Питательная среда для глубинного культивирования мицелия armillaria mellea

Изобретение относится к биотехнологии и микологии. Питательная среда содержит глюкозу, пептон, калий фосфорнокислый однозамещенный (KH2PO4), магний сернокислый 7-водный (MgSO4×7H2O), соевое масло и воду при заданном соотношении компонентов. Изобретение позволяет сократить сроки культивирования мицелия Armillaria mellea. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к биотехнологии и к микологии и может быть использовано, в частности, в качестве питательной среды при глубинном культивировании мицелия Armillaria mellea.

Предлагаемое изобретение позволит сократить время культивирования мицелия Armillaria mellea и повысить его выход.

Известна питательная среда для глубинного культивирования Armillaria mellea [1], содержащая, %: порошок куколок шелкопряда - 1,500, соевый жмых - 1,500, сахарозу - 2,000, этанол - 1,000, глюкозу - 1,000, MgSO4 - 0,075, K2HPO4 - 0,150.

Недостатками питательной среды являются высокая себестоимость, использование веществ, проходящих особый учет и контроль, ограниченность ресурсов.

Известна питательная среда для культивирования мицелия Armillaria mellea [2], содержащая, г/л: глюкозу - 15,00; KH2PO4 - 1,75; MgSO4×7H2O - 0,75; L-аспарагин - 6,00; пептон - 2,00; тиамин - 0,003 и минеральный раствор 10,00 мл. В минеральный раствор вводят, мг/10,0 мл: ZnSO4×7H2O - 879,0; CuSO4×5H2O - 39,3; Н3ВО3 - 5,7; MnSO4×H2O - 6,1; (NH4)6Mo7O24×7H2O - 36,8.

Недостатком этой среды является ограниченность ресурсов, высокая себестоимость и сложный состав.

Известна питательная среда для глубинного культивирования мицелия Armillaria mellea [3], содержащая, %: измельченный картофель - 20,000; глюкозу - 1,000; сахарозу - 1,000; дрожжевой экстракт - 2,000; порошок куколок шелкопряда - 1,000; MgSO4×H2O - 0,075; KH2PO4 - 0,150; VB1 - 0,001%.

Недостатками данной среды являются ограниченность ресурсов (порошок куколок шелкопряда), низкое качество среды за счет введения измельченного картофеля, высокая себестоимость.

Известна питательная среда для выращивания мицелия Armillaria mellea глубинным методом [4], содержащая, %: экстракт бобов фасоли - 25,00; жидкий кукурузный экстракт - 2,00; декстрин - 2,50; тиамин - 0,06; этанол - 1,00; KH2PO4 - 0,30.

Недостатками этой питательной среды являются ограниченность ресурсов, таких как тиамин и декстрин, сложность состава, высокая себестоимость питательной среды, использование веществ, проходящего особый учет и контроль.

Известна питательная среда для культивирования мицелия Armillaria mellea в жидкой среде [5], содержащая, г/л: глюкозу - 40,0, дрожжевой экстракт - 4,0.

Недостатками среды являются низкий выход биомассы мицелия, длительный срок культивирования.

Наиболее близкой к заявленному техническому решению является питательная среда [6, прототип], которая включает, г/л: глюкозу - 40,0; дрожжевой экстракт - 3,0; KH2PO4 - 4,0; MgSO4 - 2,0.

Недостатком известной питательной среды является низкая скорость роста мицелия базидиомицета Armillaria mellea.

Предлагаемое техническое решение направлено на создание питательных сред, имеющих низкую себестоимость и обеспечивающих быстрый рост мицелия гриба Armillaria mellea и сокращение временных затрат на стадии культивирования мицелия.

Этот результат достигается за счет использования минеральных компонентов, углеводов, белковых веществ и жиров при следующем соотношении компонентов, г/л:

Глюкоза - 5,0-10,0

Пептон - 2,6-6,1

KH2PO4 - 1,5-3,0

MgSO4×7H2O - 0,6-1,1

Соевое масло - 12,0-20,0

Остальное - вода.

Использование соевого масла позволяет ускорить процесс накопления биомассы мицелия Armillaria mellea за счет содержащихся в нем питательных веществ - органических кислот, минеральных компонентов и витаминов.

Количественное содержание соевого масла в предлагаемой питательной среде обуславливает увеличение ее ростовых характеристик, и выход за пределы заявленных значений приводит к снижению ростовых свойств питательной среды.

Так, при содержании в питательной среде соевого масла в количестве 12 г/л (пример 1) выход биомассы составляет 24,18 г/л, увеличение количества соевого масла до 18 г/л в 1,2 раза увеличивает выход биомассы (пример 2), однако дальнейшее увеличение количества соевого масла - 20 г/л (пример 3) приводит к снижению ростовых свойств питательной среды.

Стерильные жидкие питательные среды готовят следующим образом. Все компоненты смешивают, нагревают до 30°С на водяной бане до полного растворения твердых частиц, полученную смесь автоклавируют при 1,2 атм в течение 30 мин, затем охлаждают до 18°С.

