены 2 аллеля: rs8099917 Τ (тимин), rs8099917 G (гуанин). Генотип Т/Т в rs8099917 связан со спонтанным разрешением инфекции, а аллель G в rs8099917 ассоциирует с очень низким уровнем ответа на терапию пегилированным интерфероном и рибавирином (Grebely J. At 2009, Rauch Α. At all, 2010). Табл. 1.

Таблица 1
Генетические полиморфизмы, ассоциированные с устойчивостью к лечению хронического гепатита С интерфероном и рибавирином
Полиморфизм: ген замена	Генотип	Возможные проявления полиморфизма
ИЛ 28 С>T {rs12979860}	С/С	- Возможно спонтанное разрешение инфекции - Около 80% пациентов отвечают на лечение
ИЛ 28 С>T {rs12979860}	С/Т	20-40% пациентов с ХГС отвечают на лечение
т/т	20-25% пациентов с ХГС отвечают на лечение
ИЛ 28 T>G {rs8099917}	т/т	Возможно спонтанное разрешение инфекции
ИЛ 28 T>G {rs8099917}	G/T	Сниженный ответ на противовирусную терапию
G/G	Низкий ответ на противовирусную терапию

Несмотря на множество известных факторов прогноза эффективности ПВТ, включая генетические, которые учитываются для определения исхода заболевания и ответа на стандартную противовирусную терапию, в лечении хронического гепатита С (ХГС), генотипа 1в, ответ на ПВТ сохраняется невысоким (Jansen D. et al., 2006, Mangia A et al., 2005, Zenzem S., et al., 2006).

Цель данного изобретения - повысить достоверность генетических факторов в прогнозе противовирусного ответа на стандартную противовирусную терапию у пациентов с хроническим гепатитом С, генотипом 1в.

По сведениям авторов ближайшим аналогом предлагаемому изобретению является определение генетического полиморфизма в гене IL28B как фактора прогноза ответа у пациентов с ХГС, генотипом 1в, на стандартную противовирусную терапию (Ge D., Fellay J., Thompson A. et al. Genetic variation in IL28B predicts hepatitis С treatment-induced viral clearance. Nature, 2009, 461, 399-401; A.B. Лапшин и соавт. Влияние генетических полиморфизмов гена IL28B на эффективность противовирусной терапии хронического гепатита С стандартным интерфероном-α. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии, 2013. - T 23. - N1. - C. 23).

С давних времен ученые искали связь между групповой принадлежностью крови по системе ABO и заболеваниями. В настоящее время продемонстрирована ассоциация групп крови ABO с очень многими заболеваниями. Например, лица с группой крови Αβ(ΙΙ) чаще заболевают раком, имеют в крови сниженный уровень интерферона, менее устойчивы к оспе; лица, имеющие группу крови 0αβ (I), более подвержены к язве желудка и двенадцатиперстной кишки, имеют преимущество в иммунном ответе на сифилис, лица с группой крови Βα (III) чаще подвержены опухолям кишечника («Группы крови человека» С.И. Донсков, В.А. Мороков, руководство по иммуносерологии, 2011). Отмечена положительная корреляция между группой крови Αβ (II) и носительством вируса гепатита С у доноров неякутов (С.И. Донсков, Л.Е. Давыдова, журнал «Вестник службы крови России» 2013. - N2. - C. 43-46). В исследовательской работе, выполненной Shavakhi Α., Hajalikhani M., 2012 г. показано, что у пациентов с ХГС не с группой крови 0αβ (I) выше стадия фиброза.

По результатам нашего исследования, проведенного в ГКВГ ФСБ России, выявлена взаимосвязь между групповой принадлежностью крови, полиморфизмом гена IL28B и противовирусным ответом на стандартную противовирусную терапию.

