Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша



Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша
Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша

Владельцы патента RU 2585244:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Минздрава России (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша. Для этого проводят иммунологическое исследование периферической венозной крови в 7-12 недель гестации у женщин с угрозой невынашивания беременности. После проведенного лечения угрозы прерывания беременности определяют относительное содержание CD45RA-CD62L- в популяции CD8+ лимфоцитов. При его значении более 23,9% прогнозируют возникновение угрожающего выкидыша во втором триместре у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет прогнозировать рецидив угрожающего выкидыша во втором триместре гестации, что позволит выбрать правильную тактику ведения беременной женщины, позволит снизить частоту данного осложнения. 1 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для раннего прогнозирования рецидива угрозы прерывания беременности во втором триместре у женщин с привычным невынашиванием после проведенной стандартной сохраняющей терапии.

Актуальность заявленного способа определяется тем, что долгие годы патология невынашивания беременности в ранние сроки не имеет тенденции к снижению, несмотря на достигнутые успехи в вопросах диагностики, лечении во время и вне беременности и составляет по данным разных авторов от 2 до 55% числа всех беременностей, достигая в первом триместре гестации 50%, при этом 25% из этого числа приходится на долю привычного невынашивания (Сидельникова, В.М. Профилактика преждевременных родов // Мат. форума "Мать и дитя". - 2006. - С. 241. Роль системы цитокинов в патогенезе привычного выкидыша и преждевременных родов. / Н.К. Тетруашвили., В.М. Сидельникова., В.М. Верясов. и др. // Вестн. Рос. ассоц. акуш.-гин. - 1999. - №3. - С. 37-45). Таким образом, прогнозирование рецидива угрожающего выкидыша у женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе позволит профилактировать данное осложнение и предотвратить неблагоприятный исход беременности.

Известен способ прогнозирования возникновения и сохранения угрозы прерывания беременности на всем протяжении срока гестации путем определения в сыворотке крови содержания рецепторного антагониста интерлейкина-1 и при его значении более 700 пг/мл прогнозируют возникновение в 1 триместре угрозы прерывания, сохраняющейся на протяжении всего срока гестации (Патент №2317554. Российская Федерация. Способ прогнозирования возникновения и сохранения угрозы прерывания беременности на всем протяжении срока гестации. / Посисеева Л.В., Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В., Лукина Н.С., Панова И.А. // Изобретения. Полезные модели. - 2008. - №5, Ч. 3. - С. 695).

Однако данный способ не является специфичным для применения у женщин с привычным невынашиванием беременности и имеет более низкую точность.

Известен способ прогнозирования угрожающих преждевременных родов у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков путем исследования периферической венозной крови в 6-12 недель гестации, определяя соотношение показателей относительного содержания CD25+ к IL-2+ лимфоцитам, и при значении соотношения, равном или более 1,0 прогнозируют развитие угрожающих преждевременных родов (Патент №2344424. Российская Федерация. Способ прогнозирования угрожающих преждевременных родов у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков. / Борзова Н.Ю., Сотникова Н.Ю., Крошкина Н.В., Лепилова И.Б. // Изобретения. Полезные модели. - 2009. - №2).

Однако данный способ не используется у женщин с привычным невынашиванием беременности, позволяет спрогнозировать развитие угрозы в более поздние сроки и имеет более низкую точность. Техническим результатом является расширение арсенала технических средств и повышение точности прогнозирования угрожающего выкидыша.

Заявляемый технический результат достигается путем иммунологического исследования периферической венозной крови в 7-12 недель гестации после проведенного лечения угрожающего выкидыша. При этом определяют относительное содержание CD45RA-CD62L- (претерминально-дифференцированных клеток памяти) в популяции CD8+ лимфоцитов и при его значении более 23,9% прогнозируют возникновение повторной угрозы прерывания беременности с точностью 89,2%, чувствительностью 92,3% и специфичностью 83,9%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать возникновение рецидива угрозы прерывания беременности у женщин с привычным невынашиванием беременности по определению относительного содержания CD45RA-CD62L- в популяции CD8+ лимфоцитов.

