Системы, способы и составы для лечения рака

Описаны способ и составы для лечения рака с применением по меньшей мере двух эпигенетических модификаторов. Предложены: способ лечения пациента с раковым заболеванием, включающий совместное введение терапевтически эффективного количества кверцетина и фенилбутирата натрия (ФБН), причем каждый из кверцетина и фенилбутирата натрия вводят внутривенно, и доза кверцетина составляет от 0,5 до 1,5 г, и доза фенилбутирата натрия составляет от 1 до 10 г; фармацевтическая комбинация указанных соединений для лечения пациента с раковым заболеванием и для применения в лечении ракового заболевания и набор для лечения пациента с раковым заболеванием. Технический результат состоит в синергизме действия соединений, в значительном улучшении в качестве жизни и в ответе на химиотерапию. В различных вариантах реализации также применяют гипербарическую кислородную терапию и терапию с применением ингибиторов гликолиза. 4 н и 39 з.п. ф-лы, 2 пр.

 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной заявки США 61/505393, поданной 7 июля 2011 года и озаглавленной «НАПРАВЛЕННЫЕ ВНУТРИВЕННЫЕ ТЕРАПИИ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ С НАРУШЕНИЕМ ФУНКЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И РАКОМ» ("TARGETED INTRAVENOUS THERAPIES FOR PATIENTS WITH IMMUNE DYSFUNCTION AND CANCER"), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки, и на основании предварительной заявки США 61/507950, поданной 14 июля 2011 года и озаглавленной «СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАКА» ("METHOD FOR TREATING CANCER"), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0002] Настоящее изобретение относится к различным системам, способам и составам для лечения пациентов с раком, и в частности для лечения пациентов с поздними стадиями рака.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] В 2007 году 10 наиболее часто диагностируемых видов рака среди мужчин в Соединенных Штатах Америки включали рак простаты, легких, толстой кишки, прямой кишки и мочевого пузыря; меланомы кожи; неходжкинскую лимфому; рак почек; рак ротовой полости и горла; лейкемию; и рак поджелудочной железы. У женщин наиболее распространенными видами рака являлись рак груди, рак легких и рак толстой кишки. В целом, у 758587 мужчин был диагностирован рак, и 292853 мужчин умерло от рака в США в 2007 году. У женщин, как было показано программой «Течение, распространенность и исходы злокачественных новообразований» (SEER) Национального института рака, заболеваемость распространенным раком в 2008 году составляла 6451737 случаев. В целом, было показано, что в 2010 году центром по профилактике и контролю заболеваемости (CDC) было зарегистрировано 11957599 случаев рака поздних стадий, и процент почти не менялся на протяжении последних 8 лет (482000 случаев в 2000 году против 456000 случаев в 2008 году). Годовое изменение в частоте проявления рака между 1999 и 2008 годами составило примерно 0,6%. Статистика показывает, что смертность от распространенного рака всех типов значительно не изменилась за последнее десятилетие, а в некоторых случаях, таких как рак легких, смертность увеличивается, особенно среди женщин. Частота выживаемости пациентов остается без изменений, даже несмотря на то, что на рынок внедряется большое количество агентов для химиотерапии рака на поздних стадиях. Более того, возможная токсичность многих химиотерапевтических агентов может быть неприемлемым фактором для врачей и для пациентов. Поэтому очевидна необходимость нетоксичной терапии, которая будет использоваться или отдельно, или в комбинации с традиционной химиотерапией.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0004] В различных вариантах реализации настоящего изобретения предложен фармацевтический состав для профилактики или лечения рака, содержащий два или более «эпигенетических модификаторов». Согласно другому варианту реализации, эпигенетическими модификаторами могут быть ингибиторы гистоновых деацетилаз и/или деметилирующие агенты. Согласно предпочтительному варианту реализации, деметилирующие агенты могут опосредованно функционировать как ингибиторы гистоновых деацетилаз (HDACI) и наоборот. В других частных предпочтительных вариантах реализации, эпигенетические модификаторы выбраны из группы, включающей фенилбутират натрия (ФБН), липоевую кислоту (ЛК), кверцетин, вальпроевую кислоту, гидралазин, бактрим, экстракт зеленого чая (например, галлат эпигаллокатехина (EGCG)), куркумин, сульфорафан и аллицин/диаллил дисульфид. Согласно предпочтительному варианту реализации, один эпигенетический модификатор содержит фенилбутират натрия (ФБН), а другой содержит кверцетин. В другом предпочтительном варианте реализации, один эпигенетический модификатор содержит фенилбутират натрия (ФБН), а второй эпигенетический модификатор содержит экстракт зеленого чая, такой как галлат эпигаллокатехина (EGCG).

[0005] В других вариантах реализации фармацевтический состав может дополнительно содержать один или более ингибиторов гликолиза. Согласно другому варианту реализации, ингибиторы гликолиза выбраны из группы, включающей дихлоруксусную кислоту, октреотид, и 2 дезоксиглюкозу (2ДГ). Согласно другим вариантам реализации, фармацевтический состав может дополнительно содержать один или более окислителей или антиоксидантов. Согласно другим вариантам реализации, окислитель или антиоксидант выбраны из группы, включающей витамин C, германий, L-карнитин, таурин, глутатион, лизин, пролин, перекись водорода (H2O2), и диметилсульфоксид (ДМСО).

[0006] В различных вариантах реализации, предложена дозированная форма фармацевтического состава для профилактики или лечения рака, включающая два или более эпигенетических модификаторов в комбинированной форме, где эпигенетические модификаторы представлены в дозе, которой можно вызвать ответ опухоли у людей (например, уменьшение опухолевых маркеров, уменьшение размеров человеческой опухоли), что измеряется за счет лабораторных или радиологических исследований после введения от примерно 1 до примерно 60 доз. В других различных вариантах реализации, предложена дозированная форма фармацевтического состава для профилактики или лечения рака, включающая два или более эпигенетических модификаторов, где эпигенетические модификаторы представлены в дозе, которой можно вызвать увеличение функционирования иммунной системы, что измерялось по увеличению активности лейкоцитов и/или натуральных киллеров у человека после введения от примерно 1 до примерно 60 дозированных форм.

[0007] В других различных вариантах реализации предложен набор, содержащий единичную дозу фармацевтического состава для профилактики или лечения рака, содержащую два или более эпигенетических модификаторов, и емкость, в которой указанная единичная доза содержится по меньшей мере частично.

[0008] В различных вариантах реализации предложен способ профилактики или лечения, включающий введение терапевтически эффективных количеств двух или более эпигенетических модификаторов животному. В одном варианте реализации, это профилактика или лечение рака. В предпочтительном варианте реализации, рак является эпигенетически управляемым. В другом частном предпочтительном варианте реализации, выбор происходит из группы, включающей глиому, рак кишечника, рак поджелудочной железы, лейкемию, немелкоклеточную карциному легкого, и злокачественную меланому. В другом предпочтительном варианте реализации, рак с гипоксической агрессивностью.

[0009] В других вариантах реализации, предложен способ профилактики или лечения, включающий введение терапевтически эффективных количеств одного или нескольких эпигенетических модификаторов клеточной линии или культуре in vitro или in vivo на животной модели и помещение животного в гипербарическую кислородную среду. В одном частном варианте реализации, один или более эпигенетических модификаторов могут быть даны до помещения животного в гипербарическую кислородную среду. В другом частном варианте реализации, одни или более эпигенетических модификаторов могут быть даны после помещения животного в гипербарическую кислородную среду. Еще в одном альтернативном варианте реализации, один или более эпигенетических модификаторов могут быть даны до и после помещения животного в гипербарическую кислородную среду. В другом варианте реализации, эпигенетические модификаторы можно принимать отдельно или в комбинированной форме. В частном предпочтительном варианте реализации, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит в течение примерно двадцати четырех (24) часов до или после введения модификаторов. Во втором предпочтительном варианте реализации, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит между примерно пятью (5) минутами и девяноста (90) минутами до или после введения модификаторов. В третьем предпочтительном варианте реализации, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит между примерно тридцатью (30) минутами и примерно тремя (3) часами до или после введения.

[0010] В другом варианте реализации, для любого из вышеуказанных методов, химиотерапия или радиационная терапия могут быть одним или многими дополнительными шагами, которые имеют место перед или после введения любого эпигенетического модификатора, или в единичной, или в комбинированной форме, отдельно или вместе, до или после помещения животного в гипербарическую кислородную среду.

[0011] В различных вариантах реализации, предложен способ профилактики или лечения, включающий введение терапевтически эффективных количеств одного или нескольких ингибиторов гликолиза, достаточных для того, чтоб модифицировать линию раковых клеток или культуру in vitro или in vivo на животной модели, и помещение животного в гипербарическую кислородную среду. В частном варианте реализации, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит в течение примерно двадцати четырех (24) часов до или после введения. Во втором частном варианте, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит между примерно пятью (5) минутами и примерно девяноста (90) минутами до или после введения. В другом частном предпочтительном варианте, помещение животного в гипербарическую кислородную среду происходит между примерно тридцатью (30) минутами и примерно тремя (3) часами до или после введения.

