Способ определения показаний к проведению селективной адсорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами

Авторы патента:

Рогальская Екатерина Анатольевна (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2634262:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н. Бакулева" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦССХ им. А.Н. Бакулева" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике сепсиса, вызванного грамотрицательными микроорганизмами, в отделении реанимации и интенсивной терапии. Способ определения показаний к проведению селективной адсорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами, включает исследование температуры тела, общего количества лейкоцитов, нейтрофильного сдвига, уровня прокальцитонина в плазме крови, определение активности эндотоксина с помощью хемолюминесцентного анализа в тесте ЕАА; при температуре тела менее 36°C и более 38°C, общем количестве лейкоцитов менее 4×10⁹/л и более 12×10⁹/л, нейтрофильном сдвиге более 10%, содержании прокальцитонина более 2 нг/мл и активности эндотоксина, равной или более 0,6, показано проведение процедур селективной сорбции эндотоксина, при выявлении активности эндотоксина менее 0,6 оценивают ответ нейтрофилов по уровню показателя "Response" в тесте ЕАА, при уровне "Response" менее 0,5 дополнительно исследуют содержание в крови пациента пресепсина, при концентрации пресепсина 1500 пг/мл и выше назначают процедуры селективной адсорбции эндотоксина. 1 пр., 1 табл.

Использование новых высокотехнологичных подходов в лечении больных сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами, связано с необходимостью экспресс-диагностики эндотоксинемии.

Известен способ определения показаний селективной адсорбции эндотоксина (Кулабухов В.В., Чижов А.Г., Кудрявцев А.Н. Селективная липополисахаридная гемосорбция как ключевое звено патогенетически обоснованной терапии грамотрицательного сепсиса. Медицинский алфавит. Неотложная медицина. - 2010. №3. С. 60-66), который включает определение совокупности параметров: клинические признаки септического шока, бактериологический анализ, температура тела, общее количество лейкоцитов, нейтрофильный сдвиг, концентрация прокальцитонина, значения ЛАЛ-теста. Процедуры селективной адсорбции эндотоксина назначают при гипертермии более 38°С, общем количестве лейкоцитов более 12×10⁹/л, нейтрофильном сдвиге более 10%, концентрации прокальцитонина более 2,0 нг/мл, значениях ЛАЛ-теста 1,40 ЕдЭ/мл.

Однако в современной литературе имеются многочисленные данные о высокой частоте ложноположительных результатов ЛАЛ-теста. Поскольку сходство факторов коагуляции мечехвоста, клетки которого используются в ЛАЛ-тесте, с факторами свертывающей системы млекопитающих очень высоко, гелирование лизата могут вызывать тромбин и тромбопластин человека. Помимо взаимодействия с компонентами плазмы пациента, получению ложноположительных значений способствуют условия постановки теста. Даже незначительные колебания температуры (36°С или 38°С вместо положенных 37°С) или рН используемых реактивов (6,0 или 8,0 вместо 7,0) увеличивают частоту положительных результатов «гель-тромб» ЛАЛ-теста в 1,5 и 5,0 раз соответственно.

К другим затруднениям интерпретации результатов ЛАЛ-теста относят отсутствие в клинических исследованиях взаимосвязи значений теста с уровнем активации системы комплемента и экспрессией цитокинов мононуклеарными клетками, вызванной грамотрицательной микрофлорой; обнаружение положительных значений теста при наличии грибковой инфекции в системном кровотоке, что связано с активацией коагуляционного каскада теста (1→3)-β-D-глюканами.