Ранее данный показатель не использовался для прогнозирования возникновения рецидива угрозы прерывания беременности у женщин с привычным невынашиванием беременности. В литературе также отсутствуют данные об изменении содержания CD45RA-CD62L- лимфоцитов при рецидиве угрозы прерывания беременности у женщин с привычным невынашиванием беременности. Вероятно, в тех случаях, когда проведенная сохраняющая терапия не стабилизирует барьерную функцию плаценты, увеличение уровня антигенов плодового происхождения в кровотоке матери вызывает дифференцировку претерминально-дифференцированных клеток памяти в популяции цитотоксических CD8+ лимфоцитов, способствуя усилению цитотоксических реакций в отношении плаценты и плода с повторным развитием угрожающего выкидыша.

Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом:

1. К 3 мл гепаринизированной крови из кубитальной вены добавляют 3 мл Среды 199 и выделяют обогащенную популяцию лимфоцитов стандартным методом скоростного центрифугирования при 1500 об/мин в течение 20 минут в двойном градиенте плотности фиколл-верографина (Boum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - Vol. 21, N 97. - P. 77).

2. Суспензию лимфоцитов дважды отмывают физиологическим раствором, доводят концентрацию клеток до 1×106 кл/мл. К 0,1 мл полученной суспензии одновременно добавляют по 5 мкл моноклональных антител anti-human CD4, CD62L, CD45RA, коньюгированных с РС5, с FITC, с РЕ соответственно (Caltag Laboratories, USA). Клетки инкубируют в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, отмывают в 1 мл физиологического раствора и фиксируют в 0,5 мл фиксирующего раствора CellFixTM (BD Biosciences, Belgium).

3. Определяют относительное (процентное) содержание CD45RA-CD62L- клеток в CD8+ лимфоцитарном гейте на проточном цитометре FACScan (Becton Dickinson, USA) с использованием программного обеспечения CellQuest Pro.

Использование предлагаемого способа позволяет в ранние сроки (7-12 недель) с высокой точностью 89,2% прогнозировать возникновение рецидива угрожающего выкидыша у женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе после проведенного лечения угрозы прерывания беременности.

Отличительными признаками заявленного способа являются:

после проведенного лечения угрозы прерывания беременности определяют относительное содержание CD45RA-CD62L- в популяции CD8+ лимфоцитов. При значении показателя более 23,9% прогнозируют возникновение угрожающего выкидыша во втором триместре у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Пациентка Б., 34 лет, беременность четвертая, желанная, в анамнезе 1 своевременные роды в сроке 39 недель, без осложнений, 2 самопроизвольных выкидыша в сроке 6 и 8 недель, находится в зарегистрированном браке. В анамнезе: эрозия шейки матки, кольпит. При поступлении в стационар срок беременности составил 5-6 недель. Предъявляла жалобы на тянущие боли в низу живота и в области поясницы, накануне отмечала незначительные кровяные выделения из половых путей. По УЗИ: гипертонус нижних отделов тела матки. После проведенной стандартной сохраняющей терапии признаки угрожающего выкидыша купировались, беременность прогрессировала.

В 7-8 недель было проведено обследование по заявленному способу:

Уровень CD45RA-CD62L- лимфоцитов составил 33,1%, что выше заявляемого уровня (>23,9%).

Заключение: Прогнозируется рецидив угрожающего выкидыша.

В сроке 14-15 недель беременности женщина поступила в стационар с клиническими признаками угрожающего выкидыша. Начата сохраняющая терапия с положительным эффектом.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. Пациентка З., 28 лет, беременность пятая, желанная, в анамнезе 1 медицинский аборт, без осложнений, 3 самопроизвольных выкидыша в сроке 4-5 и 7 недель, находится в зарегистрированном браке. В анамнезе: хронический эндометрит, эрозия шейки матки. При поступлении в стационар срок беременности составил 9-10 недель. Предъявляла жалобы на тянущие боли в низу живота и в области поясницы, кровянистые выделения из половых путей. По УЗИ: у внутреннего зева подоболочечное скопление жидкости 10·7·12 мм. После проведенной стандартной сохраняющей терапии признаки угрожающего выкидыша купировались, беременность прогрессировала.

В 11-12 недель было проведено обследование по заявленному способу.

Уровень CD45RA-CD62L- лимфоцитов составил 25,6%, что выше заявляемого уровня (23,9%).

Заключение: Прогнозируется рецидив угрожающего выкидыша во втором триместре беременности.

