Способ оценки состояния здоровья человека с помощью иммунологического исследования крови

Авторы патента:

Топтыгина Анна Павловна (RU)

Самохина Ирина Валериевна (RU)

Курбатова Ольга Владимировна (RU)

Закиров Рустам Шакирович (RU)

Копыльцова Елена Александровна (RU)

Семикина Елена Леонидовна (RU)

Петричук Светлана Валентиновна (RU)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2646503:

Федеральное государственное автономное учреждение "Национальный научно-практический центр здоровья детей" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ "ННПЦЗД" Минздрава России) (RU)
Федеральное Бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки состояния здоровья человека. В периферической крови обследуемого с помощью метода проточной цитофлюорометрии определяют процентное содержание Th17-лимфоцитов, а именно процент лимфоцитов с фенотипом CD3⁺CD4⁺CD161⁺CD45R0⁺ от гейта CD3⁺CD4⁺лимфоцитов. Вычисляют расчетный показатель процентного содержания Th17-лимфоцитов в периферической крови по следующей формуле: у = -0,0059х² + 0,6819х + 1,1671,

где х - возраст обследуемого лица в годах, у - расчетный процент Th17 для данного возраста; сравнивают расчетный и реальный показатели процентного содержания Th17-лимфоцитов в периферической крови. При их совпадении или наличии между ними разницы, не превышающей 2σ, обследуемого считают здоровым. В случае превышения реального показателя Th17-лимфоцитов над расчетным более чем на 2σ обследуемого считают больным, где σ - стандартное отклонение. Использование данного способа позволяет на основании критерия соответствия возрастной норме индивидуального уровня Th17-лимфоцитов в периферической крови выявить среди лиц с неизвестным анамнезом и неясными клиническими проявлениями группу здоровых лиц и группу больных лиц. 1 пр., 1 табл., 1 ил.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии, а именно к иммунологическим способам оценки состояния здоровья человека.

Изобретение может быть использовано в медицине для подтверждения состояния здоровья человека. В преамбуле к Уставу Всемирной организации здравоохранения говорится, что здоровье является состоянием полного физического, душевного и социального благополучия, а не только отсутствием болезней и физических дефектов. Тем не менее, в медико-санитарной статистике под здоровьем на индивидуальном уровне понимается отсутствие выявленных расстройств и заболеваний. На сегодняшний момент нет стандартного метода, позволяющего четко разграничить состояние здоровья и болезни. Для оценки состояния здоровья обычно используют сбор анамнеза, клинический осмотр врача, термометрию, измерение частоты пульса, артериального давления, результаты клинического анализа крови и общего анализа мочи. Также используют другие лабораторные и инструментальные методы обследования. Таким образом, подтверждение состояния здоровья достаточно трудоемкий и часто длительный процесс. Тем не менее, далеко не всегда можно быть уверенным, что были проведены все необходимые обследования человека и какое-то заболевание не было упущено.

Известно, что иммунная система вовлечена в патогенез практически любого заболевания. В процессе иммунного ответа на антигены из исходно однородной субпопуляции Т-хелперов (CD4⁺ Т-лимфоцитов) формируется несколько субпопуляций. К настоящему моменту идентифицированы следующие субпопуляции Т-хелперов (Th): Th1, Th2, Th9, Th17, Th22, фолликулярные Т-хелперы и регуляторные Т-клетки. Субпопуляция Th17-лимфоцитов (Th17) регулирует противобактериальный и противогрибковый иммунный ответ и активирует нейтрофилы, но может поддерживать аутоиммунные заболевания [1]. Главным транскрипционным фактором для субпопуляции Th17 человека является RORC2, а основными цитокинами являются провоспалительные интерлейкины (IL): IL-17A, IL-21 и IL-22 [2]. Одной из важных поверхностных молекул, характерных для Th17, является CD161, а также хемокиновый рецептор CCR6 [3]. В процессе постнатального развития происходят длительные процессы формирования многих звеньев иммунной системы, в том числе субпопуляции Th17. Нам не удалось найти исследования, прослеживающего изменения уровня Th17 от рождения и до очень пожилого возраста. Однако если проанализировать уровень Th17 в контрольных группах в многочисленных исследованиях субпопуляции Th17 при различных заболеваниях у людей разного возраста [4, 5, 6, 7], то можно отметить, что у здоровых детей грудного и младшего возраста Th17 определяются на уровне 1-3% [4, 5], и их количество прогрессивно нарастает с возрастом [7]. Дополнительные изменения вносят различные заболевания.

