Способ прогнозирования наступления беременности у женщин с i и ii стадиями эндометриоза после хирургического лечения

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования спонтанного наступления беременности в течение года после проведения хирургического лечения бесплодия у женщин с I и II стадиями наружного генитального эндометриоза. У женщин до оперативного лечения определяют относительное содержание CD86+ нейтрофилов и при его значении, равном 31% или менее в нейтрофильном гейте, прогнозируют наступление беременности в течение года после проведения хирургического лечения бесплодия. Изобретение позволяет оценить шанс спонтанного наступления беременности после проведения лечебной лапароскопии, своевременно скорректировать тактику ведения пациенток и оценить необходимость ЭКО. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования наступления беременности в течение года после проведения хирургического лечения бесплодия у женщин с I и II стадиями наружного генитального эндометриоза.

Актуальность предлагаемого способа определяется тем, что, несмотря на высокую частоту встречаемости бесплодия у женщин с эндометриозом I и II стадиями, эффективные методы коррекции фертильности у данных пациенток до сих пор отсутствуют. Наиболее распространенным методом лечения пациенток с бесплодием и «малыми» формами эндометриоза (I и II стадии) является хирургический метод (Surgery for endometriosis-associated infertility: do we exaggerate the magnitude of effect? / B. Rizk [et al.] // Facts Views Vis Obgyn. - 2015. - Vol. 7, №2. - P. 109-118). Проведенные в последние десятилетия многоцентровые исследования доказали, что лечебно-диагностическая лапароскопия достоверно повышает шанс наступления беременности у пациенток с эндометриозом I и II стадиями в течение первых 12 месяцев после операции по сравнению с теми женщинами с эндометриозом, которым проводилась только диагностическая операция (Laparoscopic surgery for endometriosis / J.M. Duffy [et al.] // Cochrane Database Syst Rev. - 2014. - №4. - CD011031). Однако частота наступления беременности после лечебно-диагностической лапароскопии остается пока еще сравнительно невысокой и не превышает 30-50% (Diwadkar G.B., Falcone Т. Surgical management of pain and infertility secondary to endometriosis // Semin Reprod Med. - 2011. - Vol. 29, №2. - P. 124-129; Reproductive performance, pain recurrence and disease relapse after conservative surgical treatment for endometriosis: the predictive 421 value of the current classification system / P. Vercellini [et al.] // Hum Reprod. - 2006. - Vol. 21. - P. 2679-2685). В связи с этим многие исследователи придерживаются мнения о том, что для повышения эффективности лечения бесплодия у пациенток с «малыми» формами эндометриоза целесообразно после хирургического удаления очагов эндометриоза использовать методы вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), в том числе и ЭКО (Endometriosis and infertility Surgery and ART: An integrated approach for successful management / M.E. Coccia [et al.] // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. - 2008. - Vol. 138, №1. - p. 54-59). Однако ЭКО является дорогостоящим методом лечения, поэтому для оценки необходимости проведения ЭКО особую актуальность приобретает разработка новых эффективных методов прогнозирования спонтанного наступления беременности у пациенток с эндометриозом I и II стадиями после проведения хирургического лечения эндометриоза. Внедрение этих методов в практическое здравоохранение позволит врачу еще на дооперационном этапе оценить шанс наступления беременности после лапароскопии, своевременно скорректировать тактику ведения больных и решить вопрос о необходимости проведения ЭКО.

Ранее было предложено прогнозировать эффективность хирургического лечения бесплодия у пациенток с эндометриозом с помощью алгоритма, включающего в себя клинико-лабораторное обследование на дооперационном этапе с оценкой овариального резерва, спермы мужа и функции фаллопиевых труб. Прогнозируют спонтанное наступление беременности в течение 6-18 месяцев после проведения хирургического лечения у тех пациенток с эндометриозом и бесплодием, у которых отмечены сохранный овариальный резерв, нормальные характеристики спермы и проходимости труб (de Ziegler D., Borghese В., Chapron С. Endometriosis and infertility: pathophysiology and Management // Lancet. - 2010. - Vol. 376. - P. 730-738). Данный способ имеет ряд недостатков:

- для создания прогноза требуется проведение клинико-инструментального обследования как женщины с бесплодием и эндометриозом, так и ее мужа, что занимает большое количество времени;

- в способе не указано, при каких стадиях эндометриоза применяется данный прогностический комплекс;

- отсутствуют данные о точности прогноза.

