Способ экспериментального моделирования аутотрансплантации селезеночной ткани в печень

Авторы патента:

Бабич Игорь Иванович (RU)

Дынник Анна Григорьевна (RU)

G09B23/28 - в медицине

Владельцы патента RU 2610361:

Бабич Игорь Иванович (RU)
Дынник Анна Григорьевна (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и касается моделирования аутотрансплантации селезеночной ткани в печень. Для этого после лапароскопической спленэктомии и фрагментации декапсулированной селезеночной ткани приготавливают гомогенат путем добавления физиологического раствора к измельченной селезеночной ткани в соотношении 2:1. Затем полученный гомогенат вводят субкапсулярно в передненаружную поверхность правой доли печени в объеме от 1/14 до 1/20 первоначальной массы селезеночной ткани. Способ позволяет изучать жизнеспособность аутолиентрансплантата под капсулой печени для предупреждения послеоперационного гипоспленизма при возможности использования такого приема трансплантации в лапароскопической хирургии. 2 пр., 4 табл. 8 ил.

Изобретение относится к области медицины и найдет применение в экспериментальной хирургии для моделирования аутотрансплантации селезеночной ткани в печень, изучения патогенеза и возможности определения жизнеспособности аутолиентрансплантата под капсулу печени.

Единственным способом профилактики синдрома послеоперационного гипоспленизма является аутотрансплантация селезеночной ткани. Большинство существующих на сегодняшний день способов аутолиентрасплантации доступны при широкой лапаротомии. Тогда как активное развитие лапароскопии заставляет искать новые оперативные решения, доступные миниинвазивной хирургии. Спорным остается вопрос об оптимальной массе аутолиентрансплантата, позволяющей купировать развитие синдрома послеоперационного гипоспленизма.

Известен способ профилактики постспленэктомического синдрома в эксперименте (патент РФ №2247567, опубликован 10.03.2005), при котором осуществляют забор селезенки у эмбриона, которую отмывают в питательной среде №199, помещают в свежую среду №199, и получают гомогенат в тефлоновом гомогенизаторе, который подвергают центрифугированию; выделяют верхний, средний и нижний слои; отсасывают средний слой и верхнюю часть нижнего слоя; полученную смесь клеток разводят в питательной среде №199, которую затем вводят инъекционно в брыжейку тонкой кишки или прямую мышцу живота. Известный способ трудоемок, не применим в экстренной хирургии.

Известен способ аутотрансплантации селезеночной ткани в печень (патент РФ №2305502, опубликован 10.09.2007), при котором производят аутотрансплантацию перфорированного фрагмента селезеночной ткани в рану печени с последующей фиксацией этого фрагмента П-образными швами через сохраненную в периферической части капсулу селезеночного трансплантата. Однако данный способ доступен только при одномоментном повреждении селезенки и печени и широком лапаротомном доступе.

Известен способ моделирования очагов диссеминированного постспленэктомического спленоза (патент РФ №2481645, опубликован 10.05.2013), при котором выполняют открытую спленэктомию и обсеменение органов брюшной полости кровью из удаленной селезенки. При этом создаются условия, схожие с излитием крови селезенки в брюшную полость при ее повреждении, и условия для активации механизмов роста «неоселезеночной» ткани, наиболее приближенные к имеющим место при патологии у человека. Недостатком известного способа является неконтролируемый спленолиз, который может привести к развитию гиперспленизма, спаечной кишечной непроходимости.

Задачей заявляемого изобретения является моделирование способа аутотрансплантации селезеночной ткани в печень, применимого в лапароскопической хирургии.

Задача достигается тем, что после лапароскопической спленэктомии и фрагментации декапсулированной селезеночной ткани до 0,2 см приготавливают гомогенат путем добавления физиологического раствора к измельченной селезеночной ткани в соотношении 2:1. Затем полученный гомогенат вводят субкапсулярно в передненаружную поверхность правой доли печени в объеме от 1/14 до 1/20 первоначальной массы селезеночной ткани, позволяющем профилактировать развитие послеоперационного гипоспленизма.

Изобретение иллюстрируется фотографиями.

На фото 1 изображен этап иммобилизации селезенки.

На фото 2 изображен этап спленэктомии.

На фото 3 изображен этап аутолиентрансплантации под капсулу печени.

На фото 4 - вид печени с зоной аутолиентрансплантата.

