Способ моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом



Способ моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом
Способ моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом

Владельцы патента RU 2618657:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и касается моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом. Способ включает внутрибрюшинное введение белым крысам-самцам линии Wistar однократно в сутки гентамицина в дозе 20 мг/кг в течение 5 дней. После этого внутрибрюшинно вводят липополисахарид Escherichia coli серотипа O55:В5 в дозе 1 мг/кг 1 раз в 7 дней в течение двух недель. Затем делают перерыв во введении фармакологических агентов в течение 7 дней. После этого внутрибрюшинно вводят ингибитор эндотелиальной NO-синтазы L-нитроаргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг ежедневно в течение 7 дней. Способ обеспечивает моделирование нескольких взаимосвязанных звеньев патогенеза эндотелиальной дисфункции, что приближает модель к процессам в организме человека на бессимптомной фазе течения дисфункции при варианте коморбидной патологии. 2 ил., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для оценки эндотелиопротективных эффектов ряда фармакологических препаратов с различными механизмами действия при моделировании системного воспаления низкой градации и окислительного стресса.

По известным литературным источникам субклиническое персистирующее воспаление низкой градации является важным патогенетическим звеном многих социально значимых хронических заболеваний, включая атеросклероз, сахарный диабет, метаболический синдром, онкологические заболевания и болезнь Паркинсона (SamanthaChang, and Liwu Li Metabolicendotoxemia: a novel conceptin chronic disease pathology //J MedSci 2011;31(5):191-209). В связи с этим разработка метода моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и оксидативным стрессом, является актуальной проблемой экспериментальной фармакологии.

Известен способ моделирования эндотоксинового шока у кроликов, включающий в себя однократное внутривенное введение липополисахарида Escherіchіacoli (E.coli), серотипа O55:B5 в дозе 0,5 мг/кг и L-нитроаргинин метилового эфира (L-NAME) в дозе 15 мг/кг/сутки за три дня до эндотоксинового шока и в течение пяти дней после него (Eric Wiel1, Qian Pu, Delphine Corseaux, Emmanuel Robin, Régis Bordet, Niels Lund, Brigitte Jude, and Benoоt Vallet Effect of L-arginine on endothelial injury and hemostasis in rabbit endotoxin shock, Journal of Applied Physiology, November 1, 2000, vol. 89, no. 5, 1811-1818).

Основными недостатками данного способа являются: однократное введение липополисахарида, которое не позволяет смоделировать системное воспаление низкой градации; введение L-NAME до введения липополисахарида, что ведет к проявлению лечебных эффектов при оксидативном стрессе, а не его усугублению. Кроме того, данный метод не позволяет влиять на изменение метаболических путей, регулируемых почками.

Другой способ моделирования хронической эндотоксемии у крыс включает интраперитонеальное введение гентамицина в дозе 20 мг/кг в течение 5 дней, на 6 день дополняется однократным введением липополисахарида в дозе 0,2 мг/кг. Животные выводятся из экспериментана 30, 60 или 90 сутки от начала эксперимента (Kalashnikova, S.; Kovnatskaya, G.; Shchyogolev, A Morphofunctional Changes in the Kidneys in Chronic Endotoxemia against the Background of Hypothyroidism, Bulletin of Experimental Biology & Medicine; Aug 2012, Vol.153, Issue 4, p. 516).

Основными недостатками данного способа являются: однократное введение липополисахарида, которое не позволяет смоделировать системное воспаление низкой градации и отсутствие прямого воздействия на звенья, регулирующие активность NO-синтазы.

Наиболее близким к заявленному решению является способ моделирования эндотелиальной дисфункции с помощью бактериального липополисахарида (в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно) и ингибитора индуцибельной NO-синтазы 1400W (в дозе 3 мг/кг внутрибрюшинно) (Liver sinusoidal endothelial dysfunction after LPS administration: a role for inducible-nitric oxide synthase. La Mura V. etal., J Hepatol. 2014, Dec; 61(6):1321-7).

Недостатками данного способа являются:

1. Однократное введение липополисахарида в высокой дозе, что воспроизводит изменения, происходящие при сепсисе, а не хроническом воспалении.

2. Используется ингибитор индуцибельной NO-синтазы, что может способствовать проявлению лечебных эффектов за счет блокады индуцибельной, а не эндотелиальной синтазы оксида азота.

