Способ диагностики параимплантарного воспаления после эндопротезирования крупных суставов

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики параимплантарного воспаления после эндопротезирования крупных суставов, характеризующийся тем, что производят забор крови, готовят образцы сыворотки крови, осуществляют исследование сыворотки крови с помощью иммуноферментного анализа, определяя количественные значения показателей: фактора, ингибирующего миграцию макрофагов (MIF), и белка, стимулирующего макрофаги (MSP), а также интерлейкинов 1, 4, 8, 10 (IL1, IL4, IL8, IL10), рассчитывают коэффициент выраженности макрофагальной реакции и коэффициент выраженности гуморального ответа , определяют показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2.7, и при его отрицательных значениях констатируют регресс патологического процесса, при положительных значениях - прогресс патологического процесса. Изобретение позволяет повысить чувствительность и специфичность диагностики направленности развития параимплантарного воспаления. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно травматологии и ортопедии, клинической лабораторной диагностике и клинической патофизиологии. Данное техническое решение может быть использовано для оценки клеточного и гуморального звеньев инфекционного процесса, в совокупности характеризующих развитие параимплантарного воспаления и определяющих в послеоперационном периоде различные варианты медикаментозного или хирургического лечения возникшего гнойно-воспалительного осложнения.

Инфекционно-воспалительные осложнения первичного эндопротезирования крупных суставов представляют собой серьезную медицинскую и социальную проблему в связи с растущей частотой встречаемости, сложностями диагностики, длительными сроками лечения и последующей реабилитации, различными функциональными исходами, возможностью инвалидизации и смерти в отдаленном периоде, а также значительными финансовыми затратами, превосходящими стоимость первичной операции (Волокитина Е.А., Зайцева О.П., Вишняков А.А. Локальные интраоперационные и послеоперационные осложнения эндопротезирования тазобедренного сустава. // Гений ортопедии. - 2009. - №3: - С. 71-7).

Известны различные способы диагностики наличия параимплантарного воспаления, заключающиеся в оценке комплекса клинико-лабораторных показателей, включающие в себя внезапно возникающую боль в коленном суставе, ограничение его функции за счет отека окружающих тканей, гиперемию кожных покровов и образование экссудата в глубоких или поверхностных слоях мягких тканей, лейкоцитоз, повышение скорости оседания эритроцитов, положительную реакцию на эстеразу лейкоцитов, рост процентного содержания нейтрофильных гранулоцитов в синовиальной жидкости (Белов Б.С., Макаров С.А., Бялик Е.И. Инфекция протезированного сустава: современное состояние проблемы // Современная ревматология. - 2013. - №4. - С. 4-9).

Однако данные клинико-лабораторные критерии не являются высокочувствительными и специфичными для дифференциальной диагностики асептического и септического воспаления, которое с равной вероятностью может развиваться в послеоперационном периоде при первичном эндопротезировании крупных суставов, что приводит к неадекватной или поздней диагностике параимплантарной инфекции уже на этапе формирования фистулы, связанной с суставом.

Известны также способы диагностики наличия и тяжести инфекционного процесса, развивающегося после первичного эндопротезирования крупных суставов, включающие определение в крови C-реактивного белка и прокальцитонина, а также выделение положительных культур из пунктатов или фрагментов перипротезных тканей, полученных в ходе хирургического вмешательства (Вырва О.Е., Бурлака В.В., Малык Р.В., Озеров К.И. Инфекционные осложнения первичного тотального эндопротезирования тазобедренного и коленного суставов // Ортопедия, травматология и протезирование. - 2011. - №3. - С. 60-67).

Однако данные клинико-лабораторные критерии не отражают степени выраженности локальной воспалительной реакции, а также системного воспалительного ответа организма больных на возникший локус инфекционного процесса.

Наиболее близким аналогом к заявляемому способу диагностики воспалительного процесса является изолированное определение в сыворотке крови иммунологических маркеров состояния гуморального звена системного ответа организма больных при развитии параимплантарного воспаления, а именно циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), фактора некроза опухолей (ФНО), интерлейкина-6 (ИЛ-6) (Дмитриева Л.А., Лебедев В.Ф., Коршунова Е.Ю. Осложнения при эндопротезировании тазобедренного сустава и способы их прогнозирования (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2013. - №2 (90). Часть 1. - C. 153-58).