Предшественником групповых субстанций А и В является вещество Н. По химической природе групповые антигены крови являются полисахаридами, белками или сложными комплексами белков, сахаров липидов. На первом этапе биосинтеза групповых антигенов к веществу предшественнику под действием фукозилтрансферазы присоединяются остатки фукозы, в результате чего образуется вещество Н. Последующее гликозилирование субстанции H под действием А и В трансфераз приводит к образованию группоспецифических субстанций А и В соответственно. У выделителей группоспецифических субстанций имеется активный ген секретор (Se), или FUT2, кодирующий синтез фукозилтрансферазы. Контролирующий ген синтеза вещества H и ген секретора фукозилтрансферазы расположены на 19 хромосоме (19q13) человека («Группы крови человека», С.И. Донсков, В.А. Мороков, руководство по иммуносерологии, 2011).

Расположение локуса гена вещества Н, предшественника антигенов А и В системы ABO, гена секретора фукозилтрансферазы, обеспечивающего образование растворимых форм вещества H и гена полиморфизма IL28B на хромосоме 19 (19ql3) человека, дает предположение о наличии у них одной регуляторной зоны.

Результаты исследования

В отделении гепатологии Главного клинического военного госпиталя ФСБ России проведено проспективное исследование по изучению устойчивого вирусологического ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином у 52 пациентов с ХГС, генотипом 1в, в зависимости от групповой принадлежности крови и полиморфизма гена IL28B. Устойчивый вирусологический ответ (УВО) оценивался через 6 месяцев после курса противовирусной терапии в условиях реального времени методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с определением вирусной нагрузки из расчета 10 МЕ/мл (табл. 2).

Таблица 2
Показатели вирусологического ответа в зависимости от полиморфизма IL28 В и групповой принадлежности крови
№п/п	Группа крови	Полиморфизм ИЛ-28 В	УВО
rs12979860	rs8099917
1	2	3	4	5
1	0αβ (I)	С/С	Т/Т	ДА
2	0αβ (I)	С/С	Т/Т	ДА
3	0αβ (I)	С/С	Т/Т	ДА
4	0αβ (I)	С/С	Т/Т	ДА
5	0αβ (I)	С/С	Т/Т	ДА
6	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
7	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
8	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
9	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
10	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
11	0αβ (I)	Т/Т	T/G	НЕТ
12	0αβ (I)	С/Т	T/G	НЕТ
13	0αβ (I)	С/Т	Т/Т	НЕТ
14	0αβ (I)	С/Т	Т/Т	НЕТ
15	0αβ (I)	С/Т	Т/Т	НЕТ
16	0αβ (I)	С/Т	Т/Т	НЕТ
17	0αβ (I)	С/Т	Т/Т	НЕТ
18	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	ДА
19	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	ДА
20	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	ДА
21	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	ДА
22	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
23	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
24	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
25	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
26	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
27	Αβ (II)	С/Т	T/G	НЕТ
28	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	НЕТ
29	Αβ (II)	Т/Т	Т/Т	НЕТ
30	Αβ (II)	С/С	Т/Т	НЕТ
31	Αβ (II)	С/Т	Т/Т	НЕТ
32	Βα (III)	С/С	Т/Т	ДА
33	Βα (III)	С/Т	T/G	ДА
34	Βα (III)	С/Т	T/G	ДА
35	Βα (III)	С/Т	T/G	ДА
36	Βα (III)	С/Т	T/G	ДА
1	2	3	4	5
37	Βα (III)	C/T	T/G	ДА
38	Βα (III)	C/T	T/G	ДА
39	Βα (III)	C/T	T/G	ДА
40	Βα (III)	C/T	T/G	ДА
41	Βα (III)	C/T	T/G	НЕТ
42	Βα (III)	C/C	T/T	НЕТ
43	Βα (III)	C/T	T/T	НЕТ
44	Βα (III)	C/C	T/T	НЕТ
45	Βα (III)	C/T	T/T	НЕТ
46	AB (IV)	T/T	T/T	НЕТ
47	AB (IV)	T/T	T/T	НЕТ
48	AB (IV)	T/T	T/T	НЕТ
49	AB (IV)	C/T	T/T	НЕТ
50	AB (IV)	C/T	T/T	НЕТ
51	AB (IV)	C/C	T/T	ДА
52	AB (IV)	C/T	T/T	ДА

