Способ оценки приспособительно-компенсаторной реакции у здоровых лиц на дистанционное прекондиционирование

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для оценки приспособительно-компенсаторной реакции у здоровых лиц на дистанционное прекондиционирование. Проводят пробу с артериальной окклюзией путем наложения манжеты на верхнюю часть руки. Создают окклюзию путем подъема давления в манжете до 200 мм рт.ст. на протяжении 5 мин, затем осуществляют реперфузию на протяжении 5 мин. Цикл проводят три раза. Измеряют параметры микроциркуляции методом лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) и содержание порфиринов на длинах волн 710, 640 и 680 нм методом лазерной флуоресценции (ЛФ) при помощи многофункционального лазерного диагностического комплекса «ЛАКК-М». Датчик располагают на ладонной поверхности левого указательного пальца руки в положении пациента лежа на спине после 5-минутного периода адаптации в помещении при температуре +23 - +24°С. По ЛДФ рассчитывают параметры микроциркуляции: показатель микроциркуляции (ПМ), среднеквадратичное отклонение (СКО), величину микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc). Сравнивают показатели до и после прекондиционирования. При увеличении после прекондиционирования показателей ПМ, СКО, СТ, снижении Rc, уменьшении содержания порфиринов на всех длинах волн оценивают компенсаторно-приспособительную реакцию как нормальную в ответ на острую кратковременную гипоксию у здоровых лиц. Способ позволяет определить адаптационные и резервные возможности организма при удаленном прекондиционировании у здоровых лиц за счет оценки показателей микроциркуляции и окислительно-восстановительных процессов. 7 ил., 5 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, науке для определения микроциркуляции и тканевого обмена при дистанционном прекондиционировании неинвазивным способом на основе лазерной доплеровской флоуметрии и флуоресценции у здоровых людей.

Актуальность проблемы заключается в том, что стратегия защиты сердца и мозга от сосудистых повреждений на основе дистанционного ишемического прекондщионирования является объектом многолетних экспериментальных и клинических исследований. До настоящего времени нет единого мнения о клинической эффективности этой лечебной и профилактической технологии и ее механизмах [Zhe Zheng, M.D., Ph.D. and Shengshou Hu, M.D. Expert Perspective: Remote Ischemic Preconditioning for CABG // Cardio Exchange. An NMEJM Practice Community. 22 Aug. 2013].

В обзоре D.J. Housenloy и D.M. Yellow рассмотрены три пути воздействия дистанционного прекондиционирования: невральный путь, гуморальный путь и системный ответ. Эффекты прекондиционирования рассмотрены в раннем (сразу после воздействия) и позднем (до двух суток) периодах.

Невральный механизм кардиопротекции обсуждался в обзоре [Gourine A, Gourine AV. Neural mechanisms of cardioprotection. // Physiology (Bethesda). 2014 Mar; 29(2): 133-40. doi: 10.1152/physiol.00037. 2013]. На основе собственных исследований и анализа более 80 публикаций делается вывод, что при повышении парасимпатической вагусной активности происходит ограничение размера миокардиального инфаркта. Последние экспериментальные данные указывают, что активация вегетативного рефлекторного пути является следствием повышения врожденного механизма кардиопротекции, который проявляется в механизмах дистанционного прекондиционирования.

Предполагается, что ацетилхолин, высвобождаемый вагусом, действует на сердце через мускариновые рецепторы.

Механизмы парасимпатического влияния при отдаленном прекондиционировании на сердце также были недавно исследованы на этапах экспериментальной 15-минутной окклюзии бедренных артерий крыс самцов до начала ишемии миокарда, на десятой минуте ишемии и на десятой минуте реперфузии. [Mrochek A.G. Bulgak A.G. Basalay M.V. Barsukevich V.C., Gurin A.V. Mechanisms of parasympathetic influences on the heart in the development of the effect antiischemic distant conditioning myocardium. Eurasian heart journal. 1/2014 p. 81-88]. Найдено, что дистанционное прекондиционирование миокарда ограничивает зону некроза на 56-58%. Двусторонняя ваготомия до начала экспериментальной острой ишемии миокарда отменяла положительные эффекты дистанционного прекондиционирования. Несмотря на определенные положительные результаты исследований прекондиционирования на экспериментальных животных (мыши, крысы, кролики) клиническое внедрение на людях сдерживается неоднозначными результатами [Tsai ВМ, Wang М, March KL, Turrentine MW, Brown JW, Meldrum DR. Preconditioning: evolution of basic mechanisms to potential therapeutic strategies. Shock. 2004 Mar; 21(3): 195-209. [PubMed]].

