Способ оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях при анализе цифровых изображений иммуногистохимических микропрепаратов в программе adobe® photoshop®

Авторы патента:

A61B5/107 - измерение физических размеров, например размеров тела в целом или его частей

Владельцы патента RU 2626145:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской федерации (ГБОУ ВПО ОрГМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к морфологии и иммуногистохимии. Для сравнительной оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях на разных сроках репаративного процесса осуществляют фотографирование иммуногистохимических препаратов. Цифровую микрофотографию загружают в программу Adobe Photoshop Extended версий CS3-CS6. Содержание белков межклеточного матрикса программно определяют при помощи использования интегрированных модулей "Цветовой диапазон" и "Журнал измерений". Автоматически выделяют и вычисляют в цифровых изображениях площади участков структур, содержащих исследуемые белки. Вычисляют относительное содержание белков в тканях по формуле ООП (%)=(Sa/St)х100, где ООП - относительная объемная плотность, Sa - суммарная площадь всех выделенных областей в анализируемом изображении, St - общая площадь цифрового изображения. Способ позволяет повысить точность сравнительной оценки и получить объективные данные по содержанию белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях за счет автоматизации процесса оценки. 1 пр., 5 ил.

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к морфологии и иммуногистохимии, и может быть использовано для сравнительной оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях на разных сроках репаративного процесса.

Предлагаемый способ основан на принципах и методах системной морфометрии и стереологии, наиболее близкими из которых являются способы определения объемной плотности тканевых микроструктур (V_Vi):

- Метод наложения точечных сеток (метод «полей» А.А. Глаголева) на срезы с последующим подсчетом числа совпадений точек с профилями исследуемых структур, а доля точек, попавших на структурные профиля (P_Pi), оценивает их относительный объем: V_Vi=P_Pi=P_Pi/P_T, где Р_T - общее число точек тестовой системы [1].

- Метод суммирования линий сканирования, заключенных между границами профилей структуры (L_Li), и последующего отнесения полученного значения к общей суммарной длине тестовой линии (L_T): V_Vi=L_Li=L_Li/L_T(1).

Недостатками вышеперечисленных способов является наличие многочисленных, зачастую трудновыполнимых условий для получения объективных данных: необходимость многократных измерений, трудоемкость применения окулярной точечной сетки, окулярной тестовой линии сканирования или аналогичных измерительных сеток и линий, но адаптированных для микрофотографий, «ручной» подсчет элементов, большие затраты времени, большая погрешность измерений из-за размытости границ гистохимической окраски структур и субъективной оценки свето- и цветовосприятия, что в совокупности усложняет использование этого метода для решения крупных научных задач.

Из уровня техники известен способ оценки участия остеоцитов в минерализации костного матрикса (патент на изобретение RU 2466408 С1, опубл. 10.11.2012. Бюл. №31) основан на подсчете числа лакун, содержащих аморфные минералы с последующим определением их процентного содержания в анализируемом остеоне, и, если минералы в аморфной фазе обнаруживаются менее чем в 30% лакун, минерализационную активность остеоцитов оценивают как низкую, при наличии аморфных минералов в 30-80% лакун - как среднюю, а если более 80% лакун содержат минералы в аморфной фазе - как высокую. Однако данный способ не предназначен для количественной оценки белков межклеточного матрикса, а позволяет оценить совершенно другой параметр - содержание минералов в аморфной фазе костного матрикса с вычислением отличных от предлагаемых количественных характеристик - подсчитывают число лакун, содержащих аморфные минералы. При этом в программе - графическом редакторе (например, Adobe PhotoShop 3.0) используют совершенно другие инструменты и методику: в полученном цифровом изображении гистологического препарата выделяют контуром один остеон, внутри контура маркируют (например, цифрами) все лакуны остеоцитов и визуализируют минералы в аморфной фазе, осуществляя цветовую сегментацию изображения так, чтобы в нем осталась только одна цветовая тональность, описываемая неравенством IB>IR>IG, где IB - значение интенсивности по синему, IR - по красному и IG - по зеленому каналам RGB - системы цифрового цвета. Также в ходе изготовления гистологического препарата используется неспецифическая окраска трихромным методом по Массону (пропись с анилиновым синим), что в совокупности с вышеперечисленным делает данный способ совершенно не пригодным для количественной оценки белков межклеточного матрикса.

Задача изобретения - расширение арсенала способов, автоматизация, объективизация и повышение точности сравнительной оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях.