Изложенным способом проведено исследование у 52 пациентов, что подтверждено актом внедрения №528/14 от 15.05.14 г. «Группа крови - фактор прогноза устойчивого вирусологического ответа на стандартную противовирусную терапию у больных с хроническим гепатитом С, генотипом 1в», утвержденным начальником ГКВГ ФСБ России». В результате исследования была впервые выявлена корреляция между групповой принадлежностью крови, полиморфизмом гена IL28B и ответом на противовирусную терапию у пациентов с хроническим гепатитом С, генотипом 1в. Впервые выявлено, что: пациенты с группой крови 0αβ (I) и полиморфизмом гена IL28B с генотипом С/С в локусе rs12979860 и генотипом Т/Т в локусе rs8099917 имели ответ на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию в 100% случаев, при однонуклеотидной замене цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs12979860 противовирусный ответ был чаще у пациентов с группой крови Αβ (II) и составил 80%, при однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в локусе rs8099917 ответ на противовирусную терапию был только у пациентов с группой крови Βα (III).

Сущность предлагаемого нами способа заключается в следующем. Пациентам с хроническим гепатитом С, генотипом 1в, через 6 месяцев после курса стандартной противовирусной терапии проведено генетическое исследование на полиморфизм гена IL28B, определена групповая принадлежность крови, ПЦР с определением вирусной нагрузки гепатита С из расчета 10 МЕ/мл и оценен устойчивый вирусологический ответ на противовирусную терапию. При наличии у пациентов с группой крови 0αβ (I) и полиморфизмом в гене IL28B с генотипом С/С в локусе rs12979860 и генотипом Т/Т в локусе rs8099917 устойчивый вирусологический ответ наблюдался в 100% случаев, при однонуклеотидной замене цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs12979860 у пациентов с группой крови Аβ (II) устойчивый вирусологический ответ составил 80%, при однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в локусе rs8099917 устойчивый вирусологический ответ был только у пациентов с группой крови Вα (III).

Существенные признаки, характеризующие изобретение:

1) проводят генетическое исследование на полиморфизм гена IL28B;

2) определяют групповую принадлежность крови в сочетании с полиморфизмом гена IL28B;

3) прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 100% случаев у пациентов с группой крови 0αβ (I) и полиморфизмом гена IL28B в rs12979860 с генотипом С/С и генотипом Т/Т в rs8099917;

4) прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 80% случаев у пациентов с группой крови Аβ (II) и однонуклеотидной заменой цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs12979860 гена IL28B;

5) прогнозируют устойчивый вирусологический ответ при однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в локусе rs8099917 гена IL28B только у пациентов с группой крови Вα (III).

Признаки 2, 3, 4, 5 являются отличительными.

Основные преимущества, характеризующие изобретение:

- доступность метода;

- невысокие материальные затраты;

- возможность с большой достоверностью прогнозировать ответ на дорогостоящую, с множеством побочных эффектов, противовирусную терапию;

- однократность исследования, ввиду неизменности в течение всей жизни, как группой принадлежности крови, так и полиморфизмом в гене IL28B.

В результате проведенного исследования нами впервые выявлена взаимосвязь между групповой принадлежностью крови и полиморфизмом гена IL28, влияющая на результативность противовирусной терапии.

С марта 2014 г., после завершения обследования 52 больных, данный способ используется в гепатологическом отделении госпиталя, при обследовании первичных пациентов, с целью принятия решения о назначении противовирусной терапии. За истекший период времени проведено обследование 30-ти пациентов с ХГС, генотипом 1в, противовирусная терапия назначена 10-ти пациентам, 20 пациентов будут принимать гепатопротективную терапию с ожиданием назначения трехкомпонентной или безинтерфероновой терапии.

Использование полученных результатов позволяет более дифференцированно проводить отбор пациентов на стандартную противовирусную терапию, выделять группу пациентов с ожиданием трехкомпонентной или безинтерфероновой терапии. Способ позволяет избавить значительное количество пациентов от длительной, необоснованной, с множеством побочных эффектов стандартной противовирусной терапии, существенно снизить материальные затраты.

