Способ оценки активности инфекции, вызванной вирусами герпеса 4, 5 и 6 типа у детей



Владельцы патента RU 2639593:

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный медицинский университет имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение используют в медицине, педиатрии, инфекционных болезнях и касается способа оценки активности инфекции, вызванной вирусами герпеса 4, 5, 6 типа у детей. Сущность способа: у детей с подозрением на герпесвирусную инфекцию (ГВИ) 4, 5, 6 типа определяют количество ДНК вируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в соскобе из эпителия ротоглотки и при количестве ДНК более 1000 копий на 105 клеток для 4 типа ГВИ, и более 10000 копий на 105 клеток для 5 и 6 типа ГВИ, определяют активную стадию инфекции. Изобретение обеспечивает объективную оценку герпесвирусной инфекции 4, 5, 6 типа по показателям вирусной нагрузки, отражающим активность инфекционного процесса с помощью неинвазивного экспресс-метода со 100%-ной специфичностью и высокой чувствительностью. 6 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки активности смешанной герпесвирусной инфекции у детей.

Вирусные заболевания смешанной этиологии - одна из актуальных проблем современной клинической медицины. Инфицированность населения герпесвирусами (ГВ) очень высока и составляет от 65% до 90%. За последние 10-15 лет возросло число пациентов с рецидивирующими герпесвирусными инфекциями. Наличие микст-герпесвирусной инфекции способствует затяжному течению респираторных заболеваний, хронизации бронхолегочной и ЛОР-патологии, а также вовлечению в процесс других органов и систем.

Представители семейства Herpesviridae обладают способностью пожизненно персистировать в организме инфицированного человека. В настоящее время известно 8 клинически значимых типов вирусов из семейства Herpesviridae: вирусы простого герпеса 1 и 2 типов (ВПГ 1, 2), вирус 3 типа (ветряной оспы-опоясывающего герпеса), вирус 4 типа (Эпштейна-Барр, ВЭБ), вирус 5 типа (цитомегаловирус, ЦМВ), вирусы герпеса типов 6, 7 и 8.

ВЭБ-инфекция, или инфекционный мононуклеоз - заболевание, которое характеризуется выраженной интоксикацией с лихорадкой, лимфопролиферативным синдромом с поражением миндалин, лимфатических узлов, печени, селезенки и своеобразными изменениями состава крови. Вэб-инфекционный мононуклеоз относится к антропонозным инфекциям. Источником являются больные с клинически выраженными и стертыми формами болезни, здоровые вирусоносители. Инфицированность ВЭБ составляет около 90% населения. После первичного инфицирования ВЭБ, протекавшего в форме инфекционного мононуклеоза, в 15-25% случаев в дальнейшем отмечается хроническое или рецидивирующее течение инфекции.

Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) - одна из оппортунистических инфекций герпесвирусной группы с максимальной иммунодепрессивной активностью, самая широко распространенная внутриутробная инфекция с вертикальной трансмиссией до 95%. При хроническом течении формирует полиорганность поражений, при латентном - синдром нарушения противоинфекционной защиты. Реактивация хронического процесса и активация латентного у детей раннего возраста приводят к развитию тяжелых генерализованных форм с летальным исходом, особенно на фоне интеркуррентных заболеваний. ЦМВИ является триггером, поддерживающим фактором и маркером иммунопатологических синдромов, формируя контингент иммунокомпрометированных «часто болеющих» амбулаторных пациентов, представляющих значительные трудности в лечебной работе педиатров.

Вирус герпеса человека 6-го типа (ВГ-6) является широко распространенным β-герпес-вирусом, который обладает широким клеточным тропизмом, способен к длительной персистенции в организме человека. Инфекция, вызываемая ВГ-6 типа, является антропонозом. По данным отечественных авторов, частота носительства антител к ВГ-6 у детей раннего возраста в РФ варьирует от 72 до 95%. На сегодняшний день считается, что инфицирование происходит преимущественно в раннем детском возрасте. После первичного заражения ребенка возможно несколько вариантов развития болезни: от классической Roseola infantum до недифференцируемого заболевания, сопровождающегося лихорадочным состоянием, раздражительностью, отитом, судорожными приступами, сыпью.

