Способ прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным в молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2632112:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский научно-исследовательский институт онкологии" (Томский НИИ онкологии) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы. Для этого проводят гистологическое исследование препаратов ткани первичного новообразования до проведения неоадъювантной химиотерапии. При этом в препаратах оценивают инфильтративный компонент, в котором определяют наличие трабекулярных, тубулярных, альвеолярных, солидных структур и дискретных групп опухолевых клеток. Затем оценивают стромальный компонент. В инфильтративном компоненте опухоли определяют наличие или отсутствие дискретных групп опухолевых клеток. В строме опухоли оценивают выраженность воспалительной инфильтрации, степень злокачественности. Проводят иммуногистохимическое исследование для оценки экспрессии bcl-2, Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата, мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках. Степень злокачественности X₁ при первой степени оценивают в 1 балл, при второй в 2 балла, третьей в 3 балла. Присутствие в инфильтративном компоненте дискретных групп клеток Х₂ оценивают отсутствие в 1 балл, присутствие в 2 балла. Присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток Х₃ оценивают в 2 балла, отсутствие в 1 балл. Позитивную экспрессию Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата Х₄ оценивают в 2 балла, отсутствие в 1 балл. Наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках Х₅ оценивают в 2 балла, отсутствие в 1 балл. Далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле: Y=5-3,0X₁-18,5Х₂-25,5Х₃+75,6X₄-19,8X₅, далее, значение вероятности достижения полной регрессии опухоли Р определяют по формуле: Р=e^Y/(1+e^Y), и при Р≥0,5 прогнозируют высокую, а при Р<0,5 - низкую вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы.

Заболеваемость раком молочной железы стабильно занимает первое место среди онкологической патологии у женщин и количество больных с каждым годом только растет [1, 2, 3]. В связи с этим имеется необходимость в совершенствовании методов диагностики и лечения данной патологии, в частности одного из этапов терапии - неоадъювантной химиотерапии [4, 5, 6]. Предоперационная химиотерапия имеет большое значение, так как позволяет не только уменьшить размер первичной опухоли и, как следствие, объем оперативного вмешательства, но и определить потенциальную чувствительность к цитостатическим препаратам [5, 7, 8, 9].

При лечении люминального В рака молочной железы довольно широко используется неоадъювантная химиотерапия, однако, несмотря на применение современных схем полихимиотерапии нередко эффективность лечения низкая, либо вообще отсутствует [10, 11, 12, 13]. В 90% случаев данное состояние связывают с возникновением феномена множественной лекарственной устойчивости [9]. Указанный феномен характеризуется возникновением широкой перекрестной резистентности к большому количеству противоопухолевых препаратов и возникает в результате работы трех ключевых молекулярных механизмов: активации белков семейства ABC-транспортеров, системы глутатион-трансферазы, активацией онкогенов и дезактивацией протоонкогенов, регулирующих апоптоз клеток [9, 14, 15, 16, 17, 18].

В настоящее время изучению проблем работы данных механизмов и выявлению морфологических и молекулярно-биологических маркеров для прогнозирования возникновения химиорезистентности уделяется все возрастающее внимание, но данные исследований, касающиеся феномена лекарственной устойчивости у больных раком молочной железы, весьма разрознены, противоречивы и посвящены преимущественно изучению процесса in vitro. В связи с этим особую значимость приобретают клинические исследования характеристик первичного опухолевого узла у больных раком молочной железы, сопряженных с чувствительностью и резистентностью к цитостатическим препаратам, которые позволят прогнозировать ответ на неоадъювантную химиотерапию и обеспечат индивидуализированный подход в терапии рака молочной железы.

Новый технический результат - разработка способа прогнозирования вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы обладающего высокой чувствительностью и специфичностью.

Для достижения нового технического результата в способе прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы осуществляют гистологическое исследование препаратов ткани первичного новообразования до проведения неоадъювантной химиотерапии, включающий изготовление гистологических препаратов, далее, на светооптическом уровне в препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, оценивают инфильтративный компонент, в котором определяют наличие трабекулярных, тубулярных, альвеолярных, солидных структур и дискретных групп опухолевых клеток, также оценивают стромальный компонент, в каждом случае в инфильтративном компоненте опухоли определяют наличие или отсутствие дискретных групп опухолевых клеток, в строме опухоли оценивают выраженность воспалительной инфильтрации, степень злокачественности по модифицированной схеме на основании оценки количества тубулярных структур, митозов и выраженности клеточного полиморфизма, также с помощью иммуногистохимического исследования оценивают экспрессию bcl-2, Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата, наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках. Определяют степень злокачественности X₁ и при первой степени оценивают в 1 балл, при второй в 2 балла, третьей в 3 балла; определяют присутствие в инфильтративном компоненте дискретных групп клеток Х₂ и оценивают отсутствие в 1 балл, присутствие в 2 балла; определяют присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток Х₃ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают позитивную экспрессию Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата Х₄ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках Х₅ в 2 балла, отсутствие в 1 балл.

Далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=5-3,0X₁-18,5Х₂-25,5Х₃+75,6X₄-19,8Х₅,

5 - коэффициент регрессии свободного члена;

X₁ - степень злокачественности (1 - первая, 2 - вторая, 3 - третья),

-3,0 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₂ - присутствие в инфильтративном компоненте опухоли дискретных групп клеток (1 - нет, 2 - есть),

-18,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₃ - присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток (1 - нет, 2 -есть),

-25,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₄ - позитивная экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 - нет, 2 - есть),

75,6 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₅ - наличие мембранной экспрессии в опухолевых клетках MRP2 (1 - нет, 2 - есть),

-19,8 - коэффициент регрессии этого признака;

далее, значение вероятности достижения полной регрессии опухоли Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+e^Y), где

е - математическая константа, равная 2,72;

и при Р≥0,5 прогнозируют высокую, а при Р<0,5 - низкую вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии.

Способ осуществляют следующим образом

Производят забор материала первичного новообразования до проведения неоадъювантной химиотерапии и фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливают согласно рекомендациям ВОЗ (Женева, 2012).

На светооптическом уровне в препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, оценивают инфильтративный компонент, в котором определяют наличие трабекулярных, тубулярных, альвеолярных, солидных структур и дискретных групп опухолевых клеток, также оценивают стромальный компонент. В каждом случае в инфильтративном компоненте опухоли определяют наличие или отсутствие дискретных групп опухолевых клеток. В строме опухоли оценивают выраженность воспалительной инфильтрации. Оценивают также степень злокачественности по модифицированной схеме P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson (1957) в модификации C.W. Elston (1991) на основании оценки количества тубулярных структур, митозов и выраженности клеточного полиморфизма.

В дальнейшем для определения молекулярно-генетического субтипа рака молочной железы проводят иммуногистохимическое исследование по стандартной методике. Применяют антитела фирмы Dako к рецепторам эстрогена (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к онкопротеину с-еrbВ-2 (HER2/neu статус) (рабочее разведение 1:500, кроличьи), к Ki-67 (клон MIB-1, RTU, мышиные). Оценку экспрессии рецепторов к половым гормонам проводят количественным методом гистосчета (Histo-Score). При этом подсчитывают процент позитивных клеток и показатель экспрессии в баллах (Петров С.В., 2012). HER2/neu-негативными считают случаи с отсутствием окрашивания или слабым прерывистым мембранным окрашиванием. К HER2/neu-позитивным относят случаи с интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток. Случаи с умеренным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток или интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием менее чем в 10% клеток, требующие выявления наличия амплификации гена HER2/neu методом FISH или CICH/SISH, не включают в исследование. На основании сочетания экспрессии рецепторов к эстрогенам, прогестерону, HER2/neu статуса и Ki-67 определяют 4 основных молекулярно-генетических типа: люминальный А (при позитивной экспрессии рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативный HER2/neu статус, экспрессия Ki-67 <20%); люминальный В (при позитивной экспрессии рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативный HER2/neu статус, экспрессия Ki-67≥20%); трижды негативный (при негативной экспрессии рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативный HER2/neu статус); тип с гиперэкспрессией HER2/neu (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, позитивный HER2/neu статус).

Применяют антитела фирмы «Novocastra» к bcl-2 (клон bcl2/100/D5, рабочее разведение 1:80); фирмы «Аbсаm» к Р-гликопротеину (клон JSB-1, рабочее разведение 1:40), к MRP2 (клон М2 III-6, рабочее разведение 1:200.

Оценивают экспрессию bcl-2, Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата, мембранную экспрессию MRP2 в опухолевых клетках.

Определяют степень злокачественности X₁ и при первой степени оценивают в 1 балл, при второй в 2 балла, третьей в 3 балла; определяют присутствие в инфильтративном компоненте дискретных групп клеток Х₂ и оценивают отсутствие в 1 балл, присутствие в 2 балла; определяют присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток Х₃ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают позитивную экспрессию Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата Х₄ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках Х₅ в 2 балла, отсутствие в 1 балл.

Далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=5-3,0X₁-18,5Х₂-25,5Х₃+75,6X₆-19,8Х₅,

5 - коэффициент регрессии свободного члена;

X₁ - степень злокачественности (1 - первая, 2 - вторая, 3 - третья),

-3,0 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₂ - присутствие в инфильтративном компоненте опухоли дискретных групп клеток (1 -нет, 2 - есть),

-18,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₃ - присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток (1 - нет, 2 - есть),

-25,5 - коэффициент регрессии этого признака;

X₄ - позитивная экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 - нет, 2 - есть),

75,6 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₅ - наличие мембранной экспрессии в опухолевых клетках MRP2 (1 - нет, 2 - есть), -19,8 - коэффициент регрессии этого признака;

далее, значение вероятности достижения полной регрессии опухоли Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+e^Y), где

е - математическая константа, равная 2,72;

Способ основан на результатах клинических исследований.

Изучался биопсийный материал от 26 пациенток с инвазивным раком молочной железы. Материал первичного новообразования до проведения неоадъювантной химиотерапии фиксировали в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляли по стандартной методике. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливали согласно рекомендациям ВОЗ (Женева, 2012). Во всех случаях (26 пациенток) гистологический тип новообразований соответствовал инвазивной карциноме неспецифического типа.