Указанная задача решается путем изготовления гистологического среза исследуемой ткани с последующим иммуногистохимическим окрашиванием для специфического выявления соответствующего белка, проведения микрофотографирования, полученного иммуногистохимического микропрепарата на цифровом светооптическом микроскопе (или цифровой окулярной насадки-фотокамеры на светооптическом микроскопе) и использования компьютерной программы Adobe Photoshop в обработке цифрового изображения.

Новизной является то, что для сравнительной оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях применяется анализ цифровых микрофотографий иммуногистохимических препаратов при помощи программы Adobe Photoshop Extended версий CS3-CS6 с использованием уже интегрированных в программу модулей "Цветовой диапазон" и "Журнал измерений", но с адаптацией под специфическую окраску хромогенами иммуногистохимических препаратов при специфическом выявлении определенных белков в ходе иммуногистохимического исследования по разработанной методике программного анализа в Adobe Photoshop.

Раскрытие изобретения.

Предлагаемый способ заключается в том, что используют цифровую микрофотографию иммуногистохимического препарата, а содержания белков межклеточного матрикса программно определяют при помощи Adobe Photoshop Extended версий CS3-CS6 с использованием интегрированных модулей "Цветовой диапазон" и "Журнал измерений", по разработанной методике программного анализа, что позволяет автоматически выделять и вычислять в цифровых изображениях площади участков структур, содержащих исследуемые белки с последующим объективным и точным вычислением их относительного содержания в тканях по формуле ООП (%)=(S_a/S_t)×100, где ООП - относительная объемная плотность, S_a - суммарная площадь всех выделенных областей в анализируемом изображении, S_t - общая площадь цифрового изображения.

Объясняя выше предложенную формулу ООП(%)=(S_a/S_t)×100, необходимо пояснить, что определение относительного объема какой-либо структуры (V_Vi), т.е. совокупного объема этой структуры (V_i) в единице объема (тестовом объеме) ткани (V_т), основано на принципе Делессе: V_Vi=A_Ai, где A_Ai - площадь, занимаемая структурой i на площади среза [3], что позволяет от двумерных величин (площадей) перейти к объемным отношениям, что и использовано при вычислении относительной объемной плотности (ООП) в результате математических действий с площадью (S_a и S_t). Относительный объем какой-либо структуры (V_Vi), равно как и площадь, занимаемую структурой i на площади среза в исследуемой ткани (A_Ai), при выполнении стереометрического анализа гистологических и цитологических препаратов рекомендуется называть объемной плотностью структуры [1], что и взято за основу номенклатурного позиционирования, вычисляемой в предложенном методе, количественной характеристике относительной объемной плотности (ООП) белков межклеточного матрикса.

Изобретение иллюстрируется чертежами с подробным описанием и примером его практического использования.

Фиг. 1 - ООП остеокальцина в периостальной мозоли.

Фиг. 2 - ООП остеокальцина в эндостальной мозоли.

Фиг. 3 - ООП коллагена II типа в периостальной мозоли.

Фиг. 4 - ООП коллагена II типа в эндостальной мозоли.

Фиг. 5. - А) Контрольная группа, периостальная зона перелома, иммуногистохимическая реакция на выявление экспрессии коллагена I типа (коричневого цвета), об. ув. x 600.

Б) Опытная группа, периостальная зона перелома, иммуногистохимическая реакция на выявление экспрессии коллагена I типа (коричневого цвета), об. ув. x 600.