Для диагностики активности герпесвирусных инфекций (ГВИ) традиционно используется серологический метод иммуноферментного анализа (ИФА) венозной крови с определением титра IgM и IgG с индексом авидности (ИА) в динамике (Современные аспекты герпесвирусных инфекций. Эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика: методические рекомендации / Правительство Москвы, Департамент Здравоохранения; [сост. Каражас Н.В. и др.]. - М.: Спецкнига, 2012. - с. 113).

Недостатки метода: данный метод не является прямым и недостаточно чувствительный - он косвенный и результат определяется индивидуальной иммунореактивностью, а иммуноглобулины не являются вируснейтрализующими. Метод не позволяет оценить степень репликативной активности вирусов, не определены «пороговые» значения вирусной нагрузки, разграничивающие активную и латентную стадию инфекции.

Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в объективности, чувствительности и неинвазивности.

Указанные задачи достигаются путем определения количества ДНК герпесвируса - вирусной нагрузки (ВН), в соскобе из эпителия ротоглотки методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) (тест-системы Реал Бест ДНК ВГЧ-6, Реал Бест ДНК ВЭБ, Реал Бест ДНК ЦМВ (Вектор-Бест, Россия).

Установлено разделяющее значение ВН, при превышении которого делают предположение об активном течении инфекции, что определяет дальнейшую врачебную тактику, направленную на уточнение патологического состояния лабораторными и клиническими методами.

Для построения математической модели активной/латентной ГВИ используют методику регрессионного анализа. Входной переменной является значение ВН, выраженное числом копий ДНК герпесвируса на 105 эпителиальных клеток соскоба ротоглотки пациента, выходная переменная-активная/латентная ГВИ у пациента (да/нет).

Для ГВИ 4 типа (ВЭБ) получают линейное уравнение регрессии: y=-0,55+0,7x, где x - значение вирусной нагрузки. Подставив значение ВН, в уравнение регрессии p=1/1+е-(0,55+0,7x), получают значение вероятности наличия активной ГВИ при данной ВН. Затем, при помощи рок-анализа определяют разделяющее значение - то значение ВН, при котором сумма чувствительности и специфичности для данного теста максимальна, и которая показывает, после какого значения вероятности один класс сменяется другим. Для ГВИ 4 типа оптимальный порог определяют ВН=1000 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток соскоба ротоглотки. Таким образом, при значениях ВН≤1000 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток определяют латентную стадию инфекции, а при значениях ВН≥1000 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток, определяют активную стадию инфекции.

Аналогичный расчет производят для ГВИ 5 и 6 типа. Получают линейное уравнение регрессии общее для 5-6 типа: y=-2,8+1,18х, подставив значение ВН, в уравнение регрессии p=1/1+е-(-2,8+1,18x), получают значение вероятности наличия активной ГВИ 5-6 типа, методом рок-анализа определяют разделяющее значение ВН=10000 копий ДНК ГВ 5-6 типа на 105 эпителиальных клеток. При значениях ВН≤10000 копий ДНК ГВ 5-6 типа на 105 эпителиальных клеток определяют латентную стадию инфекции, а при значениях ВН≥10000 копий ДНК ГВ 5-6 типа на 105 эпителиальных клеток, определяют активную стадию инфекции.

Таким образом, значения вирусной нагрузки, разделяющие активную стадию инфекции от неактивной:

- для ГВ-инфекции, вызванной вирусом 4 типа (ВЭБ) - 1000 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток;

- для ГВ-инфекции, вызванной вирусом 5 типа (ЦМВ) - 10000 копий ДНК ЦМВ на 105 эпителиальных клеток;

- для ГВ-инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6 типа - 10000 копий ДНК ГВ-6 на 105 эпителиальных клеток.

ПРИМЕР 1.

Больной А., 2 года 5 мес. ДДОУ не посещает.

Диагноз: инфекционный мононуклеоз, вызванный ВЭБ, средней тяжести.

Ребенок от 1 родов в 42 недели гестации. На первом году жизни: в возрасте 2 месяцев - атонический дерматит; 3 эпизода ОРВИ с 1 месяца жизни длительностью более 10 дней. За 6 месяцев третьего года жизни - 2 эпизода ОРВИ без антибиотикотерапии.

При осмотре: гипертрофия небных миндалин II ст., очаги налета белого цвета с обеих сторон, гранулезный фарингит. Подчелюстные лимфоузлы пакетами 2*3 см, безболезненные, заднешейные до 2 см единичные. При риноскопии - выраженный отек с обеих сторон, скудное слизистое отделяемое. Дыхание при аускультации - везикулярное. Печень увеличена на 1 см.

