Средство для ингибирования фермента тирозил-днк-фосфодиэстеразы 1 человека

Изобретение относится к молекулярной биологии, биохимии и биотехнологии, конкретно к известным соединениям, представляющим собой производные (8-(трифторметил)бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)амидов общей формулы I, проявляющим способность ингибировать действие фермента тирозил-ДНК-фосфодиэстеразы 1 человека. Технический результат: повышение ингибирующего действия на фермент тирозил-ДНК-фосфодиэстеразы 1 человека (Tdp1) и расширение арсенала ингибиторов данного фермента. 2 ил., 1 табл., 8 пр.

 

Изобретение относится к молекулярной биологии, биохимии и биотехнологии, конкретно к соединениям, представляющим собой производные (8-(трифторметил)бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)амидов общей формулы I:

где n≥1, R - третичная аминогруппа, в том числе и входящая в состав гетероцикла, у которых выявлена биологическая активность, заключающаяся в способности ингибировать действие фермента тирозил-ДНК-фосфодиэстеразы 1 человека (Tdp1).

В последние годы ведутся активные поиски ингибиторов фермента тирозил-ДНК-фосфодиэстеразы 1 (Tdp1), который рассматривается как перспективная фермент-мишень для создания лекарственных препаратов для лечения онкологических и нейродегенеративных заболеваний [1].

Tdp1 относится к классу фосфодиэстераз - ферментов, расщепляющих фосфодиэфирные связи [2]. Природный мутант этого фермента SCAN1 вызывает тяжелое нейродегенеративное заболевание - синдром спиноцеребеллярной атаксии и нейропатии [3].

Tdp1 играет важную роль в удалении повреждений ДНК, создаваемых топоизомеразой 1 (Top1), ее ингибитором камптотецином и антираковыми препаратами. Нормальный ферментативный цикл топоизомеразы 1 включает обратимую реакцию трансэтерификации. Остаток тирозина-723 активного центра фермента образует переходный ковалентный комплекс с 3′-фосфатом основания ДНК. При этом образуется одноцепочечный разрыв, который позволяет «разрезанной» цепи вращаться вокруг интактной, снимая локальное напряжение в спирали. Затем целостность ДНК восстанавливается за счет обратной реакции [4]. В нормальных условиях скорость реакции лигирования значительно выше, чем скорость расщепления, но в ряде случаев переходные комплексы оказываются стабильными. В частности, ингибиторы Top1, такие как камптотецин и его производные, применяющиеся в клинике, существенно замедляют скорость обратной реакции [4]. Невозможность восстановить структуру ДНК приводит к образованию одноцепочечных разрывов, которые могут превратиться в более токсичные двухцепочечные. Помимо ингибиторов, ряд повреждений ДНК вблизи от места присоединения Top1 также могут блокировать реакцию лигирования.

Tdp1 расщепляет 3′-диэфирную связь между остатком тирозина и 3′-концом ДНК, а также удаляет другие повреждения с 3′-конца ДНК [5, 6]. При этом на 3′-конце ДНК остается фосфат, на 5′-конце - гидроксильный остаток. Такая структура является субстратом для фермента полинуклеотидкиназа-3′-фосфатаза (PNKP), которая восстанавливает традиционную для эксцизионной репарации (ЭРО) конфигурацию 3′-ОН, 5′-фосфат [7]. В результате, Tdp1 противостоит ингибиторам Top1, которые являются достаточно эффективными антираковыми препаратами (см. обзоры [8, 9]). Предполагается, что именно Tdp1 ответственна за лекарственную устойчивость некоторых видов рака [4, 10]. Эта гипотеза подтверждается рядом исследований: мыши, нокаутные по Tdp1, и человеческие клеточные линии, имеющие мутацию SCAN1, гиперчувствительны к камптотецину [11-14]. И, наоборот, в клетках с повышенным уровнем экспрессии Tdp1 камптотецин и этопозид вызывают меньше повреждений ДНК [15, 16]. Таким образом, сочетание препаратов, воздействующих на Top1 и Tdp1, может существенно повысить эффективность химиотерапии.