Описание способа

Цифровой фотоснимок загружают в программу Adobe Photoshop CS6 Extended (подходят и более ранние CS3, CS4, CS5 версии программы) и в левой колонке панели инструментов выбирают инструмент "Волшебная палочка", после чего правой кнопкой мышки кликают на окне загруженного изображения и в раскрывающемся контекстном меню выбирают "Цветовой диапазон" – инструмент, обеспечивающий выбор области в изображении по тональности или цвету. Также существует второй способ активации этого инструмента, для чего необходимо кликнуть по вкладке главного меню "Выделение", и в открывшемся меню выбрать соответствующую строку: "Цветовой диапазон". После клика по строке откроется диалоговое окно инструмента и автоматически активируется дополнительный инструмент "Пипетка", преобразующий курсор мышки в цветочувствительный маркер, с помощью которого в области цифровой микрофотографии выбираем участок нужного цвета и тональности, соответствующий цвету и тональности преципитирующего специфического хромогена соответстующей системы детекции, применяемой в ходе иммуногистохимического окрашивания гистологического препарата. После выбора "Пипеткой" нужного цвета на всей площади цифровой микрофотографии автоматически произойдет выделение областей подобного цвета и тональности. Далее границы выделенных областей расширяют или сокращают в зависимости от избыточности или недостаточности включения в области выделения пикселей тех оттенков и тональностей цвета, что соответствуют цвету шаблона используемой системы детекции. Для этого в правой стороне диалогового окна "Цветовой диапазон" выбирают пипетку со знаком «+» -инструмент добавления к границам выделенной области дополнительных пикселей нужных оттенков необходимого цвета, и пипетка со знаком «-», которая при клике мышкой на соответствующие пиксели в цифровом изображении вычитает их из всей области выделения, сокращая ее границы. В диалоговом окне "Цветового диапазона" имеется опция "Разброс" для установки приемлемого диапазона яркости выделяемых пикселей, от настройки параметров которой также будут зависеть границы выделяемой области. Чем выше установить значение "Разброса", тем больше уровней яркости включается в пределы допуска. По умолчанию "Разброс" имеет значение 40, это значит, что будут выбраны все пиксели изображения, имеющие точно такой же цвет, как и тот участок (образец), по которому кликнули пипеткой, а также все пиксели, которые имеют яркость в пределах 40 единиц светлее или темнее образца. Любые пиксели, яркость которых на 41-н и более уровней светлее или темнее, не будут включены в выделение. После необходимой коррекции по яркости включаемых в область выделения пикселей формируются окончательные, уточненные путем настройки вышеописанных параметров границы выделенных областей цифровой микрофотографии, суммарная относительная площадь которой и будет соответствовать относительной объемной плотности белков межклеточного матрикса, проявивших себя в цифровом изображении окраской, соответствующей цвету специфического хромогена (например, хромоген DAB образует темно-коричневые преципитаты). Для того чтобы при анализе следующего цифрового изображения гистологических препаратов той же ткани, окрашенной теми же иммуногистохимическими реактивами, не повторять коррекцию границ областей выделения и нивилировать субъективность (а значит и возможные ошибки) при каждой такой коррекции, необходимо сохранить шаблон настроенных параметров инструмента уже откорректированных границ. Для этого в интерфейсе диалогового окна "Цветового диапазона" при завершении настройки всех необходимых параметров этого инструмента при первой загрузке цифровой микрофотографии исследуемого иммуногистогимического препарата или шаблона, используемой системы детекции, кликают на опцию "Сохранить", после чего, во вновь открывшемся диалоговом окне, сохраняют сформированный шаблон в файл с расширением «.АХТ». Теперь при анализе следующего цифрового изображения гистологических препаратов той же ткани, окрашенной теми же иммуногистохимическими реактивами, вместо настройки каждого параметра "Цветового диапазона" в диалоговом окне данного инструмента кликают на опцию "Загрузить" и в открывшемся диалоговом окне выбирают сохраненный ранее шаблон со всеми необходимыми настройками, после чего автоматически произойдет выделение областей цифровой микрофотографии с уже откорректированными границами согласно преднастроенному шаблону, что значительно сократит время исследования и исключит субъективность оценки.

Далее для точного определения относительной объемной плотности (ООП) изучаемых белков межклеточного матрикса нужно рассчитать отношение суммарной площади выделенных областей в изображении к общей площади цифровой микрофотографии. Для этого кликают по вкладке главного меню "Окно" и в открывшемся меню выбирают строку: "Журнал измерений" (строка имеется в наличии только в Extended версии программы Photoshop). Далее в левой верхней части открывшегося диалогового окна инструмента "Журнал измерений" кликают на опцию "Записать измерения", после чего автоматически сформируется таблица с различными рассчитанными параметрами выделенных областей изображения. Числовое значение первой строки "Измерение 1" в столбце "Площадь" будет соответствовать суммарной площади всех выделенных областей в анализируемом изображении (S_a). Общая площадь цифрового изображения (S_t) зависит от разрешения микрофотографии и соответствует произведению значений первой строки "Измерение 1" в столбцах "Высота" и "Ширина" таблицы инструмента "Журнал измерений". Значение S_t будет всегда одинаковым при условии одинакового разрешения для всех анализируемых цифровых изображений, что значительно упрощает вычисление ООП по следующей формуле ООП (%)=(S_a/S_t)×100. Единицей измерения по умолчанию является пиксел.