Из литературы также известно, что для оценки эндотоксиновой нагрузки используется определение уровня активности эндотоксина ЕАА (Endotoxin Activity Assay). В основу этого теста положена реакция моноклональных антител к липиду А эндотоксина. Этот комплекс антиген-антитело (АГ-АТ) активирует нейтрофилы и вызывает в них окислительный «взрыв». Активные формы кислорода, вырабатываемые нейтрофилами, измеряются с помощью хемилюминесцентной реакции с люминолом (Romaschin A.D., Harris D.M., Ribeiro М.В., Paice J., Foster D.M., Walker P.M., Marshall J.C. A rapid assay of endotoxin in whole blood using autologous neutrophil dependent chemiluminescence // Journal of Immunological Methods. Elsevier; 1998; 212: 169-185).

Известен способ определения показаний к проведению селективной адсорбции эндотоксина у больных сепсисом (Попок З.В. Селективная сорбция эндотоксина в комплексной интенсивной терапии сепсиса у больных после кардиохирургических операций // Автореферат дис. канд. мед. наук. Москва, 2010. - 24 с.), при котором определяют температуру тела, общее количество лейкоцитов, нейтрофильный сдвиг, наличие очага инфекции и недостаточности органов и систем, уровень активности эндотоксина (ЕАА), титр эндотоксина по ЛАЛ-тесту, концентрацию прокальцитонина.

Процедуры селективной адсорбции эндотоксина назначают при следующих значениях показателей: гипертермия более 38°С, общее количество лейкоцитов более 12×10⁹/л или менее 4×10⁹/л, нейтрофильный сдвиг более 10%, наличие очага инфекции и недостаточность более 2 органов и систем, уровень активности эндотоксина (ЕАА) более 0,6, титр эндотоксина по ЛАЛ-тесту более 0,72 ЕдЭ/мл, концентрация прокальцитонина более 2 нг/мл. При уровне ЕАА менее 0,6 селективная адсорбция эндотоксина не показана. Однако известный способ не учитывает дополнительный показатель "Response" в тесте ЕАА, который отражает уровень способности нейтрофилов пациента к окислительному «взрыву» (маркер фагоцитарной активности нейтрофилов in vitro).

Известен также способ назначения процедур селективной адсорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами (Четвериков М.В. Селективная адсорбция эндотоксина при хирургическом сепсисе у онкологических больных // Дис.канд. мед. наук. Ростов-на-Дону, 2015. - 131 с.), выбранный за прототип, при котором учитывают показатель "Response", температуру тела, частоту сердечных сокращений, частоту дыхания или парциального давления углекислого газа в артериальной крови, общее количество лейкоцитов, нейтрофильный сдвиг, значения теста ЕАА и концентрацию прокальцитонина. Назначение процедур селективной адсорбции эндотоксина проводят при наличии гипертермии более 38,3°С или гипотермии менее 36°С, тахикардии более 90 уд./мин, тахипноэ более 20 вдохов/мин или парциального давления углекислого газа в артериальной крови (раСО₂) менее 32 мм вод.ст., общего количества лейкоцитов более 12×10⁹/л и менее 4×10⁹/л, нейтрофильного сдвига более 10%, значений теста ЕАА более 0,6 или 0,4-0,6 при уровне "Response" менее 0,5, прокальцитонина более 2 нг/мл. Недостатком известного способа является то, что он не учитывает пациентов со значениями ЕАА менее 0,4 при уровне "Response" менее 0,5 и высокой фагоцитарной активностью резистентных нейтрофилов, которые также нуждаются в процедурах селективной адсорбции эндотоксина.

Технической проблемой является создание более точного и информативного способа определения показаний к проведению селективной адсорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами.

Технический результат от использования способа заключается в расширении диагностических показателей экспресс-диагностики определения показаний к проведению селективной сорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами.

Измерение активности эндотоксина в тесте ЕАА напрямую связано со способностью нейтрофилов, опсонизированных иммунными комплексами «эндотоксин-АТ к эндотоксину», к фагоцитарной активности с последующим респираторным взрывом, интенсивность которого фиксируется автоматическим хемилюминометром. Принцип хемилюминесцентной оценки фагоцитарной активности основан на CR1/CR3-рецепторной активации нейтрофилов цельной крови к продуцированию оксидантов, вступающих в реакцию с люминолом. В тесте ЕАА имеется дополнительный показатель "Response", который отражает уровень способности нейтрофилов пациента к окислительному ответу.