[0012] В других вариантах реализации, предложен способ профилактики или лечения, включающий введение терапевтически эффективных количеств одного или нескольких ингибиторов гликолиза, достаточных для того, чтобы модифицировать раковые клеточные линии или культуры in vitro или in vivo на животной модели, и введение терапевтически эффективных количеств одного или нескольких эпигенетических модификаторов животному. В частном варианте реализации, один или более введений ингибиторов гликолиза и один или более введений эпигенетических модификаторов происходит в течение примерно двадцати четырех (24) часов до или после каждого из них. В другом частном варианте реализации, один или более введений ингибиторов гликолиза происходит между примерно пятью (5) минутами и примерно девяноста (90) минутами до или после введения одного или нескольких эпигенетических модификаторов. В третьем частном варианте реализации, один или более введений ингибиторов гликолиза происходит между примерно тридцатью (30) минутами или примерно тремя (3) часами после одного или более введений эпигенетических модификаторов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0013] Нижеприведенная характеристика, примеры и данные представляют полное описание получения и применения состава изобретения. Поскольку множество вариантов реализации настоящего изобретения можно осуществить, не выходя за рамки сущности и объема изобретения, изобретение определяется приложенной формулой изобретения. Указанные примеры приведены, чтобы предоставить специалисту подробное раскрытие и описание того, как получать и применять предпочтительные варианты композиций и способов, и не ограничивают настоящее изобретение каким-либо образом. Модификации описанных режимов осуществления изобретения очевидны специалистам и предполагается, что такие модификации находятся в рамках следующей формулы изобретения. Если не оговорено иное, применяются следующие определения.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

[0014] В настоящей заявке термин «вводить», «введение», «доставлять» или «доставка» (в совокупности «введение») относится к введению в организм посредством таблеток, капсул, мягких капсул, внутривенных, внутримышечных и/или подкожных инъекций, трансдермальных пластырей, кремов, гелей или посредством других механизмов, которые известны в данной области или в дальнейшем будут разработаны.

[0015] В настоящей заявке термин «активный ингредиент» относится к любому материалу, который является или предполагается, что является, биологически активным

[0016] В настоящей заявке термин «комбинированная форма», относится к присутствию двух или более активных ингредиентов в одной и той же среде. Например, если активные ингредиент A и активный ингредиент B вместе в одном растворе, можно сказать, что смесь активного ингредиента A и активного ингредиента B является комбинированной формой.

[0017] В настоящем описании термин «эпигенетический модификатор», относится к материалу, который влияет, считается, что влияет, или имеет тенденцию к влиянию на экспрессию и функцию генов. Также в настоящем документе используется термин «эпигенетически управляемый», который означает любой материал, затронутый, или имеющий тенденцию быть под влиянием, экспрессии и функции генов.

[0018] В настоящей заявке термин «ингибитор гликолиза», относится к материалу, который ингибирует, считается, что ингибирует, или имеет тенденцию к ингибированию гликолиза в раковых клетках.

[0019] Термин «солевой», который используется в настоящем документе, означает стерильный или относительно стерильный раствор хлорида натрия в воде. Солевой раствор может подходить для внутривенных инъекций человеку.

[0020] В настоящем описании термин «дозированная форма» означает массу или объем фармацевтического состава, предназначенную для одновременного введения пациентом.

ОПИСАНИЕ

[0021] Было обнаружено, что применение двух или более эпигенетических модификаторов для лечения рака дает неожиданные и синергетические терапевтические результаты. В частности, совместное введение, совместный состав и/или близкое по времени введение составов имеют тенденцию приносить особенно хороший результат. Кроме того, в различных вариантах гипербарическая кислородная терапия дополнительно усиливает терапевтический эффект. Также было обнаружено, что различные антиоксиданты и ингибиторы гликолиза могут с успехом применяться в дополнение к двум или более эпигенетическим модификаторам. Совместное введение, совместное введение в состав и/или близкое по времени введение любых эпигенетических модификаторов, антиоксидантов, ингибиторов гликолиза и/или гипербарическая кислородная терапия могут производиться в любом порядке, но могут иметь место в течение примерно 24 часов до или после каждого из них, между примерно 5 минутами и примерно 90 минутами до или после каждого из них, или между примерно 30 минутами и примерно 3 часами до или после каждого из них.

[0022] Составы в соответствии с различными вариантами реализации включают два или более эпигенетических модификаторов. Эпигенетические модификаторы могут работать вместе и изменять экспрессию генов в раковых клетках и предраковых клетках. Эпигенетические модификаторы могут быть выбраны таким образом, чтобы увеличить или уменьшить генетическую экспрессию. Например, эпигенетические модификаторы могут использоваться для того, чтобы уменьшить экспрессию генов семейства саркомы крыс ("Ras") и/или генов B-клеточной лимфомы-2 ("bel-2").

[0023]. Эпигенетические модификаторы, встречающиеся в различных вариантах реализации, включают, но не ограничиваются только ими, ингибиторы гистоновых деацетилаз (HDACIs) и деметилирующие агенты. Деметилирующие агенты представляю собой агенты, которые ингибируют или имеют тенденцию ингибировать метилирование ДНК и/или гистонов путем ингибирования или тенденции ингибирования ферментов метилирования, таких как ДНК-метилтрансферазы (DNMT) или гистоновые метилтрансферазы. Агенты деметилирующей химеотерапии включают, но не ограничиваются только ими, следующие соединения: аналоги цитидина, такие как 5-азацитидин (азацитидин) и 5-азадеоксицитидин (децитабин). В частности, известно, что HDACIs, нарушают или имеют тенденцию нарушать работу деацетилаз гистонов. Деацетилаза гистонов представляет собой фермент, который удаляет ацетильную группу с гистонов и активен перед транскрипцией. Среди других характеристик, также было показано, что эпигенетические модификаторы ингибируют ангиогенез.

[0024] В различных вариантах реализации, хотя предполагается, что любой эпигенетический модификатор может использоваться согласно настоящему изобретению, HDACIs могут быть прямого действия (например, действуют путем прямого связывания с мишенями-ферментами), или непрямого действия (то есть, действуя посредством непрямого связывания, такое как изменение в форме хроматина). В дополнение к этому, HDACI могут включать одну или более молекул фенилбутирата натрия («ФБН»), липоевой кислоты («ЛК»), кверцетина, вальпроевой кислоты, гидралазина, бактрима, экстракта зеленого чая (например, галлат эпигаллокатехина (EGCG)), куркумина, сульфорафана и аллицин/диаллил дисульфида.

[0025] ФБН сейчас классифицируется FDA как орфанный препарат для лечения заболеваний, связанных с нарушением цикла образования мочевины. Фенилбутират («ФБ») является пролекарством. В человеческом теле ФБ метабализируется посредством бета-оксиления до фенилацетата. Фенилацетат ковалентно связывается с глутамином и образует фенилацетил глутамин, который, в конечном счете, удаляется из организма с мочой. Фенилмасляная кислота ("ФМК") имеет подавляющую рост и вызывающую дифференциацию активность in vitro и in vivo в модельных системах. Не будучи связанными указанной теорией, полагают, что ФМК останавливает клеточный цикл в его G1-GO фазе. ФБ является эффективным HDACI, и считается, что он вызывает апоптоз через c-Jun-N-терминальную киназу ("JNK"). В клетках карциномы легкого опосредуемая 56 p21wafl остановка роста клеток MCF-7, опосредуемая фактором некроза опухоли (ФНО) - 58 или рецепторами, активируемыми пероксисомными пролифераторами (PPAR) дифференцировка, и является более эффективным, чем фенилацетат в клетках рака простаты, в то же время повышая экспрессию ГКГС I класса. ФБ преобразуется in vivo в активный метаболит фенилацетат ("ФА") путем β-окисления в митохндриях печени и почек. Наиболее доза-ограничивающие показатели - это усталость, тошнота и сонливость. Были проведены предварительные исследования на пациентах с рецидивирующей глиобластомой мозга. Считается, что ФБН работает, влияя на NF Kappa-B путь, снижая противовоспалительный ответ и регулируя активность более чем 100 генов.

[0026] Исследование токсичности ФБН показало, что пероральная доза до 36 грамм за день демонстрирует минимальную токсичность. В одном из исследований у 25 процентов пациентов при применении данного лекарственного средства заболевание было стабильным в течение более 6 месяцев. ФБН в оральной форме хорошо переносится и достигает концентрации in vivo, про которую in vitro было показано, что она имеет биологическую активность. Было предположено, что ФБН играет роль как цитостатический агент. Однако в большинстве исследований ФБН использовался как пероральный препарат, а не как препарат, вводимый внутривенно.