ИФА: анти-ВЭБ IgM (кач) - обнаружены, анти-ВЭБ IgG - 15,8 ОЕд/мл, ИА - 29%. Заключение: низкоавидные IgG анти-ВЭБ в сочетании с наличием анти-ВЭБ IgM - острая фаза герпесвирусной инфекции 4 типа (ВЭБ).

ПЦР количественно в соскобе эпителия ротоглотки - 38000 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует активной стадии герпесвирусной инфекции 4 типа (ВЭБ).

Лечение: интерферон альфа-2b150.000 ME ректальные суппозитории 2 раза в день 3 курса по 10 дней; Acyclovirum 0,2 по 1 таб. 5 раз в день в течение 5 дней; Clarithromycin 125/5 по 1 ч.л. 2 раза в день в течение 7 дней на фоне и оральной детоксикации и местной терапии - орошение миндалин спреем «Каметон» (Camphora + Chlorobutanolum + Oleum foliorum Eucalypti viminalis + Levomentholum) 3 раза в день 5 дней.

Через 1 месяц от начала терапии - положительный клинический эффект: тонзиллит купирован, подчелюстные лимфоузлы уменьшились в размере - пакетами до 1*2, заднешейные - единичные до 1 см, носовое дыхание восстановлено в полном объеме, печень - по краю реберной дуги.

Положительный лабораторный эффект: ПЦР количественно в соскобе из ротоглотки - 400 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует неактивной стадии герпесвирусной инфекции 4 типа (ВЭБ).

Терапия закончена. Рекомендована профилактика ОРВИ препаратами топического действия (Lysocime + Pyridoxine). Контроль методом количественной ПЦР ДНК ВЭБ в соскобе из ротоглотки при интеркуррентных заболеваниях.

Пример 2.

Больной Д., 4 года. В возрасте 2 лет перенес инфекционный мононуклеоз. В возрасте 3 лет впервые выявлена нейтропения средней тяжести (до 500 кл/мл крови), легкая анемия.

В настоящее время жалобы на слабость, плохой аппетит, увеличение лимфоузлов, частую «простудную» заболеваемость

При осмотре: пониженное питание; увеличение подчелюстных, заднешейных лимфоузлов (до 2 см, безболезненные). Анемия легкой степени поставлена на основании: Hb - 100 г/л. Вторичная иммунная недостаточность (ВИН), субкомпенсированная смешанного типа, диагностирована на основании нейтропении с абсолютным числом нейтрофилов 580 кл/мл (менее 1000 кл/мл) и гипоиммуноглобулинемии - IgG 273 мг/дл (N - 350-1400).

ИФА: анти-ВЭБ IgM - отрицательно, анти-ВЭБ IgG - 106,3 ОЕд/мл, ИА - 87%. Заключение: хроническая инфекция, вызванная герпесвирусом 4 типа (ВЭБ), латентное течение.

Методом количественной ПЦР в соскобе из ротоглотки - 300 копий ДНК ВЭБ на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует неактивной стадии герпесвирусной инфекции 4 типа (ВЭБ).

Лечение: ректальные суппозитории Кипферона (иммуноглобулиновый комплексный препарат (КИП) - 0,2 г; интерферон альфа-2b человеческий, рекомбинантный - 500000 ME) по 1 свече в день 3 курса по 10 дней, затем Pidotimod по 7 мл, один раз в день в течение 45 дней.

Через 1 месяц от начала терапии - положительный клинический эффект: улучшился аппетит, прибавил в массе, уменьшились подчелюстные лимфоузлы, не болел. Положительный лабораторный эффект: повышение количества нейтрофилов до 1000 кл/мл и IgG до возрастной нормы (370 мг/дл).

ПРИМЕР 3.

Больная Д., 8 мес. Диагноз: хроническая ЦМВИ, реактивация, острая фаза, с поражением печени (гепатит с синдромом цитолиза). ВИН, субкомпенсированная, смешанного типа (нейтропения, гипоиммуноглобулинемия G). Анемия легкой степени.

Высокий перинатальный риск ВУИ (ЦМВ): угроза прерывания 1 беременности в сроке 14 и 26 недель гестации; высокий антителогенез к ЦМВ (IgG 1: 6400) на фоне ОРВИ в I триместре. Иктеричность с 1 суток до 1,5 месяцев. Максимальный уровень общего билирубина 243 мкмоль/л, прямой билирубин 56 мкмоль/л (более 10% от общего); АЛТ 98 Е/л (3 N), ACT 79 Е/м (2,5 N) с волнообразным снижением и повышением в динамике.