Авторами обнаружено, что в группе пациентов с критически низким уровнем "Response" обращают на себя внимание низкие значения ЕАА и высокая концентрация пресепсина. Это обусловлено тем, что в системном кровотоке после связывания с эндотоксином мембранный CD14 отщепляется от моноцита и в растворимой форме выходит в циркуляцию. Высвободившиеся в результате активации фагоцитоза лизосомальные протеиназы расщепляют растворимый CD14 с образованием фрагмента, который в настоящее время получил название пресепсин. Производитель позиционирует данный тест как показатель активации фагоцитоза. Таким образом, уровень пресепсина отражает фагоцитоз in vivo, тогда как тест на измерение активности эндотоксина ЕАА использует способность нейтрофилов к фагоцитозу in vitro.

Авторами сделано предположение, что нейтрофилы пациента не могут вступить в реакцию с иммунными комплексами в тесте ЕАА, поскольку их CR1/CR3-рецепторы заняты или истощены длительным поступлением в кровоток массивных доз эндотоксина, вызывающих высокую фагоцитарную активность, которую отражает значительно увеличенная концентрация пресепсина (ПСП).

Анализ уровня "Response" помогает составить более полную и достоверную оценку клинического состояния пациента в каждом конкретном исследовании уровня эндотоксинемии, а использование значений "Response" и ПСП в способах назначения и мониторинга этиопатогенетической терапии сепсиса повышает информативность всего комплекса лабораторных исследований уровня эндотоксинемии и эффективность проводимой терапии в целом, что позволяет не пропустить пациентов с низкой иммунной реактивностью организма, нуждающихся в адсорбции.

Сущность изобретения состоит в следующем.

У пациентов с подозрением на сепсис, вызванный грамотрицательными микроорганизмами, оценивают температуру тела, общее количество лейкоцитов, нейтрофильный сдвиг, концентрацию прокальцитонина, активность эндотоксина тестом ЕАА и уровень адекватности ответа нейтрофилов "Response", концентрацию пресепсина. Селективная адсорбции эндотоксина показана при следующих значениях показателей: температура тела менее 36°С и более 38°С, общее количество лейкоцитов менее 4×10⁹/л и более 12×10⁹/л, нейтрофильный сдвиг более 10%, концентрация прокальцитонина 2 нг/мл. При содержании прокальцитонина, равном или более 2 нг/мл, определяют активность эндотоксина с помощью хемолюминесцентного анализа в тесте ЕАА. Назначают проведение процедур селективной адсорбции эндотоксина при активности эндотоксина, равной и более 0,6. При этом при выявлении активности эндотоксина менее 0,6 оценивают ответ нейтрофилов по уровню показателя "Response" в тесте ЕАА, характеризующего функциональную активность нейтрофилов. При уровне "Response" менее 0,5 дополнительно исследуют содержание в крови пациента пресепсина. При концентрации пресепсина 1500 пг/мл и выше назначают процедуры селективной адсорбции эндотоксина.

Способ осуществляется следующим образом.

Исследуем уровень прокальцитонина (ПКТ) у пациентов с подозрением на сепсис, вызванный грамотрицательными микроорганизмами, с гипертермией более 38°С или гипотермией менее 36°С, общим количеством лейкоцитов более 12×10⁹/л и менее 4×10⁹/л, нейтрофильным сдвигом более 10%. Анализ концентрации ПКТ необходим для выявления группы пациентов с предполагаемой бактериальной инфекцией среди пациентов с признаками воспаления, вызванными иммунным ответом на хирургическое лечение или вирусную инфекцию.

