Способ прогнозирования эффективности терапии у пациентов с ибс через 12 месяцев после острого коронарного синдрома

Авторы патента:

Суроедов Владислав Александрович (RU)

Хаишева Лариса Анатольевна (RU)

Самакаев Азат Сафаевич (RU)

Шлык Сергей Владимирович (RU)

Глова Светлана Евгеньевна (RU)

Хоролец Екатерина Викторовна (RU)

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2613298:

Хаишева Лариса Анатольевна (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и кардиологии, и касается прогнозирования эффективности терапии у пациентов с ИБС через 12 месяцев после острого коронарного синдрома (ОКС). Для этого через 12 месяцев после ОКС у пациентов, приверженных к медикаментозной терапии, в крови исследуют уровень фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF-A) и эндостатина. В том случае, если уровень VEGF-A превышает 155,13 пг/мл, а уровень эндостатина превышает 266,39 нг/мл, прогнозируют низкую эффективность медикаментозной терапии. Способ обеспечивает повышение точности прогнозирования, что в свою очередь позволяет своевременно скорректировать медикаментозную терапию. 2 табл., 1пр.

Предлагаемое изобретение относится к области терапии, кардиологии и может быть использовано для контроля над состоянием пациентов с ишемической болезнью сердца после перенесенного острого коронарного синдрома.

Острый коронарный синдром (ОКС) является одной из ведущих причин госпитализаций в мире в связи с ишемической болезнью сердца (ИБС) и приносит значительный социально-экономический ущерб, включающий затраты ресурсов системы здравоохранения на экстренные госпитализации, операции реваскуляризации и непрямые потери в экономике в связи с длительной утратой трудоспособности и инвалидностью (А.В. Концевая, Р.Г. Оганов, 2011).

В течение последних лет эффективность вторичной профилактики сердечно-сосудистых заболеваний возросла (Оганов Р.Г., 2009), однако наблюдение за пациентами с ИБС и многососудистым поражением, а именно двух и более венечных сосудов, показывает, что в течение 5 лет у 51% из них развивается повторный инфаркт миокарда или коронарная смерть (Лутай М.И., 2004). Это обуславливает необходимость совершенствования имеющихся методов терапии и поиска новых подходов к лечению ИБС.

Эндотелиальная дисфункция приводит не только к развитию атеросклеротического поражения артерий, но и является пусковым моментом для активации как тромбоцитарного, так и коагуляционного механизмов свертывания и, как следствие, развитие тромбоза, являющегося основным патогенетическим механизмом развития ОКС (Ватутин Н.Т., 2006; Жданов B.C., 2006; Никитин Ю.П., 2006; Барабаш О.Л., 2007; Омельяненко М.Г., 2008; Niccoli G., Lanza G., Spaziani С. et al., 2007).

Под приверженностью к лечению, согласно определению ВОЗ, понимают «степень соответствия поведения пациента в отношении применения лекарств, выполнения рекомендаций по питанию или изменению образа жизни, следования назначениям и указаниям врача» (WHO, 2003).

Низкая приверженность к лечению связана с возникновением осложнений: нарушение режима терапии при инфаркте миокарда и гиперхолестеринемии приводит к повышению смертности у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями (Coronary Drug Project Group, 1980). Прекращение применения клопдогрела и статинов после коронарного события приводит к увеличению риска фатального повторного инфаркта и смертельного исхода (Но P.M., 2010). Нарушение приема β-адреноблокаторов приводит к увеличению смертности и сердечно-сосудистых катастроф (Mairesse S., 2012).

Поэтому представляет интерес прогнозирование эффективности терапии у пациентов с ИБС после перенесенного ОКС в ходе медикаментозного лечения в течение 12 месяцев на основании изучения факторов ангиогенеза и приверженности к терапии.

Известен способ оценки эффективности лечения ИБС путем оценки перекисного окисления липидов (ПОЛ) тромбоцитов (Л.В. Шаталина и др. "Состояние мембран и особенности ПОЛ тромбоцитов у больных с нестабильной стенокардией". Кардиология. -1989. - N 2. - с. 45-49), а также путем оценки уровня холестерола (ХС) липопротеинов (ЛП) разных классов у больных ИБС под влиянием физических тренировок (В.А. Дудаев и др. "Изменение содержания ХС ЛП разных классов у больных ИБС под влиянием физических тренировок". - Кардиология. - 1989. - N 2. - с. 49-53). Однако указанные способы не позволяют достаточно точно оценить эффективность лечения ИБС.