3. Отсутствует повреждающее действие на почечную ткань, что не позволяет рассматривать эндотелиальную дисфункцию со всех патофизиологических этапов развития.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка легковоспроизводимого способа моделирования системного воспаления низкой градации и окислительного стресса, а также ассоциированной с ними эндотелиальной дисфункции.

Поставленная задача достигается следующим образом: белым крысам-самцам линии Wistar массой 250-300 г внутрибрюшинно вводят липополисахарид и ингибитор NO-синтазы, причем предварительно однократно в сутки внутрибрюшинно вводят нефротоксичный антибактериальный препарат из группы аминогликозидов гентамицин в дозе 20 мг/кг в течение 5 дней. По окончании введения гентамицина, на шестые сутки от начала эксперимента, начинают введение липополисахарида Escherіchіacoli серотипа (O55:B5) в дозе 1 мг/кг внутрибрюшинно 1 раз в 7 дней в течение двух недель, затем делают перерыв во введении животным фармакологических агентов в течение 7 дней, после чего внутрибрюшинно вводят блокатор эндотелиальной NO-синтазы L-нитроаргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг ежедневно в течение 7 дней. Животных выводят из эксперимента на 34 сутки.

Внутрибрюшинное введение нефротоксичного антибактериального препарата гентамицина приводит к морфофункциональным изменениям почечной паренхимы, проявляющихся вторичной артериальной гипертензией, диссоциацией эндотелийпродуцируемых медиаторов, повышением в крови уровня асимметричного диметиларгинина (АДМА) – эндогенного конкурентного блокатора NO-синтазы, активацией оксидативного стресса и др.

Инъекции липополисахарида Escherіchіacoli вызывают окислительные повреждения: уменьшение толщины поверхности эндотелия, обусловливая нарушения структуры гликокаликса сосудистого русла и развитие эндотелиальной дисфункции, которая приводит к ухудшению микроциркуляции и снижению оксигенации тканей.

L-NAME блокирует эндотелиальную NO-синтазу, усугубляет оксидативный стресс, нарушая прооксидантно-антиоксидантный баланс.

Использование последовательного введения гентамицина, липополисахарида и блокатора эндотелиальнойсинтазы оксида азота в указанных дозах позволяет добиться следующих результатов:

• блокировать не только синтез, но и биодоступность оксида азота как ключевого патогенетического звена в развитии эндотелиальной дисфункции;

• преодолеть эндогенные механизмы природной защиты и нарушить баланс функционирования систем организма и гомеостаз;

• приблизить экспериментальные методы моделирования эндотелиальной дисфункции к патогенетическим процессам, протекающим в организме человека при хроническом воспалении и ассоциированной с ним эндотелиальной дисфункции.

Таким образом, поставленная задача решена.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ.

Эксперимент выполнен на 30 половозрелых самцах крыс линии Wistar массой 180-200 г. В эксперименте использовались три группы животных: 1) группа интактных животных (n=10); 2) группа с L-NAME-индуцированным дефицитом оксида азота (n=10); 3) опытная группа (n=10).

Группе интактных животных вводили плацебо (0,9% раствор натрия хлорида).

Группе с L-NAME-индуцированным дефицитом оксида азота ежедневно внутрибрюшинно вводили 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида в течение 6 дней, затем процедуру повторяли 1 раз в неделю в течение двух недель. Завершали эксперимент введением L-NAME в дозе 25 мг/кг ежедневно в течение 7 дней.

Опытной группе ежедневно внутрибрюшинно вводили 4% раствор гентамицина в течение 5 дней в дозе 20 мг/кг.

По окончании введения гентамицина на шестые сутки от начала эксперимента животным интраперитонеально вводили липополисахарид кишечной палочки в дозе 1 мг/кг 1 раз в неделю. Процедуру повторяли в течение двух недель. Затем делали перерыв во введении животным фармакологических агентов в течение 7 дней, после чего вводили блокатор эндотелиальной NO-синтазы L-нитроаргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг ежедневно в течение 7 дней.