Таким образом, предлагаемый нами способ прогнозирования достоверности ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию отличается от других способов прогноза эффективности противовирусной терапии тем, что у пациентов с ХГС, генотипом 1в, исследуется полиморфизм гена IL28B в сочетании с групповой принадлежностью крови. При сочетании группы крови 0αβ (I) и IL28B в локусе rs12979860 с генотипом С/С и генотипом Т/Т в rs8099917, при однонуклеотидной замене цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs 12979860 у пациентов с группой крови Αβ (II) и при однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в rs8099917 IL28B у пациентов с группой крови Βα (III) вероятность противовирусного ответа значительно выше.

Способ прогнозирования достоверности ответа на стандартную двухкомпонентную противовирусную терапию пегилированными интерферонами и рибавирином у пациентов с хроническим гепатитом С, генотипом 1в, включающий генетическое исследование крови на полиморфизм гена IL28B, отличающийся тем, что проводят определение групповой принадлежности крови в сочетании с полиморфизмом гена IL28B, при этом прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 100% случаев у пациентов с группой крови 0αβ (I) и полиморфизмом гена IL28B в rs12979860 с генотипом С/С и генотипом Т/Т в rs8099917, прогнозируют устойчивый вирусологический ответ в 80% случаев у пациентов с группой крови Аβ (II) и при однонуклеотидной замене цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs12979860 гена IL28B, а при однонуклеотидной замене тимина на гуанин (T>G) в rs8099917 гена IL28B устойчивый вирусологический ответ прогнозируют только у пациентов с группой крови Вα (III).

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики синдрома неалкогольного стеатогепатита, включающий исследование слюны больного, отличающийся тем, что к капле слюны больного добавляют каплю кристаллообразующего вещества - 3% спиртового раствора хлорида меди, выдерживают полученный препарат в течение 24 часов в горизонтальном положении при температуре 20-25°C, влажности 50-70%, вдали от прямых солнечных лучей и нагревательных приборов и исследуют под микроскопом, при этом наличие и выраженность неалкогольного стеатогепатита определяют присутствием и количеством в микроскопическом препарате аморфных темно-желтых масс с наложением на кристаллы в виде «метелок» или «пучков», а отсутствие неалкогольного стеатогепатита определяют наличием в микроскопическом препарате кристаллов в виде «метелок» или «пучков» без наложения аморфных темно-желтых масс.

Способ оценки состояния здоровья женщин при прогнозировании физиологического и осложненного течения беременности на ранних сроках гестации // 2578028

Изобретение относится к микроэкологии и иммунологии и может использоваться для интегральной оценки состояния здоровья женщин при прогнозировании физиологического и осложненного течения беременности на ранних сроках гестации.

Способ экспресс-определения резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови человека // 2578027

Изобретение относится к клинической биохимии и представляет собой способ экспресс-определения резистентности к окислению липопротеинов низкой плотности сыворотки крови путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с последующей турбидиметрической регистрацией смеси, отличающийся тем, что обработку сыворотки или плазмы крови человека ведут 15% раствором ПВП-12600 в 0,01М Трис-HCl-буфере, pH 7,4, содержащем 0,15М NaCl, при объемном соотношении сыворотка : ПВП (1 : 6), инкубируют 10 и 20 мин при комнатной температуре, измеряют светопоглощение спектрофотометрически при длине волны 450 нм в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность между ними и при отсутствии разницы констатируют нормальную резистентность к окислению ЛНП в сыворотке крови человека.

Портативный диагностический прибор и способ его применения с электронным устройством и диагностическим картриджем при диагностическом экспресс-исследовании // 2578023

Группа изобретений относится к диагностическим экспресс-исследованиям. Описан портативный диагностический прибор, содержащий порт для приема с возможностью извлечения диагностического картриджа, элемент, соединенный с электронным устройством, датчики для регистрации данных исследования биологического или природного образца после реакции с реактивами, содержащимися в картридже.