Из патентной литературы известен также способ оценки эффективности лечения ИБС. Сущность способа: проводят электрофорез в геле агарозы путем исследования сыворотки крови до и после лечения. Затем определяют уровень липопротеина ЛП (а) с помощью дополнительной обработки 0,3 мл 0,1% раствора Тритона Х-100 и инкубации 15 мин при 20°С, перемешивают смесь методом встряхивания 120 раз в 1 мин, последующей инкубацией сыворотки крови больного с раствором Судана Б в течение 1 ч в темном термостате при 40°С. Далее вносят пробы в лунку в геле агарозы с площадью основания 4×20 мм для электрофореза ЛП с последующей фиксацией электрофореграмм, их высушиванием, денситометрией. При снижении уровня ЛП (а) на 35% и более по сравнению с исходным уровнем и увеличении уровня ЛПВП с 13% до 28% и более оценивают лечение ишемической болезни сердца как эффективное. Использование способа обеспечивает повышение чувствительности и точности оценки эффективности лечения ишемической болезни сердца, однако оно отражает только эффективность терапии дислипидемии. (См. п. RU №2439575, кл. G01N 33/68, опубл. 10.01.2012).

Известен способ оценки эффективности лечения ишемической болезни сердца, в котором определяют концентрацию 2-ТБК активных соединений, лаг-период, ХС ЛПВП в сыворотке крови до и после лечения. При увеличении лаг-периода, ХС ЛПВП и снижении концентрации 2-ТБК соединений не менее чем на 20% от исходного уровня терапию ишемической болезни сердца считают эффективной. (См. п. RU №2122732, кл. G01N 33/49, опубл. 27.11.1998).

В доступной научно-медицинской и патентной литературе нами не выявлены работы, касающиеся прогнозирования эффективности терапии у пациентов с ИБС после перенесенного ОКС в ходе медикаментозного лечения в течение 12 месяцев и изучения количественной зависимости особенностей факторов ангиогенеза и приверженности к терапии.

Задача изобретения: спрогнозировать эффективность медикаментозной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца через 12 месяцев после перенесенного острого коронарного синдрома.

Технический результат, получаемый в результате использования заявляемого изобретения, состоит в повышении точности и информативности способа.

Поставленная задача решается тем, что в качестве критериев эффективности назначаемой медикаментозной терапии и маркеров прогноза заболеваемости определяют факторы ангиогенеза. При этом через 12 месяцев после ОКС у пациентов, приверженных к медикаментозной терапии, в крови исследуют уровень фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF-A) и эндостатина. Если уровень фактора роста эндотелия составляет более 155,13 пг/мл, а уровень эндостатина превышает значение 266,39 нг/мл, прогнозируют низкую эффективность медикаментозной терапии.

Предпосылками для выбора существенных признаков изобретения и выявления причинно-следственной связи между ними и получаемым техническим результатом явились наши многочисленные научно-клинические исследования.

Универсальным механизмом, через который реализуется действие всех факторов риска развития ИБС, признана эндотелиальная дисфункция (ЭД) (Davignon J. et al., 2004; Joner M. et al., 2005; Brunner H, et al., 2005). Ряд проведенных исследований продемонстрировал, что эндотелиальная дисфункция у пациентов с ИБС связана с ухудшением прогноза и увеличением риска развития сердечно-сосудистых катастроф. Suwaidi А. и соавт. в 2000 году впервые установили, что у пациентов с ИБС и неокклюзирующим поражением коронарных артерий по данным коронарографии и выраженной дисфункцией эндотелия выше риск развития сердечно-сосудистых событий.

Одним из критериев эффективности назначаемой терапии является оценка ангиогенеза, который может служить маркером прогноза заболевания у пациентов с ОКС. В ходе нашего исследования произведено сравнение уровней эндотелиального фактора роста, а также эндостатина у 81 пациента, через 12 месяцев после индексного события, и у 18-ти относительно здоровых добровольцев, уровень VEGF был сопоставим среди относительно здоровых добровольцев по сравнению с пациентами, перенесшими ОКС (таблица 1).

При проведении корреляционного анализа у пациентов, перенесших ОКС, между клинико-лабораторными показателями и эндотелиальным фактором роста, а также эндостатином получена связь слабой силы, близкая к связи средней силы, статистически значимая ангиогенных факторов с величиной ПАД, для VEGF - положительная связь (r=0,29, р<0,05), для эндотстатина - отрицательная связь (r=-0,31, р<0,05). С показателями липидограммы ОХС с двумя факторами VEGF (r=-0,17, р<0,05); для эндостатина (r=0,21, р<0,05), эндостатин также коррелировал с ХС ЛПВП (r=-0,51, р<0,05) и прямая связь с ХС ЛПНП (r=0,39, р<0,05).

С учетом целей и задач исследования пациенты, которым проводилось изучение эндотелиального фактора роста и эндостатина, были разделены на две группы: первая группа - 43 человека (61,17±2,31 года), пациенты, приверженные к медикаментозной терапии, вторая группа - 38 человек (60,39±2,71 года), больные с низкой приверженностью к медикаментозной терапии.

