Агонисты v1а-рецепторов

Изобретение относится к соединениям формулы (I), их солям, фармацевтическим композициям, и их применению в качестве агонистов V1a-рецепторов вазопрессина при лечении, например, осложнений цирроза, включая бактериальный перитонит, HRS2 (гепаторенальный синдром II типа) и рефрактерный асцит. 13 н. и 26 з.п. ф-лы, 3 табл.

 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Эта заявка имеет преимущество приоритета предварительной заявки на патент США №61/645558, зарегистрированной 10 мая 2012 года, полное раскрытие которой включено здесь посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Это изобретение относится к пептидным соединениям, и более конкретно, к соединениям, которые обладают частичной агонистической активностью в отношении V1a-рецепторов, композициям, содержащим такие соединения, и применению таких соединений.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Система вазопрессин-рецепторы вазопрессина принимает участие в двух ключевых гомеостатических функциях. Основная функция вазопрессина состоит в регулировании осмоляльности крови через V2-рецептор (V2R), находящийся в почке. Вторая функция вазопрессина состоит в том, что он выступает в качестве вазопрессорного агента, и опосредуется через V1a-рецептор (V1aR), находящийся в кровеносных сосудах.

Было проведено исследование ряда агонистов и антагонистов рецепторов вазопрессина для применения в лечении множества заболеваний. Lenz, et al., Gut, 1985, 26(12), 1385-1386; Lenz, et al., Gut, 1989, 30(1), 90-96; Russell, et al., N. Engl J. Med., 2008, 358(9), 877-887; Fimiani, et al., Eur. J. Intern. Med., 2011, 22(6), 587-590; Cardenas, et al., J. Hepatol., 2012, 56(3), 571-578; Sanyal, et al., Gastroenterol., 2008, 734(5), 1360-1368.

Особый клинический интерес представляет собой применение агонистов вазопрессина благодаря их вазопрессорной активности у пациентов с гиповолемией или гипотензией для повышения артериального давления. Значительным недостатком существующих полных агонистов вазопрессина при таком применении является вероятность вызвать сильную вазоконстрикцию и гипоперфузию тканей при использовании в фармакологических дозах. Gulberg, et al., Hepatol., 1999, 30(4), 870-875; Yefet, et al., Isr. Med. Assoc. J., 2011, 13(3), 180-181; Sanyal, ef al., Gastroenterol., 2008, 134(5), 1360-1368. Узкий терапевтический индекс этих соединений ограничивает их применение только пациентами, у которых риск гипоперфузии тканей допустим из-за тяжести первопричинного патологического состояния, требующего лечения.

V2-рецептор (V2R) преимущественно находится в почках, особенно в главных клетках собирающих протоков, где он отвечает за концентрирование мочи путем реабсорбции воды из гломерулярного ультрафильтрата. Эта задержка воды может приводить к гипонатриемии, если пропорционально не ограничивать потребление жидкости. V2R также имеет внепочечную локализацию, например в эндотелиальных клетках, где он, по-видимому, отвечает за множество эффектов, включая высвобождение фактора фон Виллебранда и оксида азота. V1a-рецептор (V1aR) преимущественно находится в гладкомышечных клетках во всей сосудистой сети, где он действует как ключевой регулятор сосудистого тонуса. Аналог вазопрессина, терлипрессин, был разрешен к применению в ряде стран для лечения некоторых осложнений цирроза (кровоточащего варикозного расширения вен пищевода и гепаторенального синдрома 1 типа) и применяется для демонстрации пригодности использования вазоконстрикции для лечения других осложнений цирроза (спонтанного бактериального перитонита, гепаторенального синдрома 2 типа и постпарацентезной циркуляторной дисфункции).

Цирроз печени является обычной конечной стадией избыточного потребления акоголя или гепатита. Примерно у каждого третьего пациента с циррозом в брюшной полости скапливается жидкость, и ее регулируют с помощью парацентеза. Осложнения парацентеза включают гиповолемию и нежелательное падение артериального давления. Обычно их купируют посредством инфузии человеческого альбумина и с недавнего времени терлипрессина.

Развитие портальной гипертензии вследствие цирроза является ключевым фактором сердечно-сосудистых осложнений, связанных с конечной стадией заболевания печени. Печень имеет нормальный градиент печеночного венозного давления (ГПВД) 1-5 мм рт. ст. Увеличение ГПВД возникает в результате активного и пассивного увеличения внутрипеченочного сосудистого сопротивления, связанного с развитием цирроза. Это инициирует рефлекторную висцеральную артериальную вазодилатацию, приводящую к увеличению портального кровотока, и в дальнейшем способствует увеличению ГПВД, которое диагностируют как портальную гипертензию, как только оно превышает значение 12 мм рт. ст. Этот сдвиг объема циркулирующей крови в сторону висцеральной циркуляции приводит к снижению эффективного объема крови (то есть объема крови в центральной части сердечно-сосудистой системы), которое инициирует рефлекторные механизмы, нацеленные на увеличение объема крови, в особенности механизмы удержания натрия и воды и механизмы вазоконстрикции, дополнительно увеличивающие интенсивность сдвига объема крови в сторону висцеральной циркуляции, что увеличивает портальный кровоток. В итоге, нарастающая вазоконстрикция в почке инициирует уменьшение почечного кровотока, приводя либо к хронической (гепаторенальный синдром 2 типа, HRS2) или острой почечной недостаточности (гепаторенальный синдром 1 типа; HRS1), в зависимости от скорости ухудшения состояния. Оба типа почечной недостаточности очень трудно регулировать клинически (то есть купировать избыточную почечную вазоконстрикцию), не усугубляя висцеральную вазодилатацию и портальную гипертензию.

Современная медицинская тактика лечения наиболее тяжелых сердечнососудистых осложнений цирроза основана преимущественно либо на вазоконстрикторной терапии, либо на введении альбумина. Вазоконстрикторная терапия, нацеленная на специфическое уменьшение висцеральной вазодилатации без дальнейшего ухудшения почечного кровотока, является терапией выбора. Однако на данный момент не существует "золотого стандарта" лечения, поскольку доступные вазоконстрикторные агенты обычно имеют значительные недостатки, такие как недостаточная степень висцеральной вазоконстрикции и/или чрезмерная степень экстрависцеральной вазоконстрикции, слишком короткая продолжительность действия или слишком узкое терапевтическое окно. В европейских странах новым стандартом лечения HRS1 является введение терлипрессина. Другие более ранние менее тяжелые осложнения цирроза за недостатком безопасного вазоконстриктора часто лечат с помощью альбумина в качестве плазмоэкспандера.

Терлипрессин, как было показано в широкомасштабном рандомизированном плацебо-контролируемом слепом клиническом исследовании (Orphan Therapeutics), эффективен при лечении HRS1, что подтверждает концепцию о том, что вазоконстрикция может быть эффективной при лечении почечной недостаточности, связанной с циррозом (HRS1). Хотя основная конечная точка исследования (выживаемость при купировании HRS) не была достигнута, терлипрессин вероятно станет препаратом выбора при HRS1 в тех мировых регионах, где он разрешен к применению. Хотя терлипрессин считается лучшим вариантом чем терапия только жидкостью/альбумином, он способен только вызывать обратное развитие почечной недостаточности у 30-40% пациентов, оставляя возможности для улучшения. Терлипрессин продемонстрировал клиническую эффективность при кровоточащем варикозном расширении вен пищевода (BEV) и HRS1, но он имеет недостатки, такие как относительно короткая продолжительность действия при использовании в более низких, и, следовательно, более безопасных, дозах и слишком сильная экстрависцеральная вазоконстрикция при использовании в более высоких дозах. Терлипрессин практически не используется вне контролируемых условий стационара из-за необходимости в его частом введении (каждые 4-6 часов или посредством внутривенной (в/в) инфузии) и вероятности тяжелых побочных эффектов. Несмотря на то, что эти тяжелые побочные эффекты встречаются редко, они потенциально опасны для жизни и должны контролироваться соответствующим образом.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно настоящему раскрытию предложено соединение формулы (I):

или его соль, где:

R¹ выбран из (С₁-С₁₀)алкила, (С₁-С₁₀)алкокси, (С₁-С₁₀)алкилNH, Ar¹-L¹- и незамещенного или замещенного циклоалкила;

Ar¹-L¹- выбран из Ar¹-, Ar¹-CH₂-, Ar¹-CH₂CH₂-, Ar¹-O-, Ar¹-CH₂O-, Ar¹-NH- и Ar¹-CH₂NH-;

Ar¹ представляет собой незамещенный арил или замещенный арил;

R² выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, гидрокси, (С₁-С₆)алкокси и галогена;

R³ выбран из (С₁-С₆)алкила, незамещенного или замещенного циклоалкила и Cy³-СН₂-;

Cy³- представляет собой незамещенный или замещенный арил, или незамещенный или замещенный циклоалкил;

R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, (С₁-С₆)галогеналкила, -((C₁-C₆)алкилен)-OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4a₂, группы -((С₁-С₆)алкилен)-S(С₁-С₆)алкил, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)OR^4a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)NP^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=NR^4a)NR^4a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)R^4a, -((C₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)OR^4a, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)NR^4a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^4aC(=O)^4а, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^4aC(=O)OR^4a, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂, Ar⁴ и -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁴;

каждый R^4a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Ar⁴ выбран из незамещенного или замещенного арила и незамещенного или замещенного гетероарила;

R⁵ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-NR^5a₂ и -((C₁-C₆)алкилен)-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂;

каждый R^5a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Q выбран из групп Q¹, Q², Q³ и Q⁴:

a и b обозначают связи, соединяющие Q с остальной частью молекулы;

R⁶ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила и -C(=NR^6a)NR^6a₂;

каждый R^6a независимо представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R⁷ выбран из (С₁-С₆)алкила, незамещенного арила, замещенного арила, незамещенного циклоалкила и замещенного циклоалкила;

R⁸ выбран из NH₂ и гидроксила;

R⁹ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, (С₁-С₆)галогеналкила, -((C₁-C₆)алкилен)-OR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-SR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)OR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=NR^9a)NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)R^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)OR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)R^9b, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)OR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=O)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=NR^9a)NR^9a₂, Ar⁹ и -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁹;

каждый R^9a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

каждый R^9b независимо выбран из водорода и (С₁-С₁₀)алкила;

Ar⁹ выбран из незамещенного арила, замещенного арила, незамещенного гетероарила, замещенного гетероарила;

R¹⁰ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-OR^10a, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=О)NR^10a₂ и Ar¹⁰-СН₂-;

Ar¹⁰ представляет собой незамещенный гетероарил или замещенный гетероарил;

каждый R^10a выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Ar выбран из арила или замещенного арила;

каждый X представляет собой NH, и каждый Y представляет собой С=O; или каждый X представляет собой С=O, и каждый Y представляет собой NH;

m равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

n равно 0, 1, 2, 3 или 4;

о равно 1 или 2;

p равно 1, 2 или 3; и

r равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; при условии, что R⁹ представляет собой водород, если r больше одного.

Описаны различные воплощения раскрытых соединений, включая соединения по примерам.

Также описана фармацевтическая композиция, которая содержит соединение формулы (I), или любое из его воплощений, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

Также описаны способы лечения с использованием соединений формулы (I). Способы включают введение эффективного количества соединения формулы (I), или любого из его воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли индивидууму, нуждающемуся в таком лечении.

Соединения также полезны при лечении осложнений, возникающих в результате цирроза, например, когда повышение кровяного давления является терапевтически целесообразным.

Осложнения цирроза, которые можно лечить заявленными соединениями, включают бактериальный перитонит, гепаторенальный синдром 2 типа или рефрактерный асцит. Соединения также полезны, например, для повышения кровяного давления. Соединения также полезны при лечении гиповолемического шока; вазодилататорного шока; кровоточащего варикозного расширения вен пищевода; гепаторенального синдрома; гепаторенального синдрома 1 типа; гепаторенального синдрома 2 типа; гипотензии, вызванной анестезией; парацентез-индуцированной циркуляторной дисфункции; интраоперационной кровопотери; острого кровотечения; кровопотери, связанной с санацией ожогов; кровопотери, связанной с носовым кровотечением; спонтанного бактериального перитонита; рефрактерного асцита; кровотечения при гипертензивной гастропатии; сепсиса; тяжелого сепсиса; септического шока; гипотензии, включая ортостатическую гипотензию и интрадиализную гипотензию; остановки сердца; кровопотери, связанной с травмой; вазодилататорного шока, вызванного сердечно-легочным шунтированием; вызванного милриноном вазодилататорного шока при застойной сердечной недостаточности; анафилактического шока; сердечнососудистой нестабильности, вызванной смертью мозга; острого респираторного дистресс-синдрома; острого повреждения легких; шока, вызванного интоксикацией метформином; шока, вызванного митохондриальным заболеванием; шока, вызванного отравлением цианидом; шока, вызванного синдромом капиллярной утечки, вызванным интерлейкином-2, другим цитокином, денилейкин дифтитоксом или другим иммунотоксином, или синдромом гиперстимуляции яичников; гипотензии, вызванной конечной стадией болезни почек; воспалительного заболевания кишечника; реперфузионного повреждения; респираторного дистресс-синдрома новорожденных; тяжелого острого респираторного синдрома; асцита; вазодепрессорного обморока; вазовагального обморока; синдрома токсического шока; и синдрома идиопатической системной капиллярной утечки.

Если не определено иное, все технические и научные термины, использованные здесь, имеют такое же значение, которое обычно подразумевается специалистом в той области техники, к которой относится данное изобретение. Несмотря на то, что способы и материалы, подобные или эквивалентные тем, которые описаны здесь, могут быть использованы при практическом осуществлении или апробировании настоящего изобретения, подходящие способы и материалы описаны ниже. Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие материалы, упомянутые здесь, включены посредством ссылки во всей их полноте. В случае противоречий, настоящее описание, включая определения, будет проверено. Кроме того, материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративными и не носят ограничительного характера.

Подробности одного или более чем одного воплощения изложены в прилагаемых ниже графических материалах и описании. Другие признаки, задачи и преимущества будут очевидны из описания и графических материалов и из формулы изобретения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Не будучи ограниченными какой-либо теорией, полагают, что агонист V1a-рецептора вазопрессина с максимальным уровнем вазоконстрикторной активности может быть применен для лечения при использовании болюсного принципа введения, которое может обеспечить большую продолжительность действия с постоянным уровнем вазоконстрикции, тем самым значительно увеличивая безопасность, пригодность и клиническую эффективность при лечении, позволяющем обратить вспять течение почечной недостаточности, обусловленной осложнениями цирроза. Полагают, что такие соединения могут обеспечивать повышенную безопасность, делая возможным использование такого вазоконстриктора в условиях клинического лечения низкой интенсивности или даже в качестве препарата для амбулаторного лечения, тем самым обеспечивая возможность лечения состояний, таких как спонтанный бактериальный перитонит, HRS2 и рефрактерный асцит.