На настоящий момент рост развития сердечно-сосудистых заболеваний неуклонно растет, медикаментозная терапия, направленная на достижение снижения уровня артериального давления, коррекцию уровня липидов, оптимизацию уровня глюкозы и других факторов риска, позволяет значительным образом снизить уровень развития неблагоприятных сердечнососудистых событий, но не дает возможности предупредить их развитие.

Методы хирургического лечения ИБС также не решают проблему лечения, т.к. не оказывают влияние на течение и прогрессирование атеросклероза. Недостаток метода: существует целый ряд факторов, ограничивающих проведение процедур реваскуляризации миокарда: неблагоприятные морфологические характеристики стеноза, многососудистые поражения коронарного русла, сопутствующая патология.

Поэтому наряду с пациентами, имеющими успешный ангиографический результат, есть пациенты, у которых не удается достичь реваскуляризации миокарда, или пациенты, которым оперативное вмешательство не может быть выполнено.

С учетом вышеизложенных неблагоприятных моментов таким больным следует рекомендовать для кардиореабилитации физические тренировки, в том числе и дистанционное ишемическое прекондиционирование.

Доказано, что кратковременная ишемия приводит к каскаду биохимических процессов в кардиомиоцитах, которые в свою очередь приводят к уменьшению размеров миокардиального некроза, стабилизации функциональной способности левого желудочка, снижению риска развития желудочковых аритмий.

Следующим этапом механизма прекондиционирования является активация белков эффекторов, в результате открываются каналы сарколеммы и митохондрий клеток миокарда, предотвращение чрезмерного образования АФК, препятствование открытию специфических ионных каналов внутренней мембраны митохондрий, оптимизация метаболизма жирных кислот. Все вышеперечисленное в итоге приводит к: 1) ослаблению внутриклеточной перегрузки ионами Са²⁺; 2) снижению сократительной способности миокарда и, следовательно, его потребности в энергии; 3) стимулированию образования необходимого количества АФК и уменьшению выраженности оксидативного стресса; 4) предотвращению отека матрикса митохондрий; 5) оптимизации синтеза АТФ; 6) замедлению процесса программируемой клеточной смерти (апоптоза); 7) стабилизации структуры мембран кардиомиоцитов.

Однако избыточное образование белков эффекторов является губительным и приводит к оксидативному стрессу и повреждению миокарда. Имеются также сведения об участии в изучаемом эффекте белков теплового шока, СО, ионов хлора, железа и прочих биологически активных веществ, выступающих в роли конечных звеньев прекондиционирования.

Возраст, пол, сопутствующие заболевания и лекарственные препараты могут влиять на механизмы прекондиционирования [Cleveland и др., 1997; Ferdinandy и др., 1998; von Arnim и др., 2002].

По некоторым данным в мозге прекондиционированных животных медленнее снижалась концентрация АТФ, что могло быть обусловлено стимуляцией анаэробного гликолиза.

Несмотря на значительное количество работ, как видим, клиническое применение ишемического прекондиционирования на настоящий момент является весьма противоречивым вопросом. Тем более что большинство работ проведено в лабораторных условиях in vitro, на животных.

Известна работа, где оценивался объемный кровоток в ткани прекондиционируемого внутреннего органа методом лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) до и после прекондиционирования. На питающий сосуд органа (печени) накладывали клипсу. Затем рассчитывали общее время ишемии, количество эпизодов ишемии, время и количество эпизодов реперфузии между эпизодами ишемии, а также время реперфузии до начала активации защитного эффекта прекондиционирования по формуле. Эффективным считалось положение клипсы, когда через 60 с остаточный кровоток составлял не более 40 перфузионных единиц. [Покровский М.В. с соавторами. Патент RU №2462176, МПК А61В 5/00, опубл. 27.09.2012, бюл. №27].