Изучение факторов ангиогенеза у пациентов, приверженных к медикаментозной терапии, показало, что VEGF был сопоставим между пациентами, перенесшими ОИМ и НС и был статистически значимо ниже по сравнению с пациентами, имеющими низкую приверженность к медикаментозной терапии (таблица 2). Во второй группе пациентов показатели эндотелиального фактора роста также не зависели от вида ОКС.

Таким образом, мы выявили, что уровень VEGF в большей степени зависит от приверженности к медикаментозной терапии, чем от вида перенесенного ОКС. А на уровень эндостатина влияют как вид ОКС, так и приверженность к лечению. Самые высокие значения как ингибитора, так и индуктора ангиогенеза регистрируются у пациентов с ОИМ в анамнезе, с низким комплайнсом к лечению, причем превалирование наблюдается за счет ингибирующего компонента ангиогенеза.

Подробное описание способа и примеры его клинического применения

У пациентов с ишемической болезнью сердца, перенесших острый коронарный синдром, через 12 месяцев медикаментозной терапии определяли уровень факторов ангиогенеза.

Для определения уровня фактор роста сосудистого эндотелия (VEGF-A) и эндостатина проводили забор крови из локтевой вены натощак в пробирки - вакутейнеры типа Monovette. При комнатной температуре образцы крови инкубировали 5-10 минут, затем центрифугировали в течение 20 минут при температуре +4°С и 1500G. Полученную сыворотку замораживали и хранили при -20°С до дня постановки реакции без размораживания.

Исследование проводили с помощью набора реактивов Quantikine производства «R&D Systems», Великобритания, методом количественного иммуноферментного сэндвич-анализа.

Произведен количественный анализ цветовой реакции с определением оптической плотности при помощи лабораторного анализатора для ИФА для VEGF-A с длиной волны 450 нм, для эндостатина с длиной волны 450 нм с коррекцией при 570 нм.

При помощи программного обеспечения Maple полученные количественные значения оптической плотности для каждого исследуемого образца пересчитаны в соответствующие величины концентрации VEGF-A и эндостатина согласно инструкции производителя реактивов.

Определяемая концентрация для VEGF-А от 0 до 1500 пг/мл, чувствительность от 5 пг/мл, для эндостатина концентрация от 0 до 10 нг/мл и чувствительность от 0,063 нг/мл.

Под приверженностью к лечению, согласно определению ВОЗ, понимали «степень соответствия поведения пациента в отношении применения лекарства, выполнения рекомендаций по питанию или изменению образа жизни назначениям и указаниям врача» (WHO, 2003).

На визит пациента просили принести пустые блистеры и упаковки препаратов, которые он принимал за период времени, прошедший после последнего визита. Подсчитывали долю оставшихся таблеток и рассчитывали процент приверженности по формуле (Osterberg L., Blaschke Т. 2005, Brown М.Т., Bussell J.K., 2011):

Приверженность к лечению считалась неудовлетворительной в том случае, когда пациент принимал ≤80% или ≥120% таблеток медикаментов, назначенных на длительный период времени.

Сравнивая количественные значения уровней эндостатина у пациентов через 12 месяцев после перенесенного ОКС с относительно здоровыми добровольцами мы выявили, что уровень эндостатина статистически значимо выше у пациентов с сердечно-сосудистой патологией, чем у здоровых. Причем разница в колебаниях уровня эндостатина у здоровых в 3 раза меньше, чем у пациентов после ОКС.

Больные с низкой приверженностью к медикаментозной терапии имели статистически значимо более высокие показатели общего холестерина, холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности. Полученные различия в значениях липидограммы легко объясняются применением статинов, как основного класса препаратов после индексного ОКС у приверженных пациентов. Однако необходимо отметить, что целевых значений общего холестерина и холестерина липопротеидов низкой плотности для вторичной профилактики достигнуто не было.

Изучение факторов ангиогенеза у пациентов, приверженных к медикаментозной терапии, показало, что эндотелиальный фактор роста был сопоставим между пациентами, перенесшими ОИМ и нестабильную стенокардию, и был статистически значимо ниже по сравнению с пациентами, имеющими низкую приверженность к медикаментозной терапии. Во второй группе пациентов показатели эндотелиального фактора роста также не зависели от вида острого коронарного синдрома.

Анализ уровня эндостатина показал, что пациенты, перенесшие острый инфаркт миокарда, имеют статистически значимо более высокие значения данного фактора, по сравнению с пациентами, имеющими в анамнезе нестабильную стенокардию. Однако при сравнении значений уровня эндостатина среди пациентов с инфарктом миокарда видно, что значения данного показателя выше среди пациентов с низкой приверженностью к медикаментозной терапии, такая же ситуация наблюдается и для пациентов, имеющих в анамнезе нестабильную стенокардию.