Измерение уровня ПКТ в плазме крови проводят на иммуннохимическом анализаторе Elecsys 2010 (Roche) количественным электрохемилюминесцентным иммунотестом ECLIA - Elecsys BRAHMS РСТ (BRAHMS DiagnosticaGmbH). В основе метода лежит способность антигенов и антител формировать «сэндвич-комплексы». В реакцию вступают антигены (ПКТ) исследуемого образца и моноклональные антипрокальцитониновые антитела (мыши), меченные рутениевым комплексом, и антитела, меченные биотиновой меткой.

На следующем этапе определяем уровень активности эндотоксина (ЕАА) и "Response" у пациентов с концентрацией ПКТ более 2 нг/мл. Измерение уровня активности эндотоксина необходимо для дифференциальной диагностики инфекции, вызванной грамотрицательными микроорганизмами.

В основе метода ЕАА лежит реакция эндотоксина цельной крови пациента с антиэндотоксиновыми антителами, содержащимися в реактиве. Белки комплемента опсонизируют образованные комплексы антитела/эндотоксин. Опсонизированные иммунные комплексы через комплементарные рецепторы к компонентам комплемента взаимодействуют с нейтрофилами, которые в присутствии зимозана подвергаются респираторному взрыву.

Продуцируемые нейтрофилами оксиданты вступают в реакцию с люминолом. Интенсивность хемилюминесценции пропорциональна уровню эндотоксина в исследуемом образце. Хемилюминесценция обнаруживается подсчетом фотонов в хемилюминометре. Измеренные прибором величины преобразуются расчетом в единицы эндотоксина, а единица его активности как пропорциональная суммарной возможной активности (0-1,00). В тесте ЕАА имеется специальный параметр "Response", отражающий степень адекватности окислительного ответа нейтрофилов.

Оценку уровня хемилюминесценции проводят в трех прилагаемых к набору пробирках, отличающихся по составу добавленных в них реагентов, в которые добавляется цельная кровь пациента. Каждый ЕАА-тест состоит из «пробирки 1» (контроль), «пробирки 2» (образец) и «пробирки 3» (максимум). В «пробирке 1» проводят измерение базальной активности, определяющей неспецифический оксидативный всплеск нейтрофилов больного в отсутствие специфических антиэндотоксиновых антител. В «пробирке 3» определяют уровень максимально возможного оксидативного ответа нейтрофилами больного. В «пробирке 2» проводят аналитическое измерение. Уровень ЕАА рассчитывается нормализацией хемилюминесценции в исследуемой пробе («пробирка 2») относительно максимальной хемилюминесценции («пробирка 3») с коррекцией обоих результатов по базальной активности хемилюминесценции («пробирка 1»).

Пациентам с уровнем ЕАА более или равным 0,6 назначают процедуры селективной адсорбции эндотоксина.

На следующем этапе оцениваем адекватность ответа нейтрофилов по уровню "Response" у пациентов с ЕАА менее 0,6. Значения "Response" получаем автоматически при измерении уровня эндотоксина тестом ЕАА. Согласно комментариям производителя теста ЕАА, референсный диапазон показателя "Response" составляет 0,80-0,98. Оценку уровня «Response» проводим, чтобы не исключить больных с низкой реактивностью нейтрофилов и поэтому ложно заниженными значениями ЕАА, которые также нуждаются в проведении селективной адсорбции эндотоксина.

У пациентов с ЕАА менее 0,6 и "Response" менее 0,5 исследуем концентрацию пресепсина в цельной крови пациента. Измерения уровня ПСП необходимы, чтобы подтвердить чрезмерную активацию иммунитета высокими уровнями циркулирующего в крови эндотоксина. Концентрацию пресепсина измеряют на анализаторе PATHFAST (Mitsubishi Chemical Medience Corp.) В основе тест-системы лежит метод хемилюминесцентного иммуноферментного анализа (CLEIA) с применением специальной технологии разделения связанного и свободного материала промывкой магнитных частиц в наконечниках MAGTRATION (Precision System Science).