Однако определение данных показателей позволяет оценивать развитие инфекционно-воспалительных осложнений после первичного эндопротезирования крупных суставов только лишь с позиций состояния гуморального звена иммунитета и совершенно не учитывает клеточный ответ организма и индивидуальные для каждого больного возможности адаптационно-приспособительных реакций, определяющих прогресс или регресс параимплантарного воспаления.

Задачей заявляемого изобретения является разработка чувствительного и специфичного способа диагностики параимплантарного воспаления, позволяющего судить о возможностях компенсаторно-приспособительных реакций организма пациентов, развивающихся в ответ на активацию инфекционного процесса, выраженность которых определяет выбор проводимых лечебных мероприятий.

Сущность заявляемого изобретения характеризуется тем, что в способе диагностики параимплантарного воспаления после эндопротезирования крупных суставов производят забор крови; готовят образцы сыворотки крови; осуществляют исследование сыворотки крови с помощью иммуноферментного анализа, при этом определяя количественные значения показателей: клеточного звена параимплантарного воспаления - фактора, ингибирующего миграцию макрофагов (MIF), и белка, стимулирующего макрофаги (MSP), а также гуморального звена параимплантарного воспаления - интерлейкинов 1, 4, 8, 10 (IL1, IL4, IL8, IL10); рассчитывают коэффициент выраженности макрофагальной реакции и коэффициент выраженности гуморального ответа ; оценивают полученные значения коэффициентов; определяют показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2.7, по значению которого судят о возможностях компенсаторно-приспособительных реакций организма пациентов, развивающихся в ответ на активацию инфекционного процесса, и при его отрицательных значениях констатируют регресс патологического процесса, при положительных значениях - прогресс патологического процесса.

Технический результат заявляемого изобретения.

Использование наряду с количественной оценкой параметров наличия и тяжести воспалительного процесса еще и показателей, характеризующих индивидуальные возможности организма больных по противостоянию прогрессированию инфекционно-воспалительного процесса и осуществлению санации очага инфекции, позволяет с высокой степенью достоверности судить о регрессе или прогрессе параимплантарного воспаления, таким образом определяя не только направленность его развития, но и выбор адекватного способа лечения. Это достигается путем использования совокупности чувствительных и специфичных лабораторных критериев диагностики состояния клеточного и гуморального звеньев локальной и/или системной воспалительной реакции.

Такой технический прием, как применение коэффициентов выраженности макрофагальной реакции и гуморального ответа, отражающих соотношение показателей про- и противовоспалительных механизмов параимплантарного воспаления, позволяет повысить объективность оценки направленности его развития.

Способ диагностики параимплантарного воспаления после эндопротезирования крупных суставов осуществляют следующим образом.

Данное диагностическое исследование выполняют больным, у которых в послеоперационном периоде развилось параимплантарное воспаление, сопровождающееся возникновением одного или нескольких клинических признаков, а именно боли, нарушения функции оперированного сустава, гипертермии и гиперемии окружающих имплантат мягких тканей, несостоятельности послеоперационной раны и очагов некрозов в области послеоперационного рубца.

После клинического обследования и подтверждения наличия параимплантарного воспаления в асептических условиях производят взятие крови из периферической вены в вакуумную пробирку объемом 5 мл. С помощью центрифугирования при 2000 об/мин в течение порядка 10 минут получают сыворотку крови. Полученные образцы сыворотки крови тестируют методом твердофазного иммуноферментного анализа. При этом определяют в полученных образцах сыворотки крови количественные значения показателей: клеточного звена параимплантарного воспаления - фактора, ингибирующего миграцию макрофагов (MIF) и белка, стимулирующего макрофаги (MSP), а также гуморального звена параимплантарного воспаления - интерлейкинов 1, 4, 8, 10 (IL1, IL4, IL8, IL10). Рассчитывают коэффициент выраженности макрофагальной реакции К1 и коэффициент выраженности гуморального ответа К2 по формулам:

,

.

Все показатели формул измеряются в пг/мл. Затем оценивают полученные значения коэффициентов. Определяют показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2,7. По значению К судят о возможностях компенсаторно-приспособительных реакций организма пациентов, развивающихся в ответ на активацию инфекционного процесса. При отрицательных значениях К констатируют регресс патологического процесса, заключающийся в усилении макрофагальной реакции и гумморального иммунного ответа организма больных, приводящих к санации очага воспаления. При положительных значениях К диагностируют прогресс патологического процесса, заключающийся в увеличении выраженности и распространенности локальной воспалительной реакции в зоне имплантации и системной воспалительной реакции в ответ на возникший очаг инфекции.