Еще одним аналогом заявленного способа является способ прогнозирования частоты наступления беременности у женщин с наружным генитальным эндометриозом после проведения лечебной лапароскопической операции на основании определения до лечения показателей содержания в сыворотке крови эмбриональных антител с помощью ЭЛИ-П-теста и при показателях эффективности реакций ЭЛИ-П-теста 41 усл. ед и более прогнозируют наступление беременности в 57,4% случаев, при отклонении всех антигенов тест-системы в сторону снижения до 50% от нормативных показателей прогнозируют наступление беременности в 28,4%, а при снижении всех антигенов тест-системы свыше 50% от нормативных показателей прогнозируют отсутствие наступления беременности в 100% (Боровкова Л.В. Репродуктивная функция у больных с генитальным эндометриозом: автореф. дис.… д-ра мед. наук. - М., 2004. - 34 с.). Однако для создания прогноза по данному способу требуется проведение иммуноферметных исследований, которые зачастую имеют низкую воспроизводимость. Кроме того, этот способ имеет невысокую точность.

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ прогнозирования спонтанного наступления беременности у женщин с I и II стадией наружного генитального эндометриоза путем иммунологического исследования периферической венозной крови до оперативного лечения, отличающийся тем, что определяют относительное количество IL-1β+ моноцитов и при его значении, равном 50,0% или более в моноцитарном гейте прогнозируют спонтанное наступление беременности в течение года (Патент №2557923 Россия. Способ прогнозирования спонтанного наступления беременности у женщин с I и II стадией наружного генитального эндометриоза // Малышкина А.И., Сотникова Н.Ю., Анциферова Ю.С. и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2015. - №21.)

Данный способ был выбран нами в качестве прототипа - способ имеет точность - 83,3%.

Техническим результатом является расширение арсенала технических средств, а также повышение точности, чувствительности и специфичности способа прогнозирования наступления беременности в течение года после проведения хирургического лечения бесплодия у женщин с I и II стадиями наружного генитального эндометриоза. Технический результат достигается тем, что до проведения оперативного лечения в периферической крови женщин с I и II стадиями эндометриоза определяют относительное содержание CD86+ нейтрофилов в нейтрофильном гейте и при его значении равном 31% или менее прогнозируют спонтанное наступление беременности в течение года после хирургического лечения с точностью 87,5%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать спонтанное наступление беременности после хирургического лечения бесплодия у женщин с I и II стадиями наружного генитального эндометриоза по определению относительного содержания в периферической крови нейтрофилов, экспрессирующих CD86 молекулы.

Ранее было показано, что у пациентов с раком легкого усиливается экспрессия CD86 молекул на поверхности нейтрофилов, инфильтрирующих ткань опухоли, после взаимодействия нейтрофилов с активированными Т-клетками (Tumor-associated neutrophils stimulate Т cell responses in early-stage human lung cancer / E.B. Eruslanov [et al.] // J Clin Invest. - 2014. - Vol. 124, №12. - P. 5466-5480). У пациентов с ревматоидным артритом был выявлен низкий уровень экспрессии CD86 молекул на нейтрофилах, выделенных из синовиальной жидкости (Synovial fluid neutrophils transcribe and express class II major histocompatibility complex molecules in rheumatoid arthritis / A. Cross [et al.] // Arthritis Rheum. - 2003. - Vol.48, №10. - P. 2796-2806), а у пациентов с грануломатозом Вегнера в период обострения отмечалось повышение экспрессии CD86 молекул на поверхности нейтрофилов периферической крови (Polymorphonuclear neutrophils in Wegener's granulomatosis acquire characteristics of antigen presenting cells / C. Iking-Konert [et al.] // Kidney Int. - 2001. - Vol. 60, №6. - P. 2247-2262).

Для прогнозирования наступления беременности у женщин с бесплодием и «малыми» формами эндометриоза после проведения хирургического лечения бесплодия показатель CD86+ нейтрофилов ранее не использовался.