Нa фото 5 - гистологический препарат печени кролика с участком аутолиентрансплантата через 30 суток после операции, увеличение 1×100.

На фото 6 - гистологический препарат печени кролика с участком аутолиентрансплантата через 60 суток после операции, увеличение 1×40.

На фото 7 - гистологический препарат печени кролика с участком аутолиентрансплантата через 30 суток после операции, увеличение 1×100.

На фото 8 - гистологический препарат печени кролика с участком аутолиентрансплантата через 60 суток после операции, увеличение 1×40.

Способ экспериментального моделирования аутотрансплантации селезеночной ткани в печень осуществляется следующим образом.

Измельченную после лапароскопической спленэктомии (фото 1, фото 2), селезеночную ткань до 0,2 см в объеме от 1/14 до 1/20 первоначальной массы селезеночной ткани помещают в цилиндр системы для пункционной биопсии печени с внутренним диаметром просвета иглы 1,8 мм (может быть использован одноразовый стерильный шприц для инъекций и игла с внутренним диаметром просвета 2 мм, углом среза иглы 45°). Фрагменты селезеночной ткани в цилиндре (шприце) смешиваются с физиологическим раствором в соотношении 2:1, перемешиваются легким покачиванием до однородной массы. Затем выполняется пункционное введение полученного гомогената селезеночной ткани в передненаружную часть правой доли печени субкапсулярно следующим образом. После введения иглы на глубину 0,1 см-0,2 см на протяжении 3,0 см-5,0 см (фото 3) под капсулу печени начинают извлечение иглы с одновременным введением гомогената. Таким образом, субкапсулярно получается трансплантат селезеночной ткани длиной (3-5) см, шириной (1,0-1,5) см, (фото 4). Подобным образом вводится оставшаяся часть гомогената селезеночной ткани.

Пример из практики №1.

Кролик, 6 месяцев, масса 3500 г.

После медикаментозной седации препаратами, разрешенными в ветеринарии, и соответствующей обработки операционного поля выполнена срединная лапаротомия длиной 10,0 см, сосуды селезенки взяты на зажимы, пересечены. Селезеночная ткань измельчена и помещена в цилиндр устройства для пункционной биопсии печени. После чего по вышеописанной методике выполнено пункционное введение гомогената в передненаружную поверхность печени. Контроль гемостаза. Лапаротомная рана ушита наглухо.

Гистологическое исследование зоны аутотрансплантации:

через 1 месяц определяется слабовыраженная граница аутотрансплантата выраженная фибробластами, разрастание лимфоидной ткани, единичные синусы (фото 5).

Через 2 месяца определяются новообразованные синусы с небольшим просветом и умеренным кровенаполнением (фото 6).

Пример из практики №2.

Кролик, 6 месяцев, 3750 гр.

После соответствующей обработки операционного поля через разрез 1,0 см в средней точке передней брюшной стенки и наложения карбоперитонеума наложены дополнительные доступы в типичных для спленэктомии точках. После спленэктомии, помещении в резервуар и удалении селезенки из брюшной полости выполнено ее размельчение и приготовление гомогената путем добавления 0,9% физиологического раствора в соотношении 2:1. Под видеоконтролем в проекции передненаружной поверхности печени системой для пункционной биопсии печени выполнен прокол передней брюшной стенки, гомогенат введен субкапсулярно на протяжении 3,0 см, пункционная система удалена. Контроль гемостаза. Троакары удалены из брюшной полости. Швы на кожу.

Гистологическое исследование зоны аутотрансплантации:

через 1 месяц определяется слабовыраженная граница аутотрансплантата, выраженная фибробластами, разрастание лимфоидной ткани, единичные синусы (фото 7).

Через 2 месяца определяются новообразованные синусы с небольшим просветом и умеренным кровенаполнением (фото 8).

Таким образом, данный способ имеет существенные преимущества перед существующими способами аутолиентрансплантации, заключающиеся в возможности выполнения лапароскопически. Так, после спленэктомии лапароскопическим способом и приготовлением гомогената из спленэктомированной ткани под видеоконтролем выполняется прокол передней брюшной стенки в проекции передненаружной поверхности печени и введение гомогената вышеописанным способом, что позволяет минимизировать инвазивность оперативного вмешательства, снизить риск развития гнойно-септических осложнений, облегчить течение послеоперационного периода.