Подготовленную таким образом питательную среду инокулируют стерильно гомогенизированным мицелием Armillaria mellea в количестве 10%.

Для получения посевного материала выращенный в чашках Петри на агаризованной среде мицелий вносят в колбы объемом 250 мл со стерильной жидкой средой и культивируют в стационарных условиях при температуре 28°С.

Примеры осуществления технического решения:

Пример 1.

Для приготовления 1 л питательной среды берут компоненты в следующем количестве, г/л:

Глюкоза - 8,0

Пептон - 4,0

KH2PO4 - 2,0

MgSO4×7H2O - 0,8

Соевое масло - 12,0

Остальное - вода.

Стерильные жидкие питательные среды готовят следующим образом. Все компоненты смешивают, нагревают до 30°С на водяной бане до полного растворения твердых частиц, полученную смесь автоклавируют при 1,2 атм в течение 30 мин, затем охлаждают до 18°С.

Пример 2.

Для приготовления 1 л питательной среды берут компоненты в следующем количестве, г/л:

Глюкоза - 10,0

Пептон - 5,0

КН2РО4 - 3,0

MgSO4×7H2O - 1,0

Соевое масло - 18,0

Остальное - вода.

Стерильные жидкие питательные среды готовят по примеру 1

Пример 3.

Для приготовления 1 л питательной среды берут компоненты в следующем количестве, г/л:

Глюкоза - 9,0

Пептон - 4,5

KH2PO4 - 2,5

MgSO4×7H2O - 0,9

Соевое масло - 20,0

Остальное - вода.

Стерильные жидкие питательные среды готовят по примеру 1

Данные по всем примерам представлены в таблице 1.

В контроле питательной средой служила среда содержащая, г/л: глюкоза - 20,0; пептон - 10,0; дрожжевой экстракт - 2.

Приведенные примеры показывают, что предлагаемая питательная среда по своим ростовым свойствам превосходит прототип. Преимущества предлагаемой среды выражаются в способности более активного и укоренного наращивания биомассы мицелия базидиомицета Armillaria mellea.

На сегодняшний день на базе предприятия ООО «Биотехнологии переработки кормов» (г. Бийск) организованно малотоннажное производство мицелия грибов Armillaria mellea с целью получения белковых кормовых добавок.

Источники информации

1. Gao. L.W. The cultivation, bioactive component s and pharmacological effects of Armillaria mellea / L.W. Gao, W.Y. Li, Y.L. Zhao, J.W. Wang // African Journal of Biotechnology. - 2009. - Vol. 8 (25). - pp. 7383-7390.

2. Hansson G. Effects of cultivation techniques and media on yields and morphology of the basidiomycete Armillaria mellea / G. Hansson, G. Seifert // Applied Microbiology and Biotechnology. - Volume 26, Issue 5, pp 468-473.

3. Yuan Y. Optimization of Liquid Submerged Fermentation Culture Media of Armillaria mellea / Y. Yuan, L. Jingsheng // Academic Periodical of Farm Products Processing - 2009-07.

4. Cheng XH. Optimization of submerged culture condition for production of mycelial biomass by Armillaria mellea / XH Cheng, LD Liu, HX Dong, HG Qu, DH Cai // Journal Article, Research Support, Non-U.S. Govt, English Abstract (lang: chi).

5. Elisashvili V. Submerged Cultivation of Medicinal Mushrooms: Bioprocesses and Products (Review) / V. Elisashvili // International Journal of Medicinal Mushrooms. - 2012. - 14(3): 211-239.

6. Lung MY. Optimization of exopolysaccharide production from Armillaria mellea in submerged cultures / MY Lung, PC Huang // Lett Appl Microbiol. - 2010 - 50(2): 198-204. doi: 10.1111/j.1472-765X.2009.02777.x. Epub 2009 Nov 23.

Питательная среда для глубинного культивирования мицелия Armillaria mellea, содержащая глюкозу, пептон, минеральные компоненты и соевое масло, при следующем соотношении компонентов, г/л:

Глюкоза 5,0-10,0
Пептон 2,6-6,1
KH2PO4 1,5-3,0
MgSO4×7H2O 0,6-1,1
Соевое масло 12,0-20,0
Вода до 1,0 л



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения компактина, в котором осуществляют культивирование штамма Penicillium citrinum ВКПМ F-1099 на питательной среде.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен промышленный способ получения компактина.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к штаммам грибам-продуцентам биологически активных веществ. Штамм Laetiporus sulphureus 3Х, обладающий широким спектром различных биологически активных веществ, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ F-1188 и может быть использован при производстве биологически активных добавок.

Группа изобретений относится к области защиты растений от вредителей. Предложен способ получения биологически-активного препарата для защиты растений, биологически-активный препарат для защиты растений, способ изготовления микроконтейнеров для осуществления способа, микроконтейнер для биологически-активного препарата, а также способ защиты растений от вредителей, где способ включает активацию биологически-активного препарата и нанесение его на растения.