Однако работа проводилась на животных (на крысах) и оценивался кровоток прямым способом, т.е. во время оперативного вмешательства на внутренних органах брюшной полости.

Феномен ишемического прекондиционирования был описан в 1986 году учеными Murry С.Е., Jennings R.B. и Reimer K.A. (Murry, СЕ; Jennings, RB, Reimer, KA (November 1986). "Preconditioning with ischemia: a delay of lethal cell injury in ischemic myocardium.". Circulation 74 (5): 1124-36. doi:10.1161/01.cir.74.5.1124. PMID 3769170.) В ходе исследования было показано, что миокард собаки, подвергнутый нескольким эпизодам ишемии путем пережатия коронарной артерии длительностью 5 мин перед последующей продолжительной ишемией, демонстрирует уменьшение размера инфаркта по сравнению с контрольными животными.

Однако пережатие коронарной артерии в клинических условиях имеет ограниченное применение. Обусловлено это необходимостью хирургического доступа и высоким риском осложнений, а также невозможностью использования дистанционного прекондиционирования для профилактики ишемии.

Исследования дистанционного прекондиционирования у здоровых испытуемых с оценкой отдельных показателей вегетативных изменений были опубликованы в единичных работах [Stavros P. Loukogeorgakis; Anna Т. Panagiotidou; Michael W. Broadhead; Ann Donald; John E. Deanfield, BA; Raymond J. MacAllister. J Am Coll Cardiol. Remote Ischemic Preconditioning Provides Early and Late Protection Against Endothelial Ischemia-Reperfusion Injury in HumansRole of the Autonomic Nervous System. 2005; 46(3):450-456. doi:10.1016/j.jacc.2005.04.044]. Исследованиями установлено, что прекондиционирование предотвращает травму эндотелия сосудов двумя временными этапами: в ранней стадии немедленно, в течение 4 часов, и вторым этапом через 24 часа продолжительностью до 48 часов после прекондиционирования. Исследование проводилось на 16 здоровых добровольцах. На недоминирующее предплечье надевали манжету шириной 9 см и создавали давление 200 мм рт.ст. в течение 20 мин. На коллатеральную руку на предплечье надевали манжету шириной 9 см и создавали давление 200 мм рт.ст. окклюзия в течение 5 мин, затем 5 мин реперфузия, цикл повторяли 3 раза. Оценивали функцию эндотелия сосудов плечевой артерии с помощью проток-опосредованной дилатации (FMD) до создания ишемии, после нее и через 24 часа. Изучалось влияние вегетативной блокады с использованием триметафана. В данной работе оценивали только роль вегетативной нервной системы на дистанционное прекондиционирование, а для введения препарата использовали венозную канюлю в предплечье левой руки. Оценивали изменение диаметра плечевой артерии и длительность эффекта дистанционного прекондиционирования при введении триметафана. Оценки же окислительно-восстановительных реакций и микроциркуляции не проводилось. Для проведения профилактического отдаленного прекондиционирования этот метод не годится в связи с инвазивным методом доступа и высоким риском осложнений.

Задача изобретения состоит в выборе критериев для изменения микроциркуляции окислительно-восстановительных процессов в клетках по изменениям параметров ферментов окислительного метаболизма до и после прекондиционирования у здоровых лиц 20-30 лет для оценки в последующем этих изменений у больных лиц. Это позволит в дальнейшем проводить исследования по углублению изучения механизмов терапевтического и профилактического действия удаленного (дистанционного) прекондиционирования с целью разработки новых методик их применения для повышения адаптационных и резервных возможностей организма в процессе реабилитации и профилактики ИБС.