При патологии различного генеза отмечается повышение уровня Th17 [1, 4, 5, 6]. Уровень Th17 в периферической крови повышается при различных аутоиммунных заболеваниях [8]; инфекциях [9]; аллергических [10] и онкологических заболеваниях [11]. Динамику уровня Th17 в ответ на введение вирусных антигенов удалось проследить на примере прививки живой вирусной вакциной против кори, краснухи и эпидемического паротита. Оказалось, что после введения вакцины быстро повышается количество активированных Th и Th17 в периферической крови. По завершении ответа на вакцину уровень Th17 снижается, но остается чуть выше исходного. Это превышение было не значимым, однако такая тенденция наблюдалась [12]. По-видимому, специфические Th17-лимфоциты образуются при каждом иммунном ответе, и после его завершения какая-то небольшая часть образовавшихся в данном иммунном ответе Th17 превращается в Th17 памяти и сохраняется в организме, чем и объясняется постепенный прирост субпопуляции Th17 с возрастом. Таким образом, можно заключить, что при заболеваниях различного генеза происходит формирование Th17, уровень этих клеток в периферической крови повышается. Этот феномен может быть использован для разделения состояния здоровья и болезни.

Нам не удалось найти прямых аналогов заявленного изобретения. Наиболее близкое техническое решение описано в статье Н.Е. Галича [13], однако прогнозирование состояния здоровья или болезни основано не на анализе каких-либо субпопуляций лимфоцитов с помощью проточной цитофлюорометрии, а на анализе различных параметров файлов цитофлюорометрического анализа (анализ числа вспышек, распределение по каналам интенсивности флуоресценции и т.п.). Эти параметры зависят от тех настроек, которые использует оператор при конкретном измерении, поэтому предложенный способ оценки здоровья весьма приблизителен и может давать существенные ошибки в диагностике. Также были предложены способы оценки состояния здоровья с помощью комплексной оценки, в состав которой входили некоторые иммунологические параметры [14, 15]. В первом патенте учитывали такой параметр, как малоновый альдегид и отношение Th к Т-супрессорам, а во втором - уровень общих сывороточных IgA, IgG, IgE, но ни в том, ни в другом патенте не использовали такой параметр, как Th17, что неудивительно, поскольку в 2001 году, когда были поданы оба патента, еще не знали о существовании Th17.

Задачей изобретения является разработка способа оценки состояния здоровья человека с помощью иммунологического исследования крови, позволяющего подтвердить состояние здоровья на основании соответствия индивидуального уровня Th17-лимфоцитов возрастным нормам.

Технический результат заключается в разработке способа оценки состояния здоровья человека, позволяющего четко различать состояние здоровья и болезни на основании критерия соответствия возрастной норме индивидуального уровня Th17-лимфоцитов в периферической крови. Такие знания позволяют выявить среди лиц с неизвестным анамнезом и неясными клиническими проявлениями группу здоровых лиц и группу больных. Разработанный способ оценки состояния здоровья помогает осуществлять контроль за состоянием здоровья групп граждан и осуществлять первичный отбор группы больных, требующих дальнейшего исследования причин их заболевания, и группы здоровых, не требующих дальнейшего исследования.