В настоящее время жалобы на плохой аппетит, диспепсию (запоры), недостаточную прибавку в массе.

При осмотре: пониженного питания; увеличение подчелюстных лимфоузлов (II порядка) и размеров печени (выступает на 3 см из-под края реберной дуги).

УЗИ - гепатоспленомегалия, реактивные изменения в печени.

Анемия легкой степени поставлена на основании: Hb - 100 г/л.

ВИН, субкомпенсированная смешанного типа, диагностирована на основании нейтропении с абсолютным числом нейтрофилов 980 кл/мл (менее 1000 кл/мл) и гипоиммуноглобулинемии - IgG 273 мг/дл (N - 350-1400).

В биохимическом анализе крови: АЛТ - 74 Е/л (N - 0-31), ACT - 60 Е/л (N - 0-32) при нормальном значении ГГТП - 28 Е/л (N - 8-61).

ИФА: анти-CMV IgM - отрицательно, анти-CMV IgG - 106,3 МЕ/л, ИА - 47%. Заключение: поздняя стадия острой фазы герпесвирусной инфекции 5 типа (ЦМВ).

ПЦР на ДНК ЦМВ количественно: в слюне 3000000 копий на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует активной стадии герпесвирусной инфекции 5 типа (ЦМВ).

Лечение: ректальные суппозитории Кипферона 500000 ME 1 раз в день 3 курса по 10 дней, ликопид 0,001 (1 таб.) 1 раз в день 10 дней 3 курса с цикличным чередованием, на фоне урсодезоксихолиевой кислоты (урсофальк) в дозе 15 мг/кг (135 мг однократно на ночь) и оральной детоксикации.

Через 3 месяца от начала терапии - положительный клинический эффект: улучшился аппетит, повысилась прибавка в массе, нормализовался размер печени и стул, уменьшились подчелюстные лимфоузлы.

Положительный лабораторный эффект: снижение до верхней границы нормы АЛТ - 31 Е/л, ACT - 32 Е/л. Повышение количества нейтрофилов до 1700 кл/мл и IgG до возрастной нормы (370 мг/дл). ПЦР на ДНК ЦМВ количественно в слюне 2700 копий на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует неактивной стадии герпесвирусной инфекции 5 типа (ЦМВ). Системная противовирусная терапия закончена. Рекомендован режим «антигенного щажения», контроль ПЦР на ДНК ЦМВ через 3 месяца, а также контроль АЛТ, ACT после интеркуррентных заболеваний.

ПРИМЕР 4.

Больной Е., 4,5 года. Посещает ДДОУ с 2,6 лет. Диагноз: хронический рецидивирующий аденоидит, тонзиллофарингит, ВИН, субкомпенсированная, смешанного типа (нейтропения, лимфоцитопения, гипоиммуноглобулинемия A, G).

Высокий перинатальный риск ВУИ (ЦМВ): 3 беременность у женщины 40 лет (1 выкидыш, 2 - замершая) с угрозой прерывания в сроке 12 и 22 недель; ОРВИ в сроке 24 недели при активации латентной ЦМВ-инфекции (ИА IgG к ЦМВ 12%).

На 1 году жизни 7 эпизодов ОРВИ, трижды с госпитализацией и антибиотикотерапией. Хронический аденоидит с двух лет с частыми обострениями. С момента начала коллективного воспитания ОРВИ ежемесячно с непрекращающимся насморком в интервалах.

На пятом году жизни, за последние 6 месяцев - 5 эпизодов ОРВИ. Индекс резистентности (ИР)=0,83 (низкий).

При осмотре: круги под глазами, носовое дыхание значительно затруднено, ночной «храп». Лимфоузлы подчелюстные и переднешейные II порядка. ГНМ III степени с умеренной гиперемией и отеком, гранулезный фарингит. Дыхание пуэрильное, проводные хрипы.

ВИН, субкомпенсированная, смешанного типа поставлена на основании клинической картины; нейтропении с абсолютным числом нейтрофилов 1380 кл/мл (менее 1500 кл/мл), лимфоцитопении (1900 клеток в мл); гипоиммуноглобулинемии А - 6,6 мг/дл (N - 21-291) и G - 210 мг/дл (N - 350-1400).

