Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров




Владельцы патента RU 2623145:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина" (RU)

Изобретение относится к биологической химии, а именно к биохимии животных, и может быть использовано для определения выраженности карбонильного стресса при послеродовом эндометрите у коров. Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров включает определение содержания карбонилированных белков, оценку показателей осуществляют по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса, который рассчитывают по формуле: Kc=СКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн, где СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера; СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, где Kc=1,5-1,9 свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров; Kc=2,0-3,4 свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров; Kc=3,5-4,5 свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров. Заявляемый способ прост и экономичен в осуществлении. Расчет коэффициента интенсивности карбонильного стресса позволяет выявить глубокие нарушения соотношений производных аминокислот нейтрального и основного характера, что повышает информативную ценность лабораторного исследования.

 

Изобретение относится к биологической химии, а именно к биохимии животных, и может быть использовано для определения выраженности карбонильного стресса при послеродовом эндометрите у коров.

Известен способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях, включающий определение количества карбонильных продуктов. Оценку степени окислительной модификации белков (ОМБ) в биологическом материале осуществляют при расчете площади под кривой спектра ОМБ, которая равна сумме площадей альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) нейтрального и основного характера:

-

где

-

-

[Патент №2524667 G01N 33/52, 27.07.2014].

Недостатком известного способа оценки является большой фактический материал, перегруженный числовыми значениями, что затрудняет оценку и анализ полученного материала.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является способ оценки показателей окислительной модификации белков молока крупного рогатого скота, включающий определение содержания карбонилированных белков по реакции взаимодействия окисленных остатков с 2,4-динитрофенилгидразином (2,4-ДНФГ) и образованием производных 2,4-динитрофенилгидразона. Оптическую плотность образовавшихся динитрофенилгидразонов регистрировали спектрофотометрически при следующих длинах волн: 274, 356, 370, 430 и 530 нм. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0 [Высокогорский В.Е. Сравнительная оценка показателей окислительной модификации белков молока крупного рогатого скота различных эколого-географических зон Омской области / В.Е. Высокогорский, Ю.А. Подольникова, О.Н. Лазарева // Фундаментальные исследования. - 2014. - №12, ч. 4. - С. 760-761].

Недостатком данного способа является высокая трудоемкость оценки.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является снижение трудоемкости оценки.

Технический результат достигается тем, что способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров, включающий определение содержания карбонилированных белков, оценку показателей осуществляют по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса, который рассчитывают по формуле:

Kc=СКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн, где

Kc - коэффициент интенсивности карбонильного стресса;

СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера е.о.п./мл;

СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера е.о.п./мл;

причем Kc=1,5-1,9 свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров;

Kc=2,0-3,4 свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров;

Kc=3,5-4,5 свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Определение оценки показателей окислительной модификации белков молока коров по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса снижает трудоемкость оценки показателей за счет определения меньшего количества показателей.

При остром и хроническом эндометрите увеличивается содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального и основного характера. Однако при остром эндометрите возрастает количество кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, при хроническом эндометрите значительно увеличивается содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера. Вышеуказанные изменения влияют на коэффициент интенсивности карбонильного стресса, что позволяет быстро оценить степень окислительной модификации белков молока коров, т.е. снижает трудоемкость при оценке показателей окислительной модификации белков.

Исследовали 3 группы коров по 25 в каждой группе. Первая группа - коровы с острым послеродовым эндометритом; вторая группа - коровы клинически здоровые животные; третья группа - коровы с хроническим послеродовым эндометритом.

В основе способа определения продуктов окислительной модификации белков лежит метод R.L. Levine в модификации Е.Е. Дубининой. Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров осуществляют следующим образом.

Берут пробы молока у каждой коровы от всех трех групп коров и исследуют следующим образом. Исследуемое молоко от коров первой группы (с острым послеродовым эндометритом) в количестве 0,2 мл вносят в пробирку и разводят добавлением 0,6 мл дистиллированной воды. Затем в 2 другие пробирки вносят по 0,2 мл разведенного молока и добавляют 1,8 мл 20% ТХУ кислоты. В одну из пробирок - опытную, добавляют 2 мл 0,1 М 2,4-ДНФГ, растворенного в 2 М растворе HCl, а в другую - контрольную - 2 мл 2М HCl без 2,4-ДНФГ. Осуществляют инкубацию при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем пробы обеих пробирок центрифугируют 10 мин со скоростью 3000 об/мин.