В литературе описано немного ингибиторов Tdp1, и они обладают мягким ингибирующим действием (в диапазоне 100-10 мкМ) [4, 17, 18].

Показано также, что подавление активности Tdp1 делает опухолевые клетки гиперчувствтительными к противораковому препарату темозоломиду (метилирование пуринов) [19], метилметансульфонату (образование апуриновых/апиримидиновых сайтов), блеомицину (одноцепочечные/двухцепочечные разрывы с 3′-фосфогликолятами), перекиси водорода и ионизирующему излучению (разрывы и др. виды повреждений) [20]. Это предполагает участие Tdp1 в различных путях репарации ДНК.

Таким образом, ингибиторы Tdp1 могут увеличить цитотоксичность камптотецинов. Терапевтическим эффектом таких веществ может быть селективное увеличение активности ингибиторов Top1 в опухолях с нарушениями в процессах репарации ДНК и контроля клеточного цикла.

Наиболее близким к заявляемому средству - прототипом, является фурамидин, представляющий собой гетероциклический диамидин [17] общей формулы II:

Недостатком известного средства являются неудовлетворительные ингибиторные характеристики (IC₅₀ для одноцепочечной ДНК составляет порядка 100 мкМ).

Задачей изобретения является создание более эффективного ингибитора Tdp1.

Поставленная задача решается применением соединений, представляющих собой производные (8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)амидов общей формулы I, в качестве ингибиторов действия фермента Tdp1.

Соединения Ia (n=1, R=пирролидин-1-ил) и Iб (n=1, R=пиперидин-1-ил) впервые были описаны в работе [21], они обладают ингибирующей активностью по отношению к некоторым ферментам репарации ДНК в миллимолярных концентрациях.

Эти соединения могут быть синтезированы взаимодействием 8-(трифторметил)бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-амина III с 2-(пирролидин-1-ил)ацетил хлоридом или 2-(пиперидин-1-ил)ацетил хлоридом в соответствии со схемой, приведенной на фиг. 1. Соединение III, в свою очередь, может быть синтезировано из 1-хлор-4-(трифторметил)бензола с использованием коммерчески доступных реагентов в соответствии со схемой, описанной в [22] и приведенной на фиг. 2.

Другие соединения общей формулы I могут быть синтезированы взаимодействием амина III с хлорангидридами соответствующих кислот (фиг. 1). Например, соединения Iв (n=1, R=морфолин), Iг (n=2, R=морфолин), Iд (n=1, R=дибутиламин), Iе (п=2, R=пиперидин) и Iж (n=2, R=пирролидин), могут быть синтезированы взаимодействием соединения III с 2-морфолинацетил хлоридом, 3-морфолинопропаноил хлоридом, 2-(дибутиламино)ацетил хлоридом, 3-(пиперидин-1-ил)пропаноил хлоридом или 3-(пирролидин-1-ил)пропаноил хлоридом, соответственно.

Структура и чистота полученных соединений подтверждена данными ЯМР-спектроскопии, масс-спектрометрии и ВЭЖХ.

Технический результат: получен класс эффективных ингибиторов Tdp1 с повышенными ингибирующими характеристиками (IC₅₀ для одноцепочечной ДНК 0.2÷6.0 мкМ).

Соединения общей формулы I после проведения углубленных фармакологических исследований,могут использоваться для дальнейшей разработки новых низкотоксичных высокоэффективных противораковых средств.

Ниже приводятся конкретные примеры реализации заявляемого технического решения.

Пример 1. Синтез 2-(пирролидин-1-ил)-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)ацетамида (Iа).