ИФА: анти-CMV IgM - отрицательно, анти-CMV IgG - 106,4 МЕ/л, ИА- 68%. Заключение: хроническая герпесвирусная инфекция 5 типа (ЦМВ), латентное течение. Лечение не требуется. ПЦР на ДНК ЦМВ количественно в слюне 1300 копий на 105 эпителиальных клеток. Заключение: вирусная нагрузка соответствует неактивной стадии герпесвирусной инфекции 5 типа (ЦМВ).

Рекомендации: контроль ПЦР на ДНК ЦМВ через 3 месяца.

ПРИМЕР 5.

Больной А., 5 мес. Ребенок от 2 беременности, 2 родов, плановое кесарево сечение, вес при рождении 3178, рост 49, Апгар 8/9. Выписан на 5 сутки. На искусственном вскармливании. Период новорожденности без особенностей. Привит по календарю. В 4 месяца - гипохромная анемия, назначен Мальтофер. В 5 месяцев заболел остро, появилась температура до 39°C, снижение аппетита. Лихорадка и катаральные явления отмечались в течение 2 суток. На 3-й сутки болезни на фоне снижения температуры до 37,5°C и улучшения самочувствия одномоментно появилась сыпь на коже, розовая, мелкая, пятнисто-папулезная, без явного зуда.

При осмотре - кожные покровы бледно-розового цвета, чистые. Лимфатические узлы - мелкие, единичные: подчелюстные, заднешейные, подмышечные и паховые. Слизистая ротоглотки ярко гиперемирована, умеренное увеличение миндалин, наложений нет. При риноскопии - умеренный отек с обеих сторон. В легких пуэрильное дыхание, проводится во все отделы, хрипов нет. Живот мягкий, безболезненный. Печень и селезенка не увеличены. Стул и диурез не нарушены. Менингеальной и очаговой симптоматики нет.

Проведено обследование: клинический анализ крови: лейкоциты - 10⋅10*6, нейтрофилы - 3230 кл/мл, лимфоциты - 55%, моноциты - 7%, СОЭ - 20 мм/ч. Общий анализ мочи - норма.

Серологическое обследование: специфические антитела IgG к ВГЧ-6 не обнаружены. ДНК ВГЧ-6 обнаружена в соскобе слизистой ротоглотки в количестве 48000 копий ДНК ВГЧ-6 на 105 эпителиальных клеток. Маркеры других герпесвирусных инфекций - не обнаружены. Заключение: вирусная нагрузка соответствует активной стадии герпесвирусной инфекции 6-типа.

Диагноз:Roseola infantum, вызванная вирусом герпеса человека 6 типа.

Получал лечение: интерферон альфа-2b 150.000 ME ректальные суппозитории 2 раза в день 3 курса по 10 дней

На 6 сутки наблюдения произошла полная элиминация экзантемы, без пигментации кожи. Температура тела нормализовалась. Сохранялась незначительная заложенность носа.

Через 1 мес от начала лечения - ПЦР количественно: в соскобе из ротоглотки ДНК ВГЧ-6 не обнаружена. Клинический эффект - положительный, ребенок здоров, жалоб нет.

ПРИМЕР 6.

Ребенок М., возраст 2 г. 6 мес. Направлен для обследования по поводу частых ОРВИ: 4 раза за последние 6 месяцев (дважды осложненных бронхитом и отитом с антибиотикотерапией), кашля и субфебрильной температуры в течение последних двух недель, Последнее заболевание 1 месяц назад сопровождалось увеличением затылочных и подчелюстных лимфоузлов. При осмотре: кожные покровы бледные, чистые; подчелюстные лимфоузлы 2 порядка множественные, заднешейные 1-2 порядка - единичные; гипертрофия миндалин 2 ст. При риноскопии - слизистая чистая, бледная. При аускультации дыхание везикулярное. Живот мягкий, безболезненный, стул 1 раз в день.

Серологические маркеры острых герпесвирусных инфекций не обнаружены: ИА IgG к ЦМВИ=61%, IgM к ЦМВ=0; ИА IgG к VCA ВЭБ=63%, IgM к ВЭБ=0; анти-ВГб IgG=0.

ПЦР-анализ соскоба ротоглотки на ДНК ГВ 4, 5, 6 типа: ДНК ВЭБ - не обнаружена, ДНК ЦМВ - не обнаружена, ДНК ВГ-6 типа - 3000 копий ДНК на 105 эпителиальных клеток.