Известно, что ко-стимуляторные CD86 молекулы относятся к семейству В-7 молекул, которые экспрессируются преимущественно антиген-презентирующими клетками и участвуют в проведении ко-стимуляторного сигнала в Т-лимфоциты (Leung J., Suh W.K. The CD28-B7 Family in Anti-Tumor Immunity: Emerging Concepts in Cancer Immunotherapy // Immune Netw. - 2014. - Vol. 14 (6). - P. 265-276). Исследования последних лет доказали, что нейтрофилы, наряду с макрофагами и дендритными клетками, также можно отнести к антиген-презентирующими клеткам, поскольку они в определенных условиях способны экспрессировать на своей поверхности специфические молекулы, участвующие в процессе презентации антигена, такие как HLA-DR, CD80 и CD86 молекулы. Причем экспрессия CD86 молекул нейтрофилами повышается при развитии воспалительного процесса. (Takashima A., Yao Y. Neutrophil plasticity: acquisition of phenotype and functionality of antigen-presenting cell // J Leukoc Biol. - 2015. - Vol. 98, №4. - P. 489-496). По-видимому, высокое содержание СD86-позитивных нейтрофилов в периферической крови пациенток с бесплодием и эндометриозом отражает усиление активности системных воспалительных реакций, оказывающих дополнительное негативное влияние на состояние репродуктивной функции женщин и требующих дополнительной коррекции в послеоперационном периоде.

Способ осуществляется следующим образом:

1) К 3 мл гепаринизированной крови из кубитальной вены добавляют 3 мл RPMI 1640 и выделяют обогащенную популяцию полиморфноядерных гранулоцитов стандартным методом скоростного центрифугирования в двойном градиенте плотности фиколл-урографина (d=1,078 и d=1,114) (Boum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - Vol. 21, №97. - P. 77.)

2) Популяцию нейтрофилов, располагающуюся в интерфазе фиколл-урографин d=1,078 и фиколл-урографин d=1,114, дважды отмывают физраствором, доводят концентрацию клеток до 1×106 кл/мл. К 0,1 мл полученной суспензии одновременно добавляют 20 мкл моноклональных антител анти-СБ86, коньюгированных с флюоресцеинизотионатом (eBioscience, USA). Клетки инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре в темноте, отмывают в 1 мл физраствора.

3) Определяют относительное количество CD86+ клеток в нейтрофильном гейте на проточном цитометре. При его значении, равном 31% или менее, прогнозируют спонтанное наступление беременности в течение года.

Отличительные признаки способа: установлен прогностический параметр относительного содержания CD86+ нейтрофилов, при значении которого 31% или менее прогнозируют наступление беременности.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Больная Е., 32 лет, обратилась на амбулаторный прием по поводу отсутствия беременности в одном браке при регулярной половой жизни без контрацепции в течение 4 лет. Из анамнеза - менархе с 14 лет, установились сразу, менструации регулярные, через 28 дней по 3-4 дня, умеренные, болезненные. Половая жизнь с 20 лет. Бимануальное исследование не обнаружило каких-либо отклонений от нормы. При влагалищном исследовании: наружные половые органы развиты правильно. Шейка матки и слизистая влагалища визуально не изменены. Матка в антефлексио-версио, нормальных размеров, плотная, подвижная, безболезненная. Придатки четко не пальпируются, область их безболезненна, своды свободны. Пальпация крестцово-маточных связок безболезненна. Обследована по поводу бесплодия: по тестам функциональной диагностики, УЗИ органов малого таза, гистологического исследования эндометрия - цикл двухфазный, овуляторный. Инфекционный статус не отягощен. Обследование гормонального фона сыворотки крови в пределах нормы. По данным гистеросальпингографии - полость матки не деформирована, просвет маточных труб имеет неизмененный вид, трубы контрастируются на всем протяжении, контраст свободно поступает в брюшную полость. Муж обследован, спермограмма не изменена. Посткоитальный тест положительный.

Клинический диагноз: первичное бесплодие. Подозрение на наружный генитальный эндометриоз.

Произведено определение в периферической крови относительного содержания CD86+ нейтрофилов, которое составило 25,7%.

Заключение: прогнозируется спонтанное наступление беременности в течение одного года после проведения оперативной лапароскопии и деструкции очагов эндометриоза.

