Способ прогнозирования угрожающего позднего выкидыша у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе

Авторы патента:

G01N33/533 - с флуоресцентными метками

Владельцы патента RU 2592241:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у беременных женщин. Для этого в сроке 5-12 недель гестации определяют относительное количество CD178+ моноцитов гестации в периферической венозной крови. При его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет выбрать правильную тактику ведения беременности, провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности в группе женщин с высоким риском невынашивания беременности. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии и позволяет прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе.

Актуальность изобретения определяется относительно высокой частотой встречаемости привычного невынашивания беременности, которая составляет 10-25% (Потеря беременности / А.Н. Стрижаков, И.В. Игнатко. - М.: МИА, - 2007. - 224 с.). При этом риск последующего самопроизвольного выкидыша в том же гестационном сроке достигает 18,6-49,17% (Невынашивание беременности / В.М. Сидельникова, Г.Т. Сухих. - М.: МИА, 2010. - 536 с.). Выявлено, что для женщин с репродуктивными потерями в анамнезе характерно осложненное течение последующей беременности (преждевременные роды, гестационный диабет, синдром задержки развития плода, преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты, гестационная артериальная гипертензия, преэклампсия, низкая оценка новорожденного по шкале Апгар (Физиология и патология плода / А.Н. Стрижаков, А.И. Давыдов, Л.Д. Белоцерковцева, И.В. Игнатко. - М.: Медицина, 2004. - 356 с., Does miscarriage in an initial pregnancy lead to adverse obstetric and perinatal outcomes in the next continuing pregnancy? / S. Bhattacharya, J. Townend, A. Shetty et al. // BJOG. - 2008. - Vol.115(13). - P. 1623-9). В связи с этим у женщин с привычным невынашиванием в 51% наблюдений отмечается неблагоприятный для плода исход беременности, что обусловливает высокий уровень перинатальной заболеваемости и смертности (Невынашивание беременности / В.М. Сидельникова, Г.Т. Сухих. - М.: МИА, 2010. - 536 с.). Таким образом, прогнозирование и последующая профилактика угрожающего позднего выкидыша позволит предотвратить различные осложнения гестационного периода и неблагоприятные исходы беременности.

Существует способ прогнозирования возникновения и сохранения угрозы прерывания беременности на всем протяжении срока гестации путем определения содержания рецепторного антагониста интерлейкина-1 (ILl-Ra) (Пат. №2317554. Российская Федерация. Способ прогнозирования возникновения и сохранения угрозы прерывания беременности на всем протяжении срока гестации / Посисеева Л.В., Сотникова Н.Ю., Кудряшова А.В., Лукина Н.С., Панова И.А. // Изобретения. Полезные модели. - 2008. - №5). Заявляемый способ заключается в том, что в сроке 6-12 недель гестации в крови беременных определяют содержание ILl-Ra. Развитие угрозы прерывания беременности в 1 триместре, сохраняющейся на всем протяжении срока гестации, прогнозируют при содержании ILl-Ra более 700 пг/мл с точностью 88%. Авторы изобретения не указывают конкретные сроки гестации, в которые наблюдается угроза прерывания, исследование проводится в общей популяции беременных женщин, что является экономически невыгодным и не направлено на прогнозирование невынашивания беременности в группе женщин с привычной потерей беременности.