Поставленная задача достигается путем разработки способа оценки состояния здоровья на основании соответствия индивидуального уровня Th17-лимфоцитов в периферической крови конкретного человека, определенного с помощью проточной цитометрии, его возрастной норме, рассчитанной по предложенной формуле.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Для установления динамики возрастных норм уровня Th17-лимфоцитов в периферической крови было обследовано 352 здоровых человека (168 лиц женского пола и 184 - мужского), в возрасте от 1 месяца до 85 лет, в том числе младше 1 года - 79, в возрасте 1-2 года 11 мес. - 34, 3-4 года 11 мес. - 24, 5-6 лет 11 мес. - 28, 7-8 лет 11 мес. - 25, 9-11 лет 11 мес. - 36, 12-14 лет 11 мес. - 39, 15-18 лет - 26, 20-35 лет - 25, 36-49 лет - 11, 50-70 лет - 16 и в возрасте более 70 лет - 9 человек. Состояние здоровья оценивали при проведении профилактических осмотров и ежегодной диспансеризации, по результатам которых подтверждено отсутствие острых и хронических заболеваний у всех обследованных. Полученные в результате лабораторного обследования показатели клинического анализа крови находились в пределах возрастных норм.

Иммунофенотипирование лимфоцитов крови проводили методом проточной цитофлюорометрии с четырехцветным окрашиванием в реакции прямой иммунофлюоресценции по технологии окрашивания лимфоцитов в цельной крови с последующим лизированием эритроцитов (технология и реактивы BD Biosciences (США) - проточный цитометр FACSCalibur, программа сбора и обработки информации CellQuest). Выделение лимфоидного региона проводилось по показателям прямого и бокового светорассеяния с учетом экспрессии CD45. Определяли уровень Th17-лимфоцитов с фенотипом CD3⁺CD4⁺CD161⁺CD45R0⁺, для этой популяций оценивался процент в составе всех Th-клеток (в гейте CD3⁺CD4⁺). Возрастная динамика процента Th17-лимфоцитов в периферической крови здоровых людей в гейте CD3⁺CD4⁺лимфоцитов (M±SE) представлены на Фиг. 1. Пунктирной линией обозначен график аппроксимации.

Анализ уровня Th17-лимфоцитов выявил сильную положительную корреляцию между возрастом и уровнем лимфоцитов этой субпопуляции в периферической крови здоровых лиц, коэффициент корреляции Пирсона составил 0,82. В результате проведенного математического анализа было установлено, что выявленная зависимость аппроксимируется квадратным уравнением: у = -0,0059х² + 0,6819х + 1,1671, где х - возраст обследуемого лица в годах, а у - расчетный процент Th17 для данного возраста.

Величина достоверности аппроксимации R² составила 0,98, что говорит об очень высокой степени соответствия модели.

Для оценки состояния здоровья обследуемого следует рассчитать по формуле, полученной в результате аппроксимации наших данных (у = -0,0059х² + 0,6819х + 1,1671, где х - возраст обследуемого лица в годах), его возрастную норму процента Th17-лимфоцитов и далее с помощью проточной цитофлюорометрии определить процент Th17 (лимфоциты с фенотипом CD3⁺CD4⁺CD161⁺CD45R0⁺, процент от гейта CD3⁺CD4⁺лимфоцитов) у данного человека в периферической крови. Если расчетный и реальный показатель совпадут или будут близки, то человека можно считать здоровым, если реальный уровень Th17-лимфоцитов превышает расчетный более чем на 5% (2σ) для детей до 3 лет, 7% (2σ) для детей от 3 до 7 лет и 10% (2σ) для людей старше 7 лет, то человек, вероятно, болен, и нужно искать причину его заболевания.

Пример

В качестве примера в Таблице 1 приведено процентное содержание Th17-лимфоцитов в периферической крови людей с неизвестным анамнезом.