В тесте используются смесь моно- и поликлональных антител к пресепсину: поликлональные антитела дополнительно связаны со щелочной фосфатазой, моноклональные антитела - с магнитными частицами. При добавлении в реакционную смесь пробы исследуемой крови происходит образование иммунных комплексов - ПСП/меченные ферментом АТ/АТ на магнитных частицах. После удаления несвязавшегося материала к этому комплексу добавляется хемилюминесцентный субстрат, ферментативное превращение которого инициирует люминесценцию. Интенсивность люминесценции пропорциональна концентрации пресепсина в пробе. Расчет результата проводится по стандартной калибровочной кривой.

Пациентам с концентрацией пресепсина 1500 пг/мл и выше назначают процедуры селективной адсорбции эндотоксина.

Приводим данные, подтверждающие возможность реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата.

Клинический пример. Послеоперационный период у пациента М. 48 лет после кардиохирургического вмешательства на клапане сердца осложнился грамотрицательным сепсисом, очагом инфекции явилась ИВЛ-ассоциированная пневмония; температура тела 38,5°С, общее количество лейкоцитов 3,0×10⁹/л. Описанным способом в крови пациента измерили концентрацию ПКТ, которая составила 5,5 нг/мл. Затем была измерена активность эндотоксина тестом ЕАА, которая составила менее 0,60 (0,00). Поэтому была проведена оценка адекватности ответа нейтрофилов в тесте ЕАА по уровню "Response", который составил 0,01. На последнем этапе была измерена концентрация ПСП, уровень которой составил 9482 пг/мл. Пациенту были назначены процедуры селективной адсорбции эндотоксина. После двух процедур селективной адсорбции эндотоксина способность нейтрофилов к оксидативному взрыву возросла до 37%, а значения активности эндотоксина достигли верхней границы диапазона, что можно связать с освобождением CR1/CR3-рецепторов полиморфноядерных нейтрофилов за счет снижения уровня эндотоксина. В таблице представлены результаты исследования пациента М. до и после селективной адсорбции эндотоксина. Пациент М. был переведен в отделение и выписан.

Способ определения показаний к проведению селективной адсорбции эндотоксина у пациентов с сепсисом, вызванным грамотрицательными микроорганизмами, включающий исследование температуры тела, общего количества лейкоцитов, нейтрофильного сдвига, уровня прокальцитонина в плазме крови, определение активности эндотоксина с помощью хемолюминесцентного анализа в тесте ЕАА; при температуре тела менее 36°C и более 38°C, общем количестве лейкоцитов менее 4×10⁹/л и более 12×10⁹/л, нейтрофильном сдвиге более 10%, содержании прокальцитонина более 2 нг/мл и активности эндотоксина, равной или более 0,6, показано проведение процедур селективной сорбции эндотоксина, при выявлении активности эндотоксина менее 0,6 оценивают ответ нейтрофилов по уровню показателя "Response" в тесте ЕАА, отличающийся тем, что при уровне "Response" менее 0,5 дополнительно исследуют содержание в крови пациента пресепсина, при концентрации пресепсина 1500 пг/мл и выше назначают процедуры селективной адсорбции эндотоксина.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования слабости родовой деятельности. На сроке доношенной беременности определяют показатели крови: общий белок, уровень альфа-глицерофосфатдегидрогеназы в лимфоцитах.

Способ ранней оценки риска инфекционных осложнений у пациентов с травмами // 2634036

Изобретение относится к области медицины, в частности к неотложной медицине и травматологии. Определяют состояние пациента путем измерения параметров крови и клинических показателей.

Способ прогнозирования метаболического синдрома у больных хронической обструктивной болезнью легких // 2633931

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано для прогнозирования метаболического синдрома у больных с хронической обструктивной болезнью легких.

Способ раннего выявления иммунологических проявлений побочного действия кортикостероидов при нефротическом синдроме у детей // 2633592

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для индивидуальной количественной оценки ранних проявлений неблагоприятного побочного действия кортикостероидных препаратов на иммунологические процессы в организме ребенка при терапии нефротического синдрома.