Существует способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности путем определения содержания растворимых фибрин-мономерных комплексов в плазме крови (Пат. №2123698. Российская Федерация. Способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности / Смиренина И.В., Пестрикова Т.Ю., Федорова Е.Н. // Изобретения. - 1998. - №35). По данному способу в плазме крови беременных определяют содержание фибрин-мономерных комплексов и при показателях более 5,5×10^-2 г/л, 6,5×10^-2 г/л и 7×10^-2 г/л соответственно в первом, во втором и в третьем триместрах беременности прогнозируют угрозу невынашивания беременности. Авторы изобретения не указывают точность, чувствительность и специфичность способа. Способ является трудоемким, предполагает прогнозировать угрозу прерывания за 2-4 недели до появления клинических симптомов, в связи с чем необходимо неоднократное проведение исследования в течение второго триместра. Данный способ позволяет прогнозировать угрозу прерывания у женщин в общей популяции, что связано с большими экономическими затратами и не направлен на прогнозирование невынашивания беременности в группе женщин с привычной потерей беременности.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ прогнозирования невынашивания во втором триместре (Пат. №2340899. Российская Федерация. Способ прогнозирования невынашивания во втором триместре беременности / Левченко М.В., Орлов В.И. // Изобретения. Полезные модели. - 2008. - №34). По данному способу у беременной во втором триместре гестации определяют содержание трансформирующего фактора роста-β2 (ТФР-β2) в сыворотке крови и, если ΤΦΡ-β2 меньше 1806,8 пг/мл, то прогнозируют угрозу прерывания беременности. В случае, если ТФР-β2 больше 1806,8 пг/мл, то дополнительно определяют уровень субстанции Ρ и, если он больше 0,274 нг/мл, то также прогнозируют угрозу прерывания беременности во втором триместре с точностью 89%. Вышеуказанные авторы проводят лабораторное обследование по двум показателям: ΤΦΡ-β2 и субстанции Р, что усложняет методику выполнения способа, оценивают содержание ΤΦΡ-β2 в общей популяции беременных женщин, что является экономически затратным. Способ не направлен на прогнозирование невынашивания беременности в группе женщин с привычным невынашиванием, у которых наиболее высокий риск прерывания последующей беременности.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в сроке 5-12 недели гестации в периферической венозной крови беременных с угрозой прерывания беременности и привычным невынашиванием в анамнезе определяют относительное количество CD178+ моноцитов, и при его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш.

Технический результат направлен на повышение точности, чувствительности и специфичности прогнозирования угрожающего позднего выкидыша (12-22 недели) (Акушерство: национальное руководство / Под ред. Э.К. Айламазяна, В.И. Кулакова, В.Е. Радзинского, Г.М. Савельевой. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. - 1200 с.). В этом сроке гестации происходит вторая волна инвазии трофобласта, становление плодово-маточного кровотока. Угрожающий поздний выкидыш, являясь как причиной, так и следствием возникновения плацентарной недостаточности, приводит к развитию хронической гипоксии плода, синдрому задержки развития плода, рождению ребенка с низкой массой тела (Плацентарная недостаточность и инфекция / В.И. Кулаков, Н.В. Орджоникидзе, В.Л. Тютюнник. - М., 2004. - 494 с.). Предлагаемый метод исследования позволяет с точностью 97,6% прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе, что дает возможность провести своевременную профилактику и лечение данной патологии, снизить уровень перинатальной заболеваемости и смертности в группе женщин с высоким риском прерывания последующей беременности.

Способ осуществляется следующим образом.

1. К 3 мл гепаринизированной крови из кубитальной вены добавляют 3 мл Среды 199 и выделяют обогащенную популяцию мононуклеарных клеток стандартным методом скоростного центрифугирования при 1500 оборотов в минуту в течение 40 минут в градиенте плотности фиколл-урографина (A. Boum / Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - Vol. 21, N. 97. - P. 77).

2. Суспензию мононуклеарных клеток дважды отмывают физиологическим раствором, доводят концентрацию клеток до 1×10⁶ кл/мл. К 0,1 мл полученной суспензии добавляют 20 мкл моноклональных антител анти-CD178, конъюгированных с фикоэритрином. Клетки инкубируют в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, отмывают и фиксируют в 0,5 мл фиксирующего раствора CellFix™ (BD Biosciences, Belgium).

3. Определяют относительное (процентное) количество CD178+ моноцитов в моноцитарном гейте на проточном цитометре FACScanto (Becton Dickinson, USA). При его значении 37,7% или менее прогнозируют угрожающий поздний выкидыш.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у беременных с угрозой прерывания ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе, по определению содержания CD178+ моноцитов в периферической венозной крови.

