Способ оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы

Авторы патента:

G01N33/483 - физический анализ биологических материалов

Владельцы патента RU 2621159:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный аграрный университет" (RU)

Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к ветеринарии, и предназначено для оценки готовности иммунной системы к вакцинации. Для оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток инъецируют маркер "Трипановый синий" в дозе не более 0,5 мл. Через час осуществляют бескровный убой цыплят и вскрывают их брюшную полость, вырезают брыжейку или брюшину. Помещают на камеру Горяева, закрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп с окуляром, увеличивающим объект исследования не менее в 15 раз, и объективом 9×0,20. Полученный результат фотографируют с помощью цифрового фотоаппарата и изображение вводят в компьютер, используя программное обеспечение Microsoft Office Power Point. Определяют количество окрашенных макрофагов расположенных на 4 больших квадратах камеры Горяева, общая площадь которых 0,16 мм², проводят анализ, обработку данных, строят график динамики развития макрофагов по их количеству в зависимости от возраста цыплят. Определяют период стабилизации развития макрофагов, в течение которого осуществляют вакцинацию цыплят. Использование изобретения позволяет повысить сохранность цыплят. 3 ил.

Настоящее изобретение относится к области ветеринарии, в частности к оценке готовности иммунной системы к вакцинации.

Известна вакцинация цыплят путем орального применения пробиотиков, начиная с первого по десятые сутки. Однако отсутствие определения конкретного времени применения пробиотиков может сопровождаться гибелью определенного количества микробных клеток, составляющих основу препарата в желудочно-кишечном тракте, что создает условия для несвоевременного накопления достаточного уровня полезной микрофлоры в организме цыплят.

Также известна технология вакцинации цыплят, включающая определение оптимального срока вакцинации (http://ru.wikihow.com).

Недостатками известных технических решений является отсутствие конкретных и обоснованных сроков вакцинации цыплят.

Техническим результатом является повышение сохранности цыплят за счет определения оптимального срока вакцинации.

Технический результат достигается тем, что в способе оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы, включающем определение оптимального срока вакцинации, согласно изобретению в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток инъецируют маркер "Трипановый синий" в дозе не более 0,5 мл, затем через час осуществляют бескровный убой цыплят и вскрывают их брюшную полость, вырезают брыжейку или брюшину и помещают на камеру Горяева, которая представляет собой стекло с нанесенной на него размерной сеткой в виде мелких и больших квадратов, закрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп с окуляром увеличивающий объект исследования не менее в 15 раз, и объективом 9×0,20, затем полученный результат фотографируют с помощью цифрового фотоаппарата и полученное изображение вводят в компьютер и используют программное обеспечение Microsoft Office Power Point, на слайд которого располагают оцифрованное изображение объекта исследования и на него накладывают электронный макет сетки камеры Горяева, который предварительно вводят в компьютер, далее определяют количество окрашенных макрофагов, расположенных на 4 больших квадратах камеры Горяева, общая площадь которых 0,16 мм², проводят анализ, обработку данных, строят график динамики развития макрофагов по их количеству в зависимости от возраста цыплят и определяют период стабилизации развития макрофагов, в течение которого осуществляют вакцинацию цыплят.

Новизна заявляемого предложения заключается в том, что в качестве объекта для визуальной оценки его заселенности макрофагами используют брюшину или брыжейку кишечника, обладающие достаточной светопроницаемостью, и не нуждаются в трудоемкой предварительной подготовке.

Сущность изобретения поясняется чертежом, где на на фиг. 1 изображено фото брыжейки кишечника, с окрашенными макрофагами в виде синих точек; на фиг. 2 изображено наложение электронного макета камеры Горяева на фото брыжейки кишечника; на фиг. 3 изображен график динамики развития макрофагов по их количеству в зависимости от возраста цыплят.

Способ оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы осуществляется следующим образом.