Далее по формуле, полученной в результате аппроксимации наших данных (у = -0,0059х² + 0,6819х + 1,1671, где х - возраст обследуемого лица в годах), для каждого обследованного лица с неизвестным анамнезом были рассчитаны их возрастные нормы уровня Th17 (%) - столбец 4 в Таблице 1, и сопоставлены, используя критерий 2σ (столбец 5 в Таблице 1), с реальным уровнем Th17 (%) - столбец 3 в Таблице 1. В результате сопоставлений выяснилось, что у обследованных №1, 6, 7, 8, 9 и 10 их реальный уровень Th17 (%) соответствует возрастной норме, следовательно, эти люди должны быть расценены как здоровые, что соответствовало действительности. С другой стороны, у №2, 3, 4, 5 реальный уровень Th17 (%) превышает расчетный более чем на 2σ, следовательно, эти люди должны быть расценены как больные, что соответствовало реальности. Интересно подробнее рассмотреть обследуемых людей №8 и 10. Так, обследуемый №8 и по пороговому критерию, и по критерию соответствия возрастной норме должен быть отнесен к группе здоровых людей. Однако из анамнеза стало известно, что у данного человека диагноз ювенильный ревматоидный артрит, но этот пациент находится на биологической терапии (мабтера) и по всем показателям демонстрирует стойкую клинико-лабораторную ремиссию. Его реальный уровень Th17 (%) немного выше расчетного возрастного уровня, но не выходит за 2σ. Пациент под №10 имеет диагноз гломерулонефрит и также получает биологическую терапию. Реальный уровень Th17 (%) превышает уровень возрастной нормы, однако не выходит за пределы 2σ.

Таким образом, используя критерий соответствия реального уровня Th17 (%) расчетной возрастной норме, удалось правильно разделить здоровых лиц (№1, 6, 7, 9) и больных (№2, 3, 4, 5), а также выявить пациентов в ремиссии на биологической терапии (№8 и 10), для этого, правда, были нужны данные анамнеза.

ЛИТЕРАТУРА

1. Korn Т., Bettelli Е., Oukka М., and Kuchroo V.K. IL-17 and Th17 Cells Annu. Rev. Immunol., 2009, vol. 27, pp. 485-517.

2. Unutmaz D. RORC2: the master of human Th17 cell programming. Eur. J. Immunol., 2009, vol. 39, no. 6, pp. 1452-1455.

3. Cosmi L., Palma R., Santarlasci V., Maggi L., Capone M., Frosali F., Rodolico G., Querci V., Abbate G., Angeli R., Berrino L., Fambrini M., Caproni M., Tonelli F., Lazzeri E., Parronchi P., Liotta F., Maggi E., Romagnani S., Annunziato F. Human interleukin 17-producing cells originate from a CD161+CD4+ T cell precursor J. Exp. Med., 2008, vol. 205, no. 8, pp. 1903-1916.

4. Li Y.Y., Wei S.G., Zhao X., Jia Y.Z., Zhang Y.F., Sun S.Z. Th17/Treg cell expression in children with primary nephritic syndrome and the effects of ox-LDL on Th17/Treg cells. Genet. Mol. Res. 2016, 15(2), pp. 1-8.

5. Dong H., Qu S., Chen X., Zhu H., Tai X., Pan J. Changes in the cytokine expression of peripheral Treg and Th17 cells in children with rotavirus enteritis. Exp. Ther. Med. 2015, Vol. 10 no 2, pp. 679-682.

6. Li Q., Wang Y., Wang Y., Chen K., Zhou Q., Wei W., Wang Y. Treg/Th17 ratio acts as a novel indicator for acute coronary syndrome. Cell Biochem. Biophys. 2014, Vol. 70, no 2, pp. 1489-1498.

7. Schmitt V., Rink L., Uciechowski P. The Th17/Treg balance is disturbed during aging. Exp. Gerontol. 2013, Vol. 48, no l2, pp. 1379-86.

8. Qu N., Xu M., Mizoguchi I., Furusawa J., Kaneko K., Watanabe K., Mizuguchi J., Itoh M., Kawakami Y., Yoshimoto T. Pivotal Roles of T-Helper 17-Related Cytokines, IL-17, IL-22, and IL-23, in Inflammatory Diseases Clin Dev Immunol. 2013; 2013: 968549.