Поставленная задача достигается способом оценки приспособительно-компенсаторной реакции у здоровых лиц на дистанционное прекондиционирование, включающим обследование до и после прекондиционирования. При прекондиционировании проводят пробу с артериальной окклюзией путем наложения манжеты на верхнюю часть руки, создания окклюзии путем подъема давления в манжете до 200 мм рт.ст., затем реперфузия, цикл повторяют три раза. Окклюзию создают на протяжении 5 мин, реперфузию на протяжении 5 мин. Проводят измерения микроциркуляции и окислительно-восстановительных процессов в клетках по изменениям параметров ферментов окислительного метаболизма методом лазерной доплеровской флуометрии (ЛДФ) при помощи многофункционального лазерного диагностического комплекса «ЛАКК-М». При исследовании располагают датчик на ладонной поверхности левого указательного пальца руки в положении пациента лежа на спине после 5-минутного периода адаптации в помещении при температуре +23 - +24°С, все измерения проводят в следующей последовательности: осуществляют флуоресцентную диагностику содержания следующих ферментов окислительного метаболизма: порфирины - при длине волны 710 нм, 640 нм и 680 нм.

По ЛДФ рассчитывают параметры микроциркуляции: уровень перфузии (М), среднеквадратичное отклонение (СКО, или σ), которые измеряют в перфузионных еденицах (пф.ед), величину микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc), которые измеряют в относительных единицах. При сравнении показателей до и после прекондиционирования у здоровых молодых лиц считают нормальным увеличение ПМ на 1,66%, СКО (σ) на 69,85%, увеличение показателя микрососудистого тонуса (СТ) на 29,46%, снижение показателя сосудистого сопротивления (Rc) на 21,08%, а также уменьшение порфиринов на 32,26%) и оценивают эти изменения как нормальную компенсаторно-приспособительную реакцию в ответ на острую кратковременную гипоксию у здоровых лиц.

Новизна изобретения.

1. Проводят измерения микроциркуляции и окислительно-восстановительных процессов в клетках по изменениям параметров ферментов окислительного метаболизма методом лазерной доплеровской флуометрии (ЛДФ) при помощи многофункционального лазерного диагностического комплекса «ЛАКК-М». При исследовании располагают датчик на ладонной поверхности левого указательного пальца руки в положении пациента лежа на спине после 5-минутного периода адаптации в помещении при температуре +23 - +24°С.

2. Все измерения проводят в следующей последовательности: запись последовательных параметров ферментов окислительного метаболизма и флуоресцентная диагностика следующих ферментов окислительного метаболизма: кератин - при длине волны 670 нм, липофусцин - при длине волны 570 нм, каротин - при длине волны 608 нм, пиридоксин - при длине волны 525 нм, флавины - при длине волны 550 нм, NADH - при длине волны 490 нм, порфирины - при длине волны 710 нм, 640 нм и 680 нм.

3. По ЛДФ рассчитывают параметры микроциркуляции: уровень перфузии (М), среднеквадратичное отклонение (СКО, или σ), которые измеряют в перфузионных еденицах (пф.ед), величину микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc), которые измеряют в относительных единицах.

4. Сравнивают показатели до и после прекондиционирования: у здоровых молодых лиц считают нормальным увеличение ПМ на 1,66%, СКО (σ) на 69,85%, увеличение показателя микрососудистого тонуса СТ на 29,46%, снижение показателя Rc на 21,08%, а также уменьшение порфиринов на 32,26%, оценивают эти изменения как нормальную компенсаторно-приспособительную реакцию в ответ на острую кратковременную гипоксию у здоровых лиц.

Других работ, где бы оценивалась микроциркуляция и окислительно-восстановительные процессы методом лазерной доплеровской флоуметрии и флуоресценции до и после прекондиционирования, не найдено.

Впервые использованы новые современные методические подходы для неинвазивной оценки изменения микроциркуляции и окислительно-восстановительных процессов в клетках по изменениям параметров ферментов окислительного метаболизма до и после прекондиционирования у здоровых лиц.