Установлено, что уровень эндотелиального фактора роста в большей степени зависит от приверженности к медикаментозной терапии, чем от вида перенесенного острого коронарного синдрома. На уровень эндостатина влияют как вид острого коронарного синдрома, так и приверженность к лечению. Самые высокие значения, как ингибитора, так и индуктора ангиогенеза, регистрируются у пациентов с острым инфарктом миокарда в анамнезе, с низким комплайнсом к лечению, причем превалирование наблюдается за счет ингибирующего компонента ангиогенеза. То есть у данной когорты пациентов физиологический ангиогенез не возможен, сам патологический процесс в коронарном русле и факторы риска, такие как высокое артериальное давление и прогрессирование атеросклероза, ингибируют возможность создания новых сосудов. Длительность заболевания, пол пациентов не влияют на изученные факторы ангиогенеза.

Таким образом, пациенты с ОКС имеют повышенный уровень как ингибирующих, так и стимулирующих ангиогенез факторов, при этом пациенты, перенесшие ОИМ, имеют статистически значимо более высокие уровни изучаемых факторов, чем больные с нестабильной стенокардией. На уровень факторов ангиогенеза влияет степень приверженности пациентов к медикаментозной терапии. У пациентов с низкой приверженностью уровень факторов ангиогенеза выше, чем у пациентов с высокой приверженностью к медикаментозной терапии, главным образом за счет ингибирующего компонента. Факторы ангиогенеза у пациентов после перенесенного ОКС имеют разнонаправленную взаимосвязь с пульсовым АД и показателями липидного спектра крови, а также с приверженностью к медикаментозной терапии.

Клинический пример

Пациент Г-ко В.Н., 53 лет, диагноз: ИБС. Стенокардия напряжения ФК II. Постинфарктный кардиосклероз (2013).

Проходил медикаментозное лечение в течение 12 месяцев. Больному дополнительно назначено исследование крови. Уровень фактора роста эндотелия имеет значение 161,45 пг/мл, а уровень эндостатина равен 272,16 нг/мл, что дает основание прогнозировать низкую эффективность медикаментозной терапии. Это подтверждается низким комплайнсом пациента, равным 63%, и последующими клиническими наблюдениями за больным.

Преимущества заявляемого способа состоят в том, что способ прогнозирования низкой эффективности терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца после перенесенного ОКС обеспечивает повышение достоверности прогноза течения заболевания, который позволяет скорректировать медикаментозное лечение, повысить комплайнс пациента и улучшить исход лечения. Применение изобретения в клинической практике позволило существенно повысить точность прогнозирования эффективности медикаментозной терапии ишемической болезни сердца, что позволило повысить качество лечебно-диагностического процесса и повлекло значительный социально-экономический эффект.

Заявляемый способ контроля над состоянием пациента после перенесенного острого коронарного синдрома в ходе медикаментозного лечения на основании изучения факторов ангиогенеза в течение 12 месяцев и изучения приверженности к терапии апробирован в клинике и может быть рекомендован к использованию в амбулаторных и стационарных условиях.

Список использованной литературы

1. Aspirin in coronary heart disease. The Coronary Drug Project Research Group. // Circulation. - 1980 Dec. - 62(6 Pt 2). - V59-62.

2. Brown M.T. Medication Adherence: WHO Cares? / M.T. Brown, J.K. Bussell // Mayo Clin. Proc. - 2011. - Vol. 86, N 4. - P. 304-314.

3. Brurmer H, Cockcroft JR, Deanfield J, Donald A, Ferrannini E, Halcox J, Kiowski W, TF, Mancia G, Natali A, Oliver JJ, Pessina AC, Rizzoni D, Rossi GP, Salvetti A, Spieker LE, Taddei S, Webb DJ; Working Group on Endothelins and Endothelial Factors of the European Society of Hypertension. Endothelial function and dysfunction. Part II: Association with cardiovascular risk factors and diseases. A statement by the Working Group on Endothelins and Endothelial Factors of the European Society of Hypertension. // J Hypertens. - 2005 Feb; 23(2): 233-46.

4. Davignon J. The cardioprotective effects of statins / J. Davignon // Curr. Atheroscler. Rep. - 2004. - N 6. - P. 27-35.

5. Ho PM, Tsai TT, Maddox TM, Powers JD, Carroll NM, Jackevicius C, Go AS, Margolis KL, DeFor ТА, Rumsfeld JS, Magid DJ. Delays in filling clopidogrel prescription after hospital discharge and adverse outcomes after drug-eluting stent implantation: implications for transitions of care. Circ Cardiovasc Qual Outcomes. 2010 May; 3(3):261-6. doi: 10.1161/CIRCOUTCOMES. 109.902031. Epub 2010 Apr 20.