К раствору 0.095 г (0.30 ммоль) амина III в 2 мл сухого метиленхлорида (СН₂Сl₂) прибавили 0.044 г (0.30 ммоль) 2-(пирролидин-1-ил)ацетил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 3 часа при комнатной температуре. Затем добавили 3 мл Н₂O, 2 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.082 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), с использованием в качестве элюента смеси гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир. Выделили 0.042 г исходного амина III (конверсия 56%) и 0.029 г (41% в расчете на прореагировавший амин III) соединения Iа.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 1.83-1.92 (м, 2Н-С(11), 2Н-С(12)), 2.68-2.80 (ш.м, 2Н-С(10), 2Н-С(13)), 3.30 (д, ²J=17.0) и 3.43 (д, ²J=17.0) 2Н-С(9), система АВ, 7.73 (д, J(4,6)=1.7, Н-С(4)), 8.92 (ш.с, Н-С(6)), 10.85 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 134.00 (ш.с, С(1)), 142.23 (с, С(2)), 146.19 (с, С(3)), 126.09 (д, ³J(C,F)=3.5, С(4)), 133.01 (с, ²J(C,F)=33.2, С(5)), 118.53 (уш.д, С(6)), 122.54 (¹J(C,F)=273.8, С(7)), 169.68 (ш.с, С(8)), 59.06 (т, С(9)), 54.26 (т, С(10), С(13)), 24.11 (т, С(11), С(12)). Найдено: m/z 430.964 [М+Н]⁺ C₁₃H₁₃N₂F₃OS₅. Вычислено: [М+Н]⁺=430.966.

Пример 2. Синтез 2-(пиперидин-1-ил)-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)ацетамида (Iб).

К раствору 0.090 г (0.028 ммоль) амина III в 2 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.045 г (0.28 ммоль) 2-(пиперидин-1-ил)ацетил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 3 часа при комнатной температуре. Затем добавили 3 мл Н₂O, 2 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.093 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент: смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир. Выделили 0.050 г (конверсия 44%) исходного амина III и 0.022 г (40% в расчете на прореагировавший амин III) соединения 1б.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 1.45-1.52 (м, 2Н-С(12)), 1.61-1.73 (м, 2Н-С(11), 2Н-С(13)), 2.51-2.61 (м, 2Н-С(10), 2Н-С(14)), 3.11 (д, ²J=17.0) и 3.14 (д, ²J=17.0) 2Н-С(9), система АВ, 7.74 (д, J(4,6)=1.8, Н-С(4)), 8.96 (уш.д, J(6,4)=1.8, Н-С(6)), 10.91 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 133.85 (уш.с, С(1)), 142.36 (с, С(2)), 146.18 (с, С(3)), 126.08 (д, ³J(C,F)=4.0, С(4)), 133.04 (с, ²J(C,F)=32.2, С(5)), 118.48 (д, ³J(C,F)=4.0, С(6)), 122.54 (¹J(C,F)=273.8, С(7)), 169.90 (с, С(8)), 62.85 (т, С(9)), 54.90 (т, С(10), С(14)), 26.38 (т, С(11), С(13)), 23.46 (т, С(12)). Найдено: 444.990 [М+Н]⁺ C₁₄H₁₅N₂F₃OS₅. Вычислено: [М+Н]⁺=444.982.

Пример 3. Синтез 2-морфолино-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)ацетамида (Iв).

К раствору 0.095 г амина III (0.3 ммоль) в 2 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.049 г (0.3 ммоль) 2-морфолинацетил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 3 часа при комнатной температуре. Затем добавили 3 мл Н₂O, 2 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.101 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент: смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир. Выделили 0.049 г (конверсия 48%) амина III и 0.029 г (45% в расчете на прореагировавший амин III) соединения Iв.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 2.53-2.85 (м, 2Н-С(10), 2Н-С(13)), 3.25 (ш.с, 2Н-С(9)), 3.62-3.97 (м, 2Н-С(11) 2Н-С(12)), 7.76 (ш.д, J(4,6)=1.8, Н-С(4)), 8.90 (ш.с, Н-С(6)), 10.73 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 141.94 (с, С(1)), 134.04 (с, С(2)), 146.32 (с, С(3)), 126.43 (д, С(4)), 133.11 (²J(C,F)=33.4, С(5)), 118.66 (д, С(6)), 122.50 (¹J(C,F)=273.65, С(7)), 168.64 (с, С(8)), 62.25 (т, С(9)), 53.57 (т, С(10), С(13)), 66.89 (т, С(11), С(12)). Найдено: 446.953 [М+Н]⁺ C₁₃H₁₃N₂O₂S₅. Вычислено: [М+Н]⁺=446.960.