На светооптическом уровне в препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, оценивали инфильтративный компонент, в котором определяли наличие трабекулярных, тубулярных, альвеолярных, солидных структур и дискретных групп опухолевых клеток, также оценивали стромальный компонент. В каждом случае в инфильтративном компоненте опухоли определяли наличие или отсутствие дискретных групп опухолевых клеток. В строме опухоли оценивали выраженность воспалительной инфильтрации. Оценивали также степень злокачественности по модифицированной схеме P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson (1957) в модификации C.W. Elston (1991) на основании оценки количества тубулярных структур, митозов и выраженности клеточного полиморфизма.

В дальнейшем для определения молекулярно-генетического субтипа рака молочной железы проводили иммуногистохимическое исследование по стандартной методике. Применяли антитела фирмы Dako к рецепторам эстрогена (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к онкопротеину с-еrbВ-2 (HER2/neu статус) (рабочее разведение 1:500, кроличьи), к Ki-67 (клон MIB-1, RTU, мышиные). Оценку экспрессии рецепторов к половым гормонам проводили количественным методом гистосчета (Histo-Score). При этом подсчитывали процент позитивных клеток и показатель экспрессии в баллах (Петров С.В., 2012). HER2/neu-негативными считались случаи с отсутствием окрашивания или слабым прерывистым мембранным окрашиванием. К НЕР2/neu-позитивным относили случаи с интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток. Случаи с умеренным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток или интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием менее чем в 10% клеток, требующие выявления наличия амплификации гена HER2/neu методом FISH или CICH/SISH, не включали в исследование. На основании сочетания экспрессии рецепторов к эстрогенам, прогестерону, HER2/neu статуса и Ki-67 определяли 4 основных молекулярно-генетических типа: люминальный А (позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативный HER2/neu статус, экспрессия Ki-67<20%); люминальный В (позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативный HER2/neu статус, экспрессия Ki-67≥20%); трижды негативный (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативный HER2/neu статус); тип с гиперэкспрессией HER2/neu (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, позитивный HER2/neu статус). Во всех случаях (26 пациенток) молекулярно-генетический субтип рака молочной железы соответствовал трижды негативному.

Применяли антитела фирмы «Novocastra» к bcl-2 (клон bcl2/100/D5, рабочее разведение 1:80); фирмы «Аbсаm» к Р-гликопротеину (клон JSB-1, рабочее разведение 1:40), к MRP2 (клон М2 III-6, рабочее разведение 1:200), к BCRP (клон ВХР-21, рабочее разведение 1:20).

Оценивали экспрессию bcl-2, Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата, мембранную экспрессию MRP2 в опухолевых клетках.

Определяли степень злокачественности Х₁ и при первой степени оценивали в 1 балл, при второй в 2 балла, третьей в 3 балла; определяли присутствие в инфильтративном компоненте дискретных групп клеток Х₂ и оценивали отсутствие в 1 балл, присутствие в 2 балла; определяли присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток Х₃ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивали позитивную экспрессию Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата Х₄ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивали наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках Х₅ в 2 балла, отсутствие в 1 балл.

Далее рассчитывали значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=5-3,0X₁-18,5Х₂-25,5Х₃+75,6X₄-19,8Х₅,

5 - коэффициент регрессии свободного члена;

X₁ - степень злокачественности (1 - первая, 2 - вторая, 3 - третья),

-3,0 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₂ - присутствие в инфильтративном компоненте опухоли дискретных групп клеток (1 - нет, 2 - есть),

-18,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₃ - присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток (1 - нет, 2 - есть),

-25,5 - коэффициент регрессии этого признака;

X₄ - позитивная экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 - нет, 2 - есть),

75,6 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₅ - наличие мембранной экспрессии в опухолевых клетках MRP2 (1 - нет, 2 - есть),

-19,8 - коэффициент регрессии этого признака.

Далее, значение вероятности достижения полной регрессии опухоли Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+е^Y),где

е - математическая константа, равная 2,72.

и при Р≥0,5 прогнозировали высокую, а при Р<0,5 - низкую вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии.

Полученная модель имеет высокую степень достоверности: χ²=12,05; р=0,03. Чувствительность модели составила 100%, специфичность - 100%.

Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Пациентка И., 51 год с инвазивной карциномой неспецифического типа, II В клинической стадии (T2N1M0) люминальным В молекулярно-генетическом подтипом. При гистологическом исследовании биопсионного материала в инфильтративном компоненте ИКНТ отсутствовали дискретные опухолевые клетки (1 балл), степень злокачественности была второй (2 балла). При иммуногистохимическом-исследовании в опухолевых клетках отсутствовала мембранная экспрессия MRP2 (1 балл), отсутствовала позитивная экспрессия bcl-2 в клетках воспалительного инфильтрата (1 балл), отсутствовала экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 балл). Далее было определено значение Y по уравнению

Y=5-3,0*2-18,5*1-25,5*1+75,6*1-19,8*1=10,8;

Р=[2,72^10,8/(1+2,72^10,8)]=0,99.

Полученное значение Р=0,99 позволило отнести пациентку к группе высокого риска развития местного рецидива. После проведения 4 курсов НАХТ по схеме FAC у пациентки наблюдалась полная морфологическая регрессия опухоли. При гистологическом исследовании операционного материала подтверждена IV степень лечебного патомофроза.