6. Joner M. Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk / M. Joner, A. V. Finn, A. Farb [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. - 2006. - Vol. 48. N l.-P. 193-202.

7. Niccoli G., Lanza G., Spaziani C. et al. Baseline systemic inflammatory status and no-reflow phenomenon after percutaneous coronary angioplasty for acute myocardial infarction. // Int J Cardiol. - 117. - P. 306-311.

8. Osterberg L. Adherence to medication / L. Osterberg, T. Blaschke // N. Engl. J. Med. - 2005. - Vol. 353, N 5. - P. 487-497.

9. Sabate E. Adherence to Long-Term Therapies: Evidence for Action, World Health Organization. - Geneva, Switzerland, 2003. - URL: http://whqlibdoc.who.int/publications/2003/9241545992.pdf.

10. Suwaidi A. Long-term follow-up of patients with mild coronary artery disease and endothelial dysfunction / A. Suwaidi, S. Hamasaki, S. Higano [et al.] // Circulation. - 2000. - Vol. 101. - P. 948-954.

11. Барбараш О.Л. Клиническая значимость показателей эндотелиальной дисфункции, оксидативного стресса и гемостаза у больных инфарктом миокарда / О.Л. Барбараш, В.В. Кашталап, В.Н. Каретникова [и др.] // Патология кровообращения и кардиохирургия. - 2007. - №2. - С. 28-33.

12. Ватутин Н.Т. Эндотелины и сердечно-сосудистая патология / Н.Т. Ватутин, Н.В. Кал инки на, А.Л. Демидова // Укр. кардiол. журн. - 2006. - №1. - С. 101-106.

13. Жданов B.C. Воспалительная клеточная реакция и тучные клетки в интиме аорты и легочной артерии человека на ранних стадиях атеросклероза / B.C. Жданов, И.П. Дробкова, П.В. Чумаченко // Архив патологии. - 2006. - №2. - С. 19-24.

14. Концевая А.В. Социально-экономический ущерб от острого коронарного синдрома в Российской Федерации / АВ. Концевая, А.М. Калинина, И.Е. Колтунов, Р.Г. Оганов // РФК. - 2011. - Т. 7, №2. - С. 158-166.

15. Лутай М.И. Вторичная профилактика и медикаментозное лечение больных с ишемической болезнью сердца. Можно ли изменить прогноз? / М.И. Лутай, А.Ф. Лысенко // Укр. кардюл. журн. - 2004. - №3. - С. 9-20.

16. Никитин Ю.П. Новые фундаментальные и прикладные основы атерогенеза / Ю.П. Никитин // Бюллетень СО РАМН. - 2006. - №2 (120). - С. 6-14.

17. Оганов Р.Г. Возможности улучшения профилактики сердечно-сосудистых заболеваний в Российской Федерации / Р.Г. Оганов, С.А. Шальнова, Г.Я. Масленникова // Профилактическая медицина. - 2009. - №6. - С. 3-7.

18. Омельяненко М.Г. Эндотелиальная дисфункция и ишемическая болезнь сердца у женщин молодого и среднего возраста / М.Г. Омельяненко. - М., 2008. - 111 с.

Способ прогнозирования эффективности терапии у пациентов с ИБС через 12 месяцев после острого коронарного синдрома (ОКС), характеризующийся тем, что в качестве критериев эффективности назначаемой медикаментозной терапии и маркеров прогноза неблагоприятного течения заболевания определяют факторы ангиогенеза, при этом через 12 месяцев после ОКС у пациентов, приверженных к медикаментозной терапии, в крови исследуют уровень фактора роста эндотелия и эндостатина, и если уровень фактора роста эндотелия составляет более 155,13 пг/мл, а уровень эндостатина превышает значение 266,39 нг/мл, прогнозируют низкую эффективность медикаментозной терапии.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики раннего неонатального сепсиса (РНС) у новорожденных первых суток жизни. В клетках буккального соскоба измеряют уровни экспрессии генов IL12A и CD68 относительно представленности мРНК референсных генов В2М, GUS, ТВР или HPRT.

