Способ морфометрической оценки прогноза течения иммунной тромбоцитопении после спленэктомии по индексу соотношения масс cd4+/cd8+ t-лимфоцитов селезенки



Владельцы патента RU 2621627:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, и предназначено для прогнозирования течения иммунной тромбоцитопении после спленэктомии. Для осуществления изобретения определяют массу удаленной селезенки, выполняют гистологическую проводку образцов послеоперационного материала общепринятым способом с приготовлением парафиновых блоков. Для идентификации и подсчета CD4+ и CD8+ лимфоцитов в гистологических срезах селезенки проводят иммуногистохимическое окрашивание. В гистологических срезах селезенки подсчитывают количество CD4+ и CD8+ клеток, вычисляют их массу и рассчитывают индекс соотношения масс (ИМС) CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов. При значениях ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов <2,3 прогнозируют рефрактерную форму иммунной тромбоцитопении, а при ≥2,4 устанавливают благоприятное течение заболевания. Использование изобретения обеспечивает эффективную морфометрическую оценку течения иммунной тромбоцитопении после спленэктомии. 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к гематологии. Способ может быть использован для прогнозирования течения иммунной тромбоцитопении (ИТП) после спленэктомии путем морфометрической оценки в гистологических срезах селезенки количества CD4+ и CD8+ Т-клеток после иммуногистохимического окрашивания лимфоцитов, вычисления их массы и расчета индекса соотношения масс (ИСМ) CD4+/CD8+ Т-клеток.

Цель изобретения - разработка способа морфометрического прогнозирования течения ИТП после спленэктомии по ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки.

ИТП является одним из наиболее распространенных аутоиммунных заболеваний, характеризующимся изолированным снижением содержания тромбоцитов крови преимущественно за счет их разрушения. В основе развития патологического процесса лежат сложные иммунные механизмы, конечным этапом которых является образование антитромбоцитарных антител, приводящих к снижению количества тромбоцитов в периферической крови (P.Y. Choi, F. Roncolato, X. Badoux [et al.] A novel triple therapy for ITP using high-dose dexamethasone, low-dose rituximab, and cyclosporine (TT4) // Blood. - 2015. - Vol. 126, №4. - P. 500-5003; D. Provan, R. Stasi, A. Newland [et al.] International consensus report on the investigation and management of primary immune thrombocytopenia // Blood. - 2010. - Vol. 115, №2. - P. 178-186).

Известно, что ключевую роль в патогенезе ИТП играет селезенка. В последнее время появились сообщения о Т-клеточном механизме ингибирования активации клеточных линий с участием CD4+ регуляторных лимфоцитов, играющих ведущую роль в иммунном ответе при данном заболевании (W. Bao, J.B. Bussel, S. Heck [et al.] Improved regulatory T-cell activity in patients with chronic immune thrombocytopenia treated with thrombopoietic agents // Blood. - 2010. - Vol. 116, No 22. - P. 4639-4645; B.H. Chong ITP: Tregs come to the rescue // Blood. - 2010. - Vol. 116, No 22. - P. 4388-4390). Встречаются работы, указывающие на активацию CD8+ Т-клеток в лимфоидном органе и их участие в разрушении тромбоцитов у пациентов с ИТП, не отвечающих на иммуносупрессивную терапию (S. Audia, M. Samson, M. Mahevas [et al.] Preferential splenic CD8+ T-cell activation in rituximab-nonresponder patients with immune thrombocytopenia // Blood. - 2013. - Vol. 122. - P. 2477-2486; W. Bao. J.B. Bussel, S. Heck [et al.] Improved regulatory T-cell activity in patients with chronic immune thrombocytopenia treated with thrombopoietic agents // Blood. - 2010. - Vol. 116, No 22. - P. 4639-4645). Однако до сих пор недостаточно изучена роль CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов селезенки в патогенезе ИТП. Отсутствуют сведения о влиянии массы CD4+ и CD8+ клеток лимфоидного органа, а также ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов на течение патологического процесса после спленэктомии.

Способа морфометрической оценки прогноза течения ИТП после спленэктомии по индексу соотношения масс CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки не существует.

Прототип отсутствует.