Ранее определение CD178+ моноцитов в периферической крови с целью прогнозирования угрожающего позднего выкидыша у женщин с угрозой прерывания ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе не использовалось. В литературе отсутствуют данные об изменении содержания CD178+ моноцитов при угрозе прерывания и привычном невынашивании беременности в зависимости от ее исхода. В ряде работ была доказана роль CD178 в развитии опухолевых (Participation of the Fas/FasL signaling pathway and the lung microenvironment in the development of osteosarcoma lung metastases / G. Huang, K. Nishimoto, Y. Yang, E.S. Kleinerman // Adv. Exp.Med. Biol. - 2014. - Vol. 804. - P. 203-17), аутоиммунных заболеваний (Highly efficient, in-vivo Fas-mediated apoptosis of B-cell lymphoma by hexameric CTLA4-FasL / A. Aronin, S. Amsili, T.B. Prigozhina et al. // J. Hematol. Oncol. - 2014. - Vol. 7(1). - P. 64), преэклампсии (Aberrant expression of corticotropin-releasing hormone in pre-eclampsia induces expression of FasL in maternal macrophages and extravillous trophoblast apoptosis / G. Petsas, U. Jeschke, D.U. Richter et al. // Mol. Hum. Reprod. - 2012. - Vol. 18(11). - P. 535-45). Показано, что самопроизвольные аборты сопровождаются повышением экспрессии CD178 молекул в децидуальных лимфоцитах (A panoramic view to relationships between reproductive failure and immunological factors / A. Kokcu, E. Yavuz, H. Celik, D. Bildircin // Arch. Gynecol. Obstet. - 2012. - Vol. 286(5). - P. 1283-9). Вероятно, снижение экспрессии CD178 моноцитами при угрозе прерывания ранних сроков может являться одним из факторов, приводящих к нарушению механизмов апоптоза при беременности, что может обусловливать развитие угрожающего позднего выкидыша у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе.

Использование предлагаемого способа позволяет с высокой степенью точности (97,6%) прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе.

Отличительными признаками заявленного способа являются: определение в 5-12 недели гестации относительного количества CD178+ моноцитов. При его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Пациентка О., 35 лет, беременность четвертая, желанная, наступила самостоятельно, во втором браке. В анамнезе три погибшие беременности ранних сроков, преимущественно инфекционного генеза. При планировании настоящей беременности пролечена уреаплазменная инфекция. В сроке 12 недель беременности госпитализирована в гинекологическое отделение Ив НИИ M и Д с жалобами на тянущие боли внизу живота. При влагалищном исследовании: наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длинная, наружный зев сомкнут.Тело матки увеличено до 12 недель беременности, округлой формы, плотное, подвижное, безболезненное. Выделения слизистые.

Диагноз: Беременность 12 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

До назначения сохраняющей терапии было проведено обследование по заявляемому способу: относительное количество CD178+ моноцитов составило 33,2%.

Заключение: прогноз - угрожающий поздний выкидыш.

Проводилась сохраняющая терапия.

В сроке 16 недель беременности пациентка повторно госпитализирована в гинекологическое отделение с жалобами на тянущие боли внизу живота, по ультразвуковому исследованию (УЗИ) определяется гипертонус по задней стенке матки, гипоэхогенное образование (гематома) 45×20 мм.

Диагноз: Беременность 16 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. Пациентка Α., 30 лет, беременность четвертая, желанная, наступила самостоятельно, в первом браке. В анамнезе три самопроизвольных выкидыша ранних сроков, преимущественно инфекционного генеза. При планировании настоящей беременности пролечена микоплазменная инфекция. В сроке 9 недель беременности госпитализирована в гинекологическое отделение Ив НИИ M и Д с жалобами на тянущие боли внизу живота. При влагалищном исследовании: наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длинная, наружный зев сомкнут.Тело матки увеличено до 6 недель беременности, округлой формы, плотное, подвижное, безболезненное. Выделения слизистые.

Диагноз: Беременность 9 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

До назначения сохраняющей терапии было проведено обследование по заявляемому способу: относительное количество CD 178+ моноцитов составило 46,7%.

Заключение: прогноз - отсутствие угрожающего позднего выкидыша.

Проводилась сохраняющая терапия.