Пример 4. Синтез 3-морфолино-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)пропанамида (Iг).

К раствору 0.120 г амина III (0.38 ммоль) в 3 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.175 г (0.59 ммоль) 3-морфолинопропаноил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 20 часов при комнатной температуре. Затем добавили 4 мл Н₂O, 3 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.134 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир. Выделили 0.046 г (конверсия 62%) амина III и 0.056 г (45% в расчете на прореагировавший амин III) соединения Iг.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 2.55-2.62 (м, 2Н-С(11), 2Н-С(14)), 2.64-2.69 (м, 2Н-С(9)), 2.71-2.77 (м, 2Н-С(10)), 3.77-3.87 (м, 2Н-С(12) 2Н-С(13)), 7.77 (д.к, J(4,6)=2.0, ⁴J(C,F)=0.7, Н-С(4)), 8.77 (д, J(6,4)=2.0, Н-С(6)), 10.68 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 142.74 (с, С(1)), 135.12 (с, С(2)), 145.80 (с, С(3)), 126.83 (д, ³J(C,F)=3.6, С(4)), 132.63 (²J(C,F)=33.3, С(5)), 120.99 (д, ³J(C,F)=3.9, С(6)), 122.56 (¹J(C,F)=273.4, С(7)), 170.96 (с, С(8)), 32.80 (т, С(9)), 54.17 (т, С(10)), 53.29 (т, С(11), С(14)), 66.28 (т, С(12), С(13)). Найдено: 460.979 [М+Н]⁺ C₁₄H₁₅N₂F₃O₂S₅. Вычислено: [М+Н]⁺=460.98.

Пример 5. Синтез 2-(дибутиламино)-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)ацетамида (Iд).

К раствору 0.095 г (0.30 ммоль) амина III в 3 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.070 г (0.34 ммоль) 2-(дибутиламино)ацетил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 4 часа при комнатной температуре. Затем добавили 3 мл Н₂O, 2 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.099 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент: смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир. Выделили 0.047 г (конверсия 51%) амина III и 0.029 г (39% в расчете на прореагировавший амин III) соединения Iд.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 0.91 (т, J(13,12)=J(17,16)=7.5, 3H-C(13), 3H-C(17)), 1.28-1.37 (м, 2Н-С(12), 2Н-С(16)), 1.43-1.51 (м, 2Н-С(11), 2Н-С(15)), 2.54 (д.д, J=9.0, J=7.5, 2Н-С(10), 2Н-С(14)), 3.20 (с, 2Н-С(9)), 7.74 (ш.с, Н-С(4)), 9.00 (ш.с, Н-С(6)), 10.85 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 142.30 (с, С(1)), 133.98 (с, С(2)), 146.07 (с, С(3)), 126.17 (д, ³J(C,F)=3.5, С(4)), 133.02 (²J(C,F)=33.2, С(5)), 118.55 (д, ³J(C,F)=4.0, С(6)), 122.58 (¹J(C,F)=273.3, С(7)), 171.12 (с, С(8)), 59.57 (т, С(9)), 55.49 (т, С(10), С(14)), 29.77 (т, С(11), С(15)), 20.52 (т, С(12), С(16)), 13.93 (к, С(13), С(17)). Найдено: 489.060 [М+Н]⁺. C₁₇H₂₃N₂F₃OS₅. Вычислено: [М+Н]⁺=489.04.

Пример 6. Синтез 3-(пиперидин-1-ил)-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)пропанамида (Iе).