Пример

Больной П., 53 лет, поступил в отделение гнойной хирургии через три недели с момента выполнения первичного эндопротезирования по поводу гонартроза III стадии левого коленного сустава с жалобами на боль, припухлость и покраснение в области оперированного сустава, а также ограничение его функции. При клиническом осмотре у больного наблюдали: деформацию левого коленного сустава и ограничение сгибания/разгибания в нем, отек мягких тканей, гиперемию и гипертермию кожных покровов в зоне хирургического вмешательства. При ультразвуковом исследовании прилежащих к области хирургического вмешательства мягких тканей визуализировали единичные мелкие поверхностно расположенные жидкостные образования, при пункции которых была получена неопалесцирующая жидкость, содержащая по результатам лабораторного исследования большое количество нейтрофильных лейкоцитов и белка. На основании данных обследования больного был установлен диагноз: «Состояние после эндопротезирования левого коленного сустава. Поверхностное параимплантарное воспаление».

С целью оценки направленности развития параимплантарного воспаления больному осуществляли взятие крови из периферической вены. Определяли в полученных образцах сыворотки крови методом иммуноферментного анализа количественные значения MIF - 124,37 пг/мл, MSP - 186,72 пг/мл, IL1 - 36,57 пг/мл, IL4 - 236,81 пг/мл, IL8 - 196,34 пг/мл, IL10 - 111,59 пг/мл.

Рассчитали коэффициент выраженности макрофагальной реакции К1 и коэффициент выраженности гуморального ответа К2, которые были равны:

,

Определили показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2.7=0,67+0,66-2,7=1,33-2,7=-1,37. Полученный результат свидетельствовал о регрессе патологического процесса. С учетом этого было принято решение о проведении консервативного лечении, состоявшего в назначении больному рациональной антибактериальной терапии и сохранении имплантированной конструкции. Через 4 недели клинических признаков параимплантарного воспаления и нестабильности эндопротеза не отмечали, клинико-лабораторные параметры (скорость оседания эритроцитов, C-реактивный белок, прокальцитонин) свидетельствовали об отсутствии инфекционно-воспалительного процесса.

Пример 2

Больной К., 60 лет, поступил в отделение гнойной хирургии через 3,5 месяца с момента выполнения первичного эндопротезирования по поводу гонартроза III стадии правого коленного сустава с жалобами на боль, припухлость и покраснение в области оперированного сустава, наличие свищевого отверстия и поступления из него небольшого количества гнойного содержимого, расхождение краев послеоперационного рубца, отек мягких тканей, а также ограничение функции сустава. При клиническом осмотре у больного наблюдали: деформацию правого коленного сустава и ограничение сгибания/разгибания в нем, наличие свищевого отверстия и поступление из него небольшого количества гнойного содержимого, диастаз краев послеоперационного рубца, наложение фибрина на поверхности незрелых грануляций, гиперемии и гипертермии кожных покровов в зоне хирургического вмешательства. При ультразвуковом исследовании в межфасциальных пространствах глубоких мышц бедра визуализировали неограниченное скопление жидкости. На основании полученных при обследовании больного данных был установлен диагноз: «Состояние после эндопротезирования правого коленного сустава. Глубокое параимплантарное воспаление, свищевая форма».

С целью оценки направленности развития параимплантарного воспаления больному осуществляли взятие крови из периферической вены. Определяли в полученных образцах сыворотки крови методом иммуноферментного анализа количественные значения MIF - 837,62 пг/мл, MSP - 437,51 пг/мл, IL1 - 86,39 пг/мл, IL4 - 345,86 пг/мл, IL8 - 686,72 пг/мл, IL10 - 109,64 пг/мл.

Рассчитали коэффициент выраженности макрофагальной реакции К1 и коэффициент выраженности гуморального ответа К2, которые были равны:

,

Определили показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2.7=1,9+1,7-2,7=3,6-2,7=0,9.

Полученный результат свидетельствовал о прогрессе патологического процесса. С учетом этого было принято решение о проведении хирургического лечения, состоявшего в двухэтапной замене эндопротеза с использованием спэйсера.