В раскрытии изобретения описаны селективные, частичные агонисты V1a-рецепторов, которые по существу могут обладать клиническими преимуществами над терлипрессином, обеспечивая повышенную безопасность и пригодность в течение более длительного периода времени действия чем терлипрессин. Нежелательные флуктуации вазоконстрикторного действия тем самым также уменьшаются. Такие соединения могут стать терапевтическими агентами выбора при лечении сердечно-сосудистых осложнений, в случае, когда снижение портальной гипертензии дает клинический эффект. Как правило эти преимущества могут сделать возможным практическое лечение осложнений цирроза, когда соединения-полные агонисты могут быть непригодны.

Существующие соединения-полные агонисты, такие как терлипрессин, имеют узкий терапевтический индекс. При повышении концентрации лекарственного средства-полного агониста возможно превышение терапевтического уровня вазоконстрикции, что приводит к избыточной вазоконстрикции. Это может приводить к тяжелой тканевой гипоксии и ишемии. Соединения со сниженной максимальной эффективностью или "частичной эффективностью" могут быть использованы в гораздо более высокой концентрации, чем существующие соединения-полные агонисты, поскольку они не вызывают нежелательной дополнительной вазоконстрикции. Максимальное вазоконстрикторное действие, которое достигается с помощью таких соединений, снижено вследствие субмаксимальной активации агонистом V1a-рецептора.

В раскрытии настоящего изобретения следует принимать во внимание, что некоторые признаки, описанные здесь, которые, для ясности, описывают в контексте отдельных воплощений, также могут быть даны в комбинации в отдельном воплощении. И наоборот, различные признаки, описанные здесь, которые, для краткости, описывают в контексте отдельного воплощения, также могут быть даны отдельно или в любой подходящей подкомбинации.

I. Определения

Если не оговорено иное, все технические и научные термины, использованные здесь, имеют такое же значение, которое обычно подразумевается специалистом в той области техники, к которой относится данное изобретение.

Для терминов "например" и "такой как" и их грамматических эквивалентов подразумевается, что далее следует фраза "и без ограничения", если не оговорено иное.

Использованные здесь формы единственного числа включают объекты в форме множественного числа, если по контексту четко не указано иное.

Использованный здесь термин "примерно" означает "приблизительно" (например плюс или минус приблизительно 10% указанной величины).

Использованный здесь термин "частичный агонист V1a-рецепторов" означает соединение, которое обеспечивает агонизм (как определено посредством FLIPR анализа (флуоресцентная визуализация на планшетном ридере), описанного здесь) к человеческому V1a-рецептору в размере от примерно 15% до примерно 70% от величины агонизма, обеспечиваемого аргинином-вазопрессином (AVP), который считают полным агонистом V1a-рецептора.

Использованный здесь термин "алкил" относится к насыщенной углеводородной цепи, которая может представлять собой прямую цепь или разветвленную цепь. Алкильная группа формально соответствует алкану с одной С-Н связью, замененной точкой присоединения алкильной группы к остальной части соединения. Термин "(C_x-C_y)алкил" (где x и y представляют собой целые числа) сам по себе или в виде части другого заместителя означает, если не оговорено иное, алкильную группу, содержащую от x до y атомов углерода. Например, (С₁-С₆)алкильная группа может содержать в себе от одного до шести (включительно) атомов углерода. Примеры (С₁-С₆)алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, изопентил, неопентил и изогексил, но не ограничиваются ими. (C_x-C_y)алкильные группы включают (С₁-С₁₀)алкил, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₄)алкил и (С₁-С₃)алкил.

Термин "(C_x-C_y)алкилен" (где x и y представляют собой целые числа) относится к алкиленовой группе, содержащей от x до y атомов углерода. Алкиленовая группа формально соответствует алкану с двумя С-Н связями, замененными точками присоединения алкиленовой группы к остальной части соединения. Примеры представляют собой двухвалентные прямые углеводородные группы, состоящие из метиленовых групп, таких как -СН₂-, -СН₂СН₂- и -СН₂СН₂СН₂-. (C_x-C_y)алкиленовые группы включают (С₁-С₆)алкилен и (С₁-С₃)алкилен.

Использованный здесь термин "алкокси" относится к группе R-O-, где R представляет собой алкильную группу, как описано выше. Термин "(C_x-C_y)алкокси" (где x и y представляют собой целые числа) сам по себе или в виде части другого заместителя означает, если не оговорено иное, алкильную группу, содержащую от x до y атомов углерода. (С₁-С₆)алкокси группы включают, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси и трет-бутокси, но не ограничиваются ими. (C_x-C_y)алкокси группы включают (С₁-С₆)алкокси и (С₁-С₃)алкокси.

Использованный здесь термин "алкенил" относится к ненасыщенной углеводородной цепи, которая включает двойную связь С=C. Алкенильная группа формально соответствует алкену с одной С-Н связью, замененной точкой присоединения алкенильной группы к остальной части соединения. Термин "(C_x-C_y)алкенил" (где x и y представляют собой целые числа) означает радикал, содержащий от x до y атомов углерода, где присутствует по меньшей мере одна двойная углерод-углеродная связь (поэтому x должен представлять собой по меньшей мере 2). Некоторые воплощения имеют от 2 до 4 атомов углерода, некоторые воплощения имеют от 2 до 3 атомов углерода, и некоторые воплощения имеют 2 атома углерода.

Алкенильные группы могут включать как Е-, так и Z-стереоизомеры. Алкенильная группа может включать более чем одну двойную связь. Примеры алкенильных групп включают винил, аллил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 4-пентенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 4-гексенил, 5-гексанил, 2,4-гексадиенил и тому подобное.

Использованный здесь термин "алкинил" относится к ненасыщенной углеводородной цепи, которая включает тройную связь С≡С. Алкинильная группа формально соответствует алкину с одной С-Н связью, замененной точкой присоединения алкильной группы к остальной части соединения. Термин "(C_x-C_y)алкинил" (где x и y представляют собой целые числа) означает радикал, содержащий от x до y атомов углерода, где присутствует по меньшей мере одна тройная углерод-углеродная связь (поэтому x должен представлять собой по меньшей мере 2). Некоторые воплощения имеют от 2 до 4 атомов углерода, некоторые воплощения имеют от 2 до 3 атомов углерода, и некоторые воплощения имеют 2 атома углерода. Примеры алкинила включают этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 3-бутинил, 1-пентинил, 2-пентинил, 3-пентинил, 4-пентинил, 1-гексинил, 2-гексинил, 3-гексинил, 4-гексинил, 5-гексинил и тому подобное. Термин "алкинил" включает ди- и три-ины.

Использованный здесь термин "галогено" или "галоген" относитя к -F, -Cl, -Br и -I.

Использованный здесь термин "галогеналкил" относится к алкильной группе, в которой один или более чем один атом водорода заменен атомом галогена. Термин "(C_x-C_y)галогеналкил" (где x и y представляют собой целые числа) сам по себе или в виде части другого заместителя означает, если не оговорено иное, алкильную группу, содержащую от x до y атомов углерода. Алкил может быть замещен галогеном одного вида вплоть до полного замещения, например как представлено формулой C_nF_2n+1; когда присутствует более чем один галоген, они могут быть одинаковыми или разными и выбраны из F, Cl, Br или I. Некоторые воплощения содержат от 1 до 3 атомов углерода. Галогеналкильные группы могут быть с неразветвленной цепью или разветвленные. Примеры включают фторметил, дифторметил, трифторметил, хлордифторметил, 2,2,2-трифторэтил, пентафторэтил и тому подобное. Термин "перфторалкил" означает группу формулы -C_nF_2n+1; иными словами, перфторалкил представляет собой алкил, как он определен здесь, где алкил полностью замещен атомами фтора, и, поэтому, считается разновидностью галогеналкила. Примеры перфторалкилов включают CF₃, CF₂CF₃, CF₂CF₂CF₃, CF(CF₃)₂, CF₂CF₂CF₂CF₃, CF₂CF(CF₃)₂, CF(CF₃)CF₂CF₃ и тому подобное.

Использованный здесь термин "циклоалкил" относится к неароматической насыщенной моноциклической, бициклической или полициклической углеводородной кольцевой системе. Термин "(C_x-C_y)циклоалкил" (где x и y представляют собой целые числа) означает циклоалкильную группу, содержащую от x до y атомов углерода в кольце. Циклоалкильные группы включают (С₃-С₁₂)циклоалкил, (С₅-С₇)циклоалкил и (C₆)циклоалкил. Типичные примеры (С₃-С₁₂)циклоалкила включают циклопропил, циклопентил, циклогептил, циклооктил, декагидронафталин-1-ил, октагидро-1Н-инден-2-ил, декагидро-1Н-бензо[7]аннулен-2-ил и додекагидро-индацен-4-ил, но не ограничиваются ими. Типичные примеры (С₃-С₁₀)циклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, декагидронафталин-1-ил и октагидро-1Н-инден-2-ил, но не ограничиваются ими. Типичные примеры (С₃-С₈)циклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил и октагидропентален-2-ил, но не ограничиваются ими.

Циклоалкил может быть незамещенным или замещенным. Замещенный циклоалкил может быть замещен одной или более чем одной группой, например 1, 2 или 3 группами, включая: (С₁-С₆)алкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, галоген, (С₁-С₆)галогеналкил, -CN, -NO₂, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR₂, -C(=NR)NR₂, -NR₂, -NRC(=O)R, -NRC(=O)O(С₁-С₆)алкил, -NRC(=O)NR₂, -NRC(=NR)NR₂, -NRSO₂R, -OR, -O(С₁-С₆)галогеналкил, -OC(=O)R, -OC(=O)O(С₁-С₆)алкил, -OC(=O)NR₂, -SR, -S(O)R, -SO₂R, -OSO₂(С₁-С₆)алкил, -SO₂NR₂, -(С₁-С₆)алкилен-CN, -(С₁-С₆)алкилен-C(=O)OR, -(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -(С₁-С₆)алкилен-OR, -(C₁-C₆)алкилен-OC(=O)R, -(C₁-C₆)алкилен-NR₂, -(С₁-С₆)алкилен-NRC(=O)R, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)OR, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -ΝR(C₂-C₆)алкилен-OR, -NR(C₂-C₆)алкилен-OC(=O)R, -NR(C₂-C₆)алкилен-NR₂, -NR(C₂-C₆)алкилен-NRC(=O)R, -O(C₁-C₆)алкилен-C(=O)OR, -O(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -O(С₂-С₆)алкилен-OR, -O(C₂-C₆)алкилен-OC(=O)R, -O(С₂-С₆)алкилен-NR₂ и -O(C₂-C₆)алкилен-NRC(=O)R. Каждый R может независимо представлять собой водород или (С₁-С₆)алкил. Кроме того, каждый из любых двух атомов водорода на одном и том же атоме углерода карбоциклического кольца может быть заменен атомом кислорода с образованием оксо (=O) заместителя.

Термин "ароматический" относится к карбоциклу или гетероциклу, имеющему одно или более чем одно полиненасыщенное кольцо, которое имеет ароматический характер (то есть имеет (4n+2) делокализованных π (пи) электронов, где n равно целому числу).

Использованный здесь термин "арил", употребляемый отдельно или в комбинации с другими терминами, относится к ароматической углеводородной группе. Арильная группа может состоять, например, из моноциклических или бициклических колец, и может содержать, например от 6 до 12 атомов углерода в кольце, например фенил, бифенил и нафтил. Термин "(C_x-C_y)арил" (где x и y представляют собой целые числа) означает арильную группу, содержащую от x до y кольцевых атомов углерода. Примеры (С₆-С₁₄)арильной группы включают фенил, α-нафтил, β-нафтил, бифенил, антрил, тетрагидронафтил, флуоренил, инданил, бифениленил и аценафтил, но не ограничиваются ими. Примеры (С₆-С₁₀)арильной группы включают фенил, α-нафтил, β-нафтил, бифенил и тетрагидронафтил, но не ограничиваются ими.

Арильная группа может быть незамещенной или замещенной. Замещенная арильная группа может быть замещена одной или более чем одной группой, например 1, 2 или 3 группами, включая: (С₁-С₆)алкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, галоген, (С₁-С₆)галогеналкил, -CN, -ΝO₂, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR₂, -C(=NR)NR₂, -NR₂, -NRC(=O)R, -NRC(=O)O(С₁-С₆)алкил, -NRC(=O)NR₂, -NRC(=NR)NR₂, -NRSO₂R, -OR, -O(С₁-С₆)галогеналкил, -OC(=O)R, -ОС(=O)O(С₁-С₆)алкил, -OC(=O)NR₂, -SR, -S(O)R, -SO₂R, -OSO₂(С₁-С₆)алкил, -SO₂NR₂, -(С₁-С₆)алкилен-CN, -(С₁-С₆)алкилен-C(=O)OR, -(С₁-С₆)алкилен-C(=O)NR₂, -(C₁-C₆)алкилен-OR, -(C₁-C₆)алкилен-OC(=O)R, -(С₁-С₆)алкилен-NR₂, -(C₁-C₆)алкилен-NRC(=O)R, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)OR, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -NR(С₂-С₆)алкилен-OR, -NR(С₂-С₆)алкилен-OC(=O)R, -NR(C₂-C₆)алкилен-NR₂, -NR(С₂-С₆)алкилен-NRC(=O)R, -O(C₁-C₆)алкилен-C(=O)OR, -O(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -O(С₂-С₆)алкилен-OR, -O(C₂-C₆)алкилен-OC(=O)R, -O(C₂-C₆)алкилен-NR₂ и -O(С₂-С₆)алкилен-NRC(=O)R. Каждый R может независимо представлять собой водород или (С₁-С₆)алкил.

Использованный здесь термин "гетероарил" или "гетероароматический" относится к ароматической кольцевой системе, имеющей по меньшей мере один гетероатом по меньшей мере в одном кольце и от 2 до 9 атомов углерода в кольцевой системе. Гетероарильная группа имеет 1 или 2 атома кислорода, 1 или 2 атома серы, и/или от 1 до 4 атомов азота в кольце, и может быть присоединена к остальной части молекулы через атом углерода или гетероатом. Типичные гетероарилы включают фурил, тиенил, пиридил, оксазолил, пирролил, индолил, хинолинил или изохинолинил и тому подобное. Гетероатомы гетероарильной кольцевой системы могут включать гетероатомы, выбранные из одного или более чем одного атома азота, кислорода и серы.

Примеры неароматических гетероциклов включают моноциклические группы, такие как: азиридин, оксиран, тииран, азетидин, оксетан, тиетан, пирролидин, пирролин, имидазолин, пиразолидин, диоксолан, сульфолан, 2,3-дигидрофуран, 2,5-дигидрофуран, тетрагидрофуран, тиофан, пиперидин, 1,2,3,6-тетрагидропиридин, 1,4-дигидропиридин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, пиран, 2,3-дигидропиран, тетрагидропиран, 1,4-диоксан, 1,3-диоксан, гомопиперазин, гомопиперидин, 1,3-диоксепан, 4,7-дигидро-1,3-диоксепин и гексаметиленоксид.