В сроке 14-15 недель беременности женщина поступила в стационар с клиническими признаками угрожающего выкидыша. Начата сохраняющая терапия с положительным эффектом.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Пациентка К., 29 лет, беременность четвертая, желанная, в анамнезе 1 своевременные роды без осложнений, 2 самопроизвольных выкидыша в сроке 4 и 10 недель, находится в зарегистрированном браке. В анамнезе: хронический тонзиллит, хронический гастродуоденит, хронический эндометрит, кандидозный кольпит. При поступлении в стационар срок беременности составил 5-6 недель. Предъявляла жалобы на тянущие боли в низу живота и в области поясницы, накануне однократные мажущие кровянистые выделения из половых путей. По УЗИ: гипертонус нижних отделов тела матки. После проведенной стандартной сохраняющей терапии признаки угрожающего выкидыша купировались, беременность прогрессировала.

В сроке 7-8 недель было проведено обследование по заявленному способу:

Уровень CD45RA-CD62L- лимфоцитов составил 23,9%, что равно заявленному уровню (23,9%).

Заключение: Прогнозируется отсутствие рецидива угрожающего выкидыша во втором триместре беременности.

Во втором триместре у женщины признаки угрозы прерывания беременности отсутствовали, в стационар женщина не поступала. Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 4. Пациентка К., 31 год, беременность четвертая, желанная, в анамнезе 3 самопроизвольных выкидыша в сроке 5-6, 8 и 8-9 недель, находится в зарегистрированном браке. В анамнезе: вегетососудистая дистония по гипотоническому типу, эутиреоз. При поступлении в стационар срок беременности составил 7 недель. Предъявляла жалобы на тянущие боли внизу живота и в области поясницы, кровянистые выделения из половых путей. По УЗИ: гипертонус нижних отделов тела матки, цервикальный канал вверху расширен до 3 мм. После проведенной стандартной сохраняющей терапии признаки угрожающего выкидыша купировались, беременность прогрессировала.

В сроке 9 недель было проведено обследование по заявленному способу:

Уровень CD45RA-CD62L- лимфоцитов составил 12,8%, что ниже заявленного уровня (23,9%).

Заключение: Прогнозируется отсутствие рецидива угрожающего выкидыша во втором триместре беременности.

Во втором триместре у женщины признаки угрозы прерывания беременности отсутствовали, в стационар женщина не поступала.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 38 беременных женщин с угрожающим выкидышем. Результаты исследований сведены в таблицу 1.

Преимущества заявляемого способа:

1. Высокая точность - 89,2%;

2. Хорошая воспроизводимость метода;

3. Простота в интерпретации результатов обследования;

4. Способ дает возможность прогнозировать возникновение рецидива угрожающего выкидыша у женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе;

5. Предлагаемый способ позволяет своевременно выбрать правильную тактику ведения женщин с риском развития данной акушерско-гинекологической патологии и избежать неблагоприятных исходов беременности.

Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша путем иммунологического исследования периферической венозной крови в 7-12 недель гестации у женщин с угрозой невынашивания беременности, отличающийся тем, что после проведенного лечения угрозы прерывания беременности определяют относительное содержание CD45RA-CD62L- в популяции CD8+ лимфоцитов и при его значении более 23,9% прогнозируют возникновение угрожающего выкидыша во втором триместре у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения антител к аллогенным HLA-G в сыворотки крови. Для этого используют тест перекрестной совместимости (cross match) мононуклеаров донора с сывороткой реципиента.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов. Для этого используют бруцеллин для специфической активации лимфоцитов.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования развития безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после аутологической трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Для этого окрашивают исследуемый образец крови моноклональными антителами CD235a (FITC)/ CD59(PE)/CD71 (АРС).

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для диагностики наследственной оптической нейропатии (НОН). Для этого проводят клинические и цитологические исследования и дополнительно из кожи пациента получают культуру фибробластов плотностью 5000-10000 клеток на см2, окрашивают митохондриальным потенциалзависимым флюоресцентным красителем TMRE до конечной концентрации 25 нМ.

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения еx-vivo эффективности лечения рака. Для этого после введения одной или более доз иммуногенной композиции субъекту измеряют уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) в организме.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242).