Способ диагностики параимплантарного воспаления после эндопротезирования крупных суставов, характеризующийся тем, что производят забор крови; готовят образцы сыворотки крови; осуществляют исследование сыворотки крови с помощью иммуноферментного анализа, при этом определяя количественные значения показателей: клеточного звена параимплантарного воспаления - фактора, ингибирующего миграцию макрофагов (MIF), и белка, стимулирующего макрофаги (MSP), а также гуморального звена параимплантарного воспаления - интерлейкинов 1, 4, 8, 10 (IL1, IL4, IL8, IL10); рассчитывают коэффициент выраженности макрофагальной реакции и коэффициент выраженности гуморального ответа ; оценивают полученные значения коэффициентов; определяют показатель развития параимплантарного воспаления К, равный (К12)-2.7, по значению которого судят о возможностях компенсаторно-приспособительных реакций организма пациентов, развивающихся в ответ на активацию инфекционного процесса, и при его отрицательных значениях констатируют регресс патологического процесса, при положительных значениях - прогресс патологического процесса.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки влияния алюминия на иммунный статус. Для этого в пробе крови пациента определяют содержание алюминия, и в тех пробах крови пациентов, где содержание алюминия выше референтного значения, извлекают иммунокомпетентные клетки.

Изобретение относится к области биомедицины и касается способа диагностирования острого повреждения почек и применения in vitro набора, содержащего праймеры, необходимые для выполнения способа.

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может быть использовано для диагностики периода инфекционного процесса, вызванного вирусом ветряной оспы.

Группа изобретений относится к способу калибровки составного анализа, включающему: добавление калибровочного реагента, включающего по меньшей мере две различные связывающие молекулы, где каждая молекула обладает способностью специфичного связывания с агентом захвата и способностью связываться с детектирующей молекулой и где по меньшей мере две из связывающих молекул имеют различные специфичности и присутствуют в различных концентрациях, добавление детектирующей молекулы, детектирование связанной детектирующей молекулы, создание калибровочной кривой, включающей ряд калибровочных точек/интервалов.

Настоящая группа объектов изобретения относится к области биотехнологии. Предложен рекомбинантный мультимерный скаффолд на основе 3 домена FnIII тенасцина (Tn3), который специфически связывается с рецептором 2 TRAIL (TRAIL R2).

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен рекомбинантный ген, кодирующий белок L1 вируса папилломы человека 16 типа, с кодонами, оптимизированными для гетерологичной экспрессии в штаммах Е.

Изобретение относится к области биохимии. Предложено антитело к рецептору эпидермального фактора роста 2 (HER2) человека, а также включающие указанное антитело фармацевтические композиции, предназначенные для профилактики и лечения злокачественной опухоли и для индуцирования апоптоза.

Изобретение относится к медицине и касается способа получения селективного иммуносорбента для удаления антител к десмоглеину 3 типа (Dsg3) из крови больных пузырчаткой, при котором приготавливают раствор Dsg3 в фосфатном буфере.

Настоящее изобретение относится к акушерству и касается прогнозирования угрозы невынашивания инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Сущность способа: в сыворотке крови беременных со сроком 6-11 недель гестации с помощью иммуноферментного анализа определяют уровень интерфероноподобного цитокина IL-28B.
Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для получения антигена для дифференциальной диагностики вакцинированных и больных бруцеллезом животных.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии и клинической иммунологии. У больных определяют клинико-анамнестические и лабораторно-инструментальные критерии диагностики псориатического артрита и присваивают им баллы. При возрасте старше 40 лет присваивают 1 балл, кожном зуде - 1 балл, псориазе ногтей - 1 балл, индексе массы тела (ИМТ) больше или равном 25 кг/м2 - 1 балл, скорости оседания эритроцитов (СОЭ) больше или равной 7 мм/ч - 1 балл, уровне общего холестерина более 4,2 ммоль/л - 1 балл, уровне цитокина TNFα выше 8,1 пг/мл - 1 балл, выявлении генотипа С-597 IL10 - 1 балл, гепатомегалии по результатам УЗИ - 1 балл. Суммируют полученные баллы, и при сумме баллов равной 5 или более диагностируют псориатический артрит. Способ позволяет достоверно диагностировать псориатический артрит у больных псориазом за счет определения клинико-анамнестических и лабораторно-инструментальных критериев диагностики. 1 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, педиатрии и аллергологии, и может использоваться для прогнозирования степени тяжести атопического дерматита у детей. Сущность способа: в сыворотке крови у ребенка с атопическим дерматитом при поступлении в стационар определяют концентрацию неоптерина, и при концентрации неоптерина от 2,6 нг/мл до 4,0 нг/мл прогнозируют легкую степень тяжести атопического дерматита, при концентрации от 4,1 нг/мл до 5,9 нг/мл прогнозируют среднюю степень, а при концентрации 6,0 нг/мл и выше прогнозируют тяжелую степень тяжести атопического дерматита. Изобретение обеспечивает повышение точности прогноза атопического дерматита у детей. 3 пр.