[0027] В различных вариантах реализации, кверцетин используется как HDACI. Кверцетин также используется как агент, вызывающий дифференцировку раковых стволовых клеток, как блокатор многих путей и сигнальных молекул, как агент, вызывающий чувствительность к химиотерапии, также как и агент апоптоза. Кверцетин - это флавоноид, экстрагированный из яблок. Было предположено несколько механизмов действия кверцетина против рака. Было предположено, что кверцетин может взаимодействовать с различными клеточными рецепторами, и что кверцетин ингибирует клеточный цикл в фазе G1 и G2, подавляет тирозинкиназу и предотвращает неконтролируемую пролиферацию, влияет на рецепторы эстрогенов, и взаимодействует с белками теплового шока, предотвращая пролиферацию.

[0028] Также было показано, что кверцетин может взаимодействовать с рецепторами, такими как Raf и MEK, которые участвуют в пролиферации опухоли. Взаимодействие с другими рецепторами, такими как рецепторы клеточной поверхности, также предполагается. В дополнение к этому, считается, что кверцетин может действовать, изменяя передачу сигнала. Было показано, что кверцетин влияет на регуляцию клеточного цикла, смерть клетки, воспалительные реакции и образование новой кровеносной сети.

[0029] Были проведены исследования по изучению токсичности кверцетина. Было проведено открытое неконтролируемое клиническое испытание, направленное на поиск дозировки. В этом исследовании, увеличивающийся объем кверцетина до 1700 мг/м2 внутривенно давали на протяжении 3 недель 50 пациентам с раком, и считалось, что рак у них нельзя вылечить традиционными способами. Лечили пациентов с разными типами рака, включая рак толстой кишки, желудка, поджелудочной железы, яичника и меланому. Ни один из пациентов не достиг подавления рака, что определялось по радиологическим показателям ВОЗ, но двое пациентов показали длительное уменьшение количества раковых маркеров после терапии кверцетином (один пациент с метастазирующей гепатоклеточной карциномой, а другой пациент с четвертой стадией метастазирующего рака яичника, который до этого не отвечал на химиотерапию). В дополнение к этому, уровни тирозинкиназы измерялись в 11 исследованиях, и было показано уменьшение уровня тирозинкиназы в 9 исследованиях. Тирозинкиназа обычно исследуется в онкологии, так как она может привезти к неконтролируемой пролиферации раковых клеток путем переопределения сигнала, который контролирует рост клеток. В результате было заключено, что кверцетин возможно имеет способность подавлять тирозинкиназу, и следующее исследование должно будет проведено при дозах не выше чем 1400 мг/м2. Результаты этого исследования были поддержаны несколькими исследованиями in vitro, в которых кверцетин вызывал подавление экспрессии тирозинкиназы в раковых и нераковых клетках.

[0030] Не будучи связанными указанной теорией, предполагается, что кверцетин может показывать обещающие результаты в лечении почти всех видов раковых клеток благодаря своему влиянию на регуляцию генов, например, благодаря способности уменьшать экспрессию генов AS и bcl-2. Также было предположено, что кверцетин играет предупреждающую роль в частоте заболевания раком. Значения всасывания кверцетина отрицательно коррелировало с раком поджелудочной железы среди действующих курильщиков, демонстрируя значительное снижение (0,55) относительного риска при максимальной и минимальной квантили значений всасывания.

[0031] Однако, сейчас не существует исследований на людях, которые бы оценили эффекты кверцетина, принимаемого внутривенно, в сочетании с другими эпигенетическими терапиями.

[0032] В различных вариантах реализации, липоевая кислота («ЛК») используется как HDACI. Липоевая кислота также является ингибитором топоизомеразы и окислительным агентом для гликолитической терапии. При низких конентрациях ЛК является кофактором пируватдегидрогеназы в митохондриях. ЛК не синтезируется в человеке и в человеческом организме не присутствует в достаточном количестве при диете или при питании. Доступная в природе ЛК не может быть получена непосредственно из пищевых источников. Было показано, что низкий уровень ЛК связан с различными заболеваниями. Обычно ЛК считается безопасной и нетоксичной.

[0033] В последнее время считается, что основной эффект ЛК - это то, что она является индуктором окислительного стресса. В связи с этим ЛК может быть эффективной при применении с гипербарической кислородной терапией за счет способности к индукции окисления в комбинированной терапии против рака. Было показано, что альфа-липоевая кислота вызывает апоптоз в человеческих клетках рака кишечника путем увеличения дыхания митохондрий с сопутствующим образованием свободных радикалов. Несколько исследований снабдило нас доказательствами того, что альфа-липоевая кислота может эффективно вызывать апоптоз в человеческих клетках рака кишечника за счет проокислительного механизма, который начинается путем увеличения поглощения окисляемого субстрата митохондриями.

[0034] Недавние исследования на мышиных раковых моделях дали надежду на применение ЛК для лечения различных видов раковых клеток: MBT-2 переходно-клеточный рак мочевого пузыря, B16-F10 меланома and LL/2 карцинома легких Льюис. Считается, что ЛК уменьшает жизнеспособность раковых клеток и увеличивает фрагментацию ДНК этих клеток. В целом, противораковый эффект ЛК видимо регулируется через вызывание апоптоза через каспаз-независимые и каспаз-зависимые пути, которые регулируются внутриклеточным уровнем Ca2+. ЛК обычно считают безопасной и нетоксичной. Альфа-липоевая кислота одобрена в Германии как лекарство для лечения полинейропатий, таких как диабетическая и алкогольная полинейропатия, и заболеваний печени.

[0035] Экстракт зеленого чая, такой как галлат эпигаллокатехина (EGCG), также известный как эпигаллокатехин-3-галлат, также используется в настоящем изобретении. EGCG является эфиром эпигаллокатехина и галловой кислоты и является типом катехина. EGCG является наиболее распространенным катехином в чае и является мощным антиоксидантом, который может иметь терапевтические применения для лечения различных заболеваний (например, рака). Он обычно находится в зеленом чае, но не в черном чае; во время производства черного чая катехины превращаются в флавины и теарубигины. EGCG можно найти во многих добавках.

[0036] Существует растущее количество доказательств того, что EGCG - наряду с другими флаваноидами - может быть полезен для лечения некоторых типов раков, включая рак мозга, простаты, рак шейки матки и рак мочевого пузыря. Было показано, что EGCG связывает и ингибирует антиапоптотический белок Bcl-xl, который задействован в выживаемости и в раковых клетках, и в нормальных клетках. Также было обнаружено, что EGCG, среди других полифенолов чая, является сильным ингибитором топоизомеразы, что похоже на некоторые противораковые лекарства для химиотерапии, например, эктопозид и доксорубицин.

[0037] Согласно различным вариантам реализации, фармацевтические составы содержат один или более HDACIs и могут существовать в комбинированной форме.

[0038] В соответствии с различными вариантами реализации составы, системы и способы включают один или более фармацевтически допустимых вспомогательных веществ. Составы можно принимать поодиночке, или вместе с одним, или многими другими соединениями, описанными в настоящем документе, или вместе с одним или многими другими лекарствами (или в любой их комбинации). В целом, составы, описанные в настоящем документе, будут введены как препараты в связке с одним или более фармацевтически принятыми вспомогательными веществами. Выбор вспомогательного вещества будет в значительной степени зависеть от таких факторов, как особый режим введения, влияние вспомогательного вещества на растворимость и стабильности, и природа дозированной формы.

[0039] Фармацевтические композиции, подходящие для доставки соединений настоящего изобретения, и методы их подготовки будут понятны для специалистов в этой области. Такие составы и способы их приготовления могут быть найдены, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0040] Препараты, в соответствии с различными вариантами реализации, могут содержать любой фармацевтически приемлемый перевозчик или растворитель, например, солевой раствор. Нормальный солевой раствор содержит стерильную воду и хлорид натрия. Например, может быть использован нормальный солевой раствор и/или D5 солевой раствор. D5 солевой раствор содержит солевой раствор с 5% декстрозы.

[0041] Возможно также введение препаратов изобретения непосредственно через кровоток, через мышцы или через внутренние органы. Подходящие методы для парентерального введения лекарственных препаратов включают введение внутривенно, внутриартериально, внутрибрюшинно, интратекально, внутрижелудочковое введение, внутриуретральное введение, интрастернальный способ введения, внутричерепной способ введения, внутримышечно и подкожно. Подходящие устройства для парентерального введения включают иглы (в том числе микроиглы) шприцов, шприцы без игл и приспособления для инфузий.

[0042] Препаратами для парентерального введения являются, как правило, водные растворы, которые могут содержать вспомогательные вещества, такие как соли, углеводы и буферные вещества (преимущественно до pH от примерно 3 до примерно 11), но для некоторых применений они могут быть более подходяще сделаны как стерильные неводные растворы, или они могут быть в сушеном виде для того, чтобы быть затем использованными в сочетании с подходящим транспортным средством, таким как стерильная апирогенная вода.