Примеры гетероарильных групп включают: пиридил, пиразинил, пиримидинил, в частности 2- и 4-пиримидинил, пиридазинил, тиенил, фурил, пирролил, в частности 2-пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, в частности 3- и 5-пиразолил, изотиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-триазолил, тетразолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил и 1,3,4-оксадиазолил.

Примеры полициклических гетероциклов включают: индолил, в частности 3-, 4-, 5-, 6- и 7-индолил, индолинил, хинолил, тетрагидрохинолил, изохинолил, в частности 1- и 5-изохинолил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолил, циннолинил, хиноксалинил, в частности 2- и 5-хиноксалинил, хиназолинил, фталазинил, 1,5-нафтиридинил, 1,8-нафтиридинил, 1,4-бензодиоксанил, кумарин, дигидрокумарин, бензофурил, в частности 3-, 4-, 5-, 6- и 7-бензофурил, 2,3-дигидробензофурил, 1,2-бензизоксазолил, бензотиенил, в частности 3-, 4-, 5-, 6- и 7-бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил, в частности 2-бензотиазолил и 5-бензотиазолил, пуринил, бензимидазолил, в частности 2-бензимидазолил и бензтриазолил.

Гетероарильная группа может быть незамещенной или замещенной. Замещенная гетероарильная группа может быть замещена одной или более чем одной группой, например 1, 2 или 3 группами, включая: (С₁-С₆)алкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, галоген, (С₁-С₆)галогеналкил, -CN, -NO₂, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR₂, -C(=NR)NR₂, -NR₂, -NRC(=O)R, -NRC(=O)O(C₁-C₆)алкил, -NRC(=O)NR₂, -NRC(=NR)NR₂, -NRSO₂R, -OR, -O(С₁-С₆)галогеналкил, -OC(=O)R, -ОС(=O)O(С₁-С₆)алкил, -OC(=O)NR₂, -SR, -S(O)R, -SO₂R, -OSO₂(С₁-С₆)алкил, -SO₂NR₂, -(С₁-С₆)алкилен-CN, -(С₁-С₆)алкилен-C(=O)OR, -(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -(C₁-C₆)алкилен-OR, -(C₁-C₆)алкилен-OC(=O)R, -(С₁-С₆)алкилен-NR₂, -(C₁-C₆)алкилен-NRC(=O)R, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)OR, -NR(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -NR(С₂-С₆)алкилен-OR, -NR(С₂-С₆)алкилен-OC(=O)R, -NR(C₂-C₆)алкилен-NR₂, -NR(С₂-С₆)алкилен-NRC(=O)R, -O(С₁-С₆)алкилен-C(=O)OR, -O(C₁-C₆)алкилен-C(=O)NR₂, -O(C₂-C₆)алкилен-OR, -O(C₂-C₆)алкилен-OC(=O)R, -O(C₂-C₆)алкилен-NR₂ и -O(С₂-С₆)алкилен-NRC(=O)R. Каждый R может независимо представлять собой водород или (С₁-С₆)алкил.

Вышеупомянутый список гетероциклильных и гетероарильных группировок является репрезентативным и не носит ограничительного характера.

Термин "замещенный" означает, что атом или группа атомов формально заменяет водород в качестве "заместителя", присоединенного к другой группе. Термин "замещенный", если не оговорено особо, относится к любой степени замещения, а именно моно-, ди-, три-, тетра- или пента-замещение, где такое замещение допускается. Заместители выбираются независимо, и замещение может быть осуществлено в любом химически доступном положении.

Здесь в описании и в формуле изобретения использована номенклатура, общепринятая в области химии пептидов, и более конкретно, в области химии вазопрессина. Аминокислоты по существу могут представлять собой либо L-, либо D-аминокислоты. Когда конфигурация не указана, аминокислота находится в L или природной форме. В некоторых структурных формулах для наглядности добавлены тио звенья β-меркаптопропионовой кислоты (1) и цистеиновые (6) фрагменты. Вещества, описанные здесь, также включают пептиды с последовательностями, имеющими обратимые пептидные связи. Эти последовательности предпочтительно представляют собой обратные последовательности, более предпочтительно содержащие D-аминокислоты.

Термин "соль" включает любую ионную форму соединения и одну или более чем одну противоионную частицу (катион и/или анион). Соли также включают цвиттер-ионные соединения (то есть молекулу, содержащую еще одну катионную и анионную частицу, например цвиттер-ионные аминокислоты). Противоионы, присутствующие в соли, могут включать любые катионные, анионные или цвиттер-ионные частицы. Типичные анионы включают хлорид, бромид, иодид, нитрат, сульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, кислый фосфат, перхлорат, хлорат, хлорит, гипохлорит, периодат, иодат, иодит, гипоиодит, карбонат, бикарбонат, изоникотинат, ацетат, трихлорацетат, трифторацетат, лактат, салицилат, цитрат, тартрат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкаронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат, трифторметансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, пара-толуолсульфонат, пара-трифторметилбензолсульфонат, гидроксид, алюминаты и бораты, но не ограничиваются ими. Типичные катионы включают катионы моновалентных щелочных металлов, таких как литий, натрий, калий и цезий, и двухвалентных щелочноземельных металлов, таких как бериллий, магний, кальций, стронций и барий, но не ограничиваются ими. Также включены катионы переходных металлов, таких как золото, серебро, медь и цинк, а также неметаллические катионы, таких как соли аммония.

Ссылки на соединения, описанные и раскрытые здесь, как считается, включают как свободное основание, так и все соли присоединения. Соли присоединения могут представлять собой либо соли с фармацевтически приемлемыми катионами, такими как Na⁺, Ca²⁺, K⁺ или Na⁺, у терминальной кислотной группы, например, когда C-терминальная аминокислота представляет собой Gly или присутствует OH, либо фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты в основном центре пептида, например в Arg фрагменте. Применение находят ацетатные соли, а также гидрохлорид, гидробромид и соли других кислот. В методах выделения, описанных в примерах, пептидный продукт часто выделяют и очищают в виде ацетатной соли. Соединения могут также образовывать внутренние соли или цвиттер-ионы, когда присутствует свободная терминальная карбоксильная группа. Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые обладают профилями токсичности в таких пределах, которые делают их полезными при фармацевтическом применении. Тем не менее, фармацевтически неприемлемые соли могут обладать свойствами, такими как высокая степень кристалличности, которые могут делать их полезными, например, в способах синтеза, очистки или приготовления соединений, описанных здесь, в виде препаратов. Как правило, полезные свойства соединений, описанных здесь, не зависят от того, находится ли соединение в форме соли или нет, так что, если не оговорено иное (например, указание, что соединение должно находится в форме "свободного основания" или "свободной кислоты"), ссылку в описании на соединение следует понимать как включение солевых форм соединения, вне зависимости от того, есть ли на это четкие указания или нет. Получение и выбор подходящих солевых форм описаны в Stahl, et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH 2002.

При нахождении в твердом состоянии соединения, описанные здесь, и их соли могут находиться в различных формах и могут, например, иметь форму сольватов, включающих гидраты. В основном, полезные свойства соединений, описанных здесь, не зависят от того, находится ли соединение или его соль в какой-либо конкретной твердой форме, такой как полиморф или сольват, так что, если не оговорено иное, ссылку в описании на соединения или соли следует понимать как включение любой твердой формы соединения, вне зависимости от того, есть ли на это четкие указания или нет.

Соединения, предложенные здесь, могут также включать все изотопы атомов, встречающихся в промежуточных соединениях или в конечных соединениях. Изотопы включают такие атомы, которые имеют одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий.

Фраза "фармацевтически приемлемый" использована здесь для указания тех соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые по результатам тщательной медицинской оценки подходят для применения при контакте с тканями людей и животных, не обладая излишней токсичностью, раздражающим действием, способностью вызывать аллергическую реакцию или другой проблемой или осложнением, в соответствии с надлежащим соотношением польза/риск.

Выражение "терапевтически эффективное количество", когда оно используется для описания количества соединения, вводимого посредством определенного способа, относится к количеству соединения, которое обеспечивает требуемый фармакологический эффект или другой эффект, например количество которое ингибирует аномальный рост или пролиферацию, или вызывает апоптоз раковых клеток, приводя к положительному эффекту.

Термины "лечение" и "излечение" означают оказание терапевтически эффективного воздействия, такого как уменьшение интенсивности существующих симптомов, предотвращение или уменьшение дополнительных симптомов, уменьшение интенсивности или предотвращение метаболических причин, лежащих в основе симптомов, отсрочивание или предотвращение дальнейшего развития расстройства и/или уменьшение тяжести симптомов, которые будут развиться или, как ожидают, могут развиваться.

В данном описании также могут быть обнаружены следующие аббревиатуры: AcOH (уксусная кислота); Boc (трет-бутоксикарбонил); DCM (дихлорметан); DIAD (Ν,Ν'-диизопропилазодикарбоксилат); DIC (Ν,Ν'-диизопропилкарбодиимид); DIPEA (Ν,Ν-диизопропилэтиламин); DME (1,2-диметоксиэтан); DMF (Ν,Ν-диметилформамид); Et (этил); Fmoc (9-флуоренилметилметоксикарбонил); ч (час(ы)); ivDde (1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1-илиден)-3-метилбутил; HIPF (1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропанол; HOBt (N-гидроксибензотриазол); ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография); ЖХ (жидкостная хроматография); MeOH (метанол); МС (масс-спектрометрия); Mtt (4-метилтритил); NMM (4-метилморфолин); Pbf (2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил); t-Bu (трет-бутил); ТЕАР (фосфат триэтиламмония); TFA (трифторуксусная кислота); TFE (2,2,2-трифторэтанол); TIS (триизопропилсилан); ТРР (трифенилфосфин) и Trt (тритил[трифенилметил, (С₆Н₅)₃С-]).

Другие аббревиатуры, использованные здесь, являются следующими: 3-Pal (3-пиридилаланин); 5-Ava (5-аминовалериановая кислота); cHxCO (циклогексилкарбонил); Orn (орнитин); Tyr(Me) (метокси-аналог тирозина); Cit (цитруллин); Dab (2,4-диаминомасляная кислота); Hmp (2-гидрокси-3-меркаптопропионовая кислота); Hgn (гомоглутамин); iBuCO (изовалерил), beta-Ala (бета-аланин; 3-аминопропионовая кислота) и isohArg (изогомоаргинин).

II. Соединения

В настоящем изобретении предложены пептидные частичные агонисты V1a-рецепторов, имеющие конкретную родовую структурную формулу, представленную нижеследующей формулой (I):

где:

R¹ выбран из (С₁-С₁₀)алкила, (С₁-С₁₀)алкокси, (С₁С₁₀)алкилNH, Ar¹-L¹- и незамещенного или замещенного циклоалкила;

Ar¹-L¹- выбран из Ar¹-, Ar¹-CH₂-, Ar¹-CH₂CH₂-, Ar¹-O-, Ar¹-CH₂O-, Ar¹-NH- и Ar¹-CH₂NH-;

Ar¹ представляет собой незамещенный арил или замещенный арил;

R² выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, гидрокси, (С₁-С₆)алкокси и галогена;

R³ выбран из (С₁-С₆)алкила, незамещенного или замещенного циклоалкила и Cy³-СН₂-;

Cy³- представляет собой незамещенный или замещенный арил, или незамещенный или замещенный циклоалкил;

R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, (С₁-С₆)галогеналкила, -((С₁-С₆)алкилен)-OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4a₂, группы -((С₁-С₆)алкилен)-S(С₁-С₆)алкил, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)OR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=NR^4a)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)R^4a, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)R^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂, Ar⁴ и -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁴;

каждый R^4a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Ar⁴ выбран из незамещенного или замещенного арила и незамещенного или замещенного гетероарила;

R⁵ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-NR^5a₂ и -((C₁-С₆)алкилен)-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂;

каждый R^5a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Q выбран из групп Q¹, Q², Q³ и Q⁴:

a и b обозначают связи, соединяющие Q с остальной частью молекулы;

R⁶ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила и -C(=NR^6a)NR^6a₂;

каждый R^6a представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил;

R⁷ выбран из (С₁-С₆)алкила, незамещенного арила, замещенного арила, незамещенного циклоалкила и замещенного циклоалкила;

R⁸ выбран из NH² и гидроксила;

R⁹ выбран из водорода, (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, (С₁-С₆)галогеналкила, -((С₁-С₆)алкилен)-OR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-SR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)OR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=NR^9a)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)R^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)OR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=O)R^9b, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)CR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=O)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=NR^9a)NR^9a₂, Ar⁹ и -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁹;

каждый R^9a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

каждый R^9b независимо выбран из водорода и (С₁-С₁₀)алкила;

Ar⁹ выбран из незамещенного арила, замещенного арила, незамещенного гетероарила, замещенного гетероарила;

R¹⁰ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-OR^10a, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=О)NR^10a₂ и Ar¹⁰-СН₂-;

Ar¹⁰ представляет собой незамещенный гетероарил или замещенный гетероарил;

каждый R^10a выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила;

Ar выбран из арила или замещенного арила;

каждый X представляет собой NH, и каждый Y представляет собой С=O; или каждый X представляет собой С=O, и каждый Y представляет собой NH;

m равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

n равно 0, 1, 2, 3 или 4;

o равно 1 или 2;

p равно 1, 2 или 3; и

r равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; при условии, что R⁹ представляет собой водород, если r больше одного.

В некоторых воплощениях R¹ может представлять собой (С₁-С₁₀)алкил, например (С₁-С₇)алкил, (С₁-С₆)алкил или (С₁-С₄)алкил. R¹ может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил, н-гексил или н-гептил. В некоторых воплощениях R¹ может представлять собой (С₁-С₁₀)алкокси, например (С₁-С₇)алкокси или (С₁-С₆)алкокси. R¹ может представлять собой, например метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, неопентокси, н-гексилокси или н-гептокси. В некоторых воплощениях R¹ может представлять собой (С₁-С₁₀)алкиламино, например (С₁-С₇)алкиламино или (С₁-С₆)алкиламино. R¹ может представлять собой, например метиламино, этиламино, н-пропиламино, изопропиламино, изобутиламино, втор-бутиламино, трет-бутиламино, неопентиламино, н-гексиламино или н-гептиламино.

В некоторых воплощениях R¹ может представлять собой незамещенный или замещенный циклоалкил, например (С₃-С₁₂)циклоалкил, например (С₅-С₇)циклоалкил или (С₆)циклоалкил. R¹ может представлять собой, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. В некоторых воплощениях циклоалкил может быть незамещенным. В некоторых воплощениях циклоалкил может быть замещенным. Когда R¹ представляет собой замещенный циклоалкил, этот циклоалкил может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -OR^1a и оксо, где каждый R^1a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропил, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила.