Электрохимический способ выявления аминокислотных замен и идентификации пептидов // 2633078

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах.

Прибор для биомедицинских и токсикологических исследований // 2632719

Изобретение относится к области экологии, фармакологии, токсикологии, медицины и касается автоматизации определения подвижности биологических тест-объектов на 96-луночном планшете.

Способ определения оптимального интервала между операциями эндопротезирования при билатеральном гонартрозе или коксартрозе у пациентов с остеопорозом // 2632705

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для определения оптимального интервала между операциями эндопротезирования при лечении двусторонних заболеваний тазобедренных или коленных суставов.

Устройство для определения функциональной активности комплемента // 2632694

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной иммунологии, а именно к устройствам для определения функциональной активности комплемента в крови человека при диагностике ряда заболеваний.

Способ химиолучевого лечения орофарингеального рака // 2632542

Изобретение относится к медицине, онкологии, радиологии, лучевой терапии. Способ лучевой терапии (ЛТ) орофарингеального рака (ОФР) на фоне соответствующей химиотерапии включает предварительное определение у больного массы тела и диаметра шеи и предлучевую подготовку с использованием КТ-топометрии и расчета дозиметрического плана.

Способ прогноза риска развития инфекционно-воспалительных осложнений у женщин после сверхранних преждевременных родов // 2632521

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и касается способа раннего прогнозирования развития инфекционно-воспалительных осложнений (ИВО). У женщин после сверхранних преждевременных родов перед родами устанавливают: имели ли место роды ранее, страдает ли женщина эндокринной патологией и никотинозависимостью, была ли угроза прерывания беременности в первом триместре данной беременности, имеет ли место истмико-цервикальная недостаточность при данной беременности.

Способ выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии у мелких лабораторных животных // 2634567

Изобретение относится к области медицины, а именно к гемостазиологии, и предназначено для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии в норме, при патологии, а также при моделировании патологии у мелких лабораторных животных на аппаратно-программном комплексе для клинико-диагностических исследований реологических свойств крови АРП-01М «Меднорд» с помощью информационно-компьютерной системы (ИКС) «Гемо-3». Способ представляет собой запись кривой низкочастотной пьезотромбоэластографии с использованием в настройках ИКС «Гемо-3» дельты амплитуд для принятия точки максимальной, равной 1, и времени ожидания повышения амплитуды, равного 20 минутам, и позволяет определить такие показатели, как интенсивность контактной коагуляции (ИКК), времени контактной коагуляции t1, интенсивности коагуляционного драйва (ИКД), времени достижения константы тромбина t2, константы тромбиновой активности (КТА), времени свертывания t3, интенсивности полимеризации сгустка (ИПС), времени полимеризации t4, максимальной амплитуды сгустка (МА), времени образования фибрин-тромбоцитарной структуры t5, интенсивности тотального свертывания (ИТС), интенсивности лизиса и ретракции сгустка (ИРЛС), t6=t5+10 минут, коэффициента суммарной противосвертывающей активности (КСПА). 2 ил.

Способ стратификации риска поражения сердечно-сосудистой системы у пациентов с хронической болезнью почек // 2634573

Изобретение относится к медицине и предназначено для ранней диагностики высокого риска поражения миокарда и резистивных сосудов у пациентов с хронической болезнью почек. Определяют в плазме крови пациентов с хронической болезнью почек уровень FGF-23 посредством ИФА. Повышение уровня фибропластического фактора роста-23 свидетельствует о высоком риске поражения сердечно-сосудистой системы. Способ позволяет повысить точность диагностики риска сердечно-сосудистых катастроф у пациентов с хронической болезнью почек. 2 ил.