Способ прогнозирования задержки роста и макросомии плода у беременных с сахарным диабетом // 2613122

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и представляет собой способ прогнозирования задержки роста и макросомии плода у беременных с сахарным диабетом, отличающийся тем, что у беременных на сроке гестации, начиная с 24 недель, определяют содержание глюкозы венозной крови путем проведения трехчасового теста толерантности к глюкозе, объем плаценты методом УЗИ, индекс резистентности маточной артерии методом УЗДГ, рассчитывают коэффициент фетопатии F по формуле: , где V - объем плаценты, определенный методом ультразвуковой плацентометрии (см3), IR - индекс резистентности маточной артерии, определенный методом ультразвуковой допплерографии, TGTT - уровень глюкозы, определенный при проведении трехчасового глюкозотолерантного теста (ммоль/л), GA - срок гестации (недели), при коэффициенте фетопатии F более 2,0 прогнозируют развитие макросомии плода, при коэффициенте фетопатии F менее 0,5 прогнозируют развитие задержки роста плода.

Способ прогнозирования абсцесса при остром тонзиллите // 2613081

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии. Для прогнозирования абсцесса при остром тонзиллите проводят определение балльного индекса по результатам суммирования баллов.

Способ определения пола эмбриона в яйце // 2612370

Изобретение относится к способу определения пола эмбриона, при котором пол эмбриона определяется при помощи, по меньшей мере, одного неинвазивного (неразрушающего), по меньшей мере, по отношению к яйцу способа определения.

Способ диагностики анаплазмоза рогатого скота методом полимеразной цепной реакции // 2612263

Изобретение относится к области ветеринарии и молекулярной биотехнологии и предназначено для диагностики анаплазмоза рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Способ диагностики сахарного диабета по уровню метилглиоксаль-модифицированных липопротеидов низкой плотности с использованием моноклональных антител // 2612092

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и может быть использовано для диагностики сахарного диабета. Способ включает биохимическое исследование крови у пациентов, где в плазме / сыворотке крови определяют уровень метилглиоксаль-модифицированных липопротеидов низкой плотности путем иммунометрического сэндвич-метода иммуноферментного анализа.

Высокопроизводительный скрининг соединений, модулирующих экспрессию клеточных макромолекул // 2612017

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Способ идентификации и количественного определения специфической молекулы-мишени в образце, включающий: тестирование и выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; или выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; скрининг образца, содержащего специфическую молекулу-мишень, в высокопроизводительном скрининговом анализе, включающий добавление первого и второго лиганда, каждый из которых имеет первую и вторую детектируемую метку, связывание каждого из первого и второго лигандов с отдельными и специфическими сайтами на специфической молекуле-мишени, где скрининговый анализ не требует стадии промывания; обнаружение излучения света, когда первый и второй лиганды специфически связываются со специфической молекулой-мишенью; измерение интенсивности излучаемого света и по интенсивности света проводят идентификацию и количественное определение специфической молекулы-мишени в образце.

Способ диагностики тимомегалии у детей // 2611393

Изобретение относится к области медицины, в частности к иммунологии и педиатрии, и предназначено для диагностики тимомегалии у детей. Проводят ПЦР в режиме реального времени с использованием соответствующих праймеров и флюоресцентно-меченого олигонуклеотида с последующим расчетом числа копий Т-рецепторных эксцизионных колец (ТРЭК) по стандартной кривой, построенной по разведениям плазмиды, представленной SEQ ID NO: 1 с известной концентрацией ДНК ТРЭК.

Способ оценки эффективности эндотелиотропной терапии после реконструктивных операций на артериях // 2611386

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности эндотелиопротекторной терапии у экспериментальных животных после реконструктивных операций на брюшном отделе аорты.

Способ определения устойчивости мембран эритроцитов периферической крови при снижении белка полосы-4.1 на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации // 2611360

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы формирования у беременной гемической анемии при индуцирующем действии цитомегаловирусной инфекции в период обострения на структуру мембран эритроцитов.

Способ диагностики низко дифференцированного нейроэндокринного рака желудка // 2613300

Изобретение относится к области медицины, в частности к патологической анатомии и онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики низкодифференцированного нейроэндокринного рака желудка и низкодифференцированных аденокарцином. Сущность изобретения: вырезают пластину опухоли с зоной максимальной инвазии и границами с неизмененной слизистой желудка, проводят гистологическое исследование, в случае выявления в гистологических препаратах преобладания трабекулярных, альвеолярных и солидных структур осуществляют иммуногистохимические исследования с антителами к хромогранину А, синаптофизину и нейронспецифической энолазе всех гистологических блоков. При выявлении положительной реакции с антителами хотя бы к одному из маркеров (хромогранин А/синаптофизин/нейронспецифическая энолаза) оценивают процент клеток с положительной реакцией каждого антитела в каждом блоке при увеличении 200, полученные проценты суммируют и делят на общее количество блоков, если полученное число более 70%, то опухоль расценивают как низкодифференцированный нейроэндокринный рак. Способ обеспечивает повышение точности и объективизации дифференциальной диагностики указанных состояний. 2 пр., 4 ил.