На 34 день от начала эксперимента под наркозом вводили катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД). Болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряли непрерывно посредством датчика и компьютерной программы Biopac SystemInc. MP150. Проводились функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВД) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНВД) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

Для оценки выраженности эндотелиальной дисфункции использовался коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД), рассчитываемый как отношение площадей треугольников над кривой восстановления артериального давления после введения нитропруссида и ацетилхолина.

При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величина стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг массы тела животного, внутрибрюшинно) животное фиксировали и производили регистрацию уровня гемодинамических показателей, их вариабельности при введении фармакологических агентов. Затем производился расчет СрАД, площадей треугольников над кривой восстановления артериального давления на нитропруссид и ацетилхолин, КЭД (по САД, ДАД и СрАД) для каждой группы животных.

Болюсное внутривенное введение ацетилхолина в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего у интактных животных для САД 84,3±4,4, для ДАД - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. Эндотелий независимая вазодилятация также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек.

Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения ацетилхолина (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и нитропруссида (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Моделирование эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом, вызывало артериальную гипертензию (САД – 173,0±15,2, ДАД – 134,0±3,9, СрАД - 152,0±11,2 мм рт.ст.) и приводило к большему снижению показателей АД после введения ацетилхолина (САД до 102,9±8,1, ДАД до 66,9±8,0, СрАДдо 79,2±4,8 мм рт.ст.) и меньшему – после введения нитропруссида (САД до 92,8±4,7, ДАД до 47,1±4,2 и СрАД до 62,0±2,9 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Динамика показателей гемодинамики в исследуемых группах животных представлена в таблице 1 на Фиг. 1.

При расчете степени выраженности эндотелиальной дисфункции по показателю КЭД были получены следующие данные: КЭД=1,1 у интактных животных, КЭД=7,2 у животных контрольной группы и КЭД=5,4 у животных, получавших L-NAME. Расчет коэффициента эндотелиальной дисфункции представлен в таблице 2 на Фиг. 2.

Таким образом, данный способ позволяет моделировать эндотелиальную дисфункцию, ассоциированную с универсальными механизмами повреждения: системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом, и может быть использован для оценки эндотелиопротективных эффектов ряда фармакологических препаратов с различными механизмами действия.

Способ моделирования эндотелиальной дисфункции, ассоциированной с системным воспалением низкой градации и окислительным стрессом, включающий внутрибрюшинное введение белым крысам-самцам линии Wistar однократно в сутки гентамицина в дозе 20 мг/кг в течение 5 дней, после чего внутрибрюшинно вводят липополисахарид Escherichia coli серотипа O55:В5 в дозе 1 мг/кг 1 раз в 7 дней в течение двух недель, затем делают перерыв во введении фармакологических агентов в течение 7 дней, после чего внутрибрюшинно вводят ингибитор эндотелиальной NO-синтазы L-нитроаргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг ежедневно в течение 7 дней.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине, хирургии, травматологии и дерматологии. Для моделирования трофической язвы венозной этиологии у кролика линии Шиншилла, интраоперационно на внутренней поверхности бедра проводят оперативный доступ к бедренной вене с последующим прошиванием через центр сосуда проленом 7/0 и перевязкой 1/2 вены до сужения просвета в 2 раза.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и хирургии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого на фоне моделирования ишемии скелетной мышцы проводят ее коррекцию путем внутрижелудочного введения комбинации варденафила в дозе 0,09 мг/кг и пентоксифиллина 30 мг/кг 1 раз в сутки ежедневно в течение 7 дней.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и хирургии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого на фоне моделирования ишемии скелетной мышцы проводят ее коррекцию путем внутрижелудочного введения комбинации силденафила в дозе 0,22 мг/кг и пентоксифиллина 30 мг/кг 1 раз в сутки ежедневно в течение 7 дней.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и хирургии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мышцы. Для этого на фоне моделирования ишемии скелетной мышцы проводят ее коррекцию путем внутрижелудочного введения комбинации тадалафила в дозе 0,09 мг/кг и пентоксифиллина в дозе 30 мг/кг 1 раз в сутки ежедневно в течение 7 дней.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине и андрологии. Для лечения первичного мужского гипогонадизма в эксперименте проводят трансплантацию аллогенной ткани костного мозга лабораторному животному с первичным мужским гипогонадизмом, смоделированным на основании временной ишемии тестикул.