Предварительно в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток для визуализации макрофагов авторами был выбран традиционный маркер - краситель «Трипановый синий», который является взвесью минеральных частиц в разбавителе. Краску (по 0,5 мл) инъецировали в брюшную полость 5 цыплятам в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток, не допуская попадания ее во внутренние органы. Через 60 минут производят разрыв спинного мозга цыплят в области верхней части шеи (бескровный убой), вскрытие брюшной полости цыплят, отделение брюшины и брыжейки кишечника. Окрашенные объекты помещают на камеру Горяева. Камера Горяева - оптическое устройство для подсчета клеток или иных соизмеримых с ними частиц в заданном объеме жидкости. Состоит из толстого предметного стекла, имеющего прямоугольное углубление (камеру) с нанесенной микроскопической сеткой, и тонкого покровного стекла. Размеры малого квадрата камеры Горяева 0,05×0,05 мм, а размеры большого квадрата камеры Горяева - 0,2×0,2 мм.

Далее исследуемый объект закрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп. На объекте для исследования оценивали количество окрашенных макрофагов при малом увеличении микроскопа (окуляр 15х, объектив 9×0,20).

Затем полученное изображение под микроскопом фотографируют с помощью цифрового фотоаппарата и полученное изображение вводят в компьютер и используют программное обеспечение Microsoft Office Power Point, на слайде которого располагают оцифрованное изображение объекта исследования, и на него накладывают электронный макет камеры Горяева. Для получения макета сетку камеры Горяева оцифровывают и вводят в компьютер. Для оценки брали 4 больших квадрата камеры, в которых определяли точное количество клеток ММС (моноцитарно-макрофагальной системы), захвативших краску. Площадь 4 больших квадратов камеры Горяева составляет 0,16 мм².

По полученным данным строят график динамики развития макрофагов по их количеству в зависимости от возраста цыплят. В возрасте 3 суток установлено наименьшее число клеток, захвативших краску, - от 1 до 4; в дальнейшем установлен прогрессирующий рост их количества, который стабилизировался в возрасте цыплят 17 суток (10-18 клеток). В дальнейшем количество окрашенных макрофагов на единице площади не изменилось.

Следовательно, формирование первичного звена иммунологической реактивности цыплят в целом завершается к возрасту 17 суток. Это является четким маркером готовности иммунной системы птицы адекватно оценивать любой объект, попавший в организм, в том числе вакцинный антиген.

Первая вакцинация птицы является обоснованной при достижении возраста 17 суток при концентрации макрофагов не менее 10 клеток на 0,16 мм².

Элементы моноцитарно-макрофагальной системы функционально и морфологически приспособлены осуществлять контроль по принципу «свой - чужой». Это проявляется в отслеживании любых объектов, не отвечающих определению «свой», и фагоцитировании этих объектов. Если объект имеет неорганическую природу, то макрофаги захватывают его и удерживают внутри клетки длительное время.

В результате научных исследований выяснилось, что при вакцинации цыплят в возрасте 17 суток сохранность цыплят составила 94%, а сохранность при вакцинациях более раннем возрасте - в среднем 83%.

Способ оценки функциональной зрелости иммунной системы молодняка сельскохозяйственной птицы, включающий определение оптимального срока вакцинации, отличающийся тем, что в брюшную полость цыплят в возрасте 3, 7, 12, 17 и 28 суток инъецируют маркер "Трипановый синий" в дозе не более 0,5 мл, затем через час осуществляют бескровный убой цыплят и вскрывают их брюшную полость, вырезают брыжейку или брюшину и помещают на камеру Горяева, которая представляет собой стекло с нанесенной на него размерной сеткой в виде малых и больших квадратов, закрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп с окуляром, обеспечивающим 15-кратное увеличение, и объективом 9×0,20, затем полученный результат фотографируют с помощью цифрового фотоаппарата и полученное изображение вводят в компьютер, затем используют программное обеспечение Microsoft Office Power Point, на слайд которого предварительно располагают оцифрованное изображение объекта исследования и на него накладывают электронный макет сетки камеры Горяева, который предварительно вводят в компьютер и определяют количество окрашенных макрофагов, расположенных на 4 больших квадратах камеры Горяева, общая площадь которых 0,16 мм², проводят анализ, обработку данных, строят график динамики развития макрофагов по их количеству на единице площади и определяют возрастные параметры периода стабилизации заселения объекта макрофагами, который является оптимальным для первой вакцинации цыплят.

Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и касается способа диагностики тяжести течения хронического гастрита у детей. Сущность способа заключается в изучении клинических, морфологических и иммуногистохимических показателей слизистой оболочки желудка на наличие антигенов простого герпеса, цитомегаловируса и вируса Эпштейн-Барр.

Способ сбора и фиксации нематод, паразитирующих в сычуге и тонком кишечнике жвачных животных // 2617417

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для диагностики нематодозов жвачных животных. Способ сбора и фиксации нематод, паразитирующих в сычуге и тонком кишечнике жвачных животных, включает извлечение сычуга и тонкого кишечника с содержимым во время патологоанатомического вскрытия.

Способ определения массы микрочастицы в переменном электрическом поле // 2614735

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения массы микрочастицы в суспензии. Для этого осуществляют формирование измерительного объема между двумя электродами, соединенными с источником переменного напряжения и расположенными в камере с жидкостью, диспергирование в этот объем частицы, измерение параметров взаимодействия частицы с электрическим полем и последующее вычисление ее массы.

Способ диагностики мастита // 2607383

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики мастита у коров. Способ заключается в том, что молоко в объеме 100-200 мкл наносят на предметное стекло и проводят дегидратацию препарата в потоке теплого воздуха при температуре 40-50°С и влажности 20-30% в течение 15-20 минут в горизонтальном положении.

Способ детекции белков // 2606852

Группа изобретений относится к медицине и касается системы детекции для электрохимического выявления белкового аналита, включающей наноструктурированный микроэлектрод, содержащий линкер на своей поверхности, где линкер присоединен к антителу или его фрагменту, способным связывать белковый аналит; и редокс-репортер, способный к переносу электронов с указанным наноструктурированным микроэлектродом, где связывание белкового аналита с указанными антителом или его фрагментом препятствует переносу электронов между указанным редокс-репортером и указанным наноструктурированным микроэлектродом.

Блок датчиков // 2593797

Изобретение относится к области измерений для диагностических целей. Блок датчиков для проведения диагностических измерений, размещенных на поверхности тела, включает основание, содержащее выемку, в которой закреплен пьезоэлемент датчика давления.

Способ анализа цитохрома с в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеивания на наноструктурированных покрытиях // 2585118

Настоящее изобретение относится к области биоаналитических исследований и представляет собой способ анализа цитохрома С в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), включающий подготовку митохондрий и их нанесение на подложку на основе диэлектрического химически инертного материала с наноструктурированным покрытием толщиной 1-10 мкм в виде кольцевых наноструктур серебра, при этом ободки серебряных колец состоят из сообщающихся друг с другом пористых агрегатов серебра, на поверхности которых расположены округлые наночастицы серебра размером 2-90 нм, с последующей иммобилизацией митохондрий на данные наноструктурированные покрытия, детектирование спектров ГКР с последующей расшифровкой характеристических колебаний анализируемой пробы спектров ГКР с использованием стандартного программного обеспечения.

Способ прогнозирования развития тяжёлого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей // 2579315

Изобретение относится к медицине, в частности к фибробронхоскопии, и описывает способ прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей методом хемилюминесценции.

Способ и аппарат для измерения иммунной и кислородной системы и скрининга лекарственных средств // 2574000

Группа изобретений относится к области мониторинга здоровья по части функции иммунной системы и измерения эффектов токсинов и других воздействий. Способ включает в себя предоставление аппарата, предоставление образца крови, установление базового значения молекулярного кислорода, приложение воздействия на упомянутый образец, получение данных об изменении концентрации молекулярного кислорода и скорости ее изменения, а также сравнение полученных данных с данными здорового индивидуума.

Биолюминесцентный способ определения антиоксидантной активности вещества // 2571229

Предложен способ определения антиоксидантной активности вещества, предусматривающий приготовление контрольных проб, содержащих буферный раствор и биолюминесцентный сенсор, определения исходной интенсивности биолюминесценции.