Изобретение позволяет получить новый технический результат: легким, неинвазивным способом оценить состояние микроциркуляции и окислительно-восстановительные процессы, изменение этих параметров при удаленном прекондиционировании у здоровых лиц как нормальную компенсаторно-приспособительную реакцию в ответ на острую кратковременную гипоксию в верхней конечности. Способ позволяет определить адаптационные и резервные возможности организма при удаленном прекондиционировании у здоровых лиц и позволяет рекомендовать его использование как неинвазивный способ исследования сердечной ишемии в клинической практике для определения полезности прекондиционирования.

В качестве критериев микроциркуляции авторами выбраны: уровень перфузии (М), среднеквадратичное отклонение (СКО, или σ), которые измеряют в перфузионных еденицах (пф.ед), величина микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc), которые измеряют в относительных единицах. Изменение этих критериев говорит об улучшении микроциркуляции и соответственно кровоснабжения органов.

Уменьшение порфиринов свидетельствует о запуске каскада биохимических процессов, улучшающих питание миокарда за счет стимуляции образования гемоглобина.

Данные критерии могут быть использованы в дальнейшем для неинвазивной оценки предложенным способом при разработке новых клинических методик для терапевтического и профилактического применения прекондиционирования, для повышения адаптационных и резервных возможностей организма в процессе реабилитации и профилактики ИБС.

Выполнение способа поясняется графиками, представленными на Фиг. 1-7.

На Фиг. 1 - Изменение показателя микроциркуляции у здоровых лиц; при прекондиционировании видно, что как у женщин, так и мужчин регистрируется увеличение ПМ, отличие средних общих показателей после прекондиционирования увеличивается на 1,66%

На Фиг. 2 - Изменение среднего квадратического отклонения у здоровых лиц; при прекондиционировании регистрировали увеличение СКО после прекондиционирования на 69,85%, что является признаком улучшения микроциркуляции.

На Фиг. 3 - Изменение микрососудистого тонуса у здоровых лиц; при прекондиционировании после окклюзий: увеличение СТ произошло у 55% лиц, уменьшилось - у 20%, а не изменилось - у 25%. После окклюзий произошло увеличение средних общих показателей СТ на 29,46%.

На Фиг. 4 - Изменение внутрисосудистого сопротивления у здоровых лиц; при прекондиционировании в фоновой записи: регистрировалось от 0,083 до 0,463., после окклюзий сопротивление уменьшилось у 55%, увеличилось у 10%, не изменилось у 35%. После прекондиционирования средние общие показатели внутрисосудистого сопротивления снизились на 21,08%.

На Фиг. 5-7 - Изменение коэффициента К порфиринов; при длине волны 710, 640 и 680 нм у здоровых лиц при прекондиционировании: коэффициент «К» значительно уменьшился как у мужчин, так и у женщин и колебался в зависимости от длины волны и пола у 60%-90% обследуемых.

Для порфиринов после прекондиционирования значительно снижался коэффициент «К» при обследовании на любой длине волны в среднем на 32,26%.

Способ осуществляется следующим образом. Проводят дистанционное прекондиционирование у здоровых лиц, включающее обследование до и после прекондиционирования.

Определяют микроциркуляции по ЛДФ и проводят флоуметрию при помощи многофункционального лазерного диагностического комплекса «ЛАКК-М» («ЛАЗМА», Россия). Данным комплексом проводили следующие исследования: микрогемодинамика (методом доплеровской флоуметрии - ЛДФ), содержание ферментов окислительного метаболизма (методом лазерной флуоресцентной диагностики).

Проведение сеансов прекондиционирования проводилось с помощью наложенной манжеты для определения АД на левую руку. Максимальное давление в манжете - 200 мм рт.ст. Длительность ишемии - 5 минуты с последующей 5-минутной реперфузией. Проводилось 3 сеанса.

ЛДФ выполняли на ладонной поверхности левого указательного пальца руки в положении пациента лежа на спине после 5-минутного периода адаптации в помещении при температуре +23 - +24°С (по методики Крупаткина А.И. - Крупаткин А.И., Сидоров В.В. Функциональная диагностика состояния микроциркуляторно-тканевых систем. Руководство для врачей. М., 2013. - 496 с.).