Изобретение относится медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для определения субпопуляционного состава клеток кожи. Способ определения субпопуляционного состава клеток кожи и получения цитоиммунограммы кожи включает забор биоптата кожи на глубину 2 мм, гомогенизацию ткани в 0,9%-ном водном растворе хлорида натрия при температуре +23…+25°С, извлечение гомогената, фильтрование гомогената через инертную фильтровальную перегородку с диаметром пор 20 мкм, центрифугирование гомогената при 400 g в течение 5 минут при температуре +23…+25°С. После центрифугирования определяют жизнеспособность клеток кожи, инкубируют в течение 20 минут клетки кожи с моноклональными антителами для проточной цитометрии меченые флюорохромами, проводят фенотипирование клеток кожи, определяют количество клеток кожи определенного фенотипа - цитоиммунограмму кожи: кератиноциты CD49f+, из них активированные CD49f+HLA-DR+; фибробласты (фиброциты) CD45-CD14-CD44+, из них активированные CD45-CD14-CD44+CD80+; тучные клетки CD249+, из них активированные CD249+CD63+; моноциты (макрофаги) CD45+CD14+, из них активированные CD45+CD14+HLA-DR+; внутриэпидермальные макрофаги CD207+, их них активированные CD207+CD80+, CD207+HLA-DR+, CD207+CD80+HLA-DR+; эндотелиальные клетки CD146+, их них активированные CD146+CD34+, CD146+HLA-DR+, CD146+CD54+, CD146+CD54+HLA-DR+; лимфоцитарные популяции: Т-лимфоциты CD45+CD3+, Т-хелперы CD45+CD3+CD4+CD8-, Т-супрессоры CD45+CD3+CD4-CD8+, В-лимфоциты CD45+CD3-CD19+, NK-лимфоциты CD45+CD3-CD16+CD56+. Использование данного способа позволяет составить количественную и функциональную характеристику всех составляющих элементов кожи для использования в диагностике. 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкоурологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития стеноза везикоуретрального анастомоза после радикальной простатэктомии. Для этого проводят гистологическое исследование парапростатических тканей области шейки мочевого пузыря, включающее подсчет клеток воспалительного инфильтрата: лимфоциты, моноциты, плазмоциты в парапростатических тканях области шейки мочевого пузыря. А также определяют площадь распространения фиброза в препаратах, окрашенных азокармином по Гейденгайну. При количестве лимфоидных клеток свыше 30 в поле зрения при объективе 40 и окулярах 10 (×400) и при замещении соединительнотканными волокнами более 2/3 площади препарата в поле зрения прогнозируют высокий риск развития стеноза. Использование данного способа позволяет снизить послеоперационные осложнения путем прогнозирование риска развития стеноза везикоуретрального анастомоза после радикальной простатэктомии и выбора тактики лечения пациента. 2 пр.