[0043] Приготовление препарата для парентерального введения при стерильных условиях, например, путем лиофилизации, может быть легко выполнено с применением стандартных фармацевтических технологий, хорошо известных специалистам в этой области.

[0044] Фармацевтически пригодные соли соединений, обнародованных в настоящем документе, включают кислотно-аддитивные соли и основные соли. Пригодные кислотно-аддитивные соли формируются из кислот, которые формируют нетоксичные соли. Примеры включают, но не ограничиваются только ими, следующие соединения: ацетат, аспартат, бензоат, бесилат, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, борат, камсилат, цитрат, эдисилат, эсилат, формиат, фумарат, глуцептат, глюконат, глюкуронат, гексофлюорофосфат, гибензат, гидрохлорид/хлорид, гидробромид/бробид, гидроиодид/йодид, изетионат, лактат, малат, малеат, малонат, мезилат, метилсульфат, нафтилат, 2-напзилат, никотинат, нитрат, оротат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидрофосфат, фосфат/однозамещенный фосфат, сахарат, стеарат, сукцинат, тартрат, сульфат, тозилат и трифлюороацетат.

[0045] Пригодные основные соли образуются из оснований, которые формируют нетоксичные соли. Примеры включают соли алюминия, аргинина, бензатина, кальция, холина, диэтиламина, диоламина, глицина, лизина, магния, меглюмина, оламина, калия, натрия, трометамина и цинка.

[0046] Полусоли кислот и оснований могут быть также сформированы, например, гемисульфат и гемикальциевая соль.

[0047] Фармацевтически приемлемые соли активных ингредиентов, указанных в настоящем документе, могут быть приготовлены одним или более следующих трех методов (хотя любой метод приготовления фармацевтически пригодных солей может быть использован):

1) путем реакции соединения активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, с требуемой кислотой или основанием.

2) путем удаления кислотной или основной лабильной защитной группы от подходящего предшественника активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, или путем дециклизации подходящего циклического предшественника, например лактона или лактама, с применением желанной кислоты или основания.

3) путем превращения одной соли активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, в другую с помощью реакции с удачной кислотой или основанием или с помощью подходящей ионообменной колонки.

[0048] Все три реакции обычно проводятся в растворе. Получившиеся в результате соли могут выпасть в осадок и быть собраны путем фильтрации или, могут быть восстановлены путем испарения растворителя. Степень ионизации в образовавшихся солях может варьировать от полностью ионизированной до почти неионизированной. Для обзора подходящих солей, смотри Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002), все соответствующие положения которого включены в настоящую заявку посредством ссылки.

[0049] В различных вариантах реализации, два или более активных ингредиентов, таких как два или более HDACIs, могут не быть в комбинированной форме, но могут быть введены одновременно. Совместное введение может заключаться в введении пациенту препаратов в одно и тоже время, или через близкорасположенный временной период. Например, совместное введение может заключатся во введении ФБН и кверцетина в одно и тоже время. Также, например, совместное введение может заключаться во введении ФБН и кверцетина с промежутком времени между введением первого и второго препарата примерно 24 часа (24), или примерно одна (1) минута и примерно шестьдесят (60) минут между введением первого и второго препарата, или примерно пять (5) минут и примерно девяноста (90) минут, или примерно тридцать (30) минут и примерно три (3) часа между введением первого и второго препарата.

[0050] В различных вариантах реализации, один или более окислителей или антиоксидантов могут присутствовать. Примеры включают, но не ограничиваются только ими, следующие соединения: витамин C, германий, L-карнитин, таурин, глутатион, лизин, пролин, перекись водорода, (H2O2), и диметилсульфоксид (ДМСО). Окислителем может быть любой химикат, вещество, молекула или соединение, которое может образовывать, или способствовать образованию свободных радикалов, что приводит к повреждению клеток, включая раковые клетки. В общем, окислители (также называемые окисляющее вещество или оксидант) забирают электрон от другой молекулы в окислительно-восстановительной химической реакции. Окислитель «восстанавливается» за счет того, что забирает электрон на себя, а взаимодействующее вещество «окисляется» за счет того, что электрон отнимается от него. Антиоксидантами могут быть любые химические субстанции, молекулы или соединения, которые замедляют или предотвращают окисление субстрата. В общем, антиоксиданты уменьшают скорость окислительных реакций, которыми являются химические реакции, которые переносят электроны с одного субстрата на окисляющийся агент. Антиоксиданты могут замедлять эти реакции или через реагирование с интермедиатами, и таким образом прямым способом останавливать окислительные реакции, или через реагирование с окисляющим веществом, и таким образом предотвращая наступление окислительной реакции. Одно и то же вещество может действовать как окислитель или как антиоксидант при различных обстоятельствах или условиях. В частности, доза вещества может определять, является ли вещество окислителем или антиоксидантом. Например, витамин C в дозе 25 грамм внутривенно обладает свойствами окислителя, но при более низких дозах витамин C обладает антиоксидантными свойствами.

[0051] В различных вариантах реализации может присутствовать, один или более ингибиторов гликолиза Примеры включают, но не ограничиваются только ими, следующие соединения: дихлоруксусная кислота, октреотид, и 2 дезоксиглюкоза (2DG). Однако не все ингибиторы гликолиза были признаны эффективными. В частности, хотя в предыдущих исследованиях использовали 3-бромопируват (как алкилирующий агент и ингибитор гликолиза) для того, чтобы поразить раковую клетку, в настоящем изобретении он не был признан эффективным или годным для применения. Как правило, что касается ингибиторов гликолиза, стратегия, направленная на лечение или предотвращение рака заключается в нацеливании на факторы, отвечающие за продукцию энергии в раковых клетках. В ядерных клетках человека есть два вида образующих энергию единиц, то есть систем, которые образуют «высокоэнергетические» соединения АТФ из АДФ. Один тип - это гликолиз, а другой тип - митохондрия. Митохондрия является самым главным местом образования АТФ (>90%) в нераковых клетках. Однако в раковых клетках представлены оба механизма. За счет гликолиза в раковых клетках может образовываться около половины АТФ даже в присутствии кислорода (это называют эффект Варбурга). Таким образом, ингибиторы гликолиза могут быть применены для лечения различных типов рака.

[0052] Дихлоруксусная кислота ("ДУК") - это побочный продукт хлорирования воды. Стимулируя активность пируват-дегидрогеназы, ДУК облегчает окисление молочной кислоты и снижает заболеваемость приобретенной и врожденной формой молочнокислого ацидоза. Ион дихлорацетата стимулирует активность фермента пируватдегидрогеназы через ингибирование фермента киназы пируватдегидрогеназы. Таким образом, происходит уменьшение продукции лактата через перенос метаболизма пирувата с гликолиза на окисление в митохондриях.

[0053] Раковые клетки имеют тенденцию изменять путь, через который они метабализируют кислород, на путь, который способствует их выживанию. Солидные опухоли, в том числе первичный агрессивный рак мозга мультиформная глиобластома, развивают устойчивость к гибели клеток, частично за счет переключения с окислительного фосфорилирования в митохондриях на цитоплазматический гликолиз. ДУК деполяризует митохондрии, увеличивает количество активных форм кислорода в митохондриях, и вызывает апоптоз в гликолитических раковых клетках, и in vitro, и in vivo.

[0054] ДУК терапия также подавляет гипоксия-индуцируемый фактор - 1a, способствует активации р53, и подавляет ангиогенез как in vivo, так и in vitro. Имеются веские доказательства, полученные на доклинических in vitro и in vivo моделях, что ДУК может быть применена для лечения рака у человека. Более того, активация митохондрий с помощью ДУК увеличивает потребление кислорода опухолью и значительно усиливает эффективность основанной на гипоксии химиотерапии на животных моделях. При лабораторных исследованиях роста изолированных раковых клеток в культуре ткани, было показано, что ДУК восстанавливает первоначальный метаболизм и способствует саморазрушению клеток.

[0055] Октреотид (фирменное наименование САНДОСТАТИН) представляет собой октапептид, лекарственный имитатор природного соматостатина, однако это более мощный ингибитор гормона роста, глюкагона и инсулина, чем природный гормон. Октреотид после подкожного введения всасывается быстро и полностью. Максимальная концентрация в плазме достигается через 30 минут.

[0056] Онкогены могут экспрессировать белки из группы рецепторных тирозинкиназ, то есть группы белков, которая включает рецепторы к инсулину или к инсулинподобному фактору роста. Другие онкогены изменяют РР2А-фосфатазу, которая тормозит эти киназы. Октреотид используется при различных заболеваниях, начиная с 1979 года. Поскольку он подавляет секрецию инсулина, а также действует как агент для подавления инсулинподобного фактора роста один (IGF-1), было предположено, что возможно его использовать для лечения различных видов раков с гликолитической активностью. Было показано с помощью экспериментов на животных, что октреотид имеет терапевтическое применение, предпочтительное для пациентов.