К раствору 0.105 г (0.33 ммоль) амина III в 3 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.088 г (0.50 ммоль) 3-(пиперидин-1-ил)пропаноил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 20 часов при комнатной температуре. Затем добавили 4 мл Н₂O, 3 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.143 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент: смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир, метанол. Выделили 0.018 г (конверсия 83%) амина III и 0.061 г (49% в расчете на прореагировавший амин III) соединения Iе.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 1.47-1.55 (м, 2Н-С(13)), 1.65-1.74 (м, 2Н-С(12), 2Н-С(14)), 2.48-2.57 (м, 2Н-С(10), 2Н-С(11) или 2Н-С(15)), 2.62-2.72 (м, 2Н-С(9), 2Н-С(15) или 2Н-С(11)), 7.76 (д, J(4,6)=1.9, Н-С(4)), 8.70 (д, J(6,4)=1.9, Н-С(6)), 11.07 (ш.с, NH). ЯМР ¹³С (CDCl₃): 142.88 (с, С(1)), 135.86 (с, С(2)), 145.69 (с, С(3)), 126.84 (д, ³J(C,F)=3.5, С(4)), 132.41 (²J(C,F)=33.2, С(5)), 121.47 (д, ³J(C,F)=3.8, С(6)), 124.78 (¹J(C,F)=273.8, С(7)), 171.49 (с, С(8)), 33.03 (т, С(9)), 54.06 (т, С(10), С(11), С(15)), 25.18 (т, С(12), С(14)), 23.97 (т, С(13)). Найдено: 459.002 [М+Н]⁺. C₁₅H₁₇N₂F₃OS₅. Вычислено: [М+Н]⁺=459.00.

Пример 7. Синтез 3-(пирролидин-1-ил)-N-(8-(трифторметил)-бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)пропанамида (Iж).

К раствору 0.080 г (0.33 ммоль) амина III в 3 мл сухого СН₂Сl₂ прибавили 0.080 г (0.50 ммоль) 3-(пирролидин-1-ил)пропаноил хлорида. Реакционную смесь перемешивали 2 часа при комнатной температуре. Затем добавили 3 мл Н₂O, 2 мл СН₂Сl₂, экстрагировали СН₂Сl₂, сушили Na₂SO₄. Растворитель отогнали, получили 0.083 г смеси, которую делили колоночной хроматографией на SiO₂ (Macherey-Nagel, 60-200 µ), элюент смесь гексана и бензола (1:1), диэтиловый эфир, метанол. Получили 0.022 г (20%) соединения Iж.

ЯМР ¹H (CDCl₃): 1.87-1.95 (м, 2Н-С(12), 2Н-С(13)), 2.64 (ш.т, J(9,10)=6.0, 2Н-С(9)), 2.66-2.73 (м, 2Н-С(11), 2Н-С(14)), 2.84 (ш.т, J(10,9)=6.0, 2Н-С(10)), 7.73 (д.к, J(4,6)=2.0, ⁴J(H,F)=0.7, Н-С(4)), 8.85 (д.к, J(6,4)=2.0, ⁴J(H,F)=0.6, H-C(6)), 11.70 (ш.с, NH). ЯМР ¹³C (CDCl₃): 143.52 (c, C(1)), 134.76 (c, C(2)), 145.88 (c, C(3)), 126.33 (д, ³J(C,F)=3.4, C(4)), 132.57 (²J(C,F)=33.2, C(5)), 120.68 (д, ³J(C,F)=3.9, C(6)), 122.64 (¹J(C,F)=273.5, C(7)), 171.62 (c, C(8)), 35.23 (т, C(9)), 51.34 (т, C(10)), 53.59 (т, C(11), C(14)), 23.65 (т, C(12), C(13)). Найдено: 444.981 [M+H]⁺. C₁₄H₁₅N₂F₃OS₅. Вычислено: [M+H]⁺=444.98.

Пример 8. Исследование влияния предлагаемых соединений на активность Tdp1.

Рекомбинантная тирозил-ДНК-фосфодиэстераза 1 человека (КФ 3.1.4.) была экспрессирована в системе Escherichia coli (плазмида рЕТ 16B-Tdp1 предоставлена доктором Кальдекотт К.У., Университет Сассекса, Великобритания) и выделена, как описано [2, 23].