Изобретение относится к области медицинской вирусологии и микробиологии и касается штамма вируса Эбола Заир. Представленный штамм вируса Эбола Заир H.sapiens-wt/GIN/2015/Kalidie-Kindia-1022 выделен из крови больного лихорадкой Эбола во время эпидемии в Гвинее 2014-2015 гг. путем 3 последовательных пассажей на мышах-сосунках линии BALB/c и 6 последовательных пассажей на культуре клеток Vero и депонирован в государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под номером V-695. Изобретение позволяет получить антиген - компонент иммуноферментной тест-системы для выявления антител классов G и М к вирусу Эбола с титром не менее 2⋅106 ТЦПД50/мл. 6 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике гастроэнтерологии, может быть использовано для диагностики степени тяжести цирроза печени смешанной этиологии.Способ диагностики степени тяжести цирроза печени смешанной этиологии с помощью анализа крови заключается в том, что у пациентов в сыворотке крови определяют уровень интерлейкина-6, и при значении интерлейкина-6 менее или равном 12,7 пг/мл диагностируют легкую (компенсированную) степень цирроза печени, при концентрации интерлейкина-6 более 12,7 пг/мл и менее или равной 26,2 пг/мл диагностируют умеренную (субкомпенсированную) степень, при уровне интерлейкина-6 более 26,2 пг/мл - тяжелую (декомпенсированную) степень цирроза печени.Технический результат: повышение доступности и простоты выполнения при высокой чувствительности, специфичности и объективности способа. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения цитотоксической активности NK-клеток в отношении клеток трофобласта. Способ включает выделение фракции мононуклеарных клеток, содержащих NK-клетки, из периферической крови. Проводят инкубацию в культуральной среде мононуклеаров в присутствии клеток-мишеней с последующей оценкой количества погибших клеток путем проточной цитофлуометрии. При этом мононуклеары периферической крови, содержащие NK-клетки, инкубируют в культуральной среде DMEM в течение 4 часов в присутствии клеток трофобласта линии Jeg-3. Часть клеток трофобласта инкубируют в культуральной среде DMEM без мононуклеаров в течение 4 часов. Затем определяют количество нежизнеспособных и жизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных с мононуклеарами периферической крови, и базовое количество нежизнеспособных и жизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных в культуральной среде без мононуклеаров периферической крови. Определяют цитотоксический эффект NK-клеток в отношении клеток трофобласта по формуле: ЦЭ=(X1/Х2)×100-(Х1баз/Х2баз)×100, где ЦЭ - цитотоксическая активность NK-клеток, X1 - количество нежизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных с мононуклеарами периферической крови, Х2 - количество жизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных с мононуклеарами периферической крови, Х1баз. - базовое количество нежизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных в культуральной среде без добавления мононуклеаров; Х2баз. - базовое количество жизнеспособных клеток трофобласта, инкубированных в культуральной среде без добавления мононуклеаров. Использование данного способа позволяет получить количественную оценку цитотоксической активности NK-клеток, что дает возможность проводить мониторинг течения беременности. 6 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и предназначено для выделения и исследования иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности (ИК-ммЛНП), из сыворотки крови человека. Агрегируют из сыворотки крови человека множественно модифицированные ЛНП в условиях 9,1% ПВП-35000 при комнатной температуре, осаждают центрифугированием, тщательно декантируют. Полученный супернатант инкубируют при 4°С в течение 30 мин. Образовавшиеся агрегаты ИК-ммЛНП осаждают повторным центрифугированием, декантируют, растворяют преципитат в буфере без ПВП и определяют содержание холестерина, триацилглицеринов. Определяют содержание IgG в составе преципитата. Исследуют комплемент-связывающую способность иммунных комплексов, содержащих ммЛНП. Способ может применяться для ранней диагностики субклинического атеросклероза. 1 ил., 5 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к медицине и касается диагностических реагентов для клинической лабораторной диагностики сифилитической инфекции. Заявлены стабилизированный кардиолипиновый антиген и способ его получения. Кардиолипиновый антиген получен способом, включающим приготовление буферного раствора с последовательным добавлением друг к другу ЭДТА динатриевой соли, натрия фосфорнокислого 2-замещенного, калия фосфорнокислого 1-замещенного, холин-хлорида, тимеросала (мертиолята), воды очищенной, далее получившийся раствор перемешивают и фильтруют, после чего приготавливают спиртовой раствор липидов, для этого смешивают кардиолипин, лецитин, холестерин и спирт этиловый абсолютированный, затем осуществляют смешение буферного раствора и спиртового раствора. Техническими результатами группы изобретений является:- законченный цикл получения готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена на производственном предприятии,- контроль качества и обеспечение длительной специфической активности приготовленного реагента в реакции микропреципитации при диагностике сифилиса с исключением этапа лабораторного приготовления рабочей эмульсии Аг Кл. 2 н.п. ф-лы, 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма E. coli, являющегося продуцентом антигена возбудителя сибирской язвы Bacillus anthracis. Представленный штамм получен на основе протективного антигена Bacillus anthracis путем введения в штамм E. coli BL21 (DE3) плазмиды pGEM-TTPPAG. Плазмида pGEM-TTPPAG содержит в своем составе промотор фага Т7, который контролирует экспрессию слитого гена, представляющего собой полноразмерный ген ТТP бактериофага DT57C (кодирует белок трубки хвоста pb6), слитый через 3’-конец с геном протективного антигена B. anthracis, и экспрессирующегося в форме вирусоподобных частиц. Изобретение обеспечивает выход целевого продукта в оптимальных условиях культивирования не ниже 1 г/л культуры, а также позволяет получить основной защитный антиген возбудителя сибирской язвы B. anthracis в форме вирусоподобных частиц (ВПЧ), имеющих размер 225,4 нм, что облегчает его очистку и потенциально повышает иммуногенность. Полученные ВПЧ, свободные от растворимого клеточного белка, могут использоваться в качестве антигена для иммунизации. 5 ил., 3 табл.
Наверх