Аналогом является известный способ оценки CD4+ и CD8+ Т-клеток селезенки у больных ИТП, не отвечающих на терапию ритуксимабом (S. Audia, M. Samson, M. Mahevas [et al.] Preferential splenic CD8+ T-cell activation in rituximab-nonresponder patients with immune thrombocytopenia // Blood. - 2013. - Vol. 122. - P. 2477-2486).

Отличия заявляемого способа от аналога включают:

1. В заявляемом способе после иммуногистохимического окрашивания гистологических срезов селезенки производят подсчет количества CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов, вычисляют их массу и рассчитывают индекс соотношения масс, по значениям которого прогнозируют варианты течения ИТП после спленэктомии.

2. В аналоге цитофотометрически по относительному количеству (%) CD8+ и CD8+/CD4+ Т-клеток в селезенке и крови оценивают результаты лечения ИТП у пациентов, не отвечающих на терапию ритуксимабом, метод не позволяет прогнозировать варианты течения ИТП.

В процессе проведения патентно-информационного поиска не выявлено источников, порочащих новизну предлагаемого изобретения.

Заявляемое изобретение разработано в лаборатории патоморфологии крови ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России в соответствии с планом научно-исследовательской работы.

Способ осуществляется следующим образом.

После проведения спленэктомии у больных ИТП определяют массу удаленной селезенки. Гистологическую проводку образцов исследуемого материала выполняют общепринятым способом. Приготовление срезов осуществляют из парафиновых блоков селезенок, толщиной 3-5 мкм. Для идентификации CD4+ и CD8+ T-лимфоцитов в селезенке используют метод иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания; постановку реакции осуществляют по стандартной методике. Морфометрическую оценку количества CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов выполняют на световом микроскопе со встроенной фото- и видеокамерой с помощью программного обеспечения анализа изображений ImageScope Color, версии М, с окуляром х10, при объективе х100. Исследования проводят в 20 полях зрения для каждого образца, начиная от капсулы вглубь лимфоидного органа. Исходя из полученных результатов, вычисляют массу CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов и рассчитывают ИСМ CD4+/CD8+ клеток селезенки по формулам:

М1=m×D1/100%

М2=m×D2/100%

ИСМ=М1/M2,

где:

M1 - масса CD4+ Т-лимфоцитов (г),

М2 - масса CD8+ Т-лимфоцитов (г),

D1 - количество CD4+ Т-лимфоцитов, %,

D2 - количество CD8+ Т-лимфоцитов, %,

m - масса селезенки, г,

ИСМ - индекс соотношения масс CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки.

Исследования выполнены на гистологических срезах парафиновых блоков селезенок от 20 больных ИТП после спленэктомии в возрасте от 21 до 65 лет (10 - мужского пола и 10 женского). После спленэктомии определяли массу селезенки, выполняли проводку образцов послеоперационного материала, морфометрически после ИГХ окрашивания подсчитывали количество CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов селезенки, вычисляли их массу и рассчитывали ИСМ CD4+/CD8+ клеток. При значениях ИСМ CD4+/CD8+ лимфоидных элементов менее 2,3 прогнозировали рефрактерную форму ИТП, а при показателях, равных и более 2,4, - вариант ИТП с благоприятным течением заболевания. По результатам анализа у 10 пациентов после спленэктомии была установлена рефрактерная форма патологического процесса и у 10 - благоприятное течение заболевания.

Результаты исследований представлены в примерах, подтверждающих возможность заявляемого способа прогнозировать варианты течения ИТП после спленэктомии по ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки.

Пример 1.

Больная М, 59 лет, поступила в гематологическое отделение ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России 03.04.2011 г. Анализ крови при поступлении: гемоглобин 154 г/л, эритроциты 5,5×1012/л, лейкоциты 14,4×109/л, тромбоциты 9×109/л. Диагноз при поступлении: ИТП, тяжелая форма, плохо контролируемая лекарственными препаратами. Через 2 месяца выполнена операция (07.06.2011): спленэктомия - без осложнений. Масса селезенки больной (m) составила 119,0 г. Проведено ИГХ окрашивание лимфоцитов в гистологических срезах селезенки по стандартной методике. С помощью морфометрического исследования определено количество (D1) CD4+ 13,4% и (D2) CD8+ 7,9% Т-лимфоцитов. По ранее приведенным формулам вычислены их массы: (M1) CD4+ и (М2) CD8+ Т-клеток. Установленные величины масс получены в ходе следующих расчетов: М1(CD4+)=119,0 г × 13,4%/100 (15,9 г) и М2(CD8+)=119,0 г × 7,9%/100 (9,4 г). ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки составил 1,7 (<2,3).