Надосадочную жидкость сливают, осадок трижды промывают смесью этанол-этилацетат (1:1) для экстракции липидов и остатка 2,4-ДНФГ, который не прореагировал с карбонильными группами окисленных белков. Отмытый осадок подсушивают с целью удаления остатков этанол-этилацетата. К подсушенному осадку добавляют по 5 мл 8М мочевины и выдерживают 5 мин в кипящей бане до полного растворения осадка.

Производят замер оптической плотности опытной пробы против контрольной пробы при длинах волн: 370, 530 нм в кварцевых кюветах с толщиной оптического слоя 1 см. Определяют СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера, е.о.п.; СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, е.о.п.

Рассчитывают коэффициент интенсивности карбонильного стресса по формуле:

Kc=СКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн, где

Kc - коэффициент интенсивности карбонильного стресса;

СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера, е.о.п./мл;

СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, е.о.п./мл.

Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров первой группы оказался в диапазоне 1,5-1,9, что свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Пробы молока от коров второй группы (клинически здоровые коровы) исследуют аналогично пробам молока первой группы коров. Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров второй группы оказался в диапазоне 2,0-3,4, что свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров.

Пробы молока от коров третьей группы (с хроническим послеродовым эндометритом) исследуют аналогично пробам молока первой группы коров. Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров из второй группы оказался в диапазоне 3,5-4,5, что свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Предлагаемый способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров обеспечивает сокращение трудоемкости оценки за счет необходимости для расчета коэффициента интенсивности карбонильного стресса определять меньшее количество показателей. Трудоемкость проведения оценки предлагаемым способом снижается на 60%.

Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров апробирован в лаборатории кафедры продуктов питания и пищевой биотехнологии ФГБОУ ВО Омский ГАУ.

Заявляемый способ прост и экономичен в осуществлении. Расчет коэффициента интенсивности карбонильного стресса позволяет выявить глубокие нарушения соотношений производных аминокислот нейтрального и основного характера, что повышает информативную ценность лабораторного исследования.

Заявляемый способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров может быть использован в ветеринарной лабораторной диагностике для определения стадии развития карбонильного стресса при послеродовом эндометрите и коррекции лечения и рациона питания коров.

Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров, включающий определение содержания карбонилированных белков, отличающийся тем, что оценку показателей осуществляют по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса, который рассчитывают по формуле:

Кс=СКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн,

где Кс - коэффициент интенсивности карбонильного стресса;

СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера, в единицах оптической плотности/мл;

СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, в единицах оптической плотности/мл;

причем Кс=1,5-1,9 свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров;

Кс=2,0-3,4 свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров;

Кс=3,5-4,5 свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к измерительной технике и может найти применение в процессах определения эффективного потенциала ионизации и эффективного сродства к электрону многокомпонентных ароматических конденсированных сред (органические полупроводники на основе ароматических углеводородов и смесей, нефтяные смолы, смолы пиролиза, каменноугольные смолы, высококипящие нефтяные фракции, легкие и тяжелые газойли коксования, каталитического крекинга деасфальтизаты, экстракты селективной очистки масляных фракций, асфальтосмолистые вещества, битуминозные материалы, кубовые остатки процессов нефтехимпереработки).

Изобретение относится к конструкции электрохимических ячеек для исследований электрохимических систем методами in situ спектроскопии и микроскопии. Герметичная электрохимическая ячейка состоит из содержащего сквозную полость для размещения электролита корпуса, рабочего электрода, по крайней мере одного вспомогательного электрода и пластины, выполненной с возможностью герметичного закрепления со стороны нижнего торца корпуса.

Изобретение относится к области измерительной техники. Кювета для оптических микрорезонаторов с модами типа шепчущей галереи содержит корпус с отверстием в верхнем торце, выполненный с возможностью заполнения исследуемой средой и снабженный боковыми окнами для ввода и вывода излучения.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ идентификации микроводорослей.

Изобретение относится к устройствам измерения оптической плотности газовой среды. Способ включает наличие нескольких, связанных с опорным каналом, измерительных каналов, расположенных в пространстве на равном расстоянии от общего центра, выделение амплитуд разностных между измерительными каналами сигналов, сравнение максимальной из таких амплитуд со значением сигнала в опорном канале и при превышении порога по результатам сравнения формирование результатов измерения оптической плотности среды для установления факта наличия дыма.