На 9 день менструального цикла произведена лапароскопия, в ходе которой обнаружено: брюшная полость свободна, матка нормальных размеров. Маточные трубы не изменены, свободно проходимы при хромогидротубации. Яичники не изменены. На брюшине правой крестцово-маточной связки обнаружены единичные поверхностные очаги эндометриоза площадью менее 3 см2. Произведена коагуляция очагов эндометриоза биполярным коагулятором. Выполнена биопсия брюшины. Гистологическое исследование удаленных тканей эндометриоз брюшины.

Диагноз при выписке: Бесплодие первичное. Наружный генитальный эндометриоз I и II стадии.

Спустя три месяца после операции наступила спонтанная беременность, завершившаяся своевременными родами.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. В отделение эндохирургии для уточнения причины бесплодия обратилась женщина 30 лет с жалобами на вторичное бесплодие в течение 6 лет, тянущие боли внизу живота до и во время менструации, купирующиеся приемом нестероидных противовоспалительных средств. В анамнезе 1 спорадический выкидыш. Состоит в одном браке, гинекологических заболеваний в анамнезе не отмечает. В ходе обследования на специализированном приеме по бесплодию выявлено наличие двухфазного менструального цикла (по тестам функциональной диагностики, УЗИ органов малого таза и гистологического исследования эндометрия), по данным гистеросальпингографии полость матки не изменена, маточные трубы умеренно извиты, контрастируются на всем протяжении, контраст в брюшную полость поступает с обеих сторон. Гормональный и инфекционный фон не изменен. При влагалищном исследовании: шейка матки без дефектов; тело матки нормальных размеров, подвижное, безболезненное; придатки не увеличены с обеих сторон, безболезненны при пальпации. Болезненность при пальпации в области крестцово-маточных связок и заднего свода. Супруг обследован - отклонений от нормы не выявлено. Посткоитальный тест положительный.

Клинический диагноз: вторичное бесплодие. Подозрение на наружный генитальный эндометриоз.

Проведено определение в периферической крови относительного содержания CD86+ нейтрофилов, которое составило 66,4%.

Заключение: прогнозируется отсутствие спонтанного наступления беременности в течение одного года после лапароскопии.

На лапароскопии: брюшная полость свободна, матка нормальных размеров. Маточные трубы визуально не изменены, при хромогидротубации заполняются красителем. На брюшине крестцово-маточных связок поверхностные и глубокие очаги эндометриоза более 3 см2. Яичники нормальных размеров, в правом - постовуляторная «стигма».

Проведено иссечение и деструкция очагов эндометриоза. Эндометриоз верифицирован гистологически. Диагноз при выписке: Бесплодие вторичное. Наружный генитальный эндометриоз I и II стадии.

В течение года регулярной половой жизни без контрацепции беременность не наступила.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился. Больной рекомендовано экстракорпоральное оплодотворение.

Пример 3. Обратилась женщина 25 лет с жалобами на первичное бесплодие в течение 3-х лет в одном браке, периодически возникающие боли при половом контакте. Нарушений менструального цикла, гинекологических заболеваний в анамнезе не отмечает. На дооперационном этапе проведено полное клинико-лабораторное обследование супружеской пары. По тестам функциональной диагностики, УЗИ органов малого таза и гистологического исследования эндометрия - менструальный цикл двухфазный, овуляторный. Гормональный фон соответствует возрасту и фазе менструального цикла. При обследовании выявлено вульвовагинальное инфицирование (уреаплазменное носительство) - проведена терапия, направленная на восстановление нормобиоценоза. По данным гистеросальпингографии полость матки имеет правильную форму, маточные трубы заполняются контрастом на всем протяжении, не расширены; контраст в брюшную полость поступает с обеих сторон. При осмотре: матка нормальных размеров, подвижная, безболезненная. Придатки не определяются. Несколько болезненен задний свод. Выделения слизистые, умеренные. Направлена на лапароскопию для уточнения причины бесплодия. Муж обследован - нормозооспермия. Посткоитальный тест положительный.

Диагноз: первичное бесплодие. Подозрение на наружный генитальный эндометриоз.

Произведено определение в периферической крови относительного содержания CD86+ нейтрофилов, которое составило 31%.