В качестве тест-системы для определения ингибирующих свойств предлагаемых соединений использована реакция удаления тушителя флуоресценции Black Hole Quencher 1 (BHQ1) с 3′-конца олигонуклеотида, катализируемая Tdp1. На 5′-конце олигонуклеотида находится (5,6)-FAM - флуорофор, интенсивность флуоресценции которого возрастает при удалении тушителя. Для измерения флуоресценции использовался флуориметр POLARstar OPTIMA производства BMG LABTECH.

Реакционные смеси объемом 200 мкл содержали буфер (50 мМ Tris-НСl, pH 8,0; 50 мМ NaCl; 7 мМ меркаптоэтанол), 50 нМ олигонуклеотид и различные концентрации ингибиторов. Реакция запускалась добавлением Tdp1 до конечной концентрации 1,3 нМ. Измерения проводились в линейном диапазоне зависимости скорости реакции от времени (до 8 минут) через каждые 55 секунд. Влияние предлагаемых соединений оценивали по величине IС₅₀ (концентрация ингибитора, при которой активность фермента снижена наполовину). Обсчет значений IC50 проводился с помощью программы MARS Data Analisys 2.0 (BMG LABTECH).

Влияние предлагаемых соединений на активность Tdp1 представлено в таблице. Из таблицы видно, что величины IС₅₀ для предлагаемых соединений составляют 0,22-6,03, что в 50-15 раз ниже, чем у соединения-прототипа.

Предлагаемые соединения оказывают специфическое ингибирующее действие на фермент тирозил-ДНК-фосфодиэстераза 1 человека (Tdp1) и, являясь эффективными соединениями, расширяют арсенал ингибиторов данного фермента и могут быть использованы для разработки лекарственных препаратов, применимых в клинической медицине.

Источники информации

1. Cortes Ledesma F, et al., Nature, 2009, 461, 674-678.

2. Interthal H, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2001, 98, 12009-12014.

3. Rass U, et al., Cell., 2007, 130, 991-1004.

4. Dexheimer TS, et al., Anticancer Agents Med Chem. 2008, 8, 381-389.

5. Ben Hassine S, et al., The EMBO Journal, 2009, 28, 632-640.

6. Povirk LF. ISRN Mol. Biol., 2012, 1-16.

7. Vance JR, Wilson ТЕ. J. Biol. Chem., 2001, 276, 15073-15081.

8. Pommier Y. Nat. Rev. Cancer, 2006, 6, 789-802.

9. Pommier Y, et al. Chem Biol., 2010, 17, 421-433.

10. Beretta GL, et al., Curr. Med. Chem. 2010, 17, 1500-1508.

11. El-Khamisy SF, et al., DNA Repair (Amst)., 2009, 8 760-766.

12. Das BB, et al., The EMBO Journal., 2009, 28, 3667-3680.

13. Katyal S, et al., EMBO J., 2007, 26, 4720-4731.

14. Hirano R, et al., EMBO J., 2007, 26, 4732-4743.

15. Barthelmes HU, et al., J Biol Chem. 2004, 279, 55618-25565.

16. Nivens MC, et al., Cancer Chemother Pharmacol., 2004, 53, 107-115.

17. Antony, S et al., Nucleic Acids Res. 2007, 35, 4474-4484.

18. Nguyen TX, et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 4457-4478.

19. Alagoz M, et al., Nucleic Acids Res., 2013, [Epub ahead of print].

20. Murai J, et al., J Biol Chem. 2012, 287, 12848-12857.

21. Kutuzov MM, et al., Biopolym. and Cell, 2012, 28, 239-241.

22. Khomenko TM, et al., Letters in Drug Design & Discovery, 2009, 6, 464-467.

23. Lebedeva NA, et al., FEBS Lett., 2011, 585, 683-686.

Средство, представляющее собой одно из производных (8-(трифторметил)бензо[f][1,2,3,4,5]пентатиепин-6-ил)амидов общей формулы I:

где n=1, 2, a R - третичная аминогруппа, в том числе входящая в состав шестичленного гетероцикла, содержащего атом кислорода, проявляющее ингибирующее действие в отношении фермента тирозил-ДНК-фосфодиэстеразы 1 человека.