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине и андрологии. Для моделирования первичного мужского гипогонадизма осуществляют ишемическое воздействие на тестикулы путем временного наложения лигатуры сроком на 3 суток.

Группа изобретений относится к медицинской технике. Тренажерное устройство содержит узел корпуса, содержащий наружный корпус, запускающий узел и демпферный блок, вставленные в наружный корпус.

Изобретение относится к экспериментальной и спортивной медицине, в частности к способам моделирования физического переутомления у крыс в условиях десинхроноза. Нагрузку на животного осуществляют в два этапа.

Изобретение относится к экспериментальной биологии и предназначено для исследования поведенческих реакций лабораторных животных. Для этого предложена модифицированная тест-установка «Открытое поле».

Изобретение относится к медицине, а именно к количественной гистохимической оценке адаптации организма к воздействию низкой температуры окружающей среды. Для этого устанавливают холодовую анестезию у экспериментального животного путем количественной цитохимической оценки хромаффинной реакции эритроцитов крыс при общем охлаждении организма.

Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии, и предназначено для применения при демонстрации на моделях возможности прогнозирования возникновения патологических изменений зубочелюстного (зубоальвеолярного) комплекса при использовании ортодонтических конструкций. Производят изготовление из оптически прозрачного или полупрозрачного материала экспериментальной модели стоматологического объекта и выполняют внешнее силовое нагружение на указанный объект. Воздействуют на него поляризованным светом и производят регистрацию интерференционной картины нагруженной экспериментальной модели, по которой судят о распределения нагрузок в нагруженной модели. При этом экспериментальная модель стоматологического объекта выполнена в виде зубоальвеолярной модели, изготовленной в виде поперечного аксиального среза альвеолярного отростка с выступами, имитирующими наружную поверхность зубов, на которые устанавливают брекеты. Просвечивают модель поляризованным светом с помощью установки, включающей источник света, поляризатор и анализатор, плоскости которых установлены параллельно, причем поляризатор жестко закреплен и снабжен градуированным кольцом, а анализатор установлен с возможностью поворота в плоскости, параллельной плоскости поляризатора, и также снабжен градуированным кольцом. Регистрируют исходную интерференционную картину напряжений в материале указанной экспериментальной ненагруженной модели. Производят последующее крепление к установленным на модель брекетам активной ортодонтической дуги, производя, таким образом, нагружение модели. Вновь просвечивают нагруженную модель поляризованным светом с помощью указанной установки, добиваясь максимальной интенсивности изображения светлых и темных интерференционных полос поворотом плоскости анализатора на определенный угол. Регистрируют полученную интерференционную картину уже нагруженной модели, по которой судят о распределении нагрузок в зубоальвеолярной модели, сопоставляя ее с данными исходной интерференционной картины ненагруженной модели. Способ за счет выделения зон высокой концентрации нагрузок и зон малой концентрации нагрузок позволяет спрогнозировать возникновение патологических изменений зубочелюстного комплекса при использовании ортодонтических конструкций. 6 з.п. ф-лы, 9 ил., 2 пр.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для изучения процесса накопления магнитных наночастиц в заданном участке сосудистой системы под воздействием внешнего магнитного поля. Стенд для исследования процесса магнитоуправляемой доставки наночастиц в сосудистую систему содержит У-образную трубку, единичный конец которой расположен между магнитом и регистратором и соединен с накопительной емкостью, помпу, расходомер, а также датчик давления и элемент доставки наночастиц. Выход накопительной емкости соединен через помпу и расходомер с одним из раздвоенных концов У-образной трубки, образуя замкнутый контур, имитирующий систему кровообращения, причем упомянутый раздвоенный конец У-образной трубки соединен также с датчиком давления и элементом доставки наночастиц. Элемент доставки наночастиц по первому варианту представляет собой шприц, а по второму варианту представляет собой электромагнитный зонд, соединенный с источником питания. Группа изобретений обеспечивает возможность исследования процесса магнитоуправляемой доставки наночастиц в сосудистую систему. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к фармакологии, и может быть использовано для коррекции окислительного стресса в условиях ультрафиолетового облучения. Способ заключается в том, что в условиях ультрафиолетового облучения лабораторным животным - крысам - осуществляют ежедневное пероральное введение настоя травы вьюнка полевого из расчета 5 мл/кг массы за 20 минут до воздействия ультрафиолетовых лучей. Настой получают настаиванием в течение 60 минут 5 г травы на 200 мл кипящей воды. Способ обеспечивает коррекцию окислительного стресса, базируемую на снижении содержания продуктов перекисного окисления липидов в организме облучаемых крыс и увеличении активности антиоксидантной системы при сокращении длительности курса фитокоррекции. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и предназначено для создания модели ишемии глаза. Для этого кролику субконъюнктивально вводят 0.1-0.3 мл 1% раствора фенилэфрина. Способ обеспечивает возможность воспроизведения дозированной, транзиторной ишемии глаза для оценки действия фармакологических препаратов. 1 з.п. ф-лы, 7 пр., 1 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к нанотоксикологии, и касается критериев диагностики токсического действия наночастиц серебра, инкапсулированных в природную полимерную матрицу арабиногалактана (нAgAГ). Лабораторным животным опытной группы на протяжении 9 дней внутрижелудочно вводят водный раствор нAgAГ из расчета 100 мкг серебра на килограмм массы в 0,5 мл дистиллированной воды. Животным контрольной группы на протяжении 9 дней внутрижелудочно вводят 0,5 мл дистиллированной воды. Сразу после окончания воздействия изготавливают срезы тканей головного мозга животных обеих групп. Окрашивают их на антитела к белкам caspase-3 и bcl-2 и проводят обзорную микроскопию полученных препаратов. При этом подсчитывают общее количество клеток в 0,2 мм2, количество патологически измененных нейронов с экспрессией caspase 3, количество патологически измененных нейронов с экспрессией bcl-2, количество нормальных нейронов с экспрессией caspase 3, количество нормальных нейронов с экспрессией bcl-2 в процентах от общего количества клеток в 0.2 мм2. Вычисляют отношения этих показателей на препаратах опытной группы к аналогичным показателям контрольной группы. При увеличении в опытной группе числа патологически измененных нейронов с экспрессией caspase 3 в среднем в 1,6 раза, числа нормальных нейронов с экспрессией caspase 3 в среднем в 2,5 раза, патологически измененных нейронов с экспрессией bcl-2 в среднем в 2,4 раза, числа нормальных нейронов с экспрессией bcl-2 в 1,5 раза делают заключение о наличии процесса апоптоза в тканях головного мозга животных. Предлагаемый способ позволяет оценить функциональное состояние нейронов головного мозга при воздействие нанобиокомпозитов серебра, расширяет арсенал методов оценки действия токсических веществ на организм лабораторных животных. 1 пр., 1 табл.