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов. Постановку реакции проводят в отношении облученной донорской крови, учет результатов выполняют с помощью проточного цитофлюориметра с использованием моноклональных антител, меченных разными флюорохромами, проведением гейтирования активированных лимфоцитов со сниженной экспрессией общелейкоцитарного маркера CD45 и определением среди них процента дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8-, при этом в качестве контроля берут необлученный образец той же крови. После чего определяют эффективность облучения по соотношению содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в проверяемой облученной и той же необлученной контрольной крови как Эоб=Сднтло-Сднтлк, где Эоб - эффективность облучения, Сднтло - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в опыте (в проверяемой облученной крови), Сднтлк - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в контроле (в необлученном образце той же крови). При разнице с контролем более чем в 50% делают вывод о функциональной неполноценности Т-лимфоцитов в облученной крови и иммунологической безопасности данного препарата крови для реципиента. Использование данного способа позволяет определять эффективность облучения донорской крови методом проточной цитометрии.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у беременных женщин. Для этого в сроке 5-12 недель гестации определяют относительное количество CD178+ моноцитов гестации в периферической венозной крови. При его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет выбрать правильную тактику ведения беременности, провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности в группе женщин с высоким риском невынашивания беременности. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода (СЗРП). Для этого у пациенток с фетоплацентарной недостаточностью и ЗРП в сыворотке крови иммуноферментным методом определяют активность супероксиддисмутазы, содержание фактора роста плаценты, эндоглина и мелатонина. По этим показателям рассчитывают прогностический коэффициент П по формуле: П=(0,0001*COD+0,0255*Mel+0,1636*CD105+(-0,0487*PGF)-8,5389, где COD - супероксиддисмутаза, пг/мл, Mel - мелатонин, пг/мл, CD 105 - эндоглин, пг/мл, PGF - фактор роста плаценты, пг/мл. При величине П равной 0,64 и более прогнозируют высокий риск развития критического состояния плода в антенатальном периоде, что требует завершения беременности путем операции кесарево сечение в экстренном порядке в интересах плода. Способ обеспечивает повышение точности прогнозирования критического состояния плода антенатально, что позволяет своевременно выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к отоларингологии, и может быть использовано для дифференциальной экспресс-диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. Для этого проводят забор периферической крови и определяют относительное содержание субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов, одновременно экспрессирующих CD16, CD11b на поверхностной мембране. Принимают за норму наличие субпопуляции CD16brightCD11bdimНГ% от 80 и до 99,9% с высокой плотностью экспрессии CD16 и низкой плотностью экспрессии CD11b. При условии выявления субпопуляции CD16brightCD11bbrightНГ или CD16dimCD11bbrightНГ в количестве от 40% и более определяют соответственно острую вирусную инфекцию или острую бактериальную инфекцию. Использование данного способа позволяет обеспечить точность дифференциальной диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. 3 пр., 1 табл.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов, патогенных для человека и животных. Характеризуется использованием как минимум пяти иммунохроматографических стрип-тестов, размещенных в едином корпусе. При этом в первом и втором каналах корпуса устройства находятся стрип-тесты для выявления токсинов, в третьем канале - стрип-тест для выявления вегетативных форм бактерий, в четвертом - споровых форм бактерий, а в пятом - стрип-тест для выявления питательной среды культивирования вирусов и риккетсий. Тестирование ведут путем укладки корпуса иммунохроматических стрип-тестов в теплоизолирующий цефленовый пакет, состоящий из двух слоев цефлена, с теплоизолирующей прокладкой из пористого теплоизолирующего материала между ними, а корпус иммунохроматографических стрип-тестов внутри пакета нагревают источником постоянного тепла, причем отверстие пакета закрывают механическим зажимом и считают этот момент началом тестирования. Также предложено устройство для иммунохроматографического анализа. Группа изобретений позволяет увеличить производительность иммунохроматографического анализа, расширить температурный диапазон иммунохроматографического анализа от минус 20 до плюс 50°C, сократить время получения результата до 10 мин по сравнению с анализом при комнатной температуре (20 мин), при условии достижения одинаковой чувствительности, повысить чувствительность анализа по сравнению с анализом, проводимым при комнатной температуре. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 8 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Способ включает этапы: a) обеспечения биологического образца для тестирования от указанного субъекта, причем указанный образец содержит циркулирующие тканевые макрофаги (СТМ); b) окрашивания указанных СТМ с использованием панели дифференциально меченых различных антител против опорных маркеров CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью идентификации и подсчета различных субпопуляций СТМ; c) фиксации, пермеабилизации и окрашивания СТМ с использованием одного или нескольких антител для обнаружения против одного или более эпитопов по меньшей мере одного протеазо-индуцированного фрагмента белка, полученного в результате внутриклеточной деградации не принадлежащего СТМ белка, отдельными СТМ в тканях, из которых они происходят, тем самым идентифицируя по меньшей мере одну субпопуляцию циркулирующих тканеспецифических макрофагов (CTSM). Далее проводят анализ с применением многопараметрической проточной цитометрии указанных окрашенных СТМ и CTSM путем селективного пропускания по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью определения количества сигналов каждого определенного меченого антитела, связанного с отдельными клетками. Определяют относительное и абсолютное количество отдельных клеток в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, экспрессирующих каждый из измеренных внутриклеточных эпитопов. Расчет относительного и абсолютного количества клеток проводят в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, каждое из которых происходит из различных нормальных и измененных тканей, что определяют с помощью оцениваемого набора отдельных протеазо-индуцированных фрагментов белка. Проводят определение количества связанного с антителами сигнала, ассоциированного с каждым отдельным оцениваемым внутриклеточным пептидом, с целью получения профиля окрашивания CTSM. А также сравнивают тестируемый профиль окрашивания CTSM с нормальным профилем окрашивания CTSM для каждой оцениваемой ткани, причем повышенное количество CTSM свидетельствует о наличии заболевания. Группа изобретений относится также к набору для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Использование данной группы изобретений позволяет проводить раннюю диагностику и мониторинг заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR. 2 н. и 21 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр., 7 ил.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения аналитической тест-системы на основе суспензионных микрочипов для детекции маркеров заболеваний. Для этого создают суспензионные микрочипы путем оптического кодирования микросфер различного диаметра флуоресцентными красителями с их последующим конъюгированием с биологическими распознающими молекулами. Создают детектирующие компоненты путем конъюгирования биологических детектирующих молекул с флуоресцентными красителями. Для оптического кодирования микросфер различного диаметра используют полупроводниковые флуоресцентные нанокристаллы, которые наносят послойно на поверхность микросфер. При этом слой полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов одного цвета пространственно отделяют от соседнего слоя полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов другого цвета тремя и более слоями полиэлектролитов. Для формирования внешнего слоя полиэлектролита используют полимер, включающий функциональные группы для специфического и/или ориентированного конъюгирования биологических распознающих молекул. Для маркирования биологических детектирующих молекул используют флуоресцентные красители, возбуждаемые на одной длине волны с используемыми полупроводниковыми флуоресцентными нанокристаллами. Изобретение позволяет создать тест-системы, позволяющие детектировать и количественно определять множество различных белковых маркеров, например онкологических заболеваний женской репродуктивной системы, методами проточной цитометрии на стандартных проточных цитометрах. 21 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и представляет собой способ определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах объектов окружающей среды и в почве, заключающийся в подготовке пробы, внесении в пробу иммуномагнитных частиц, иммунохимическом связывании, в результате чего образуются агрегаты цист и ооцист с магнитными частицами, улавливании агрегатов цист и ооцист в магнитном поле, отмывке зафиксированных агрегатов цист и ооцист буферным раствором, диссоциации меркаптоэтанолом или соляной кислотой, разделении цист, ооцист и магнитных частиц в магнитном поле, переносе выделенных цист и ооцист на предметное стекло для последующего иммунофлуоресцентного мечения и последующей оценки микроскопированием с применением насадки «Опти-Люм» на микроскоп, где результат учитывают исходя из того, что цисты лямблий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от округлых до овальных от 8 до 14 мкм в длину на 7-10 мкм в ширину, с ярко подсвеченными краями, ооцисты же криптоспоридий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до сферических от 3 до 5 мкм в диаметре, с ярко подсвеченными краями. Изобретение обеспечивает повышение эффективности определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах с овощей и объектов окружающей среды, в почве и сокращение временных затрат на исследование одной пробы исследуемого материала адаптированным до 15 минут. 7 пр., 7 табл., 1 ил.

Изобретение относится к новым соединениям N,N'-диэтил-N,N'-ди(2-бром-4-R-фенил)амидам 2,2'-бипиридил-6,6'-дикарбоновой кислоты и 6,6'-диэтил-9,9'-диR-3,3'-дибензо[ƒ]-1,7-нафтиридин-5,5'(6H,6'H)-дионам формулы (1) и (2) соответственно: .Изобретение также относится к способу их получения. Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в качестве органических лигандов для комплексообразования с ионами f-элементов, что может быть использовано во времяразрешенном иммунофлуоресцентном и других видах флуоресцентного анализа. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 25 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-05-27 2016-05-27T08:37:35
Наверх