Пример конкретного использования

Экспериментальное исследование проведено на 70 половозрелых крысах самцах линии «Вистар». Все исследования на животных были выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приказ Минвуза СССР от 13.11.1984 г. №724). Животным под ингаляционным наркозом формировали открытый поперечный перелом средней трети диафиза левой большеберцовой кости. В опытной группе (ОГ) животным в область перелома на 1 и 2 сутки эксперимента вводили по 0,5 мл препарата «Винфар» [4], в контрольной группе (КГ) - 0,5 мл физ. раствора. Осуществлена естественная иммобилизация посредством сохранившей целостность малоберцовой кости. Животных выводили из опыта на 3, 14, 21, 28, 44 и 61 сутки. Исследования проводили с использованием гистологических, иммуногистохимических методов и морфометрии. Гистологическое исследование включало окраску гематоксилином Майера и эозином. При проведении иммуногистохимических методов исследования для выявления экспрессии Osteocalcin (маркер созревания костной ткани), collagen II (маркер хондрогенеза) и collagen I (в исследовании - маркер остеогенеза) использовались соответственно антитела anti-Osteocalcine («SPRING Bioscience)), США), anti-Collagene II Type и anti-Collagene I Type («GeneTex», США). Используемая система детекции - Reveal Polyvalent HRP - DAB Detection System («SPRING Bioscience)), США). Подсчет площади остеокальцина и коллагеновых волокон производился при помощи программы Adobe Photoshop CS6 Extended в относительных значениях (относительная объемная плотность - ООП вычислялась по вышеописанной методике), в пределах исследуемого гистосреза на 1 цифровой микрофотографии (равной 1 полю зрения) при увеличении x300 минимум в 5 полях зрения (микрофотографий) для каждого показателя. При проведении статистической обработки результатов вычисляли средние значения абсолютных и относительных величин (М), ошибки средних величин (m) и t-критерий Стьюдента. Различия считали достоверно значимыми при уровне вероятности p<0,05.

На 3 сутки у животных контрольной группы (КГ) в периостальной зоне перелома синтез остеокальцина незначителен и составляет 0,218±0,009%, тогда как в опытной группе (ОГ) ООП остеокальцина в 2 раза выше - 0,423±0,013% (см. Фиг. 1). Экспрессия коллагена I типа в ОГ (ООП 9,40±0,62%) больше таковой группы контроля (ООП 3,92±0,31%) почти в 3 раза. У животных контрольной группы ООП коллагена II типа составляет 4,77±0,11%, что незначительно превышает данный показатель в ОГ (ООП коллагена II типа 4,03±0,08%). В эндостальной костной мозоли на 3 сутки эксперимента содержание остеокальцина в ОГ вдвое больше КГ и незначительно превышает аналогичные показатели периостальной зоны (ООП остеокальцина КГ 0,293±0,011% и ООП остеокальцина КГ 0,579±0,013%) (см. Фиг. 2). ООП коллагена I типа в эндостальной мозоли в обеих группах троекратно, а ООП коллагена II типа - четырехкратно меньше, чем в периостальной мозоли (см. Фиг. 3 и 4).

На 21 сутки у животных КГ в периостальной зоне перелома ООП экспрессия коллагена I типа в ОГ (ООП 20,7±1,01%) на этом сроке возрастает и, по-прежнему, больше таковой группы контроля (ООП 11,25±1,12%). У животных контрольной группы ООП коллагена II типа составляет 19,16±0,98%, в ОГ ООП коллагена II типа - 12,55±0,52%, т.е. происходит двукратное увеличение экспрессии коллагена II по сравнению с 14 сутками. В эндостальной костной мозоли на 21 сутки эксперимента содержание остеокальцина в КГ (ООП 0,747±0,008%) незначительно превышает ОГ (ООП 0,621±0,013%), ООП остеокальцина которой меньше значений предыдущего срока, что означает более раннее (по сравнению с КГ) начало редукции эндостальной мозоли.