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам для имитации сосудистой процедуры с визуализационным контролем. Система содержит складывающееся основание из двух частей, соединенных шарнирным соединением, где каждая часть включает одну или несколько стыковочных станций, две направляющие трубки для операционных инструментов, при этом каждая поддерживается одной из стыковочных станций, и два рабочих блока, выполненных с возможностью соединения с одной из стыковочных станций, содержит камеру для приема в себя операционного инструмента, датчик диаметра инструмента и блок слежения за инструментом. Данные слежения и информация о диаметре предоставляются программе, хранящейся в памяти. Способ содержит этапы, на которых определяют информацию о диаметре инструмента, введенном в рабочий блок, определяют данные слежения за инструментом, причем при касании инструмента поверхности камеры данных слежения определяются независимо от определения информации о диаметре, и отображают имитирующее изображение инструмента на основе информации о диаметре и данных слежения. Рабочий блок содержит камеру для инструментов, датчик диаметра инструмента, введенного в камеру, блок слежения за инструментом, где блок слежения и датчик диаметра предоставляют информацию для ее использования программным обеспечением, и рабочий блок соединен со стыковочной станцией, поддерживающей направляющую трубку для инструментов. Использование изобретений позволяет упростить транспортировку, сборку и калибровку средств для имитации сосудистой процедуры с визуализационным контролем. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к топографической анатомии, нейрохирургии, и может быть использовано в целях изучения вариабельности артериальных и венозных сосудов основания черепа и головного мозга человека. На цельном нефиксированном кадавере выделяют внутренние сонные артерии и внутренние яремные вены с обеих сторон. Промывают сосуды вначале проточной водой, затем 3-5% соляным раствором. Далее готовят комплексный раствор, состоящий из резины белой силиконовой, силиконового масла - растворителя и окрашивающего пигмента (красного и синего пигмента) в соотношении 1:(0,9-1,1):(0,04-0,06) соответственно. За 30-60 секунд до введения комплексного раствора в сосуды в добавляют в раствор катализатор-отвердитель в соотношении 1:(0,05-0,07), перемешивают до получения гомогенной массы. Комплексный раствор вначале вводят во внутреннюю сонную артерию до момента появления комплексного раствора из внутренней сонной артерии с противоположной стороны, затем во внутреннюю яремную вену до момента появления комплексного раствора из внутренней яремной вены с противоположной стороны. Способ позволяет быстро и качественно визуализировать как крупные, так и очень мелкие сосуды головного мозга. 7 з.п. ф-лы, 16 ил.