Заключение: прогнозируется наступление беременности в течение одного года после проведения оперативной лапароскопии и деструкции очагов эндометриоза. На 7 день менструального цикла произведена лапароскопия, в ходе которой обнаружено: брюшная полость свободна, матка нормальных размеров. Маточные трубы не изменены, свободно проходимы при хромогидротубации. Яичники не изменены. На брюшине задних листков широких маточных и крестцово-маточных связок обнаружены множественные поверхностные и глубокие очаги эндометриоза площадью более 3 см2. Произведена коагуляция и иссечение очагов эндометриоза монополярным коагулятором. Выполнена биопсия брюшины. Гистологическое исследование удаленных тканей - эндометриоз брюшины.

Диагноз при выписке: Бесплодие первичное. Наружный генитальный эндометриоз I и II стадии.

Через 6 месяцев наступила беременность, завершившаяся своевременными родами.

Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 24 женщины с бесплодием и наружным генитальным эндометриозом I и II стадиями Данные исследований приведены в таблице 1.

Преимущества заявляемого способа:

1) высокая точность - 87,5%, чувствительность - 88,9%, специфичность - 86,7%;

2) небольшое количество времени, необходимого для обследования женщины по заявляемому способу

3) способ позволяет оценить шанс спонтанного наступления беременности после проведения лечебной лапароскопии, своевременно скорректировать тактику ведения пациенток и оценить необходимость назначения им такого дорогостоящего метода, как ЭКО.

Способ прогнозирования спонтанного наступления беременности в течение года у женщин с I и II стадиями наружного генитального эндометриоза после проведения хирургического лечения бесплодия путем иммунологического исследования периферической венозной крови до оперативного лечения, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD86+ нейтрофилов и при его значении, равном 31% или менее в нейтрофильном гейте прогнозируют наступление беременности.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Способ идентификации и количественного определения специфической молекулы-мишени в образце, включающий: тестирование и выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; или выбор первого лиганда или множества первых лигандов и второго лиганда или множества вторых лигандов, соединенных с детектируемой меткой, в отношении связывания с молекулой-мишенью; скрининг образца, содержащего специфическую молекулу-мишень, в высокопроизводительном скрининговом анализе, включающий добавление первого и второго лиганда, каждый из которых имеет первую и вторую детектируемую метку, связывание каждого из первого и второго лигандов с отдельными и специфическими сайтами на специфической молекуле-мишени, где скрининговый анализ не требует стадии промывания; обнаружение излучения света, когда первый и второй лиганды специфически связываются со специфической молекулой-мишенью; измерение интенсивности излучаемого света и по интенсивности света проводят идентификацию и количественное определение специфической молекулы-мишени в образце.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и представляет собой способ флуоресцентного гистологического выявления амилоида, включающий фиксирование срезов ткани органов в 10%-ном формалине, окрашивание флуоресцентным красителем, промывку водой, обезвоживание, заделку в прозрачные нефлуоресцирующие среды и микроскопирование на флуоресцентном микроскопе, отличающийся тем, что в качестве флуоресцентного красителя используют производные 4-N-арил-3,5-диоксо-1-формил-10-окса-4-азатрицикло[5.2.11.7.02.6]дец-8-енов формулы где Y=2-NO2, 3-NO2, 4-NO2, 3-СООН, 4-СООН,а окрашивание осуществляют 1,5% спиртовым раствором красителя, смешанным с 1% водным раствором гидроксида натрия в соотношении 1:1.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, плодоводству и селекции. Способ включает промораживание однолетних побегов в период покоя в камере искусственного климата.

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа количественного определения метоклопрамида в лекарственных формах, воде и биологических жидкостях.
Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике, и может быть использовано для ранней дифференциальной диагностики острого панкреатита и рака поджелудочной железы.