Способ интраоперационной дифференциальной диагностики объемных образований щитовидной железы // 2624377

Изобретение относится к медицине, хирургии, интраоперационной дифференциальной диагностике объемных образований щитовидной железы (ЩЖ). В режиме реального времени проводят конфокальную лазерную микроскопию ткани ЩЖ. При получении изображения в виде сетки с ячейками округлой или полигональной формы диаметром 20-200 мкм с перегородкой толщиной 0,2 мкм диагностируют отсутствие объемных образований ЩЖ. При регистрации сетчатого изображения с диаметром ячеек более 200 мкм диагностируют узловой коллоидный зоб. При получении изображения с ячейками диаметром 20-200 мкм с толщиной перегородки 10-30мкм и участками фиброза диагностируют аденому ЩЖ. При регистрации изображения с бесструктурными массами с неровными изъеденными краями по всему полю зрения с просветлениями, расположенными в хаотичном порядке, диагностируют рак ЩЖ. Способ обеспечивает быструю и точную диагностику образований ЩЖ в режиме реального времени, интраоперационно. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.

Способ диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите // 2624855

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики микробного фактора при хроническом неспецифическом эндометрите. Сущность способа заключается в том, что у больной на 7-9-й день менструального цикла берут бактериологический посев из полости матки и цервикального канала с помощью внутриматочной цитощетки. При выявлении Lactobacillus spp., Enterococcus faecali, Streptococcus viridans, Streptococcus agalactiae диагностируют микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. Использование способа позволяет с высокой точностью диагностировать микробный фактор при хроническом неспецифическом эндометрите. 3 пр.

Способ определения in vitro перспективных эмбрионов для последующей имплантации в матку при проведении процедуры экстракорпорального оплодотворения (эко) // 2625777

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, репродуктологии, эмбриологии, и может быть использовано для определения in vitro перспективных эмбрионов для последующей имплантации в матку при проведении процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Для этого посредством цейтраферной видеозаписи у 2-клеточных эмбрионов определяют последовательность и ориентацию плоскостей делений (горизонтальная/экваториальная - Е, вертикальная/меридиональная - М) каждого бластомера. При этом учитывают, что такие плоскости могут быть: последовательными экваториальными (ЕЕ), последовательными меридиональными (ММ), меридиональным, затем экваториальным (ME), экваториальным, затем меридиональным (ЕМ). И в случае, если последовательности делений в этих плоскостях соответствуют вариантам (ЕМ) или (ММ), то такие эмбрионы считают перспективными для последующей имплантации в матку при проведении процедуры ЭКО. Способ обеспечивает раннее выявление и перенос наиболее перспективных для имплантации эмбрионов, что повышает частоту имплантации и беременности. 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Устройство (варианты) и способ автоматического мониторинга привычек питания // 2626672

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для неинвазивного мониторинга свойств биологической ткани. Последовательно проводят следующие этапы: сбора данных импеданса и вспомогательных данных от участка тела пользователя; предварительной обработки полученных данных, причем предварительная обработка заключается в фильтрации полученных данных и удалении артефактов из полученных данных импеданса путем обнаружения не относящихся к пище физиологических факторов на основе вспомогательных данных; восстановления динамики кривой глюкозы путем применения обученного алгоритма машинного обучения, оценивания гликемического индекса из динамики кривой глюкозы, предоставления пользователю результатов оценки и автоматического мониторинга привычек питания на основе упомянутых результатов оценки для определенного периода времени. Группа изобретений позволяет повысить эффективность неинвазивного мониторинга гликемических показателей и скорректировать привычки питания. 2 н. и 40 з.п. ф-лы, 5 ил.

Способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки // 2626676

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки, заключающийся в том, что исследуют ультразвуковые параметры матки с подсчетом количества миоматозных узлов, методом краевой дегидратации менструальных выделений (МВ) определяют наличие параллельных и волокнистых структур и рассчитывают коэффициент Р: где z рассчитывают по формуле:z=b1×x1+b2×x2+b3×х3+а,где b1 - коэффициент, равный 2,172; x1 - волокнистые структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b2 - коэффициент, равный 2,238; x2 - параллельные структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b3 - коэффициент, равный 1,568; x3 - количество узлов; а - константа, равная –10,915; и при значении Р>0,5 дополнительно методом иммуноферментного анализа исследуют уровни лигандов APRIL и TRAIL, и при значении APRIL более 11,1 нг/мл, TRAIL менее 22,5 пг/мл прогнозируют риск развития быстрорастущей миомы матки. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования. 2 табл., 2 пр.