Изобретение относится к биотехнологии, может быть использовано при производстве биологически активных добавок пищевого, кормового и медицинского назначения. Осуществляют двухстадийную обработку мицелиальной биомассы гриба Aspergillus oryzae 12-84 (RCAM 01134) при естественном значении pH под действием внутриклеточных ферментов.

Группа изобретений относится к применению инсектицидной сложной частицы для регулирования заражения членистоногими в местах для хранения зерна. Сложная частица имеет диаметр ≥10 мкм и включает гидрофобную частицу из воска, имеющую температуру плавления ≥50°C, и споры штамма энтомопатогенного грибка Beauveria bassiana IMI 398548.

Предложен штамм микромицета Clonostachys candelabrum, обладающий антибактериальной активностью в отношении возбудителя туляремии Francisella tularensis 15/10. Штамм микромицета выделен из почвы и депонирован в Государственную коллекцию патогенных микроорганизмов (ГКПМ-Оболенск) под регистрационным номером F-1466.

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии. Штамм Trichoderma harzianum Rifai ВКПМ F-180 применяется в качестве продуцента ингибитора Mycoplasma hominis и может быть использован при лечении микоплазменных инфекций.

Изобретение относится к биотехнологии, прикладной микробиологии и может быть использовано для получения эфирного масла. Штамм Eremothecium ashbyi Guill.

Изобретение относится к биотехнологии, прикладной микробиологии и может быть использовано для получения эфирного масла. Штамм Eremothecium ashbyi Guill.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к растениеводству. Способ включает полив растений водным раствором органического и минерального удобрения, полученного путем добавления к 1 литру воды 50 мл азотной кислоты и которое перед применением для полива растений разбавляют водой в 100 раз.

Способ строительства поливной системы культурного газона включает выращивание травяного покрова из предварительно сформированных газонных полос, имеющих основу, выращивание осуществляют на предварительно подготовленной площадке на месте обустройства газона, поливную систему выполняют в виде отдельных гнутых перфорированных секций элементов, выполненных в форме цифры восемь в плане и подсоединенных к источнику подачи воды, снабженному автоматической системой управления, секции элементов размещают между двумя слоями геотекстиля, на поверхность которого укладывают плодородную почву и засевают семена, гнутые перфорированные секции элементов снабжают в их концевой части регулируемым вентилем и соединяют со сбросной дреной.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к грибоводству. Установка содержит установленные в корпусе на стеллажах ящики для компоста.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано как при возделывании овощных корнеплодных растений, так и кормовых. Задачей, на решение которой направлено изобретение, является получение высокачественного урожая корнеплодов с использованием узколенточной посадки и долотообразных лап в межленточном пространстве.
Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к овощеводству. Способ включает рядовую посадку кустов на Т-образной шпалере.

Изобретение относится к биотехнологии. Состав среды для культивирования растения семейства Рясковые (Lemna minor) в условиях in vitro включает фосфат калия монозамещенный - KH2PO4, четырехводный нитрат кальция - Ca(NO3)2×4H2O, нитрат калия - KNO3, семиводный сульфат магния - MgSO4×7H2O, двуводный молибдат натрия - Na2MoO4×2H2O, семиводный сульфат цинка - ZnSO4×7H2O, двунатриевый дигидрат этилендиаминтетрауксусной кислоты - Nа2ЭДТА×2H2O и борную кислоту - H3BO3, дополнительно содержит калия йодид - KI, кобальта хлорид - CoCl2×6H2O, глицин, глутамин, тиамин, пиридоксин, фолиевую кислоту, семиводный сульфат железа - FeSO4×7H2O, пятиводный сульфат марганца - MnSO4×5H2O, фруктозу и пятиводный сульфат меди - CuSO4×5H2O.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к растениеводству. Способ включает посев семян бобовых трав, например клевера и уход за посевами.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к виноградарству и плодоводству. Способ включает создание саженцев, посадку растений, обрезку и формирование основания рукавов, подвязку и механизированную укрывку кустов на зиму.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности виноградарства. Способ включает создание саженцев, выведение штамба и рукавов, рожков на плодоношение и ведение виноградных насаждений куста на вертикальной однопроволочной шпалере.

Изобретение относится к области грибоводства и биотехнологии. Способ включает подготовку субстрата до момента автоклавирования.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к плодоводству, физиологии растений и питомниководству. Способ включает измерение динамики электропроводности тканей прививки. При этом электропроводность тканей прививки измеряют в трех местах прививки: привой, место прививки и подвой, в первый день и через 14-16 дней после ее осуществления. К качественно прижившимся относят те, у которых корреляция значений электропроводности привоя и подвоя стремится к единице, стандартное отклонение от первоначальных значений внутри сорто-подвойной комбинации не превышает пределы 75-85 мкСм и характер динамики имеет монотонный рост. Способ позволяет провести раннюю оценку качества срастания прививочных компонентов и повысить выход качественного посадочного материала. 4 ил., 1 табл.
Наверх