Исследование выполняли в следующей последовательности: 1) запись исходных параметров ферментов окислительного метаболизма; 2) запись исходных параметров микрогемодинамики; 3) проба с артериальной окклюзией №1 в течение 5 минут; 4) реперфузия после окклюзии №1 в течение 5 минут; 5) проба с артериальной окклюзией №2 в течение 5 минут; 6) реперфузия после окклюзии №2 в течение 5 минут; 7) проба с артериальной окклюзией №3 в течение 5 минут; 8) реперфузия после окклюзии №3 в течение 5 минут; 9) запись последовательных параметров ферментов окислительного метаболизма после трех комплексов ишемии-реперфузии (прекондиционирования).

По флуоресцентной диагностики определяли следующие ферменты окислительного метаболизма (до и после прекондиционирования): кератин - при длине волны 670 нм, липофусцин - при длине волны 570 нм, каротин - при длине волны 608 нм, пиридоксин - при длине волны 525 нм, флавины - при длине волны 550 нм, NADH - при длине волны 490 нм, порфирины - при длине волны 710 нм, 640 нм и 680 нм. Рассчитывали параметры микроциркуляции: уровень перфузии (М), среднеквадратичное отклонение (СКО, или σ), величину микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc).

Величина ПМ представляет собой уровень перфузии объема ткани за единицу времени и измеряется в перфузионных единицах (пф.ед).

М - среднее арифметическое значение показателя микроциркуляции (ПМ).

Результат флоуметрии может быть представлен выражением:

ПМ=K×Nэp×Vcp,

где:

ПМ - показатель микроциркуляции (пф.ед),

K - коэффициент пропорциональности (К=1),

Nэр - количество эритроцитов (мл/сек/мм³),

Vcp - средняя скорость эритроцитов в зондируемом объеме (мм/сек)

Среднее квадратичное отклонение (СКО или σ) амплитуды колебаний кровотока от среднего арифметического значения (М). Параметр σ (СКО), также измеряется в перфузионных единицах (пф.ед). Он характеризует величину временной изменчивости микроциркуляции, именуемую в микрососудистой семантике как флакс («flux»).

Нормирование амплитуды низкочастотных колебаний (ALF) относительно СКО (средней величины флакса) позволяет судить о микрососудистом тонусе (СТ):

СТ определяется по формуле:

СТ=σ/ALF,

где:

σ - среднее квадратичное отклонение (пф.ед)

ALF - амплитуды низкочастотных колебаний (пф.ед/Гц)

Нормирование амплитуды высокочастотных и пульсовых колебаний относительно СКО характеризует другой важный в диагностическом плане показатель - внутрисосудистое сопротивление (Rc):

Для определения внутрисосудистого сопротивления используется формула:

Rc=(AHF+ACF)/σ,

где AHF - амплитуда высокочастотных колебаний (пф.ед/Гц),

ACF - амплитуда кардиоколебаний (пф.ед/Гц),

σ - среднее квадратичное отклонение (СКО) (пф.ед),

Rc и СТ измеряются в относительных единицах.

Таким образом, результаты спектрального анализа колебаний ПМ в ЛДФ-грамме позволяют судить о состоянии регуляторных механизмов тканевой гемодинамики.

Дыхание клеток - это каскад окислительно-восстановительных реакций, в результате которого происходит производство АТФ - универсального топлива для клеток. Дыхательные окислительно-восстановительные процессы протекают в митохондриях с участием пиридиннуклеотидов (НАД+/НАДН, НАДФ+/НАДФН) и флавопротеидов (ФАД), спектры поглощения и флуоресценции которых при переходе из окисленного состояния в восстановленное (и наоборот) меняются. Это позволяет следить за состоянием энергетического «статуса» клетки. Известно, что после кислородного стресса и активации свободнорадикальных процессов первоначально НАДН возрастает, а затем прогрессивно снижается вплоть до клеточной смерти. Истощение НАДН предшествует таким процессам, как снижение рН, снижение внутриклеточного калия, а в последующем и фрагментация ДНК. Однако НАДН может возрастать и при отеке кожи.