Заключение - значения вирусной нагрузки соответствуют неактивной стадии герпесвирусной инфекции 6 типа.

Положительный эффект данной методики - возможность объективной оценки герпесвирусной инфекции 4, 5 и 6 типа по показателям вирусной нагрузки, отражающим активность инфекционного процесса, с помощью неинвазивного экспресс-метода - количественной ПЦР со 100% специфичностью и высокой чувствительностью.

Способ оценки активности инфекции, вызванной вирусами герпеса 4, 5, 6 типа у детей с помощью лабораторной диагностики, отличающийся тем, что у ребенка с подозрением на герпесвирусную инфекцию (ГВИ) 4, 5, 6 типа определяют количество ДНК вируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в соскобе из эпителия ротоглотки, и, при количестве ДНК более 1000 копий на 105 клеток для 4 типа ГВИ, и более 10000 копий на 105 клеток для 5 и 6 типа ГВИ, определяют активную стадию инфекции.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области иммунологии. Предложено гуманизированное антитело, специфичное к STEAP-1, и его антигенсвязывающий фрагмент.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложены антитело и его фрагмент, которые связываются с фосфо-эпитопом на белке Тау, а также кодирующие их полинуклеотиды; линии клеток, продуцирующие антитела; вектор, содержащая его клетка-хозяин и способ получения антитела и его функционального фрагмента.