Способ диагностики хронического панкреатита у собак // 2634574

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для диагностики хронического панкреатита у собак в течение короткого промежутка времени, что позволяет вовремя назначить адекватное медикаментозное лечение и диетотерапию. Способ включает получение от животного сыворотки крови, внутривенное или внутрибрюшинное введение диагностического препарата в виде вытяжки с участка слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки шестимесячной свиньи в дозе 0,33-4,5 мл в зависимости от веса животного, предварительно разведенного в физиологическом растворе в соотношении 1:5, повторное получение сыворотки крови через 20 мин после введения препарата. Последующее проведение сравнительного исследования обоих отобранных образцов сыворотки крови в соответствии с методикой К. James в модификации Веремеенко позволяет диагностировать хронический панкреатит при снижении уровня ингибиторов протеаз в крови после введения препарата более чем на 1 мг/мл альфа-1-антитрипсина, что на рентгеновской пленке выражается появлением зон лизиса при более низких концентрациях трипсина, чем до введения диагностического препатата. Достигается быстрота, простота и дешевизна диагностики. 1 табл.

Способ определения активности тиреопероксидазы в щитовидной железе // 2635531

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы. Способ по изобретению представляет собой метод по де Робертису. Криостатные срезы переносят на предметные стекла и оставляют на 2 ч для высушивания при температуре воздуха 18° по Цельсию, после этого срезы покрывают 0,3% раствором молибдата аммония на 5 мин. Затем сливают раствор и покрывают срезы инкубационной средой, приготовленной из 1 мл насыщенного раствора бензидина с добавлением 1 капли 0,3% раствора перекиси водорода и переносят на столик микроскопа с фотонасадкой, через 15 мин проводят съемки. Использование изобретения позволяет определить функциональное состояние щитовидной железы. 1 ил., 4 пр.

Способ прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге // 2635628

Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, патоморфологии, и касается способа прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге. Способ включает получение парафинового блока из биоптата опухоли, полученный парафиновый блок микротомируют, полученный срез окрашивают, сканируют и сопоставляют его с парафиновым блоком, из которого затем выделяют опухолевую ткань, после чего ее депарафинизируют, гидротируют, ферментативно разрушают в ней оболочку клеток до получения суспензии клеточных ядер, суспензию окрашивают флюорестентным красителем и проводят ДНК цитометрию. Если количество анеуплоидных ядер в полученной суспензии меньше или равно 21%, прогнозируют благоприятное течение опухолевого процесса, выше 21% - неблагоприятное. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования течения опухолевого процесса в головном мозге за счет использования в способе ДНК цитометрии прецизионно выделенной опухоли из парафинового блока. 2 пр., 2 ил.

Способ прогнозирования стриктуры общего желчного протока и стеноза большого дуоденального соска у пациентов после холецистэктомии по поводу холелитиаза // 2635962

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования стриктуры общего желчного протока и стеноза большого дуоденального соска у пациентов после холецистэктомии. Определяют уровень нейропептидов-дилататоров (НП-дилататоров) и при выявлении снижения уровня НП-дилататоров к 9-м суткам послеоперационного периода более чем в 1,8 раза, повышения их уровня в сроки от 1-го до 3-х месяцев после холецистэктомии более чем в 1,5 раза; при выявлении у пациентов, оперированных с КХ, осложненным МЖ, повышения уровня НП-дилататоров к 5-м суткам послеоперационного периода более чем в 1,4 раза, снижения их уровня к 30-м суткам после холецистэктомии более чем в 3 раза и повышения их уровня в период от 1-го до 3-х месяцев после операции более чем в 1,1 раза прогнозируют стриктуру ОЖП и стеноз БДС. Способ позволяет повысить достоверность прогнозирования осложнений у пациентов после холецистэктомии. 6 ил., 2 пр.