Способ экспериментального моделирования аутотрансплантации селезеночной ткани в печень путем лапароскопической спленэктомии, декапсуляции и фрагментации селезеночной ткани, отличающийся тем, что полученный путем добавления физиологического раствора к измельченной селезеночной ткани в соотношении 2:1 гомогенат вводят субкапсулярно в передненаружную поверхность правой доли печени в объеме от 1/14 до 1/20 первоначальной массы селезеночной ткани.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, а также к ветеринарии, и касается проведения газоплазменной контактной монополярной электрокоагуляции тканей мелких грызунов.

Способ моделирования тромбоэмболии легочной артерии у крыс // 2610212

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в качестве модели для изучения патогенеза разных форм тромбоэмболии легочной артерии и для доклинических испытаний потенциальных антиагрегантов, антикоагулянтов и тромболитиков.

Способ моделирования вторичного постгипоксического иммунодефицита по дисрегуляторному типу с транзиторной недостаточностью cd4-позитивных лимфоцитов // 2609281

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной патофизиологии, и касается моделирования вторичного постгипоксического иммунодефицита по дисрегуляторному типу с транзиторной недостаточностью CD4-позитивных лимфоцитов.

Способ моделирования преэклампсии // 2608161

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, акушерству и гинекологии, и касается моделирования преэклампсии. Для этого лабораторным крысам на 14 сутки беременности накладывают серебряные клипсы с просветом 0,1 мм на сосуды, кровоснабжающие матку.

Способ моделирования фиброзно-кистозной болезни молочной железы в эксперименте // 2605655

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии и маммологии, и может быть использовано в качестве модели фиброзно-кистозной болезни молочной железы.

Способ оценки когнитивных способностей крыс в проблемной камере григорьева // 2604048

Изобретение относится к физиологии и фармакологии поведения, в частности экспериментальному исследованию высших функций мозга, а именно когнитивных способностей животных, а также в психофармакологии для тестирования когнотропных препаратов, которые улучшают умственные способности.

Способ моделирования язвенного колита // 2604044

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и касается моделирования язвенного колита. Самцам крыс линии «Wistar выполняют ишемизацию стенки толстой кишки.

Способ оценки биоинертности медицинских имплантов in vivo // 2603717

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для оценки биоинертности материалов для изготовления медицинских имплантов.

Универсальный обучающий адаптер авд // 2603425

Группа изобретений относится к медицинской технике. Обучающая адаптерная система для дефибриллятора содержит пару электродов пациента, детектор, выполненный с возможностью детектировать надлежащее размещение пары электродов пациента на имитации пациента, соединитель, расположенный для электрического соединения с дефибриллятором, имитатор ЭКГ, шунтирующий резистор дефибрилляционной энергии и контроллер.

Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р ингибитором дипептидилпептидазы 4 // 2602688

Изобретение относится к экспериментальной медицине, фармакологии и предназначено для изучения принадлежности лекарственных препаратов к субстратам эффлюксного белка-транспортера гликопротеина-Р (P-gp, АВСВ1 белок), а также использования в качестве контроля ингибирующей активности P-gp при установлении веществ аналогичного типа действия.

Способ оценки протективного действия фармакологического препарата при острой сенсоневральной тугоухости в эксперименте // 2610409

Изобретение относится к экспериментальной медицине в области оториноларингологии и может быть использовано для оценки протективного действия фармакологического препарата при острой сенсоневральной тугоухости (ОСНТ) в эксперименте. С этой целью в условиях моделей ОСНТ различного генеза до и после введения исследуемого фармакологического препарата определяют амплитудные и временные характеристики суммарного электрического ответа улитки слухового анализатора кошки с мембраны круглого окна на короткий звуковой сигнал «щелчок» длительностью 3,1-0,2 мс при интенсивности щелчка 30 дБ над порогом обнаружения ответа. Определяют также содержание глюкозы и лактата в лабиринтной жидкости улитки. Если после введения препарата значения всех определяемых показателей приближаются к значениям таковых у кошек в нормальном физиологическом состоянии, то протективное действие фармакологического препарата оценивают как положительное. Способ позволяет объективно оценивать различные фармакологические средства по их влиянию на функцию улитки в предлагаемых патологических моделях и выявлять единый механизм развития ОСНТ при любом патологическом воздействии. 6 табл., 4 ил.