Эти вещества участвуют при гликолизе, в цикле Кребса и дыхании клеток.

Порфириновые соединения также участвуют в обменных процессах организма и участвуют в формировании гемма, т.е. в образовании гемоглобина. По данным Гинзбург М.Л. порфириновые соединения участвуют в цепи переноса электронов дыхания клетки [Гинзбург М.Л. Автореферат диссертации Лазерная доплеровская флоуметрия и спектрофотометрия в диагностике и оценке эффективности лечения микроциркуляторных нарушений у больных вибрационной болезнью. Москва - 2005]. Увеличение порфириновых соединений в коже тканей, подверженных воздействию вибрации рассматривают как компенсаторно-приспособительную реакцию в ответ на хроническую гипоксию, обусловленную стойким нарушением микроциркуляции.

У нас же исследовались здоровые лица, которым проводили кратковременную окклюзию.

Для проведения данной работы были приглашены студенты местных ВУЗов не страдающие какими-либо заболеваниями, в возрасте от 20 до 31 года. Всего обследовано 20 человек, которые были разделены на 2 группы: мужчины и женщины. В каждой группе по 10 лиц.

Впервые описаны при прекондиционировании здоровых лиц изменение показателей микроциркуляции неинвазивным способом - при помощи ЛДФ: показана склонность к увеличению показателей микроциркуляции и сосудистого тонуса после прекондиционирования, снижение внутрисосудистого сопротивления.

Впервые неинвазивным способом определены реакции окислительно-восстановительных процессов после прекондиционирования и снижение показателей ферментов, особенно порфиринов, участвующих в образовании гемма.

Результаты исследования:

Величина ПМ

ПМ - среднее значение его (М) (фон) регистрировался от 1,9 пф.ед до 29,3 пф.ед.

У женщин - от 1,9 до 29,3 пф.ед. У мужчин - от 16,8 до 28,4 пф.ед.

После окклюзий: происходило увеличение ПМ у 45% обследуемых, уменьшение ПМ - у 30% и неизменно ПМ у 25% лиц (Фиг. 1).

Следовательно, у женщин и мужчин регистрируется увеличение ПМ после прекондиционирования на 1,66%.

СКО (среднее квадратическое отклонение ПМ) (фон) регистрировался от 0,7 до 5,3 пф.ед (Фиг. 2).

После окклюзий: увеличение СКО произошло у 60% лиц, уменьшилось - у 5%, а не изменилось - у 35% студентов.

СКО после прекондиционирования повысилось на 69,85%, что является признаком для улучшения микроциркуляции.

СТ (микрососудистый тонус) фон: регистрировался от 2,124 до 10,212.

После окклюзий: увеличение СТ произошло у 55% лиц, уменьшилось - у 20%, а не изменилось - у 25%. (Фиг. 3). Т.е. после окклюзий произошло увеличение показателей СТ на 29,46%).

Rc (внутрисосудистое сопротивление) фон: регистрировалось от 0,083 до 0,463.

После окклюзий сопротивление уменьшилось у 55%, увеличилось у 10%, не изменилось у 35% (Фиг. 4).

Следовательно, после прекондиционирования регистрировали снижение внутрисосудистого сопротивления на 21,08%.

Дыхательные окислительно-восстановительные процессы определяли по коэффициенту (К) НАДН, флавинов и порфиринов по разной частоте спектров флоуресценции. В результате исследования при прекондиционировании выявили, что наибольшее значение имеют порфирины.

Порфириновые соединения у здоровых лиц, которым проводили кратковременную окклюзию, определяли по коэффициенту К при разной длине волны: при длине волны 710 нм, 640 нм и 680 нм (Фиг. 5-7 соответственно). Коэффициент «К» при длине волны 710 нм, при длине волны 640 нм, а также при длине волны 680 нм. Коэффициент «К» значительно уменьшился как у мужчин, так и у женщин и колебался от 90% до 60%.

Следовательно, для порфиринов после прекондиционирования значительно снижался коэффициента «К» при обследовании на любой длине волны в среднем на 32,26%.