Способ определения продолжительности безрецидивного периода при серозном раке яичников // 2613302

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для определения продолжительности безрецидивного периода при серозном раке яичников. Для этого во время проведения больным раком яичников операции полного объема в гомогенате ткани опухоли определяют уровень НЕ4, и при его значении от 4768 пМ/г до 5674 пМ/г сырой ткани прогнозируют продолжительность безрецидивного периода 6 и более месяцев, а при его значении от 7995 пМ/г до 9339 пМ/г сырой ткани прогнозируют продолжительность безрецидивного периода менее 6 месяцев. Способ позволяет оценить биологическую активность первичной опухоли яичника, индивидуальный прогноз заболевания и тактику дальнейшего ведения пациенток при возможности многократного воспроизведения в лечебных учреждениях онкологического профиля, располагающих биохимическими лабораториями. 2 пр.

Способ количественного определения гексахлорбензола в крови методом газохроматографического анализа // 2613306

Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности к санитарной токсикологии. Сущность: производят отбор пробы крови, экстракцию экстрагентом из указанной пробы ГХБ и определение его количества методом газохроматографического анализа с использованием градуировочного графика. При этом после отбора пробы крови ее подкисляют до рН 6-7 водным раствором серной кислоты, например, 1%-ной концентрации. В качестве экстрагента используют толуол, взятый в объемном соотношении к пробе крови как 0,6 к 1,0 соответственно. Экстракцию ведут дважды последовательно по 5 мин каждую. Полученный экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 7000 об/мин и далее определяют количество ГХБ методом газохроматографического анализа с использованием детектора электронного захвата на капиллярной колонке НР-1 35 м * 0,32 мм * 0,25 мкм при температурном режиме: капиллярная колонка - 70°С-230°С; испаритель - 270°С; детектор - 270°С; расход газа-носителя - азота - 20 см3/мин. Достигается повышение степени извлечения ГХБ из пробы крови, а также точности и селективности анализа. 1 з.п. ф-лы; 10 табл., 1 пр.

Способ определения 3-метоксигидроксибензола в биологическом материале // 2613310

Изобретение относится к токсикологии, а именно к способу определения 3-метоксигидроксибензола в биологических материалах. Для этого образцы, содержащие 3-метоксигидроксибензол, трижды экстрагируют метилацетатом в течение 45 мин. Объединенные экстракты обрабатывают раствором KOH в этаноле, а затем удаляют растворитель испарением при 18-22°С. Остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, содержащим НСl в избытке по отношению к щелочи в остатке. Подкисленные ацетоновые экстракты объединяют, обрабатывают водным раствором NaOH для создания избытка щелочной среды и удаляют ацетон в токе воздуха при температуре 18-22°С. Водно-щелочной раствор разбавляют водой, подкисляют до рН 2-3 24% НСl, экстрагируют диэтиловым эфиром и насыщают Na2SO4 для удаления остатков воды. Экстракт упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°С и хроматографируют на макроколонке с силикагелем КСС 3 80/120 мкм. Смесь элюируют смесью гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему. Фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют и концентрируют до 10 мл. Полученный остаток защелачивают раствором NaOH с рН 12-13, а затем подкисляют 24% НСl до рН 2-3, а затем экстрагируют дихлорметаном и насыщают Na2SO4 для удаления остатков воды. Дихлорметановый экстракт обрабатывают N-метил-N-триметилсилил-трифторацетамидом, 20 минут, 60°С для получения триметилсилильного производного 3-метоксигидроксибензола. Определение проводят методом хромато-масс-спектрометрии. Для разделения используют капиллярную колонку (L=25 м d= 0,2 мм), неподвижной фазой 5%-фенил-метилполисилоксан в токе гелия 0,6 мл/мин. Начальная температура термостата колонки составляет 70°С и выдерживается в течение 3 мин, в дальнейшем температура программируется от 70°С до 290°С со скоростью изменения 20°С в мин, конечная температура колонки выдерживается 10 мин. Температура инжектора составляет 250°С, температура интерфейса детектора - 300°С. Для регистрации сигнала используют масс-селективный детектор в режиме электронного удара ионизирующим пучком электронов 70 эВ. Количество триметилсилильного производного 3-метоксигидроксибензола вычисляют, используя предварительно построенный калибровочный график при сравнении площадей пиков. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности метода и может быть использовано на санэпидстанциях, в химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и ветеринарных лабораториях. 3 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования течения туберкулеза // 2613320

Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования течения туберкулеза легких. Способ прогнозирования течения туберкулеза, включающий определение концентрации таурина в плазме крови, при этом дополнительно определяют концентрацию таурина в моноцитах, после чего анализируют отношение концентрации таурина в плазме к концентрации таурина в моноцитах и при значении отношения от 0,5 до 0,69 прогнозируют вероятность развития инфильтративного туберкулеза, при значении отношения от 0,7 до 1 прогнозируют вероятность развития туберкулемы, при значении отношения выше 1 прогнозируют вероятность развития фиброзно-кавернозного туберкулеза. Вышеописанный способ позволяет повысить достоверность прогнозирования течения туберкулеза. 4 ил.