Заключение: по результатам иммуногистохимического и морфометрического анализа установлено, что у пациентки с ИТП рефрактерная форма течения заболевания. При динамическом наблюдении за больным уже спустя 2 месяца после спленэктомии прогноз был подтвержден лабораторными показателями (15.08.10): гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4,89×1012/л, лейкоциты 10,3×109/л, тромбоциты 75×109/л. Пациентка до настоящего времени нуждается в поддерживающей терапии.

Пример 2.

Больная Б., 57 лет, поступила в гематологическое отделение ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России 27.04.2010 г. Анализ крови при поступлении: гемоглобин 117 г/л, эритроциты 4,74×1012/л, лейкоциты 4,73×109/л, тромбоциты 21×109/л. Диагноз при поступлении: ИТП, тяжелая форма, плохо контролируемая лекарственными препаратами. Через 5 месяцев выполнена операция (12.10.2010): спленэктомия - без осложнений. Масса селезенки больной (m) составила 101,0 г. Проведено ИГХ окрашивание лимфоцитов в гистологических срезах селезенки по стандартной методике. С помощью морфометрического исследования определено количество (D1) CD4+ 18,2% и (D2) CD8+ 2,3% Т-лимфоцитов. По ранее приведенным формулам вычислены их массы: (M1) CD4+ и (М2) CD8+ Т-клеток. Установленные величины масс получены в ходе следующих расчетов: M1(CD4+)=101,0 г × 18,2%/100 (18,4 г) и М2(CD8+)=101,0 г × 2,3%/100 (2,4 г). ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки составил 7,7 (≥2,4).

Заключение: по результатам иммуногистохимического и морфометрического анализа установлено, что у пациентки с ИТП благоприятный вариант течения заболевания. При динамическом наблюдении за больной прогноз был подтвержден лабораторными показателями, значения которых находились в пределах нормы в течение 47 месяцев после спленэктомии (29.09.14): гемоглобин 136 г/л, эритроциты 4,55×1012/л, лейкоциты 7,03×109/л, тромбоциты 360×109/л. В настоящее время пациентка не нуждается в поддерживающей терапии.

Заявляемое изобретение обладает новизной, дает при использовании положительный результат, заключающийся в возможности по ИСМ CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки прогнозировать течение ИТП после спленэктомии. При значениях ИСМ CD4+/CD8+ Т-клеток селезенки <2,3 прогнозируют рефрактерную форму патологического процесса, а при величинах ≥2,4 - благоприятное течение заболевания.

Предлагаемый способ информативен, может быть использован в гематологических отделениях, патоморфологических и гистологических лабораториях в качестве дополнительного критерия, предопределяющего прогноз ИТП у больных после удаления селезенки, а также дифференцированного подхода при назначении терапии.

Способ морфометрической оценки прогноза течения иммунной тромбоцитопении после спленэктомии по индексу соотношения масс CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки, характеризующийся тем, что после удаления селезенки определяют ее массу, в гистологических срезах лимфоидного органа после иммуногистохимического окрашивания подсчитывают количество CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов, вычисляют их массу и рассчитывают индекс соотношения масс CD4+/CD8+ Т-клеток и при значениях индекса соотношения масс CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов селезенки <2,3 прогнозируют рефрактерную форму иммунной тромбоцитопении, а при ≥2,4 устанавливают благоприятное течение заболевания.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области педиатрии, а конкретно к аллергологии и диетологии раннего возраста, и может быть использовано аллергологами и/или диетологами для прогнозирования формирования толерантности при аллергии к белку коровьего молока у детей раннего возраста.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к клинической и биологической психиатрии. Регистрируют электроэнцефалограмму (ЭЭГ) до начала терапии больных приступообразной шизофренией с маниакально-бредовыми расстройствами.
Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования угрозы невынашивания при гриппе A(H3N2) у женщин в первом триместре беременности. Сущность способа заключается в том, что у женщин в первом триместре гестации при гриппе A(H3N2) в период разгара заболевания в первой сыворотке крови определяют величину титра противовирусных антител (А), оценивают уровень TNF-α (пг/мл) (В).
Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования выкидыша на первом триместре гестации при действии у беременной цитомегаловирусной инфекции в период обострения.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает серологическое исследование крови серонегативных животных на лейкоз с применение РИД в течение 5 дней после учета и оценки реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает серологическое исследование крови серонегативных животных на лейкоз с применение РИД в течение 5 дней после учета и оценки реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, эндокринологии, и может быть использовано для ранней диагностики когнитивных нарушений у больных с сахарным диабетом 2 типа.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается оценки эффективности реабилитации больных ишемической болезнью сердца (ИБС). Для этого определяют значение концентрации белка теплового шока с молекулярной массой 70 кДа до проведения диагностического стресс-теста с физической нагрузкой и через 2-3 суток после него.

Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии, и предназначено для диагностики у детей возраста 4-12 лет хронических воспалительных заболеваний носоглотки, ассоциированных с ингаляционной экспозицией бензола и формальдегида.

Изобретение относится к медицине, а именно к профессиональной патологии и пульмонологии, и раскрывает способ диагностики профессиональной хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), сформировавшейся в результате действия кремнийсодержащих пылей.

Изобретение относится к области методов клинико-лабораторной диагностики и касается способа прогнозирования рецидивирующего вульвовогинального кандидоза (ВВК). Сущность способа: проводят генотипирование пациентки по полиморфным локусам генов IL4:-33 С>Т [rs2070874]; CCL2:2493(-2578) A>G [rs1024611]; IL1B:-598(-1552) A>G [rs16944] с применением ПЦР в режиме реального времени и определяют долю лактобацилл в составе вагинальной микрофлоры при помощи комплекта реагентов "Фемофлор 16", после чего полученные данные включают в функцию Z=1,063*IL1B+1,112*IL4+1,483*CCL2-0,044*Lact+1,326, где 1,326 - некоторая константа, IL1B - количество аллелей G в локусе IL1B:-598(-1552) A>G [rs16944] гена IL1B, IL4 - количество аллелей С в локусе IL4:-33 С>Т [rs2070874] гена IL4, CCL2 - количество аллелей G в локусе CCL2:2493(-2578) A>G [rs1024611] гена CCL2, Lact - доля лактобацилл (%) в составе вагинальной микрофлоры. Вероятность развития рецидивирующего ВВК определяется по формуле p=1/(1+e-z), если значение р больше 0,5, то есть основание ожидать развитие рецидивирующего ВВК, а если значение р меньше 0,5, то развитие рецидивирующего ВВК мало вероятно. Изобретение характеризует малоинвазивный способ и является доступным тестом для усовершенствования тактики ведения пациенток с ВВК. 2 пр., 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для оценки гиперчувствительности по высвобождению гистамина из лейкоцитов цельной крови. Способ включает забор в пробирки с гепарином венозной крови у обследуемого человека, центрифугирование крови, замену плазмы буфером. Проводят инкубацию аликвот ресуспендированных клеток крови с тестируемыми субстанциями в микроплейте, а также с анти-IgE в качестве положительного контроля и с буфером - отрицательного контроля. После центрифугирования микроплейта определяют уровень гистамина в надосадочной жидкости лунок микроплейта методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемным масс-спектрометрическим детектором. Проводят сравнение уровней гистамина, полученных для каждой из тестируемых субстанций, с положительным и отрицательным контролями. При повышении уровня содержания гистамина в опытном образце по сравнению с отрицательным контролем при наличии реакции в положительном контроле выявляют гиперчувствительность к тестируемой субстанции. Использование данного способа позволяет диагностировать сенсибилизацию к аллергену, а также мониторировать эффективность антиаллергического лечения за счет прямого количественного определения гистамина, высвобождающегося из лейкоцитов крови, методами высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрического анализа. 5 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунохимии, а именно к способу получения материала для биологического связывания с помощью сорбирующих колонок. Сущность изобретения заключается в том, что разработан способ получения селективного иммуносорбента для удаления антител - IgG к десмоглеину 3 типа из сыворотки крови больных пузырчаткой с использованием твердофазного носителя, заключающийся в том, что для его получения рекомбинантый человеческий десмоглеин 3 типа (Dsg3) иммобилизируют путем ковалентного связывания с твердофазным носителем, в качестве которого применяют агарозный сорбент, несущий на своей поверхности N-гидроксисукцинимидные группы: NHS-активированную агарозу. При использовании изобретения получают иммуносорбент, обладающий высокой селективной сорбционной способностью по отношению к аутоантителам - IgG к десмоглеину 3 типа. Полученный предлагаемым способом иммуносорбент может использоваться для лечения больных пузырчаткой в качестве адъювантного метода терапии. Его применение улучшает качество терапии, позволяет уменьшить дозы и длительность системных глюкокортикостероидных препаратов, снизить частоту развития побочных эффектов вследствие иммуносупрессивной терапии. 