В сроке 12-22 недели гестации пациентка не отмечала наличия боли внизу живота, по УЗИ - патологии не выявлено.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Пациентка Ж., 33 лет, беременность четвертая, желанная, наступила самостоятельно, во втором браке. В анамнезе три самопроизвольных выкидыша ранних сроков, преимущественно инфекционного генеза. В сроке 5 недель беременности госпитализирована в гинекологическое отделение Ив НИИ M и Д с жалобами на тянущие боли внизу живота. При влагалищном исследовании: наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое, шейка матки конической формы, длинная, наружный зев сомкнут.Тело матки увеличено до 5 недель беременности, округлой формы, плотное, подвижное, безболезненное. Выделения слизистые.

Диагноз: Беременность 5 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

До назначения сохраняющей терапии было проведено обследование по заявляемому способу: относительное количество CD178+ моноцитов составило 37,7%.

Заключение: прогноз - угрожающий поздний выкидыш.

Проводилась сохраняющая терапия.

В сроке 16 недель беременности пациентка повторно госпитализирована в гинекологическое отделение с жалобами на тянущие боли внизу живота, по УЗИ определяется гипоэхогенное образование (гематома) 40×25 мм.

Диагноз: Беременность 16 недель. Угрожающий выкидыш. Привычное невынашивание беременности.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 43 женщины, результаты исследований приведены в таблице 1.

Преимущества заявляемого способа:

1. Высокая точность - 97,6%, чувствительность - 100% и специфичность - 92,3%;

2. Хорошая воспроизводимость метода;

3. Простота и доступность выполнения методики;

4. Простота в интерпретации результатов обследования;

5. Способ позволяет с наиболее ранних сроков гестации прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе, что дает возможность профилактировать данную патологию и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности.

Способ прогнозирования угрожающего позднего выкидыша у беременных женщин путем иммунологического исследования периферической венозной крови, отличающийся тем, что в сроке 5-12 недели гестации определяют относительное количество CD178+ моноцитов и при его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов.

Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша // 2585244

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша. Для этого проводят иммунологическое исследование периферической венозной крови в 7-12 недель гестации у женщин с угрозой невынашивания беременности.

Способ определения антител к аллогенным hla-g // 2585091

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения антител к аллогенным HLA-G в сыворотки крови. Для этого используют тест перекрестной совместимости (cross match) мононуклеаров донора с сывороткой реципиента.

Способ оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов методом проточной цитофлуориметрии при специфической активации антигеном // 2582395

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов. Для этого используют бруцеллин для специфической активации лимфоцитов.

Способ прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после проведения аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток // 2580648

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования развития безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после аутологической трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.

Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы // 2578448

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы.

Способ лабораторной диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии // 2574968

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Для этого окрашивают исследуемый образец крови моноклональными антителами CD235a (FITC)/ CD59(PE)/CD71 (АРС).

Способ диагностики наследственной оптической нейропатии // 2566271

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для диагностики наследственной оптической нейропатии (НОН). Для этого проводят клинические и цитологические исследования и дополнительно из кожи пациента получают культуру фибробластов плотностью 5000-10000 клеток на см2, окрашивают митохондриальным потенциалзависимым флюоресцентным красителем TMRE до конечной концентрации 25 нМ.

Иммунологические исследования с использованием недисперсного хемилюминесцентного реактива // 2559581

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2555340

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения еx-vivo эффективности лечения рака. Для этого после введения одной или более доз иммуногенной композиции субъекту измеряют уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) в организме.

Способ выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода /сзрп/ // 2595884

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода (СЗРП). Для этого у пациенток с фетоплацентарной недостаточностью и ЗРП в сыворотке крови иммуноферментным методом определяют активность супероксиддисмутазы, содержание фактора роста плаценты, эндоглина и мелатонина. По этим показателям рассчитывают прогностический коэффициент П по формуле: П=(0,0001*COD+0,0255*Mel+0,1636*CD105+(-0,0487*PGF)-8,5389, где COD - супероксиддисмутаза, пг/мл, Mel - мелатонин, пг/мл, CD 105 - эндоглин, пг/мл, PGF - фактор роста плаценты, пг/мл. При величине П равной 0,64 и более прогнозируют высокий риск развития критического состояния плода в антенатальном периоде, что требует завершения беременности путем операции кесарево сечение в экстренном порядке в интересах плода. Способ обеспечивает повышение точности прогнозирования критического состояния плода антенатально, что позволяет своевременно выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.