Изобретение относится к медицине и физиологии и касается стимуляции электровозбудимых нейрональных клеток, что может быть использовано в исследованиях клеток, выращиваемых на микроэлектродной матрице (МЭМ). Способ включает размещение культур клеток на чаше микроэлектродной матрицы, выполненной в виде массива из металлических микроэлектродов, сформированных на подложке, с контактными площадками по периметру, соединенными посредством токопроводящих дорожек с микроэлектродами. Поддержание жизнеспособности культур клеток осуществляют в условиях СО2-инкубатора. Проводят генерацию электрических сигналов с помощью стимулятора, передачу генерируемых сигналов от стимулятора к культурам клеток на МЭМ, регистрацию спонтанной активности культур клеток. Новым является то, что МЭМ предварительно устанавливают в коннектор, помещенный в инкубатор. Причем в коннекторе над МЭМ устанавливают плату с отверстием, с выступом, с прижимными пружинными контактами, соединенными токопроводящими дорожками. Устанавливают таким образом, чтобы чаша с культурой клеток выступала сквозь отверстие платы, а прижимные пружинные контакты платы были расположены соосно контактным площадкам МЭМ с возможностью взаимодействия с ними. Коннектор и МЭМ соединяют со стимулятором посредством шлейфа из проводных соединений. Генерацию электрических сигналов осуществляют в виде последовательности, состоящей из серии 5 импульсов с межимпульсным интервалом 20 мс и интервалом между сериями 200 мс. При этом передачу генерируемых биполярных стимулов от стимулятора к культурам клеток осуществляют посредством шлейфа из проводных соединений, подключенного к разъему на выходе стимулятора с одной стороны и к внешнему разъему коннектора с другой стороны через прижимные пружинные контакты по токопроводящим дорожкам платы на контактные площадки МЭМ и по токопроводящим дорожкам МЭМ через микроэлектроды. Способ обеспечивает возможность непрерывной и длительной (хронической) стимуляции культуры электровозбудимых нейрональных клеток, улучшение физиологических условий, необходимых для ее развития, повышение надежности эксперимента. 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной хирургии и может быть применимо для формирования модели костного дефекта. На предплечье мелкого лабораторного животного выполняют поперечную остеотомию на двух уровнях до кортикальной пластинки, граничащей с межкостной мембраной. Линии остеотомии соединяют в продольном направлении. Удаляют костный фрагмент. Выкусывают костное вещество до кортикальной пластинки. Способ позволяет уменьшить травматичность, уменьшить влияние вторичных факторов.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения особенностей течения остеомиелита, разработки и оценки эффективности различных способов его лечения. Для этого моделируют локализованный метафизарный хронический остеомиелит у кролика. В области проксимального метаэпифиза большеберцовой кости формируют костный дефект, в который укладывают заранее заготовленную стерильную гемостатическую губку размером, соответствующим размеру дефекта. После чего ее инфицируют введением 0,5 микробной взвеси суточной культуры золотистого стафилококка, содержащей 106 КОЕ/мл. Затем рану ушивают, и животное содержат в обычных условиях не менее 21 суток. Способ обеспечивает создание локализованного очага хронического метафизарного остеомиелита за счет купирования кровотечения и ограничения распространения инфицирующего агента на смежные сегменты, что приводит к низкому риску генерализации инфекционного процесса и развитию летальных исходов экспериментального животного в результате сепсиса. 6 ил., 1 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-02-08 2017-05-14T00:24:30
Наверх