Изобретение относится к области экологии и может быть использовано для измерения концентрации парниковых газов в атмосфере. Сущность: система содержит тракт дистанционных измерений и тракт экспресс-анализа газовых компонент в предельном слое атмосферы.

Изобретение относится к измерительной технике, в частности к оптическим методам измерения концентрации дисперсных частиц, взвешенных в жидкости. Способ оптического измерения счетной концентрации частиц в жидких средах включает измерение среднего гидродинамического диаметра частиц методом динамического рассеяния света, расчет по измеренному значению эффективности экстинкции частиц, измерение оптической плотности на одной из длин волн видимого диапазона и расчет по полученным данным счетной концентрации частиц.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения продуктов химического гидролиза дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Способ определения продуктов химического гидролиза дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) включает хроматографическое определение продуктов гидролиза.

Изобретение относится к области геологии и может быть использовано при поиске скоплений углеводородов. Предложен способ обнаружения углеводородов с использованием подводного аппарата, снабженного одним или несколькими измерительными компонентами.

Изобретение относится к цифровой фотографии для медицинских целей, в частности, такой как биологическая ткань, в ближней инфракрасной области спектра. Технический результат заключается в повышении контрастной чувствительности и отношения сигнал/шум видеосистемы для наблюдения малоконтрастных объектов, находящихся в мутной среде, упрощении устройства для формирования телевизионного изображения в мутных средах с преобладающим над поглощением рассеянием.

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для определения интегральной антиоксидантной активности (АОА) растительного сырья и продуктов питания на его основе. Способ включает взаимодействие реагента, иммобилизованного в оптическую полиметакрилатную мембрану, с аналитом, последующее ее отделение от раствора и оценку величины антиоксидантной активности. В качестве реагента применяют индикаторную систему медь(II) – неокупроин, иммобилизованную в полиметакрилатную матрицу, аналитический сигнал представляют в виде светопоглощения при 450 нм, или визуальной оценки интенсивности окраски оптической мембраны, количественную и/или качественную оценку интегральной антиоксидантной активности проводят по градуировочному графику и/или цветовой шкале, построенным для аскорбиновой кислоты, используемой в качестве вещества-стандарта. 2 ил., 7 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области физики, в частности к аналитическому приборостроению и может быть использовано в газоанализаторах, применяемых на установках извлечения серы. Cпособ оптического определения компонента, преимущественно сероводорода, и его концентрации в потоке газа включает облучение пробы исследуемого газа с использованием лазерного излучения с различными длинами волн, при котором производят сложение люминесцентного излучения в УФ или видимом диапазоне с лазерным излучением в ближнем ИК диапазоне для достижения порога интенсивности, при котором возникает эффект вынужденного рассеивания Мандельштама-Бриллюэна с образованием стоксовых составляющих. Далее регистрируют спектральное распределение интенсивности прошедшего через пробу излучения, определяют превышение полученного сигнала над пороговым уровнем шума и сравнивают абсолютные значения полученных пиков и главного максимума, соответствующего лазерному излучению. При этом пробу исследуемого газа облучают в камере газоанализатора, заполненной водой, температуру которой поддерживают в диапазоне 80-85°С. Присутствие компонента идентифицируют по частоте максимума излучения, полученного в результате вынужденного рассеивания Мандельштама-Бриллюэна, а его концентрацию определяют как логарифм интенсивности стоксовой составляющей. Газоанализатор размещают непосредственно в зоне движения потока газа, а в качестве источника лазерного облучения используют по меньшей мере один твердотельный лазер с полупроводниковой накачкой, встроенный в камеру газоанализатора. Длину волны лазерного излучения в УФ и видимом диапазоне выбирают в пределах 200-530 нм, а в ближнем ИК диапазоне - 810-1200 нм. Технический результат - возможность определения компонента, преимущественно сероводорода, и его концентрации в потоке газа с высокой точностью, а также непрерывный мониторинг процесса. 3 з.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к устройству для качественной и/или количественной регистрации частиц в жидкости. Устройство для качественной и/или количественной регистрации частиц в жидкости содержит источник (1) света, оптический датчик (2) и размещенный между ними держатель (4) пробы для приема исследуемой жидкости. При этом держатель (4) пробы является подвижным относительно по меньшей мере датчика (2) и выполнен с возможностью соединения через впускное отверстие (9) для жидкости с линией (11) для подвода жидкости и через выпускное отверстие (10) для жидкости - с линией (12) для отвода жидкости. Причем держатель (4) пробы расположен с возможностью замены в приемном приспособлении (5) устройства и между проводными подключениями (9, 10) в держателе (4) пробы образован закрытый канал (37), который по меньшей мере на отдельных участках на двух противолежащих сторонах имеет прозрачную стенку (30, 31). В устройстве предусмотрен фиксатор (25), с помощью которого держатель (4) пробы в своем предписанном положении выполнен с возможностью фиксации с геометрическим замыканием в приемном приспособлении (5). Техническим результатом является обеспечение возможности быстрой и простой смены держателя при загрязнении 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к аналитическим измерениям. Способ классификации образца в одном из классов осуществляется на основании спектральных данных, причем спектральные данные содержат спектр комбинационного рассеяния, ближний инфракрасный спектр, ИК-Фурье спектр, масс-спектр MALDI или времяпролетный масс-спектр MALDI. Способ содержит этапы, на которых: a) получают по меньшей мере два множества первых спектров для использования в качестве эталонных спектров, причем каждое множество содержит спектры эталонных образцов, принадлежащие одному и тому же классу; b) определяют, для каждого из эталонных спектров, значение одной и той же по меньшей мере одной величины, связанной со спектральным признаком посредством применения предварительно определенной функции или операции к каждому эталонному спектру; c) для каждого набора эталонных спектров строят функцию плотности вероятности (PDF) значения упомянутой по меньше мере одной величины посредством связывания вероятности с разными значениями величины на основании значений, определенных на этапе b); d) получают спектр из образца и определяют значение одной и той же величины этого спектра; e) вычисляют, на основании множества PDF, определенных на этапе с) и значения величины для полученного спектра для каждого из упомянутых классов, вероятность того, что образец принадлежит этому классу, причем эталонные спектры и спектр, полученный из образца, являются спектрами одиночных частиц. Технический результат заключается в обеспечении возможности повышения эффективности и надежности классификации образца. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 13 ил.