Пример 2. Пациентка Т., 44 года с инвазивной карциномой неспецифического типа, II В клинической стадии (T2N1M0) люминальным В молекулярно-генетическом подтипом. При гистологическом исследовании биопсионного материала в инфильтративном компоненте ИКНТ присутствовали дискретные опухолевые клетки (2 балла), степень злокачественности была третьей (3 балла). При ИГХ-исследовании в опухолевых клетках присутствовала позитивная мембранная экспрессия MRP2 (2 балла), отсутствовала позитивная экспрессия bcl-2 в клетках воспалительного инфильтрата (1 балл), отсутствовала экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 балл). Далее было определено значение Y по уравнению:

Y=5-3,0*3-18,5*2-25,5*1+75,6*1-19,8*2=-30,5;

Р=[2,72^-30,5/(1+2,72^-30,5)]=0.

Рассчитанное по формуле значение Р составило 0, что позволило отнести пациентку к группе с низкой вероятностью развития полной регрессии новообразования. После проведения 4 курсов НАХТ по схеме FAC у пациентки наблюдалась частичная регрессия опухоли. При гистологическом исследовании операционного материала в опухолевой ткани отмечена I степень лечебного патоморфоза.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью и информативностью прогнозировать вероятность развития полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы.

Источники информации

1. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 г. / под ред. М.И. Давыдов, Е.М. Аксель. - М.: Издательская группа РОНЦ, 2014. - С. 46.

2. Lakhani S.R. IARC world health organization classification of tumours. WHO classification of tumours of the breast / S.R. Lakhani [et al.] - Lyon: WHO Press, 2012. - 240 p.

3. Youlden D.R. The descriptive epidemiology of female breast cancer: an international comparison of screening, incidence, survival and mortality / D.R. Youlden [et al.] // Cancer Epidemiology. - 2012. - Vol. 36, N 3. - P. 237-248.

4. Минимальные клинические рекомендации Европейского Общества Медицинской Онкологии (ESMO): пер. с англ.- М.: Издательская группа РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, 2010. - С. 8-32.

5. Gampenrieder S.P. Neoadjuvant Chemotherapy and Targeted Therapy in Breast Cancer: Past, Present, and Future / S.P. Gampenrieder, G. Rinnerthaler, R. Greil // J. Oncol. - 2013. - 732047. Epub 2013 Aug 20.

6. Redden M.H. Neoadjuvant chemotherapy in the treatment of breast cancer / M.H. Redden, G.M. Fuhrman // Surg. Clin. North Am. - 2013. - Vol.93, N 2. - P. 493-499.

7. Cazzaniga M. Breast cancer chemoprevention: old and new approaches / M. Cazzaniga, B. Bonanni // J. Biomed. Biotechnol. - 2012. - doi: 10.1155/2012/985620.

8. von Minckwitz G. Update on neoadjuvant/preoperative therapy of breast cancer: experiences from the German Breast Group / G. von Minckwitz, M. Untch, S. Loibl // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. - 2013. - Vol.25, N 1. - P. 66-73.

9. Wind N.S. Multidrug resistance in breast cancer: from in vitro models to clinical studies / N.S. Wind, I. Holen. // Int. J. Breast Cancer. - 2011. - doi: 10.4061/2011/967419

10. Perou C.M. Molecular portraits of human breast tumours / CM. Perou [et al.] // Nature. - 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

11. Sorlie T. Gene expression patterns of breast carcinomas distinguish tumor subclasses with clinical implications / T. Sorlie [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2001. - Vol. 98, N 19. - P. 10869-10874.

12. Anders C.K. Biology, metastatic patterns, and treatment of patients with triple-negative breast cancer / C.K. Anders, L.A. Carey // Clin. Breast Cancer. - 2009. - Suppl. 2. - P. 73-81.

13. Cheang M.C Ki67 index, HER2 status, and prognosis of patients with luminal В breast cancer / M.C Cheang [et al.] // J. Natl. Cancer. Inst. - 2009. - Vol. 101, N 10. - P. 736-750.

14. Stavrovskaya A.A. Cellular mechanisms of multidrug resistance of tumor cells / A.A. Stavrovskaya // Biochemistry. - 2000. - Vol.65, N 1. - P. 95-106.

15. Fukuda Y. ABC transporters and their role in nucleoside and nucleotide drug resistance / Y. Fukuda, J.D. Schuetz // Biochem. Pharmacol. - 2012. - Vol. 83, N 8. - P. 1073-1083.

16. Kathawala R.J. The modulation of ABC transporter-mediated multidrug resistance in cancer: a review of the past decade / R.J. Kathawala [et al.] // Drug Resist. Urdat. - 2015. - Vol. 18. - P. 1-17.

17. Videira M. Deconstructing breast cancer cell biology and the mechanisms of multidrug resistance / M. Videira, R.L. Reis, M.A. Brito // Biochim. Biophys. Asta. - 2014. - Vol. 1846, N 2. - P. 312-325.