2 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования развития тяжелого поражения центральной нервной системы при клещевом энцефалите с помощью анализа ликвора, отличающийся тем, что в ликворе больного определяют уровень серотонина, при его значении более 20 нг/мл прогнозируют среднетяжелое поражение центральной нервной системы с развитием непаралитической менингеальной формы, менее 20 нг/мл - прогнозируют тяжелое поражение центральной нервной системы с формированием паралитических очаговых форм. Изобретение обеспечивает высокую точность и специфичность исследования, сокращение времени на диагностику. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и касается способа ранней диагностики бронхиальной астмы у детей в возрасте 5 лет и младше. Сущность способа заключается в том, что проводят анализ данных анамнеза, оценку клинических симптомов, изучение аллергологического статуса, которое проводят с использованием общего анализа крови, в котором определяют уровень эозинофилов и уровень общего иммуноглобулина Е в сыворотке крови, проведение цитологического исследования индуцированной мокроты, для определения в ней процентного содержания эозинофилов. Дополнительно анализируют Индекс Риска Астмы (API) и при его положительном значении и уровне эозинофилов в мокроте, равном или больше 2,5%, диагностируют бронхиальную астму. Причем при уровне эозинофилов в мокроте меньше 2,5% проводят повторное исследование и при выявлении повышения уровня эозинофилов мокроты не менее чем в 2 раза диагностируют бронхиальную астму, при этом повторное исследование проводят не менее одного раза в 6 месяцев, а при появлении респираторных симптомов - более одного раза в 6 месяцев. Использование способа позволяет с высокой точностью диагностировать бронхиальную астму на ранних стадиях у детей в возрасте 5 лет и младше. 1 з.п. ф-лы, 8 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения онкологических заболеваний. В периферической крови больного определяют количество Т-лимфоцитов CD3+, 10*9/л, и их субпопуляций: лимфоцитов CD4+ и CD8+, 10*9/л, %, кроме того, вычисляют значение частного от деления количества субпопуляций лимфоцитов CD4+ на количество CD8+. После окончания курса первичного лечения в периферической крови больного определяют абсолютное количество Т-лимфоцитов CD3+, 10*9/л, синтезирующих спонтанно и стимулированно провоспалительные цитокины, фактор некроза опухоли (TNF-α), интерлейкин - 2 (IL-2), интерферон γ (INF-γ). После чего оценивают реактивность влияния на течение опухолевого процесса каждого вида цитокина путем вычисления коэффициента реакции для каждого из них по формуле: Кр=nCD3+стим/nCD3+спонт, где Кр - коэффициент реакции влияния на течение опухолевого процесса для соответствующего провоспалительного цитокина, а именно: TNF-α, INF-γ, IL-2; nCD3+стим - количество клеток Т-лимфоцитов (CD3+) в периферической крови, синтезирующих соответствующий цитокин в тест-системе после стимуляции; CD3+спонт - количество клеток Т-лимфоцитов CD3+ в периферической крови, синтезирующих соответствующий цитокин спонтанно. Затем вычисляют значение частного от деления количества субпопуляций лимфоцитов CD4+ на количество CD8+ и при значении частного от деления равном 1 и выше, при значении коэффициента реакции в заданных пределах хотя бы для двух цитокинов, а именно: для TNF-α в пределах от 80 до 120, для IL-2 от 80 до 120, для INF-γ от 150 до 250, развитие заболевания прогнозируют как нормореактивное, прогноз благоприятный; при значении частного от деления количества субпопуляций CD4+ на количество лимфоцитов CD8+ меньше 1, при значении коэффициента реакции хотя бы для двух цитокинов выше верхнего предела, а именно: для TNF-α и для IL-2 выше 120, для INF-γ выше 250, развитие заболевания прогнозируют как гиперреактивное, прогноз благоприятный; при значении коэффициента реакции хотя бы для двух цитокинов ниже нижнего предела, а именно: для TNF-α и для IL-2 ниже 80, для INF-γ ниже 150, развитие заболевания прогнозируют как гипореактивное, прогноз неблагоприятный; при значении частного от деления количества лимфоцитов CD4+ на количество лимфоцитов CD8+ больше 1, при значении коэффициента реакции хотя бы для двух цитокинов выше верхнего предела, а именно: для TNF-α и для IL-2 выше 120, для INF-γ выше 250, развитие заболевания прогнозируют как гиперреактивное, прогноз неблагоприятный; при значении коэффициента реакции хотя бы для двух цитокинов ниже нижнего предела, а именно: для TNF-α и для IL-2 ниже 80, для INF-γ ниже 150, развитие заболевания прогнозируют как гипореактивное, прогноз благоприятный. Использование данного способа позволяет прогнозировать течение онкологических заболеваний путем оценки взаимосвязи между соотношением субпопуляций лимфоцитов и влиянием на течение опухолевого процесса цитокинов- TNF-α, IL-2 и INF-γ. 10 пр., 6 табл.