Изобретение относится к области разработки лекарственных препаратов для лечения онкологических заболеваний. Предложен способ выявления веществ и их композиций с противоопухолевой активностью, основанный на увеличении продукции репортерного белка, кодируемого рекомбинантным репликативно-дефектным аденовирусом, в ответ на воздействие веществ или их композиций на молекулярные мишени из числа протеинкиназы mTOR, топоизомераз I и II, гистон деацетилаз и неизвестных мишеней, ингибируемых соединениями LY294002 и LY303511.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ получения ДНК-праймеров и зондов для малоинвазивной пренатальной ПЦР-диагностики трисомии 21-й хромосомы у плода по крови беременной женщины, характеризующийся тем, что выбирают сайт дифференциального метилирования фетальной ДНК 21-й хромосомы и ДНК 21-й хромосомы взрослого человека, чувствительный к эндонуклеазам, синтезируют прямой и обратный праймер, соответствующие ампликону длиной от 60 до 300 п.н., а также зонд, соответствующий этому ампликону, проводят ПЦР в реальном времени смеси образцов после их обработки эндонуклеазой рестрикции, отбирают пары праймеров и зонды, обеспечивающие эффективность реакции ПЦР в реальном времени выше 90% и линейность при изменении относительной концентрации образцов выше 90%.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике и касается способа определения мозговой изоформы креатинфосфокиназы в крови человека.

Изобретение относится к области биотехнологии и предназначено для применения индоцианина зеленого в качестве оптической метки наночастиц, содержащих лекарственное вещество белковой природы.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для экспресс-анализа количества сахара в крови. Гексокиназный способ неинвазивного определения сахара в крови включает в подготовку прибора для определения сахара в крови, в котором используют пробу и реагент, помещение их в кювету для перемешивания с получением раствора, содержащего конгломерат реактива с сахаром в слюне, у которого повышается спектральная чувствительность и достигает порога на двух значениях 190 нм и 340 нм, установку кюветы в рабочий прибор, включение источника светового излучения, а также фильтра-селектора, направляемых поочередно на кварцевую кювету с упомянутым раствором, осуществление контроля оптической плотности многосекционным фотоприемником и определение значения сахара в крови посредством обработки процессором данных об оптической плотности.