В некоторых воплощениях R¹ может быть представлен формулой Ar¹-L¹-, где Ar¹-L¹- может представлять собой Ar¹-, Ar¹-CH₂-, Ar¹-CH₂CH₂-, Ar¹O-, Ar¹-CH₂O-, Ar¹-NH- или Ar¹-CH₂NH-. В некоторых воплощениях Ar¹-L¹- может представлять собой Ar¹-CH₂-. В некоторых воплощениях Ar¹L¹- может представлять собой Ar¹- или Ar¹-СН₂СН₂-. Ar¹ представляет собой незамещенный арил или замещенный арил, например, незамещенный или замещенный фенил. Когда Ar¹ является замещенным, этот арил, например, фенил, может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -CN, -NO₂, -OR^1a, -NR^1a₂ и -NR^1aC(=O)R^1a, где каждый R^1a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила.

В некоторых воплощениях R¹ представляет собой (С₁-С₁₀)алкил, (С₅-С₇)циклоалкил или Ar¹-СН₂-. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой изобутил, н-гексил или циклогексил. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой бензил.

В некоторых воплощениях R² может представлять собой (С₁-С₆)алкил, например (С₁-С₄)алкил. R² может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил или н-гексил. В некоторых воплощениях R² может представлять собой гидрокси. В некоторых воплощениях R² может представлять собой (С₁-С₆)алкокси, например (С₁-С₄)алкокси. R² может представлять собой, например, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, неопентокси или н-гексокси. В некоторых воплощениях R² может представлять собой метокси. В некоторых воплощениях R² может представлять собой галоген, например фтор, хлор или бром.

В некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 11 в качестве α-атома углерода, имеет D-конфигурацию или, в других воплощениях, L-конфигурацию. Эта аминокислота может представлять собой, например, D-орто-метил-тирозин, D-пара-хлорфенилаланин, L-орто-метил-тирозин или L-пара-хлорфенилаланин.

В некоторых воплощениях R³ может представлять собой (С₁-С₆)алкил, например (С₁-С₄)алкил. R³ может представлять собой, например метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил или н-гексил.

В некоторых воплощениях R³ может представлять собой незамещенный или замещенный циклоалкил или Cy³-СН₂-, где Cy³ представляет собой незамещенный или замещенный циклоалкил. Циклоалкил может представлять собой, например (С₃-С₁₂)циклоалкил, например (С₅-С₇)циклоалкил или (С₆)циклоалкил, например циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. В некоторых воплощениях циклоалкил, сам по себе или в виде части Cy³-CH₂-, может быть незамещенным. В некоторых воплощениях циклоалкил, сам по себе или в виде части Cy³-СН₂-, может быть замещенным. При замещении циклоалкил может быть замещен, например, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -OR^3a и оксо, где каждый R^3a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила.

В некоторых воплощениях R³ может представлять собой Cy³-СН₂-, где Cy³ представляет собой незамещенный или замещенный арил (Ar³). Ar³ представляет собой незамещенный арил или замещенный арил, например, незамещенный или замещенный фенил. В некоторых воплощениях, когда Ar³ является замещенным, арил, например, фенил, может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -CN, -NO₂, -OR^3a, -NR^3a₂ и -NR^3aC(=O)R^3a, где каждый R^3a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила. В некоторых воплощениях замещенный арил, например, фенил, является галогензамещенным, например моногалогензамещенным.

В некоторых воплощениях R³ выбран из (С₁-С₆)алкила и Ar³-СН₂-, где Ar³-представляет собой незамещенный или замещенный арил. В некоторых воплощениях Ar³ представляет собой незамещенный арил или галогензамещенный арил. В некоторых воплощениях Ar³ представляет собой фенил. В некоторых воплощениях Ar³ может представлять собой фенил или фенил, замещенный гидрокси, алкокси или галогеном, например, 4-хлорфенил. В некоторых воплощениях R³ выбран из (С₁-С₆)алкила и Ar³-CH₂-, где Ar³ представляет собой фенил или галогензамещенный фенил. В некоторых воплощениях R³ представляет собой втор-бутил, неопентил, бензил или 4-хлорбензил.

В некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 12 в качестве α-атома углерода (то есть с R³ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например аланин, лейцин, изолейцин, валин, фенилаланин, 4-хлорфенилаланин или тирозин.

В некоторых воплощениях R⁴ может представлять собой (С₁-С₁₀)алкил, например (С₁-С₇)алкил или (С₁-С₆)алкил. R⁴ может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил, н-гексил или н-гептил.

В некоторых воплощениях R⁴ может представлять собой -((C₁-C₆)алкилен)-OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-S(С₁-С₆)алкил, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)OR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=NR^4a)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)R^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)OR^4a, -((С₁-С₆)алкилен)-OC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)R^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ или -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁴, где R^4a представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил, например метил. (С₁-С₆)алкиленовая цепь может иметь 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода и может состоять из метиленовых групп. Например, R⁴ может иметь формулу -(CH₂)_1-6-OR^4a, -(CH₂)_1-6-NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -(СН₂)_1-6-Ar⁴, например, -(CH₂)-OR^4a, -(CH₂)_2-4-NR^4a₂, -(CH₂)_1-3-C(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_2-4-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_2-4-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -(CH₂)-Ar⁴.

В некоторых воплощениях R⁴ представляет собой (С₁-С₆)алкил, -((С₁-С₆)алкилен)-OR^4a, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ или -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁴. В некоторых воплощениях R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, -(CH₂)_1-6-OR^4a, -(CH₂)_1-6-NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_1-6-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -(CH₂)_1-6-Ar⁴. В некоторых воплощениях R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, -(CH₂)-OR^4a, -(CH₂)_2-4-NR^4a₂, -(CH₂)_1-3-C(=O)NR^4a₂, -(СН₂)_2-4-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_2-4-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -(CH₂)-Ar⁴.

В составе R⁴ каждый R^4a может независимо представлять собой водород или (С₁-С₆)алкил, например, метил. В некоторых воплощениях каждый R^4a независимо представляет собой водород или метил. В некоторых воплощениях каждый R^4a представляет собой водород. В некоторых воплощениях, когда R⁴ имеет в своем составе более одной группы R^4a, все группы R^4a представляют собой водород, или только одна из групп R^4a представляет собой (С₁-С₆)алкил, например, метил.

В составе R⁴ и его воплощениях Ar⁴ может представлять собой незамещенный арил или замещенный арил, например, незамещенный или замещенный фенил, или незамещенный гетероарил, или замещенный гетероарил. Когда Ar⁴ является замещенным, этот арил, например, фенил, или гетероарил могут быть замещены, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -CN, -NO₂, -OR^4b, -NR^4b₂ и -NR^4bC(=O)R^4b, где каждый R^4b независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила. В некоторых воплощениях Ar⁴ представляет собой гетероарил, например незамещенный гетероарил, например, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, тиенил, фурил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, тиадиазолил, оксадиазолил, индолил, индолинил, хинолил, изохинолил, бензофурил, бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил и бензимидазолил. В некоторых воплощениях Ar⁴ представляет собой имидазолил, например 1Н-имидазол-4-ил или индолил, например индол-3-ил.

В некоторых воплощениях R⁴ представляет собой метил, изобутил, -СН₂ОН, -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂, -(CH₂)₄-NH₂, -(CH₂)₂-C(=O)NH₂, -(CH₂)₃-NHC(=NH)NH₂, -(CH₂)₃-NHC(=O)NH₂ или -СН₂-(1Н-имидазол-4-ил).

В некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 15 в качестве α-атома углерода (то есть с R⁴ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например аланин, аргинин, аспарагин, цитруллин, 2,4-диаминомасляную кислоту, глутамин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, орнитин, фенилаланин, серии, триптофан или валин.

R⁵ представляет собой -((С₁-С₆)алкилен)-NR^5a₂ или -((С₁-С₆)алкилен)-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂; где каждый R^5a независимо представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил, например метил. (С₁-С₆)алкиленовая цепь может иметь 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода и может состоять из метиленовых групп. Например, R⁵ может иметь формулу -(CH₂)_1-6-NR^5a₂ или формулу -(CH₂)_1-6-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂. В некоторых воплощениях R⁵ представляет собой -(CH₂)_2-4-NR^5a₂ или -(CH₂)_2-4-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂. В некоторых воплощениях каждый R^5a независимо представляет собой водород или метил. В некоторых воплощениях каждый R^5a представляет собой водород. В некоторых воплощениях, когда R⁵ представляет собой -((С₁-С₆)алкилен)-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂, все группы R^5a представляют собой водород или только одна из групп R^5a представляет собой (С₁-С₆)алкил, например, метил.

В некоторых воплощениях R⁵ представляет собой -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂, -(CH₂)₄-NH₂ или -(CH₂)₃-NHC(=NH)NH₂. В некоторых воплощениях R⁵ представляет собой -(CH₂)₃-NHC(=NH)NH₂.

Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 17 в качестве α-атома углерода (то есть с R⁵ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например аланин, аргинин, 2,4-диаминомасляную кислоту, лизин или орнитин.

В некоторых воплощениях R⁷ может представлять собой (С₁-С₆)алкил, например, (С₁-С₄)алкил. R⁷ может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил или н-гексил.

В некоторых воплощениях R⁷ может представлять собой незамещенный или замещенный циклоалкил, например, (С₃-С₁₂)циклоалкил, например (С₅-С₇)циклоалкил или (С₆)циклоалкил. R⁷ может представлять собой, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. В некоторых воплощениях циклоалкил может быть незамещенным. В некоторых воплощениях циклоалкил может быть замещенным. Когда R⁷ представляет собой замещенный циклоалкил, этот циклоалкил может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -OR^7a и оксо, где каждый R^7a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила.

В некоторых воплощениях R⁷ может представлять собой незамещенный или замещенный арил (Ar⁷), например незамещенный или замещенный фенил. Когда арил является замещенным, этот арил, например фенил, может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеналкила, -CN, -NO₂, -OR^7a, -NR^7a₂ и -NR^7aC(=O)R^7a, где каждый R^7a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила.

В некоторых воплощениях R⁷ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₄-С₇)циклоалкил. В некоторых воплощениях R⁷ представляет собой (С₁-С₆)алкил. В некоторых воплощениях R⁷ представляет собой втор-бутил.

Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 3 в качестве α-атома углерода (то есть с R⁷ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например, аланин, лейцин, изолейцин или валин.

R⁸ может представлять собой -NH₂ или ОН. В некоторых воплощениях R⁸ представляет собой -NH₂. В некоторых воплощениях R⁸ представляет собой -ОН. Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 1 в качестве α-атома углерода, может представлять собой, например, цистеин или (R)-2-гидрокси-3-меркаптопропионовую кислоту.

В некоторых воплощениях R¹⁰ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-OR^10a и -((С₁-С₆)алкилен)-С(=О)NR^10a₂. (С₁-С₆)алкиленовые цепи могут иметь 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода и могут состоять из метиленовых групп. Например R¹⁰ может иметь формулу -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^10a₂, например -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^10a₂. Каждый R^10a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила. В некоторых воплощениях каждый R^10a представляет собой водород.

В некоторых воплощениях R¹⁰ представляет собой Ar¹⁰-СН₂-. В некоторых воплощениях Ar¹⁰ представляет собой незамещенный гетероарил. В некоторых воплощениях Ar¹⁰ представляет собой замещенный гетероарил. В некоторых воплощениях, когда Ar¹⁰ является замещенным, этот гетероарил замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеноалкила, -CN, -NO₂, -OR^10b, -NR^10b₂ и -NR^10bC(=O)R^10b. Каждый R^10b независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила. В некоторых воплощениях Ar¹⁰ представляет собой гетероарил, например, незамещенный гетероарил, и может представлять собой, например пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, тиенил, фурил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, тиадиазолил, оксадиазолил, индолил, индолинил, хинолил, изохинолил, бензофурил, бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил или бензимидазолил. В некоторых воплощениях Ar¹⁰ представляет собой пиридил, например, 3-пиридил.

В некоторых воплощениях R¹⁰ представляет собой 1-гидроксиэтил, -(CH₂)₂-C(=O)NH₂ или 3-пиридил-СН₂-. В некоторых воплощениях R¹⁰ представляет собой -(CH₂)₂-C(=O)NH₂.

Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 13 в качестве α-атома углерода (то есть с R¹⁰ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например, аспарагин, глутамин, треонин или 3-пиридилаланин.

Ar может представлять собой незамещенный или замещенный арил, например, незамещенный или замещенный фенил. Когда Ar является замещенным, этот арил, например, фенил, может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеноалкила, -CN, -NO₂, -OR^Ar, -NR^Ar₂ и -NR^ArC(=O)R^Ar, где каждый R^Ar независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила. В некоторых воплощениях Ar представляет собой фенил или замещенный фенил. В некоторых воплощениях Ar представляет собой фенил.

Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 2 в качестве α-атома углерода (то есть с -CH₂Ar в качестве боковой цепи), может представлять собой, например, фенилаланин.

В некоторых воплощениях каждый X представляет собой NH, а каждый Y представляет собой С=O.

В других воплощениях каждый X представляет собой С=O, а каждый Y представляет собой NH.

m может быть равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5. В некоторых воплощениях m равно 0, 1, 2, 3 или 4. В некоторых воплощениях m равно 1. В некоторых воплощениях m равно 3.

о может быть равно 1 или 2. В некоторых воплощениях о равно 1. В некоторых воплощениях о равно 2.

p равно 1, 2 или 3. В некоторых воплощениях p равно 1. В некоторых воплощениях p равно 2. В некоторых воплощениях p равно 3.

Поэтому, в некоторых воплощениях аминокислота, имеющая атом углерода под номером 4 в качестве α-атома углерода (то есть с (CH₂)_p(C=O)NH₂ в качестве боковой цепи), может представлять собой, например, аспарагин, глутамин или гомоглутамин.

В некоторых воплощениях Q представляет собой Q¹. n может быть равен любому из 0, 1, 2, 3 или 4. r может быть равен любому из 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, n равно 1. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, n равно 2. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, n равно 3. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, R⁶ является водородом или -C(=NR^6a)NR^6a₂. Каждый R^6a независимо представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил, например, метил. В некоторых воплощениях каждый R^6a представляет собой водород или метил. В некоторых воплощениях по меньшей мере два R^6a представляют собой водород. В некоторых воплощениях каждый R^6a представляет собой водород. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, R⁶ является водородом или -C(=NH)NH₂.

В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, Q¹ представляет собой ^a-NH(CH₂)₄CH(NH₂)-C(=O)-^b, ^a-NH(CH₂)₄CH(NHC(=NH)NH₂)-С(=O)-^b или ^a-C(=O)(CH₂)₂CH(NH₂)-C(=O)-^b. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q¹, Q¹ представляет собой ^a-NH(CH₂)₄C^(S)H(NH₂)-C(=O)-^b, ^a-NH(CH₂)₄C^(S)H(NHC(=NH)NH₂)-C(=O)-^b, или ^a-C(=O)(CH₂)₂C^(S)H(NH₂)-C(=O)-^b, или ^a-C(=O)(CH₂)₂C^(R)H(NH₂)-C(=O)-^b.