9. Hemdan N.Y.A., Abu Ell-Saad A.M., Sack U. The Role of T Helper (T_H)17 Cells as a Double-Edged Sword in the Interplay of Infection and Autoimmunity with a Focus on Xenobiotic-Induced Immunomodulation. Clin Dev Immunol. 2013; 2013: 374769.

10. Ota K., Kawaguchi M., Matsukura S., Kurokawa M., Kokubu F., Fujita J., Morishima Y., Huang S., Ishii Y., Satoh H., Hizawa N. Potential Involvement of IL-17F in Asthma. J. Immunol. Res. 2014; 2014: 602846.

11. Alizadeh D., Katsanis E., Larmonier N. The Multifaceted Role of Th17 Lymphocytes and Their Associated Cytokines in Cancer. Clin Dev Immunol. 2013; 2013: 957878.

12. Топтыгина А.П., Семикина Е.Л., Алешкин B.A. Регуляция иммунного ответа у детей, привитых против кори, краснухи и эпидемического паротита // Иммунология - 2012. - Т. 33, №4. - С. 175-179.

13. Галич Н.Е. Иммунофлюоресценция и цитометрия в диагностике состояния здоровья: информационные энтропии, корреляции, бистабильности, вейвлеты // Здоровье - основа человеческого потенциала: проблема и пути их решения. - 2008. - Т. 3, №1. - С. 76-79.

14. Патент 2181888 Российской Федерации МПК 7G01N33/50A. Способ медико-социологической оценки здоровья населения трудоспособного возраста. / Решетников А.В.; заявитель и патентообладатель Решетников А.В. (RU). - №2001119204/14; заявл. 12.07.2001; опубл. 27.04.2002 Бюл. 12 - 8 с.: с ил.

15. Патент 2193353 Российской Федерации МПК 7G01N33/50B. Способ медико-социологической оценки здоровья населения нетрудоспособного возраста. / Решетников А.В.; заявитель и патентообладатель Решетников А.В. (RU). - №2001127295/14; заявл. 10.10.2001; опубл. 27.11.2002 Бюл. 33 - 8 с.: с ил.

Способ оценки состояния здоровья человека с помощью иммунологического исследования крови, отличающийся тем, что в периферической крови обследуемого с помощью метода проточной цитофлюорометрии определяют процентное содержание Th17-лимфоцитов, а именно процент лимфоцитов с фенотипом CD3⁺CD4⁺CD161⁺CD45R0⁺ от гейта CD3⁺CD4⁺ лимфоцитов, вычисляют расчетный показатель процентного содержания Th17-лимфоцитов в периферической крови по следующей формуле:

y=-0,0059x²+0,6819x+1,1671,

где x - возраст обследуемого лица в годах,

y - расчетный процент Th17 для данного возраста,

сравнивают расчетный и реальный показатели процентного содержания Th17-лимфоцитов в периферической крови и при их совпадении или наличии между ними разницы, не превышающей 2σ, обследуемого считают здоровым, а в случае превышения реального показателя Th17-лимфоцитов над расчетным более чем на 2σ обследуемого считают больным, где σ - стандартное отклонение.

Изобретение относится к области медицины, а именно к наркологическим и инфекционным болезням, и может быть использовано для диагностики абстинентного синдрома при опийной наркомании, сочетанной с ВИЧ-инфекцией.

Способ прогнозирования эндометриопатии у женщин с репродуктивными нарушениями // 2646473

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования эндометриопатии, отличающийся тем, что в образце менструальной крови определяют концентрации интерлейкина-6 (ИЛ-6), глутатионпероксидазы-1 (ГТП 1) и растворимой формы Е-селектина и определяют коэффициент вероятности эндометриопатии (Р) по формуле: гдеа=0,0002782; b=0,0381529; с=-0,1205126; d=-1,1189533; e - экспонента (константа) = 2,7; X3 - значение концентрации ИЛ-6, пг/мл; Х2 - значение концентрации растворимой формулы Е селектина, нг/мл; X1 - значение концентрации ГТП 1, нг/мл; и при значении Рэ > 0,29 прогнозируют наличие эндометриопатии.