Способ прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров // 2577733

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для прогнозирования перехода острого течения субклинического мастита лактирующих коров в клинически выраженное, наступление самовыздоровления или перехода его в хроническое течение.

Способ оценки эффективности противотуберкулезной терапии у пациенток с генитальным туберкулезом // 2577723

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки эффективности терапии генитального туберкулеза, включающий контрольные иммунологические обследования, отличающийся тем, что по окончании интенсивной фазы терапии проводят 1-й контроль, который включает определение индекса стимуляции интерферона-гамма (ИФН-γ) с туберкулином очищенным (ППД-Л), определение уровней специфических иммуноглобулинов (IgA, IgM) к микобактерии туберкулеза (МБТ) методом иммуноферментного анализа (ИФА), а 2-й контроль проводят через 6-11 месяцев после окончания основного курса терапии, при этом в случае если индекс стимуляции ИФН-γ с ППД-Л по окончании интенсивной фазы противотуберкулезной терапии был выше 7, 8 - только по ИФН-γ с ППД-Л, в случае если оптическая плотность IgM к МБТ была более 0,600 - только по IgM к МБТ, в случае если оптическая плотность при IgA к МБТ была более 0,450 - контроль проводят только по IgA к МБТ; при этом по результатам контрольных исследований рекомендуют продление, или коррекцию, или окончание терапии.

Способ определения литической активности множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности // 2577719

Изобретение относится к клинической биохимии и представляет собой способ определения литической активности множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности (ммЛНП) путем обработки сыворотки крови 20% раствором поливинилпирролидона с молекулярной массой 35000 (ПВП-35000) при объемном соотношении сыворотка: ПВП (1:0,84), инкубируют 10 мин при комнатной температуре, агрегаты ммЛНП осаждают центрифугированием, декантируют, осадок ммЛНП растворяют в буфере без ПВП, добавляют аутологичные отмытые стандартизованные эритроциты человека, инкубируют в течение 48 часов при комнатной температуре, измеряют оптическую плотность на фотометре при длине волны 620 нм, по калибровочному графику определяют степень лизиса и при лизисе более 10% констатируют повышенную литическую активность ммЛНП.

Способ определения количества воды, поступившей с пищей в организм человека // 2577707

Изобретение относится к диагностической медицине, а именно к измерению водного баланса организма человека. Для этого определяют количество воды, поступившей с пищей в организм человека к моменту времени ti, как величину, пропорциональную общему количеству глюкозы, поступившей в кровь человека к моменту времени ti, определяемому как сумма упомянутого количества глюкозы, поступившей в кровь человека за каждый интервал времени от первого - Δt1 до i-го - Δti.

Способ определения количества воды, поступившей с пищей в организм человека // 2577707

Способ получения положительного контроля стандартного образца иммуноглобулина человека для определения антикомплементарной активности препаратов иммуноглобулинов человека, и стандартный образец иммуноглобулина человека для определения антикомплементарной активности препаратов иммуноглобулинов человека // 2577703

Группа изобретений относится к биотехнологии, в частности, к стандартным образцам иммуноглобулина человека, используемым для определения антикомплементарной активности иммуноглобулинов человека и способам их получения.

Способ идентификации нативных пар фрагментов днк или рнк, присутствующих в одних и тех же живых клетках // 2578009

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу селективного подавления амплификации в ходе ПЦР фрагментов ДНК. Добавляют в реакционную смесь блокирующий олигонуклеотид в концентрации, которая превышает концентрацию праймеров, используемых для ПЦР, не менее чем в 2 раза.

Набор последовательности праймеров и аллель-специфических зондов для одновременной генодиагностики двух мутантных аллелей, вызывающих cvm и blad у крупного рогатого скота // 2577990

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к набору последовательностей праймеров и аллель-специфических зондов для одновременной генодиагностики двух мутантных аллелей, вызывающих комплекс аномалий позвоночника (CVM) и дефицит лейкоцитарной адгезии (BLAD) у крупного рогатого скота.