[0057] Гормон роста вызывает в печени синтез и высвобождение инсулинподобного фактора роста (IGF). Последний активирует, как и инсулин, IGF-тирозинкиназные рецепторы (IGFR), и тем самым вызывает MAP киназный-ERK митогенный сигнал. При нормальной физиологии, фактор роста стимулирует липазу триглицеридов в адипацитах, увеличивает высвобождение жирных кислот и их бета-окисление. Помимо этого, гормон роста закрывает гликолитический источник ацетил CoA, возможно путем подавления взаимодействия гексокиназ с митохондриями. Этот эффект, который делает апоптоз возможным, не происходит в опухолевых клетках.

[0058] В рамках настоящего изобретения, два или более фармацевтических составов могут быть удобно скомбинированы в форме набора, пригодного для совместного введения препаратов, так как может быть целесообразно принимать комбинацию активных ингредиентов, например, для лечения конкретных заболеваний или состояний.

[0059] Таким образом, набор в рамках настоящего изобретения включает два и более отдельных фармацевтических состава, по меньшей мере один из которых включает активный ингредиент, описанный в настоящем документе, и предназначен для отдельного хранения указанных составов, как описано в настоящем документе, например в виде емкости, бутылки с делениями или пакета из фольги с делениями. Примером таких наборов является известная блистерная упаковка, использующаяся для упаковки таблеток, капсул и похожих вещей.

[0060] Набор особенно подходит для введения различных дозированных форм, например в виде оральной формы или с помощью парентерального введения, для введения отдельных препаратов через разные интервалы между дозами, или для титрования отдельных препаратов друг относительно друга. Для оказания помощи по введению препарата, набор обычно содержит указания по применению и может содержать памятку по применению.

[0061] Соединения изобретения могут существовать и в сольватированной форме, и в несольватированной форме. Термин «сольватированная» используется в настоящем документе для того, чтобы описать комплекс молекул, включающий соединения изобретения и стехиометрическое количество одной или более фармацевтически приемлемых молекул растворителя, например, этанола. Термин «гидрат» используется, когда растворителем является вода.

[0062] В рамки данного изобретения включены комплексы, такие как клатраны, соединения, в которых "молекулы-гости" заключены в полости, образованные "молекулами-хозяевами", где, в противоположность вышеупомянутым сольватам, лекарство и гость представлены в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Также в рамки данного изобретения включены комплексы лекарства, содержащие две или более органические и/или неорганические составляющие, которые могут быть представлены в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Образовавшиеся в результате комплексы могут быть ионизированными, частично ионизированными или неионизированными. Для обзора таких комплексов, смотри J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288, by Haleblian (August 1975), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0063] Далее все ссылки на активные ингредиенты, указанные в настоящем документе, включают ссылки на соли, сольваты и их комплексы, и на сольваты и комплексы их солей.

[0064] Активные ингредиенты, описанные в настоящем документе, включают все полиморфы и их кристаллические структуры, пролекарственные препараты и их изомеры (включая оптические, геометрические и таутомерные изомеры). Например, все HDACIs и ингибиторы гликолиза, описанные в настоящем документе, содержат все полиморфы и их кристаллические структуры, пролекарственные препараты и их изомеры (включая оптические, геометрические и таутомерные изомеры).

[0065] Как указано, так называемые «пролекарства» активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, также находятся в рамках данного изобретения. Так, некоторые варианты активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, которые могут иметь маленькую фармакологическую активность или вообще не иметь фармакологической активности, когда принимаются внутрь или на тело, при превращении в активные ингредиенты с помощью, например, гидролитического расщепления, имеют желаемую активность. На такие варианты ссылаются как на «пролекарства». Дальнейшая информация по применению пролекарств может быть найдена in Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi and W. Stella) и Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (ed. E.B. Roche, American Pharmaceutical Association), содержание которых полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0066] Пролекарства в соответствии с настоящим изобретением могут, например, быть получены путем замещения соответствующих функциональных элементов, присутствующих в активных ингредиентах, описанных в настоящем документе, определенными фрагментами, которые известны специалистам в данной области как «профрагменты», как описано, например, в Design of Prodrugs by H. Bundgaard (Elsevier, 1985), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0067] Примеры групп замещения в соответствии с вышеизложенными примерами и примеры других типов пролекарств могут быть найдены в вышеуказанных источниках.

[0068] Также в рамках настоящего изобретения находятся метаболиты активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, которые представляют собой соединения, образованные in vivo при введении лекарства.

[0069] Соединения активных ингредиентов, описанные в настоящем документе, могут содержать один или более ассиметричных атомов углевода и могут существовать как два или более стереоизомера. В тех случаях, когда описанные в настоящем документе активные ингредиенты содержат группу алкенила или алкенилена, возможны геометрические цис-транс (или Z/E) изомеры. В тех случаях, когда структурные изомеры взаимно преобразуются через низкий энергетический барьер, может иметь место таутометрическая изомерия («таутомерия»). Это может принимать форму протонного таутомеризма в активных ингредиентах, описанных в настоящем документе, содержащих, например, имино, кето, или оксигруппу, или форму так называемой валентной таутометрии в соединениях, которые содержат ароматический фрагмент. Отсюда следует, что одно соединение может проявлять более чем один тип изомеризма.

[0070] В рамках настоящего изобретения находятся все стереоизомеры, геометрические изомеры и таутомерные формы активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, включая соединения, проявляющие больше чем одни тип изомерии, и смеси одного или нескольких их. Также в рамки данного изобретения включены кислотно-аддитивные соли или основные соли, в которых противоион оптически активен, например, d-лактат или L-лизин, или рацемический, например, dl-тартрат или dl-аргинин.

[0071] Цис-транс изомеры могут быть выделены с помощью общепринятых методов, хорошо известных специалистам в этой области, например, с помощью хроматографии и фракционной кристаллизации.

[0072] Общепринятые методы для приготовления/изоляции отдельных энантиомеров включают хиральный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или растворение рацемата (или рацемата соли или производного соединения) с применением, например, хиральной жидкостной хроматографии высокого давления.

[0073] Также, рацемат (или рацемический предшественник) может вступить в реакцию с подходящим оптически активным соединением, например, алкоголем, или в случае, когда описанные в настоящем документе активные ингредиенты содержат кислотный или основной фрагмент, с кислотой или основанием, такими как L-фенилэтиламин или винная кислота. Получившаяся в результате смесь диастереоизомеров может быть выделена с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации и один или оба диастереоизомера превращены в соответствующие беспримесные энантиомеры с помощью методов, хорошо известных специалистам в этой области.

[0074] Хиральные соединения изобретения (и их хиральные предшественники) могут быть получены в энантиомерно обогащенной форме с применением методов хроматографии, как правило, хиральной жидкостной хроматографии высокого давления, на несимметричных смолах, с мобильной фазой, состоящей из углеводорода, как правило, гептана или гексана, содержащей в себе от 0 до примерно 50% от объема изопропанола, как правило, от примерно 2 х % до примерно 20 ти %, и от 0 до примерно 5% от объема алкиламина, как правило примерно 0,1% диэтиламина. Концентрация элюата дает обогащенные смеси.

[0075] Стереоизомерные конгломераты могут быть выделены с помощью общепринятых методов, известных специалистам в данной области - смотри, например, Stereochemistry of Organic Compounds by E.L. Eliel and S.H. Wilen (Wiley, New York, 1994), содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

[0076] Настоящее изобретение включает все фармацевтически приемлемые изотопно-меченные соединения активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, где один или более атомов замещается атомами, имеющими такое же атомное число, но атомная масса или массовое число отличаются от атомной массы или массового числа, которое преобладает в природе.

[0077] Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения, включают, но не ограничиваются только ими, следующие изотопы: изотопы водорода, такие как 2Н и 3Н, углерода, такие как 11C, 13C и 14C, хлора, такие как 36Cl, фтора, такие как 18F, иода, такие как 1231 и 1251, азота, такие как 13N и 15N, кислорода, такие как 150, 170 и 180, фосфора, такие как 32P, и серы, такие как 35S.

[0078] Определенные изотопно-меченные соединения активных ингредиентов, описанных в настоящем документе, например те, которые включают радиоизотоп, являются подходящими для проведения исследований, нацеленных на изучение распределения лекарства или субстрата в ткани. Радиозотоп тритий, то есть 3H, и углерод-14, то есть 14C, в частности являются подходящими для этой цели с точки зрения простоты их включения и готовых средств их обнаружения.

[0079] Замена тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, то есть 2H, может дать определенные терапевтические преимущества, возникающие вследствие большей метаболической стабильности, например, увеличение периода полужизни in vivo или уменьшение требуемой дозировки, и, следовательно, может быть предпочтительна при некоторых обстоятельствах.

[0080] Замена позитронно-эмиссионными изотопами, например, 1 IC, 18F, 150 и 13N, может быть применена в позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) для исследования размещения субстрата рецептора.