В некоторых воплощениях Q представляет собой Q². n может быть равен любому из 0, 1, 2, 3 или 4. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q², n равно 0. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q², n равно 1. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q², n равно 2. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q², n равно 3.

В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q², Q² представляет собой ^a-NH(CH₂)₄-^b, ^a-NH(CH₂)₅-^b, ^a-NH(CH₂)₆-^b, ^a-C(=O)-(CH₂)₃-^b или ^a-C(=O)-(CH₂)₅-^b.

В некоторых воплощениях Q представляет собой Q³. n может быть равен любому из 0, 1, 2, 3 или 4. r может быть равен любому из 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q³, n равно 3. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q³, r равно 0. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q³, r равно 3. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q³, R⁶ является водородом или -C(=NR^6a)NR^6a₂. Каждый R^6a независимо представляет собой водород или (С₁-С₆)алкил, например, метил. В некоторых воплощениях каждый R^6a представляет собой водород или метил. В некоторых воплощениях по меньшей мере два R^6a представляют собой водород. В некоторых воплощениях каждый R^6a представляет собой водород. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q³, R⁶ является водородом или -C(=NH)NH₂.

В Q³ в некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой (С₁-С₆)алкил, например, (С₁-С₇)алкил или (С₁-С₆)алкил. R⁹ может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил, н-гексил или н-гептил.

В некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой (С₁-С₆)галогеналкил, -((С₁-С₆)алкилен)-OR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-SR^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)OR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-C(=O)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=NR^9a)NR^9a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)R^9a, -((C₁-C₆)алкилен)-OC(=O)OR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-ОС(=O)NR^9a₂, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)R^9b, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=O)OR^9a, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)NR^9a₂ или -((C₁-C₆)алкилен)-NR^9aC(=NR^9a)NR^9a₂. (С₁-С₆)алкиленовые цепи могут иметь 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода и могут состоять из метиленовых групп. Например, R⁹ могут иметь формулу -(CH₂)_1-6-OR^9a, -(CH₂)_1-6-NR^9a₂, -(CH₂)_1-6-SR^9a, -(CH₂)_1-6-C(=O)OR^9a₂, -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^9a₂, -(CH₂)_1-6-C(=NR^9a)NR^9a₂, -(CH₂)_1-6-OC(=O)R^9b, -(CH₂)_1-6-OC(=O)OR^9a, -(CH₂)_1-6-OC(=O)NR^9a₂, -(CH₂)_1-6-NR^9aC(=O)R^9b, -(CH₂)_1-6-NR^9aC(=O)OR^9a, -(CH₂)_1-6-NR^9aC(=O)NR^9a₂ или -(CH₂)_1-6-NR^9aC(=NR^9a)NR^9a₂. В некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой -((С₁-С₆)алкилен)-С(=O)NR^9a₂ или -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)R^9b, например, -(CH₂)_1-6-NR^9a₂ или -(CH₂)_1-6-NR^9aC(=O)R^9b. Каждый R^9a независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например метила. В некоторых воплощениях каждый R^9a представляет собой водород. Каждый R^9b независимо выбран из водорода и (С₁-С₁₀)алкила, например (С₁-С₆)алкила, например, метила или н-гексила. В некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой, например, -CH₂-NH₂, -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂, или -(CH₂)₄-NH₂, -CH₂-NHC(=O)R^9b, -(CH₂)₂-NHC(=O)R^9b, -(CH₂)₃-NHC(=O)R^9b или -(CH₂)₄-NHC(=O)R^9b; или каждая формула R^9b может представлять собой, например, метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил или н-гексил. В некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой, например -(CH₂)₄-NH₂, -(CH₂)₄-NHAc или -(CH₂)₄-NH-гептаноил.

В некоторых воплощениях R⁹ может представлять собой Ar⁹ или -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁹. (C₁-C₆)алкиленовые цепи могут иметь 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода и могут состоять из метиленовых групп. Например, R⁹ может иметь формулу -(CH₂)_1-6-Ar⁹, например, -СН₂-Ar⁹. Ar⁹ может представлять собой незамещенный или замещенный арил, например, фенил или незамещенный либо замещенный гетероарил. В некоторых воплощениях, когда Ar⁹ является замещенным, арил, например фенил, или гетероарил может быть замещен, например 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из (С₁-С₆)алкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, (С₁-С₆)галогеноалкила, -CN, -NO₂, -OR^9c, -NR^9c₂ и -NR^9cC(=O)R^9c, где каждый R^9c независимо выбран из водорода и (С₁-С₆)алкила, например, метила, этила, н-пропила, изопропила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, неопентила или н-гексила. В некоторых воплощениях, когда Ar⁹ представляет собой гетероарил, например незамещенный гетероарил, Ar⁹ может представлять собой, например пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, тиенил, фурил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, тиадиазолил, оксадиазолил, индолил, индолинил, хинолил, изохинолил, бензофурил, бензотиенил, бензоксазолил, бензотиазолил или бензимидазолил.

В некоторых воплощениях Q³ представляет собой

^a-NH(CH₂)₄-C(=O)-NH-(CH₂)₄CH(NH₂)-C(=O)-^b,

^a-NHCH((CH₂)₄NH₂)-C(=O)-NH-(CH₂)₄CH(NH₂)-C(=O)-^b,

^a-NHCH((CH₂)₄NHAc)-C(=O)-NH-(CH₂)₄CH(NH₂)-C(=O)-^b или

^а-NHCH((СН₂)₄NH-гептаноил)-С(=O)-NH-(СН₂)₄СН(NH₂)-С(=O)-^b. В некоторых воплощениях Q³ представляет собой ^a-NH(CH₂)₄-C(=O)-NH-(CH₂)₄C^(S)H(NH₂)-C(=O)-^b,

^a-NHC^(S)H((CH₂)₄NH₂)-C(=O)-NH-(CH₂)₄C^(S)H(NH₂)-C(=O)-^b,

^a-NHC^(S)H((CH₂)₄NHAc)-C(=O)-NH-(CH₂)₄C^(S)H(NH₂)-C(=O)-^b,

^a-NHC^(S)H((CH₂)₄NHAc)-C(=O)-NH-(CH₂)₄C^(R)H(NH₂)-C(=O)-^b или

^a-NHC^(S)Н((СН₂)₄NH-гептаноил)-С(=O)-NH-(СН₂)₄С^(S)Н(NH₂)-С(=O)-^b.

В некоторых воплощениях Q представляет собой Q⁴. n может быть равен любому из 0, 1, 2, 3 или 4. r может быть равен любому из 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, n равно 1. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, n равно 2. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, n равно 3. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, r равно 1. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, r равно 2. В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, r равно 3.

В некоторых воплощениях, когда Q представляет собой Q⁴, Q⁴ может представлять собой ^a-NH-(CH₂)₂-C(=O)-NH-(CH₂)₅-^b, ^a-NH-(CH₂)₄-C(=O)-NH-(CH₂)₆-^b, ^a-C(=O)-(CH₂)₂-C(=O)-NH-(CH₂)₆-^b или ^a-C(=O)-(CH₂)₃-C(=O)-NH-(CH₂)₄-^b.

Следующие пептидные соединения, являющиеся частичными агонистами V1a-рецепторов, могут иллюстрировать родовую структуру, предложенную в формуле (I). В следующих последовательностях, на основании структурной формулы (1), в нижней строке перечислены аминокислоты пептидного фрагмента, содержащего атомы углерода, которые обозначены номерами 10-18 в формуле (I), и в нижней строке перечислены аминокислоты пептидного фрагмента, содержащего атомы углерода, которые обозначены номерами 1-9 в формуле (I), вместе с группой Q. Связь между Q и пептидным фрагментом, содержащим атомы углерода 1-9 (то есть связь "b" в формуле (I)), показана вертикальной линией.

Соединение №1

Соединение №2

Соединение №3

Соединение №4

Соединение №5

Соединение №6

Соединение №7

Соединение №8

Соединение №9

Соединение №10

Соединение №11

Соединение №12

Соединение №13

Соединение №14

Соединение №15

Соединение №16

Соединение №17

Соединение №18

Соединение №19

Соединение №20

Соединение №21

Соединение №22

Соединение №23

Соединение №24

Соединение №25

Соединение №26

Соединение №27

Соединение №28

Соединение №29

Соединение №30

Соединение №31

Соединение №32

Соединение №33

Соединение №35

Соединение №36

Соединение №37

Соединение №38

Соединение №39

Соединение №41

Соединение №42

Соединение №43

Соединение №44

Соединение №45

Соединение №46

Соединение №47

Соединение №48

Соединение №49

Соединение №50

Соединение №51

Соединение №52

Соединение №53

Соединение №54

Соединение №55

Соединение №56

Соединение №57

Соединение №58

Соединение №59

Соединение №60

Соединение №61

Соединение №62

Соединение №63

Соединение №64

Соединение №65

Соединение №66

Ниже приведены молекулярные структуры конкретных соединений, представленных в примерах.

Соединение №18 (ниже)

Соединение №39 (ниже)

Соединение №41 (ниже)

Соединение №42 (ниже)

Соединение №47 (ниже)

Соединение №48 (ниже)

Соединение №49 (ниже)

Соединение №50 (ниже)

Соединение №54 (ниже)

Соединение №55 (ниже)

III. Синтез

В общем, способы синтеза пептидов применимы к синтезу соединений формулы (I). Способы синтеза пептидов хорошо разработаны в данной области техники, и в этих способах обычно используют защищенные аминокислоты, обычно защищенные с помощью карбаматной группы (например трет-бутилоксикарбонила ("ВОС") или флуоренилметоксикарбонила (Fmoc)). В типичном способе защищенную аминокислоту присоединяют к свободной аминогруппе растущей пептидной цепи с получением пептида, наращиваемого посредством дополнительной аминокислотной единицы. Затем с аминогруппы новой терминальной аминокислоты растущей пептидной цепи снимают защиту, и она становится доступной для дальнейших реакций сочетания. Благодаря хорошо разработанным способам, пригодным для синтеза пептидов, способы, которые подходят для синтеза соединений формулы (I), будут очевидны специалисту в данной области техники, исходя из структуры таких соединений. Пути синтеза конкретных соединений описаны в примерах, а описанные способы могут быть адаптированы для дополнительных соединений в пределах формулы (I), например, с помощью соответствующих аминокислотных производных, если необходимо.

Благодаря биологической важности пептидов и пептидных аналогов широкий спектр аминокислот имеется в продаже или известен в данной области техники. Кроме того, многочисленные способы получения таких соединений известны в данной области техники. Поэтому аминокислоты (а также другие промежуточные соединения), требуемые для получения соединений формулы (I), имеются в продаже, известны в данной области техники или могут быть получены посредством способов, известных в данной области техники.

Способы синтеза аминокислот и пептидов описаны, например, в: Benoiton, Chemistry of Peptide Synthesis, CRC Press, 2006; Hughes, et al., Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Vol. 1, Origins and Synthesis of Amino Acids, Wiley-VCH 2009; Hughes, et al., Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Vol. 2. Modified Amino Acids, Organocatalysis and Enzymes; Wiley-VCH 2010; Hughes, et al., Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry Vol. 3: Building Blocks, Catalysis and Coupling Chemistry, Wiley-VCH 2011; Hughes, et al., Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Vol. 4: Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Protection Reactions, Medicinal Chemistry, Combinatorial Synthesis, Wiley-VCH 2011; Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Vol. 5: Amino Acids, Peptides and Proteins in Organic Chemistry, Analysis and Function of Amino Acids and Peptides, Wiley-VCH 2011; Howl, et al., Peptide Synthesis and Applications (Methods in Molecular Biology Vol. 298), Humana Press, 2010; Jones, Amino Acid and Peptide Synthesis, 2nd edn., Oxford University Press, 2002; Jones, The Chemical Synthesis of Peptides (International Series of Monographs on Chemistry), Oxford University Press, 1994; Pennington, et al, Peptide Synthesis Protocols (Methods in Molecular Biology Vol. 35), Humana Press, 1994; Sewald, et al., Peptides: Chemistry and Biology, Wiley-VCH, 2009; Williams, et al., Chemical Approaches to the synthesis of Peptides and Proteins (New Directions in Organic & Biological Chemistry), CRC Press 1997.

IV. Приготовление в виде препарата и введение

Предложенные здесь композиции могут содержать частичные агонисты V1a-рецепторов формулы (I), описанной здесь, их соли или любое из их воплощений. Предложенные здесь соединения особенно хорошо растворимы при физиологических значениях pH (например, от примерно 6,8 до примерно 7,4) и могут быть приготовлены в виде растворов соответствующей концентрации для введения, в частности, для подкожной инъекции. Эти соединения хорошо переносятся организмом и не демонстрируют тенденцию к загустеванию при введении подкожно в эффективных концентрациях.

Обычно фармацевтические композиции, содержащие такие соединения и подходящий фармацевтически приемлемый эксципиент, могут быть введены парентерально, например, внутривенно, интраперитонеально, внутримышечно, подкожно или тому подобными способами. Фармацевтические композиции будут обычно содержать эффективное количество соединения в сочетании с общепринятым фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Обычно доза будет составлять от примерно 1 микрограмма до примерно 2,5 микрограмм пептида на килограмм массы тела реципиента при введении внутривенно. Природа этих соединений может допускать эффективное пероральное введение; однако пероральные дозы могут быть выше.

Для парентерального введения соединение может быть приготовлено, например, в виде стерильного раствора или суспензии. Соединения могут быть приготовлены, например, в виде стерильного водного препарата, который может быть изотоничен крови реципиента. Водный препарат может быть приготовлен, например, в соответствии с известными способами при использовании подходящих диспергирующих агентов, увлажняющих агентов и/или суспендирующих агентов. Вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия являются примерами подходящих разбавителей. Стерильные нелетучие масла могут быть использованы в качестве растворителя или суспендирующей системы. Легкие нелетучие масла, включая синтетические моно- или диглицериды и жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, могут быть использованы.

Количество соединения или композиции, которое вводят, будет определено лечащим врачом, принимающим во внимание все значимые факторы. В предпочтительном воплощении количество соединения или композиции, вводимое с каждой инъекцией, будет составлять от примерно 0,001 мг до примерно 2,5 мг на кг массы тела в сутки, при том, что примерно 0,2 мг/кг/сутки обычно является достаточным.

Соединения и композиции, содержащие соединения, могут быть введены внутривенно или подкожно, например, единовременно или длительно с целью повышения сосудистого системного сопротивления и/или снижения висцерального кровотока при лечении любого из симптомов.

В некоторых воплощениях соединения вводят посредством внутривенной инъекции. Курс лечения может включать однократную инъекцию или повторяющиеся инъекции.

В основном, частота дозирования может изменяться от наиболее редкой, такой как несколько раз в неделю, до нескольких раз в сутки. В основном, длительность терапии может изменяться от максимально короткого периода, примерно несколько дней или неделю, до длительного периода времени. Когда лечение пациента включает парацентез, курс лечения может включать инъекцию непосредственно перед началом проведения парацентеза и одну или более чем одну (например две или три) инъекцию сразу после проведения парацентеза и по меньшей мере одну инъекцию, например две, позднее. Инъекции могут быть разделены промежутком времени в несколько часов, таким как промежуток времени от 4 до 12 ч, более предпочтительно от 6 до 10 ч. Курс лечения может включать инъекцию перед началом проведения парацентеза и дополнительные инъекции спустя 8 и 16 ч.