Способ определения стадии грибовидного микоза относится к медицине, а именно к дерматовенерологии, и может быть использован для определения стадии грибовидного микоза - наиболее часто встречаемой нозологической разновидности первичных кожных лимфом.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, перинатологии и клинической иммунологии, и предназначено для прогнозирования эффективности стандартного лечения задержки роста плода.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и онкогематологии, и может быть использовано для контроля качества исследуемого образца при мониторинге минимальной резидуальной болезни при множественной миеломе методом проточной цитофлуориметрии аспирата костного мозга.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для визуализации биологических объектов. Для этого осуществляют мечение анализируемых клеточных компонент, клеток, тканей или органов флуоресцентными зондами.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии и эндокринологии, и представляет собой способ диагностики степени тяжести гиперандрогении, включающий определение индекса свободного тестостерона (ИСТ) на основе глобулина, связывающего половые стероиды, и тестостерона крови, отличающийся тем, что ИСТ рассчитывают по формуле где Тобщий – уровень общего тестостерона, нмоль/л, ГСПС – уровень глобулина, связывающего половые стероиды, нмоль/л, и при величине ИСТ от 31 до 36 и наличии клинических проблем, выбранных из гирсутизма, дермопатии и нарушений менструального цикла, диагностируют легкую степень тяжести заболевания, при величине ИСТ от 36 до 100 диагностируют среднюю степень тяжести заболевания, а при величине ИСТ более 100 диагностируют тяжелую степень тяжести заболевания.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и представляет собой способ определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах объектов окружающей среды и в почве, заключающийся в подготовке пробы, внесении в пробу иммуномагнитных частиц, иммунохимическом связывании, в результате чего образуются агрегаты цист и ооцист с магнитными частицами, улавливании агрегатов цист и ооцист в магнитном поле, отмывке зафиксированных агрегатов цист и ооцист буферным раствором, диссоциации меркаптоэтанолом или соляной кислотой, разделении цист, ооцист и магнитных частиц в магнитном поле, переносе выделенных цист и ооцист на предметное стекло для последующего иммунофлуоресцентного мечения и последующей оценки микроскопированием с применением насадки «Опти-Люм» на микроскоп, где результат учитывают исходя из того, что цисты лямблий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от округлых до овальных от 8 до 14 мкм в длину на 7-10 мкм в ширину, с ярко подсвеченными краями, ооцисты же криптоспоридий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до сферических от 3 до 5 мкм в диаметре, с ярко подсвеченными краями.
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, детским инфекционным болезням, и предназначено для диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения аналитической тест-системы на основе суспензионных микрочипов для детекции маркеров заболеваний.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к бис-Met-гистонам, и может быть использовано в медицине. Молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид, состоящий из двух остатков метионина в качестве первого и второго N-концевых аминокислотных остатков, соединенных через пептидную связь со зрелым эукариотическим гистоном H1. 3. Полипептид получают путем культивирования клетки-хозяина, трансформированной вектором экспрессии, включающим указанную молекулу нуклеиновой кислоты. Полипептид используют в составе фармацевтической композиции для лечения рака, бактериальных, вирусных или грибковых инфекций. Также полипептид используют в составе композиции для диагностики пациента в отношении наличия ответа на фармацевтическую композицию, содержащую указанный полипептид, или в отношении излечимости с ее помощью. Изобретение позволяет увеличить эффективность рекомбинантной экспрессии и облегчить определение указанного полипептида в присутствии эндогенных гистонов при сохранении биологической активности зрелого эукариотического гистона H1. 3. 12 н. и 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии. Предложен способ морфологической диагностики тяжести преэклампсии. Проводят оценку уровня оптической плотности цитоплазмы синцитиотрофобласта промежуточных ворсин плаценты посредством иммуногистохимии с первичными антителами к DAI-1. При значениях оптической плотности менее 0,15 у.е. диагностируют преэклампсию тяжелого течения, при значениях выше 0,15 у.е. - преэклампсию умеренного течения и артериальную гипертензию беременных. Изобретение обеспечивает эффективную диагностику тяжести преэклампсии на основании оценки экспрессии ДНК-распознающих рецепторов DAI-1 в ткани плаценты. 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии, патологической анатомии, а также к гистологии, цитологии и клеточной биологии, и может быть использовано в диагностике в миопатии центрального стержня. Проводят иммуногистохимическое выявление маркеров наружной митохондриальной мембраны и митохондриального комплекса IV: готовят гистологические образцы-срезы, наносят на них усилитель флуоресцентного сигнала, далее на срезы наносят белок-блокатор, обеспечивая уменьшение фонового неспецифического окрашивания, и затем наносят вторичные флуоресцентные антитела и фотозащитный реагент с последующим исследованием с помощью люминесцентного микроскопа. Осуществление изобретения позволяет повысить надежность диагностики миопатии центрального стержня за счет расширения технических возможностей исследования биоптатов скелетных поперечнополосатых мышц пациентов при использовании иммуногистохимического метода на парафиновых биопсийных препаратах. 2 ил.,1 пр.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для определения степени индивидуального генетического риска атеросклероза, ишемической болезни сердца и инфаркта миокарда. Изобретение основано на измерении степени гетероплазмии мтДНК по мутациям 652ins/delG, A750G, A1555G, С3256Т, Т3336С, С5178А, 8516insА/С/АС, 8528insA, 8930insG, G9477A, 10958insC, A12308G, G12372A, 13047insC, 13050insC, C14766T, G15059A и A15326G. Измеренные показатели гетероплазмии используют в качестве переменных величин в формуле, по которой рассчитывают степень суммарной мутационной нагрузки митохондриального генома. При превышении порогового значения данного показателя, принятого равным 40,3 балла, диагностируют наличие атеросклероза и индивидуальной генетической предрасположенности к атеросклерозу, ишемической болезни сердца и инфаркту миокарда.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности к онкологии. Предложены способ диагностики рака предстательной железы и способ мониторинга реакции на терапию рака предстательной железы, включающие контактирование раковых клеток эпителиального происхождения с анти-STEAP-l антителом, которое специфически связывается с простата-специфическим маркером STEAP-1 с KD≤1000 нМ, где анти-STEAP-1 антитело представляет собой антитело 15А5, продуцированное клеткой гибридомы, имеющей номер депонирования микроорганизмов РТА-12259. Предложенная группа изобретений обеспечивает эффективные способы диагностики и мониторинга рака предстательной железы. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 11 ил., 8 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к средствам исследования и диагностики с помощью биочипов. Способ селективного анализа на основе иммунологических реакций с использованием биочипов включает подготовку пробы, смешение антигенов пробы с суперпарамагнитными частицами, соединенными с антителами к указанным антигенам пробы, транспортировку смеси в зону селективного детектирования по имуннологическим реакциям через капилляры и воздействие на смесь магнитным полем. При этом воздействие магнитным полем осуществляют во время прохождения смеси через капилляры, перемещая его вдоль капилляров по направлению от входа в них смеси до выхода, причем используют изменяющееся во времени и в пространстве неоднородное магнитное поле. После прохождения по капиллярам смесь последовательно перемещают магнитным полем через все зоны селективного детектирования по имуннологическим реакциям. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности. 1 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к средствам исследования и диагностики с помощью биочипов. Способ селективного анализа на основе иммунологических реакций с использованием биочипов включает подготовку пробы, смешение антигенов пробы с суперпарамагнитными частицами, соединенными с антителами к указанным антигенам пробы, транспортировку смеси в зону селективного детектирования по имуннологическим реакциям через капилляры и воздействие на смесь магнитным полем. При этом воздействие магнитным полем осуществляют во время прохождения смеси через капилляры, перемещая его вдоль капилляров по направлению от входа в них смеси до выхода, причем используют изменяющееся во времени и в пространстве неоднородное магнитное поле. После прохождения по капиллярам смесь последовательно перемещают магнитным полем через все зоны селективного детектирования по имуннологическим реакциям. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности. 1 ил.