Изменение показателей микроциркуляции до и после прекондиционирования методом ЛДФ и изменение показателей порфиринов методом флуоресцентной диагностики приведены в таблице 1.

Анализ этих изменений показывает, что как у женщин, так и у мужчин регистрировали увеличение показателей ПМ, СКО, что является признаком улучшения микроциркуляции, характеризующий постишемическую гиперемию, выявили снижение внутрисосудистого сопротивления.

Содержание ферментов окислительного метаболизма - порфиринов, определяли по коэффициенту контрастности биоткани. Максимальное значение коэффициентной контрастности биоткани (К) вычисляли с учетом различных волн и фильтров различного цвета.

Пример 1. Студент М-в А.Н., 23 года. Проведено прекондиционирование с обследованием по предлагаемому способу.

Полученные данные представлены в Табл. 2.

После прекондиционирования увеличились показатели ПМ, СКО, СТ, уменьшился показатель Rc, но незначительно. Коэффициент (К) порфиринов по всем длинам волн - L снизился.

Пример 2. Студент З-н C.O., 21 год. Проведено прекондиционирование с обследованием по предлагаемому способу.

У студента после прекондиционирования увеличились значительно показатели ПМ, СКО, СТ, уменьшился показатель Rc. Коэффициент (К) порфиринов по всем длинам волн - L значительно снизился.

Пример 3. Студентка Б-ко А.А., 21 год. Проведено прекондиционирование с обследованием по предлагаемому способу.

После прекондиционирования увеличились значительно показатели ПМ, СКО, умеренно - СТ, уменьшился показатель Rc. Коэффициент (К) порфиринов по всем длинам волн - L значительно снизился.

Пример 4. Студентка Ш-ва Ю.А., 22 года. Проведено прекондиционирование с обследованием по предлагаемому способу.

После прекондиционирования увеличились значительно показатели ПМ, СКО, СТ, уменьшился показатель Rc. Коэффициент (К) порфиринов по всем длинам волн - L снизился.

При прекондиционировании как у женщин, так и у мужчин увеличивались такие показатели, как ПМ, СКО. Эти изменения являются признаком увеличения микроциркуляции после кратковременной окклюзии и постишемической гиперемии, поэтому же и регистрировалось чаще снижение внутрисосудистого сопротивление. Как у мужчин, так и у женщин после прекондиционирования увеличивались и показатели микрососудистого тонуса, возможно, рефлекторного характера.

Уменьшение окислительно-восстановительных ферментов в коже тканей, подверженных воздействию кратковременной окклюзии, можно рассматривать как компенсаторно-приспособительную реакцию в ответ на острую кратковременную гипоксию у здоровых лиц, наибольшим воздействием подвержены порфирины.

Способ оценки приспособительно-компенсаторной реакции у здоровых лиц на дистанционное прекондиционирование, включающий проведение пробы с артериальной окклюзией путем наложения манжеты на верхнюю часть руки, создания окклюзии путем подъема давления в манжете до 200 мм рт.ст, на протяжении 5 мин, затем реперфузии на протяжении 5 мин, цикл проводят три раза, отличающийся тем, что проводят измерения параметров микроциркуляции методом лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) и содержания порфиринов на длинах волн 710, 640 и 680 нм методом лазерной флуоресценции (ЛФ) при помощи многофункционального лазерного диагностического комплекса «ЛАКК-М», датчик располагают на ладонной поверхности левого указательного пальца руки в положении пациента лежа на спине после 5-минутного периода адаптации в помещении при температуре +23 - +24°С; по ЛДФ рассчитывают параметры микроциркуляции: показатель микроциркуляции (ПМ), среднеквадратичное отклонение (СКО), величину микрососудистого тонуса (СТ) и внутрисосудистого сопротивления (Rc), сравнивают показатели до и после прекондиционирования и при увеличении после прекондиционирования показателей ПМ, СКО, СТ, снижении Rc, уменьшении содержания порфиринов на всех длинах волн оценивают компенсаторно-приспособительную реакцию как нормальную в ответ на острую кратковременную гипоксию у здоровых лиц.