Способ оценки эффективности терапии инфекции вызванной вирусом герпеса человека 6 типа у детей // 2646472

Изобретение относится к области медицины, педиатрии, инфекционным болезням и касается способа оценки эффективности терапии инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6), у детей.

Способ оценки нейропротекторных свойств веществ in vitro и тест-система для его осуществления // 2646446

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для оценки нейропротекторных свойств веществ in vitro. Для этого используют дифференцированные в нейрональном направлении индуцированные плюрипотентные стволовые клетки человека путем репрограммирования фибробластов кожи человека в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки.

Клеточная культура конъюнктивы человека chang conjunctiva атсс - ccl 20.2 для предупреждения феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов // 2646100

Изобретение относится к биотехнологии. Конкретно, изобретение относится к предупреждению феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов.

Способ диагностики репродуктивного респираторного синдрома свиней непрямым иммуногистохимическим анализом на основании моноклональных антител // 2645114

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для диагностики репродуктивного респираторного синдрома свиней. Для этого диагностику репродуктивного респираторного синдрома свиней проводят непрямым иммуногистохимическим анализом на основании моноклональных антител.

Способ прогнозирования вакцинации новорожденных из групп высокого риска против туберкулеза в роддоме // 2645109

Изобретение относится к медицине, в частности, к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования возможной вакцинации против туберкулеза у новорожденных из групп высокого перинатального риска в роддоме.

Способ прогнозирования затяжного течения острого назофарингита у женщин с реактивацией хронической микст-герпесвирусной инфекции во втором триместре беременности // 2644831

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии. Определяют антитела IgM и IgG к ВПГ- 1 типа, антитела IgM и IgG к ВПГ- 2 типа и антитела IgG к ЦМВ при индексе авидности антител IgG к ВПГ- 1 типа более 65% в сыворотке крови в баллах(А).

Эпитоп, специфичный к олигомеру амилоида бета, и антитела // 2644335

Данное изобретение относится к области иммунологии. Предложено изолированное антитело, которое обладает способностью специфично связываться с амилоидом бета (Аβ), а также антигенные циклические пептиды, способные вызывать специфический иммунный ответ против олигомерного Аβ.

Способ прогнозирования риска формирования панического расстройства на ранней стадии заболевания // 2644309

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для прогноза риска формирования панических расстройств. Определяют общеклинические показатели, в качестве которых используют иммунобиологические.

Способ прогнозирования прогресса папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим рецидивирующим впч - ассоциированным цервицитом // 2646785

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано в гинекологических стационарах и амбулаторных условиях женских консультаций и поликлиник для прогнозирования прогресса папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим рецидивирующим ВПЧ-ассоциированным цервицитом. Сущность изобретения: у пациентки определяют генотипы полиморфизмов Ser249Pro в гене TLR6 и Pro72Arg в гене ТР53 и при выявлении у пациентки аллеля Ser в гене TLR6 и гомозиготного генотипа Pro/Pro или Arg/Arg в гене ТР53 прогнозируют низкий риск прогрессирования ПВИ; при выявлении у пациентки мутации Pro/Pro в гене TLR6 либо гетерозиготного генотипа Pro/Arg в гене ТР53 прогнозируют средний риск прогрессирования ПВИ; при определении у пациентки мутации Pro/Pro в гене TLR6 и гетерозиготного генотипа Pro/Arg в гене ТР53 прогнозируют высокий риск прогрессирования ПВИ. Изобретение обеспечивает возможность осуществления с высокой степенью достоверности прогнозирования прогресса ПВИ у пациенток с ВПЧ-ассоциированным цервицитом, что позволит выбрать правильную тактику ведения. 5 табл., 3 пр.

Способ количественного определения серебряной соли сульфадимидина // 2646786

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для количественного определения серебряной соли сульфадимидина для стандартизации и контроля качества лекарственных средств. Для этого готовят контрольный водный раствор сульфадимидина. Оптическую плотность рабочего и контрольного образцов регистрируют спектрофотометрически при длине волны 242 нм. Расчет результатов проводят по удельному показателю поглощения с учетом молекулярных масс сульфадимидина и его серебряной соли. Изобретение обеспечивает унифицирование методики анализа в контрольно-аналитических лабораториях, результатов определения и уменьшение погрешности анализа. 2 табл., 1 ил., 1 пр.

Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы // 2646800

Изобретение используется в патологической анатомии, эндокринологии, хирургии. Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы заключается в том, что проводят гистоэнзиматическое исследование фермента тиреопероксидазы (ТПО) в щитовидной железе и по активности ТПО диагностируют диффузный токсический зоб, многоузелковый токсический зоб, фолликулярную аденому в состоянии эутиреоза, аденокарциному. Целью изобретения является обеспечение достоверности полученных результатов при проведении дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы. 4 пр., 2 ил.

Способ выделения аутоантител подклассов иммуноглобулина g к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли // 2646807

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения подклассов иммуноглобулина G (IgG) аутоантител к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли (TNF), заключающегося в получении общей фракции IgG аффинной хроматографией с использованием сорбента Protein G Sepharose с последующей нейтрализацией, объединением и диализом IgG, очистке полученной фракции IgG от примеси TNF. При этом выделение подклассов IgG производят из фармацевтического препарата иммуноглобулина для внутривенного введения, после получения фракции IgG осуществляют ее очистку от примеси TNF ультрафильтрацией с использованием центрифужных фильтров, затем проводят этап выделения антител IgG3 и получения смеси IgG1, IgG2, IgG4 аффинной хроматографией; затем выделяют антитела IgG1 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем выделяют антитела IgG2 многократной негативной аффинной хроматографией с последующим объединением и диализом, затем проводят очистку антител IgG1 и IgG2 от примеси IgG4 негативной аффинной хроматографией, после чего проводят выделение специфических аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2, IgG3 аффинной хроматографией с последующей нейтрализацией, объединением и диализом. Изобретение обеспечивает получение чистых фракций аутоантител к TNF подклассов IgG1, IgG2 и IgG3. 1 пр., 1 табл.

Способ оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции // 2647450

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано в клинической практике для оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции Для этого определяют значения лабораторных показателей пациента в остром периоде заболевания (в сроки 10-14 дней от начала заболевания): доли CD4+, CD8+ лимфоцитов, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов, уровни IgM, ИЛ-8, гамма-глобулинов, фагоцитарный индекс (ФИ), количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФН), индекс Кердо; определяют значения лабораторных показателей пациента в периоде реконвалесценции (в сроки 21-25 дней от начала заболевания): долю CD3+ лимфоцитов, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов, уровень IgM, индекс Кердо. В остром периоде заболевания оценивают значения лабораторных показателей пациента в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла, показатели ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >11 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 82,25±0,06%; при сумме ≤11 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 84,81±0,05%. В периоде реконвалесценции оценивают значения лабораторных показателей пациента острого периода заболевания в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла; ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; оценивают значения лабораторных показателей пациента периода реконвалесценции в баллах: долю CD3+ лимфоцитов при значениях ≤74,11% - 2 балла, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов при значениях ≤480,45 мкл-1 - -1 балл, уровень IgM при значениях >1,59 г/л - 3 балла, индекс Кердо при значениях ≤-11,15 - 2 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов. Подсчитывают сумму баллов; при сумме >14 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 88,53±0,05%; при сумме ≤14 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 86,80±0,05%. Использование данного способа позволяет проводить дифференцированную диагностику безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции. 6 табл., 2 ил.