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа идентификации и раздельного количественного определения танина и галловой кислоты при совместном присутствии в растительном сырье и фитопрепаратах без предварительного разделения. Сущность способа заключается в том, что навеску растительного сырья заливают нагретой до кипения водой, кипятят с обратным холодильником, извлечение процеживают, не дожидаясь охлаждения, в мерную колбу, доводят объем раствора, если необходимо, водой до метки. Далее измеряют оптическую плотность фильтрата, разведенного боратным буферным раствором с рН 9,0, относительно буфера при длинах волн 275±2 нм и 305±2 нм и рассчитывают содержание галловой кислоты и танина в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах. Использование способа позволяет повысить точность одновременного определения танина и галловой кислоты при совместном присутствии в растительном сырье и фитопрепаратах. 5 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области диагностики, а именно к способу определения длительности болезни при лихорадке Ку у лиц в возрасте до 50 лет. Способ определения длительности болезни при лихорадке Ку, заключающийся в том, что в сыворотке крови больных в возрасте до 50 лет определяют активность каталазы на 1 или 2 неделях болезни, затем, решая регрессионные уравнения зависимости между активностью каталазы, длительностью эндотоксикоза и продолжительностью заболевания, определяют длительность болезни при лихорадке Ку в днях, при этом при определении активности каталазы сыворотки крови на 1 неделе болезни определяют длительность болезни с точностью до 1-2 дней, а при определении активности каталазы сыворотки крови на 2 неделе болезни - с точностью до 1-3 дней. Вышеописанный способ повышает точность определения длительности болезни при лихорадке Ку. 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа количественного определения флуоресцеина натрия. Сущность способа заключается в том, что прозрачную полиметакрилатную матрицу выдерживают в анализируемом растворе при встряхивании в течение 15 минут, при этом в анализируемый раствор добавляют раствор NaOH для создания среды кислотностью pH 9. Оценку концентрации флуоресцеина натрия осуществляют по градуировочному графику интенсивности полосы при максимуме флуоресценции 440 нм. Использование способа позволяет с высокой точностью определять флуоресцеин натрия в растворах. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии и касается способа определения феназепама. Сущность способа заключается в том, что готовят растворы определяемого вещества в концентрации 0,02 мг/мл и образца сравнения. В качестве растворителя для приготовления испытуемых растворов используют 0,1М раствор натрия гидроксида. В качестве образца сравнения используют натрия нитрат. Измеряют оптическую плотность раствора определяемого вещества и образца сравнения на спектрофотометре при длине волны 345 нм. Расчет результатов проводят по формуле ,где Dx и Dвос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно; аx и авос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно; V1 и V2 -объемы приготовленного раствора определяемого вещества; V3 - объем аликвоты определяемого вещества; - объем приготовленного раствора образца сравнения; 100 - коэффициент для пересчета в проценты; W - влажность, %; 0,0208 - коэффициент пересчета по натрия нитрату в 0,1M растворе натрия гидроксида. Использование способа позволяет с высокой точностью определять феназепам в исследуемых образцах. 3 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии, и касается способа определения O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата и O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-(дибутиламиносульфенил)-N-метилкарбамата в биологическом материале. Сущность способа заключается в том, что биологический объект, содержащий O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамат или O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-(дибутиламиносульфенил)-N-метилкарбамат, измельчают, трижды обрабатывают смесью ацетона и этилацетата, взятых в соотношении 6:4 по объему, каждый раз в течение 30 минут. Полученные извлечения объединяют, экстрагент испаряют, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном. Ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют, остаток растворяют в ацетонитриле. Полученный раствор разбавляют водой в соотношении 1:4 по объему, образующийся водно-ацетонитрильный раствор насыщают хлоридом натрия. Далее дважды экстрагируют этилацетатом, органические экстракты объединяют, упаривают до сухого остатка. Остаток растворяют в ацетоне, вносят в макроколонку сорбента, которым является силикагель КСС №3 80/120 мкм. Процесс хроматографирования осуществляют, используя двухкомпонентную подвижную фазу гексан-диоксан в соотношении 8:2 по объему. Фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в метаноле. Далее проводят определение исследуемого вещества хромато-масс-спектрометрическим методом в капиллярной колонке HP-5MS длиной 30 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил-95%-метилполисилоксан, при толщине пленки неподвижной фазы 0,25 мкм), используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 1,0 мл/мин, и масс-селективным детектором, работающим в режиме электронного удара, где начальная температура термостата колонки составляет 70°С, данная температура выдерживается в течение 2 минут, в дальнейшем температура повышается от 70 до 200°С со скоростью 40°С в минуту, а затем от 200 до 290°С со скоростью 12,5°С, конечная температура колонки выдерживается в течение 2 минут, температура инжектора составляет 250°С, температура квадруполя 150°С, температура интерфейса детектора 290°С, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ. Регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество ализируемого вещества, которым является O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамат или O-(2,3-дигнщро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-(дибутиламиносульфенил)-N-метилкарбамат, по площади хроматографического пика. Использование способа позволяет с высокой точностью определять O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата и O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-(дибутиламиносульфенил)-N-метилкарбамата в биологическом материале. 4 табл. 3 пр.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики гипоксии плода в родах, включающий определение концентрации лактата в амниотической жидкости, отличающийся тем, что образец амниотической жидкости забирают в первом периоде родов вагинальной амниотомией при раскрытии шейки матки 4-5 см посредством иглы для пункции заднего свода влагалища, определяют в амниотической жидкости концентрацию лактата энзиматическим колориметрическим методом и при концентрации лактата в амниотической жидкости менее 5,0 ммоль/л или более 9,5 ммоль/л диагностируют гипоксию плода в родах. Осуществление изобретения обеспечивает сокращение времени диагностики гипоксии плода в родах при высоких показателях чувствительности и специфичности. 3 пр., 4 ил.

Изобретение относится к области медицины. Предложены способы зондирования множественных мишеней в биологическом образце, включающие использование фотоактивируемого химического обесцвечивания для обнаружения множественных мишеней в биологическом образце. Способы включают: связывание по меньшей мере одного зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в образце, содержащей множественные мишени; обнаружение сигнала от по меньшей мере,одного связанного зонда; приведение образца, содержащего связанный зонд, в контакт с реагентом переноса электрона; облучение образца, связывание по меньшей мере одного зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в образце; обнаружение сигнала от зонда. Также предложен способ получения серии по меньшей мере двух изображений, показывающих оптически меченные биологические мишени. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 6 ил., 5 пр.