Изобретение относится к аналитической химии и представляет собой способ проведения иммунохроматографического анализа. Предложенный способ проведения иммунохроматографического анализа отличается тем, что при изготовлении тест-полоски используют прозрачную подложку. После контакта тест-полоски с пробой и завершения движения реагентов вдоль мембран на нитроцеллюлозную мембрану наносят вещество, растворяющее нитроцеллюлозу, но не нарушающее структуру подложки, например ацетонитрил. После высыхания растворителя на поверхности подложки образуется стекловидная прозрачная масса. Детекция на просвет оставшегося в зонах связывания маркера дает возможность его полной (100%-ной) регистрации при малом уровне неспецифического окрашивания вне зон связывания, что, в конечном итоге, повышает достоверность регистрации результатов анализа и позволяет выявлять наличие в пробах контролируемого соединения в более низких концентрациях. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Описаны антиген-связывающие фрагменты (Fab), селективно связывающиеся с ботулиническим нейротоксином С, в частности гуманизированные Fab. Представлены клетки дрожжей, продуцирующие указанные гуманизированные Fab. Предложен способ получения описанных гуманизированных Fab. Также предложены способ детекции ботулинического нейротоксина С и набор для детекции ботулинического нейротоксина С. Изобретение позволяет получить реагенты для детекции ботулинического нейротоксина С, обладающие высокой специфичностью связывания с указанным нейротоксином. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 12 ил., 6 табл., 9 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использован для выявления предраковых изменений в молочной железе. Для этого определяют концентрацию интерлейкина 8 (ИЛ-8) в супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА. После чего вычисляют индекс влияния (ИВ) раково-эмбрионального антигена (ИВ РЭА) на продукцию ИЛ-8 (ИВ РЭА ИЛ-8) по формуле: ИВ РЭА ИЛ-8=А/Б, где А - уровень продукции цитокина под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции цитокина. При величине ИВ РЭА ИЛ-8, не превышающей 14, выявляют предраковые изменений в молочной железе (склерозирующий аденоз или пролиферат молочной железы). Использование данного способа позволяет выявлять предраковые изменения в молочной железе, что позволяет своевременно начать адекватное лечение. 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных раком молочной железы. Сущность способа: определяют уровень экспрессии YKL-39 по технологии ТaqMan с помощью специфичных праймеров и пробы Sense 5’-aacaacaaggttatcatcaaggac-3’, AntiSense 5’-tttgggattcttggttttgag-3’, Probe FAM-5’-agtgaagtgatgctctaccagaccat-3’-BHQ1, далее проводят ПЦР-анализ экспрессии гена белка YKL-39, оценивают относительную экспрессию гена белка YKL-39 с помощью метода Pfaffl в условных единицах (УЕ) относительно гена рефери GAPDH, причем в качестве калибратора используют нормальную ткань молочной железы, в которой при проведении исследования аналогичным вышеописанному способом уровень экспрессии гена белка YKL-39 составляет 1 УЕ. При уровне экспрессии YKL-39 более 1 УЕ прогнозируют высокую, а при уровне экспрессии гена белка YKL-39 менее 1 УЕ - низкую вероятность длительного периода безметастатической выживаемости. 1 табл.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-04-07 2017-06-19T01:38:31
Наверх