[0081] Изотопно-меченые активные ингредиенты, описанные в настоящем документе, в целом, могут быть приготовлены с помощью традиционных методов, известных специалистам в данной области, или с помощью процессов, аналогичных тем, которые описаны в прилагаемых примерах, с применением соответствующих изотопно-меченых реагентов вместо немеченых реагентов, используемых до этого.

[0082] Считается, что свободные радикалы и гипоксия могут увеличить повреждение митохондриальной ДНК и вызвать нежелательные изменения в эпигенетике, связанные с риском развития рака и метастазов через гипоксия-индуцибельный фактор-1 и VEGF. Гипоксия это обычная характеристика местнораспространенной солидной опухоли на поздних стадиях, которая связывается со сниженным терапевтическим эффектом, а в последнее время, со злокачественной прогрессией. Новые доказательства указывают на то, что влияние гипоксии на развитие опухоли регулируется серией вызванной гипоксией изменений в белках и генах, активирующих ангиогенез, анаэробный метаболизм, и другие процессы, которые позволяют опухолевым клеткам выживать или избегать среды с дефицитом кислорода. Транскрипционный фактор гипоксия-индуцибельный фактор-1 ("HIF-1") является регулятором адаптации опухолевой клетки к гипоксическому стрессу. Опухолевые клетки с изменениями в белках и генах, благоприятных для выживания в условиях гипоксии, будут расти, тем самым усугубляя гипоксию. Отбор и развитие новых (и более агрессивных) клонов, которые, в конечном счете, становятся доминирующей опухолевой клеточной линией, приводит к установлению порочного круга гипоксии и развитию опухоли. Гипоксия имеет тенденцию увеличивать экспрессию тканевого фактора опухолевыми клетками, что усиливает связывание опухолевых клеток тромбоцитами и гематогенное метастазирование. Гипоксия, независимо от ее продолжительности, увеличивает ядерное содержание HIF-1, а также уровни мРНК эритропоэтина и VEGF. HIF-1 играет важную роль в росте солидных опухолей и их выживаемости. Сверхэкспрессия HIF-1 альфа была продемонстрирована во многих опухолях человека и прогнозирует слабый ответ на химиорадиотерапию.

[0083] В связи с этим, считается, что гипербарическая оксигенация (HBOT) может сыграть положительную роль в некоторых злокачественных заболеваниях и увеличить качество жизни пациентов при применении в сочетании с химиотерапией, ингибировать определенные гены рака и рост опухоли in vitro, и уменьшить груз опухоли и ограничить рост крупных опухолевых клеточных колоний. Возможно, что это воздействие снижает уровень HIF-1, который может изменять экспрессию гена VEGF, впоследствии вовлеченного в развитие метастаз опухолей. VEGF является инициатором ангиогенеза опухоли. Кроме того, считается, что экспрессия VEGF потенцируется гипоксией и что усиление продукции VEGF в бедных кислородом зонах вносит вклад в управляемый VEGF ангиогенез опухоли.

[0084] Считается, что связанные со свободными радикалами повреждения, которые не вызывают смерть клетки, могут вызывать развитие рака, и могут вызывать рост раковых опухолей и метастазы. Активные формы кислорода образуют мутации в митохондриальной ДНК и регулируют HIF-I, поэтому уменьшение повреждений, вызванных активными формами кислорода, предпочтительно.

[0085] Есть доступные лекарства, которые эффективно уменьшают продукцию свободных радикалов и повреждение клетки. Эти лекарства могут теоретически изменять эпигенетику и увеличивать эффективность других препаратов, таких как ДУК и ФБН. В итоге совмещение HBOT с составами и способами, описанными в этом документе, будет предпочтительным.

[0086] Настоящее изобретение также предполагает применение лечения вместе с гипербарической оксигенацией до или после введения любого эпигенетического модификатора, или по отдельности, или в комбинированной форме, или при совместном введении, с другим эпигенетическим модификатором. В целом, гипербарическая оксигенация, или гипербарическая оксигенотерапия, это лечение, при котором индивидуум подвергают воздействию увеличенной концентрации кислорода при атмосферном давлении больше чем одна атмосфера на протяжении заранее установленного промежутка времени. Гипербарическая кислородная терапия была одобрена для лечения многих состояний, включая эмболии, отравление угарным газом, повреждения с размождением тканей, кессонная болезнь, анемия, и инфекции костей. Гипербарическая кислородная терапия и различное оборудование для гипербарической терапии (такое как гипербарическая камера) широко известны и описаны в различных патентах, например в патенте США No. 5865722, содержание которого полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки. Любое подходящее гипербарическое оборудование или камера может быть использовано в настоящем изобретении. Одни или более эпигенетических модификаторов могут быть введены до или после воздействия гипербарической кислородной терапией, например, в гипербарической камере. Воздействие гипербарической кислородной терапией может происходить в течение примерно 24 часов до или после введения любого эпигенетического модификатора, между примерно пятью (5) минутами и примерно девяноста (90) минутами до или после введения любого эпигенетического модификатора, или между примерно тридцатью (30) минутами и примерно тремя (3) часами до или после введения эпигенетического модификатора.

ПРИМЕРЫ

[0087] Пример 1: Составы, наборы и введение

[0088] В различных вариантах реализации предложен состав, содержащий ФБН и кверцетин. Состав может быть в комбинированной форме. Состав использует солевую среду, в которой есть от примерно 0,5 г до примерно 1,0 г кверцетина и от примерно 5,0 г до примерно 10,0 г ФБН. Согласно другим вариантам реализации, D5 солевой раствор используется вместо нормального солевого раствора. Согласно другим вариантам реализации, состав содержит антиоксидант.

[0089] В различных вариантах реализации предложен состав, содержащий ЛК и кверцетин. Состав может быть в комбинированной форме. Состав использует солевую среду, где находится от примерно 0,5 г до примерно 1,5 г кверцетина и от примерно 200 мг до примерно 1000 мг ЛК. Согласно другим вариантам реализации, D5 солевой раствор используется вместо нормального солевого раствора.

[0090] В различных вариантах реализации предложен состав, содержащий ЛК и ФБН. Состав может быть в комбинированной форме. Состав использует солевую среду, где находится от примерно 200 мг до примерно 1000 мг ЛК и от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г ФБН. Согласно другим вариантам реализации, D5 солевой раствор используется вместо нормального солевого раствора.

[0091] В различных вариантах реализации предложен состав, содержащий ФБН, кверцетин, и ингибитор гликолиза. В различных вариантах реализации, ингибитор гликолиза содержит по меньшей мере одну из 3-BP, дихлоруксусную кислоту и октреотид. Состав может быть в комбинированной форме. Препарат использует солевую среду, где находится от примерно 0,5 г до примерно 1,5 г кверцетина, и от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г ФБН. Согласно другим вариантам реализации, D5 солевой раствор используется вместо нормального солевого раствора.

[0092] В различных вариантах реализации предложен состав, содержащий экстракт зеленого чая (например, EGCG) и ФБН. Состав существует в комбинированной форме. Состав использует солевую среду, где находится от примерно 100 мг до примерно 1,5 г экстракта зеленого чая и от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г ФБН.

[0093] Любой состав в соответствии с различными вариантами реализации может быть упакован в виде набора, как описано в настоящем документе. В дополнение к этому, активные ингредиенты, описанные в настоящем документе, могут быть введены путем совместного введения с составом или путем временно близкорасположенного введения с препаратом как описано выше.

[0094] Пример 2: Гипербарическая Оксигенотерапия (HBOT)

[0095] После введения или совместного введения любого активного ингредиента, описанного в настоящем документе, можно применять гипербарическую оксигенотерапию. В различных вариантах реализации, пациента подвергают гипербарической оксигенотерапии между примерно 5 минутами и примерно 90 минутами после введения любого из активных ингредиентов, описанных в настоящем документе. Среда, в которой проходит гипербарическая кислородная терапия, включает в себя атмосферу с содержанием O₂ по меньшей мере выше 95% при давлении от примерно 0,5 атмосфер до примерно 2,5 атмосфер, и более предпочтительные условия - это давление от примерно 1,5 атмосфер до примерно 2 атмосфер. HBOT происходит в промежутке времени от примерно тридцати минут до примерно трех часов.

[0096] Пример 3: Исследования

[0097] В соответствии с тем, что описано в настоящем документе, были проведены различные исследования с применением различных направленных терапий для того, чтобы уменьшить анаэробный гликолиз у пациентов с раком в сочетании с лечением эпигенетическим модификатором с применением HDACIs и гипербарической оксигенации. Было показано, что эти препараты увеличивают качество жизни и могут улучшать выживаемость людей. В частности, комплексное лечение рака/методика были предприняты для лечения пациентов, которые обращались с просьбой о таком лечении добровольно.