18. Wikens S. Structure and mechanism of ABC transporters / S. Wikens // F1000Prime Rep. - 2015. - Vol. 3. - P. 14.

Способ прогнозирования степени вероятности полной регрессии при проведении неоадъювантной химиотерапии у пациенток с люминальным В молекулярно-генетическим субтипом рака молочной железы путем гистологического исследования препаратов ткани первичного новообразования до проведения неоадъювантной химиотерапии, отличающийся тем, что в препаратах оценивают инфильтративный компонент, в котором определяют наличие трабекулярных, тубулярных, альвеолярных, солидных структур и дискретных групп опухолевых клеток, также оценивают стромальный компонент, в каждом случае в инфильтративном компоненте опухоли определяют наличие или отсутствие дискретных групп опухолевых клеток в строме опухоли оценивают выраженность воспалительной инфильтрации, степень злокачественности по модифицированной схеме на основании оценки количества тубулярных структур, митозов и выраженности клеточного полиморфизма, также с помощью иммуногистохимического исследования оценивают экспрессию bcl-2, Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата, мембранную экспрессию MRP2 в опухолевых клетках, также определяют степень злокачественности X₁ и при первой степени оценивают в 1 балл, при второй в 2 балла, третьей в 3 балла; определяют присутствие в инфильтративном компоненте дискретных групп клеток Х₂ и оценивают отсутствие в 1 балл, присутствие в 2 балла; определяют присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток Х₃ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают позитивную экспрессию Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата Х₄ в 2 балла, отсутствие в 1 балл; оценивают наличие мембранной экспрессии MRP2 в опухолевых клетках Х₅ в 2 балла, отсутствие в 1 балл, далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=5-3,0X₁-18,5Х₂-25,5Х₃+75,6X₄-19,8Х₅,

5 - коэффициент регрессии свободного члена;

X₁ - степень злокачественности (1 - первая, 2 - вторая, 3 - третья),

-3,0 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₂ - присутствие в инфильтративном компоненте опухоли дискретных групп клеток (1-нет, 2 - есть),

-18,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₃ - присутствие в воспалительном инфильтрате bcl-2-позитивных клеток (1 - нет, 2 - есть),

-25,5 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₄ - позитивная экспрессия Р-гликопротеина в клетках воспалительного инфильтрата (1 - нет, 2 - есть),

75,6 - коэффициент регрессии этого признака;

Х₅ - наличие мембранной экспрессии в опухолевых клетках MRP2 (1 - нет, 2 - есть), -19,8 - коэффициент регрессии этого признака.

далее, значение вероятности достижения полной регрессии опухоли Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+e^Y), где

е - математическая константа, равная 2,72;

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития аномальных маточных кровотечений пубертатного периода у девочек-подростков, рожденных с задержкой внутриутробного роста плода.

Способ определения топирамата в плазме крови // 2631613

Изобретение относится к фармакологии и может быть использовано для проведения терапевтического лекарственного мониторинга топирамата у пациентов в условиях стационара.

Способ прогнозирования развития печеночной недостаточности при механической желтухе в эксперименте // 2631596

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования развития печеночной недостаточности при механической желтухе. Дополнительно проводят приготовление мазков крови с последующим сканированием эритроцитов методом полуконтактной атомно-силовой микроскопии и измерения их параметров, затем определяют индекс печеночной недостаточности, учитывая показатель значения билирубина, гаммаглютамилтрасферазы, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрасферазы, относительный объем эритроцита, который определяют как ΔV=V/V0, где V - объем эритроцита в эксперименте, a V0 - объем эритроцита в норме, оба объема вычисляют по данным атомно-силовой микроскопии.

Способы и композиции для улучшения популяции кишечной микробиоты и их осуществления // 2631595

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для улучшения структуры кишечной микробиоты. Описано применение берберина, позволяющее избирательно увеличивать первую популяцию кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у субъекта.

Способ прогнозирования осложнений у пациентов в острый период политравмы // 2631028

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования осложнений у пациента в острый период политравмы путем исследования показателей крови и мочи, отличающийся тем, что при поступлении у пациента определяют показатели концентрации глюкозы, общего белка и натрия в сыворотке крови, фибриногена в плазме, белка в моче, в цельной крови количество лейкоцитов и тромбоцитов, определяют активированное частичное тромбопластиновое время, тромбиновое время и протромбиновый индекс, сравнивают полученные результаты с показателями нормы, используемыми в лаборатории, и оценивают вероятность развития летального исхода и осложнений в виде пневмонии, жировой эмболии и нагноения.

Способ прогнозирования развития бронхиальной астмы у больных полипозным риносинуситом // 2630972

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу прогнозирования развития бронхиальной астмы у больных полипозным риносинуситом. Способ прогнозирования развития бронхиальной астмы у больных полипозным риносинуситом, заключающийся в том, что в крови пациентов определяют молекулы средней массы (МСМ), ед.оп.пл., измеряют температуру выдыхаемого и вдыхаемого воздуха (Т выд), °С, и (Т вдых), °С, и определяют разность температур (ΔT), °С, между температурой вдыхаемого и выдыхаемого воздуха, прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения: D=+5,028×Т выд-0,405×ΔТ-8,910×МСМ, где граничное значение дискриминантной функции 152,16; при D больше или равно граничному значению дискриминантной функции прогнозируют отсутствие развития бронхиальной астмы у больных с полипозным риносинуситом; при D меньше граничного значения дискриминантной функции прогнозируют развитие бронхиальной астмы у больных с полипозным риносинуситом.