Способ моделирования острого жирового гепатоза беременных // 2610536

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной патофизиологии, и может быть использовано для моделирования острого жирового гепатоза беременных. Для этого беременным самкам крыс вводят внутрибрюшинно водный раствор тилоксапола в дозе 300 мг/кг ежедневно в течение четырех дней с 15-го по 18-й дни беременности. Способ позволяет получить модель, наиболее приближенную к клиническому течению заболевания, при простоте, экономичности в исполнении и высокой выживаемости лабораторных животных. 7 ил.

Устройство для обучения диагностике патологии внутренних органов методом эхоконтрастирования // 2611905

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано для обучения специалистов проведению эхоконтрастных ультразвуковых исследований и оценке патологии внутренних органов. Устройство содержит резервуар с прозрачной эластичной крышкой и размещенную в нем по центру на середине высоты систему, образованную бифуркациями и соустьями трубок, диаметр которых уменьшается с 10 мм на периферии до 2 мм в центре, с дозатором на входе и запирающимся краном на выходе, образующую два независимых контура. Один контур - сосудистый - воспроизводит кровоснабжение паренхиматозных органов и выполнен в виде попарно соединенного ряда элементов, образованных трубками, соединенными в форме шестиугольников, образованных бифуркациями третьего порядка подающей трубки сосудистого контура и соустьями первого порядка отводящей трубки сосудистого контура. Второй контур - патологический - моделирует кровоснабжение патологических очагов и выполнен в виде двух элементов, образованных трубками, соединенными в форме шестиугольников, образованных бифуркациями второго порядка подающей трубки патологического контура и соустьями первого порядка отводящей трубки патологического контура и расположенных таким образом, что их соседние стенки соприкасаются на всем протяжении и перемещение эхоконтрастного вещества происходит в противоположных направлениях. Кровоснабжение патологических очагов смоделировано в виде трех трубчатых петель, размещенных на отводящей трубке патологического контура. Петля, моделирующая аневризму, образует посредине эллипсоидное расширение. Петля, моделирующая метастаз, свернута из трубки в виде клубка, причем входящая в него трубка проходит в центр клубка, а выходящая - по его наружной поверхности. Петля, моделирующая гемангиому, также свернута из трубки в виде клубка, причем входящая в него трубка проходит по наружной поверхности клубка, а выходящая идет из его центра. Изобретение обеспечивает сокращение времени и упрощение методики обучения. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Способ профилактики антракосиликоза при моделировании в эксперименте // 2611935

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для профилактики антракосиликоза. Способ включает моделирование заболевания ежедневной затравкой угольно-породной пылью экспериментальных животных с одновременным использованием профилактического препарата. В качестве такого препарата вводят в питание животного биологически активную добавку Цито-Реактор дигидрокверцетин в дозе 3 мг/кг массы тела животного. Продолжительность эксперимента составляет 12 недель. Способ обеспечивает сокращение выраженности дистрофических и склеротических изменений в тканях, нормализацию звеньев липидного обмена, в том числе соотношения липопротеидов крови, а также общего метаболизма за счет удлинения фазы долговременной адаптации. 2 табл.

Способ моделирования гипогонадизма, вызванного метаболическими нарушениями // 2611936

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и касается моделирования гипогонадизма, развивающегося при метаболических нарушениях. Для этого мышам-самцам линии C57Bl/6 через сутки после рождения вводят стрептозотоцин однократно, подкожно в дозе 200 мг/кг. Затем, с 28-х суток после рождения, переводят животных на рацион, обогащенный насыщенными жирами. Поддерживают этот рацион до достижения гипергликемии, гиперинсулинемии, нарушений глюкозотолерантности, а также угнетения сперматогенеза и нарушения фертильности. Способ обеспечивает создание модели гипогонадизма, вызванного метаболическими нарушениями, предназначенной для поиска эффективных лекарственных средств коррекции нарушений в мужской половой системе при метаболическом синдроме. 2 ил., 6 табл., 5 пр.

Способ первичной фармакологической оценки специфической антигипоксической активности препарата // 2612266

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для первичной фармакологической оценки антигипоксической активности вновь синтезируемых веществ. Способ состоит в том, что половозрелых дождевых червей одинакового размера подвергают гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме. При этом гермообъем заполняют кипяченой водопроводной водой комнатной температуры для животных контрольной группы и раствором исследуемого препарата, приготовленного на такой же воде, для животных опытной группы. Используют в каждой группе не менее 40 особей. Выдерживают червей при температуре 24ºС в течение 20 часов. Об антигипоксической активности препарата судят по количеству выживших особей в обеих группах. Способ обеспечивает объективный первичный отбор перспективных антигипоксических средств, прост и экономичен в использовании. 1 табл., 1 пр.