Способ прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета // 2613892

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может использоваться для прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета. Способ включает определение бактерицидной активности образца слюны (БАС) методом проточной цитофлюориметрии. При значениях БАС равных 65,7% и выше прогнозируют течение заболевания как благоприятное, а при величине БАС равной 37,0% и ниже - как течение, осложненное эрозиями слизистой оболочки рта. Изобретение дает возможность выявления группы стоматологических пациентов с предрасположенностью к осложнениям эрозиями слизистой оболочки рта при хроническом рецидивирующем афтозном стоматите. 2 табл., 1 пр., 1 ил.

Способ прогнозирования угрозы невынашивания при гриппе a(h3n2) у женщин в первом триместре беременности // 2613896

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается прогнозирования в первом триместре беременности у женщин угрозы невынашивания при гриппе A(H3N2). Сущность способа: в первом триместре гестации при гриппе A(H3N2) в период разгара заболевания определяют величину титра противовирусных антител в первой сыворотке (А), оценивают уровень серомукоида (ед. оп. пл.) в плазме крови (В), устанавливают концентрацию среднемолекулярных пептидов (ед. оп. пл.) в плазме крови (С), определяют содержание циркулирующих иммунных комплексов (ед. оп. пл.) в сыворотке крови (Е). Затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции D:D=-0,021×А+8,049×В-106,797×С-46,494×Е, где граничное значение составляет - 35,77, при D больше или равном граничного значения дискриминантной функции прогнозируют отсутствие угрозы невынашивания, а при D меньше граничного значения прогнозируют развитие угрозы невынашивания при гриппе A(H3N2) в первом триместре беременности. Вероятность правильного прогноза составляет 85,5%. 2 пр.

Способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в биологических объектах // 2613898

Изобретение относится к области медицины и описывает способ количественного определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека методом анодной вольтамперометрии. Способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови включает предварительную пробоподготовку сыворотки крови и вольтамперометрическое определение суммарного содержания серусодержащих соединений на фоне боратного буферного раствора с pH 9,18. Проводят анодную вольтамперометрию с использованием индикаторного ртутно-пленочного электрода при дифференциально-импульсной форме развертки потенциала со скоростью 0,03 В/с в диапазоне потенциалов от -1,0 В до 0,05 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода сравнения. Концентрацию суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека от 1,0⋅10-4 до 1,2⋅10-3 моль/дм3 определяют по высоте пика анодного тока при потенциале -0,03 В методом градуировочного графика по стандартному раствору глутатиона. Технический результат: высокая селективность, чувствительность и простота определения. 2 ил., 1 табл.

Способ дооперационной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы // 2614700

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дооперационной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы. Способ включает тонкоигольную аспирационную биопсию узловых образований щитовидной железы под контролем ультразвукового исследования, причем пункционную иглу с содержащимся в ней аспиратом промывают двукратно в консервирующем растворе NovaPrep, центрифугируют, отбирают супернатанты, проводят иммуноцитохимический анализ экспрессии Ki-67 и рассчитывают диагностический показатель по формуле , где HS=∑P(i)×i,i - интенсивность окрашивания, выраженная в баллах (от 0 до 3), P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью, и при p>0,5 - образование признают злокачественным, при р<0,5 - доброкачественным. Применение изобретения обеспечивает повышение точности и информативности способа. Чувствительность и специфичность способа 81,8% и 93,8% соответственно.

Способ прогнозирования субклинического кетоза у коров // 2614718

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для профилактики заболевания животных кетозом. Способ прогнозирования субклинического кетоза у коров включает отбор пробы крови и определение глюкозы в крови. Определяют уровень глюкозы в крови коров в переходный период, не более 1 раза в 3 дня, при этом для измерения глюкозы используют глюкометр с тест-полоской. Перед каждым взятием крови глюкометр выдерживают во внешней среде не более 15 мин, при t 20-30°С. Затем на тест-полоску глюкометра помещают каплю крови диаметром, соизмеримым шириной тест-полоски, промазывают ею тест-полоску и при определении значения глюкозы на нижней границе нормы оптимальной концентрации глюкозы не более 2,2 ммоль/л прогнозируют начало развития кетоза, что является основанием для принятия срочных мер. Способ позволяет быстро и точно спрогнозировать вероятность субклинического кетоза. 2 табл., 1 пр.