Электрохимический способ выявления аминокислотных замен и идентификации пептидов // 2633078

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах. Для осуществления способа на печатный графитовый электрод наносят аликвоту 60-100 мкл 50 мкМ раствора пептида в буферном растворе. Регистрируют квадратно-волновую вольтамперограмму окисления в области от 0 до 1,5 В (отн. Ag/AgCl). Измеряют потенциалы максимумов и высоты полученных сигналов окисления аминокислотных остатков - пиков или волн и фиксируют результаты. По различию в положении потенциалов максимумов сигналов окисления и их интенсивности, зная аминокислотные последовательности для группы исследуемых пептидов или имея базу данных, полученную ранее, проводят идентификацию пептидов. При сравнении результатов относительно контроля - «нормального» пептида, констатируют аминокислотную замену. Использование изобретения обеспечивает электрохимическую идентификацию пептидов и выявление в их структуре аминокислотных замен. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 1 пр.

Способ и система для клеточного анализа с помощью массовой цитометрии // 2636352

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены способ и система для клеточного анализа. Способ включает обеспечение группы маркированных клеток, выбор имеющей интересующее свойство клетки в группе, запись локализации клетки, направление лазерного импульса на клетку и генерирование дискретного шлейфа, введение дискретного шлейфа в индуктивно сопряженную плазму и генерирование групп соответствующих маркеру элементарных ионов, обнаружение каждой из групп элементарных ионов одновременно для каждого дискретного шлейфа с помощью массовой цитометрии и корреляцию обнаруженных элементарных ионов с интересующим свойством. Система включает опрашивающее устройство для идентификации локализации подходящей клетки, хранилище данных для записи локализации клетки, систему лазерной абляции для направления лазерного импульса на локализацию клетки и массовый цитометр для обнаружения связанного с подходящей клеткой маркера. Изобретения обеспечивают расширение области клеточного анализа по сравнению с возможностями традиционных основанных на клетке методик отображения или визуализации. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 5 ил.

Способ ранней диагностики дисбиоза влагалища // 2636528

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и описывает способ диагностики дисбиоза влагалища путем исследования вагинальной жидкости. Способ характеризуется тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста. Способ обеспечивает возможность ранней диагностики дисбиоза влагалища на этапе доклинических проявлений, что позволяет своевременно начать лечение, не используя токсичные медикаментозные препараты. Изобретение может быть использовано в женских консультациях и гинекологических стационарных отделениях.

Способ оптической оценки концентрации микробных клеток в суспензии // 2636620

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве. Это достигается тем, что выполняется определение значения волнового экспонента (n) для суспензии микроорганизмов в двух дисперсионных средах с различными показателями преломления, на основе полученных его значений вычисляется для данного штамма микроорганизмов в данных конкретных условиях показатель преломления бактерий (μb) и средний радиус (Rcp) микробных тел, затем, применяя асимптотическое приближение, находится коэффициент светорассеяния (Кs), с использованием которого по измеренной оптической плотности суспензии определяется концентрация микроорганизмов (N). Изобретение может быть использовано для определения концентрации микробных клеток в суспензии в микробиологических исследованиях и биотехнологическом производстве.

Способ прогнозирования негативных последствий в полости рта при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой // 2639476

Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии, медицинской микробиологии. Способ прогнозирования негативных последствий в полости рта при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой, включающий инструментальное и микробиологическое обследование, отличающийся тем, что у пациентов перед установкой несъемной техники после оценки индексных показателей стоматологического статуса проводят забор биоматериала зубной бляшки и устанавливают количественное содержание оральных стрептококков S. mutans и S. Sanguis в КОЕ/г, при выявлении в биотопе обоих видов стрептококков или отдельно каждого в содержании 104 и более КОЕ/г в зубной бляшке, определении индекса КПУ более 1,9 и индекса Green-Wermillion более 1,4 прогнозируют негативные последствия в полости рта, выраженные в кариозной активности в процессе лечения. Использование способа обеспечивает возможность прогнозирования и, соответственно, предупреждения негативных последствий при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой в виде кариеса зубов. 2 ил., 3 табл., 3 пр.