Способ дифференциальной экспресс-диагностики острых вирусных и бактериальных инфекций // 2602677

Изобретение относится к области медицины, а именно к отоларингологии, и может быть использовано для дифференциальной экспресс-диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. Для этого проводят забор периферической крови и определяют относительное содержание субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов, одновременно экспрессирующих CD16, CD11b на поверхностной мембране. Принимают за норму наличие субпопуляции CD16brightCD11bdimНГ% от 80 и до 99,9% с высокой плотностью экспрессии CD16 и низкой плотностью экспрессии CD11b. При условии выявления субпопуляции CD16brightCD11bbrightНГ или CD16dimCD11bbrightНГ в количестве от 40% и более определяют соответственно острую вирусную инфекцию или острую бактериальную инфекцию. Использование данного способа позволяет обеспечить точность дифференциальной диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. 3 пр., 1 табл.

Способ одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов и устройство иммунохроматографического анализа для его реализации // 2614689

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов, патогенных для человека и животных. Характеризуется использованием как минимум пяти иммунохроматографических стрип-тестов, размещенных в едином корпусе. При этом в первом и втором каналах корпуса устройства находятся стрип-тесты для выявления токсинов, в третьем канале - стрип-тест для выявления вегетативных форм бактерий, в четвертом - споровых форм бактерий, а в пятом - стрип-тест для выявления питательной среды культивирования вирусов и риккетсий. Тестирование ведут путем укладки корпуса иммунохроматических стрип-тестов в теплоизолирующий цефленовый пакет, состоящий из двух слоев цефлена, с теплоизолирующей прокладкой из пористого теплоизолирующего материала между ними, а корпус иммунохроматографических стрип-тестов внутри пакета нагревают источником постоянного тепла, причем отверстие пакета закрывают механическим зажимом и считают этот момент началом тестирования. Также предложено устройство для иммунохроматографического анализа. Группа изобретений позволяет увеличить производительность иммунохроматографического анализа, расширить температурный диапазон иммунохроматографического анализа от минус 20 до плюс 50°C, сократить время получения результата до 10 мин по сравнению с анализом при комнатной температуре (20 мин), при условии достижения одинаковой чувствительности, повысить чувствительность анализа по сравнению с анализом, проводимым при комнатной температуре. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 8 пр.

Способы и средства для мониторинга нарушения тканевого гомеостаза в организме // 2635767

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Способ включает этапы: a) обеспечения биологического образца для тестирования от указанного субъекта, причем указанный образец содержит циркулирующие тканевые макрофаги (СТМ); b) окрашивания указанных СТМ с использованием панели дифференциально меченых различных антител против опорных маркеров CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью идентификации и подсчета различных субпопуляций СТМ; c) фиксации, пермеабилизации и окрашивания СТМ с использованием одного или нескольких антител для обнаружения против одного или более эпитопов по меньшей мере одного протеазо-индуцированного фрагмента белка, полученного в результате внутриклеточной деградации не принадлежащего СТМ белка, отдельными СТМ в тканях, из которых они происходят, тем самым идентифицируя по меньшей мере одну субпопуляцию циркулирующих тканеспецифических макрофагов (CTSM). Далее проводят анализ с применением многопараметрической проточной цитометрии указанных окрашенных СТМ и CTSM путем селективного пропускания по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью определения количества сигналов каждого определенного меченого антитела, связанного с отдельными клетками. Определяют относительное и абсолютное количество отдельных клеток в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, экспрессирующих каждый из измеренных внутриклеточных эпитопов. Расчет относительного и абсолютного количества клеток проводят в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, каждое из которых происходит из различных нормальных и измененных тканей, что определяют с помощью оцениваемого набора отдельных протеазо-индуцированных фрагментов белка. Проводят определение количества связанного с антителами сигнала, ассоциированного с каждым отдельным оцениваемым внутриклеточным пептидом, с целью получения профиля окрашивания CTSM. А также сравнивают тестируемый профиль окрашивания CTSM с нормальным профилем окрашивания CTSM для каждой оцениваемой ткани, причем повышенное количество CTSM свидетельствует о наличии заболевания. Группа изобретений относится также к набору для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Использование данной группы изобретений позволяет проводить раннюю диагностику и мониторинг заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR. 2 н. и 21 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр., 7 ил.