На 44 сутки у животных КГ в периостальной зоне перелома ООП остеокальцина составляет 1,156±0,034%, а в ОГ ООП остеокальцина уже на данном сроке достигает значений (ООП 1,582±0,026%), близких с ООП нормальной (около 1,6%) костной ткани [2]. Экспрессия коллагена I типа в ОГ (ООП 42,43±2,21%) на этом сроке возрастает на четверть и, по-прежнему, двукратно больше таковой группы контроля (ООП 21,23±1,94%), что визуально проявляется в большей интенсивности окраски иммуногистохимических препаратов опытной группы (см. Фиг. 5А и Б). У животных контрольной группы ООП коллагена II типа составляет 9,35±0,97%, в ОГ ООП коллагена II типа - 4,33±0,82%, т.е. происходит уменьшение экспрессии коллагена II в обеих группах по сравнению с предыдущим сроком, из-за остеогенной реорганизацией периостальной мозоли, что также подтверждается увеличением ООП коллагена I типа, см. выше. В эндостальной костной мозоли на 44 сутки эксперимента содержание остеокальцина продолжает уменьшаться в обеих группах животных, и, по-прежнему, в КГ ООП (0,460±0,017%) двукратно превышает ООП остеокальцина ОГ (0,242±0,028%) из-за более выраженной редукции эндостальной мозоли в ОГ по сравнению с контролем. ООП коллагена I типа эндостальной мозоли в КГ все еще увеличивается - 12,2±0,49%, тогда как в ОГ уменьшается - 8,75±0,53%, подтверждая развитие эндостальной мозоли в КГ и продолжение процесса ее редукции в ОГ на данном сроке эксперимента. ООП коллагена II типа КГ - 6,04±0,12%, в ОГ - 2,97±0,47%.

На 61 сутки экспрессия коллагена I типа в ОГ (ООП 69,25±2,23%) на этом сроке возрастает более чем на треть и на треть больше таковой группы контроля (ООП 46,09±1,74%), на данном сроке достигая значений, близких с ООП коллагена I нормальной (около 70,0%) костной ткани [2]. ООП коллагена I типа эндостальной мозоли в КГ начинает уменьшаться только на 61 сутки - 8,87±0,05%, подтверждая только начавшийся процесс редукции эндостальной мозоли, тогда как в ОГ ООП коллагена I типа составляет 8,01±0,02%, достигая значений, близких с ООП коллагена I нормальной костной ткани (около 7,0-8,0%). ООП коллагена II типа КГ - 2,9±0,03%, в ОГ - 1,09±0,02%.

Технический результат

Таким образом, определение ООП коллагеновых и неколлагеновых белков эндостальной и периостальной мозолей по формуле ООП(%)=(S_a/S_t)×100, при автоматическом выделении и вычислении с помощью программы Adobe Photoshop Extended в цифровых изображениях площадей участков структур, содержащих исследуемые белки - S_a и S_t, позволяет объективно определить динамику заживления открытого перелома кости в эксперименте, что в примере конкретного использования подтверждается более ранними сроками консолидации перелома диафиза большеберцовой кости в опытной группе животных при применении препарата «Винфар» в результате мощного ангиогенного воздействия входящего в его состав фактора роста фибробластов, а также влияния на пролиферативную активность клеток хондрогенного и остеогенного дифферонов, ответственных за синтез соответствующих белков межклеточного матрикса.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистопатологии / Г.Г. Автандилов. - Москва: РМАПО, 1996. - С 54-57.

2. Вавилова Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полостей рта: учебное пособие. - 2-е изд., испр. и доп. - 2008. - 208 с.

3. Максимов Г.К. Статистическое моделирование многомерных систем в медицине / Г.К. Максимов, А.Н. Синицин. - Л.: Медицина, 1983. - 144 с.

4. Свидетельство на товарный знак (знак обслуживания) №433087 «Винфар»/ Правообладатель Никитенко В.И. Зарегистрировано 23 марта 2011 г.

Способ сравнительной оценки содержания белков межклеточного матрикса в регенерирующих тканях на разных сроках репаративного процесса путем фотографирования иммуногистохимических препаратов, отличающийся тем, что используют цифровую микрофотографию, а содержание белков межклеточного матрикса программно определяют при помощи Adobe Photoshop Extended версий CS3-CS6 с использованием интегрированных модулей "Цветовой диапазон" и "Журнал измерений", автоматически выделяют и вычисляют в цифровых изображениях площади участков структур, содержащие исследуемые белки, с последующим вычислением их относительного содержания в тканях по формуле ООП (%)=(S_a/S_t)×100, где ООП - относительная объемная плотность, S_a - суммарная площадь всех выделенных областей в анализируемом изображении, S_t - общая площадь цифрового изображения.

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии. Для индивидуального прогнозирования обострений хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) у больных с сопутствующим сахарным диабетом (СД) 2 типа в течение ближайшего года наблюдения проводят измерение систолического артериального давления (САД), вычисление индекса массы тела (ИМТ), тест с 6-минутной ходьбой (ТШХ) и тест оценки степени влияния ХОБЛ на качество жизни пациентов - COPD Assessment Test (CAT).