Способ создания стойкого венозного полнокровия в малом тазу у лабораторных животных // 2612832

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной урологии, и может быть использовано для изучения влияния стойкого венозного полнокровия в малом тазу на органы и ткани малого таза в эксперименте на кроликах. Для этого способ включает пересечение срединной крестцовой вены и дополнительно внутримышечное введение 0,2 мл 1% раствора прогестерона. Препарат вводят ежесуточно в течение 30-ти суток, начиная за сутки до пересечения срединной крестцовой вены. Способ обеспечивает достижение стойкого венозного полнокровия на протяжении как минимум 6 месяцев, благодаря воздействию гормона в период острой перестройки гемодинамики в малом тазу.

Способ создания биологической модели системного ювенильного идиопатического артрита в эксперименте // 2612843

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальному моделированию. Для создания биологической модели системного ювенильного идиопатического артрита с характерными системными проявлениями осуществляют внутрикожное введение в подошву правой задней лапы в 0 сутки крысам самцам Wistar в возрасте 8 месяцев 0,1 мл раствора полного адъюванта Фрейнда 5 мг/мл и одновременное внутрибрюшинное введение раствора липополисахарида (ЛПС) из расчета 5 мкг/кг массы тела животного с последующим повторным внутрибрюшинным введением раствора ЛПС на 18 сутки из расчета 10 мкг/кг массы тела животного и активацией на 39 сутки системы иммунобиологического надзора организма путем повторного внутрикожного введения в подошву левой задней лапы 0,1 мл раствора полного адъюванта Фрейнда 5 мг/мл и одновременного внутрибрюшинного введения раствора ЛПС по 10 мкг каждому животному. Способ позволяет максимально приблизить созданную модель к системной форме ювенильного идиопатического артрита у человека.

Устройство для обучения на практике операциям со шприцом // 2612932

Изобретение относится к обучающим устройствам в области медицины. Устройство 1 для практического обучения операциям со шприцом предназначено для детектирования операции взятия или инъекции с помощью плунжера 120 шприца 100. Охватывающая соединительная часть соединена с кончиком 116 цилиндра шприца 100. Охватываемая соединительная часть соединена с втулкой 132 иглы 130 шприца. Соединительный контейнер размещен между охватывающей соединительной частью и охватываемой соединительной частью для обеспечения их непрерывности относительно друг друга, будучи зарытым снаружи. Детектор для детектирования давления, скорости потока или расхода текучей среды, протекающей в нем, помещен в любом из следующих элементов: соединительном контейнере, охватывающей соединительной части или охватываемой соединительной части. Дисплей обеспечивает отображение в режиме реального времени сигнала от детектора, позволяющего определить правильность выполнения операции со шприцом. Устройство детектирования операции со шприцом обеспечивает возможностью применения фактически используемого шприца и выполнение объективной оценки состояния взятия или инъекции. 13 з.п. ф-лы, 9 ил.

Способ моделирования пузырчатки у мышей методом введения иммуноглобулинов класса g // 2613718

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной дерматовенерологии, и касается способа моделирования вульгарной пузырчатки. Для этого способ включает введение новорожденным мышам препарата иммуноглобулинов класса G (IgG), выделенных от больных вульгарной пузырчаткой. При этом IgG выделяют не менее чем от 5 больных. Полученный препарат вводят в дозе IgG 30 мг/мышь с последующей эвтаназией животных через 48 часов. Способ воспроизводим в 100% случаев и обеспечивает клинические, гистологические и иммунологические признаки пузырчатки, что актуально для изучения патогенетических механизмов развития заболевания и разработки новых методов диагностики и терапии тяжелого аутоиммунного дерматоза. 1 пр., 1 табл., 3 ил.морфологическим и иммуногистохимическим признакам идентична изменениям кожи при пузырчатке у человека. Способ эффективен в отношении создания экспериментальной модели пузырчатки с целью получения возможности изучения патогенеза, разработки новых методов диагностики и лечения пузырчатки. 1 пр., 1 табл.