Изобретение относится к устройствам виброакустического мониторинга внешних воздействий на трубопровод. Заявленное волоконно-оптическое устройство мониторинга трубопроводов содержит два объединенных в одну систему независимых рефлектометра, каждый из которых подключен к разным оптическим волокнам волоконно-оптической линии, при этом рефлектометр содержит лазерный источник непрерывного излучения, соединенный с модулятором интенсивности оптического излучения, циркулятор, один из выходов которого соединен с волоконно-оптической линией, первый и второй эрбиевые усилители, формирователь прямоугольных электрических импульсов, фотоприемник, выполненный в виде балансного детектора с дифференциальным усилителем, волоконно-оптический интерферометр Маха-Цендера, причем рефлектометр содержит фазовый модулятор, генератор тактовых импульсов, генератор прямоугольных электрических импульсов, при этом вход управления модулятора интенсивности оптического излучения соединен с выходом генератора прямоугольных электрических импульсов, который соединен с генератором тактовых импульсов, также модулятор интенсивности оптического излучения соединен с волоконно-оптическим интерферометром Маха-Цендера, имеющим разность плеч ΔL=Vg⋅Δt, где Vg - групповая скорость излучения в оптическом волокне, Δt - время задержки волоконно-оптического интерферометра Маха-Цендера, при этом волоконно-оптический интерферометр Маха-Цендера соединен с первым эрбиевым усилителем, на одном из плеч волоконно-оптического интерферометра Маха-Цендера установлен фазовый модулятор, причем вход фазового модулятора соединен с выходом формирователя прямоугольных электрических импульсов, соединенного с генератором тактовых импульсов, выход первого эрбиевого усилителя соединен с входом циркулятора, второй выход которого соединен со вторым эрбиевым усилителем, при этом второй эрбиевый усилитель также соединен с фотоприемником, выход которого соединен с входом устройства обработки сигнала. Технический результат заключается в уменьшении вероятности замирания сигнала рефлектометра, при этом не ухудшая пространственного разрешения. 2 ил.