Способ прогноза развития постперикардиотомного синдрома у больных ибс, перенесших аортокоронарное шунтирование // 2630592

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогноза развития постперикардиотомного синдрома (ПКТС) у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), перенесших аортокоронарное шунтирование, характеризующийся тем, что у пациентов через сутки после операции определяют активность аргиназы в эритроцитах и арилэстеразную активность параоксоназы (PON) в плазме крови, затем рассчитывают коэффициент К по формуле: К = аргиназа/PON, где «аргиназа» - это активность аргиназы, МЕ/(г Hb); «PON» - арилэстеразная активность параоксоназы, МЕ/(мг белка); и при значении коэффициента К, равном 0,39 и более, у пациента прогнозируют развитие ПКТС с вероятностью 67%.

Способ тактики лечения эндометриоза при нежелательной беременности // 2630589

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения эндометриоза при нежелательности беременности. Для этого определяют коэффициент активности эндометриоза (КАЭ) как отношение значений уровня клеток целомического эпителия СА-125 на 2-3 и 7-9 дни менструального цикла (МЦ), при значении КАЭ до 1,4 пациентке назначают постоянное использование комбинированных гормональных контрацептивов (КГК); при КАЭ от 1,5 до 2,9 назначают или КГК в непрерывном режиме, или гестагены также в непрерывном режиме.

Способ оценки риска развития простудных заболеваний у лиц пожилого возраста // 2630587

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки риска развития простудных заболеваний у лиц пожилого возраста, заключающийся в исследовании ротовой жидкости пациента пожилого возраста с определением концентрации иммуноглобулина А и концентрации иммуноглобулина G, отличающийся тем, что исследование проводят через час после еды, двукратно с разницей в 30 дней и полость рта за 15 минут до забора ротовой жидкости промывают раствором натрия хлорида 0,9%, далее рассчитывают отношение концентрации иммуноглобулина А к концентрации иммуноглобулина G и в случае снижения отношения концентрации иммуноглобулина А к концентрации иммуноглобулина G при втором исследовании в 2 раза и более пациента относят в группу высокого риска развития простудных заболеваний у лиц пожилого возраста.

Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах // 2630573

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах. Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем исследования периферической венозной крови до начала сохраняющей терапии у беременных женщин с клиническими признаками угрожающих преждевременных родов в сроках гестации 24-34 недели, заключающийся в том, что в плазме крови определяют показатель резистентности активного V фактора свертывания крови к активированному протеину С и при его значении, равном 0,94 или менее, прогнозируют преждевременные роды.

Способ персонализированного ведения беременных с инфекционной патологией урогенитального тракта на ранних сроках гестации // 2632435

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, акушерству и гинекологии, и может использоваться для ведения беременных с инфекционной патологией урогенитального тракта на ранних сроках гестации. Для этого у беременных исследуют состояние мукозального иммунитета, течение инфекционного и гестационного процессов. При выявлении клинической картины невынашивания беременности, дисбиоза микробиоценоза биотопа слизистых открытых полостей или воспалительного процесса биотопа слизистых открытых полостей, наличии клинических проявлений инфекционного процесса и/или верификации возбудителя проводят профилактику прерывания беременности, витаминотерапию, антибиотикотерапию, назначают иммуноглобулин и иммуномодулятор с антимикробной активностью. При выявлении клинической картины невынашивания беременности, нормоценоза или промежуточного типа микробиоценоза биотопа слизистых открытых полостей, клинических проявлений инфекционного процесса и/или верификации возбудителя проводят профилактику прерывания беременности, витаминотерапию, антибиотикотерапию, назначают иммуномодулятор с антимикробной активностью. При физиологическом течении беременности, выявлении дисбиоза микробиоценоза биотопа слизистых открытых полостей или воспалительного процесса биотопа слизистых открытых полостей, клинических проявлений инфекционного процесса и/или верификации возбудителя назначают витаминотерапию и иммуномодулятор с антимикробной активностью. При физиологическом течении беременности, выявлении нормоценоза или промежуточного типа микробиоценоза биотопа слизистых открытых полостей, клинических проявлений инфекционного процесса и/или верификации возбудителя проводят витаминотерапию. Способ позволяет достичь адекватного медикаментозного и иммунологического лечения за счет проведения персонализированного подхода к выбору тактики лечения при профилактике осложнений антибактериальной терапии путем уточнения показаний к ее проведению. 5 пр.

Способ прогноза риска развития инфекционно-воспалительных осложнений у женщин после сверхранних преждевременных родов // 2632521

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и касается способа раннего прогнозирования развития инфекционно-воспалительных осложнений (ИВО). У женщин после сверхранних преждевременных родов перед родами устанавливают: имели ли место роды ранее, страдает ли женщина эндокринной патологией и никотинозависимостью, была ли угроза прерывания беременности в первом триместре данной беременности, имеет ли место истмико-цервикальная недостаточность при данной беременности. Берут бактериологический посев содержимого цервикального канала и определяют наличие грамотрицательной микрофлоры. Производят забор венозной крови натощак из правой локтевой вены в вакуумные пробирки в количестве 5 мл и определяют наличие анемии и количество лейкоцитов в плазме венозной крови на биохимическом автоматическом анализаторе «Sapphire 400». С учетом полученных данных вычисляют прогностический индекс по математической формуле. В зависимости от полученного значения индекса прогнозируют высокий риск развития ИОВ у женщин после сверхранних преждевременных родов либо делают заключение об отсутствии данного риска у родильницы. Способ позволяет до родов выявить группу высокого риска развития инфекционно-воспалительных осложнений после сверхранних преждевременных родов за счет определения информативных данных анамнеза и лабораторных данных. 2 пр.