Предложенные здесь соединения часто вводят в форме фармацевтически приемлемых нетоксичных солей, таких как соли присоединения кислот, или комплексных соединений металлов, например с цинком, барием, кальцием, магнием, алюминием и тому подобными (которые рассматриваются как соли присоединения, отвечающие целям этой заявки), или их комбинаций. Примерами таких солей присоединения кислот являются гидрохлорид, гидробромид, сульфат, фосфат, нитрат, оксалат, фумарат, глюконат, таннат, памоат, малеат, ацетат, цитрат, бензоат, сукцинат, альгинат, малат, аскорбат, тартрат и тому подобные.

V. Способы применения

Здесь также предложены способы лечения и способы применения соединений или композиций, описанных и предложенных здесь, например, для производства лекарственных средств для оказания терапевтического эффекта. Соединения или композиции, содержащие соединения, полезны при лечении, например, осложнений цирроза, включая бактериальный перитонит, HRS2 и рефрактерный асцит.

Здесь предложены соединения, которые обладают сниженной максимальной эффективностью в отношении V1a-рецептора, такой, что риск избыточной вазоконстрикции значительно снижен. Соединения также полезны, например, при лечении повышенного кровяного давления. Эти соединения особенно полезны при лечении состояний, когда желательным является незначительное повышение кровяного давления, например, шока гиповолемического (например, геморрагического) или вазодилататорного (например септического) происхождения, кровоточащего варикозного расширения вен пищевода (BEV), гепаторенального синдрома (HRS), включая гепаторенальный синдром I типа и II типа, сердечно-легочной реанимации и гипотензии, вызванной анестезией. Эти соединения также особенно полезны при лечении осложнений, возникающих в результате цирроза, включая спонтанный бактериальный перитонит, гепаторенальный синдром II типа (HRS2) и рефрактерный асцит. Рефрактерный асцит означает неспособность мобилизовать асцитическую жидкость и может быть диагностирован по следующим критериям: толерантность к максимальным дозам диуретика в течение по меньшей мере одной недели; вызванные диуретиками осложнения при отсутствии других провоцирующих факторов; ранний рецидив асцита в пределах 4 недель после мобилизации жидкости; стойкий асцит несмотря на ограничение натрия; средняя потеря массы менее 0,8 кг за 4 суток несмотря на максимальные дозы диуретиков; и экскреция натрия с мочой меньше чем поступление натрия (Siqueira, et al., Gastroenterol Hepatol., (N.Y.), 2009, 5(9), 647-656.).

Соединения, описанные здесь, также будут иметь клиническое применение при лечении ортостатической гипотензии, парацентез-индуцированной циркуляторной дисфункции; острого кровотечения; интраоперационной кровопотери и кровопотери, связанной с обработкой ожогов, и кровопотери, связанной с носовым кровотечением.

Другие состояния, которые можно лечить с помощью соединений, описанных здесь, включают: кровотечение при гипертензивной гастропатии; сепсис; тяжелый сепсис; септический шок; гипотензию, включая длительную и тяжелую гипотензию, и ортостатическую гипотензию, и интрадиализную гипотензию; остановку сердца; кровопотерю, связанную с травмой; вазодилататорный шок, вызванный сердечно-легочным шунтированием; вызванный милриноном вазодилататорный шок при застойной сердечной недостаточности; анафилактический шок; сердечно-сосудистую нестабильность, вызванную смертью мозга; острый респираторный дистресс-синдром; острое повреждение легких; шок, вызванный интоксикацией метформином; шок, вызванный митохондриальным заболеванием; шок, вызванный отравлением цианидом; шок, вызванный синдромом капиллярной утечки, вызванным интерлейкином-2, другим цитокином, денилейкин дифтитоксом или другим иммунотоксином, или синдромом гиперстимуляции яичников; гипотензию, вызванную конечной стадией болезни почек; воспалительное заболевание кишечника; реперфузионное повреждение; респираторный дистресс-синдром новорожденных; тяжелый острый респираторный синдром; асцит; вазодепрессорный обморок; вазовагальный обморок, например постуральная гипотензия с обмороком или нейрокардиогенный обморок; синдром токсического шока; и синдром идиопатической системной капиллярной утечки (болезнь Кларксона).

Эти соединения также демонстрируют улучшенный терапевтический индекс по сравнению с терапией, включающей, например, терлипрессин.

ПРИМЕРЫ

1. Основные способы

Производные аминокислот закупали у предприятий-поставщиков (Bachem, EMD Biosciences и Peptides International). Смолы закупали у предприятий поставщиков (PCAS BioMatrix Inc. и EMD Biosciences). Все вспомогательные реагенты, химические вещества и растворители закупали у Sigma-Aldrich и VWR.

Большинство упомянутых здесь соединений синтезировали посредством стандартных способов в химии твердофазного синтеза пептидов при использовании Fmoc-методики (методика получения Fmoc (9-флуоренилметоксикарбонил)-аминокислот). Пептиды синтезировали либо вручную, либо автоматически при использовании синтезатора пептидов Tribute (Protein Technologies), либо посредством комбинации ручного и автоматического синтезов. Соединения синтезировали вручную при использовании комбинации Boc- и Fmoc-стратегий (например, соединения 26, 29), если это было удобнее.

Препаративную ВЭЖХ проводили на хроматографе Waters Prep LC System при использовании картриджа PrepPack с Delta-Pak С18, 300 Å, 15 мкм, 47×300 мм при скорости потока 100 мл/мин и/или на колонке Phenomenex Luna С18, 100 Å, 5 мкм, 30×100 мм при скорости потока 40 мл/мин. Аналитическую обращенно-фазовую ВЭЖХ проводили на жидкостном хроматографе Agilent Technologies серии 1200rr при использовании колонки Agilent Zorbax С18, 1,8 мкм, 4,6×110 мм при скорости потока 1,5 мл/мин. Анализ конечных соединений проводили на хроматографе Agilent Technologies серии 1200 посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ на колонке Phenomenex Gemini 110 Å С18, 3 мкм, 2×150 мм при скорости потока 0,3 мл/мин. Масс-спектры регистрировали на электроспрей масс-спектрометре MAT Finningan LCQ. Если не оговорено иное, все взаимодействия проводили при комнатной температуре. В следующей стандартной справочной литературе даны дополнительные указания по общей постановке эксперимента, а также по возможности применения требуемого исходного материала и реагентов: Kates, et al., Solid Phase Synthesis: A Practical Guide, Marcel Dekker, New York, Basel, 2000; Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley Sons Inc., 2^nd Edition, 1991; Stewart, et al., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Company, 1984; Bisello, et al., J. Biol. Chem., 1998, 273, 22498-22505; Merrifield, J. Am. Chem. Soc, 1963, 85, 2149-2154; и Chang, et al., Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis: a Practical Approach, Oxford University Press, Oxford, 2000. Смолу H-Rink-ChemMatrix (PCAS BioMatrix Inc., St-Jean-sur-Richelieu, Canada) использовали в качестве исходного материала для автоматического синтеза, а смолу Fmoc-Rink-AM (EMD Biosciences, San Diego, California) использовали для ручного синтеза.

Следующие защитные группы использовали для защиты функциональных групп боковых цепей данных аминокислот: Pbf (2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил) для Arg; tBu (трет-бутил) для Glu, Asp, Ser, Thr и Tyr; Trt (тритил) для Cys, His, Gin и Asn; Boc группа (трет-бутоксикарбонил) для Dab, Orn и Lys. Защитные группы Mtt (4-метилтритил) или ivDde (1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1-илиден)3-метилбутил) использовали в боковой цепи диаминокислотного остатка альфа-аминокислоты 8 для обеспечения дополнительной степени ортогональности ветвления.

Пептиды получали на твердом носителе, начиная с остатков 1-9 пептида, показанного в формуле (I), с последующим удалением ортогональной защитной группы боковой цепи в положении 8 и добавления пептидного фрагмента, содержащего альфа-аминокислоты 10-18. Твердофазный синтез пептидов проводили вручную, автоматически на синтезаторе пептидов Tribute (Protein Technologies Inc., Тусон, Аризона) или посредством комбинации ручного и автоматического способов.

Сочетания Fmoc-защищенных аминокислот на синтезаторе Tribute были опосредованы смесью HBTU (гексафторфосфат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония)/NMMM в DMF за исключением производных цистеина, сочетание которых проводили с помощью смеси DIC/HOBt в DMF. Во время синтеза использовали однократные циклы по 30-60 минут с 5-кратным избытком активированных Fmoc-защищенных аминокислот. Удаление защитной группы Fmoc контролировали посредством УФ. Проводили многократные (до 10 раз, при необходимости) двухминутные промывки пептидной смолы с помощью 20% пиперидина в DMF.

Опосредованные DIC/HOBt реакции сочетания в DMF использовали для всех аминокислот в ручном режиме. Во время синтеза использовали однократные циклы длительностью по меньшей мере 2 часа с 3-кратным избытком активированных Fmoc-защищенных аминокислот. Завершенность реакций сочетания оценивали с помощью нингидринового теста Кайзера. Удаление защитной группы Fmoc осуществляли путем однократной 30-минутной промывки пептидной смолы с помощью 20% пиперидина в DMF.

После сборки пептидного фрагмента, содержащего альфа-атомы углерода 1-9, защитную группу боковой цепи в положении 8 удаляли. Пептидные смолы, защищенные Mtt группой, обрабатывали смесью HIPF/TFE/TIS/DCM, 4/2/1/13 (об./об./об./об.) (3 раза в течение 1 ч). Для удаления защитной группы ivDde пептидные смолы обрабатывали смесью 2% гидразин/DMF (3 раза в течение 10 мин). После удаления ортогональной защитной группы оставшуюся часть пептида (остатки 10-18) собирали посредством последовательного добавления каждой аминокислоты.

После завершения пептидного синтеза пептидные смолы промывали DCM и сушили под вакуумом. Смолы обрабатывали смесью TFA/H₂O/TIS, 96:2:2 (об./об./об.) в течение 2 ч для удаления защитных групп боковых цепей с одновременным отщеплением пептида от смолы. Пептиды фильтровали, осаждали диэтиловым эфиром и декантировали. Осадок растворяли в 10 мл неразбавленной TFA и раствор затем выливали в 200 мл 10% ацетонитрила в воде. Линейный пептид окисляли смесью 0,1 М I₂/MeOH. Раствор-окислитель добавляли по каплям до появления устойчивого желтого окрашивания. Избыток йода восстанавливали твердой аскорбиновой кислотой. Затем значение pH доводили примерно до 4 концентрированным аммиаком. Полученный раствор наносили непосредственно на колонку для препаративной ВЭЖХ и элюировали градиентом компонента В (смотри таблицу ниже).

Каждый неочищенный пептид очищали с помощью буферной системы Р. Фракции с чистотой, превышающей 93%, определенной посредством обращено-фазовой аналитической ВЭЖХ, объединяли и повторно наносили на колонку и элюировали буфером Т с получением трифторацетатов. Для получения ацетатов фракции из опытов с буфером Р повторно наносили на колонку, и колонку промывали 5 объемами 0,1 М ацетата аммония. Конечный продукт элюировали буфером А. Фракции объединяли и лиофилизировали.

Для получения алкилсвязанных (алкил в качестве заместителя “Q” в формуле (I)) гибридов остатки 1-9 сшивали с ортогональной защитной группой (Mtt или ivDde) в положении 8, как описано выше. Ортогональную защитную группу затем удаляли и вводили 2-нитробензолсульфонильную группу с помощью смеси 2-нитробензолсульфонилхлорид/2,4,6-коллидин в DCM. Полученный сульфамид, связанный со смолой, алкилировали соответствующим первичным спиртом (например, 5-Fmoc-амино-1-пентанолом) в условиях реакции Мицунобу (10 эквивалентов спирта/TPP/DIAD в безводном DME, в течение ночи). Оставшиеся остатки 10-18 последовательно добавляли один за другим и 2-нитробензолсульфонил удаляли с помощью 5% тиофенолята калия в DMF (3 раза в течение 30 мин). Отщепление, циклизацию и очистку проводили, как описано выше.

Полученные соединения, как было типично установлено, имеют по меньшей мере примерно 90% чистоту, например, по меньшей мере примерно 95% чистоту, или по меньшей мере примерно 97% чистоту, или по меньшей мере примерно 98,5% чистоту.

Примеры синтеза некоторых соединений, описанных здесь, предложены

ниже.

2. Синтез соединения №2

Фрагмент 1-9 синтезировали вручную, исходя из 15 г (10 ммоль) амидной AM смолы Ринка (EMD Biosciences; номер по каталогу 855004; 0,68 ммоль/г). Применяли опосредованные DIC/HOBt сочетания в смеси DCM/DMF (1:1, об./об., для Gly, Orn, Pro, Cys, He, Phe и Cys) или в DMF (Asn, Gin). Во время синтеза использовали однократные циклы по меньшей мере по 2 ч с 1,5-3-кратным избытком активированных Fmoc-защищенных аминокислот. Завершенность реакций сочетания оценивали с помощью нингидринового теста.

Удаление защитной группы Fmoc осуществляли путем однократной 30-минутной промывки пептидной смолы с помощью 20% пиперидина в DMF. Следующие аминокислотные производные использовали для синтеза связанного со смолой пептида, состоящего из остатков 1-9: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Orn(Mtt)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-lle-OH, Fmoc-Phe-OH и Boc-Cys(Trt)-OH. После синтеза пептидного фрагмента из остатков 1-9 смолу тщательно промывали DCM и обрабатывали смесью DCM/HFIP/TFE/TIS 13:4:2:1 (об./об./об./об.) (2×2 ч; 200 мл каждый раз). Смолу затем промывали DCM, MeOH, DMF и DCM. На этом этапе смолу разделяли во влажном состоянии и синтез продолжали в 1 ммоль масштабе. (Оставшуюся отделенную часть использовали для синтеза других соединений согласно описанию, приведенному здесь).