Генетические полиморфизмы при возрастной дегенерации желтого пятна // 2577726

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования у пациента с влажной возрастной дегенерацией желтого пятна (AMD) повышенной вероятности эффекта от лечения высокоаффинным антителом против VEGF, в частности, ранибизумабом.

Детекция aad-1 объекта das-40278-9 // 2577143

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу определения зиготности растения кукурузы, содержащего трансгенную конструкцию, содержащую ген арилоксиалканоатдиоксигеназы, где указанный способ включает: получение образца геномной ДНК от указанного растения кукурузы; получение приведенного в контакт образца посредством контактирования указанного образца ДНК с первым праймером и вторым праймером и флуоресцентным зондом, определение зиготности указанного растения кукурузы, а также к набору для его осуществления.

Способ поиска белков-мишеней, запускающих процесс канцерогенеза, в образцах тканей индивидуального пациента, для последующей противоопухолевой фармакотерапии // 2577107

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу поиска белков-мишеней, запускающих процесс канцерогенеза, в образцах тканей индивидуального пациента, для последующей противоопухолевой фармакотерапии.

Набор с лиофилизированными праймерами для пцр-диагностики гена резус-фактора плода по крови беременной женщины // 2576780

Изобретение относится к области медицины и предназначено для ПЦР-диагностики гена резус-фактора плода по крови беременной женщины. Предложен набор с лиофилизированными праймерами, содержащий готовые к амплификации реакционные пробирки с лиофилизированными праймерами и праймерами-зондами для экзонов RHD-5 и RHD-7 гена RHD.

Генетические маркеры, ассоциированные с засухоустойчивостью кукурузы // 2575605

Изобретение относится к биохимии. Описан способ получения кукурузного растения с улучшенной оптимизаций водопотребления и растение, полученное таким способом.

Терапевтическая доставка и мониторинг с использованием представляющего интерес гена белка, слитого с репортером, и оптического отображения // 2575601

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ мониторинга экспрессии представляющего интерес гена полипептида CADM1, Rb, ZMYND10, RASSF5, PTEN, SERPINB5, EPB41L3 или DAPK1 для определения терапевтического эффекта соединения при лечении заболевания, связанного с экспрессией указанного представляющего интерес гена полипептида.

Набор синтетических олигонуклеотидных праймеров для выявления рнк вируса бешенства и способ выявления рнк вируса бешенства с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (от-пцр) // 2575088

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу выявления РНК вируса бешенства и набору, который используется в данном способе. Способ включает проведение ОТ-ПЦР с олигонуклеотидными праймерами.

Фосфодиэстераза 4d7 в качестве маркера для агрессивного гормон-чувствительного рака предстательной железы // 2575076

Настоящее изобретение относится к фосфодиэстеразе 4D7 (PDE4D7) для применения в качестве маркера для агрессивного гормон-чувствительного рака предстательной железы, где экспрессия маркера повышена при сравнении экспрессии в ткани агрессивного гормон-чувствительного рака предстательной железы с экспрессией в нормальной ткани или ткани доброкачественной опухоли предстательной железы, и к применению PDE4D7 в качестве диагностического маркера для агрессивного гормон-чувствительного рака предстательной железы.

Аптамер к химазе и его применение // 2579667

Группа изобретений относится к обоасти биохимии и биотехнологии. Представлены аптамер, связывающийся с химазой и ингибирующий активность химазы, содержащий нуклеотидную последовательность, представленную как X1GAUAGAN1N2UAAX2, где X1 и X2 идентичны или не идентичны друг другу и каждый означает A или G, а N1 и N2 идентичны или не идентичны друг другу и каждый означает A, G, C, U или T; комплекс, включающий аптамер и функциональное вещество, например вещество, обладающее сродством, вещество для мечения, фермент, средство доставки лекарственного средства, лекарственное средство; лекарственное средство или реагент, содержащее аптамер или комплекс; способы детекции и очистки химазы с использованием аптамера или комплекса. 9 н. и 7 з.п. ф-лы, 8 ил., 9 табл., 9 пр.