Способ химиолучевого лечения орофарингеального рака // 2632542

Изобретение относится к медицине, онкологии, радиологии, лучевой терапии. Способ лучевой терапии (ЛТ) орофарингеального рака (ОФР) на фоне соответствующей химиотерапии включает предварительное определение у больного массы тела и диаметра шеи и предлучевую подготовку с использованием КТ-топометрии и расчета дозиметрического плана. При этом перед началом лечения у больного дополнительно определяют содержание альбумина плазмы крови. В качестве ЛТ используют 3D конформную ЛТ, причем при достижении суммарной очаговой дозы облучения больного (СОД) 20 Гр повторно определяют массу тела, содержание альбумина плазмы крови и диаметр шеи. При снижении хотя бы одного из этих показателей более чем на 5% повторно выполняют КТ-топометрию и расчет дозиметрического плана облучения, в соответствии с чем продолжают ЛТ до СОД 40 Гр. Затем снова определяют показатели массы тела, альбумина плазмы крови и диаметра шеи больного и при повторном снижении хотя бы одного показателя более чем на 5% вновь корректируют дозиметрический план, в соответствии с которым продолжают ЛТ до достижения СОД 70 Гр. Способ обеспечивает оптимальную тактику адаптивного химиолучевого лечения благодаря своевременной коррекции дозиметрического плана, исключая превышение пороговых значений предельно допустимых доз для органов риска, попадающих в зону облучения, а также исключая некорректность охвата 95%-ной изодозой первичной опухоли и зон регионарного лимфооттока. 1 пр., 1 табл.

Устройство для определения функциональной активности комплемента // 2632694

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной иммунологии, а именно к устройствам для определения функциональной активности комплемента в крови человека при диагностике ряда заболеваний. Устройство включает корпус, внутри которого расположен измерительный блок, содержащий модуль для размещения тестируемых образцов, источники света для подсветки образцов и видеокамеры с микрообъективами для фиксации состояния образцов, блок питания и микроконтроллер, подсоединенный к персональному компьютеру. Модуль для размещения тестируемых образцов выполнен в виде стрипа с ячейками и снабжен узлом встряхивания. Видеокамеры с микрообъективами объединены в блок таким образом, что каждая ячейка стрипа имеет размещенную над ней видеокамеру с микрообъективом. Измерительный блок снабжен узлом термостатирования, выполненным в виде теплового насоса на основе элемента Пелтье и термодатчика. При этом источники света для подсветки образцов размещены под каждой ячейкой стрипа и образуют осветительный узел темнопольной микроскопии. Обеспечивается повышение воспроизводимости анализов, снижения трудоемкости их проведения, сокращение времени на подготовку образцов, повышение надежности устройства и уменьшение его габаритов. 1 з.п. ф-лы, 4 ил.

Способ определения оптимального интервала между операциями эндопротезирования при билатеральном гонартрозе или коксартрозе у пациентов с остеопорозом // 2632705

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для определения оптимального интервала между операциями эндопротезирования при лечении двусторонних заболеваний тазобедренных или коленных суставов. Способ включает индивидуальное обследование больного, через 3 месяца после первой операции исследуют дополнительно Т-критерий шейки бедренной кости на стороне планируемой операции, уровень остеокальцина, уровень β-Cross laps, уровень витамина Д в сыворотке крови. Если 10-летний риск основных остеопоротических переломов менее 10%, Т-критерий шейки бедренной кости на стороне планируемой операции больше -1 SD, уровень остеокальцина, уровень β-Cross laps, уровень витамина Д в сыворотке крови в норме, то операцию второго эндопротезирования сустава можно выполнять через 3 месяца после первой. Если 10-летний риск основных остеопоротических переломов более 10% и менее 20%; Т-критерий шейки бедренной кости на стороне планируемой операции меньше -1 SD и больше -2,5 SD; уровень остеокальцина ниже нормы, уровень β-Cross laps выше нормы, уровень витамина Д в сыворотке крови ниже нормы, то операцию второго эндопротезирования сустава можно выполнять не ранее чем через 6 месяцев после первого эндопротезирования. Если 10-летний риск основных остеопоротических переломов более 20%; Т-критерий шейки бедренной кости на стороне планируемой операции меньше -2,5 SD, уровень остеокальцина ниже нормы, уровень β-Cross laps выше нормы, уровень витамина Д в сыворотке крови ниже нормы, то операцию второго эндопротезирования можно выполнять не ранее чем через 12 месяцев после первого. Использование изобретения позволяет оценить риски ранней асептической нестабильности эндопротеза, определить оптимальный срок выполнения второй операции, снизить количество осложнений, снизить затраты на лечение и улучшить качество жизни пациентов. 2 табл., 3 пр.