Способ определения этнической принадлежности у девушек-подростков с помощью биохимических параметров // 2635994

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ определения этнической принадлежности у девушек-подростков с помощью биохимических параметров крови, включающий расчет коэффициентов F1 и F2 по формулам:F1 = -7,41 - 8,96*X1 - 4,64*Х2 - 2,09*Х3 - 3,92*Х4 - 4,00*Х5 - 2,84*Х6 - 2,11*Х7 + 1,71*Х8;F2 = -6,63 + 8,47*X1 + 4,38*Х2 + 1,97*Х3 + 3,70*Х4 + 3,78*Х5 + 2,69*Х6 + 1,99*Х7 - 1,62*Х8,где X1 - уровень глюкозы, ммоль/л, Х2 - уровень альбумина, г/л, Х3 - уровень тиреотропного гормона, мЕД/мл, Х4 - уровень тироксина, нмоль/л, Х5 - уровень общего холестерола, ммоль/л, Х6 - уровень окисленного глутатиона, ммоль/л, Х7 - уровень двойных связей, усл. ед., Х8 - активность супероксиддисмутазы, усл. ед., и при значении коэффициентов F1≥F2 определяют принадлежность к тофаларскому этносу, а при значении коэффициентов F1<F2 - к восточнославянскому этносу. Проведение профилактических и лечебных мероприятий по сохранению здоровья девушек-подростков с учетом этнической принадлежности позволяет повысить их эффективность. Изобретение расширяет арсенал средств для определения этнической принадлежности. 2 пр.

Применение антитела i-3859 для выявления и диагностики рака // 2636032

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к применению выделенного антитела к CXCR4 в диагностике рака, что может быть использовано в медицине. В частности, раскрыты способы диагностики и/или прогнозирования онкогенного расстройства, связанного с экспрессией CXCR4, определения, является ли указанное расстройство или пациент, страдающий им восприимчивым к лечению анти-CXCR4 антителом, способы определения эффективной схемы лечения и наборы для лечения указанных заболеваний. Изобретение позволяет проводить эффективную диагностику и терапию онкогенных расстройств, характеризующихся экспрессией CXCR4. 5 н. и 13 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 7 пр.

Биосенсорное устройство для обнаружения биологических микро- и нанообъектов // 2636048

Изобретение относится к области биохимии. Предложено биосенсорное устройство для обнаружения биологических микро- и нанообъектов, таких как бактерии и вирусы. Устройство содержит плоский пьезокерамический первый и второй элемент с плоскими электропроводящими слоями на двух противоположных сторонах каждого элемента. Причём один электропроводящий слой второго элемента присоединен к одному электропроводящему слою первого элемента, а не присоединенные друг к другу электропроводящие слои первого и второго элементов соединены с проводами для подачи или снятия электрического сигнала на устройство. На не присоединенные друг к другу электропроводящие слои первого и второго элемента также нанесен сенсорный слой. Сенсорный слой представляет собой антитела специфичные к искомому биологическому микро- или нанообъекту. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности за счёт снижения порога обнаружения биологических микро- или нанообъектов. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

Способ и система для клеточного анализа с помощью массовой цитометрии // 2636352

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены способ и система для клеточного анализа. Способ включает обеспечение группы маркированных клеток, выбор имеющей интересующее свойство клетки в группе, запись локализации клетки, направление лазерного импульса на клетку и генерирование дискретного шлейфа, введение дискретного шлейфа в индуктивно сопряженную плазму и генерирование групп соответствующих маркеру элементарных ионов, обнаружение каждой из групп элементарных ионов одновременно для каждого дискретного шлейфа с помощью массовой цитометрии и корреляцию обнаруженных элементарных ионов с интересующим свойством. Система включает опрашивающее устройство для идентификации локализации подходящей клетки, хранилище данных для записи локализации клетки, систему лазерной абляции для направления лазерного импульса на локализацию клетки и массовый цитометр для обнаружения связанного с подходящей клеткой маркера. Изобретения обеспечивают расширение области клеточного анализа по сравнению с возможностями традиционных основанных на клетке методик отображения или визуализации. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 5 ил.