Способ прогноза родоразрешения беременных с рубцом на матке // 2624372

Изобретение относится к медицине и, в частности, к акушерству и позволяет определить прогноз родоразрешения беременных с рубцом на матке. Осуществляют прогноз родоразрешения беременных с рубцом на матке по формуле p=1/(1+2,718-582,96+1,216×1000×ИР-44,07×TCMP), где р - искомая величина; ИР - индекс резистентности; ТСМР - толщина стенки матки в области рубца.

Система и способ получения характеристик верхних дыхательных путей с использованием характеристик речи // 2623129

Изобретения относятся к медицине. Система для получения характеристик анатомического параметра верхних дыхательных путей пациента посредством анализа спектральных свойств фрагмента речи содержит механический соединитель, содержащий средство для ограничения положения челюстей пациента, средство для записи фрагмента речи и средство обработки для определения анатомического параметра верхних дыхательных путей по записанному фрагменту речи и сравнения записанного фрагмента речи с пороговым значением.

Способ определения объема околоплодных вод // 2621270

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству. У беременных во II и III триместре проводят ультразвуковое исследование с целью измерения индекса амниотической жидкости.

Способ лечения внутренних геморроидальных узлов // 2620755

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии и проктологии. При проведении интронодальной лазерной коагуляции внутренних геморроидальных узлов предварительно определяют объем геморроидального узла по формуле , где V - объем эллипсоида в см3, R1 - это ширины его основания в см, R2 - показатель высоты узла в см, R3 - длины узла в апикально-каудальном направлении в см, π=3,14.

Способ идентификации сексуального статуса женщины с сексуальным либидо // 2620020

Изобретение относится к медицине, а именно к сексологии. С помощью ростомера и сантиметровой ленты измеряют рост женщины, находящейся в положении стоя.

Способ оценки вероятностей возникновения переломов проксимального отдела бедренной кости у женщин пожилого возраста // 2618647

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для оценки вероятностей возникновения переломов проксимального отдела бедренной кости у женщин пожилого возраста.

Способ выделения капсульно-связочного аппарата суставов путем заполнения полости контрастным веществом // 2618201

Изобретение относится к области медицины, а именно к анатомическим методам исследования. Заполнение полости сустава проводят стоматологическим силиконовым слепочным материалом Speedex Light Body.

Способ определения состояния структурной незавершённости почек у новорожденных ягнят // 2617663

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к ветеринарной неонатологии, клинической диагностике и терапии животных. Для определения состояния структурной незавершенности почек у новорожденных ягнят визуально при вскрытии определяют топографию и морфометрию почек, гистологически устанавливают структуру паренхимы почек и при увеличении морфометрических параметров органа при топографическом исследовании, наличии нефронов провизорного типа и эпителиоцитов почечных канальцев с оптически просветленной либо вспененной цитоплазмой судят о структурной незавершенности почек.

Способ определения биологического возраста у мужчин // 2617313

Изобретение относится к медицине, а именно к функциональной диагностике, гериатрии и геронтологии, и может быть использовано для определения биологического возраста у мужчин.

Способ определения объема околоплодных вод во второй половине беременности // 2626376

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству. У беременных выясняют индекс массы тела по Кетле в первом триместре беременности. Накануне родов измеряют окружность живота на уровне пупка, высоту дна матки. Определяют предполагаемую массу плода и рассчитывают объем околоплодных вод V по формуле V=0,017×ВДМ×(ОЖ-25×ИМТ/СГ)2-М, где ВДМ - высота дна матки (см), ОЖ - окружность живота беременной (см), ИМТ - индекс массы тела женщины по Кетле в первом триместре беременности (кг/м2), СГ - срок гестации (недели), М - предполагаемая масса плода (г). Способ позволяет повысить точность определения объема околоплодных вод у беременных за счет применения инструментальных и лабораторных методов исследования. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования теплоизоляции рукавиц человека для защиты от холода // 2626574

Изобретение относится к области медицины, а именно к гигиене труда и физиологии человека, и может быть использовано для прогнозирования теплоизоляции рукавиц человека при воздействии холода в процессе трудовой деятельности. Определяют температуру воздуха, плотность теплового потока с поверхности кистей человека и их средней температуры, плотность теплового потока в области лба, груди, спины, поясницы, живота, плеча, кисти, верхней части бедра, нижней часть бедра, голени, находящегося в состоянии относительного покоя в комфортных климатических условиях. Определяют площадь поверхности тела человека, устанавливают время пребывания человека на холоде, допускаемый дефицит тепла в организме человека в конкретных условиях трудовой деятельности. Далее рассчитывают прогнозируемую теплоизоляцию рукавиц для защиты от холода в относительно спокойном воздухе с помощью математических формул. Способ позволяет прогнозировать теплоизоляцию рукавиц человека для защиты от холода для прогнозирования любых средств индивидуальной защиты рук, предназначенных для защиты от холода, за счет учета комплекса факторов, обуславливающих холодовую нагрузку в реальной обстановке. 1 пр.