Прибор для биомедицинских и токсикологических исследований // 2632719

Изобретение относится к области экологии, фармакологии, токсикологии, медицины и касается автоматизации определения подвижности биологических тест-объектов на 96-луночном планшете. Прибор для измерения подвижности тест-объектов в исследованиях для определения активности комплемента сыворотки крови содержит корпус, установочный узел для размещения планшета с пробами в лунках, шаговый привод, блок управления, подключенный к персональному компьютеру, и фотометрический модуль, представляющий собой модуль динамического светорассеяния, выполненный в виде источника излучения, размещенного над лунками планшета, и фотоприемника излучения, расположенного под лунками планшета и под углом к осевой линии источника излучения. Достигается ускорение анализа, повышение надежности механической части прибора, уменьшение габаритов устройства, а также - удобство пользования. 1 пр., 3 ил.

Электрохимический способ выявления аминокислотных замен и идентификации пептидов // 2633078

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах. Для осуществления способа на печатный графитовый электрод наносят аликвоту 60-100 мкл 50 мкМ раствора пептида в буферном растворе. Регистрируют квадратно-волновую вольтамперограмму окисления в области от 0 до 1,5 В (отн. Ag/AgCl). Измеряют потенциалы максимумов и высоты полученных сигналов окисления аминокислотных остатков - пиков или волн и фиксируют результаты. По различию в положении потенциалов максимумов сигналов окисления и их интенсивности, зная аминокислотные последовательности для группы исследуемых пептидов или имея базу данных, полученную ранее, проводят идентификацию пептидов. При сравнении результатов относительно контроля - «нормального» пептида, констатируют аминокислотную замену. Использование изобретения обеспечивает электрохимическую идентификацию пептидов и выявление в их структуре аминокислотных замен. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 1 пр.

Способ раннего выявления иммунологических проявлений побочного действия кортикостероидов при нефротическом синдроме у детей // 2633592

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для индивидуальной количественной оценки ранних проявлений неблагоприятного побочного действия кортикостероидных препаратов на иммунологические процессы в организме ребенка при терапии нефротического синдрома. Для этого используют показатели уровня лейкоцитов периферической крови (Алейк), процентного содержания в крови всех форм нейтрофилов (Анейт) и моноцитов (Амон), на основании которых проводят расчет коэффициента модификации Млейк – лейкоцитов, Мнейт – нейтрофилов, Ммон – моноцитов по формулам: Млейк = (Алейк – 3,5) х 1,1; Мнейт = (Анейт – 19) х 0,5; Ммон = (Амон – 2) х 2. С учетом коэффициента модификации каждого показателя рассчитывают индекс иммунологических реакций (ИИР) по формуле: при значениях ИИР > 13,5 ед. определяют неблагоприятные побочные реакции кортикостероидных препаратов на иммунологические процессы в организме ребенка. Способ позволяет своевременно провести мероприятия по фармакологической коррекции возникающих неблагоприятных побочных реакций процессы в организме ребенка. 9 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования метаболического синдрома у больных хронической обструктивной болезнью легких // 2633931

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано для прогнозирования метаболического синдрома у больных с хронической обструктивной болезнью легких. Сущность изобретения заключается в том, что в способе прогнозирования метаболического синдрома у больных хронической обструктивной болезнью легких, включающем определение прогностических факторов риска, исследуют исходные значения: сосудистого эндотелиального фактора роста - VEGF, церулоплазмина - ЦП, иммунореактивного инсулина - ИРИ, глюкозы натощак - глюкозы, индекса массы тела - ИМТ, триглицеридов – ТГ, и решают дискриминантное уравнение: Д=-2,75+0,35×VEGF-0,65×ЦП+0,07×ИРИ+0,38×Глюкоза+0,26×ИМТ+1,28×ТГ, где Д - дискриминантная функция, граничное значение которой равно нулю, VEGF - исходный уровень сосудистого эндотелиального фактора, измеренный в пг/мл; ЦП - исходный уровень церулоплазмина, измеренный в мкг/мл; ИРИ - исходный уровень иммунореактивного инсулина, измеренный в мкЕД/мл; глюкоза - исходный уровень гликемии натощак, измеренный в ммоль/л; ИМТ - исходный уровень индекса массы тела, измеренный в кг/м2; ТГ - исходный уровень триглицеридов, измеренный в ммоль/л; при Д больше или равно нулю прогнозируют развитие метаболического синдрома в течение года, а при Д меньше нуля прогнозируют неразвитие метаболического синдрома. Изобретение позволяет повысить эффективность прогнозирования развития метаболического синдрома у больных с хронической обструктивной болезнью легких путем интегральной оценки сосудистого эндотелиального фактора роста, маркера перекисного окисления липидов, маркера инсулинорезистентности, гликемии, индекса массы тела, липидного обмена.

Способ ранней оценки риска инфекционных осложнений у пациентов с травмами // 2634036

Изобретение относится к области медицины, в частности к неотложной медицине и травматологии. Определяют состояние пациента путем измерения параметров крови и клинических показателей. Причем в качестве параметров крови измеряют уровень гемоглобина в крови. Определяют наличие алкогольного опьянения, индекс Кердо и, с учетом возраста пациента и вида травмы, определяют риск инфекционных осложнений у пациента путем вычисления баллов. Суммируют полученные баллы и в зависимости от полученного значения оценивают минимальный риск, умеренный риск, высокий риск или крайне высокий риск инфекционных осложнений. Способ позволяет осуществить прогноз развития инфекционных заболеваний за счет определения информативных клинических и лабораторных показателей с учетом возраста пациента и вида травмы на дооперационном этапе. 1 табл., 3 пр.