[0098] Исследование I: Сорок (40) диаграмм пациентов были случайным образом выбраны и рассмотрены. Критерием, который позволял включить пациента, был диагноз рак. Ни один из пациентов не был исключен из исследования. Возраст пациентов бы от 27 до 83 лет. Всем пациентам их онкологами/врачами бы поставлен диагноз и были предложены стандартные методы лечения - хирургические вмешательства, традиционная химиотерапия и радиотерапия. Из 40 больных, 20 пациентов отказались от стандартного лечения, так как для них не было доступных традиционных вариантов из-за тяжести заболевания. Из 40 пациентов, 23 пациента имели рак на поздней стадии с микро и макро множественными метастазами на момент направления, перед началом лечения. 19 пациентов (47 процентов) уже безуспешно лечились от рака с помощью различных агентов химиотерапии, пациенты имели развитие или рецидив заболевания, проявляющийся в количестве опухолевых маркеров или при сканированиях.

[0099] Пациентов вели, основываясь на уникальных разработанных протоколах, которые были разработаны в связке с имеющимися научными исследованиями и клиническими испытаниями, и которые заключали в себе применение специальных естественных и синтетических внутривенных видов терапии. Внутривенные виды терапии нацелены на эпигенетический уровень и состоят из антиоксидантов, кверцетина, дихлоруксусной кислоты, фенилбутирата натрия и липоевой кислоты, по отдельности или в комбинации. Все пациенты получали одно такое лечение или более. Дозы каждого лечения оставались такой же или близкой к такой же, кверцетин вводили внутривенно в дозе от примерно 0,5 до примерно 1,5 грамм (50 мг/мл). При введении ФБН давали в дозе от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г (от 25 до 50 мл 200 мг/мл). При введении ДУК давали в дозе от примерно 500 мг до примерно 6 грамм (максимум 100/кг). При введении липоевую кислоту давали в дозе от примерно 200 мг до примерно 1000 мг. Гипербарическую оксигенотерапию проводили при стандартном давлении от 1,5 до 2,0 атмосфер и по продолжительности от 45-90 минут (в среднем 60 минут) на каждую сессию. При введении октреотид вводили подкожно в дозе от примерно 50 мкг до примерно 400 мкг.

[0100] Все пациенты начинали программу лечения после информирования их о возможных для них вариантах традиционного и нетрадиционного лечения и после получения согласия пациента на лечение. Развитие заболевания измерялось в течение всего курса лечения с помощью определения опухолевых маркеров, визуализирующих исследований и маркеров роста опухолей, некроза, ЛДГ, и воспаления, CRP, также как и с помощью определения активности натуральных киллеров и подсчета количества лимфоцитов и циркулирующих раковых клеток.

[0101] Следующие результаты были получены в течение или после завершения курса терапии:

1) Субъективное увеличение индекса качества жизни (QOL) (увеличение уровня энергии, уменьшение боли, и подъем настроения 100 процентов)

2) Иммунологический ответ: повышение количества естественных киллеров (NK) или лейкоцитов (WBC): 35% пациентов имели первоначальный низкий уровень NK и WBC, все эти пациенты имели увеличенную активность NK после терапии.

3) Возможное уменьшение активности опухоли, что измерялось с помощью ЛДГ: 40 процентов пациентов имели высокий ЛДГ, все эти пациенты имели уменьшенный ЛДГ после терапии.

4) Ответ в количестве опухолевых маркеров, достаточный для того, чтобы квалифицировать клинический ответ: 50 процентов.

5) Рецессия опухоли при радиографических исследованиях: 35 процентов.

6) Уменьшение CRP (корреляция с повышением выживаемости): 23 процента.

7) Уменьшение IGF-1: 12 процентов пациентов имели повышенный уровень IGF-1, который в литературе предполагается, что связан с прогнозом заболевания. Все эти пациенты показали улучшение в количестве IGF-1 после лечения.

[0102] Так как пациенты с раком могут иметь значительные факторы стратификации при выборе их контрольной группы, в качестве контрольной руки мы использовали прединтервенционный статус каждого пациента. Пациенты с разными факторами стратиграфии не менялись в течение исследования.

[0103] Анализ результатов исследования I:

1) Эти данные показывают улучшенный ответ в группе пациентов по сравнению с контролем. У 47 процентов пациентов не было доступного варианта лечения традиционными способами на момент обращения. В этой группе, результаты намного лучше по сравнению с традиционными методами лечения.

2) Пациенты, которые лечились и HBOT и внутривенной терапией, имели лучшие результаты по сравнению с теми пациентами, которые лечись только внутривенной терапией, что определялось по результатам оценки визуализирующих исследований, качества жизни и уменьшения размеров опухоли, а также по результатам контроля опухолевых маркеров.

3) Способ лечения пациентов с четвертой стадией заболевания, получающих данную программу лечения, оказался лучше традиционных способов лечения, и пациенты, которые получали химиотерапию совместно с вышеописанным методом лечения, показали значительное улучшение в качестве жизни и в ответе на химиотерапию

[0104] В другом исследовании было выбрано и проанализировано ретроспективно 45 диаграмм пациентов. Критериями для включения пациентов в данную группу бы диагноз рак, и получение минимум две недели лечения по протоколу. Ни один из пациентов не был исключен. Пациенты были в возрасте от 27 до 83 лет. Всем был диагностирован рак их онкологами/врачами и были предложены стандартные традиционные методы лечения с помощью хирургического вмешательства, традиционных методов химиотерапии и радиотерапии. Из 45 пациентов, 25 пациентов отказались от традиционной химиотерапии или для них не было доступных традиционных способов лечения из-за тяжести их заболевания и отсутствия ответа на традиционные методы.

[0105] Исследование II: из 45 пациентов, 36 из них (80 процентов) имели заболевание на четвертой стадии, и имели заболевание с микро и макро множественными метастазами в день обращения, до начала лечения.

[0106] 25 пациентов (55 процентов) уже безуспешно лечились от рака с помощью различных агентов химиотерапии, пациенты имели развитие или рецидив заболевания, проявляющийся в количестве опухолевых маркеров или при сканированиях.

[0107] Пациентов вели, основываясь на уникальных разработанных протоколах, которые были разработаны в связке с имеющимися научными исследованиями и клиническими испытаниями, которые заключали в себе применение специальной естественной и синтетической внутривенной терапии в комбинированной форме. Внутривенные виды терапии нацелены на эпигенетический уровень, гипербарическая кислородная терапия применялась к некоторым пациентам, со стандартным атмосферным давлением от 1,5 до 2,0 и с продолжительностью каждой сессии 45-90 минут (в среднем 60 минут).

[0108] Все пациенты начинали программу лечения после информирования их о возможных для них вариантах традиционного и нетрадиционного лечения и после получения согласия пациента на лечение. Развитие заболевания измерялось в течение всего курса лечения с помощью определения опухолевых маркеров, визуализирующих исследований и маркеров роста опухолей, некроза, ЛДГ, и воспаления, CRP, также как и с помощью определения активности натуральных киллеров и подсчета количества лимфоцитов и циркулирующих раковых клеток.

[0109] Следующие результаты были получены в течение или после завершение курса терапии:

1) Субъективное увеличение индекса качества жизни (QOL) (увеличение уровня энергии и функции, увеличение массы, улучшение показателей по системе измерения боли по баллам): 98 процентов (один пациент имел инфекцию, которую лечили антибиотиками, и 5 пациентов имели незначительные реакции, требующие антигистаминовые препараты).

2) Иммунологический ответ: увеличение активности натуральных киллеров: 19 пациентов (42 процента) имели изначально низкую активность натуральных киллеров, что указывало на низкую функцию иммунитета. Двенадцать (12) из 19 показали улучшенную активность натуральных киллеров после лечения. Один оставался в том же состоянии, и двое показали сниженную активность. 3 пациента не отслеживали свои результаты после лечения.

3) Возможное уменьшение активности опухоли, что измерялось с помощью ЛДГ: 42 пациента имели известное значение ЛДГ (три пациента имели неизвестные значения ЛДГ). 20 пациентов (44 процента) имели изначально высокий уровень ЛДГ, 18 из них (90 процентов) показали уменьшенный уровень ЛДГ после лечения.

4) Ответ в количестве опухолевых маркеров, достаточный для того, чтобы квалифицировать клинический ответ: 14 пациентов имели нормальное количество опухолевых маркеров или не имели опухолевых маркеров, связанных с их заболеванием. Среди остальных 31 пациентов с высоким уровнем опухолевых маркеров 27 пациентов (87 процентов) показали уменьшение в количестве опухолевых маркеров после курса лечения. У двух пациентов этот показатель колебался, а у одного был стабильный.

5) Уменьшение размеров опухоли, показанное в радиографических/визуализирующих исследованиях: 25 пациентов имели визуальные отчеты об их состоянии. Другие 20 пациентов не имели визуальных отчетов, или они были не приемлемы или не относились к делу. Из 25 пациентов, 19 пациентов (76 процентов) показывали положительный ответ в визуализирующих исследованиях после лечения. У семи пациентов результаты были смешаны или стабильные. Два пациента показали прогресс заболевания, один показал такое же состояние, которое было изначально.