Изобретение относится к биохимии. Предложены способы обнаружения человеческого антитела изотипа IgE против омализумаба. Также рассмотрены наборы, способы идентификации пациента, имеющего риск анафилактической реакции на омализумаб, и способ лечения пациента, имеющего IgE-опосредованное нарушение. Данное изобретение позволяет своевременно обнаруживать аллергические реакции на омализумаб и может найти применение в терапии и предупреждении развития анафилаксии. 9 н. и 43 з.п. ф-лы, 27 ил., 7 табл., 7 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описан способ количественной оценки и характеризации агрегатов А-бета, включающий следующие стадии, на которых: а) осуществляют иммобилизацию захватывающих молекул на субстрате, б) наносят предназначенный для тестирования образец и внутренний стандарт на субстрат, в) добавляют меченые с целью детекции зонды, которые метят агрегаты А-бета посредством специфического связывания с ними, и г) определяют количество и размер маркированных агрегатов А-бета с пространственным разрешением в каждом случае по сравнению с соответствующим фоном, при этом стадию б) можно осуществлять до осуществления стадии в). Также представлен набор для осуществления описанного способа, содержащий стандарт и один или несколько из следующих компонентов: стеклянный субстрат с нанесенным покрытием из гидрофобной субстанции; захватывающую молекулу; зонд; субстрат с захватывающей молекулой; растворы; и буфер. Также представлен способ определения эффективности действующих веществ и/или терапий, предназначенных для лечения болезни Альцгеймера, отличающийся тем, что а) осуществляют иммобилизацию захватывающих молекул на субстрате, б) наносят предназначенный для тестирования образец и внутренний стандарт на субстрат, в) добавляют меченые с целью детекции зонды, которые метят агрегаты А-бета посредством специфического связывания с ними, и г) определяют количество и размер маркированных агрегатов А-бета с пространственным разрешением в каждом случае по сравнению с соответствующим фоном, при этом стадию б) можно осуществлять до осуществления стадии в), д) сравнивают результаты, полученные на образцах, которые представляют собой образцы биологической жидкости организма, взятые до или в различные моменты времени после введения действующих веществ и/или применения терапии, с результатами, полученными для контроля, который не обрабатывали действующим веществом и/или не подвергали терапии, и на основе полученных результатов отбирают действующие вещества и/или терапии, после применения которых наблюдалось снижение количества агрегатов А-бета. Изобретение расширяет арсенал средств, предназначенный для определения эффективности лечения болезни Альцгеймера. 3 н. и 40 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описано антитело для снижения концентрации антигена в плазме, содержащее антигенсвязывающий домен и FcRn-связывающий домен человека, активность связывания антигена которого отличается в двух различных условиях концентрации кальция и является более низкой в условиях низкой концентрации кальция, чем в условиях высокой концентрации кальция, где низкая концентрация кальция представляет собой концентрацию ионизированного кальция от 0,1 до 30 мкМ, а высокая концентрация кальция представляет собой концентрацию ионизированного кальция от 100 мкМ до 10 мМ, где указанное антитело содержит по крайней мере четыре аминокислоты, выбранные из группы, включающей аминокислоты в положениях 30, 31, 32, 50 и 92 в соответствии с нумерацией по Kabat в легкой цепи, которые обладают хелатирующей активностью в отношении металла. А также описана фармацевтическая композиция, содержащая данное антитело. Изобретение может быть использовано для ускорения захвата антигенсвязывающими молекулами антигена в клетки, увеличения количества раз связывания антигена одной антигенсвязывающей молекулой, ускорения снижения концентрации антигена в плазме и увеличения удержания антигенсвязывающей молекулы в плазме, а также антигенсвязывающих молекул. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 56 ил., 28 табл., 25 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-12-01 2017-12-30T11:36:46
Наверх