2-Нитробензолсульфонильную группу вводили с помощью 2-нитробензолсульфонилхлорида (1,11 г; 5 ммоль) и 2,4,6-коллидина (1 мл; 7,5 ммоль) в DCM. Через 2 ч нингидриновый тест был отрицательным. Полученный сульфамид, связанный со смолой, промывали безводным DME и суспендировали в 5 мл безводного DME. Затем к суспензии добавляли 2,63 г (10 ммоль) 5-Fmoc-амино-1-пентанола и 2,63 г (10 ммоль) с последующим добавлением раствора 1,97 мл (10 ммоль) DIAD и смолу перемешивали в течение ночи. Аликвоту смолы отделяли для проверки завершения алкилирования. При анализе отщепленного пептида посредством ВЭЖХ не было обнаружено никаких пиков носителя. Смолу снова разделяли и синтез проводили в 0,2 ммоль масштабе. Смолу затем помещали в два сосуда для автоматического синтеза, причем каждый содержал примерно 0,1 ммоль связанного со смолой промежуточного пептида. Синтез продолжали параллельно на синтезаторе пептидов Tribute. Однократные сочетания (добавление каждой аминокислоты из фрагмента 10-18 по очередности) опосредовали с помощью смеси HBTU/NMM в DMF при использовании 5-кратного избытка Fmoc-защищенных аминокислот. Защитную группу Fmoc удаляли с помощью двух последовательных 10-минутных промывок 20% пиперидином в DMF. В автоматическом синтезе использовали следующие производные: Fmoc-Glu-NH₂, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-D-Tyr(Me)-OH и PhAc-OH.

После синтеза всего пептида две смолы объединяли и удаляли 2-нитробензолсульфонильную группу с помощью 5% тиофенолята калия в DMF (2 промывки по 30 мин каждая). После завершения пептидного синтеза пептидную смолу промывали DCM и сушили под вакуумом. Пептид отделяли от смолы с помощью 20 мл смеси TFA/H₂O/TIS 96:2:2 (об./об./об.) в течение 2 часов. Смолу отфильтровывали и TFA выпаривали. Неочищенный продукт осаждали диэтиловым эфиром и декантировали. Осадок растворяли в 10 мл неразбавленной TFA и раствор затем выливали в 200 мл 10% ацетонитрила в воде. Линейный пептид окисляли смесью 0,1 M I₂/MeOH. Раствор-окислитель добавляли по каплям до появления устойчивого желтого окрашивания. Избыток йода восстанавливали твердой аскорбиновой кислотой. Затем значение pH доводили примерно до 4 концентрированным аммиаком. Полученный раствор загружали непосредственно в колонку для препаративной ВЭЖХ и очищали с помощью буферной системы Ρ при элюировании градиентом компонента В (смотри таблицу ниже). Фракции с чистотой, превышающей 93%, определенной посредством обращенно-фазовой аналитической ВЭЖХ, объединяли и повторно наносили на колонку и элюировали буфером Τ с получением трифторацетатной соли. Фракции объединяли и лиофилизировали. Получали 46,2 мг (0,018 ммоль; 9% исходя из содержания пептида 85%) белого пептидного порошка.

Чистоту продукта определяли посредством аналитической ВЭЖХ как 99,0% и наблюдали М+Н как 2213,8 (расчетн. М+Н составлял 2214,1).

3. Синтез соединения №42

Фрагмент, содержащий остатки 5-9 (как показано в формуле (I)), синтезировали вручную, исходя из 0,68 г (1 ммоль) амидной AM смолы Ринка (EMD Biosciences; номер по каталогу 855004; 0,68 ммоль/г). Применяли опосредованные DIC/HOBt сочетания в DMF. Во время синтеза использовали однократные циклы по меньшей мере по 2 ч с 3-4-кратным избытком активированных Fmoc-защищенных аминокислот. Завершенность реакций сочетания оценивали с помощью нингидринового теста. Удаление защитной группы Fmoc осущевствяли путем однократной 30-минутной промывки пептидной смолы с помощью 20% пиперидина в DMF. Следующие аминокислотные производные использовали для синтеза связанного со смолой пептида, состоящего из остатков под номерами 5-9: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Dab(ivDde)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH и Fmoc-Asn(Trt)-OH. После синтеза фрагмента, содержащего остатки под номерами 5-9, смолу разделяли во влажном состоянии и синтез продолжали в 0,3 ммоль масштабе на синтезаторе пептидов Tribute при УФ контроле. (Оставшуюся часть этого продукта использовали для синтеза других соединений, как описано здесь).

Использовали однократные сочетания, опосредованные смесью HBTU/NMM в DMF, при 5-кратном избытке Fmoc-защищенных аминокислот. Защитную группу Fmoc удаляли с помощью нескольких последовательных 2-минутных промывок 20% пиперидином в DMF. Следующие аминокислотные производные использовали для сборки фрагмента, содержащего остатки под номерами 1-4 (смотри формулу (I)) в виде связанного со смолой пептида: Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-lle-OH, Fmoc-Phe-OH и Boc-Cys(Trt)-OH. После синтеза фрагмента остатков под номерами 1-4 группу ivDde удаляли с помощью смеси 2% гидразин/DMF (20 мл; 3×10 мин) и синтез продолжали на синтезаторе Tribute путем введения линкера (Q) и пептидной последовательности остатков 10-18. Настройки синтезатора были идентичны тем, которые использовали при сборке фрагмента 1-4. Следующие производные использовали в этой части автоматического синтеза: Boc-Lys(Fmoc)-OH, Fmoc-Lys(Mtt)-OH, Fmoc-Glu-NH₂, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-D-Tyr(Me)-OH и PhAc-OH. После синтеза всей пептидной последовательности смолу тщательно промывали DCM и обрабатывали смесью DCM/HFIP/TFE/TIS 13:4:2:1 (об./об./об./об.) (3×1 ч; 20 мл каждый раз). Смолу затем промывали DCM и DMF и ацетилировали уксусным ангидридом (0,28 мл; 3 ммоль) в DMF. В конце смолу промывали DMF, MeOH и DCM и сушили под вакуумом. Пептид отделяли от смолы с помощью 20 мл смеси TFA/H₂O/TIS, 96:2:2 (об./об./об.) в течение 2 часов. Последующие стадии были такими же, как в синтезе соединения 2. Фракции объединяли и лиофилизировали. Получали 249,6 мг (0,088 ммоль; 29% исходя из содержания пептида 85%) белого пептидного порошка.

Чистоту продукта определяли посредством аналитической ВЭЖХ как 95,3%, а наблюдаемый М+Н составлял 2413,0 (расчетн. М+Н равен 2413,2).

4. Синтез соединения №47

Фрагмент, содержащий остатки под номерами 5-9 (смотри формулу (I)), синтезировали вручную, исходя из 0,6 г (1 ммоль) амидной ChemMatrix смолы Ринка (PCAS BioMatrix Inc; номер по каталогу 7-600-1310; 0,6 ммоль/г). Применяли опосредованные DIC/HOBt сочетания в DMF. Во время синтеза использовали однократные циклы по меньшей мере по 2 ч с 3-4-кратным избытком активированных Fmoc-защищенных аминокислот. Завершенность реакций сочетания оценивали с помощью нингидринового теста. Удаление защитной группы Fmoc осуществляли путем однократной 30-минутной промывки пептидной смолы с помощью 20% пиперидина в DMF. Следующие аминокислотные производные использовали для синтеза связанного со смолой пептида, состоящего из остатков 1-9: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Dab(ivDde)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Hgn(Trt)-OH, Fmoc-lle-OH, Fmoc-Phe-OH и Boc-Cys(Trt)-OH. После синтеза пептидного фрагмента 1-9 смолу 3 раза промывали 20 мл смеси 2% гидразин/DMF и на данном этапе разделяли во влажном состоянии и синтез продолжали в 0,3 ммоль масштабе на синтезаторе пептидов Tribute при УФ контроле путем введения линкера (Q) и пептидной последовательности остатков 10-18. (Оставшуюся часть продукта, смолу с остатками 1-9, использовали для синтеза других соединений, описанных здесь).

При автоматическом синтезе использовали однократные сочетания, опосредованные смесью HBTU/NMM в DMF, при 5-кратном избытке Fmoc-защищенных аминокислот. Защитную группу Fmoc удаляли с помощью нескольких последовательных 2-минутных промывок 20% пиперидином в DMF. В автоматическом синтезе использовали следующие производные: Вос-Lys(Fmoc)-OH, Fmoc-Glu-NH₂, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cit-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-D-Tyr(Me)-OH и PhAc-OH. После завершения пептидного синтеза пептидную смолу промывали DCM и сушили под вакуумом. Пептид отделяли от смолы с помощью 20 мл смеси TFA/H₂O/TIS, 96:2:2 (об./об./об.) в течение 2 часов. Последующие стадии были такими же, как в синтезе соединения 2. Фракции объединяли и лиофилизировали. Получали 174,3 мг (0,063 ммоль; 21% исходя из содержания пептида 85%) белого пептидного порошка.

Чистоту продукта определяли посредством аналитической ВЭЖХ как 96,9%, а наблюдаемый М+Н составлял 2343,2 (расчетн. М+Н равен 2343,1).

5. Синтез соединения №29 посредством Boc/Fmoc-стратегии

Фрагмент, содержащий остатки 8-9 (смотри формулу (I)), синтезировали вручную, исходя из 5,00 г (3,5 ммоль) смолы МВНА (EMD Biosciences; номер по каталогу 855006, 0,70 ммоль/г). Применяли опосредованные DCC или DIC/HOBt сочетания в DCM. Во время синтеза использовали однократные циклы по меньшей мере по 2 ч с 2-4-кратным избытком активированных Boc-защищенных аминокислот. Завершенность реакций сочетания оценивали с помощью нингидринового теста. Удаления защитной группы Boc осуществляли путем двух последовательных промывок (5 и 25 мин) пептидной смолы с помощью смеси 50% TFA/DCM, содержащей 1% мета-крезола. Нейтрализацию пептидной смолы осуществляли при помощи двух 5-минутных промывок смесью 5% TEA/DCM. Следующие аминокислотные производные использовали для синтеза связанного со смолой пептида из остатков под номерами 8-9: Boc-Gly-OH и Boc-Dab(Fmoc)-OH. После синтеза фрагмента, содержащего остатки под номерами 8-9, смолу разделяли и синтез продолжали вручную в 0,5 ммоль масштабе. (Оставшуюся часть этого продукта использовали для синтеза других соединений, как описано здесь).

Фрагмент, содержащий остатки под номерами 2-7 (смотри формулу (I)), затем синтезировали при использовании способов синтеза, описанных для фрагмента 8-9. В этом сегменте использовали следующие производные: Boc-Pro-OH, Boc-Cys(Mob)-OH, Boc-Asn-OH, Boc-Gln-OH, Вос-lle-ОН и Boc-Phe-OH. Смолу снова разделяли и синтез продолжали вручную в 0,13 ммоль масштабе. Аминокислоту по 1 положению вводили в виде Z(2-Cl)-Cys(Mob)-OH и группу Fmoc удаляли с помощью двух последовательных промывок 25% пиперидином в DMF (5 и 20 мин, соответственно). Затем присоединяли Fmoc-Lys(Boc)-OH и оставшийся фрагмент, содержащий остатки под номерами 10-18 (смотри формулу (I)), последовательно синтезировали с помощью Boc-химии. Для синтеза этого фрагмента использовали следующие аминокислотные производные: Boc-Glu-NH₂, Boc-Arg(Tos)-OH, Boc-Pro-OH, Boc-Ala-OH, Boc-Asn-OH, Boc-Gln-OH, Boc-Phe-OH, Boc-D-Tyr(Me)-OH и PhAc-OH. После синтеза всей пептидной последовательности смолу тщательно промывали DMF и обрабатывали 25% пиперидином в DMF (5 и 20 мин). Смолу затем промывали DMF, суспендировали в смеси NMP/DMSO (N-метилпирролидон/диметилсульфоксид) (1:1; об./об.) и проводили гуанилирование смесью 1Н-пиразол-1-карбоксамидин HCl (Aldrich #02729LB)/DIPEA. Наконец, смолу промывали DMF, MeOH и DCM и сушили под вакуумом. Пептид отделяли от смолы с помощью 20 мл смеси HF/анизол, 20:1 (об./об.) в течение 1,5 часа при 0°С. Смолу/неочищенный пептид промывали 100 мл этилового эфира и пептид экстрагировали 100 мл смеси уксусная кислота/вода, 3:1 (об./об.). Последующие стадии были такими же, как в синтезе соединения 2. Фракции объединяли и лиофилизировали. Получали 47,5 мг (0,018 ммоль; 7% исходя из содержания пептида 85%) белого пептидного порошка.

Чистоту продукта определяли посредством аналитической ВЭЖХ как 100,0%, а наблюдаемый М+Н составлял 2285,1 (расчетн. М+Н равен 2285,2).

6. Аналитические данные соединений по примерам

Дополнительные соединения по примерам получали, в основном, используя способы синтеза, аналогичные тем, которые описаны выше. Аналитические данные соединений по примерам, которые были получены, приведены в таблице 2.

7. Биологические данные иллюстративных соединений

а. Агонистическая активность по отношению к рецепторам вазопрессина V1a

Данный способ служит для определения агонистической активности соединений в отношении рецепторов вазопрессина V1a путем клеточного анализа визуализации флуоресценции с помощью планшетного ридера (FLIPR) и для оценки значений ЕС₅₀ (концентрация соединения, которая вызывает 50% от максимально возможного ответа). Эффективность (%МРЕ) также определяют в виде процента от максимально возможного эффекта. В этом анализе агонистов используют клетки стабильной клеточной линии (HEK-flpin), экспрессирующие рецептор вазопрессина V1a. Повышение концентрации внутриклеточного кальция в ответ на агонист измеряют с помощью флуоресценции красителя, чувствительного к внутриклеточному кальцию, в режиме реального времени. Клетки подвергают воздействию изменяющихся концентраций тестируемых соединений-агонистов, после чего высвобождение внутриклеточного кальция измеряют для определения агонистической активности и эффективности.

Материалы

Использованные человеческие клетки брали из клеточной линии Flp-ln™ 293 (HEK-flpin). Эта клеточная линия стабильно экспрессирует гибридный ген lacZ-Zeocin™ и предназначена для использования с вектором экспрессии Flp-ln™, содержащим интересующий ген, и плазмидой pOG44, экспрессирующей рекомбиназу Flp. Эта клеточная линия содержит отдельный интегрированный Flp-рекомбинантный сайт-мишень (FRT) из pFRT/lacZeo или pFRT/lacZeo2. Для создания клеточной линии HEK-flpin, стабильно экспрессирующей V1aR человека, клетки котрансфицировали вектором экспрессии Flp-ln™, содержащим интересующий ген (pcDNA5/FRT-hV1aR), и плазмидой pOG44, экспрессирующей рекомбиназу Flp. Рекомбиназа Flp опосредует вставку вектора экспрессии Flp-ln™ в геном в интегрированный FRT сайт посредством сайт-специфической рекомбинации ДНК. Стабильные клеточные линии, экспрессирующие hV1aR из вектора экспрессии Flp-ln™, могут быть созданы посредством отбора при использовании гигромицина В. Подробную информацию смотри в Life Technologies/lnvitrogen manual, Growth and Maintenance of Flp-ln™ Cell Lines, Version E, published February 12, 2003.

Аргинин-вазопрессин (AVP) использовали в анализе в качестве контрольного агониста. Эффективность этого соединения принимали за 100%. 5 мМ исходный раствор готовили в DMSO и хранили при -20°С.