Способ получения аналитической тест-системы на основе суспензионных микрочипов для детекции маркеров заболеваний // 2638787

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения аналитической тест-системы на основе суспензионных микрочипов для детекции маркеров заболеваний. Для этого создают суспензионные микрочипы путем оптического кодирования микросфер различного диаметра флуоресцентными красителями с их последующим конъюгированием с биологическими распознающими молекулами. Создают детектирующие компоненты путем конъюгирования биологических детектирующих молекул с флуоресцентными красителями. Для оптического кодирования микросфер различного диаметра используют полупроводниковые флуоресцентные нанокристаллы, которые наносят послойно на поверхность микросфер. При этом слой полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов одного цвета пространственно отделяют от соседнего слоя полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов другого цвета тремя и более слоями полиэлектролитов. Для формирования внешнего слоя полиэлектролита используют полимер, включающий функциональные группы для специфического и/или ориентированного конъюгирования биологических распознающих молекул. Для маркирования биологических детектирующих молекул используют флуоресцентные красители, возбуждаемые на одной длине волны с используемыми полупроводниковыми флуоресцентными нанокристаллами. Изобретение позволяет создать тест-системы, позволяющие детектировать и количественно определять множество различных белковых маркеров, например онкологических заболеваний женской репродуктивной системы, методами проточной цитометрии на стандартных проточных цитометрах. 21 з.п. ф-лы, 3 ил.

Способ определения цист лямблий и ооцист криптоспоридий в клиническом материале, смывах с объектов окружающей среды, в почве // 2638810

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и представляет собой способ определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах объектов окружающей среды и в почве, заключающийся в подготовке пробы, внесении в пробу иммуномагнитных частиц, иммунохимическом связывании, в результате чего образуются агрегаты цист и ооцист с магнитными частицами, улавливании агрегатов цист и ооцист в магнитном поле, отмывке зафиксированных агрегатов цист и ооцист буферным раствором, диссоциации меркаптоэтанолом или соляной кислотой, разделении цист, ооцист и магнитных частиц в магнитном поле, переносе выделенных цист и ооцист на предметное стекло для последующего иммунофлуоресцентного мечения и последующей оценки микроскопированием с применением насадки «Опти-Люм» на микроскоп, где результат учитывают исходя из того, что цисты лямблий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от округлых до овальных от 8 до 14 мкм в длину на 7-10 мкм в ширину, с ярко подсвеченными краями, ооцисты же криптоспоридий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до сферических от 3 до 5 мкм в диаметре, с ярко подсвеченными краями. Изобретение обеспечивает повышение эффективности определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах с овощей и объектов окружающей среды, в почве и сокращение временных затрат на исследование одной пробы исследуемого материала адаптированным до 15 минут. 7 пр., 7 табл., 1 ил.

N,n’-диэтил- n,n’-ди(2-бром-4-r-фенил)диамиды 2,2’-бипиридил-6,6’-дикарбоновой кислоты и способ их получения, циклизация полученных амидов с образованием 6,6’-диэтил-9,9’-диr-дибензо[f]-1,7-нафтиридин-5,5’(6н,6’h)-дионов // 2647578

Изобретение относится к новым соединениям N,N'-диэтил-N,N'-ди(2-бром-4-R-фенил)амидам 2,2'-бипиридил-6,6'-дикарбоновой кислоты и 6,6'-диэтил-9,9'-диR-3,3'-дибензо[ƒ]-1,7-нафтиридин-5,5'(6H,6'H)-дионам формулы (1) и (2) соответственно: .Изобретение также относится к способу их получения. Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в качестве органических лигандов для комплексообразования с ионами f-элементов, что может быть использовано во времяразрешенном иммунофлуоресцентном и других видах флуоресцентного анализа. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 25 пр.