Способ определения базового объема инфузионной терапии в послешоковом периоде ожоговой болезни // 2626689

Изобретение относится к медицине, а именно к интенсивной терапии. Определяют базовую инфузионную терапию в послешоковом периоде ожоговой болезни. При этом определяют площадь поверхностных и глубоких ожогов. Измеряют вес больного, затем вычисляют объем инфузионной терапии по формуле: V=m(0,5Sп+1,5Sг)×K1×K2, где: V - расчетный объем внутривенной инфузии, мл, m - масса тела, в кг, Sп - площадь поверхностного ожога, указанная в % п.т., Sг - площадь глубокого ожога, в % п.т. K1 - поправочный коэффициент, учитывающий возраст пациента, K2 - поправочный коэффициент, учитывающий вес пациента. На каждый 1% поверхностного ожога внутривенно вводится 0,5 мл жидкости. На каждый 1% глубокого ожога - 1,5 мл жидкости. Способ позволяет стандартизировать инфузионную терапию, не вызывает гипергидратации и связанных с ней осложнений (отек легких и мозга, абдоминальный компартмент синдром, острая сердечно-сосудистая недостаточность, пневмония, сепсис, вплоть до летального исхода). 1 з.п.ф-лы, 2 пр.

Способ определения должного диаметра корня аорты // 2627603

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, функциональной диагностике и ультразвуковой диагностике, и предназначено для оценки должного диаметра корня аорты. Расчет должного диаметра корня аорты у лиц в возрасте 15-65 лет осуществляют по формуле:ДДКА = 1,925 + 0,009 × возраст + 0,574 × ППТ - 0,193 × пол (1), где ДДКА - должный диаметр корня аорты (мм), возраст - возраст пациента (годы), ППТ - площадь поверхности тела (м2), пол - пол пациента: 1 для мужчин, 2 для женщин. При этом за нормальный диаметр корня аорты принимают любое цифровое значение, находящееся в пределах ±0,44 см от рассчитанного ДДКА. Способ позволяет осуществить получение должных для конкретного пациента значений диаметра корня аорты и определить отклонение фактических значений показателя, полученного при эхокардиографии от физиологической нормы за счет учета индивидуальных антропометрических показателей с применением математической формулы. 2 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования клинически узкого таза // 2628245

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству. У беременных накануне родов уточняют срок гестации. С помощью ультразвукового исследования измеряют прямой и поперечный размеры плоскости входа, прямой размер узкой части, поперечный размер плоскости выхода малого таза, угол лонной дуги, лобно-затылочный, бипариетальный размеры и угол разгибания головки плода. Рассчитывают коэффициент клинического соответствия К по заявленной формуле. При значении коэффициента менее 24 прогнозируют клинически узкий таз. Способ позволяет точно прогнозировать клинически узкий таз за счет оценки наиболее значимых показателей. 1 табл., 3 пр.

Способ определения состояния структурно-функциональной незавершённости легких у новорождённых ягнят // 2628628

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарной неонатологии, клинической диагностике и терапии животных. Для определения состояния структурно-функциональной незавершенности легких у новорожденных ягнят визуально при вскрытии определяют топографию легких, гистологически устанавливают структуру паренхимы легких, определяют прижизненные показатели активности дыхания. При увеличении морфометрических параметров органа при топографическом исследовании, наличии очагов дистелектазов в паренхиме и при высокой активности дыхательной моторики судят о структурно-функциональной незавершенности легких. Способ позволяет определить незавершенность структуры и функции легких у новорожденных ягнят для последующей корректировки технологии содержания и кормления животных с целью повышения их сохранности, роста и развития. 1 пр., 2 ил.