Способ анализа клеточно-опосредованного иммунного ответа с повышенной чувствительностью // 2647468

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для измерения активности клеточно-опосредованного иммунного ответа у субъекта. При этом проводят совместную инкубацию образца, включающего лимфоциты от субъекта, по меньшей мере, с двумя наборами пептидов, полученных из белкового антигена. Первый набор, распознающийся CD8+ лимфоцитами, содержит один пептид длиной от 7 до 14 аминокислотных остатков. Второй набор, распознающийся CD4+ лимфоцитами, содержит один пептид длиной от 16 аминокислотных остатков или больше. При этом пептиды охватывают весь указанный белковый антиген или его часть. Измеряют присутствие или повышение уровня иммунной эффекторной молекулы из эффекторных Т-клеток. Присутствие или уровень иммунной эффекторной молекулы для Т-клеток является показателем уровня клеточно-опосредованной отвечаемости субъекта. Также предложены применение и способ определения статуса активности клеточно-опосредованного иммунного ответа у субъекта. Группа изобретений позволяет измерить общий клеточно-опосредованный иммунный ответ от CD4+ и от CD8+ лимфоцитов, за счет повышения чувствительности и специфичности способа измерения. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 9 табл., 2 ил.,5 пр.

N,n’-диэтил- n,n’-ди(2-бром-4-r-фенил)диамиды 2,2’-бипиридил-6,6’-дикарбоновой кислоты и способ их получения, циклизация полученных амидов с образованием 6,6’-диэтил-9,9’-диr-дибензо[f]-1,7-нафтиридин-5,5’(6н,6’h)-дионов // 2647578

Изобретение относится к новым соединениям N,N'-диэтил-N,N'-ди(2-бром-4-R-фенил)амидам 2,2'-бипиридил-6,6'-дикарбоновой кислоты и 6,6'-диэтил-9,9'-диR-3,3'-дибензо[ƒ]-1,7-нафтиридин-5,5'(6H,6'H)-дионам формулы (1) и (2) соответственно: .Изобретение также относится к способу их получения. Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в качестве органических лигандов для комплексообразования с ионами f-элементов, что может быть использовано во времяразрешенном иммунофлуоресцентном и других видах флуоресцентного анализа. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 25 пр.

Способ определения результата реакции агглютинации и микропланшет для определения продуктов реакций агглютинации // 2648471

Группа изобретений относится к способу определения результата реакции агглютинации, а также к микропланшету и устройству, используемым при осуществлении указанного способа. Способ определения реакции агглютинации включает этап реакции пробы с реагентом в лунке микропланшета, этап центрифугирования микропланшета, причем на этапе центрифугирования агглютинированный материал пробы отделяют от неагглютинированного материала пробы посредством сепарирующего материала, этап получения по меньшей мере одного изображения верхней стороны микропланшета и по меньшей мере одного изображения нижней стороны микропланшета и этап определения, на котором определяют положительный или отрицательный статус пробы в отношении реакции агглютинации путем сравнения интенсивности цвета и/или уровня серого на изображениях верхней стороны и нижней стороны микропланшета. Также раскрыты микропланшет для определения продуктов реакций агглютинаций и тестирующая установка для определения реакции агглютинации. Группа изобретений обеспечивает высокую надежность и высокую производительность определения результатов реакции агглютинации. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 9 ил.

Способ прогнозирования неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой // 2648472

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается прогнозирования неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Предлагаемый способ отличается тем, что у беременных определяют титр антител IgM к ЦМВ и рост титров антител IgG к ЦМВ при авидности IgG к ЦМВ более 65% в баллах (1 балл - титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:200; 2 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:400; 3 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:800; 4 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600) (А), концентрацию суммарных антифосфолипидных антител (Ед/мл) (В), количество ретроплацентарных гематом в плаценте в баллах: (1 балл - 1 гематома; 2 балла - 2 гематомы; 3 балла - 3 и более гематомы) (С). Затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции D: D=-2,454×А-1,217×В-3,404×С, где D - дискриминантная функция с граничным значением равным -21,55. При D, равной или больше граничного значения дискриминантной функции, прогнозируют отсутствие неблагоприятных перинатальных исходов, а при D, меньшей граничного значения дискриминантной функции, прогнозируют развитие неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Изобретение обеспечивает возможность обоснованного и своевременного проведения лечебных мероприятий, направленных на профилактику неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Вероятность правильного прогноза составляет 88,5%. 2 пр.