Группа изобретений относится к области детектирования молекулы-мишени в образце. Устройство для детектирования молекулы-мишени в образце содержит контейнер для образцов для количественного определения молекулы-мишени в образце; по меньшей мере одну первую частицу, функционализированную первой связывающей молекулой, способной к специфическому связыванию с молекулой-мишенью; поверхностную структуру, содержащую вторую связывающую молекулу, где поверхностная структура покрывает плоскую поверхность или присутствует на по меньшей мере одной второй частице. При этом первая частица, образовавшая захватывающий комплекс с молекулой-мишенью, способна к связыванию второй связывающей молекулы поверхностной структуры напрямую или ненапрямую; где каждая первая и/или вторая связывающая молекула присоединена к поверхности частицы одной из первой и/или второй частиц и/или плоской поверхности посредством длинной и жесткой линкерной молекулы; где длина линкерной молекулы выбрана так, чтобы в результате была получена средняя протяженность удлинения линкера более 60 нм; и где количество кластеров первых и/или вторых частиц, связанных друг с другом, или связанных первых и/или вторых частиц прямо или обратно пропорционально соотносится с количеством молекул-мишеней, представленных в образце. Также раскрывается способ детектирования наличия или количества молекулы-мишени в образце. Группа изобретений обеспечивает повышение вероятности связывания функционализированной частицы, связавшей молекулу-мишень, с поверхностью. 2 н. и 22 з.п. ф-лы, 13 ил., 2 пр.

Изобретение относится к обнаружению текучей среды в теле человека, в частности к обнаружению гидравлической текучей среды и жидкого топлива внутри тела человека. Способ обнаружения проникновения текучей среды в пациента включает этапы обеспечения емкости для хранения текучей среды, обеспечения текучей среды для использования в машинном оборудовании и ее добавления в указанную емкость; и обеспечения флуоресцентного красителя и его добавления в текучую среду с обеспечением флуоресценции текучей среды в присутствии голубого или ультрафиолетового света. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 10 ил.

Изобретение относится к способу определения типа пробы пластового флюида. Техническим результатом является повышение точности определения характеристик пластовых флюидов. Способ включает измерение поглощательной способности пробы пластового флюида на множестве длин волны электромагнитного излучения с помощью спектрометра и определение различия между множественными типами флюидов для идентификации типа пробы флюида, который более всего соответствует реальному типу пробы флюида на основании измерения поглощательной способности на двух или нескольких длинах волны из множества длин волны, причем определение различия между множественными типами флюида включает сопоставление измеренной поглощательной способности на первой длине волны из двух или нескольких длин волны с измеренной поглощательной способностью на второй длине волны из двух или нескольких длин волны, вычисление показателя поглощательной способности на основании измеренной поглощательной способности на первой длине волны и измеренной поглощательной способности на второй длине волны и использование вычисленного показателя поглощательной способности для определения различия между множественными типами флюида, сопоставление вычисленного показателя поглощательной способности с набором контрольных данных по вычисленным показателям поглощательной способности для разных типов пластовых флюидов с целью идентифицировать наиболее вероятный тип пробы флюида. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 13 ил., 1 табл.

Изобретение относится к измерительной технике и касается дистанционного способа обнаружения участков растительности в стрессовом состоянии путем лазерного возбуждения флуоресценции хлорофилла растения и регистрации интенсивности флуоресценции. Для зондирования растительности используют каналы регистрации в спектральных диапазонах 680, 690, 735 и 740 нм. Об обнаружении участков растительности в стрессовом состоянии судят по выполнению соотношений:R685/740>N1 или/и R690/735>N2 - растение в стрессовом состоянии, - растение в нормальном состоянии,где: , I(685 нм), I(740 нм), I(690 нм), I(690 нм) - интенсивности флуоресценции на соответствующих длинах волн. N1, N2 - пороговые значения, зависящие от вида растения и причины стрессового состояния.Технический результат заключается в повышении надежности обнаружения стрессового состояния растений. 4 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к эндокринологии и онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики новообразований в щитовидной железе. Проводят ультразвуковое исследование объемных новообразований в щитовидной железе и после этого – пульсооптометрию с оценкой показателей кровотока посредством определения амплитуды пульсовых осцилляций и оптической плотности. При значениях оптической плотности 40 и более и амплитуды пульсовых осцилляций 43 мм и менее судят о доброкачественных новообразованиях. При значениях оптической плотности 19 и менее и амплитуды пульсовых осцилляций 44 мм и более судят о злокачественных новообразованиях в щитовидной железе. Способ обеспечивает повышение точности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований в щитовидной железе за счет исследования их оптической плотности. 2 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-05-11 2017-06-29T11:35:20
Наверх