Способ и устройство для определения анатомических свойств пациента // 2629051

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам определения анатомических свойств пациента. Способ содержит этапы, на которых проецируют по меньшей мере одну структурированную световую структуру в полость рта пациента, обнаруживают по меньшей мере одну отраженную световую структуру, причем каждая из упомянутых отраженных световых структур происходит в результате отражения соответствующей проецированной структурированной световой структуры, анализируют по меньшей мере одну отраженную структурированную световую структуру с точки зрения по меньшей мере одной структурированной световой структуры, определяя, таким образом, анатомические свойства пациента, в котором каждая из по меньшей мере одной структурированной световой структуры содержит набор заданных параллельных линий и так, что набор заданных параллельных линий определяет структуру, содержащую области с повышенной плотностью линий и области с пониженной плотностью линий, и/или содержит области с повышенной толщиной линий и области с пониженной толщиной линий, причем их проекции соответствуют заданным местоположениям в полости рта и горле, включая поляризацию структурированных световых структур перед отражением в соответствии с первым режимом поляризации, и поляризацию отраженных световых структур перед обнаружением в соответствии со вторым режимом поляризации, причем первый и второй режимы поляризации являются противоположными. Устройство формирования изображений содержит средство проецирования, средство обнаружения, средство анализа, первое поляризационное средство для поляризации структурированной световой структуры перед отражением в соответствии с первым режимом поляризации и второе поляризационное средство для поляризации структуры отраженного света перед обнаружением и после отражения в соответствии со вторым режимом поляризации. Использование изобретений позволяет повысить точность и упростить контроль состояния пациента в отношении апноэ во время сна. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 6 ил.

Способ диагностики псориатического артрита // 2629627

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии и клинической иммунологии. У больных определяют клинико-анамнестические и лабораторно-инструментальные критерии диагностики псориатического артрита и присваивают им баллы. При возрасте старше 40 лет присваивают 1 балл, кожном зуде - 1 балл, псориазе ногтей - 1 балл, индексе массы тела (ИМТ) больше или равном 25 кг/м2 - 1 балл, скорости оседания эритроцитов (СОЭ) больше или равной 7 мм/ч - 1 балл, уровне общего холестерина более 4,2 ммоль/л - 1 балл, уровне цитокина TNFα выше 8,1 пг/мл - 1 балл, выявлении генотипа С-597 IL10 - 1 балл, гепатомегалии по результатам УЗИ - 1 балл. Суммируют полученные баллы, и при сумме баллов равной 5 или более диагностируют псориатический артрит. Способ позволяет достоверно диагностировать псориатический артрит у больных псориазом за счет определения клинико-анамнестических и лабораторно-инструментальных критериев диагностики. 1 пр.

Способ определения пола неопознанного трупа ребенка в возрасте от 8 до 12 лет при проведении судебно-медицинских экспертиз // 2632074

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебно-медицинской экспертизе. Для определения пола неопознанного трупа ребенка в возрасте от 8 до 12 лет исследуют расстояние между верхним и нижним щитовидными бугорками в пределах одной пластинки. При установлении расстояния между верхним и нижним щитовидными бугорками в пределах одной пластинки более 16,4 мм определяют женский пол неопознанного трупа ребенка. Способ повышает точность определения пола неопознанного трупа ребенка за счет выявления анатомо-морфологических особенностей щитовидного хряща. 1 пр.

Способ химиолучевого лечения орофарингеального рака // 2632542

Изобретение относится к медицине, онкологии, радиологии, лучевой терапии. Способ лучевой терапии (ЛТ) орофарингеального рака (ОФР) на фоне соответствующей химиотерапии включает предварительное определение у больного массы тела и диаметра шеи и предлучевую подготовку с использованием КТ-топометрии и расчета дозиметрического плана. При этом перед началом лечения у больного дополнительно определяют содержание альбумина плазмы крови. В качестве ЛТ используют 3D конформную ЛТ, причем при достижении суммарной очаговой дозы облучения больного (СОД) 20 Гр повторно определяют массу тела, содержание альбумина плазмы крови и диаметр шеи. При снижении хотя бы одного из этих показателей более чем на 5% повторно выполняют КТ-топометрию и расчет дозиметрического плана облучения, в соответствии с чем продолжают ЛТ до СОД 40 Гр. Затем снова определяют показатели массы тела, альбумина плазмы крови и диаметра шеи больного и при повторном снижении хотя бы одного показателя более чем на 5% вновь корректируют дозиметрический план, в соответствии с которым продолжают ЛТ до достижения СОД 70 Гр. Способ обеспечивает оптимальную тактику адаптивного химиолучевого лечения благодаря своевременной коррекции дозиметрического плана, исключая превышение пороговых значений предельно допустимых доз для органов риска, попадающих в зону облучения, а также исключая некорректность охвата 95%-ной изодозой первичной опухоли и зон регионарного лимфооттока. 1 пр., 1 табл.