6) Уменьшение CRP (корреляция с повышением выживаемости): 22 пациента имели повышенный уровень CRP. 23 пациента имели нормальное количество CRP, или он не проверялся. 17 пациентов показывали увеличенный C реактивный белок. Шестнадцать (16) пациентов отвечали уменьшенным CRP. Один увеличенным.

7) Уменьшение количества IGF-1: 38 пациентов были с известным уровнем инсулинподобного фактора. 10 пациентов имели увеличенный уровень IGF-1 до начала терапии. Все эти пациенты (100 процентов) отвечали на лечение уменьшением уровня IGF-1, что коррелирует с прогнозом в литературе. Все эти пациенты показали изменение уровня IGF-1 после лечения до нормального значения.

8) Уменьшение уровня VEGF: 20 пациентов имели известное значение фактора роста эндотелия сосудов (VEGF). Мы обнаружили четыре пациента с увеличенным количеством VEGF, которое коррелировало с высоким риском метастаз. Все четыре пациента показали уменьшение уровня VEGF после лечения.

[0110] Так как пациенты с раком могут иметь значительные факторы стратификации при выборе их контрольной группы, в качестве контрольной руки мы использовали прединтервенционный статус каждого пациента. Пациенты с разными факторами стратиграфии не менялись в течение исследования.

[0111] Анализ результатов с исследования II:

1) Эти данные показывают улучшенный ответ в группе больных по сравнению с контролем. У 47% пациентов на момент обращения не было доступных традиционных вариантов лечения. В этой группе результаты лечения намного лучше по сравнению с традиционными методами лечения.

2) Пациенты, которые получали обе терапии - и HBOT, и внутривенную терапию показали лучшие результаты по сравнению с теми пациентами, которые получали только внутривенную терапию, что определялось по визуализирующим исследованиям, качеству жизни и уменьшению опухоли, также как и по контролю опухолевых маркеров.

3) У пациентов с четвертой стадией болезни, которые получали вышеописанное лечение, ответ на лечение превысил ожидаемые результаты от стандартного лечения, и пациенты, которые получали химиотерапию совместно с вышеописанными способами лечения, показали значительное улучшение в качестве жизни и ответе на химиотерапию.

[0112] Как было показано, применение эпигенетических модификаторов увеличивает выживаемость при заболевании раком, также как и качество жизни у ряда пациентов. Вышеописанный способ лечения оказался лучше традиционных способов лечения.

1. Способ лечения пациента с раковым заболеванием, включающий: совместное введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества кверцетина и фенилбутирата натрия (ФБН), причем каждый из кверцетина и фенилбутирата натрия вводят внутривенно, и причем доза кверцетина составляет от 0,5 до 1,5 г и доза фенилбутирата натрия составляет от 1 до 10 г.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ФБН и кверцетин вводят в комбинированной форме.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что ФБН и кверцетин вводят в комбинации с химиотерапией.

4. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что ФБН и кверцетин вводят в комбинации с радиационной терапией.

5. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий введение экстракта зеленого чая.

6. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий введение галлата эпигаллокатехина (EGCG).

7. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что указанное раковое заболевание включает рак на поздней стадии с микро- и макромножественными метастазами.

8. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что указанный пациент уже безуспешно лечился с помощью различных агентов химиотерапии и имел развитие или рецидив ракового заболевания.

9. Фармацевтическая комбинация для лечения пациента с раковым заболеванием, содержащая: терапевтически эффективные количества кверцетина и фенилбутирата натрия (ФБН), причем указанная фармацевтическая комбинация подходит для внутривенного совместного введения и причем указанная комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,5 г кверцетина и приблизительно от 1 до 10 г ФБН.

10. Фармацевтическая комбинация по п. 9, отличающаяся тем, что ФБН и кверцетин представлены в виде единой композиции.

11. Фармацевтическая комбинация по п. 9 или 10, дополнительно содержащая экстракт зеленого чая.

12. Фармацевтическая комбинация по п. 9 или 10, дополнительно содержащая галлат эпигаллокатехина (EGCG).

13. Фармацевтическая комбинация для применения в лечении ракового заболевания, содержащая фенилбутират натрия (ФБН) и кверцетин, причем указанная фармацевтическая комбинация подходит для внутривенного совместного введения ФБН и кверцетина.

14. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 13, отличающаяся тем, что указанная фармацевтическая комбинация представлена в виде дозированной формы, содержащей от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г фенилбутирата натрия (ФБН) и от примерно 0,5 г до примерно 1,5 г кверцетина.

15. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 13 или 14, дополнительно содержащая один или более окислителей или антиоксидантов.

16. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 15, отличающаяся тем, что указанные один или более окислителей или антиоксидантов выбраны из группы, включающей витамин С, германий, L-карнитин, таурин, глутатион, лизин, пролин, перекись водорода и диметилсульфоксид.

17. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 13 или 14, дополнительно содержащая один или более ингибиторов гликолиза.

18. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 17, отличающаяся тем, что указанные один или более ингибиторов гликолиза выбраны из группы, включающей дихлоруксусную кислоту, октреотид и 2-дезоксиглюкозу (2ДГ).

19. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 13 или 14, дополнительно содержащая по меньшей мере один из: нормального солевого раствора и солевого раствора с 5% декстрозы.

20. Набор для лечения пациента с раковым заболеванием, содержащий:

дозированную форму фармацевтической комбинации для лечения рака, содержащую фенилбутират натрия (ФБН) и кверцетин, причем указанная фармацевтическая комбинация подходит для внутривенного совместного введения ФБН и кверцетина;

и емкость, в которой указанная дозированная форма содержится по меньшей мере частично.

21. Набор по п. 20, дополнительно содержащий первую вложенную емкость, содержащую ФБН, и вторую вложенную емкость, содержащую кверцетин.

22. Набор по п. 20, дополнительно содержащий вложенную емкость, содержащую фенилбутират натрия и кверцетин в комбинированной форме.

23. Набор по любому из пп. 20-22, отличающийся тем, что фармацевтическая комбинация содержит от примерно 1,0 г до примерно 10,0 г фенилбутирата натрия и от примерно 0,5 г до примерно 1,5 г кверцетина.

24. Набор по любому из пп. 20-22, отличающийся тем, что фармацевтическая комбинация дополнительно содержит по меньшей мере один из: нормального солевого раствора и солевого раствора с 5% декстрозы.

25. Способ по любому из пп. 1, 2, отличающийся тем, что доза кверцетина составляет от 0,5 до 1,0 г, и доза фенилбутирата натрия составляет от 5 до 10 г.

26. Фармацевтическая комбинация по п. 9 или 10, отличающаяся тем, что указанная комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

27. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 13 или 14, отличающаяся тем, что указанная комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

28. Фармацевтическая комбинация для применения по п. 19, отличающаяся тем, что указанная комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

29. Набор по любому из пп. 20-22, отличающийся тем, что комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

30. Набор по п. 23, отличающийся тем, что комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

31. Набор по п. 24, отличающийся тем, что комбинация содержит приблизительно от 0,5 до 1,0 г кверцетина и приблизительно от 5 до 10 г ФБН.

32. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что совместное введение включает введение пациенту указанных соединений в одно и то же время или через близко расположенный временной период.

33. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что совместное введение включает введение пациенту указанных соединений в течение приблизительно 24 часов друг после друга.

34. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что совместное введение включает введение пациенту указанных соединений в течение от приблизительно 1 минуты до приблизительно 60 минут друг от друга, или от приблизительно 5 минут до приблизительно 90 минут друг от друга, или от приблизительно 30 минут до приблизительно 3 часов друг от друга.

35. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что лечение дополнительно включает воздействие на пациента гипербарической кислородной среды.

36. Способ по п. 35, отличающийся тем, что гипербарическая кислородная среда включает атмосферу с содержанием О₂ по меньшей мере выше 95%.

37. Способ по п. 35, отличающийся тем, что указанное воздействие происходит в течение примерно 24 часов после введения кверцетина и фенилбутирата натрия.

38. Способ по п. 35, отличающийся тем, что указанное воздействие происходит между примерно 30 минутами и примерно 3 часами.

39. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий введение одного или более окислителей или антиоксидантов.

40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанные один или более окислителей и антиоксидантов выбраны из группы, включающей витамин С, германий, L-карнитин, таурин, глутатион, лизин, пролин, перекись водорода и диметилсульфоксид.

41. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий введение одного или более ингибиторов гликолиза.

42. Способ по п. 41, отличающийся тем, что указанный один или более ингибитор гликолиза выбран из группы, включающей дихлоруксусную кислоту, октреотид и 2 дезоксиглюкозу (2ДГ).

43. Фармацевтическая комбинация по любому из пп. 13-14 и 28, отличающаяся тем, что ФБН и кверцетин представлены в виде единой композиции.