Изобретение относится к диагностике, а именно способу получения модельной системы на основе лецитина из подсолнечника для определения свободно-радикального окисления. Способ получения модельной системы на основе лецитина из подсолнечника для определения свободно-радикального окисления по концентрации малонового диальдегида, включающий получение 10% спиртового раствора лецитина, из 0,25 мл полученного раствора лецитина и 5 мл дистиллированной воды инжекционным способом готовят суспензию липосом, в полученную суспензию липосом добавляют 0,2 мл 0,05 н соляной кислоты и впрыскивают 0,125 мл 3 мМ перекиси водорода, нагревают при температуре 38°С в течение 30 мин при постоянном перемешивании. Вышеописанный способ позволяет повысить точность определения свободнорадикального окисления. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для предоперационной дифференциальной диагностики первичных и вторичных злокачественных, а также доброкачественных опухолей головного мозга. Сущностью изобретения является то, что за 3 дня до операции в плазме крови больного определяют общую БАЭЭ-эстеразную активность трипсиноподобных протеиназ и при ее значении в пределах 305,9-360,1 мЕ/мл диагностируют доброкачественную опухоль головного мозга, при ее значении в пределах 1228,6-1433,4 мЕ/мл диагностируют первичную злокачественную опухоль головного мозга, а при ее значении в пределах 2052,9-2401,1 диагностируют вторичную злокачественную опухоль головного мозга. Способ позволяет проводить дифференциальную диагностику новообразования головного мозга до операции, что, в свою очередь, позволит обеспечить наиболее эффективную медикаментозную и техническую подготовку к оперативному лечению больного, имеющего новообразование головного мозга, и сократить сроки пребывания больного в стационаре. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для определения степени метаболической зрелости гетеротопических оссификатов. Сущность способа: перед выполнением хирургического лечения гетеротопических оссификатов определяют характер их расположения и локализации, затем оценивают показатель микрогемоциркуляции (ПМ, п.е. - перфузионные единицы) мягких тканей в проекции гетеротопических оссификатов пациента. В случае, если измеренные характеристики показателя фосфорно-кальциевого обмена в венозной крови пациента составляют по содержанию фосфатазы щелочной более 160-180 Ед./л, по содержанию остеокальцина более 50-58 нг/мл, а также при характеристике маркера формирования костного матрикса (PINP) - N-терминальный припептид проколлагена 1 типа более 90 нг/мл даже при изолированном поражении одного локтевого или одного коленного сустава, то устанавливают факт наличия прохождения активных регенераторных процессов, свидетельствующих о незавершенности процесса образования остеоида, его минерализации с созреванием губчатой костной ткани новообразованной кости и, как следствие, о преждевременности проведения этапа хирургического удаления образовавшихся гетеротопических оссификатов. В случае, если измеренные показатели фосфорно-кальциевого обмена в венозной крови пациента составляют по характеристике маркера формирования костного матрикса (PINP) - N-терминальный припептид проколлагена 1 типа составляют менее 76 нг/мл даже при изолированном поражении одного локтевого или одного коленного сустава, по содержанию фосфатазы щелочной в пределах 40-150 Ед./л и по содержанию остеокальцина в пределах 11-46 нг/мл, то устанавливают факт завершенности процессов образования остеоида и его минерализации с образованием и созреванием губчатой костной ткани новообразованной кости, а также свидетельствующий о достаточности стадии метаболической зрелости гетеротопических оссификатов пациента при купировании активных метаболических процессов в патологическом очаге, показатели которой свидетельствуют о целесообразности проведения этапа хирургического удаления образовавшихся гетеротопических оссификатов с восстановлением функционально достаточного объема движений в пораженном суставе. Изобретение может быть использовано при лечении пациентов с формирующимися гетеротопическими костеобразованиями в условиях травматолого-ортопедических, хирургических и других стационаров. Применение изобретения обеспечивает достаточную точность оценки степени зрелости гетеротопических оссификатов перед их хирургическим удалением, обеспечивает достаточно более раннее и объективное выявление факта развития процесса гетеротопической оссификации, а также обеспечение высокой информативности для выбора индивидуальной тактики хирургического лечения гетеротопических оссификатов. 4 пр.
Наверх