Использовали следующие реагенты: диметилсульфоксид (DMSO) (Sigma, D8779); модифицированная по способу Дульбекко среда Игла (DMEM) с глюкозой и пируватом натрия, без L-глутамина (Mediatech, 15-013-CV); фетальная бычья сыворотка, инактивированная нагреванием (FBS-HI) (Invitrogen, 16140-071); набор для анализа внутриклеточной концентрации ионов кальция FLIPR Calcium 4, большой размер (bulk format) (Molecular Devices, R8141); сбалансированный солевой раствор Хенкса (HBSS) (Invitrogen, 14025-092); HEPES-буфер (буфер на основе 2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоновой кислоты), pH 7,2 (Mediatech, 25-060-Cl); гигромицин В, 50 мг/мл (Mediatech, 30-240-CR); добавка GlutaMAX™-I, 200 мМ (Invitrogen, 35050-061); DMEM без фенолового красного: DMEM с 4,5 г/л глюкозы и пируватом натрия, без L-глутамина и фенолового красного (Mediatech, 17-205-CV); пробенецид (Sigma-Aldrich, Р-8761) и трипсин-EDTA: 0,05% трипсин/0,53 мМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота) (Mediatech, 25-052-Cl).

Использовали следующие принадлежности: черный 384-луночный планшет для анализа с прозрачным дном, покрытый поли-D-лизином (Corning, 3712); 384-луночный планшет с V-образным дном, планшет для разведения (Greiner, 781280); полистироловая пробирка (BD Biosciences, 352057); и колба для культур клеток Т175 Cell⁺ Flask (Sarstedt, 83.1812.302). Использовали следующее оборудование и программное обеспечение: флуориметрический визуализирующий планшетный ридер (FLIPR Terra) (Molecular Devices) и программное обеспечение ActivityBase (IDBS, UK).

Клетки HEK-flpin-hV1aR, cmcqV1aR, dV1aR и pV1aR культивировали в среде DMEM, содержащей 10% (об./об.) FBS-HI, 4 мМ GlutaMAX™-I, 25 мкг/мл гигромицина В, при 37°С в условиях 5% CO₂ во влажной атмосфере. Субкультуру получали посредством разведения полуконфлюэнтных культур от 1:3 до 1:6. Накануне анализа клетки отбирали из колб с культурами, используя трипсин-EDTA и помещали в среду DMEM без фенолового красного, содержащей 10% FBS-HI, 4 мМ GlutaMAX™-I. Клетки высевали в черные 384-луночные планшеты с прозрачным дном, покрытые поли-D-лизином, (20 мкл/лунка) при плотности клеток 20000 клеток/лунка и инкубировали в течение ночи.

Все соединения разводили в 100% DMSO в исходных концентрациях 10 мМ и хранили при -20°С. Соединениям давали оттаять непосредственно перед анализом.

Соединения анализировали в двух повторениях при уменьшающихся концентрациях с полулогарифмическими приращениями при наивысшей концентрации 1 или 10 мкм в зависимости от активности соединений. Типичное разведение 10-кратной конечной анализируемой концентрации включало верхнее разведение 1:100 (например 2 мкл исходного раствора в 198 мкл среды для разведения) с последующими полулогарифмическими разведениями (например 25,3 мкл в 54,7 мкл среды для разведения с добавлением 1% DMSO (об./об.)). (Среды для разведения состояли из среды DMEM без фенолового красного, содержащей 10% FBS-HI, 4 мМ GlutaMAX™-I). Контроль (AVP) тестировали в наивысшей концентрации 1 мкМ (например, 1 мкл исходного раствора в 999 мкл среды для разведения). Конечная концентрация DMSO в анализе составляла 0,1%. Контроль (AVP) и холостая проба, состоящая из среды для разведения с добавлением 0,1% DMSO (об./об.), были включены в каждое исследование.

Определение ЕС₅₀

Загрузочный буфер готовили посредством растворения 1 флакона реагента для анализа Calcium 4 в 100 мл 1× HBSS-20 мМ HEPES-буфере. Пробенецид ресуспендировали при концентрации 250 мМ в 1 M NaOH с последующим разведением 1:100 в загрузочном буфере до конечной рабочей концентрации 2,5 мМ. Значение pH доводили до 7,4.

Клетки помещали в загрузочный буфер, как указано далее. Планшеты с клетками извлекали из инкубатора и в каждую лунку добавляли 20 мкл загрузочного буфера, содержащего пробенецид (2,5 мМ). Клетки инкубировали в течение 1 часа при 37°С в условиях 5% CO₂ во влажной атмосфере. Кальциевый имиджинг получали следующим образом. В системе FLIPR Tetra устанавливали следующие параметры по умолчанию и режим считывания с длиной волны возбуждения 470-495 нм и длиной волны излучения 515-575 нм, определенного посредством выбора фильтра: увеличение 20; интенсивность возбуждения 80% (по умолчанию); время воздействия 0,4 секунды (по умолчанию).

Планшеты с клетками переносили в FLIPR Tetra, наряду с 384-луночным планшетом с V-образным дном, с предварительно внесенными полулогарифмическими концентрациями тестируемых соединений в 10-кратных конечных тестируемых концентрациях. Оставшиеся стадии анализа проводили в FLIPR Tetra. Базовые показания снимали с 1-секундными (с) интервалами в течение 5 секунд с последующим добавлением 5 мкл 10× соединений (тестируемых, контрольных или холостых). Затем проводили измерение флуоресцентного сигнала, индуцированного агонистом, в течение 180 секунд с начальными 120 значениями с интервалами в 1 секунду и с последующими 20 значениями с интервалами в 3 секунды. Суммарно, каждая лунка в FLIPR анализе содержала следующие компоненты при общем объеме 50 мкл: 20 мкл клеток; 20 мкл загрузочного буфера Calcium 4; 4,4 мкл 10× тестируемого или контрольного соединения.

Усредненная ЕС₅₀ (в нМ) и средняя эффективность (по сравнению с AVP) представлены в таблице 3.

ДРУГИЕ ВОПЛОЩЕНИЯ

Следует понимать, что хотя изобретение раскрыто в соответствии с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации и не ограничивает объем изобретения, который определен объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации входят в объем следующей формулы изобретения.

1. Соединение формулы (I):

или его соль, где:

R¹ выбран из (С₁-С₁₀)алкила, Ar¹-L¹- и незамещенного (С₅-С₇)циклоалкила;

Ar¹-L¹- выбран из Ar¹-СН₂- и Ar¹-СН₂СН₂-;

Ar¹ представляет собой незамещенный (С₆-С₁₀)арил;

R² выбран из (С₁-С₆)алкокси и галогена;

R³ выбран из (С₁-С₆)алкила, (С₅-С₇)циклоалкила и Cy³-СН₂-;

Cy³- представляет собой незамещенный (С₆-С₁₀)арил или замещенный галогеном (С₆-С₁₀)арил;

R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, -((C₁-C₆)алкилен)-OR^4a, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-C(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -((C₁-C₆)алкилен)-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -((С₁-С₆)алкилен)-Ar⁴;

каждый R^4a независимо выбран из водорода;

Ar⁴ выбран из незамещенного гетероарила, представляющего собой ароматическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере один гетероатом, представляющий собой атом азота, и от 2 до 9 атомов углерода в кольцевой системе;

R⁵ выбран из -((C₁-C₆)алкилен)-NR^5aC(=NR^5a)NR^5a₂;

каждый R^5a независимо выбран из водорода;

Q выбран из групп Q¹, Q², Q³ и Q⁴:

а и b обозначают связи, соединяющие Q с остальной частью молекулы;

R⁶ выбран из водорода и -C(=NR^6a)NR^6a₂;

каждый R^6a представляет собой водород;

R⁷ выбран из (С₁-С₆)алкила и (С₅-С₇)циклоалкила;

R⁸ выбран из NH₂ и гидроксила;

R⁹ выбран из водорода, -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9a₂ и -((С₁-С₆)алкилен)-NR^9aC(=O)R^9b;

каждый R^9a независимо выбран из водорода;

каждый R^9b независимо выбран из (С₁-С₁₀)алкила;

R¹⁰ выбран из -((С₁-С₆)алкилен)-OR^10a, -((С₁-С₆)алкилен)-С(=О)NR^10a₂ и Ar¹⁰-СН₂-;

Ar¹⁰ представляет собой незамещенный гетероарил, представляющий собой ароматическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере один

гетероатом, представляющий собой атом азота, и от 2 до 9 атомов углерода в кольцевой системе;

каждый R^10a выбран из водорода;

Ar выбран из (С₆-С₁₀)арила;

каждый X представляет собой NH, и каждый Y представляет собой С=O;

или каждый X представляет собой С=O, и каждый Y представляет собой NH;

m равно 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

n равно 0, 1, 2, 3 или 4;

о равно 1 или 2;

p равно 1, 2 или 3; и

r равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; при условии, что R⁹ представляет собой водород, если r больше одного.

2. Соединение или его соль по п. 1, где R¹ представляет собой (С₁-С₁₀)алкил, (С₅-С₇)циклоалкил или Ar¹-СН₂-.

3. Соединение или его соль по п. 2, где R¹ представляет собой изобутил, н-гексил или циклогексил.

4. Соединение или его соль по п. 2, где R¹ представляет собой бензил.

5. Соединение или его соль по п. 1, где R² представляет собой (С₁-С₆)алкокси.

6. Соединение или его соль по п. 1, где R² представляет собой метокси.

7. Соединение или его соль по п. 1, где Cy³ представляет собой фенил.

8. Соединение или его соль по п. 1, где R³ выбран из (С₁-С₆)алкила и Cy³-СН₂-, где Cy³ представляет собой фенил или галогензамещенный фенил.

9. Соединение или его соль по п. 8, где R³ выбран из втор-бутила, неопентила, бензила и 4-хлорбензила.

10. Соединение или его соль по п. 1, где R⁴ выбран из (С₁-С₆)алкила, -(CH₂)-OR^4a, -(CH₂)_2-4-NR^4a₂, -(CH₂)_1-3-C(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_2-4-NR^4aC(=O)NR^4a₂, -(CH₂)_2-4-NR^4aC(=NR^4a)NR^4a₂ и -(CH₂)-Ar⁴.

11. Соединение или его соль по п. 1, где Ar⁴ представляет собой имидазолил или индолил.

12. Соединение или его соль по п. 1, где R⁴ выбран из Me, изобутила, -СН₂ОН, -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂, -(CH₂)₄-NH₂, -(CH₂)₂-C(=O)NH₂, -(CH₂)₃-NHC(=NH)NH₂, -(CH₂)₃-NHC(=O)NH₂ и группы -СН₂(1Н-имидазол-4-ил).

13. Соединение или его соль по п. 1, где R⁵ представляет собой -(CH₂)₂-NH₂, -(CH₂)₃-NH₂ или -(CH₂)₄-NH₂.

14. Соединение или его соль по п. 1, где R⁷ представляет собой (С₁-С₆)алкил или (С₅-С₇)циклоалкил.

15. Соединение или его соль по п. 14, где R⁷ представляет собой (С₁-С₆)алкил.

16. Соединение или его соль по п. 14, где R⁷ представляет собой втор-бутил.

17. Соединение или его соль по п. 1, где R⁸ представляет собой -NH₂.

18. Соединение или его соль по п. 1, где R⁸ представляет собой -ОН.

19. Соединение или его соль по п. 1, где R¹⁰ выбран из -(CH₂)_1-6-C(=O)NR^10a₂ и Ar¹⁰-СН₂-.

20. Соединение или его соль по п. 1, где Ar¹⁰ представляет собой пиридил.

21. Соединение или его соль по п. 1, где R¹⁰ выбран из 1-гидроксиэтила, -(CH₂)₂-C(=O)NH₂ и 3-пиридил-СН₂-.

22. Соединение или его соль по п. 21, где R¹⁰ представляет собой -(CH₂)₂-C(=O)NH₂.

23. Соединение или его соль по п. 1, где Ar представляет собой фенил.

24. Соединение или его соль по любому из пп. 1-23, где каждый X представляет собой NH, и каждый Y представляет собой С=O.

25. Соединение или его соль по любому из пп. 1-23, где каждый X представляет собой С=O, и каждый Y представляет собой NH.

26. Соединение, выбранное из соединений следующих формул, и его соли:

; и

27. Соединение, выбранное из соединений следующих формул, и его соли:

соединение No. 18

соединение No. 39

соединение No. 42

соединение No. 47

соединение No. 48

; и

соединение No. 50

28. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 18

29. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 39

30. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 42

31. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 47

32. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 48

33. Соединение следующей формулы и его соли:

соединение No. 50

34. Фармацевтическая композиция, обладающая частичной агонистической активностью в отношении V1a-рецепторов, содержащая соединение по любому из пп. 1-33 или его фармацевтически приемлемую соль в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель.

35. Способ лечения осложнения, возникающего в результате цирроза, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп. 1-33 или его фармацевтически приемлемой соли.

36. Способ по п. 35, где осложнение, возникающее в результате цирроза, представляет собой осложнение, при котором повышение кровяного давления является терапевтически целесообразным.

37. Способ по п. 35, где осложнение представляет собой спонтанный бактериальный перитонит, гепаторенальный синдром II типа (HRS2) или рефрактерный асцит.

38. Способ лечения для повышения кровяного давления, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп. 1-33 или его фармацевтически приемлемой соли.

39. Способ лечения состояния, выбранного из гиповолемического шока; вазодилататорного шока; кровоточащего варикозного расширения вен пищевода; гепаторенального синдрома; гепаторенального синдрома I типа; гепаторенального синдрома II типа; гипотензии, вызванной анестезией; парацентез-индуцированной циркуляторной дисфункции; интраоперационной кровопотери; острого кровотечения; кровопотери, связанной с санацией ожогов; кровопотери, связанной с носовым кровотечением; спонтанного бактериального перитонита; рефрактерного асцита; кровотечения при гипертензивной гастропатии; сепсиса; тяжелого сепсиса; септического шока; гипотензии; остановки сердца; кровопотери, связанной с травмой; вазодилататорного шока, вызванного сердечно-легочным шунтированием; вызванного милриноном вазодилататорного шока при застойной сердечной недостаточности; анафилактического шока; сердечно-сосудистой нестабильности, вызванной смертью мозга; острого респираторного дистресс-синдрома; острого повреждения легких; шока, вызванного интоксикацией метформином; шока, вызванного митохондриальным заболеванием; шока, вызванного отравлением цианидом; шока, вызванного синдромом капиллярной утечки, вызванным интерлейкином-2, другим цитокином, денилейкин дифтитоксом или другим иммунотоксином, или синдромом гиперстимуляции яичников; гипотензии, вызванной конечной стадией болезни почек; воспалительного заболевания

кишечника; реперфузионного повреждения; респираторного дистресс-синдрома новорожденных; тяжелого острого респираторного синдрома; асцита; вазодепрессорного обморока; вазовагального обморока; синдрома токсического шока; и синдрома идиопатической системной капиллярной утечки; или лечения для облегчения сердечно-легочной реанимации, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по любому из пп. 1-33 или его фармацевтически приемлемой соли.